Evaluation in vitro of the virulence of two entomopathogenic heterorhabditid nematodes in the control of Stomoxys calcitrans (Diptera: Muscidae) larvae in byproducts of the sugar and alcohol industry / Avaliação in vitro da virulência de dois nematoides entomopatogênicos heterorhabditídeos no controle de larvas de Stomoxys calcitrans (Diptera: Muscidae) em subprodutos da indústria sucroalcooleira

Stomoxys calcitrans causes losses to livestock, mainly to cattle. This study aimed to determine the pathogenic potential of Heterorhabditis bacteriophora HP88 and H. baujardi LPP7 against S. calcitrans larvae after being exposed to byproducts of the sugar and alcohol industry. The efficacy of EPNs on stable fly larvae was evaluated in bioassays with vinasse at three temperatures (16, 25 and 35 °C) and concentrations (0, 50 and 100%), as well as in relation to larva age (4, 6 and 8 days) in filter cake and EPNs concentration (100, 300 and 500 IJs/larva) in sugarcane bagasse. H. bacteriophora showed higher efficacy than H. baujardi at all temperatures. Vinasse did not have a negative effect on the virulence of H. bacteriophora. The age of fly larvae did not affect the mortality rates caused by the EPNs. In bagasse, H. bacteriophora presented higher mortality rates than the control group. It is concluded that EPNs can be a potential component in integrated strategies of stable fly control and outbreak prevention in areas of sugar and alcohol production.(AU)

Stomoxys calcitrans causa perdas à agropecuária, principalmente na bovinocultura. Este estudo objetivou verificar o potencial patogênico de Heterorhabditis bacteriophora HP88 e H. baujardi LPP7 para larvas de S. calcitrans, após serem expostos a subprodutos da indústria sucroalcooleira. A eficácia dos NEPs sobre larvas da mosca-dos-estábulos foi avaliada em bioensaios com vinhaça em três temperaturas (16, 25 e 35 °C) e concentrações (0, 50 e 100%), bem como em relação à idade da larva (4, 6 e 8 dias) em torta de filtro e concentração de NEPs (100, 300 e 500 JIs/larva) em bagaço de cana-de-açúcar. H. bacteriophora apresentou maior eficácia do que H. baujardi em todas as temperaturas. O vinhoto não apresentou efeito negativo sobre a virulência de H. bacteriophora. A idade das larvas não influenciou no aumento ou diminuição da mortalidade dos NEPs. Em bagaço de cana, H. bacteriophora apresentou taxas de mortalidade superiores à do grupo controle. Conclui-se que os NEPs podem ser um potencial componente em estratégias de controle integrado e prevenção de surtos da mosca-dos-estábulos, em áreas de produção de açúcar e álcool.(AU)

Native isolates and the effect of aviary litter on the pathogenicity and virulence of entomopathogenic nematodes for the control of the lesser mealworm, Alphitobius diaperinus (Panzer) (Coleoptera: Tenebrionidae) / Isolados nativos e efeito da cama de aviário na patogenicidade e virulência de nematoides entomopatogênicos visando o controle do cascudinho de aviário, Alphitobius diaperinus (Panzer) (Coleoptera: Tenebrionidae)

Objetivou-se selecionar isolados nativos de nematoides entomopatogênicos (NEPs) e avaliar o efeito da cama de aviário na sua patogenicidade e virulência, visando o controle do cascudinho de aviário. Foram utilizados 18 isolados (Steinernema e Heterorhabditis) no teste de seleção e os três isolados mais virulentos foram utilizados no teste de concentrações (10, 20, 40, 50 juvenis infectantes (JIs)/cm²). O efeito da cama de aviário (nova e velha) foi avaliado sobre S. feltiae (IBCB-n 47), S. carpocapse (IBCB-n 02), H. bacteriophora e H. amazonensis (UEL 08). Os experimentos foram realizados em delineamento inteiramente casualizado. Os dados do teste de seleção e efeito da cama foram submetidos ao teste de médias Scott-Knott (P?0,05) e, do teste de concentrações à análise de regressão. Observou-se no teste de seleção para adultos, que os três isolados mais virulentos foram Heterorhabditis amazonensis (UEL 07), H. amazonensis (RSC 05) e Steinernema carpocapsae (IBCB-n 02) com 76,5; 73,5; 70% mortalidade respectivamente. Para larvas, Heterorhabditis sp. (NEPETT 11), S. feltiae (IBCB-n 47), H. amazonensis. (UEL 07) foram os mais virulentos e causaram 100; 96; 93,7% de mortalidade respectivamente. No teste de concentrações, a maior mortalidade em adultos (98%) e larvas (98%) foi observada para S. feltiae nas concentrações de 30 JIs/cm² e 50JIs/cm² respectiv

O cascudinho causa grande prejuízo para a avicultura. Seu controle é dificultado, devido ao hábito do inseto de viver em meio a cama de aviário. Por outro lado, os nematoides entomopatogênicos (NEPs) podem ser uma alternativa no controle destes insetos, pois são indicados contra pragas que vivem ou passam uma fase no solo. Desta forma objetivou-se selecionar isolados nativos de NEPs e avaliar o efeito da cama de aviário na sua patogenicidade e virulência, visando o controle do cascudinho de aviário. Foram utilizados 14 isolados nativos e dois isolados importados no teste de seleção e os três isolados mais virulentos foram utilizados no teste de concentrações (10, 20, 40, 50 juvenis infectantes (JIs)/cm²). Ambos experimentos foram realizados em delineamento inteiramente casualizado, sendo que os dados do teste de seleção foram submetidos a teste de média Scott-Knott (P ≤ 0,05) e o teste de concentrações à análise de regressão. O efeito da cama de aviário (nova e velha) foi avaliado sobre Steinernema feltiae (IBCB-n 47), Steinernema carpocapse (All), e Heterorhabditis amazonensis (UEL 08), e o ensaio foi conduzido em fatorial 2 x 3 (dois tipos de cama e três isolados), e os dados foram submetidos ao teste de médias Tukey (P ≤ 0,05). Observou-se no teste de seleção para adultos, que os três isolados mais virulentos foram Heterorhabditis amazonensis (UEL 07), H. amazonensis (RSC 05) e S. carpocapsae (All) com 76,5; 73,5; 70% mortalidade, respectivamente. Para larvas, os isolados Heterorhabditis sp. (NEPET 11), S. feltiae (IBCB-n 47), H. amazonensis (UEL 07), Heterorhabditis sp. (IBCB-n40) e H. amazonensis (UEL 08) foram os mais virulentos e diferiram estatisticamente. No teste de concentrações, a maior mortalidade em adultos (98%) e larvas (98%) foi observada para S. feltiae nas concentrações de 30 JIs/cm² e 50JIs/cm² respectivamente, e o isolado nativo avaliado (UEL 07) foi o que apresentou o pior desempenho. Com relação ao efeito da cama de aviário, observou-se que S. feltiae (IBCB-n 47) e S. carpocapse (All) causaram as maiores mortalidades, tanto em cama nova (60,7 e 58,7%) quanto em cama velha (80 e 74,7%) respectivamente sendo também superiores ao desempenho do isolado nativo (UEL 08)

Native isolates and the effect of aviary litter on the pathogenicity and virulence of entomopathogenic nematodes for the control of the lesser mealworm, Alphitobius diaperinus (Panzer) (Coleoptera: Tenebrionidae) / Isolados nativos e efeito da cama de aviário na patogenicidade e virulência de nematoides entomopatogênicos visando o controle do cascudinho de aviário, Alphitobius diaperinus (Panzer) (Coleoptera: Tenebrionidae)

Objetivou-se selecionar isolados nativos de nematoides entomopatogênicos (NEPs) e avaliar o efeito da cama de aviário na sua patogenicidade e virulência, visando o controle do cascudinho de aviário. Foram utilizados 18 isolados (Steinernema e Heterorhabditis) no teste de seleção e os três isolados mais virulentos foram utilizados no teste de concentrações (10, 20, 40, 50 juvenis infectantes (JIs)/cm²). O efeito da cama de aviário (nova e velha) foi avaliado sobre S. feltiae (IBCB-n 47), S. carpocapse (IBCB-n 02), H. bacteriophora e H. amazonensis (UEL 08). Os experimentos foram realizados em delineamento inteiramente casualizado. Os dados do teste de seleção e efeito da cama foram submetidos ao teste de médias Scott-Knott (P?0,05) e, do teste de concentrações à análise de regressão. Observou-se no teste de seleção para adultos, que os três isolados mais virulentos foram Heterorhabditis amazonensis (UEL 07), H. amazonensis (RSC 05) e Steinernema carpocapsae (IBCB-n 02) com 76,5; 73,5; 70% mortalidade respectivamente. Para larvas, Heterorhabditis sp. (NEPETT 11), S. feltiae (IBCB-n 47), H. amazonensis. (UEL 07) foram os mais virulentos e causaram 100; 96; 93,7% de mortalidade respectivamente. No teste de concentrações, a maior mortalidade em adultos (98%) e larvas (98%) foi observada para S. feltiae nas concentrações de 30 JIs/cm² e 50JIs/cm² respectiv

O cascudinho causa grande prejuízo para a avicultura. Seu controle é dificultado, devido ao hábito do inseto de viver em meio a cama de aviário. Por outro lado, os nematoides entomopatogênicos (NEPs) podem ser uma alternativa no controle destes insetos, pois são indicados contra pragas que vivem ou passam uma fase no solo. Desta forma objetivou-se selecionar isolados nativos de NEPs e avaliar o efeito da cama de aviário na sua patogenicidade e virulência, visando o controle do cascudinho de aviário. Foram utilizados 14 isolados nativos e dois isolados importados no teste de seleção e os três isolados mais virulentos foram utilizados no teste de concentrações (10, 20, 40, 50 juvenis infectantes (JIs)/cm²). Ambos experimentos foram realizados em delineamento inteiramente casualizado, sendo que os dados do teste de seleção foram submetidos a teste de média Scott-Knott (P ≤ 0,05) e o teste de concentrações à análise de regressão. O efeito da cama de aviário (nova e velha) foi avaliado sobre Steinernema feltiae (IBCB-n 47), Steinernema carpocapse (All), e Heterorhabditis amazonensis (UEL 08), e o ensaio foi conduzido em fatorial 2 x 3 (dois tipos de cama e três isolados), e os dados foram submetidos ao teste de médias Tukey (P ≤ 0,05). Observou-se no teste de seleção para adultos, que os três isolados mais virulentos foram Heterorhabditis amazonensis (UEL 07), H. amazonensis (RSC 05) e S. carpocapsae (All) com 76,5; 73,5; 70% mortalidade, respectivamente. Para larvas, os isolados Heterorhabditis sp. (NEPET 11), S. feltiae (IBCB-n 47), H. amazonensis (UEL 07), Heterorhabditis sp. (IBCB-n40) e H. amazonensis (UEL 08) foram os mais virulentos e diferiram estatisticamente. No teste de concentrações, a maior mortalidade em adultos (98%) e larvas (98%) foi observada para S. feltiae nas concentrações de 30 JIs/cm² e 50JIs/cm² respectivamente, e o isolado nativo avaliado (UEL 07) foi o que apresentou o pior desempenho. Com relação ao efeito da cama de aviário, observou-se que S. feltiae (IBCB-n 47) e S. carpocapse (All) causaram as maiores mortalidades, tanto em cama nova (60,7 e 58,7%) quanto em cama velha (80 e 74,7%) respectivamente sendo também superiores ao desempenho do isolado nativo (UEL 08)(AU)

Infection and reinfection of Stomoxys calcitrans larvae (Diptera: Muscidae) by entomopathogenic nematodes in different times of exposure / Infecção e reinfecção de larvas de Stomoxys calcitrans (Diptera: Muscidae) por nematoides entomopatogênicos em diferentes tempos de exposição

Abstract Stomoxys calcitrans is a hematophagous dipteran. Several agents are used in biological control, including entomopathogenic nematodes (EPNs). Bioassay I involved an evaluation of the effect of Heterorhabditis bacteriophora HP88 and Heterorhabditis baujardi LPP7 on S. calcitrans larvae in different periods of exposure. Groups of 10 larvae were placed in Petri dishes and 200 EPNs/larva were added, which were divided into groups according to the exposure times of 2, 4, 6, 12, 24 and 48 hours. The purpose of Bioassay II was to evaluate the efficacy of the EPNs in infecting S. calcitrans larvae when they were isolated from stable fly larvae in Bioassay I. Groups of 10 larvae were placed in Petri dishes and 200 EPNs/larva were added. In bioassay I, H. bacteriophora caused mortality rates of 51.7, 83.3 and 91.7% in 12, 24 and 48 hours, respectively, while H. baujardi caused mortality rates of 9.3 (12h), 35 (24h) and 35% (48h). In Bioassay II, H. bacteriophora and H. baujardi resulted in mortality rates of 35% and 25%, respectively. It was concluded that the longest exposure times presented the highest larval mortality and that EPNs isolated from S. calcitrans are not efficient in controlling the larvae fly.

Resumo Stomoxys calcitrans é um díptero hematófago. Vários agentes são usados no controle biológico, incluindo nematoides entomopatogênicos (NEPs). O bioensaio I objetivou avaliar o efeito de Heterorhabditis bacteriophora HP88 e Heterorhabditis baujardi LPP7 sobre larvas de S. calcitrans em diferentes períodos de exposição. Grupos de 10 larvas foram colocados em placas de Petri, adicionou-se 200 NEPs/larva, e foram divididos de acordo com tempos de exposição de 2, 4, 6, 12, 24 e 48 horas. O objetivo do Bioensaio II foi avaliar a eficácia dos NEPs na infecção de larvas de S. calcitrans, quando esses foram isolados de larvas da mosca oriundos do Bioensaio I. Os grupos de 10 larvas foram colocados em placas de Petri e 200 NEPs/larva foram adicionados. No bioensaio I, H. bacteriophora causou taxas de mortalidade de 51,7%, 83,3% e 91,7% em 12, 24 e 48 horas, respectivamente, enquanto H. baujardi causou taxas de mortalidade de 9,3% (12h), 35% (24h) e 35% (48h). No Bioensaio II, H. bacteriophora e H. baujardi resultaram em taxas de mortalidade de 35% e 25%, respectivamente. Concluiu-se que os maiores tempos de exposição apresentaram as maiores mortalidades larvais e que NEPs isolados de S. calcitrans não são eficientes no controle das larvas mosca.

Influence of plants used in agricultural diversification on the nematode Heterorhabditis amazonensis / Influência de plantas utilizadas na diversificação agrícola sobre o nematoide Heterorhabditis amazonensis

In an agricultural system, to increase natural biological control, plants that attract natural enemies can be grown alongside the main crop. However, the effects of these plants on entomopathogenic nematodes (EPNs), important agents for controlling soil pests, and the action of their conservation are unknown. To assess the impact of these plants on EPNs, two experiments were carried out in a greenhouse. The first measured the effect of Crotalaria spectabilis, Crotalaria breviflora, and Tagetes erecta on the persistence and infectivity of Heterorhabditis amazonensis isolate RSC 5 for 27 days, compared to a control treatment without plants. The second trial evaluated the effect of C. breviflora and T. erecta on the displacement of the nematode. Additionally, the influence of predator Calosoma granulatum in this system was evaluated. The plants did not influence nematode behaviour in terms of persistence, infectivity, or displacement. However, C. spectabilis allowed the most significant persistence of nematodes in the substrate for a short time, and T. erecta caused the fastest suppression of the initial population of infectives juvenile. In the second experiment, neither the predator nor the plants affected the nematode's ability to move in the soil within 5 days. These results show that prior knowledge in agricultural diversification can help to control pests by inundative application of EPNs.(AU)

Em um sistema agrícola, a fim de aumentar o controle biológico natural, plantas que atraem inimigos naturais podem ser cultivadas junto à cultura principal. Porém, os efeitos destas plantas sobre nematoidesentomopatogênicos (NEPs), importante agentes de controle de pragas de solo, e sua ação na conservação destes, são desconhecidos. Com o objetivo de avaliar o efeito de algumas destas plantas sobre NEPs, foram montados dois experimentos em casa-de-vegetação. O primeiro observou o efeito das plantas Crotalaria spectabilis, Crotalaria breviflora e Tagetes erecta sobre a persistência e infectividade de Heterorhabditis amazonensis isolado RSC 5 durante 27 dias, comparadas a um tratamento-controle sem plantas. Já o segundo experimento avaliou o efeito de C. breviflora e T. erecta, com a presença ou não do adulto do predador Calosoma granulatum no deslocamento do nematoide. Os resultados indicaram que as plantas não influenciaram na persistência dos nematoides em longo prazo nem na infectividade e no deslocamento de H. amazonensis. Porém, a planta C. spectabilis possibilitou a maior persistência de nematoides no substrato em curto prazo, e T. erecta causou a supressão mais rápida da população inicial de JIs. No segundo experimento observou-se que nem a presença do predador e das plantas afetou a capacidade de deslocamento do nematoide no solo no período de 5 dias. Estes resultados mostram que o conhecimento prévio das plantas a serem utilizadas na diversificação agrícola pode auxiliar no controle inundativo de pragas por NEPs.(AU)

Infection and reinfection of Stomoxys calcitrans larvae (Diptera: Muscidae) by entomopathogenic nematodes in different times of exposure / Infecção e reinfecção de larvas de Stomoxys calcitrans (Diptera: Muscidae) por nematoides entomopatogênicos em diferentes tempos de exposição

Stomoxys calcitrans is a hematophagous dipteran. Several agents are used in biological control, including entomopathogenic nematodes (EPNs). Bioassay I involved an evaluation of the effect of Heterorhabditis bacteriophora HP88 and Heterorhabditis baujardi LPP7 on S. calcitrans larvae in different periods of exposure. Groups of 10 larvae were placed in Petri dishes and 200 EPNs/larva were added, which were divided into groups according to the exposure times of 2, 4, 6, 12, 24 and 48 hours. The purpose of Bioassay II was to evaluate the efficacy of the EPNs in infecting S. calcitrans larvae when they were isolated from stable fly larvae in Bioassay I. Groups of 10 larvae were placed in Petri dishes and 200 EPNs/larva were added. In bioassay I, H. bacteriophora caused mortality rates of 51.7, 83.3 and 91.7% in 12, 24 and 48 hours, respectively, while H. baujardi caused mortality rates of 9.3 (12h), 35 (24h) and 35% (48h). In Bioassay II, H. bacteriophora and H. baujardi resulted in mortality rates of 35% and 25%, respectively. It was concluded that the longest exposure times presented the highest larval mortality and that EPNs isolated from S. calcitrans are not efficient in controlling the larvae fly.(AU)

Stomoxys calcitrans é um díptero hematófago. Vários agentes são usados no controle biológico, incluindo nematoides entomopatogênicos (NEPs). O bioensaio I objetivou avaliar o efeito de Heterorhabditis bacteriophora HP88 e Heterorhabditis baujardi LPP7 sobre larvas de S. calcitrans em diferentes períodos de exposição. Grupos de 10 larvas foram colocados em placas de Petri, adicionou-se 200 NEPs/larva, e foram divididos de acordo com tempos de exposição de 2, 4, 6, 12, 24 e 48 horas. O objetivo do Bioensaio II foi avaliar a eficácia dos NEPs na infecção de larvas de S. calcitrans, quando esses foram isolados de larvas da mosca oriundos do Bioensaio I. Os grupos de 10 larvas foram colocados em placas de Petri e 200 NEPs/larva foram adicionados. No bioensaio I, H. bacteriophora causou taxas de mortalidade de 51,7%, 83,3% e 91,7% em 12, 24 e 48 horas, respectivamente, enquanto H. baujardi causou taxas de mortalidade de 9,3% (12h), 35% (24h) e 35% (48h). No Bioensaio II, H. bacteriophora e H. baujardi resultaram em taxas de mortalidade de 35% e 25%, respectivamente. Concluiu-se que os maiores tempos de exposição apresentaram as maiores mortalidades larvais e que NEPs isolados de S. calcitrans não são eficientes no controle das larvas mosca.(AU)

Entomopathogenic nematodes for the control of Helicoverpa armigera (Hübner) (Lepidoptera: Noctuidae) pupae

Helicoverpa armigera (Hübner) is a polyphagous insect of difficult control and maize is an important host crop of this insect. Entomopathogenic nematodes (EPNs) are control agents of soil pests. This study aimed to verify the action of EPNs for the control of H. armigera pupae. Laboratory and greenhouse bioassays were conducted to select the concentration of nematode application and subsequently field test were conducted. It was obtained that Heterorhabditis amazonensis MC01 at the concentration of 400 infective juveniles (IJs) ·pupa-1 caused the highest mortality in a lower concentration, whereas for H. amazonensis JPM4, concentrations of both 200 and 400 IJs ·pupa-1 were similar causing pupae mortality. In the greenhouse, H. amazonensis MC01 caused mortality reached values of 80% after 10 days, at concentrations of 600 and 800 IJs ·pupa-1. The highest mortality caused by Steinernema carpocapsae was observed at eight days after the juvenile application, at a concentration of 600 IJs ·pupa-1, also reaching 80% mortality. In the field test, both forms of application were considered appropriate for H. amazonensis MC01, causing mortality rates of up to 80%.(AU)

Entomopathogenic nematodes for the control of Helicoverpa armigera (Hübner) (Lepidoptera: Noctuidae) pupae

Helicoverpa armigera (Hübner) is a polyphagous insect of difficult control and maize is an important host crop of this insect. Entomopathogenic nematodes (EPNs) are control agents of soil pests. This study aimed to verify the action of EPNs for the control of H. armigera pupae. Laboratory and greenhouse bioassays were conducted to select the concentration of nematode application and subsequently field test were conducted. It was obtained that Heterorhabditis amazonensis MC01 at the concentration of 400 infective juveniles (IJs) ·pupa-1 caused the highest mortality in a lower concentration, whereas for H. amazonensis JPM4, concentrations of both 200 and 400 IJs ·pupa-1 were similar causing pupae mortality. In the greenhouse, H. amazonensis MC01 caused mortality reached values of 80% after 10 days, at concentrations of 600 and 800 IJs ·pupa-1. The highest mortality caused by Steinernema carpocapsae was observed at eight days after the juvenile application, at a concentration of 600 IJs ·pupa-1, also reaching 80% mortality. In the field test, both forms of application were considered appropriate for H. amazonensis MC01, causing mortality rates of up to 80%.(AU)

Impact of entomopathogenic nematodes on Africanized honey bees Apis mellifera L. (Hymenoptera: Apidae) workers / Impacto de nematoides entomopatogênicos sobre operárias de Apis mellifera L. (Hymenoptera: Apidae) Africanizada

Africanized honey bee populations (Apis mellifera L.) have been decreasing mainly due to the intense use of synthetic insecticides associated with pollution and climate change. To minimize these impacts on the environment and bee populations, the use of biological control agents has been intensified. These products are generally safer for non-target insects, such as bees, which are important pollinating insects. Thus, the objective of this study was to evaluate the impact of entomopathogenic nematodes on the longevity of the Africanized honey bee A. mellifera workers. Seven treatments were used: Heterorhabditis amazonensis, Heterorhabditis bacteriophora, Heterorhabditis indica, Steinernema carpocapsae, Steinernema feltiae, and Steinernema rarum, at a concentration of 40 infective juveniles per cm² (IJs/cm²), and a control in which autoclaved distilled water was used. Two bioassays were performed: 1) spraying nematodes on the workers and 2) spraying nematodes on glass plates, in which the bees remained for two hours. Each treatment consisted of five replicates with 20 bees each. Bees were kept in cages of PVC (20 × 10 cm) covered with a voile fabric and provided pieces of cotton soaked in water and Candy paste. The cages were kept in a climatized room (27 ± 2 °C temperature, 60 ± 10% relative humidity, and 12 h photophase) and the mortality was evaluated from 12 to 240 hours. In bioassay 1, the three treatments with nematodes of the genus Steinernema reduced the longevity of the workers (103.9, 96.3, and 99.6 h) when compared to treatments with Heterorhabditis (149.7, 126.8, and 134.7 h), of which, only H. amazonensis (149.7 h) did not differ from the control (166.0 h). In bioassay 2, all treatments reduced the longevity of honey bees (155.4 to [...].

As populações de abelhas africanizadas (Apis mellifera L.) vêm diminuindo devido, principalmente, ao intenso uso de inseticidas sintéticos. Desde modo, o emprego de agentes de controle biológico tem-se intensificado de forma a minimizar este impacto no ambiente. Estes produtos são, de modo geral, mais seguros aos insetos não-alvos, como as abelhas que são importantes insetos polinizadores. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos de nematoides entomopatogênicos utilizados para controle de insetos pragas, sobre a longevidade de operárias de A. mellifera africanizada. Foram utilizados sete tratamentos: Heterorhabditis amazonensis, Heterorhabditis bacteriophora, Heterorhabditis indica, Steinernema carpocapsae, Steinernema feltiae e Steinernema rarum, na concentração de 40 juvenis infectantes por cm² (JIs/cm²), e como testemunha água destilada autoclavada. Para isso foram realizados dois bioensaios: 1) Pulverização dos nematoides sobre as operárias e 2) Pulverização dos nematoides em placas de vidro, nas quais as abelhas permaneceram por duas horas em contato. Cada tratamento foi composto por cinco repetições com 20 abelhas cada. As abelhas foram mantidas em gaiolas de PVC (20x10cm) cobertas com tecido voile e fornecidos pedaços de algodão embebido em água e pasta Candy. As gaiolas foram mantidas em sala climatizada (27 ± 2 °C, U.R. 60 ± 10%, fotofase de 12h) e a mortalidade avaliada de 12 até 240 horas. No bioensaio 1 os três tratamentos com nematoides do gênero Steinernema reduziram a longevidade das operárias (103,9; 96,3 e 99,6 horas) quando comparados aos tratamentos com Heterorhabditis (149,7; 126,8 e 134,7 horas). Entretanto, dentre estes apenas H. amazonensis (149,7 horas) não diferiu da testemunha (166,0 horas). No bioensaio 2, todos os [...].

Impact of entomopathogenic nematodes on Africanized honey bees Apis mellifera L. (Hymenoptera: Apidae) workers / Impacto de nematoides entomopatogênicos sobre operárias de Apis mellifera L. (Hymenoptera: Apidae) Africanizada

Africanized honey bee populations (Apis mellifera L.) have been decreasing mainly due to the intense use of synthetic insecticides associated with pollution and climate change. To minimize these impacts on the environment and bee populations, the use of biological control agents has been intensified. These products are generally safer for non-target insects, such as bees, which are important pollinating insects. Thus, the objective of this study was to evaluate the impact of entomopathogenic nematodes on the longevity of the Africanized honey bee A. mellifera workers. Seven treatments were used: Heterorhabditis amazonensis, Heterorhabditis bacteriophora, Heterorhabditis indica, Steinernema carpocapsae, Steinernema feltiae, and Steinernema rarum, at a concentration of 40 infective juveniles per cm² (IJs/cm²), and a control in which autoclaved distilled water was used. Two bioassays were performed: 1) spraying nematodes on the workers and 2) spraying nematodes on glass plates, in which the bees remained for two hours. Each treatment consisted of five replicates with 20 bees each. Bees were kept in cages of PVC (20 × 10 cm) covered with a voile fabric and provided pieces of cotton soaked in water and Candy paste. The cages were kept in a climatized room (27 ± 2 °C temperature, 60 ± 10% relative humidity, and 12 h photophase) and the mortality was evaluated from 12 to 240 hours. In bioassay 1, the three treatments with nematodes of the genus Steinernema reduced the longevity of the workers (103.9, 96.3, and 99.6 h) when compared to treatments with Heterorhabditis (149.7, 126.8, and 134.7 h), of which, only H. amazonensis (149.7 h) did not differ from the control (166.0 h). In bioassay 2, all treatments reduced the longevity of honey bees (155.4 to [...].(AU)

As populações de abelhas africanizadas (Apis mellifera L.) vêm diminuindo devido, principalmente, ao intenso uso de inseticidas sintéticos. Desde modo, o emprego de agentes de controle biológico tem-se intensificado de forma a minimizar este impacto no ambiente. Estes produtos são, de modo geral, mais seguros aos insetos não-alvos, como as abelhas que são importantes insetos polinizadores. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos de nematoides entomopatogênicos utilizados para controle de insetos pragas, sobre a longevidade de operárias de A. mellifera africanizada. Foram utilizados sete tratamentos: Heterorhabditis amazonensis, Heterorhabditis bacteriophora, Heterorhabditis indica, Steinernema carpocapsae, Steinernema feltiae e Steinernema rarum, na concentração de 40 juvenis infectantes por cm² (JIs/cm²), e como testemunha água destilada autoclavada. Para isso foram realizados dois bioensaios: 1) Pulverização dos nematoides sobre as operárias e 2) Pulverização dos nematoides em placas de vidro, nas quais as abelhas permaneceram por duas horas em contato. Cada tratamento foi composto por cinco repetições com 20 abelhas cada. As abelhas foram mantidas em gaiolas de PVC (20x10cm) cobertas com tecido voile e fornecidos pedaços de algodão embebido em água e pasta Candy. As gaiolas foram mantidas em sala climatizada (27 ± 2 °C, U.R. 60 ± 10%, fotofase de 12h) e a mortalidade avaliada de 12 até 240 horas. No bioensaio 1 os três tratamentos com nematoides do gênero Steinernema reduziram a longevidade das operárias (103,9; 96,3 e 99,6 horas) quando comparados aos tratamentos com Heterorhabditis (149,7; 126,8 e 134,7 horas). Entretanto, dentre estes apenas H. amazonensis (149,7 horas) não diferiu da testemunha (166,0 horas). No bioensaio 2, todos os [...].(AU)

Pathogenicity and virulence of entomopathogenic nematodes against Dichelops melacanthus Dallas (Hemiptera: Pentatomidae) / Patogenicidade e virulência de nematoides entomopatogênicos contra Dichelops melacanthus Dallas (Hemiptera: Pentatomidae)

Infestações e danos de Dichelops melacanthus (Dallas) (Hemiptera: Pentatomidae), na cultura do milho e trigo no Brasil tem aumentado nos últimos anos, principalmente devido à sua capacidade de sobreviver ao período de entressafra. O controle deste inseto é realizado principalmente com inseticidas químicos, porém o desenvolvimento de métodos alternativos, como o controle biológico, pode contribuir para um manejo mais sustentável. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar o potencial de nematoides entomopatogênicos (NEPs) no controle de D. melacanthus. O teste de seleção foi realizado com 15 isolados dos gêneros Steinernema e Heterorhabditis quanto à patogenicidade e virulência sobre adultos de D. melacanthus. Foram realizados, também, teste de concentrações (10, 20, 40, 50 e 100 juvenis infectantes (JIs)/cm²) e teste em casa-de-vegetação, nos quais utilizou-se apenas o isolado Steinernema feltiae (IBCB-n 47). Todos os experimentos foram conduzidos em delineamento inteiramente casualizado. Os dados do teste de seleção foram submetidos ao teste de médias de Scott-Knott (P ≤ 0,05) e os do ensaio em casa-de-vegetação ao Teste-t de Student. Os resultados do ensaio de concentrações foram submetidos à análise de regressão. Todos os isolados apresentaram patogenicidade e virulência sobre adultos de D. melacanthus. Os isolados GL (Heterorhabditis amazonensis), IBCB-n27 (Steinernema sp.) e RSC05 (H. amazonensis) foram os mais virulentos (80,0; 82,0 e 88,0% de mortalidade respectivamente). As concentrações mais altas de S. feltiae (50 e 100 JIs/cm²) foram responsáveis pelas maiores taxas de mortalidade dos percevejos (88,0 e 86,0% respectivamente). No teste realizado em casa-de-vegetação, S. feltiae causou mortalidade (38%) superior ao controle.

Infestations of Dichelops melacanthus (Dallas; Hemiptera: Pentatomidae) in corn and wheat in Brazil, and the subsequent damage, have increased in recent years, mainly owing to this insect’s ability to survive the off-season. The control of this insect is mainly carried out with chemical insecticides, but the development of alternative methods, such as biological control, can contribute to a more sustainable management. Thus, the objective of this study was to evaluate the potential of entomopathogenic nematodes (EPNs) for the control of D. melacanthus. A selection test was performed with 15 isolates of genera Steinernema and Heterorhabditis regarding their pathogenicity and virulence on adults of D. melacanthus. Concentration (10, 20, 40, 50, and 100 infective juveniles (IJs)/cm2) and greenhouse tests were carried out only with the Steinernema feltiae isolate (IBCB-n 47). All experiments were conducted in a completely randomized design. The selection test data were submitted to the Scott-Knott averages test (P ≤ 0.05), and those from the greenhouse test to the Student’s t-test. The results of the concentration assay were subjected to regression analysis. All isolates showed pathogenicity and virulence in adults of D. melacanthus. The isolates GL (Heterorhabditis amazonensis), IBCB-n27 (Steinernema sp.), and RSC05 (H. amazonensis) were the most virulent (80.0, 82.0, and 88.0% mortality, respectively). The higher concentrations of S. feltiae (50 and 100 IJs/cm²) were responsible for the highest mortality rates of green belly stink bug (88.0 and 86.0%, respectively). In the greenhouse test, S. feltiae caused higher mortality (38%) than the control.

Pathogenicity and virulence of entomopathogenic nematodes against Dichelops melacanthus Dallas (Hemiptera: Pentatomidae) / Patogenicidade e virulência de nematoides entomopatogênicos contra Dichelops melacanthus Dallas (Hemiptera: Pentatomidae)

Infestações e danos de Dichelops melacanthus (Dallas) (Hemiptera: Pentatomidae), na cultura do milho e trigo no Brasil tem aumentado nos últimos anos, principalmente devido à sua capacidade de sobreviver ao período de entressafra. O controle deste inseto é realizado principalmente com inseticidas químicos, porém o desenvolvimento de métodos alternativos, como o controle biológico, pode contribuir para um manejo mais sustentável. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar o potencial de nematoides entomopatogênicos (NEPs) no controle de D. melacanthus. O teste de seleção foi realizado com 15 isolados dos gêneros Steinernema e Heterorhabditis quanto à patogenicidade e virulência sobre adultos de D. melacanthus. Foram realizados, também, teste de concentrações (10, 20, 40, 50 e 100 juvenis infectantes (JIs)/cm²) e teste em casa-de-vegetação, nos quais utilizou-se apenas o isolado Steinernema feltiae (IBCB-n 47). Todos os experimentos foram conduzidos em delineamento inteiramente casualizado. Os dados do teste de seleção foram submetidos ao teste de médias de Scott-Knott (P ≤ 0,05) e os do ensaio em casa-de-vegetação ao Teste-t de Student. Os resultados do ensaio de concentrações foram submetidos à análise de regressão. Todos os isolados apresentaram patogenicidade e virulência sobre adultos de D. melacanthus. Os isolados GL (Heterorhabditis amazonensis), IBCB-n27 (Steinernema sp.) e RSC05 (H. amazonensis) foram os mais virulentos (80,0; 82,0 e 88,0% de mortalidade respectivamente). As concentrações mais altas de S. feltiae (50 e 100 JIs/cm²) foram responsáveis pelas maiores taxas de mortalidade dos percevejos (88,0 e 86,0% respectivamente). No teste realizado em casa-de-vegetação, S. feltiae causou mortalidade (38%) superior ao controle.(AU)

Infestations of Dichelops melacanthus (Dallas; Hemiptera: Pentatomidae) in corn and wheat in Brazil, and the subsequent damage, have increased in recent years, mainly owing to this insects ability to survive the off-season. The control of this insect is mainly carried out with chemical insecticides, but the development of alternative methods, such as biological control, can contribute to a more sustainable management. Thus, the objective of this study was to evaluate the potential of entomopathogenic nematodes (EPNs) for the control of D. melacanthus. A selection test was performed with 15 isolates of genera Steinernema and Heterorhabditis regarding their pathogenicity and virulence on adults of D. melacanthus. Concentration (10, 20, 40, 50, and 100 infective juveniles (IJs)/cm2) and greenhouse tests were carried out only with the Steinernema feltiae isolate (IBCB-n 47). All experiments were conducted in a completely randomized design. The selection test data were submitted to the Scott-Knott averages test (P ≤ 0.05), and those from the greenhouse test to the Students t-test. The results of the concentration assay were subjected to regression analysis. All isolates showed pathogenicity and virulence in adults of D. melacanthus. The isolates GL (Heterorhabditis amazonensis), IBCB-n27 (Steinernema sp.), and RSC05 (H. amazonensis) were the most virulent (80.0, 82.0, and 88.0% mortality, respectively). The higher concentrations of S. feltiae (50 and 100 IJs/cm²) were responsible for the highest mortality rates of green belly stink bug (88.0 and 86.0%, respectively). In the greenhouse test, S. feltiae caused higher mortality (38%) than the control.(AU)

Compatibility between entomopathogenic nematodes and crop protection products used in maize seed treatment / Compatibilidade entre nematoides entomopatogênicos e produtos fitossanitários utilizados no tratamento de sementes de milho

Chemical insecticides are widely used to control soil pests but not always effective. Entomopathogenic nematodes (NEPs) are found in the soil and depend on host insects to complete their life cycle, and therefore have the potential to control soil pests. Thus, we aimed to investigate the possible joint use of these control methods by assessing the compatibility of two nematodes (Heterorhabditis amazonensis GL and Heterorhabditis amazonensis MC01) with five crop protection products used for maize seed treatment (Maxim®, Cruiser 350 FS®, Fortenza 600 FS®, Avicta 500 FS®, and Amulet®), as well as one neem-based product (NeenMax®). The experimental design was completely randomized with five replicates, six treatments, and one control, in which only distilled water was added to nematode suspension. Each replicate consisted of a test tube containing 1 mL suspension with 2,000 infective juveniles (IJs) and 1 mL of diluted product, following the manufacturer"s recommendation. The evaluated parameters were viability, infectivity on Tenebrio molitor larvae and IJs production after exposure to products. Both nematodes were compatible with NeenMax® and Fortenza 600 FS® since they did not differ from the control and were classified as innocuous. Cruiser 350 FS ® was also compatible with the nematodes since the effect value of the product was lower than 30%. Amulet® was classified as slightly noxious, reducing H. amazonensis MC01 and H. amazonensis GL infectivity by 17.5% and 28.5%, and production by 18.2% and 22.3%, respectively. Despite not having reduced viability, Avicta 500 FS® and Maxim® were considered harmful. This is because Avicta 500 FS® and Maxim® reduced productivity by 70.0% and 72.5% and production by 66.1% and 65.4% for H. amazonensis MC01, respectively. For H. amazonensis MC01, both Avicta 500 FS® and Maxim® reduced infectivity by 76.19%, and production by 63.7% and 62.3%, respectively.

Os inseticidas químicos apesar de serem os mais utilizados para controle de pragas de solo, nem sempre são eficazes. Os nematoides entomopatogênicos (NEPs) são encontrados no solo e utilizam insetos como hospedeiros para completarem seu ciclo de vida, assim, apresentam potencial no controle de pragas com hábito subterrâneo. Com isso, destaca-se a importância de se avaliar a possibilidade de uso conjunto desses métodos de controle, objetivando-se avaliar a compatibilidade dos nematoides Heterorhabditis amazonensis GL e Heterorhabditis amazonensis MC01 com cinco produtos fitossanitários utilizados no tratamento de sementes de milho, Maxim®, Cruiser 350 FS ®, Fortenza 600 FS®, Avicta 500 FS® e Amulet®, além de um produto à base de nim, NeenMax®. O ensaio foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado com cinco repetições, totalizando seis tratamentos e o controle, no qual foi adicionada apenas água destilada à suspensão do nematoide. Cada repetição foi constituída de um tubo de ensaio contendo 1 mL de suspensão com 2.000 juvenis infectantes (JIs) e 1 mL do produto diluído de acordo com a recomendação do fabricante. Foram avaliados os parâmetros viabilidade, infectividade sobre larvas de Tenebrio molitor e produção de JIs após o contato com os produtos. Verificou-se que para ambos os nematoides os produtos NeenMax® e Fortenza 600 FS® foram considerados compatíveis, pois não diferiram do controle e foram classificados como inócuos. O produto Cruiser 350 FS ® também foi compatível aos nematoides testados, já que o valor de efeito do produto obtido foi menor que 30%. O produto Amulet® foi classificado como levemente nocivo, causando uma redução de 17,5% na infectividade e de 18,2% na produção de H. amazonensis MC01 e de 28,5% e 22,3 % para H. amazonensis GL. Avicta 500 FS® e Maxim® foram considerados nocivos, pois apesar de não reduzirem a viabilidade dos nematoides, diminuíram em 70,0% e 72,5% a infectividade e 66,1% e 65,4% a...

Compatibility between entomopathogenic nematodes and crop protection products used in maize seed treatment / Compatibilidade entre nematoides entomopatogênicos e produtos fitossanitários utilizados no tratamento de sementes de milho

Chemical insecticides are widely used to control soil pests but not always effective. Entomopathogenic nematodes (NEPs) are found in the soil and depend on host insects to complete their life cycle, and therefore have the potential to control soil pests. Thus, we aimed to investigate the possible joint use of these control methods by assessing the compatibility of two nematodes (Heterorhabditis amazonensis GL and Heterorhabditis amazonensis MC01) with five crop protection products used for maize seed treatment (Maxim®, Cruiser 350 FS®, Fortenza 600 FS®, Avicta 500 FS®, and Amulet®), as well as one neem-based product (NeenMax®). The experimental design was completely randomized with five replicates, six treatments, and one control, in which only distilled water was added to nematode suspension. Each replicate consisted of a test tube containing 1 mL suspension with 2,000 infective juveniles (IJs) and 1 mL of diluted product, following the manufacturer"s recommendation. The evaluated parameters were viability, infectivity on Tenebrio molitor larvae and IJs production after exposure to products. Both nematodes were compatible with NeenMax® and Fortenza 600 FS® since they did not differ from the control and were classified as innocuous. Cruiser 350 FS ® was also compatible with the nematodes since the effect value of the product was lower than 30%. Amulet® was classified as slightly noxious, reducing H. amazonensis MC01 and H. amazonensis GL infectivity by 17.5% and 28.5%, and production by 18.2% and 22.3%, respectively. Despite not having reduced viability, Avicta 500 FS® and Maxim® were considered harmful. This is because Avicta 500 FS® and Maxim® reduced productivity by 70.0% and 72.5% and production by 66.1% and 65.4% for H. amazonensis MC01, respectively. For H. amazonensis MC01, both Avicta 500 FS® and Maxim® reduced infectivity by 76.19%, and production by 63.7% and 62.3%, respectively.(AU)

Os inseticidas químicos apesar de serem os mais utilizados para controle de pragas de solo, nem sempre são eficazes. Os nematoides entomopatogênicos (NEPs) são encontrados no solo e utilizam insetos como hospedeiros para completarem seu ciclo de vida, assim, apresentam potencial no controle de pragas com hábito subterrâneo. Com isso, destaca-se a importância de se avaliar a possibilidade de uso conjunto desses métodos de controle, objetivando-se avaliar a compatibilidade dos nematoides Heterorhabditis amazonensis GL e Heterorhabditis amazonensis MC01 com cinco produtos fitossanitários utilizados no tratamento de sementes de milho, Maxim®, Cruiser 350 FS ®, Fortenza 600 FS®, Avicta 500 FS® e Amulet®, além de um produto à base de nim, NeenMax®. O ensaio foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado com cinco repetições, totalizando seis tratamentos e o controle, no qual foi adicionada apenas água destilada à suspensão do nematoide. Cada repetição foi constituída de um tubo de ensaio contendo 1 mL de suspensão com 2.000 juvenis infectantes (JIs) e 1 mL do produto diluído de acordo com a recomendação do fabricante. Foram avaliados os parâmetros viabilidade, infectividade sobre larvas de Tenebrio molitor e produção de JIs após o contato com os produtos. Verificou-se que para ambos os nematoides os produtos NeenMax® e Fortenza 600 FS® foram considerados compatíveis, pois não diferiram do controle e foram classificados como inócuos. O produto Cruiser 350 FS ® também foi compatível aos nematoides testados, já que o valor de efeito do produto obtido foi menor que 30%. O produto Amulet® foi classificado como levemente nocivo, causando uma redução de 17,5% na infectividade e de 18,2% na produção de H. amazonensis MC01 e de 28,5% e 22,3 % para H. amazonensis GL. Avicta 500 FS® e Maxim® foram considerados nocivos, pois apesar de não reduzirem a viabilidade dos nematoides, diminuíram em 70,0% e 72,5% a infectividade e 66,1% e 65,4% a...(AU)

Selection of entomopathogenic nematodes and evaluation of their compatibility with cyantraniliprole for the control of Hypothenemus hampei / Seleção de nematoides entomopatogênicos e avaliação da sua compatibilidade com ciantraniliprole visando o controle de Hypothenemus hampei

Attack by the coffee berry borer Hypothenemus hampei causes significant damage to coffee crops because it affects the quality of the coffee fruit during different developmental stages, which results in production losses. Control of the borer is difficult owing to its cryptic behavior and the fact that it spends its entire life cycle inside the coffee berries. This makes it difficult for natural enemies to reach it, as well as for it to come into contact with chemical insecticides. The objective of the present study was to select and evaluate the virulence of entomopathogenic nematodes (EPNs) on the coffee berry borer H. hampei and their compatibility with the insecticide cyantraniliprole under laboratory conditions. Initially, the pathogenicity and virulence of 16 isolates of Steinernema and Heterorhabditis towards coffee berry borer larvae and adults were evaluated. The most virulent isolates to both larvae and adults were determined by topical inoculation tests in coffee fruits (berries) infested by the insect, using a concentration of 100 infective juveniles (IJs)/fruit. The same isolates were also evaluated for viability and infectivity when combined with cyantraniliprole. The isolates S. feltiae (IBCB-n 47) and Heterorhabditis amazonensis (GL) displayed the highest virulence towards adults (54%). For larvae, we observed a high virulence of S. feltiae, Heterorhabditis amazonensis, Heterorhabditis indica, Heterorhabditis sp. (JPM4), Heterorhabditis sp. (NEPET 11), Heterorhabditis sp. (IBCB-n 46), and Heterorhabditis sp. (IBCB-n 44) that promoted 100% mortality. Regarding the topical inoculation test on infested fruits, S. feltiae and Heterorhabditis sp. (IBCB-n 46) were unable to penetrate the fruit through the hole made by the borer, infect, and cause the death of insects. Cyantraniliprole formulation affected the viability of IJs of S. feltiae and Heterorhabditis sp. (IBCB-n 46), mainly after 48 h of exposure.(AU)

A broca-do-café Hypothenemus hampei causa significativos prejuízos a esta cultura, pois seu ataque afeta a qualidade dos frutos de café em seus diferentes estádios de desenvolvimento e consequentemente leva a perdas na produção. O controle é dificultado devido ao seu comportamento críptico, uma vez que passa todo o ciclo dentro dos frutos de café, dificultando a ação de inimigos naturais, bem como o contato com inseticidas químicos. O objetivo deste estudo foi avaliar a virulência de nematoides entomopatogênicos (NEPs) sobre a broca-do-café H. hampei e a sua compatibilidade com o inseticida ciantraniliprole em condições de laboratório. Inicialmente, foram avaliadas a patogenicidade e virulência de 16 isolados de Steinernema e Heterorhabditis para larvas e adultos de H. hampei. Os isolados mais virulentos para larvas e adultos foram utilizados no teste de inoculação tópica em frutos de café infestados pelo inseto, utilizando uma concentração de 100 juvenis infectantes (JIs)/fruto. Os mesmos isolados também foram avaliados quanto à viabilidade e à infectividade quando combinados com ciantraniliprole. Os isolados Steinernema feltiae (IBCB-n 47) e Heterorhabditis amazonensis (GL) foram os que apresentaram maior porcentagem de mortalidade sobre os adultos (54%). Para larvas, observou-se alta virulência dos isolados S. feltiae, H. amazonensis, H. indica, Heterorhabditis sp. (JPM4), Heterorhabditis sp. (NEPET11), Heterorhabditis sp. (IBCB-n 46) e Heterorhabditis sp. (IBCB-n 44) que promoveram 100% de mortalidade. Quanto ao teste de inoculação tópica sobre frutos infestados, observou-se que tanto S. feltiae quanto Heterorhabditis sp. (IBCB-n 46) não foram capazes de penetrar o fruto pelo orifício feito pela broca, infectar e causar a morte dos insetos. A formulação de ciantraniliprole afetou a viabilidade dos JIs de S. feltiae e Heterorhabditis sp. (IBCB-n 46), principalmente após 48 horas de exposição.(AU)

Inhibition of symbiote fungus of the leaf cutter ant Atta sexdens by secondary metabolites from the bacterium Xenorhabdus szentirmaii associated with entomopathogenic nematodes / Inibição do fungo simbionte da formiga-cortadeira Atta sexdens por metabólitos secundários da bactéria Xenorhabdus szentirmaii associada a nematoides entomopatogênicos

Leaf-cutter ants (Hymenoptera: Formicidae) have evolved as dominant herbivores on the American continent. These social insects remove the leaves of economically important plant species to maintain their colony's food reserves, the symbiotic fungus Leucocoprinus gongylophorus, a basidiomycete. Such fungus can be used for applications of fungicide molecules from metabolites generated by symbiont bacteria (Xenorhabdus and Photorhabdus) from entomopathogenic nematodes (Steinernema and Heterorhabditis). Through isolation and multiplication in tryptic soy broth (TSB) medium of the bacteria Xenorhabdus szentirmaii isolated PAM 25, we conducted laboratorial tests using treatments with 10, 25, and 50% of the metabolites obtained in the sixth day of cultivation. The treatments were centrifuged and filtered to generate a supernatant, which was diluted in potato + dextrose + agar (PDA), to verify the consequences of exposure to the fungus L. gongylophorus in Petri dishes. To confirm metabolite efficiency, the control treatments in PDA only and mixed (PDA+TSB) media were conducted simultaneously for 14 days. We observed total inhibition of the symbiont fungus in both the 25 and 50% dilutions during the first days of the tests. Our results support that these metabolites have inhibitory effect on the development of symbiont fungus of leaf-cutter ants.(AU)

As formigas-cortadeiras (Hymenoptera: Formicidae) evoluíram estabelecendo-se no continente americano como herbívoros dominantes. Esses insetos sociais praticam a desfolha de espécies vegetais de interesse econômico, com a finalidade de manter a reserva alimentar da colônia, o fungo simbionte Leucocoprinus gongylophorus, um basidiomiceto. Tal fungo pode ser alvo de aplicações de moléculas fungicidas encontradas em metabólitos gerados por bactérias simbiontes (Xenorhabdus e Photorhabdus) de nematoides entomopatogênicos (Steinernema e Heterorhabditis). Por meio do isolamento e da multiplicação em meio caldo triptona de soja (TSB) da bactéria Xenorhabdus szentirmaii (isolado PAM 25), foram realizados testes laboratoriais com tratamentos contendo 10, 25 e 50% do metabólito obtido no sexto dia de cultivo. Para tanto, o metabólito foi centrifugado e filtrado, gerando um sobrenadante, o qual foi diluído em batata + dextrose + ágar (BDA), para verificar as consequências da exposição do fungo L. gongylophorus em placas de Petri. Os tratamentos de controle apenas com meio BDA e misto (BDA + TSB) também foram conduzidos simultaneamente por 14 dias, a fim de confirmar a eficiência dos metabólitos. Tanto na diluição de 25 e 50% houve total inibição do fungo simbionte já nos primeiros dias da condução dos testes. Diante dos resultados obtidos, pode-se afirmar que os metabólitos são a causa do efeito inibitório do desenvolvimento do fungo simbionte das formigas-cortadeiras.(AU)

Entomopathogenic nematodes for the control of Gryllus sp. (Orthoptera: Gryllidae) under laboratory and field conditions / Nematoides entomopatogênicos no controle de Gryllus sp. (Orthoptera: Gryllidae) em condições de laboratório e campo

Entomopathogenic nematodes are effective in controlling soil insects and they are used in agricultural systems. The virulence of entomopathogenic nematodes on crickets (Gryllus L.) (Orthoptera: Gryllidae) was evaluated under different conditions in order to select populations for application in the field. Virulence tests with Heterorhabditis amazonensis RSC05, H. amazonensis MC01, Steinernema carpocapsae All (Weiser) and H. amazonensis GL were performed. Evaluations were then made of the concentrations of infective juveniles (100, 200, 400 and 600 infective juveniles per insect); feeding preference with or without choice; and field tests using traps to evaluate insect sampling. All isolates were found to cause mortality in Gryllus sp., and H. amazonensis MC01 and S. carpocapsae All were selected; an increase in concentration resulted in increased insect mortality. Regarding the feeding preference tests, after 16 h there was no feeding in any of the treatments. In treatments with a chance of choice, it was verified that the crickets fed, independently of the presence of the nematodes. In the field tests, 19 live crickets were found in the traps, and, after application of entomopathogenic nematodes in aqueous suspension, 2 live crickets were found. Results suggested that H. amazonensis MC01 was promising in the control of Gryllus sp. under the tested conditions.(AU)

Os nematoides entomopatogênicos (NEPs) são eficazes contra insetos de solo e têm sido usados em sistemas agrícolas. A ação de NEPs sobre grilos (Gryllus L.) (Orthoptera: Gryllidae) foi avaliada em condições de laboratório e campo, a fim de selecionar populações para aplicação em área de cultivo. Foram realizados testes de virulência com Heterorhabditis amazonensis RSC05, H. amazonensis MC01, Steinernema carpocapsae All (Weiser) e H. amazonensis GL, assim como verificadas a adequação da concentração de juvenis infectantes (100, 200, 400 e 600 juvenis infectantes por inseto) e a preferência alimentar sem chance de escolha e com chance de escolha, além do teste de campo utilizando armadilhas para amostragem dos insetos. Verificou-se que todos os isolados causaram mortalidade em Gryllus sp. selecionando-se H. amazonensis MC01 e S. carpocapsae All e que o aumento na concentração de juvenis infectantes resultou em mortalidade crescente dos insetos. Com relação aos testes de preferência alimentar, observou-se que, após 16 horas, não houve alimentação em nenhum dos tratamentos. Nos tratamentos com chance de escolha, constatou-se que houve alimentação dos grilos, independentemente da presença ou não de nematoides. Nos testes de campo, antes da aplicação de juvenis infectantes, foram encontrados 19 grilos vivos nas armadilhas, e após a aplicação dos NEPs em suspensão aquosa foram encontrados 2 grilos vivos. Dessa forma, concluiu-se que H. amazonensis MC01 foi promissor no controle de Gryllus sp. nas condições testadas.(AU)

Inhibition of symbiote fungus of the leaf cutter ant Atta sexdens by secondary metabolites from the bacterium Xenorhabdus szentirmaii associated with entomopathogenic nematodes / Inibição do fungo simbionte da formiga-cortadeira Atta sexdens por metabólitos secundários da bactéria Xenorhabdus szentirmaii associada a nematoides entomopatogênicos

Leaf-cutter ants (Hymenoptera: Formicidae) have evolved as dominant herbivores on the American continent. These social insects remove the leaves of economically important plant species to maintain their colony's food reserves, the symbiotic fungus Leucocoprinus gongylophorus, a basidiomycete. Such fungus can be used for applications of fungicide molecules from metabolites generated by symbiont bacteria (Xenorhabdus and Photorhabdus) from entomopathogenic nematodes (Steinernema and Heterorhabditis). Through isolation and multiplication in tryptic soy broth (TSB) medium of the bacteria Xenorhabdus szentirmaii isolated PAM 25, we conducted laboratorial tests using treatments with 10, 25, and 50% of the metabolites obtained in the sixth day of cultivation. The treatments were centrifuged and filtered to generate a supernatant, which was diluted in potato + dextrose + agar (PDA), to verify the consequences of exposure to the fungus L. gongylophorus in Petri dishes. To confirm metabolite efficiency, the control treatments in PDA only and mixed (PDA+TSB) media were conducted simultaneously for 14 days. We observed total inhibition of the symbiont fungus in both the 25 and 50% dilutions during the first days of the tests. Our results support that these metabolites have inhibitory effect on the development of symbiont fungus of leaf-cutter ants.(AU)

As formigas-cortadeiras (Hymenoptera: Formicidae) evoluíram estabelecendo-se no continente americano como herbívoros dominantes. Esses insetos sociais praticam a desfolha de espécies vegetais de interesse econômico, com a finalidade de manter a reserva alimentar da colônia, o fungo simbionte Leucocoprinus gongylophorus, um basidiomiceto. Tal fungo pode ser alvo de aplicações de moléculas fungicidas encontradas em metabólitos gerados por bactérias simbiontes (Xenorhabdus e Photorhabdus) de nematoides entomopatogênicos (Steinernema e Heterorhabditis). Por meio do isolamento e da multiplicação em meio caldo triptona de soja (TSB) da bactéria Xenorhabdus szentirmaii (isolado PAM 25), foram realizados testes laboratoriais com tratamentos contendo 10, 25 e 50% do metabólito obtido no sexto dia de cultivo. Para tanto, o metabólito foi centrifugado e filtrado, gerando um sobrenadante, o qual foi diluído em batata + dextrose + ágar (BDA), para verificar as consequências da exposição do fungo L. gongylophorus em placas de Petri. Os tratamentos de controle apenas com meio BDA e misto (BDA + TSB) também foram conduzidos simultaneamente por 14 dias, a fim de confirmar a eficiência dos metabólitos. Tanto na diluição de 25 e 50% houve total inibição do fungo simbionte já nos primeiros dias da condução dos testes. Diante dos resultados obtidos, pode-se afirmar que os metabólitos são a causa do efeito inibitório do desenvolvimento do fungo simbionte das formigas-cortadeiras.(AU)

Entomopathogenic nematodes for the control of Gryllus sp. (Orthoptera: Gryllidae) under laboratory and field conditions / Nematoides entomopatogênicos no controle de Gryllus sp. (Orthoptera: Gryllidae) em condições de laboratório e campo

Entomopathogenic nematodes are effective in controlling soil insects and they are used in agricultural systems. The virulence of entomopathogenic nematodes on crickets (Gryllus L.) (Orthoptera: Gryllidae) was evaluated under different conditions in order to select populations for application in the field. Virulence tests with Heterorhabditis amazonensis RSC05, H. amazonensis MC01, Steinernema carpocapsae All (Weiser) and H. amazonensis GL were performed. Evaluations were then made of the concentrations of infective juveniles (100, 200, 400 and 600 infective juveniles per insect); feeding preference with or without choice; and field tests using traps to evaluate insect sampling. All isolates were found to cause mortality in Gryllus sp., and H. amazonensis MC01 and S. carpocapsae All were selected; an increase in concentration resulted in increased insect mortality. Regarding the feeding preference tests, after 16 h there was no feeding in any of the treatments. In treatments with a chance of choice, it was verified that the crickets fed, independently of the presence of the nematodes. In the field tests, 19 live crickets were found in the traps, and, after application of entomopathogenic nematodes in aqueous suspension, 2 live crickets were found. Results suggested that H. amazonensis MC01 was promising in the control of Gryllus sp. under the tested conditions.(AU)

Os nematoides entomopatogênicos (NEPs) são eficazes contra insetos de solo e têm sido usados em sistemas agrícolas. A ação de NEPs sobre grilos (Gryllus L.) (Orthoptera: Gryllidae) foi avaliada em condições de laboratório e campo, a fim de selecionar populações para aplicação em área de cultivo. Foram realizados testes de virulência com Heterorhabditis amazonensis RSC05, H. amazonensis MC01, Steinernema carpocapsae All (Weiser) e H. amazonensis GL, assim como verificadas a adequação da concentração de juvenis infectantes (100, 200, 400 e 600 juvenis infectantes por inseto) e a preferência alimentar sem chance de escolha e com chance de escolha, além do teste de campo utilizando armadilhas para amostragem dos insetos. Verificou-se que todos os isolados causaram mortalidade em Gryllus sp. selecionando-se H. amazonensis MC01 e S. carpocapsae All e que o aumento na concentração de juvenis infectantes resultou em mortalidade crescente dos insetos. Com relação aos testes de preferência alimentar, observou-se que, após 16 horas, não houve alimentação em nenhum dos tratamentos. Nos tratamentos com chance de escolha, constatou-se que houve alimentação dos grilos, independentemente da presença ou não de nematoides. Nos testes de campo, antes da aplicação de juvenis infectantes, foram encontrados 19 grilos vivos nas armadilhas, e após a aplicação dos NEPs em suspensão aquosa foram encontrados 2 grilos vivos. Dessa forma, concluiu-se que H. amazonensis MC01 foi promissor no controle de Gryllus sp. nas condições testadas.(AU)

Variability study of entomopathogenic nematode populations (Heterorhabditidae) from Argentina

Abstract Entomopathogenic nematodes (EPN) belonging to the Heterorhabditidae family are lethal parasites of soil-dwelling insects. Two species were reported in Argentina: Heterorhabditis argentinensis and Heterorhabditis bacteriophora characterized mainly by morphometric features. In this work a comparative and phylogenetic study between five Heterorhabditis populations from Argentina was conducted to analyze the variability between strains and to evaluate the taxonomic position of Heterorhabditis argentinensis. The PCA analyses of morphometric characters separated the larger juvenile, female and male H. argentinensis from H. bacteriophora populations. The juvenile (IJs) stage provided the clearest separation of Heterorhabditis populations presenting the least variability between strains. The variable L and MBW were highly related to H. argentinensis IJs. Three groups were separated by this stage considering PC1 and PC2: one formed by H. bacteriophora OLI, RIV and RN strains, (isolates from Córdoba and Río Negro province), one for H. bacteriophora VELI strain (Buenos Aires province) and one for H. argentinensis (Santa Fe province). Heterorhabditis bacteriophora VELI and H. argentinensis isolated from regions with more rainfalls and humidity presented larger values for morphometric features. Molecular analyses showed the Argentinian populations (H. bacteriophora VELI strain and H. argentinensis), forming a same clade, with six other H. bacteriophora populations (not from Argentina) with a genetic similarity between them of 99%. Heterorhabditis argentinensis presented one unique nucleotide that was not present in any of the other species of the clade. Considering the results of this study H. argentinensis would be conspecific to H. bacteriophora, constituting a strain with a great morphometric variation where the host and climatic conditions could have influenced on the measurements.

Resumo Nematóides entomopatogênicos (EPN) pertencentes à família Heterorhabditidae são parasitas letais de insetos que vivem no solo. Duas espécies foram relatados na Argentina: Heterorhabditis argentinensis e Heterorhabditis bacteriophora, caracterizada principalmente por características morfométricas. Neste trabalho um estudo comparativo e filogenética entre cinco populações do Heterorhabditis da Argentina foi conduzido para analisar a variabilidade entre as linhagens e avaliar a posição taxonômica das Heterorhabditis argentinensis. Características morfométricas de Heterorhabditis bacteriophora VELI e H. argentinensis isoladas de regiões com mais chuvas e umidade apresentaram dimensões maiores. Analisa o PCA de personagens morfométricas separou a maior juvenil, feminino e masculino H. argentinensis de H. bacteriophora populações. A fase juvenil (JIs) fornece a mais clara separação de populações Heterorhabditis apresentando a menor variação entre as cepas. A L variável e MBW foram altamente relacionada com H. argentinensis JIs. Três grupos foram separados por esta fase considerando PC1 e PC2: um formado por H. bacteriophora OLI, RIV e estirpes RN, (isolados de Córdoba e província de Rio Negro), um para a estirpe H. bacteriophora VELI (província de Buenos Aires) e um para H. argentinensis (província de Santa Fe). Heterorhabditis bacteriophora VELI e H. argentinensis isolado a partir de regiões com mais chuvas e umidade apresentaram maiores valores para as características morfométricas. A análise molecular mostrou as populações da Argentina (estirpe H. bacteriophora VELI e H. argentinensis), formando um mesmo subtipo, com seis outras populações H. bacteriophora (não da Argentina), com uma similaridade genética entre eles de 99%. Heterorhabditis argentinensis apresentado um único nucleótido que não estava presente em nenhum dos outros espécies do clado. Considerando os resultados deste estudo H. argentinensis seria conspecific a H. bacteriophora, constituindo uma estirpe com uma grande variação morfométrica onde o anfitrião e as condições climáticas podem ter influenciado nas medições.