Chemical characterization and antimicrobial activity of Campomanesia aurea against three strains of Listeria monocytogenes / Caracterização química e atividade antimicrobiana de Campomanesia aurea contra três cepas de Listeria monocytogenes

The essential oil (EO) composition of leaves of Campomanesia aurea was analyzed by GC-MS. The plant was collected in April (EOA) and October (EOO) in São Francisco de Assis/RS. The essential oils were obtained by hydrodistillation in a modified Clevenger apparatus. The yields were 4.44% in April, and 6.15%, in October. Thirty-one compounds were identified in EOA, accounting for 96.87% of the total, and twenty-eight compounds were identified in EOO, accounting for 99.46% of the total. For EOA, the major identified monoterpene was p-cymene (8.33%) and the major identified sesquiterpene was alpha-cadinol (10.72%), while regarding EOO the major identified monoterpene was repeatedly Terpinolene (3.43%), whereas the major identified sesquiterpene was alpha-cadinol (12.79%). The antibacterial activity of the essential oil was evaluated against the three Listeria monocytogenes from the American Type Culture Collection (strains ATCC 7644, 19114 and 13932). The essential oil showed a MIC of 10 mg/mL against the strains ATCC 7644 and 19114, with bacteriostatic effect of 20 mg/mL and a MIC of 20 mg/mL for ATCC 13932. Regarding the antibiofilm activity, o EOO showed the best results with an inhibition of 90% in the sessile growth with an applied concentration of 4.0 mg/mL.(AU)

O óleo essencial (EO) das folhas de Campomanesia aurea foi analisado por CG-EM. O A planta foi coletada em abril (OEA) e outubro (OEO) em São Francisco de Assis/RS. Os óleos essenciais foram obtidos por hidrodestilação em aparelho Clevenger modificado. Os rendimentos foram de 4,44% em abril e 6,15% em outubro. Trinta e um compostos foram identificados no EOA, representando 96,87% do total, e vinte e oito compostos foram identificados no EOO, representando 99,46% do total. Para EOA, o principal monoterpeno identificado foi o p-cimeno (8,33%) e o principal sesquiterpeno identificado foi o alfa-candinol (10,72%), enquanto o EOO o maior monoterpeno identificado foi repetidamente Terpinolene (3,43%), enquanto o sesquiterpeno principal identificado foi alfa-cadinol (12,79%). A atividade antibacteriana do óleo essencial foi avaliada contra as três cepas de Listeria monocytogenes obtidas a partir da American Type Culture Collection (isolados ATCC 7644, 19114 and 13932). O óleo essencial apresentou uma CIM de 10 mg/mL contra as cepas ATCC 7644. e 19114, com efeito bacteriostático de 20 mg/mL e MIC de 20 mg/mL para ATCC 13932. Quanto à atividade antibiofilme, o EOO apresentou os melhores resultados com uma inibição de 90% no crescimento séssil com uma concentração aplicada de 4,0 mg/mL.(AU)

Chemical characterization and antimicrobial activity of Campomanesia aurea against three strains of Listeria monocytogenes

Abstract The essential oil (EO) composition of leaves of Campomanesia aurea was analyzed by GC-MS. The plant was collected in April (EOA) and October (EOO) in São Francisco de Assis/RS. The essential oils were obtained by hydrodistillation in a modified Clevenger apparatus. The yields were 4.44% in April, and 6.15%, in October. Thirty-one compounds were identified in EOA, accounting for 96.87% of the total, and twenty-eight compounds were identified in EOO, accounting for 99.46% of the total. For EOA, the major identified monoterpene was p-cymene (8.33%) and the major identified sesquiterpene was -cadinol (10.72%), while regarding EOO the major identified monoterpene was repeatedly Terpinolene (3.43%), whereas the major identified sesquiterpene was -cadinol (12.79%). The antibacterial activity of the essential oil was evaluated against the three Listeria monocytogenes from the American Type Culture Collection (strains ATCC 7644, 19114 and 13932). The essential oil showed a MIC of 10 mg/mL against the strains ATCC 7644 and 19114, with bacteriostatic effect of 20 mg/mL and a MIC of 20 mg/mL for ATCC 13932. Regarding the antibiofilm activity, o EOO showed the best results with an inhibition of 90% in the sessile growth with an applied concentration of 4.0 mg/mL.

Resumo O óleo essencial (EO) das folhas de Campomanesia aurea foi analisado por CG-EM. O A planta foi coletada em abril (OEA) e outubro (OEO) em São Francisco de Assis/RS. Os óleos essenciais foram obtidos por hidrodestilação em aparelho Clevenger modificado. Os rendimentos foram de 4,44% em abril e 6,15% em outubro. Trinta e um compostos foram identificados no EOA, representando 96,87% do total, e vinte e oito compostos foram identificados no EOO, representando 99,46% do total. Para EOA, o principal monoterpeno identificado foi o p-cimeno (8,33%) e o principal sesquiterpeno identificado foi o -candinol (10,72%), enquanto o EOO o maior monoterpeno identificado foi repetidamente Terpinolene (3,43%), enquanto o sesquiterpeno principal identificado foi -cadinol (12,79%). A atividade antibacteriana do óleo essencial foi avaliada contra as três cepas de Listeria monocytogenes obtidas a partir da American Type Culture Collection (isolados ATCC 7644, 19114 and 13932). O óleo essencial apresentou uma CIM de 10 mg/mL contra as cepas ATCC 7644. e 19114, com efeito bacteriostático de 20 mg/mL e MIC de 20 mg/mL para ATCC 13932. Quanto à atividade antibiofilme, o EOO apresentou os melhores resultados com uma inibição de 90% no crescimento séssil com uma concentração aplicada de 4,0 mg/mL.

Assessment of physicochemical, textural and microbiological properties of Brazilian white mold surface-ripened cheeses: a technological approach / Avaliação das propriedades físico-químicas, de textura e microbiológicas de queijos brasileiros maturados com mofo branco: uma abordagem tecnológica

There are no specific technical regulations regarding the identity and quality of white mold surface-ripened cheeses in Brazil. These cheeses are sold both whole (Camembert-type) and in wedges (Brie-type). The aim of the study was to evaluate the physical and chemical properties; technological parameters and microbiological safety of 20 whole cheeses (Camembert-type) and 16 cheese wedges (Brie-type) produced in Brazil. Samples showed a wide range in sodium (91.0-731.0 mg/100 g, cheeses wedges) and calcium (238.0-1100.0 mg/100g, whole cheeses) contents. The cheese groups presented no significant differences in relation to the majority of the analyzed parameters. Listeria monocytogenes was reported in 5% of the whole cheese samples. The other microbiological parameters were in accordance with the current legislation, RDC no 12/2001 of Anvisa. The comparative assessments between these two cheeses indicated that they are different. In addition, the wide range of results indicated a lack of processing standardization. The mean values of the physicochemical and textural parameters should be considered as recommended for these cheeses in Brazil.(AU)

No Brasil, não há uma regulamentação técnica específica sobre a identidade e qualidade de queijos maturados com mofo branco na superfície. Estes queijos são comercializados inteiros (tipo Camembert) e em cunhas (tipo Brie). O objetivo da pesquisa foi avaliar as propriedades físicas e químicas; parâmetros tecnológicos e marcadores microbiológicos de 20 queijos inteiros (tipo Camembert) e 16 cunhas de queijo (tipo Brie) produzidos no Brasil. Os teores de sódio e cálcio apresentaram elevada amplitude (8,0 e 4,6 vezes o valor mínimo, respectivamente). Os valores médios destes queijos não apresentaram diferenças significativas em relação à maioria dos parâmetros analisados. Listeria monocytogenes foi encontrada em 5% das amostras de queijo tipo Camembert. Os demais parâmetros microbiológicos estavam de acordo com a legislação vigente, RDC no 12/2001 da Anvisa. Esta avaliação comparativa entre estes dois queijos indica que são diferentes. Além disso, os valores com elevada amplitude correspondem a falta de padronização do processamento. Os valores médios poderiam ser considerados como recomendados para estes queijos no Brasil.(AU)

Atividade antimicrobiana da própolis verde frente a bactérias Gram positivas e Gram negativas resistentes a antimicrobianos comerciais / Antimicrobial activity of green propolis against positive Gram bacteria and Gram negative resistant commercial antimicrobials

Este estudo teve por objetivo avaliar a atividade antimicrobiana do extrato da própolis verde frente a cepas Gram positivas e Gram negativas resistentes a antimicrobianos comerciais. Foi realizado teste de suscetibilidade antimicrobiana das cepas de Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa e Listeria monocytogenes frente a oito antimicrobianos comerciais. Posteriormente foi verificado a atividade antimicrobiana da própolis verde com base na concentração inibitória mínima e concentração bactericida apenas para as cepas que se mostraram resistentes. Foi possível verificar, com exceção de E. coli, que as demais bactérias apresentaram resistência a mais de um antimicrobiano, e o extrato de própolis verde apresentou valores de CIM e CBM variando de 0,18 a 6,20 mg.mL-1 e 0,37 a 50,0 mg.mL-1,respectivamente. O extrato da própolis verde apresenta potencial atividade antimicrobiana em substituição ao uso de antimicrobianos sintéticos.(AU)

Atividade antimicrobiana da própolis verde frente a bactérias Gram positivas e Gram negativas resistentes a antimicrobianos comerciais / Antimicrobial activity of green propolis against positive Gram bacteria and Gram negative resistant commercial antimicrobials

Este estudo teve por objetivo avaliar a atividade antimicrobiana do extrato da própolis verde frente a cepas Gram positivas e Gram negativas resistentes a antimicrobianos comerciais. Foi realizado teste de suscetibilidade antimicrobiana das cepas de Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa e Listeria monocytogenes frente a oito antimicrobianos comerciais. Posteriormente foi verificado a atividade antimicrobiana da própolis verde com base na concentração inibitória mínima e concentração bactericida apenas para as cepas que se mostraram resistentes. Foi possível verificar, com exceção de E. coli, que as demais bactérias apresentaram resistência a mais de um antimicrobiano, e o extrato de própolis verde apresentou valores de CIM e CBM variando de 0,18 a 6,20 mg.mL-1 e 0,37 a 50,0 mg.mL-1,respectivamente. O extrato da própolis verde apresenta potencial atividade antimicrobiana em substituição ao uso de antimicrobianos sintéticos.

Qualidade físico-química e microbiológica de leite de cabra produzido no Distrito Federal / Physical chemical and microbiological quality of goat milk produced in Distrito Federal

O objetivo desse trabalho foi avaliar a qualidade físico-química e microbiológica do leite de cabra produzido no Distrito Federal, Brasil. As amostras foram coletadas diretamente dos tetos e em pool de cada três animais (n=40) e de leite de conjunto (n=10). Nas análises físico-químicas, os resultados médios foram: gordura (animais: 3,01% ± 0,679, conjunto: 4,45% ± 1,223); sólidos não gordurosos (animais: 9,24% ± 0,651, conjunto: 9,2% ± 0,615); densidade (animais: 1,033g/mL ± 0,002, conjunto: 1,032g/mL± 0,002); proteínas (animais: 3,5% ±0,551, conjunto: 3,67% ±0,778); lactose (animais: 5,0% ± 0,035, conjunto: 4,94% ± 0,015); acidez Dornic (animais: 18,47ºD ±0,552, conjunto: 18,5ºD ± 0,5); pH (animais e conjunto: 6,9 ±0,098); crioscopia (animais: -0,560ºH ±0,010, conjunto: -0,558ºH ± 0,005). Nenhuma amostra apresentou resíduos de antibióticos. As contagens médias microbiológicas foram: aeróbios mesófilos 1,2x103 UFC/mL (animais) e 7,6x103 UFC/mL (conjunto); coliformes totais 1,0 UFC/mL (animais) e 1,2x104 UFC/mL (conjunto); Escherichia coli 2,0 UFC/mL (conjunto); psicrotróficos 1,0x104 UFC/mL (conjunto); bactérias ácido-láticas 4,7x102 UFC/mL (animais) e 7,8x103 UFC/mL (conjunto); bolores e leveduras 1,0 UFC/mL (animais) e 4,9x103 UFC/mL (conjunto) e Staphylococcus aureus 2,1x102 UFC/mL (animais) e 2,8x102 UFC/mL (conjunto). Listeria monocytogenes e Salmonella spp. não foram detectadas nas amostras analisadas. Os resultados obtidos permitem concluir que o leite de cabra produzido no Distrito Federal apresenta qualidade satisfatória e esses dados podem contribuir para o estímulo da produção na região.

The goals of this study were to evaluate the physicochemical and microbiological quality of goat milk produced in Distrito Federal, Brazil. The samples were collected as pool (n=40) and whole milk samples (n=10). The physicochemical means observed were: Fat (animals: 3.01% ± 0.679, whole milk: 4.45% ± 1.223); nonfat solids (animals: 9.24% ± 0.651, whole milk: 9.2% ± 0.615); density (animals: 1.033g/mL ± 0.002, whole milk: 1.032g/mL ± 0.002); protein (animals: 3.5% ± 0.551, whole milk: 3.67% ± 0.778); lactose (animals: 5.0% ± 0.035, whole milk: 4.94% ± 0.015); acidity (animals: 18.47°D ± 0.552, whole milk: 18.5°D ± 0.5); pH (animals and whole milk: 6.9 ± 0.098); cryoscopic index (animals:-0,560°H ± 0.010, whole milk -0.558°H ± 0.005). There were no positive samples for antibiotic residues. The mean scores microbiological counts were: aerobic mesophilic 1.2x103 CFU/mL (animals), 7.6x103 CFU/mL (whole milk); total coliforms 1.0 CFU/mL (animals), 1.2x104 CFU/mL (whole milk); Escherichia coli 2.0 CFU/mL (animals); psychrotrophics 1.0x104 CFU/mL (whole milk); acid lactic bacteria 4.7x102 CFU/mL (animals), 7.8x103 CFU/mL (whole milk); yeast and moulds, 1.0 CFU/mL (animals), 4.9x103 CFU/mL (whole milk); Staphylococcus aureus 2.1x102 CFU/mL (animals), 2.8x102 CFU/mL (whole milk). Listeria monocytogenes and Salmonella spp. were not detected in any sample. The results indicate that the goat milk produced in Distrito Federal offers quality and microbiological safety and may be an incentive for the further development of dairy goat.

Qualidade físico-química e microbiológica de leite de cabra produzido no Distrito Federal / Physical chemical and microbiological quality of goat milk produced in Distrito Federal

O objetivo desse trabalho foi avaliar a qualidade físico-química e microbiológica do leite de cabra produzido no Distrito Federal, Brasil. As amostras foram coletadas diretamente dos tetos e em pool de cada três animais (n=40) e de leite de conjunto (n=10). Nas análises físico-químicas, os resultados médios foram: gordura (animais: 3,01% ± 0,679, conjunto: 4,45% ± 1,223); sólidos não gordurosos (animais: 9,24% ± 0,651, conjunto: 9,2% ± 0,615); densidade (animais: 1,033g/mL ± 0,002, conjunto: 1,032g/mL± 0,002); proteínas (animais: 3,5% ±0,551, conjunto: 3,67% ±0,778); lactose (animais: 5,0% ± 0,035, conjunto: 4,94% ± 0,015); acidez Dornic (animais: 18,47ºD ±0,552, conjunto: 18,5ºD ± 0,5); pH (animais e conjunto: 6,9 ±0,098); crioscopia (animais: -0,560ºH ±0,010, conjunto: -0,558ºH ± 0,005). Nenhuma amostra apresentou resíduos de antibióticos. As contagens médias microbiológicas foram: aeróbios mesófilos 1,2x103 UFC/mL (animais) e 7,6x103 UFC/mL (conjunto); coliformes totais 1,0 UFC/mL (animais) e 1,2x104 UFC/mL (conjunto); Escherichia coli 2,0 UFC/mL (conjunto); psicrotróficos 1,0x104 UFC/mL (conjunto); bactérias ácido-láticas 4,7x102 UFC/mL (animais) e 7,8x103 UFC/mL (conjunto); bolores e leveduras 1,0 UFC/mL (animais) e 4,9x103 UFC/mL (conjunto) e Staphylococcus aureus 2,1x102 UFC/mL (animais) e 2,8x102 UFC/mL (conjunto). Listeria monocytogenes e Salmonella spp. não foram detectadas nas amostras analisadas. Os resultados obtidos permitem concluir que o leite de cabra produzido no Distrito Federal apresenta qualidade satisfatória e esses dados podem contribuir para o estímulo da produção na região.(AU)

The goals of this study were to evaluate the physicochemical and microbiological quality of goat milk produced in Distrito Federal, Brazil. The samples were collected as pool (n=40) and whole milk samples (n=10). The physicochemical means observed were: Fat (animals: 3.01% ± 0.679, whole milk: 4.45% ± 1.223); nonfat solids (animals: 9.24% ± 0.651, whole milk: 9.2% ± 0.615); density (animals: 1.033g/mL ± 0.002, whole milk: 1.032g/mL ± 0.002); protein (animals: 3.5% ± 0.551, whole milk: 3.67% ± 0.778); lactose (animals: 5.0% ± 0.035, whole milk: 4.94% ± 0.015); acidity (animals: 18.47°D ± 0.552, whole milk: 18.5°D ± 0.5); pH (animals and whole milk: 6.9 ± 0.098); cryoscopic index (animals:-0,560°H ± 0.010, whole milk -0.558°H ± 0.005). There were no positive samples for antibiotic residues. The mean scores microbiological counts were: aerobic mesophilic 1.2x103 CFU/mL (animals), 7.6x103 CFU/mL (whole milk); total coliforms 1.0 CFU/mL (animals), 1.2x104 CFU/mL (whole milk); Escherichia coli 2.0 CFU/mL (animals); psychrotrophics 1.0x104 CFU/mL (whole milk); acid lactic bacteria 4.7x102 CFU/mL (animals), 7.8x103 CFU/mL (whole milk); yeast and moulds, 1.0 CFU/mL (animals), 4.9x103 CFU/mL (whole milk); Staphylococcus aureus 2.1x102 CFU/mL (animals), 2.8x102 CFU/mL (whole milk). Listeria monocytogenes and Salmonella spp. were not detected in any sample. The results indicate that the goat milk produced in Distrito Federal offers quality and microbiological safety and may be an incentive for the further development of dairy goat.(AU)

Listeria monocytogenes in expansion tank milk assessed in Alagoas state counties, Brazil

Foodborne diseases represent a global public health issue and dairy products are closely related to it, since the quality of the milk produced in several Brazilian regions is unsatisfactory due to the presence of microorganisms in it. Listeria monocytogenes is a serious problem linked to food safety and, when it comes to milk, it represents a potential danger because it can withstand food storage temperatures, among other characteristics. The significant participation of Alagoas State in this the dairy production sector and the importance of producing safe food led to the aim of the present study, namely: investigating Listeria monocytogenes in expansion tank milk in Alagoas State counties. Milk samples were collected from tanks in 30 milk-processing unit suppliers. Next, they were taken to the Meat and Milk Inspection Laboratory (LICAL - UFRPE). The ISO 11290-1: 1996 / Amd.1: 2004 method, with adaptations, was used in the analyses. Bluish colonies, with or without halo formation, were identified according to their morpho-tintorial and biochemical characteristics. Listeria monocytogenes were detected in 20% of the samples (6/30), and such rate represents a public health risk. Thus, monitoring this microorganism and mastitis in the herd, as well as pre- and post-dipping, equipment and storage tank sanitation, and milk collection through refrigerated trucks at the appropriate time is a relevant procedure to prevent contamination and to assure safe food provision to the population.

Listeria monocytogenes in expansion tank milk assessed in Alagoas state counties, Brazil

Foodborne diseases represent a global public health issue and dairy products are closely related to it, since the quality of the milk produced in several Brazilian regions is unsatisfactory due to the presence of microorganisms in it. Listeria monocytogenes is a serious problem linked to food safety and, when it comes to milk, it represents a potential danger because it can withstand food storage temperatures, among other characteristics. The significant participation of Alagoas State in this the dairy production sector and the importance of producing safe food led to the aim of the present study, namely: investigating Listeria monocytogenes in expansion tank milk in Alagoas State counties. Milk samples were collected from tanks in 30 milk-processing unit suppliers. Next, they were taken to the Meat and Milk Inspection Laboratory (LICAL - UFRPE). The ISO 11290-1: 1996 / Amd.1: 2004 method, with adaptations, was used in the analyses. Bluish colonies, with or without halo formation, were identified according to their morpho-tintorial and biochemical characteristics. Listeria monocytogenes were detected in 20% of the samples (6/30), and such rate represents a public health risk. Thus, monitoring this microorganism and mastitis in the herd, as well as pre- and post-dipping, equipment and storage tank sanitation, and milk collection through refrigerated trucks at the appropriate time is a relevant procedure to prevent contamination and to assure safe food provision to the population.(AU)

Chemical characterization and antimicrobial activity of Campomanesia aurea against three strains of Listeria monocytogenes

Abstract The essential oil (EO) composition of leaves of Campomanesia aurea was analyzed by GC-MS. The plant was collected in April (EOA) and October (EOO) in São Francisco de Assis/RS. The essential oils were obtained by hydrodistillation in a modified Clevenger apparatus. The yields were 4.44% in April, and 6.15%, in October. Thirty-one compounds were identified in EOA, accounting for 96.87% of the total, and twenty-eight compounds were identified in EOO, accounting for 99.46% of the total. For EOA, the major identified monoterpene was p-cymene (8.33%) and the major identified sesquiterpene was -cadinol (10.72%), while regarding EOO the major identified monoterpene was repeatedly Terpinolene (3.43%), whereas the major identified sesquiterpene was -cadinol (12.79%). The antibacterial activity of the essential oil was evaluated against the three Listeria monocytogenes from the American Type Culture Collection (strains ATCC 7644, 19114 and 13932). The essential oil showed a MIC of 10 mg/mL against the strains ATCC 7644 and 19114, with bacteriostatic effect of 20 mg/mL and a MIC of 20 mg/mL for ATCC 13932. Regarding the antibiofilm activity, o EOO showed the best results with an inhibition of 90% in the sessile growth with an applied concentration of 4.0 mg/mL.

Resumo O óleo essencial (EO) das folhas de Campomanesia aurea foi analisado por CG-EM. O A planta foi coletada em abril (OEA) e outubro (OEO) em São Francisco de Assis/RS. Os óleos essenciais foram obtidos por hidrodestilação em aparelho Clevenger modificado. Os rendimentos foram de 4,44% em abril e 6,15% em outubro. Trinta e um compostos foram identificados no EOA, representando 96,87% do total, e vinte e oito compostos foram identificados no EOO, representando 99,46% do total. Para EOA, o principal monoterpeno identificado foi o p-cimeno (8,33%) e o principal sesquiterpeno identificado foi o -candinol (10,72%), enquanto o EOO o maior monoterpeno identificado foi repetidamente Terpinolene (3,43%), enquanto o sesquiterpeno principal identificado foi -cadinol (12,79%). A atividade antibacteriana do óleo essencial foi avaliada contra as três cepas de Listeria monocytogenes obtidas a partir da American Type Culture Collection (isolados ATCC 7644, 19114 and 13932). O óleo essencial apresentou uma CIM de 10 mg/mL contra as cepas ATCC 7644. e 19114, com efeito bacteriostático de 20 mg/mL e MIC de 20 mg/mL para ATCC 13932. Quanto à atividade antibiofilme, o EOO apresentou os melhores resultados com uma inibição de 90% no crescimento séssil com uma concentração aplicada de 4,0 mg/mL.

Quality and safety of artisan cheese produced in the serrana region of Santa Catarina / Qualidade e inocuidade de queijos artesanais produzidos na região serrana em Santa Catarina

The serrano artisan cheese produced from raw milk of dairy cattle is a typical product of high-altitude farms in the states of Santa Catarina and Rio Grande do Sul. However, marketing of the cheeses occurs illegally because they lack the minimum maturation period required for cheese produced from raw milk. The production of artisan cheeses is required to follow strict hygiene standards. This study aimed to test the quality and safety of cheeses that were produced in 31 farms of the Serrana region in Santa Catarina after 14 and 28 days of maturation. Coliform count was measured at 35 °C, and presence of other microorganisms such as Escherichia coli, Staphylococcus, Listeria spp., and Salmonella spp. were also tested. Fat and protein percentages, acidity, salt content, and humidity were also evaluated. Data were subjected to statistical analyses using the SAS® software. After 14 and 28 days of maturation, 74.19% (23/31) and 64.52% (20/31) of samples, respectively, showed higher numbers of coliforms at 35 °C than those permissible by law. Higher than permissible numbers of E. coli were observed in 45.16% (14/31) and 48.39% (15/31) of the samples analyzed after 14 and 28 days of maturation, respectively. Coagulasepositive staphylococci values above 103 CFU/g were observed in 54.84% (17/31) and 51.61% (16/31) of cheese samples after 14 and 28 days of maturation, respectively. Contamination with Salmonella spp. was not detected. However, Listeria monocytogenes serovar 4b was isolated in 3.23% (1/31) and 6.45% (2/31) of samples after 14 and 28 days of maturation, respectively. The results of humidity tests classified the cheese samples into three categories: low, medium, and high humidity. Semi fat cheeses were predominant in both maturation periods, although the samples were classified in thin, semi fat, and fat cheeses. The main variations in the compositions of analyzed samples occurred for salt and acidity levels.[...](AU)

O queijo artesanal serrano, produzido a partir de leite cru de bovinos, é um produto típico dos campos de altitude dos estados de Santa Catarina e do Rio Grande do Sul. No entanto, a sua comercialização na grande maioria ocorre às margens da legislação, por ser fabricado com leite cru e não possuir um período mínimo de maturação. Tendo em vista que a produção de queijos artesanais necessita seguir normas rigorosas de higiene, o presente estudo objetivou desenvolver um diagnóstico da qualidade e inocuidade dos queijos com 14 e 28 dias de maturação produzido em 31 propriedades da Serra Catarinense. Foram realizadas contagens de coliformes a 35°C, Escherichia coli e Staphylococcus coagulase positiva; pesquisa de Salmonella sp. e Listeria monocytogenes. Os percentuais de gordura, acidez, sal, umidade e proteína também foram avaliados. Os dados foram submetidos as análises estatísticas realizadas no software SAS®. Após 14 e 28 dias de maturação, 74,19% (23/31) e 64,52% (20/31) das amostras de queijo analisadas, respectivamente, apresentaram limites acima do disposto para coliformes a 35 °C. Contagens de E. coli superiores ao aceitável foram observadas em 45,16% (14/31) e 48,39% (15/31) das amostras analisadas após 14 e 28 dias de maturação, respectivamente. Quanto à contagem de Staphylococcus coagulase positiva, 54,84% (17/31) e 51,61% (16/31) das amostras de queijos apresentaram após 14 e 28 dias de maturação valores acima de 103 UFC/g. Nenhuma das amostras avaliadas estava contaminada com Salmonella spp., porém Listeria monocytogenes sorovar 4b foi isolada em 3,23% (1/31) e em 6,45% (2/31) das amostras aos 14 e 28 dias de maturação, respectivamente. Em relação à umidade, os queijos foram classificados como de baixa, média e alta umidade. Em relação aos teores de gordura houve a predominância de queijos semigordos nos dois períodos de maturação, embora as amostras tenham sido enquadradas como queijos magros, semigordos e gordos. [...](AU)

Isolamento e caracterização da Listeria monocytogenes de alimentos

Listeria monocytogenes é uma bactéria importante para a saúde pública humana e veterinária. As cepas da linhagem I têm sido associadas a grandes surtos de listeriose, e os sorotipos da linhagem II são comuns em alimentos e estão difundidos no ambiente e na produção agrícola; as cepas da linhagem II também são comumente isoladas de casos de listeriose em animais e de casos clínicos humanos esporádicos. Além disso, os sorotipos 1/2a, 1/2b e 4b são responsáveis por 98% dos casos documentados de listeriose humana com alta correlação com o consumo de alimentos contaminados com a bactéria. No Brasil, a prevalência da listeriose não é bem conhecida e não há um sistema de monitoramento nacional, porém estudos indicam uma prevalência em torno de 20% em produtos de origem animal e em sistemas de produção. Objetivo: Este estudo teve o objetivo de caracterizar a bactéria L. monocytogenes isolada a partir de alimentos obtidos de estabelecimentos comerciais e feiras livres localizadas em três municípios do Estado de São Paulo, Brasil. Métodos: Para isso, 130 amostras de alimentos foram inoculadas em meios de cultivo bacteriano cromogênicos e seletivos para o gênero Listeria. Além disso, gênero e espécie de L. monocytogenes, bem como os sorotipos, foram confirmados por meio de PCR multiplex. Resultados: O presente estudo identificou uma prevalência de 40% de L. monocytogenes em alimentos em feiras e comércios do Estado de São Paulo (queijos, pescados, produtos de origem animal e vegetal e alimentos prontos para consumo). Além disso, das amostras genotipadas por PCR, foi possível identificar via eletroforese que 71 delas pertencem ao gênero Listeria sp., e dessas, 52 foram identificadas como Listeria monocytogenes. Também foi possível identificar 28 amostras pertencentes ao sorotipo 1/2b, linhagem I; 14 do sorotipo 1/2b, linhagem II; e 4 do sorotipo 4b, linhagem I. Os resultados do presente estudo sugerem que cepas patogênicas de L. monocytogenes estão circulando em alimentos frescos e/ou prontos para o consumo, o que representa risco de saúde pública. Conclusão: Estudos como o presente, utilizando a biologia molecular, auxiliam a diferenciar cepas avirulentas de virulentes de L. monocytogenes em alimentos e fornecem subsídios para o estabelecimento de uma vigilância efetiva sobre a prevalência e incidência da listeriose em alimentos no Estado de São Paulo, bem como no Brasil.

Listeria monocytogenes is an important bacterium for human and veterinary public health. The lineage I strains have been linked to major outbreaks of listeriosis, and serotypes of lineage II are common in food and are widespread in the environment and in agricultural production; lineage II strains are also commonly isolated from cases of listeriosis in animals and sporadic human clinical cases. Moreover, serotypes 1/2a, 1/2b and 4b are responsible for 98% of cases of human listeriosis with a high correlation with the consumption of food contaminated with the bacteria. In Brazil, the prevalence of listeriosis is not well known and there is no national monitoring system, but studies indicate a prevalence around 20% in products of animal origin and production systems. This study aimed to isolate and characterize the bacterium L. monocytogenes in foods obtained from commercia establishments and open markets located in three municipalities in the state of São Paulo, Brazil. For this, 130 samples were isolated from selective and chromogenic Listeria culture media. In addition, L. monocytogenes genus and species, as well as serotypes, were confirmed by multiplex PCR. The present study identified a prevalence of 40% of L. monocytogenes in food at fairs and stores in the state of São Paulo (cheeses, fish, animal and vegetable products and ready-to-eat foods). From the PCR genotyped samples, it was possible to identify through electrophoresis that 71 of them belong to the genus Listeria sp., 52 of which belonged to the species Listeria monocytogenes. It was also possible to identify 28 samples belonging to serotype1/2b, lineage I; 14 of serotype 1/2a, lineage II; and 4 of serotype 4b, lineage I. The results of the present study suggest that pathogenic strains of L. monocytogenes are circulating in fresh and/or ready-to-eat foods, which represents a public health risk. Studies like the present, using molecular biology, help to differentiate avirulent and virulent strains of L. monocytogenes in foods and provide subsidies for the establishment of an effective surveillance on the prevalence and incidence of listeriosis in foods in the State of São Paulo, as well as in Brazil.

Qualidade microbiológica de queijo mussarela em peça e fatiado / Microbiological quality of sliced and block mozzarella cheese

O objetivo deste trabalho foi verificar o padrão microbiológico de queijo mussarela comercializado em estabelecimentos varejistas de Pelotas, Rio Grande do Sul. Foram analisadas 40 amostras de queijo mussarela, compreendendo 20 de queijo em peça e 20 de queijo fatiado, as quais foram submetidas a contagem de coliformes termotolerantes e de estafilococos coagulase positiva, e a pesquisa de Salmonella spp. e de Listeria monocytogenes. Observou-se que 12,5% das amostras de queijo fatiado e 5% de queijo em peça estavam em desacordo com os padrões estabelecidos pela legislação brasileira. Estes resultados indicam a necessidade de maior monitoramento desses produtos e maior cuidado higiênico-sanitário durante o processamento por parte das indústrias.(AU)

The aim of this study was to verify the microbiological quality of mozzarella cheese sold in retail markets of Pelotas, Rio Grande do Sul, Brazil. Forty samples of mozzarella cheese were analyzed, comprising 20 samples of block cheese and 20 of sliced cheese. The cheese samples were analyzed for thermotolerant coliform counts and coagulase positive staphylococci counts, and presence of Salmonella spp and Listeria monocytogenes. The percentage of 12,5% and 5% of the sliced and block cheese samples analyzed, respectively, exceeded the microbiological standards accepted by Brazilian legislation. These results indicate the need for a better product monitoring and more concern with hygiene and sanitary practices during industrial process.(AU)

Enumeration, identification and safety proprieties of lactic acid bacteria isolated from pork sausage / Enumeração, identificação e propriedades de segurança de bactérias ácido-lácticas isoladas de linguiça suína

Lactic Acid Bacteria (LAB) are indigenous microorganisms occurring in pork sausages. The utilization of selected autochthonous LAB may improve the safety of meat products. This study aims to enumerate and identify LAB in pork sausage and to characterize their safety properties, such as antimicrobial susceptibility and antibacterial activity. A total of 189 sealed packages of pork sausages were collected in seven municipalities (27 samples in each city) of Minas Gerais, Brazil. Microbiological analyses were performed to enumerate LAB. Two pre-selection criteria were applied to 567 isolates of LAB: catalase activity and tolerance to pH 2. A total of 32 strains of UFLA SAU were selected, characterized phenotypically and identified through 16S rDNA region sequencing. The susceptibility to antimicrobial and antibacterial activities of isolates was evaluated. The LAB count ranged from 3.079 to 8.987 log10 CFU/g. Lactobacillus plantarum and Lactobacillus paracasei were identified in the samples. UFLA SAU 11, 20, 34, 86, 131 and 258 showed a profile of susceptibility to four antimicrobials: erythromycin, ampicillin, chloramphenicol and gentamycin. In the antibacterial activity test, with exception of UFLA SAU 1, all other strains showed efficiency in inhibiting Escherichia coli, Salmonella Typhiand Listeria monocytogenes. In the statistical analysis there was interaction among strains of Lactobacillus against the pathogens tested. L. monocytogenes (P=0.05) was more sensitive to Lactobacillus strains and the highest inhibitory activity against this pathogen was achieved by strains UFLA SAU 135, 226, 238 and 258. Thus, UFLA SAU 11, 20, 34, 86, 131, 135, 226, 238 and 258 possess safety characteristics for application in meat products(AU)

Bactérias ácido-lácticas (BAL) são microrganismos indígenas em linguiças. A utilização de selecionadas BAL autóctones pode melhorar a segurança dos produtos cárneos. Este estudo objetivou enumerar e identificar BAL em linguiças suínas e caracterizar suas propriedades de segurança, como a susceptibilidade antimicrobiana e a atividade antibacteriana. Um total de 189 embalagens fechadas de linguiça suína foi adquirido em sete municípios (27 amostras em cada cidade) de Minas Gerais, Brasil. Análises microbiológicas para a enumeração de BAL foram realizadas. Dois critérios de pré-seleção foram aplicados para os 567 isolados de BAL: atividade catalase e tolerância ao pH 2. Um total de 32 estirpes UFLA SAU foi selecionado, caracterizado fenotipicamente e identificado por meio do sequenciamento da região 16S rDNA. A susceptibilidade a antimicrobianos e a atividade antimicrobiana dos isolados foram avaliadas. Nas linguiças, a contagem de BAL variou de 3,079 a 8,987log10 UFC/g. Lactobacillus plantarum e Lactobacillus paracasei foram identificados nas amostras. UFLA SAU 11, 20, 34, 86, 131 e 258 apresentaram um perfil de suscetibilidade a quatro antimicrobianos: eritromicina, ampicilina, cloranfenicol e gentamicina. No teste de atividade antibacteriana, com exceção da UFLA SAU 1, todas as outras estirpes mostraram eficiência em inibir Escherichia coli, Salmonella Typhi e Listeria monocytogenes. Na análise estatística, houve interação entre estirpes de Lactobacillus contra os patógenos testados. L. monocytogenes (P=0,05) foi mais sensível às estirpes de Lactobacillus, e a maior atividade inibitória contra este patógeno foi apresentada por estirpes UFLA SAU 135, 226, 238 e 258. Assim, estirpes UFLA SAU 11, 20, 34, 86, 131, 135, 226, 238 e 258 possuem características de segurança para aplicação em produtos cárneos(AU)

Optimization of growth and bacteriocin production by Lactobacillus sakei subsp. sakei2a

Lactobacillus sakei subsp. sakei 2a is a bacteriocinogenic lactic acid bacterium isolated from Brazilian pork sausage, capable of inhibiting the growth of microbial pathogens, mainly Listeria monocytogenes. In order to optimize bacteriocin production for industrial applications, this study evaluated the effect of supplementation of MRS broth with glucose, Tween 20, Tween 80, sodium citrate, potassium chloride and cysteine, and effect of the initial pH and temperature of incubation of the medium on production of bacteriocins by L. sakei 2a. Adding glucose and Tween 20 to the medium, an initial pH of 5.0 or 5.5, and incubation temperatures of 25 °C or 30 °C resulted to the highest bacteriocin yields. Thus, a 2⁴ factorial design with the four variables was performed, and statistical analysis showed that it was an adequate model (R² = 0.8296). In the studied range, the four parameters significantly influenced bacteriocin production, with the maximum yield produced at an initial pH between 5.5 and 7.0, a temperature between 25 and 30 °C and supplementation of the MRS broth with glucose from 3.25 to 6.0 g L⁻¹ and Tween 20 from 0.575 to 1.15% (v/v). Response Surface Methodology analysis indicated that the highest bacteriocin production (12800 AU mL⁻¹) occurred in the MRS broth supplemented with 5.5 g L⁻¹ glucose and 1.05% Tween 20 at an initial pH of 6.28 and an incubation temperature of 25 °C. The amount of bacteriocin produced in commercial MRS broths under the same conditions was only 5600AU mL⁻¹..(AU)

Competição e Imunidade Cruzada entre Espécies de Listeria spp. e Tratamento com Extrato de Hibiscus sabdariffa em Casos de Listeriose Induzida em Camundongos

TALLAMINI, S. C. Competição e Imunidade Cruzada entre Espécies de Listeria spp. e Tratamento com Extrato de Hibiscus sabdariffa em Casos de Listeriose Induzida em Camundongos, 2019. Tese (Doutorado em Ciência Animal) Universidade do Estado de Santa Catarina. Programa de Pós-Graduação em Ciência Animal, Lages, 2019. A listeriose é uma doença preocupante, não só pelo quadro clínico, mas também pelo custo médico anual estimado, cerca de mais de 2,8 bilhões de dólares (USDA, 2013), atingindo aproximadamente 1.600 pessoas por ano, vindas 260 a óbito (CDC, 2018). Em posse destes dados, o presente estudo teve como objetivo avaliar a competição e imunidade cruzada das espécies de Listeria spp. e a atuação de extrato de hibisco como forma de tratamento de listeriose em casos de septicemia induzida em camundongos. A imunidade cruzada foi verificada com o uso de 20 camundongos heterogêneos, fêmeas, da linhagem Swiss com 30 dias de idade, frente à Listeria spp., já a competição entre Listeria monocytogenes e Listeria innocua, contaram com o uso de cinco camundongos. Ainda foram utilizados mais 30 camundongos para avaliação da atuação de extrato cetônico de Hibiscus sabdariffa como tratamento em casos de listeriose. Foi possível verificar por meio dos testes in vitro e in vivo que existe competição entre Listeria monocytogenes e Listeria innocua, com a sobrevivência de 80% (4/5) e melhora clínica dos animais. Houve imunidade cruzada in vitro entre as espécies testadas do gênero Listeria spp. O teste in vivo mostrou imunidade protetora entre os sorotipos diferentes testados de Listeria monocytogenes, alguns com uma imunidade mais efetiva (1/2a e 1/2b) que outros sorotipos testados (1/2c e 4b), uma vez que os últimos apresentaram alguma sintomatologia clínica e os primeiros não. O extrato cetônico de hibisco teve atividade apenas in vitro, pois in vivo se mostrou ineficaz no controle da listeriose e redução da carga microbiana.

TALLAMINI, S. C. Competition and Cross-Immunity between Species of Listeria spp. and Treatment with Hibiscus sabdariffa Extract in Cases of Listeriosis Induced in Mice. 2019. Thesis (Ph.D. in Animal Science) University of Santa Catarina. Postgraduate Program in Animal Science, Lages, 2019. Listeriosis is a troubling disease, not only due to the clinical signs, but also to the estimated annual medical cost of approximately US$ 2.8 billion (USDA, 2013), reaching approximately 1.600 people per year, with a death toll of 260 (CDC, 2018). The objective of this study was to evaluate the competition and cross-immunity of Listeria spp. and the performance of hibiscus extract as a form of treatment of listeriosis in cases of induced septicemia in mice. Cross-immunity was verified with the use of 20 Swiss line heterogeneous female mice of the 30 days old against Listeria spp.. The competition between Listeria monocytogenes and Listeria innocua counted on the use of five mice. A further 30 mice were also used to evaluate the performance of ketone extract of Hibiscus sabdariffa as treatment in cases of listeriosis. It was possible to verify by in vitro and in vivo tests that there is competition between Listeria monocytogenes and Listeria innocua with survival of 80% (4/5) and clinical improvement of the animals. There was in vitro cross-immunity among the tested species of the genus Listeria. In vivo test showed protective immunity between the different tested serotypes of Listeria monocytogenes, some with more effective immunity (1/2a and 1/2b) than other serotypes tested (1/2c and 4b), since the latter demonstrated some clinical symptoms and the first do not. The ketone extract of hibiscus had activity only in vitro, once in vivo was ineffective in the control of listeriosis and not reduction of the microbial load.

título "Listeria monocytogenes IN A BRAZILIAN PORK PRODUCTION CHAIN AND ADHESION FEATURES OF ISOLATES

L. monocytogenes está presente em baixas frequências em animais a serem abatidos, mas pode persistir por longos períodos no ambiente de processamento de alimentos. No presente estudo, a contaminação por L. monocytogenes foi avaliada em diferentes etapas de uma cadeia produtiva de carne suína no Estado de Minas Gerais. Dez lotes de suínos foram amostrados em diferentes etapas da cadeia de produção, abrangendo amostras de galpão de terminação, abate (após sangria, após chamuscamento, após evisceração e após lavagem final), processamento (facas, mesas de desossa e mão de manipuladores) e produtos finais (costelas, paleta, pernil e linguiça) totalizando 670 amostras. Todas as amostras foram submetidas à detecção de L. monocytogenes, e os isolados obtidos foram caracterizados por análises bioquímicas, sorogrupos, genes de virulência, PFGE, susceptibilidade à antibióticos e habilidade de adesão. Os resultados revelaram a baixa ocorrência de Listeria spp. na cadeia de produção de suínos avaliada. No entanto, quatro amostras de linguiça testadas (40%) foram positivas para Listeria spp., Sendo L. monocytogenes identificada em duas (20%). Dez isolados foram identificados como L. monocytogenes (oito de serogrounp 1/2a ou 3a e dois de sorogrupo 4b, 4d ou 4e), todos positivos para genes relacionados a virulência hlyA, iap, plcA, actA, inlA, inlB, inlC e inlJ e suscetíveis aos antibióticos testados. Uma amostra de linguiça foi contaminada por ambos os sorogrupos 1/2a ou 3a e 4b, 4d ou 4e. Os isolados do sorogrupo 1/2a ou 3a obtidos nas visitas 5 e 6 apresentaram perfis genéticos distintos por PFGE, sugerindo que a contaminação pode vir de fonte diferente. O potencial de adesão exibido por Listeria spp. isolados (n = 18) variaram de fraco (sorogrupo 4b, 4d ou 4e) a moderado (L. innocua e L. monocytogenes sorogrupo 1/2a ou 3a). Apesar da baixa ocorrência de L. monocytogenes, foram detectados sorogrupos patogênicos em linguiça, exigindo medidas de controle por parte da indústria. Uma vez que L. monocytogenes é um patógeno capaz de aderir a variadas superfícies e formar biofilmes, o que pode explicar sua persistência em ambientes de processamento de alimentos este trabalho também avaliou a capacidade de adesão de L. monocytogenes e a interferência de fatores estressantes na capacidade de adesão de cepas selecionadas (cepas de L. monocytogenes pertencentes às linhagens I e II, também provenientes do ambiente de processamento de carnes, caraterizadas em trabalhos paralelos por forte potencial adesão (1 isolado) e capacidade de persistência no ambiente de processamento por 3 anos (2 isolados)), estes isolados foram incorporados a este trabalho e testados junto a 3 isolados provenientes de linguiça. Estes isolados foram submetidos a testes de potencial de adesão e concentração inibitória mínima contra quatro desinfetantes. A capacidade de adesão dos isolados selecionados também foi testada considerando: diluições de desinfetantes, concentrações de NaCl e sais de cura, tempo de incubação e temperatura. Cada isolado foi classificado de acordo com sua capacidade de adesão como fraco, moderado ou forte. Os quatro desinfetantes testados foram eficazes na eliminação de L. monocytogenes. Os isolados selecionados para testes de estresse apresentaram maior capacidade de adesão a 37 °C/ 72 horas, e os meios com 5% de NaCl e amônia quaternária (1:1,024) foram ineficazes na inibição da adesão ao poliestireno. Os dados coletados permitiram a identificação do potencial de adesão de L. monocytogenes, da eficácia dos sanitizantes testados no controle da contaminação por este patógeno e a capacidade de adesão na presença de amônio quaternário (1:1024) e sais de alguns isolados. Considerando sua habilidade de adesão em condições estressantes nos testes descritos acima e o fato de terem o genoma sequênciado por (cg) MLST em estudos paralelos quatro isolados de L. monocytogenes pertencentes às linhagens I e II provenientes do ambiente de processamento de carne foram ainda investigados para capacidade de formação de biofilme em aço inoxidável na presença de sal de cura 7.5% (linhagem I) e amônio quaternário (1:1,024) (linhagem II). Adicionalmente foi realizada uma análise preditiva da expressão dos genes relacionados à formação de biofilme e adaptação a condições estressantes por ensaios qPCR (previamente detectados por análise in silico do genoma dos isolados selecionados, caracterizado por cg MLST em trabalhos paralelos). A formação de biofilme de L. monocytogenes em aço inoxidável foi testada em dois sistemas diferentes (microplaca e cupons) a 37 °C por 72 horas. Os ensaios foram realizados como triplicatas biológicas e incluíram os controles apropriados para verificar diferenças significativas pela análise de variância (p < 0,05). Foi possível observar que as linhagens testadas (I e II) foram capazes de formar biofilme em aço inoxidável. Embora os tratamentos utilizados em cada linhagem tenham sido significativos na redução do biofilme formado (p < 0,05), os isolados foram capazes de formar biofilme na condição de estresse avaliada. As suspensões de biofilme de L. monocytogenes a partir de testes em cupons de aço inoxidável deram resultados positivos em ensaios de qPCR para onze genes alvo testados. De maneira geral este trabalho demonstrou que o suíno não pareceu ser um portador representativo deste patógeno. Mesmo que não tenha sido possível a obtenção de amostras positivas para L.monocytogenes oriundas do ambiente de abate e processamento amostrado, a obtenção de produtos finais (linguiça) contaminados com sorogrupos patogênicos evidencia o risco de saúde ao consumidor final e a capacidade deste patógeno em persistir no ambiente de processamento de carne suína, uma vez que sua presença foi detectada no produto final. Os isolados de L. mococytogenes obtidos pertencem às linhagens filogêneticas reconhecidas por serem altamente adptadas ao ambiente de processamento de alimentos, e apresentaram habilidade em aderir às superfícies testadas sob condições de estresse. A reconhecida capacidade deste patógeno em formar biofilme em superfícies comumente encontradas no ambiente de processamento de carnes também pôde ser demonstrada, os isolados testados foram capazes de formar biofilme em aço inoxidável na presença de agentes usualmente utilizados para preparações de embutidos e também nos procedimentos de limpeza e desinfecção da planta de processamento. A analise in silico do cg MLST destes isolados permitiu a identificação de regiões genômicas relacionadas à formação de biofilme e adaptação a condições ambientais estrassantes, em isolados das linhagens I e II, sendo ainda possível detectar a ação desta maquinaria genética na formação de biofilme em aço inoxidável sob ação de agentes estressantes, pela predição da expressão de onze gene alvo realizada por qPCR.

L. monocytogenes is present at low frequencies in animals to be slaughtered but may persist for long periods in the food processing environment. In the present study, L. monocytogenes contamination was evaluated at different stages of a pork meat production chain in the state of Minas Gerais. Ten lots of pigs were sampled at different stages of the production chain, covering samples from termination sheds, slaughtering (after bleeding, after singeing, after evisceration and after final washing), processing (knives, deboning tables and hand handlers) and end products (ribs, shoulder, ham and sausage) totaling 670 samples. All samples were submitted to L. monocytogenes detection, and the isolates obtained were characterized by biochemical analyzes, serogroups, virulence genes, PFGE, antibiotic susceptibility and adhesion ability. The results revealed the low occurrence of Listeria spp. in the pork production chain evaluated. However, four sausage samples tested (40%) were positive for Listeria spp., with L. monocytogenes identified in two (20%). Ten isolates were identified as L. monocytogenes (eight from serogrounp 1/2a or 3a and two from serogrounp 4b, 4d or 4e), all positive for virulence-related genes hlyA, iap, plcA, actA, inlA, inlB, inlC and inlJ and susceptible to the tested antibiotics. A sausage sample was contaminated by both serogroups 1/2a or 3a and 4b, 4d or 4e. Isolates from serogroup 1/2a or 3a obtained at visits 5 and 6 showed distinct genetic profiles by PFGE, suggesting that contamination may come from a different source. The adhesion potential exhibited by Listeria spp. isolates (n = 18) ranged from weak (serogroup 4b, 4d or 4e) to moderate (L. innocua and L. monocytogenes serogroup 1/2a or 3a). Despite the low occurrence of L. monocytogenes, pathogenic serogroups were detected in sausage, requiring industry control measures. Since L. monocytogenes is a pathogen capable of adhering to various surfaces and forming biofilms, which may explain its persistence in food processing environments, this work also evaluated L. monocytogenes adhesion capacity and the interference of stress factors on adhesion capacity of selected strains (L. monocytogenes strains belonging to lineages I and II, also coming from the meat processing environment, characterized in parallel work by strong adhesion potential (one isolate) and persistence capacity in the processing environment for 3 years (two isolates)), were incorporated into this work and tested with 3 selected isolates from sausage samples. These isolates were submitted to adhesion potential and minimum inhibitory concentration tests against four disinfectants. The adhesion capacity of the selected isolates was also tested considering: disinfectant dilutions, NaCl concentrations and curing salts, incubation time and temperature. Each isolate was classified according to its adherence capacity as weak, moderate or strong. The four disinfectants tested were effective in eliminating L. monocytogenes. The isolates selected for stress tests showed greater adhesion capacity at 37 °C/72 hours, and the BHI broth with 5% NaCl and quaternary ammonia (1: 1,024) were ineffective in inhibiting polystyrene adhesion. The collected data allowed the identification of the adhesion potential of L. monocytogenes, the efficacy of the sanitizers tested in the control of contamination by this pathogen and the adhesion capacity in the presence of quaternary ammonium (1: 1,024) and salts of some isolates. Considering their ability to adhere to stressful conditions in the tests described above and the fact that they have the genome sequenced by (cg) MLST in parallel studies four isolates of L. monocytogenes belonging to strains I and II from the meat processing environment were further investigated for stainless steel biofilm formation capacity in the presence of curing salt 7.5% (lineage I) and quaternary ammonium (1: 1,024) (lineage II). Additionally, a predictive analysis of gene expression related to biofilm formation and adaptation to stressful conditions was performed by qPCR assays (previously detected by in silico genome analysis of selected isolates, characterized by (cg) MLST in parallel work). L. monocytogenes biofilm formation in stainless steel was tested in two different systems (microplate and coupons) at 37 °C for 72 hours. Assays were performed as biological triplicates and included appropriate controls to verify significant differences by analysis of variance (p < 0.05). It was observed that the tested strains (I and II) were able to form stainless steel biofilm. Although the treatments used in each strain were significant in reducing the biofilm formation (p < 0.05), the isolates were able to form biofilm under the stress condition evaluated. L. monocytogenes biofilm suspensions from stainless steel coupon testing gave positive results in qPCR assays for eleven target genes tested. In general this work showed that the pig did not appear to be a representative carrier of this pathogen. Even though it was not possible to obtain positive samples for L. monocytogenes from the slaughtered and processing environment, obtaining final products (sausage) contaminated with pathogenic serogroups shows the health risk to the final consumer and the ability of this pathogen to persist in the pork meat processing environment once its presence has been detected in the final product. The isolates of L. mococytogenes obtained belong to phylogenetic lineages recognized for being highly adapted to the food processing environment, and showed ability to adhere to the tested surfaces under stress conditions. The recognized ability of this pathogen to form biofilm on surfaces commonly found in the meat processing environment could also be demonstrated, the tested isolates were able to form stainless steel biofilm in the presence of agents usually used for sausage preparations and also in the processing plant cleaning / disinfection procedures. The in silico analysis of cg MLST allowed the identification of genomic regions related to biofilm formation and adaptation to stressful environmental conditions in lineages I and II isolates. It is also possible to detect the action of this genetic machinery in the stainless steel biofilm formation under action of stress factors, by predicting the expression of eleven target genes performed by qPCR.

Listeria spp. em carpaccio de carne bovina e perfil de resistência aos agentes antimicrobianos / Listeria ssp. in beef carpaccio and resistance profile to antimicrobial agents

O presente estudo foi conduzido com o objetivo de veri-ficar a ocorrência de Listeria spp. em 50 amostras de carpaccio de carne bovina comercializados em bares e restaurantes do município de Niterói, Rio de Janeiro, e avaliar o perfil de resistência dos isola-dos aos agentes antimicrobianos utilizados no tratamento de infec-ções. Constataram-se que 20% das amostras obtidas de restaurantes e 35% de bares estavam contaminadas com Listeria spp. Dentre as espécies, L. welshimeri foi isolada com maior frequência (81,82%), seguida de L. grayi, (13,66%) e L. monocytogenes(4,55%), sendo o ágar Oxford o meio de plaqueamento mais eficiente para isolamento. Foi verificada a ocorrência de resistência dos isolados frente a todos os agentes antimicrobianos testados, exceto à tetraciclina, diante da qual 95,5% dos isolados apresentaram sensibilidade. A multirresistência foi verificada em 68,75% das estirpes analisadas. Desta forma, concluiu-se que o consumo de carpaccio de carne bovina representa risco potencial, constituindo um grave problema de saúde coletiva, especialmente devido à confrmação de estirpes patogênicas e resistentes aos principais agentes antimicrobianos utilizados no tratamento de listeriose.(AU)

The present study was conducted to verify the occurrence of Listeria spp. in 50 samples of beef carpaccio sold in bars and restaurants; and to evaluate the resistance profile to antimicrobial agents used in the routine treatment of infections. It was found that 20% of samples from restaurants and 35% from bars were contaminated with Listeria spp. Among the species, L. welshimeri was most frequently isolated (81.82%), followed by L. grayi, (13.66%) and L. monocytogenes(4.55%). The Oxford agar plating medium was the most efficient. The resistant behavior occurred to all antimicrobial agents tested, except tetracycline, to which 95.5% of the strains were sensitive. Multidrug resistance was observed in 68.75% of the strains analyzed. Thus, it is concluded that the consumption of beef carpaccio represents a potential risk, and a serious public health problem, especially due to the confirmation of pathogenic strains that are resistant to major antimicrobial agents used in the treatment of listeriosis.(AU)

Listeria spp. em carpaccio de carne bovina e perfil de resistência aos agentes antimicrobianos / Listeria ssp. in beef carpaccio and resistance profile to antimicrobial agents

O presente estudo foi conduzido com o objetivo de veri-ficar a ocorrência de Listeria spp. em 50 amostras de carpaccio de carne bovina comercializados em bares e restaurantes do município de Niterói, Rio de Janeiro, e avaliar o perfil de resistência dos isola-dos aos agentes antimicrobianos utilizados no tratamento de infec-ções. Constataram-se que 20% das amostras obtidas de restaurantes e 35% de bares estavam contaminadas com Listeria spp. Dentre as espécies, L. welshimeri foi isolada com maior frequência (81,82%), seguida de L. grayi, (13,66%) e L. monocytogenes(4,55%), sendo o ágar Oxford o meio de plaqueamento mais eficiente para isolamento. Foi verificada a ocorrência de resistência dos isolados frente a todos os agentes antimicrobianos testados, exceto à tetraciclina, diante da qual 95,5% dos isolados apresentaram sensibilidade. A multirresistência foi verificada em 68,75% das estirpes analisadas. Desta forma, concluiu-se que o consumo de carpaccio de carne bovina representa risco potencial, constituindo um grave problema de saúde coletiva, especialmente devido à confrmação de estirpes patogênicas e resistentes aos principais agentes antimicrobianos utilizados no tratamento de listeriose.(AU)

The present study was conducted to verify the occurrence of Listeria spp. in 50 samples of beef carpaccio sold in bars and restaurants; and to evaluate the resistance profile to antimicrobial agents used in the routine treatment of infections. It was found that 20% of samples from restaurants and 35% from bars were contaminated with Listeria spp. Among the species, L. welshimeri was most frequently isolated (81.82%), followed by L. grayi, (13.66%) and L. monocytogenes(4.55%). The Oxford agar plating medium was the most efficient. The resistant behavior occurred to all antimicrobial agents tested, except tetracycline, to which 95.5% of the strains were sensitive. Multidrug resistance was observed in 68.75% of the strains analyzed. Thus, it is concluded that the consumption of beef carpaccio represents a potential risk, and a serious public health problem, especially due to the confirmation of pathogenic strains that are resistant to major antimicrobial agents used in the treatment of listeriosis.(AU)

Propriedades probióticas in vitro de Lactobacillus spp. isolados de queijos minas artesanais da Serra da Canastra - MG / In vitro probiotic properties of Lactobacillus spp. isolated from Minas artisanal cheese from Serra da Canastra - MG

O objetivo deste estudo foi determinar o potencial probiótico in vitro de Lactobacillus spp. isolados de queijos minas artesanais da Serra da Canastra, considerando-se o antagonismo entre amostras isoladas frente a microrganismos indicadores, a susceptibilidade a antimicrobianos, a sensibilidade ao ácido gástrico e a sensibilidade a sais biliares. Todas as bactérias ácido-lácticas testadas apresentaram resistência ao ácido gástrico (pH 2,0) e aos sais biliares (0,3%), bem como atividade antagonista contra Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes, Salmonella enterica var. Typhimurium, Enterococcus faecalis e bactérias ácido-lácticas isoladas dos próprios queijos - Lactobacillus plantarum (D27) e Lactobacillus rhamnosus (B25). Todas as amostras foram sensíveis à eritromicina e tetraciclina e resistentes à ciprofloxacina, gentamicina, oxacilina, estreptomicina e vancomicina. L. plantarum (B17) apresentou melhor potencial probiótico, pois obteve resultados satisfatórios em todas as propriedades avaliadas. Mais estudos são necessários para verificar a presença e a capacidade de transmissão de genes de resistência antimicrobiana a outros microrganismos e para avaliar o potencial dos microrganismos in vivo. As bactérias selecionadas poderão ser utilizadas na elaboração de queijos em que sejam mantidos o sabor e a tradição do queijo minas artesanal do estado de Minas Gerais.(AU)

The aim of this study was to determine some in vitro probiotic features of Lactobacillus spp. isolated from Minas artisanal cheese from Serra da Canastra in order to select some bacteria for future production of safer cheeses keeping their natural flavor and tradition. The evaluated properties were antagonism against indicator microorganisms, antimicrobial susceptibility and also sensitivity to gastric acid and to bile salts. All lactic acid bacteria tested were resistant to gastric acid (pH 2.0) and bile salts (0.3%). Antagonistic activities were detected against Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes, Salmonella entericavar. Typhimurium, Enterococcus faecalis and other lactic bacteria isolated from the same cheese - Lactobacillus plantarum (D27) and Lactobacillus rhamnosus (B25). All samples were sensitive to the antimicrobials erythromycin, tetracycline and resistant to ciprofloxacin, gentamycin, oxacillin, streptomycin and vancomycin. L.plantarum (B17) presented the best probiotic potential. Further studies are needed to verify the presence and the capacity of transmission of antimicrobial resistance genes to other microorganisms and evaluate the in vivo probiotic potential of the selected microorganisms.(AU)