Presença de Mollicutes e Mycoplasma bovis em swabs nasais de bezerros e na secreção mastítica de vacas / Presence of Mollicutes and Mycoplasma bovis in nasal swabs from calves and in mastitic secretion from cows / Presencia de Mollicutes e Mycoplasma bovis en hisopos nasalses de terneros y secrecion de mastitis de vacas

Mycoplasma bovis faz parte da microbiota do trato respiratório bovino, mas é considerado um patógeno oportunista de extrema importância nas doenças respiratórias de bezerros. Causa ao rebanho diversas doenças como mastite, poliartrite, pneumonia e endometrite. Esse patógeno é altamente contagioso e os animais com mastite são potenciais disseminadores da infecção para o rebanho, pois liberam de 106a 108UFC por mL de leite. Da mesma forma, animais com pneumonia eliminam, por meio de secreções respiratórias, altas cargas microbianas do agente. O presente estudo teve como objetivo realizar a detecção molecular de Mycoplasma bovis em 185 amostras de secreção mastítica de vacas, bem como em 50 amostras de swab nasal de bezerros saudáveis com ou sem sinais de pneumonia e nascidos de vacas com mastite, pertencentes a quatro fazendas leiteiras do estado do Paraná, onde foram diagnosticados casos de mastite. A extração do DNA de ambas as secreções foi realizada pelo método de termólise. Para a reação em cadeia da polimerase (PCR), primers genéricos foram empregados para amplificar o DNA dos Mollicutes e as amostras positivas foram submetidas à PCR com primers específicos para M. bovis. A positividade para M. bovis foi de 3,78% nas amostras de secreção mastítica, independente da fazenda, e de 20% nos swabs nasais.

Mycoplasma bovis is part of the bovine respiratory tract microbiota but is considered an opportunistic pathogen of extreme importance in respiratory diseases of calves. It causes to the herd several diseases such as mastitis, polyarthritis, pneumonia and endometritis. This pathogen is highly contagious and animals with mastitis are potential disseminators of infection to the herd since they release from 106 to 108CFU per mL milk. Similarly, animals with pneumonia eliminate, through respiratory secretions, high microbial loads of the agent. The present study aimed to perform molecular detection of Mycoplasma bovis in 185 milk samples from cows with clinical mastitis, as well as in 50 nasal swab samples from healthy calves with or without signs of pneumonia and born from cows with mastitis, all belonging to four dairy farms in Paraná State, where cases of mastitis had been diagnosed. DNA extraction from both secretions was carried out according to the thermolysis method. For polymerase chain reaction (PCR), generic primers were employed to amplify the Mollicutes DNA and positive samples were subjected to PCR with primers specific for M. bovis. Positivity for M. bovis was 3.78% in mastitic samples, regardless of the farm, and 20% in nasal swabs.

Mycoplasma bovis forma parte de la microbiota del tracto respiratorio bovino, pero se considera un patógeno oportunista de extrema importancia en las enfermedades respiratorias de los terneros. Provoca en el rebaño diversas enfermedades como mastitis, poliartritis, neumonía y endometritis. Este patógeno es altamente contagioso y los animales con mastitis son potenciales diseminadores de la infección al hato, ya que liberan de 106 a 108 UFC por ml de leche. Asimismo, los animales con neumonía eliminan, através de secreciones respiratorias, altas cargas microbianas del agente. El presente estudio tuvo como objetivo realizar la detección molecular de Mycoplasma bovis en 185 muestras de secretion de mastitis de vacas con mastitis clínica, así como en 50 muestras de hisopos nasales de terneros sanos con o sin signos de neumonía y nacidos de vacas con mastitis, todos pertenecientes a cuatro granjas lecheras en el estado de Paraná, donde se diagnosticaron casos de mastitis. La extracción de ADN de ambas secreciones se realizó mediante el método de termólisis. Para la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), se utilizaron cebadores genéricos para amplificar el ADN de los Mollicutes y las muestras positivas se sometieron a PCR con cebadores específicos para M. bovis. La positividad para M. bovis fue del 3,78% en muestras de mastitis, independientemente de la granja, y del 20% en hisopos nasales.

Presença de Mollicutes e Mycoplasma bovis em swabs nasais de bezerros e na secreção mastítica de vacas / Presence of Mollicutes and Mycoplasma bovis in nasal swabs from calves and in mastitic secretion from cows / Presencia de Mollicutes e Mycoplasma bovis en hisopos nasalses de terneros y secrecion de mastitis de vacas

Mycoplasma bovis faz parte da microbiota do trato respiratório bovino, mas é considerado um patógeno oportunista de extrema importância nas doenças respiratórias de bezerros. Causa ao rebanho diversas doenças como mastite, poliartrite, pneumonia e endometrite. Esse patógeno é altamente contagioso e os animais com mastite são potenciais disseminadores da infecção para o rebanho, pois liberam de 106a 108UFC por mL de leite. Da mesma forma, animais com pneumonia eliminam, por meio de secreções respiratórias, altas cargas microbianas do agente. O presente estudo teve como objetivo realizar a detecção molecular de Mycoplasma bovis em 185 amostras de secreção mastítica de vacas, bem como em 50 amostras de swab nasal de bezerros saudáveis com ou sem sinais de pneumonia e nascidos de vacas com mastite, pertencentes a quatro fazendas leiteiras do estado do Paraná, onde foram diagnosticados casos de mastite. A extração do DNA de ambas as secreções foi realizada pelo método de termólise. Para a reação em cadeia da polimerase (PCR), primers genéricos foram empregados para amplificar o DNA dos Mollicutes e as amostras positivas foram submetidas à PCR com primers específicos para M. bovis. A positividade para M. bovis foi de 3,78% nas amostras de secreção mastítica, independente da fazenda, e de 20% nos swabs nasais.(AU)

Mycoplasma bovis is part of the bovine respiratory tract microbiota but is considered an opportunistic pathogen of extreme importance in respiratory diseases of calves. It causes to the herd several diseases such as mastitis, polyarthritis, pneumonia and endometritis. This pathogen is highly contagious and animals with mastitis are potential disseminators of infection to the herd since they release from 106 to 108CFU per mL milk. Similarly, animals with pneumonia eliminate, through respiratory secretions, high microbial loads of the agent. The present study aimed to perform molecular detection of Mycoplasma bovis in 185 milk samples from cows with clinical mastitis, as well as in 50 nasal swab samples from healthy calves with or without signs of pneumonia and born from cows with mastitis, all belonging to four dairy farms in Paraná State, where cases of mastitis had been diagnosed. DNA extraction from both secretions was carried out according to the thermolysis method. For polymerase chain reaction (PCR), generic primers were employed to amplify the Mollicutes DNA and positive samples were subjected to PCR with primers specific for M. bovis. Positivity for M. bovis was 3.78% in mastitic samples, regardless of the farm, and 20% in nasal swabs.(AU)

Mycoplasma bovis forma parte de la microbiota del tracto respiratorio bovino, pero se considera un patógeno oportunista de extrema importancia en las enfermedades respiratorias de los terneros. Provoca en el rebaño diversas enfermedades como mastitis, poliartritis, neumonía y endometritis. Este patógeno es altamente contagioso y los animales con mastitis son potenciales diseminadores de la infección al hato, ya que liberan de 106 a 108 UFC por ml de leche. Asimismo, los animales con neumonía eliminan, através de secreciones respiratorias, altas cargas microbianas del agente. El presente estudio tuvo como objetivo realizar la detección molecular de Mycoplasma bovis en 185 muestras de secretion de mastitis de vacas con mastitis clínica, así como en 50 muestras de hisopos nasales de terneros sanos con o sin signos de neumonía y nacidos de vacas con mastitis, todos pertenecientes a cuatro granjas lecheras en el estado de Paraná, donde se diagnosticaron casos de mastitis. La extracción de ADN de ambas secreciones se realizó mediante el método de termólisis. Para la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), se utilizaron cebadores genéricos para amplificar el ADN de los Mollicutes y las muestras positivas se sometieron a PCR con cebadores específicos para M. bovis. La positividad para M. bovis fue del 3,78% en muestras de mastitis, independientemente de la granja, y del 20% en hisopos nasales.(AU)

Representativeness of different factors affecting the economic impact of mastitis in dairy herds / Representatividade de diferentes fatores no impacto econômico da mastite em rebanhos leiteiros

he objective of this study was to identify and quantify the most representative factor affecting the economic impact of mastitis in dairy cattle herds in order to establish those that should receive greater attention from farmers and technicians to reduce the economic impact of this important disease. A simulation study was conducted with the CU$TO MASTITE program, considering 324 different herds and using combinations of the following factors: somatic cell count (250,000; 500,000; 750,000 and 1,000,000 somatic cells/mL milk); production scale (50; 100 and 150 lactating cows); productivity per animal (10; 20 and 30 L/cow/day); average annual incidence of clinical mastitis (1%; 7% and 15%), and involuntary culling rate due to mastitis (2%; 4% and 6%). Preventive measures included expenses with monitoring [culture and antibiogram, bulk tank somatic cell count (BTSCC), and individual somatic cell counts], pre- and post-dipping, vaccination, treatment of dry cows, and maintenance of the milking machine. Only treatments of clinical cases were considered as curative measures. The impact of mastitis was estimated as total losses plus expenses with prevention and treatment of clinical cases...

Objetivou-se identificar e quantificar o fator de maior representatividade no impacto econômico da mastite em rebanhos bovinos leiteiros, visando identificar aqueles que deverão receber maior atenção de pecuaristas e técnicos para reduzir o impacto econômico dessa importante enfermidade. A pesquisa foi realizada por meio de simulação no sistema computacional CU$TO MASTITE, considerando 324 rebanhos diferentes, por meio das combinações dos fatores: contagem de células somáticas (250.000; 500.000; 750.000 e 1.000.000 de células somáticas/mL de leite); escala de produção (50; 100 e 150 vacas em lactação); produtividade por animal (10; 20 e 30 L/vaca/dia); frequência média anual de mastite clínica (1%; 7% e 15%) e taxa de descarte involuntário em virtude da mastite (2%; 4%; 6%). Foram consideradas como prevenção as despesas com monitoramento (cultura e antibiograma, contagem de células somáticas no tanque e contagem de células somáticas individuais), pré e pós dipping, vacinação, tratamento de vacas secas e manutenção de ordenhadeira. Como medidas curativas, foram considerados apenas os tratamentos dos casos clínicos. O impacto da mastite foi estimado como sendo o total em perdas, acrescido das despesas com prevenção e tratamento de casos clínicos...

Representativeness of different factors affecting the economic impact of mastitis in dairy herds / Representatividade de diferentes fatores no impacto econômico da mastite em rebanhos leiteiros

he objective of this study was to identify and quantify the most representative factor affecting the economic impact of mastitis in dairy cattle herds in order to establish those that should receive greater attention from farmers and technicians to reduce the economic impact of this important disease. A simulation study was conducted with the CU$TO MASTITE program, considering 324 different herds and using combinations of the following factors: somatic cell count (250,000; 500,000; 750,000 and 1,000,000 somatic cells/mL milk); production scale (50; 100 and 150 lactating cows); productivity per animal (10; 20 and 30 L/cow/day); average annual incidence of clinical mastitis (1%; 7% and 15%), and involuntary culling rate due to mastitis (2%; 4% and 6%). Preventive measures included expenses with monitoring [culture and antibiogram, bulk tank somatic cell count (BTSCC), and individual somatic cell counts], pre- and post-dipping, vaccination, treatment of dry cows, and maintenance of the milking machine. Only treatments of clinical cases were considered as curative measures. The impact of mastitis was estimated as total losses plus expenses with prevention and treatment of clinical cases...(AU)

Objetivou-se identificar e quantificar o fator de maior representatividade no impacto econômico da mastite em rebanhos bovinos leiteiros, visando identificar aqueles que deverão receber maior atenção de pecuaristas e técnicos para reduzir o impacto econômico dessa importante enfermidade. A pesquisa foi realizada por meio de simulação no sistema computacional CU$TO MASTITE, considerando 324 rebanhos diferentes, por meio das combinações dos fatores: contagem de células somáticas (250.000; 500.000; 750.000 e 1.000.000 de células somáticas/mL de leite); escala de produção (50; 100 e 150 vacas em lactação); produtividade por animal (10; 20 e 30 L/vaca/dia); frequência média anual de mastite clínica (1%; 7% e 15%) e taxa de descarte involuntário em virtude da mastite (2%; 4%; 6%). Foram consideradas como prevenção as despesas com monitoramento (cultura e antibiograma, contagem de células somáticas no tanque e contagem de células somáticas individuais), pré e pós dipping, vacinação, tratamento de vacas secas e manutenção de ordenhadeira. Como medidas curativas, foram considerados apenas os tratamentos dos casos clínicos. O impacto da mastite foi estimado como sendo o total em perdas, acrescido das despesas com prevenção e tratamento de casos clínicos...(AU)

Cinética da atividade antibacteriana in vitro do extrato natural de Morinda Citrifolia frente à bactérias isoladas de mastite bovina / Kinetic antibacterial activity in vitro extract natural Morinda citrifolia front of the bacteria isolated from bovine mastitis

Objetivou-se com o desenvolvimento desta pesquisa avaliar o potencial in vitro do extrato hidroalcoolico de Morinda citrifolia como desinfetante/anti-séptico e antimicrobiano frente a bactérias isoladas de vacas com mastite proveniente da bacia leiteira do estado de Alagoas. A obtenção do extrato será realizada a partir do fruto da planta M. citrifolia colhido da farmácia viva de plantas medicinais, da Unidade de Ensino Viçosa, pertencente ao Campus Arapiraca da Universidade Federal de Alagoas, localizada no município de Viçosa situado na região da zona da mata do estado de Alagoas. Para avaliar o efeito antimicrobiano do extrato, foram isoladas bactérias pertencente ao gênero Staphylococcus sp de mastite bovina de sete propriedades leiteiras localizadas nos municipios de Batalha, Major Izidoro, Monteirópolis, Jaramataia, Craíbas, Jacaré dos Homens e Olho D'água das Flores, que constituem a bacia leiteira do estado de Alagoas. Utilizaram-se vacas em diferentes estágios de lactação, de várias raças e idades que foram avaliadas quanto à presença de mastite clínica e subclínica. Colheram-se as amostras de leite das fêmeas positivas para as mastites após prévia anti-sepsia do óstio do teto com álcool a 70° GL. Estas amostras foram acondicionadas em tubos de ensaio esterilizados e identificados com o nome ou número do animal e mantidas em caixas isotérmicas a 4-8°C de temperatura e enviadas ao Laboratório de Microbiologia Veterinária da Universidade Federal de Alagoas. Semearam-se as amostras de leite em placas de Petri contendo Agar base enriquecido com 8% de sangue de ovino, que foram incubadas a 37°C, realizando-se as leituras após 24 e 48 horas. Em seguida foram observadas as características morfológicas das colônias e morfotintoriais das bactérias à coloração de Gram com auxílio de microscópio em objetiva de 100x e os isolados de Staphylococcus sp foram identificados utilizando provas bioquímicas e teste de coagulase de acordo com Koneman et al (2001). A pesquisa de toxicidade do extrato hidroalcoolico de M. citrifolia foi realizada com larvas de Artemia salina. O extrato de Morinda citrifolia a 2,5% no tempo de 5 minutos apresentou 34,48% (10/29) de efeito inibitório intermediário. Em apenas 6,9% (2/29) nas concentrações 0,625%, 1,25% e 2,5% nos tempos de 5 e 20 minutos, 30 segundos e 5 e 20 minutos, respecti- vamente, o extrato apresentou inibição no crescimento de Staphylococcus coagulase positivo. Outros estudos devem ser conduzidos para padronizar a melhor e mais segura concentração do extrato para uso na descontaminação da glândula mamária de vacas. Não houve toxicidade frente as concentrações testadas do extrato hidroalcoolico de Morinda citrifolia nas larvas de Artemia salina.

Resistência de espécies de candida isoladas de leite proveniente de mastite bovina à pasteurização e fervura / Resistance of candida species isolated from milk from bovine mastitis to pasteurization and boiling

Este trabalho teve como objetivo a avaliação da resistência a pasteurização e a fervura de culturas do gênero Candida isoladas de leite bovino. Foram obtidos 45 isolados de Candida em leite provenientes de vacas leiteiras acometidas de mastite clínica ou sub-clínica em quatro estados brasileiros. As culturas foram submetidas a diferentes tratamentos térmicos, pasteurização rápida (72-75oC / 20 seg), pasteurização lenta (62-65oC / 30 min), e fervura (100oC / 1-3 seg). A pasteurização rápida foi o procedimento no qual houve maior índice de resistência da levedura (64,4%), seguida pela fervura (15,5%) e pela pasteurização lenta (6,6%). A persistência de diferentes espécies de Candida em leite submetido à pasteurização e a fervura, pode representar um risco ao consumidor, especialmente aos indivíduos imuno-comprometidos, crianças e pessoas idosas.

The objective of this study was to evaluate the resistance of Candida species isolated from bovine milk to pasteurization and boiling. A total of 45 Candida isolates were obtained from mastitic milk of dairy cows with clinical or subclinical mastitis from four Brazilian States. The isolates were submitted to different thermal treatments, fast pasteurization (72- 75oC / 20sec), slow pasteurization (62-65oC / 30 min) and boiling (100oC / 1-3sec). Fast pasteurization was the procedure in which there was a higher resistance of yeast (64.4%), followed by boiling (15.5%) and slow pasteurization (6.6%). Care should be taken regarding the possibility of Candida strains persistence in pasteurized and boiled milk, which can represent a risk to consumers especially to immuno-compromised individuals, children and elderly people.

Resistência de espécies de candida isoladas de leite proveniente de mastite bovina à pasteurização e fervura / Resistance of candida species isolated from milk from bovine mastitis to pasteurization and boiling

Este trabalho teve como objetivo a avaliação da resistência a pasteurização e a fervura de culturas do gênero Candida isoladas de leite bovino. Foram obtidos 45 isolados de Candida em leite provenientes de vacas leiteiras acometidas de mastite clínica ou sub-clínica em quatro estados brasileiros. As culturas foram submetidas a diferentes tratamentos térmicos, pasteurização rápida (72-75oC / 20 seg), pasteurização lenta (62-65oC / 30 min), e fervura (100oC / 1-3 seg). A pasteurização rápida foi o procedimento no qual houve maior índice de resistência da levedura (64,4%), seguida pela fervura (15,5%) e pela pasteurização lenta (6,6%). A persistência de diferentes espécies de Candida em leite submetido à pasteurização e a fervura, pode representar um risco ao consumidor, especialmente aos indivíduos imuno-comprometidos, crianças e pessoas idosas.(AU)

The objective of this study was to evaluate the resistance of Candida species isolated from bovine milk to pasteurization and boiling. A total of 45 Candida isolates were obtained from mastitic milk of dairy cows with clinical or subclinical mastitis from four Brazilian States. The isolates were submitted to different thermal treatments, fast pasteurization (72- 75oC / 20sec), slow pasteurization (62-65oC / 30 min) and boiling (100oC / 1-3sec). Fast pasteurization was the procedure in which there was a higher resistance of yeast (64.4%), followed by boiling (15.5%) and slow pasteurization (6.6%). Care should be taken regarding the possibility of Candida strains persistence in pasteurized and boiled milk, which can represent a risk to consumers especially to immuno-compromised individuals, children and elderly people.(AU)

INFLUÊNCIA DA MASTITE CLÍNICA CAUSADA POR DIFERENTES PATÓGENOS NOS ÍNDICES REPRODUTIVOS DE VACAS LEITEIRAS E NA RESPOSTA DE PROTEÍNAS DE FASE AGUDA

A mastite bovina é responsável por grandes perdas econômicas na bovinocultura de leite, além de aspectos de saúde pública que devem também ser considerados. Animais com mastite clínica ou subclínica apresentam diversas alterações reprodutivas. No primeiro artigo da tese, os resultados obtidos demonstraram que a mastite causada por patógenos maiores (20,1%) ou por gram-negativos (15,4%) levaram a queda na taxa de prenhez na primeira inseminação comparado com o grupo controle (32,6%). Foi observado maior taxa de perda gestacional para os grupos de patógenos maiores (22,2%) e gram- negativos (30,1%) comparados com o controle (12,8%). Foi observado diferença entre todos os grupos para o número de dias em aberto. O grupo controle apresentou o menor intervalo (126,5 dias) seguido pelo grupo patógenos menores (162,0 dias) e pelo grupo de patógenos maiores (175,1 dias). Comportamento similar observado para patógenos gram-positivo (172,7 dias) e patógenos gram-negativos (191,1 dias). Portanto, é importante controlar a mastite em rebanhos leiteiros e, para tanto, o diagnóstico é uma etapa importante. Diferentes proteínas de fase aguda foram descritas como bons biomarcadores para o diagnóstico da mastite. No segundo artigo da tese, foi observado que diferentes patógenos podem alterar a liberação de proteínas de fase aguda no leite. Bactérias que causam inflamações mais graves (E. coli e Klebsiella pneumoniae) levaram maior concentração das APP. Patógenos que causam infecções crônica (Streptococcus ambientais Staphylococcus aureus, Mycoplasma spp.) levaram a concentrações intermediarias das APP Micro- organismos que causam mastite menos graves (Staphylococcus coagulase negativa e Enterococcus spp.) levaram a menores concentrações das APP. Hp, AGP e CRP apresentaram correlação forte, positiva e significativa.

Bovine mastitis is responsible for major economic losses in dairy cattle farming, as well as public health aspects that should also be considered. Animals with clinical or subclinical mastitis present several reproductive alterations. In the first article of this thesis, the results showed that mastitis caused by major pathogens (20.1%) or gram-negative (15.4%) led to a decrease in pregnancy rate in the first insemination compared to the control group (32.6%). Higher gestational loss rates were observed for the major (22.2%) and gram-negative (30.1%) pathogen groups compared with the control (12.8%). The difference was observed between all groups for the number of days open. The control group had the shortest interval (126.5 days) followed by the minor pathogens group (162.0 days) and the major pathogens group (175.1 days). Similar behavior observed for gram- positive pathogens (172.7 days) and gram-negative pathogens (191.1 days). Therefore, it is important to control mastitis in dairy herds and, so, diagnosis is a critical step. Different acute phase proteins have been described as good biomarkers for the diagnosis of mastitis. In the second article of this thesis, it was observed that different pathogens may alter the release of acute phase proteins in milk. Bacteria that cause more severe inflammation (E. coli and K. pneumoniae) led to a higher concentration of APP. Pathogens causing chronic infections (Environmental Streptococcus, S. aureus, Mycoplasma spp.) led to intermediate concentrations of APP. Less severe mastitis causing microorganisms (Coagulase-negative Staphylococcus and Enterococcus spp.) led to lower concentrations of APP. Haptoglobin, AGP, and CRP showed strong, positive and significant correlations.

Qualidade do leite de vacas criadas no sistema silvipastoril no Vale do Cauca, Colômbia / Milk quality indicators from cows bred on silvopastoral system in Cauca Valley, Colombia

O sistema silvipastoril caracteriza-se por aumentar a produção de leite, com maior número de vacas por hectare devido ao maior aporte de proteína na dieta. Neste sistema as vacas são alimentadas, além do pasto, de pequenas árvores e arbustos. O objetivo do presente estudo foi determinar os principais indicadores de qualidade do leite e agentes causais de mastite em vacas criadas em sistema silvipastoril. Foram avaliadas a composição (teor de gordura, proteína total, lactose, extrato seco, extrato seco desengordurado e nitrogênio uréico), contagem de células somáticas (CCS), contagem bacteriana total (CBT), ocorrência de mastite clínica e subclínica, isolamento microbiológico, perfil de sensibilidade bacteriana "in vitro" e detecção de resíduos antimicrobianos no leite produzido por 100 vacas, bem como do tanque de expansão e latões em propriedades do Vale do Cauca, Colômbia. Os teores médios dos principais constituintes do leite foram 3,24% de gordura, 3,27% de proteína total, 4,40% de lactose, 10,62% de extrato seco, 8,57% de extrato seco desengordurado e 15,82mg/dL de nitrogênio uréico, enquanto do tanque de expansão e latões foi 3,51% de gordura, 3,20% de proteína total, 4,34% de lactose, 11,72% de extrato seco, 8,47% de extrato seco desengordurado e 14,57mg/dL de nitrogênio uréico. A celularidade média dos quartos mamários e do tanque de expansão foi 141.252,75 CS/mL e 363.078,05 CS/mL respectivamente. A CBT média dos quartos mamários e do tanque de expansão foi 4.466,84 UFC/mL e 24.547,01 UFC/mL. Os principais micro-organismos isolados dos quartos mamários foram Corynebacterium bovis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus hyicus, Staphylococcus spp., Streptococcus dysgalatiae, enquanto do tanque de expansão foram identificados Streptococcus spp., Enterobacter cloacae, Hafnia alveii, Streptococcus hemolítico e Streptococcus spp., com maior frequência. A presença de resíduos de antimicrobianos em leite de vacas e do tanque ou latão foi detectada em 30% e 86% das amostras, respectivamente. O sistema silvipastoril mostrou ser uma boa alternativa para produção de leite em vacas. No entanto, são necessários cuidados no tratamento mamário para evitar resíduos no leite e a análise de todos os parâmetros de qualidade para garantir um produto diferenciado.(AU)

The silvopastoral system is characterized by increasing the production of milk with a greater number of cows per hectare due to the higher amount of protein in the diet. In silvopastoral system cows are fed in addition to pasture, small trees and shrubs. The aim of this study was determinate the main indicators of milk quality and mastitis causal agents in cows bred on silvopastoral system. We evaluated the composition (fat, total protein, lactose, solids, dry extract, nonfat dry and urea nitrogen), somatic cell count (SCC), total bacterial count (TBC), occurrence of clinical and subclinical mastitis, microbiological isolation, in vitro antimicrobial sensitivity profile and detection of antimicrobial residues in milk produced by 100 cows raised in silvopastoral systems, as well as the bulk tank and churns in farms of Cauca Valley, Colombia. The concentration of the major constituents of milk were 3.24% fat, 3.27% total protein, 4.40% lactose, 10.62% dry extract, 8.57% nonfat dry and 15.82mg/dL urea nitrogen, while the bulk tank and churns was 3.51% fat, 3.20% total protein, 4.34% lactose, 11.72% dry extract, 8.47% nonfat dry and 14.57mg/dL urea nitrogen. The cell count of the cows and the bulk tank was 141,252.75 CS/mL and 363,078.05 CS/mL respectively. The TBC mean in cows and the bulk tank was 4,466.84 CFU/mL and 24,547.01 CFU/mL respectively. The main microorganisms isolated from the udder cows were Corynebacterium bovis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus hyicus, Staphylococcus spp., Streptococcus dysgalatiae, while the bulk tank were identified more often Streptococcus spp., Enterobacter cloacae, Hafnia alveii, hemolytic Streptococcus and Streptococcus spp. Antimicrobial residues in cow milk and bulk or churn were detected in 30% and 86% respectively. The silvopastoral system showed to be good alternative to milk production in cow. However is important the care with antimicrobial residues in milk and the analysis of all quality parameters to ensure a differentiated product.(AU)

Effects of environmental modification on mastitis occurrence and hormonal changes in Holstein cows / Efeito da modificação ambiental sobre a ocorrência de mastite e alterações hormonais de vacas Holandesas

The purpose of this research was to evaluate the effects of evaporative cooling in freestall on mastitis occurrence, milk production, and composition, as well as cortisol, T3 (triiodothyronine), and T4 (thyroxin) levels in lactating dairy cows. Twenty-eight multiparous cows averaging 70 ± 10 day postpartum were used in four treatments from January to March 2003. The treatments were: Day (cooling from 7:00 a.m. to 7:00 p.m.); Night (cooling from 7:00 p.m. to 7:00 a.m.); 24-hour (cooling 24-hour); and Control (no cooling). Wired cup test was used for clinical mastitis diagnosis, and the California Mastitis Test (CMT) was used to identify subclinical mastitis. Blood and milk samples were taken weekly for microbiological and hormonal analyses. The cortisol levels were higher than normal values in all treatment groups, suggesting stress conditions, but T3 and T4 levels remained normal in all groups. The occurrence of subclinical mastitis was lower in Day and Night groups than in Control and 24-hour groups. Regarding the microbiological analyses, in all groups the isolation of Corynebacterium sp. from milk samples increased while negative coagulase staphylococci (CNS) declined as etiological agents of subclinical mastitis. However, in Day and 24-hour groups, coagulase positive staphylococci (CPS) increased mainly Staphylococcus aureus (49.8% and 47.7% respectively). The Night group showed a decrease in subclinical mastitis occurrences. Our data indicate that all animals subjected to treatments presented high levels of cortisol, indicating a stress condition. The Night treatment presented a reduction in microbial isolation, suggesting a reduced susceptibility to mastitis.(AU)

O trabalho teve como objetivo avaliar a eficiência do sistema de resfriamento adiabático evaporativo, acionado em diferentes horários, em instalação do tipo freestall e seus reflexos sobre a ocorrência de mastite, produção e composição do leite e respostas hormonais de vacas em lactação. Foram utilizadas 28 vacas em lactação (70±10 dias), multíparas, das raças Holandesa Preta e Branca e Pardo Suíça, com produção média diária de 23±2,3 kg leite/dia. O período experimental de 56 dias teve início em 20 de janeiro de 2003. Os tratamentos foram: Controle (sem resfriamento); Dia (resfriamento 7 as 19 h); Noite (resfriamento 19 às 7 h) e 24 horas (resfriamento durante 24 h). A temperatura de bulbo seco (TBS), umidade relativa do ar (UR) e a temperatura de globo negro (TGN) foram mensuradas ao longo das 24 horas. A ordenha foi realizada às 7 h e 19 h. Amostragens semanais de leite e sangue foram realizadas para análise da composição do leite (gordura, proteína, lactose e contagem de células somáticas) e determinações hormonais de cortisol, tiroxina (T4) e triiodotironina (T3). Para avaliação da ocorrência de mastite clínica e subclínica foram feitos exames semanais de TAMIS (caneca de fundo preto) e California Mastitis Test (CMT). Foram colhidas amostras de leite de todos os quartos para identificação microbiológica dos agentes causais da mastite. O tratamento Dia diminuiu (P<0,05) a temperatura do freestall em 5,3°C às 12h e em 3,5°C às 14h em relação ao grupo Controle. A umidade relativa esteve elevada (P<0,05) às 7h no tratamento Noite e às 12h, 14h e 21h no tratamento Dia. Os maiores valores de ITU foram registrados no tratamento Noite às 12h, 14h e 21h. Não foram observadas diferenças entre os tratamentos (P>0,05) para a produção e composição do leite. Nos animais do tratamento Os níveis de cortisol mostraram-se acima (P<0,05) dos níveis normais em todos os tratamentos. Já os teores de T3 e T4 estiveram dentro da faixa de normalidade. Na fase pré-experimental a maior frequência de isolamento bacteriano foi para Staphylococcus coagulase negativa. No tratamento noite e dia, houve uma diminuição na proporção de casos positivos de mastite subclínica da fase pré-experimental em relação à última semana da fase experimental. Na última semana da fase experimental houve uma diminuição de Staphylococcus coagulase negativa e aumento da ocorrência de Corynebacterium sp.(AU)

MULTIRRESISTÊNCIA AOS ANTIMICROBIANOS E DETECÇÃO DOS GENES blaKPC, blaNDM e blaOXA-48 EM Klebsiella pneumoniae ISOLADAS DE MASTITE CLÍNICA BOVINA

Klebsiella pneumoniae são bactérias oportunistas encontradas no trato intestinal de animais e humanos, bem como no ambiente. Em animais de produção, o patógeno é causa importante de mastite clínica bovina e, em humanos, figura entre os patógenos mais frequentes envolvidos em infecções nosocomiais. A multirresistência dos isolados aos antimicrobianos convencionais é preocupação emergente em saúde animal e saúde pública. Atualmente, merece destaque os estudos com a produção de carbapenemases por K. pneumoniae, que são enzimas relacionadas a resistência aos antimicrobianos do grupo dos carbapenêmicos. O presente estudo investigou os escores de gravidade clínica de mastite (leves, moderados e graves), o período do ano (estações) de maior isolamento, a ocorrência de multirresistência dos isolados a 19 antimicrobianos (pertencentes a 10 grupamentos), bem como a presença dos genes blaKPC, blaNDM e blaOXA-48, associados a produção de carbapenemases, em 60 K. pneumoniae isoladas do leite de vacas com mastite clínica. Os casos ocorreram principalmente nos meses de verão (28/60=46,7%) e outono (24/60=40%). As informações sobre a gravidade clínica da mastite foram obtidas de 30 (50,0%) vacas, das quais 20 (66,6%) apresentaram casos de mastite leves (score 1), 8 (26,7%) moderados (score 2) e 2 (6,7%) graves (score 3). A maior sensibilidade dos isolados no teste de difusão com discos foi observada para marbofloxacino (100%), levofloxacino (95%), norfloxacino (93,3%), ceftriaxona (85%) e sulfametoxazole/trimetoprim (80%). Em contraste, alta resistência dos isolados foi observada para rifampicina (100%) e azitromicina (96,4%), com grande variedade de perfis de resistência. O índice de resistência múltipla aos antimicrobianos - IRMA (0,3) foi observado em 50,0% (30/60) dos isolados. No teste de difusão com discos para identificação fenotípica de K. pneumoniae produtores de carbapenemases foram encontrados 71,6% (43/60) parcialmente sensíveis e 11,7% (7/60) resistentes ao imipeném; 55,0% (33/60) parcialmente sensíveis e 3,3% (2/60) resistentes ao meropenem e 15% (9/60) parcialmente sensíveis ao ertapenem. Em contraste, nenhum isolado foi considerado produtor de carbapenemases no teste de concentração inibitória mínima com fitas impregnadas utilizando o imipeném, ertapenem e meropenem. A detecção molecular por PCR detectou 1,66% (1/60) dos isolados carreando blaKPC, 1,66% (1/60) blaNDM e 5% (3/60) blaOXA-48. Não foi observada associação estatística (P>0,05) entre as variáveis estações do ano de isolamento do patógeno, escores de gravidade clínica, resistência aos antimicrobianos, testes de difusão para identificação de produção de carbapenemases e detecção dos genes. A multirresistência aos antimicrobianos e a presença de genes produtores de carbapenemases em K. pneumoniae isolados de vacas com mastite reforça a preocupação, de âmbito mundial, com o crescimento da resistência bacteriana em isolados obtidos de animais domésticos, bem como a necessidade do uso racional de antimicrobianos no tratamento/profilaxia da mastite bovina. Na literatura consultada refere-se pela primeira vez na América do Sul, a detecção dos genes de resistência aos carbapenêmicos blaKPC, blaNDM e blaOXA-48 em K. pneumoniae isoladas de casos clínicos de mastite em vacas.

Klebsiella pneumoniae are opportunistic bacteria found in the intestinal tract of animals and humans, as well as in the environment. In livestock animals the pathogen is an important cause of bovine clinical mastitis, and in humans represent one of the most frequent pathogens involved in nosocomial infections. The pandemic scenario of multidrug resistance of the pathogen to conventional antimicrobials is an emerging concern in animal and humans. Currently, studies with the K. pneumoniae carbapenemase (KPC)-producing, which are enzymes related to resistance to antimicrobials, particularly of the carbapenemics group, deserve attention. The present study investigated the severity of clinical mastitis (mild, moderate and severe), occurrence of cases in different seasons, multidrug to 19 antimicrobials belonging to 10 groups, as well as the presence of the genes blaKPC, blaNDM and blaOXA-48 associated with the production of carbapenemases in 60 K. pneumoniae isolated from clinical mastitis in cows. The highest sensitivity of the isolates in the disk diffusion test was observed for marbofloxacin (100%), levofloxacin (95%), norfloxacin (93.3%), ceftriaxone (85%) and sulfamethoxazole / trimethoprim (80%). In contrast, the highest resistance of the isolates was observed for rifampicin (100%) and azithromycin (96.4%) with great variety of resistance profiles. The multiple antibiotic resistance (MAR) index (0.3) was observed in 50% (30/60) strains. In the disk diffusion test, which is used for phenotypic identification of the K. pneumoniae carbapenemase-producing bacteria, the findings among the total isolates were as follows: 71.6% (43/60) partially sensitive and 7 (11.7%) resistant to imipenem; 55% (33/60) were partially sensitive and 3.3 (2/60) resistant to meropenem; and 15% (9/60) were partially sensitive to ertapenem. In contrast, no isolates were carbapenemases-producing in the minimal inhibitory concentration test (MIC) using imipenem, ertapenem, and meropenem. PCR molecular detection of the three resistance genes revealed one (1.66%) isolated carrying blaKPC, one (1.66%) blaNDM, and three (5%) blaOXA-48. No statistical association (P>0,05) was observed between seasons, scores of clinical severities, multidrug resistance of isolates, diffusion disk test to carbapenemase-production, and detection of the genes studied. The multidrug resistance and the presence of K. pneumoniae carbapenemase(KPC)-producing isolated from cows with mastitis, highlights the global concern with the growth of antimicrobial resistance of bacteria from domestic animals, as well as the need for the rational use of antimicrobials in the treatment/prophylaxis of bovine mastitis. To our knowledge, the detection of the genes blaKPC, blaNDM and blaOXA-48 in K. pneumoniae isolated from clinical cases of bovine mastitis is reported for the first time in South America.

Avaliação in vitro da eficácia de desinfetantes comerciais utilizados no pré e pós-diping frente à Candida spp isolada de leite mastitico bovino / In vitro evaluation of the efficacy of commercial disinfectants used in pre and post-dipping against Candida spp isolated from bovine mastitc milk

O objetivo desta investigação foi de avaliar a sensibilidade in vitro de cepas de Candida spp. Frente a vários desinfetantes comercialmente disponíveis, utilizados para o tratamento pré e pós-dipping. Foram obtidos 45 isolados de Candida em leite mastitico provenientes de vacas leiteiras acometidas de mastite clinica ou sub clinica em quatro estados brasileiros. As drogas utilizadas foram clorexidina (2,0%), iodo (0,8%), iodo glicerinado (0,8%) e hipoclorito de sódio (1,0%) em 4 intervalos específicos de tratamento (15″, 30″, 60″ e 300″). Cem por cento das cepas de Candida foram sensíveis a clorexidina nos tempos de 30″, 60″e 300″, ao iodo glicerinado em 60″ e 300″, ao hipoclorito de sódio em 60″ e 300″ e ao iodo apenas em 300″. Assim se conclui que a eficácia mais alta de desinfecção foi encontrada para a clorexidina. Uma conclusão adicional é que é importante a realização periódica de avaliações de sensibilidade dos microrganismos aos desinfetantes comumente utilizados, de forma a garantir a eficácia da desinfecção dos tetos.

The objective of this investigation was to evaluate the in vitro sensibility of Candida spp. To several commercially available disinfectants used for pre and post-dipping.. A total of 45 isolates of Candida were obtained from the mastitic milk of dairy cows with clinical or subclinical mastitis from four Brazilian States. As active drugs were used chlorhexidine (2.0%), iodine (0.8%), iodine glycerin (0.8%) and sodium hypochlorite (1.0%) at four specific intervals (15 ″, 30 ″, 60 ″ and 300 ″). One hundred percent of Candida was found to be sensible to chlorhexidine at 30 ″, 60 ″, and 300 ″, to iodine glycerin at 60 ″ and 300 ″, to sodium hypochlorite at 60 ″, and 300 ″, to iodine only at 300 ″. It can be concluded that the highest disinfectant activity in vitro was found to be with chlorhexidine. A further conclusion was that it is important to undertake a periodic evaluation of the sensibility of microorganisms to the disinfectants commonly used, to guarantee the efficacy of the process of teat disinfecting.

Avaliação in vitro da eficácia de desinfetantes comerciais utilizados no pré e pós-diping frente à Candida spp isolada de leite mastitico bovino / In vitro evaluation of the efficacy of commercial disinfectants used in pre and post-dipping against Candida spp isolated from bovine mastitc milk

O objetivo desta investigação foi de avaliar a sensibilidade in vitro de cepas de Candida spp. Frente a vários desinfetantes comercialmente disponíveis, utilizados para o tratamento pré e pós-dipping. Foram obtidos 45 isolados de Candida em leite mastitico provenientes de vacas leiteiras acometidas de mastite clinica ou sub clinica em quatro estados brasileiros. As drogas utilizadas foram clorexidina (2,0%), iodo (0,8%), iodo glicerinado (0,8%) e hipoclorito de sódio (1,0%) em 4 intervalos específicos de tratamento (15″, 30″, 60″ e 300″). Cem por cento das cepas de Candida foram sensíveis a clorexidina nos tempos de 30″, 60″e 300″, ao iodo glicerinado em 60″ e 300″, ao hipoclorito de sódio em 60″ e 300″ e ao iodo apenas em 300″. Assim se conclui que a eficácia mais alta de desinfecção foi encontrada para a clorexidina. Uma conclusão adicional é que é importante a realização periódica de avaliações de sensibilidade dos microrganismos aos desinfetantes comumente utilizados, de forma a garantir a eficácia da desinfecção dos tetos.(AU)

The objective of this investigation was to evaluate the in vitro sensibility of Candida spp. To several commercially available disinfectants used for pre and post-dipping.. A total of 45 isolates of Candida were obtained from the mastitic milk of dairy cows with clinical or subclinical mastitis from four Brazilian States. As active drugs were used chlorhexidine (2.0%), iodine (0.8%), iodine glycerin (0.8%) and sodium hypochlorite (1.0%) at four specific intervals (15 ″, 30 ″, 60 ″ and 300 ″). One hundred percent of Candida was found to be sensible to chlorhexidine at 30 ″, 60 ″, and 300 ″, to iodine glycerin at 60 ″ and 300 ″, to sodium hypochlorite at 60 ″, and 300 ″, to iodine only at 300 ″. It can be concluded that the highest disinfectant activity in vitro was found to be with chlorhexidine. A further conclusion was that it is important to undertake a periodic evaluation of the sensibility of microorganisms to the disinfectants commonly used, to guarantee the efficacy of the process of teat disinfecting.(AU)

DETECÇÃO DE GENES DE TOXINAS EM Staphylococcus spp. RESISTENTES ISOLADOS DE MASTITE BOVINA

Staphylococcus spp. estão entre os principais agentes etiológicos da mastite bovina. Esses microrganismos são relatados como importantes contaminantes de leite cru e seus derivados, sendo capazes de produzir diversas toxinas, capazes de provocar surtos de intoxicação alimentar, e síndrome do choque tóxico em humanos. Embora as intoxicações alimentares estejam mais relacionadas a Staphylococcus aureus, há relatos de cepas de Staphylococcus coagulase negativa (SCN) produtoras de toxinas. Neste cenário, o objetivo deste estudo foi investigar a presença dos genes sea, sec e tst, responsáveis pela produção das enterotoxinas estafilocócicas A, C e da TSST-1, respectivamente, em 67 cepas de Staphylococcus spp. resistentes a princípios ativos antimicrobianos (27-S. aureus, e 40-SNC), isoladas de amostras de secreção láctea de novilhas e vacas com mastite clínica ou subclínica de propriedades comerciais e experimentais do estado de São Paulo, Brasil. Por meio da técnica de PCR, não foram encontrados em nenhuma das 67 cepas os genes sea e tst, entretanto o gene sec foi detectado em 20 cepas (29,85%) de S. aureus. A presença do gene sec em amostras de leite de vacas com mastite pode representar um sério risco do ponto de vista epidemiológico, uma vez que, quando se trata de saúde pública, a detecção de genes de virulência em amostras de alimentos, pode representar um risco à saúde do consumidor. Além disso, esses microrganismos podem conter outros genes de virulência não avaliados no presente estudo.

Staphylococcus spp. are considered one of the main etiological agents of bovine mastitis. These microorganisms are reported as important contaminants of raw milk and dairy products, being able to produce various toxins, causing food poisoning outbreaks, and toxic shock syndrome in humans. While food poisoning is more related to Staphylococcus aureus, there are reports of Coagulase Negative Staphylococcus (CNS) strains produced from toxins. With that scenery, the objective of this study was to investigate the presence of genes sea, sec and tst, responsible for the production of staphylococcal enterotoxin A, C and TSST-1, respectively, in 67 strains of Staphylococcus spp resistant to antimicrobial (27-S aureus, and 40-CNS) isolates from milk secretory samples of heifers and cows with clinical or subclinical mastitis of commercial and experimental farms in São Paulo State, Brazil. By PCR technique, they were not found in any of the 67 strains of the sea genes, however the gene was detected in 20 strains (29.85%) of S. aureus. The presence of the gene in samples of cow's milk with mastitis may represent an epidemiological risk, a detection of virulence genes in food samples may pose a risk to consumer health. Although these microorganisms may contain other virulence genes not assessed in the present study.

Cetose e hipocalcemia em vacas leiteiras e a correlação com a mastite

A pecuária leiteira é importante atividade no agronegócio brasileiro, gera alimento e renda para a população, seu crescimento ocorre por meio da intensificação dos sistemas de produção e do melhoramento genético, objetivando maiores lucros e menores custos, no entanto esse aumento produtivo elevou também o risco de transtornos metabólicos. O objetivo do trabalho foi correlacionar quadros subclínicos de hipocalcemia e de cetose com a mastite em vacas leiteiras mestiças na região do Caparaó, estado do Espírito Santo. Foram utilizadas vacas mestiças (Holandês x Zebu) em diferentes fases produtivas procedentes de 34 propriedades localizadas em sete municípios da região do Caparaó Capixaba. Foi realizado o diagnóstico de mastite clínica e subclínica por meio dos testes de caneca de fundo preto e California Mastitis Test respectivamente. A amostra de sangue foi coletada por meio de punção da veia ou artéria coccígea em tubos de coleta a vácuo sem anticoagulante, a dosagem de glicose foi realizada com o sangue total em glicosímetro portátil Optium Xceed®. As concentrações séricas de -hidroxibutirato, ácidos graxos não esterificados, triglicerídeos, colesterol e cálcio foram realizadas em analisador bioquímico automático. As análises estatísticas foram realizadas no programa Statistical Analysis System (SAS) versão 8.0 e no programa OpenEpi. Foi encontrado elevada ocorrência de mastite clínica (4,85 %), mastite subclínica (44,50 %), cetose subclínica (34,20 %) e hipocalcemia subclinica (29,89 %) na microrregião do Caparaó Capixaba. Não foi encontrado correlação entre cetose bovina e a mastite, no entanto a hipocalcemia elevou em 2,72 vezes a probabilidade de vacas sofrerem com quadros de mastite.

The dairy farming activity is important in Brazilian agribusiness, which generate food and income for the population, its growth has occurred through intensification of production systems and genetical improvement, aiming higher profits and lower costs, however this production increase also raised the risk of metabolic disorders. The aim of this study was to correlate subclinical hypocalcemia boards and ketosis with mastitis in crossbred dairy cows in Caparaó region, state of Espírito Santo. Crossbred cows were used (Holstein x Zebu) at different production phases coming from 34 properties in seven counties of the Caparaó Capixaba region. It was carried out the diagnosis of clinical and subclinical mastitis through the tests for black background Mug and California Mastitis Test (CMT) respectively. The blood sample was collected by puncture of the vein or artery coccyx in vacuum tubes without anticoagulant, the dosage of glucose was performed using total blood in a portable glucometer Optium Xceed®. Serum concentrations of -hydroxybutyrate (HB), non-esterified fatty acids (NEFA), triglycerides, cholesterol and calcium were performed in automatic biochemical analyzer. Statistical analyzes were performed using the Statistical Analysis System (SAS) version 8.0 and OpenEpi program. There was high incidence of clinical mastitis (4.85%), subclinical mastitis (44.50%), subclinical ketosis (34.20%) and subclinical hypocalcemia (29.89%) in the micro Caparaó Capixaba. No correlation was found between bovine ketosis and mastitis, however hypocalcemia in increased 2.72 times as likely to suffer cows with mastitis frames.

Occurrence, infectious etiology and risk factors associated with bovine mastitis in microrregion Itabuna-Ilhéus, Bahia / Ocorrência, etiologia infecciosa e fatores de risco associados à mastite bovina na microrregião Itabuna-Ilhéus, Bahia

The objective in this study was to evaluate the occurrence, infectious etiology and risk factors associated with mastitis in 187 dairy cows from ten farms in the Microrregion Itabuna-Ilheus from the state of Bahia, Brazil. Both cows were selected as the properties of a non-random, being selected 20% of lactatin cows from each farm. The test of choice for preliminary identification of subclinical mastitis was the California Mastitis Test, the diagnosis of clinical mastitis was carried out by the observation of signs of inflammation in the udder and the presence of gross changes in milk. Of lactating cows, 74 (39.57%) were positive for mastitis and 90% of the farms analyzed had at least one positive animal. About the risk factors, it was verified that the use of the foot calf during nursing (p

O objetivo neste estudo foi avaliar a ocorrência, etiologia infecciosa e os fatores de risco associados à mastite em 187 vacas, provenientes de 10 propriedades leiteiras localizadas na microrregião Itabuna-Ilhéus no estado da Bahia. Tanto as vacas quanto as propriedades foram selecionados de forma não-aleatória, e foram escolhidas 20% das vacas em lactação de cada propriedade. O teste de escolha para identificação preliminar da mastite subclínica foi o California Mastitis Test, e o diagnóstico da mastite clínica foi realizado pela observação de sinais de inflamação no úbere e a presença de alterações macroscópicas no leite. Das vacas em lactação, 74 (39,57%) estavam com mastite e 90% das propriedades analisadas tinham pelo menos um animal positivo. Os fatores de risco observados, para a ocorrência de mastite, foram a utilização do bezerro ao pé durante a ordenha (p

Fatores de risco associados à mastite bovina causada por Prototheca zopfii / Risk factors associated with bovine mastitis caused by Prototheca zopfii

Este trabalho teve como objetivo o estudo de fatores de risco associados à mastite bovina causada por Prototheca zopfii. Foram analisadas 13 propriedades leiteiras dos Estados do Paraná e de São Paulo, segundo os seguintes critérios de seleção: confirmação prévia de casos de mastite por Prototheca spp., triagem pela pesquisa de Prototheca spp. em tanques de expansão e latões e rebanhos com contagem de células somáticas acima de 5x105cel mL-1. As amostras coletadas consistiram de: leite, água, solo, fezes e swab de teteiras. Prototheca spp. foi isolada de amostras de leite dos quartos mamários com mastite clínica ou subclínica em uma propriedade e de amostras de leite e do ambiente em quatro propriedades, nas quais foi isolada em amostras de: água de bebedouro, abastecimento, esgoto, empoçada no piso de estábulo e sala de ordenha, solo de piquete e pasto, teteiras, fezes de bezerros e suínos. Do total de 383 vacas examinadas, Prototheca spp. foi isolada em 20 (5,2 por cento) vacas, sendo caracterizada como P. zopfii em 18. Os fatores de risco associados à mastite causada por P. zopfii foram: criação das vacas a pasto, alimentação dos animais com pasto e silagem, realização de ordenha mecânica em estábulo, permanência das vacas após ordenha em piquete sem alimento, criação de suínos próxima às instalações dos bovinos, existência de cães, gatos e roedores, falta de higienização dos tetos com água, pré-imersão dos tetos em aplicador com retorno e sem a troca do anti-séptico, alimentação dos bezerros com leite de vacas com mastite clínica e serem as vacas da raça holandesa.(AU)

This research had as objective the study of risk factors associated with bovine mastitis caused by Prototheca zopfii. Thirteen dairy herds in Paraná and São Paulo states were analyzed and selected according to the following criteria: previous confirmation of Prototheca spp. mastitis cases, screening of Prototheca spp. in bulk tanks and milk cans, and herds with somatic cells count over 5x105cel mL-1. The samples collected consisted of: milk, water, soil, manure and swabs of teat cup rubbers. Prototheca spp. was isolated from mammary quarters with clinical and subclinical mastitis of milk samples in one herd and from the environment and cows in four herds. Out of 383 cows examined, Prototheca spp. was isolated in 20 (5.2 percent) cows with mastitis, and 18 of them were characterized as P. zopfii. In four herds when Prototheca spp. was identified from mammary quarters and environment the agent was isolated from the following samples: water in the waterers, puddled water in the stalls and the milking parlour, supply, sewage, cow pen and pasture soil, teat cup rubbers and manure from calves and swines. The risk factors associated with P. zopfii mastitis consisted of: pasture system, pasture and silage feeding, use of milking machine in stalls, cow pen without fresh feed after milking, raising of swines near bovine housing, existence of dogs, cats and rodents, absence of teats hygienization with water, use of pre-immersion devices with return and without change of antiseptic, calves fed with milk of clinical mastitis cases and the Holstein breed.(AU)

Staphylococcal toxin genes in strains isolated from cows with subclinical mastitis / Detecção de genes de toxinas em linhagens de estafilococos isolados de vacas com mastite subclínica

The present study was carried out in 11 dairy herds in four municipal districts of the rural area of the State of Pernambuco, Brazil. Out of 984 quarter milk (246 cows), 10 (1.0%) were positive for clinical mastitis, 562 (57.1%) for subclinical mastitis and 412 (41.9%) were negative. A total of 81 Staphylococcus spp. isolates were obtained from milk samples from the cows diagnosed with subclinical mastitis. From these, 53 (65.0%) were S. aureus, 16 (20.0%) coagulase-positive staphylococci (CPS) and 12 (15.0%) coagulase-negative staphylococci (CNS). The isolates were further investigated for the presence of toxin genes by multiplex and uniplex PCR. The main gene observed was seg followed by seh, sei and sej. The distribution of these observed genes among the isolates obtained from different areas showed a regional pattern for the SEs. The presence of toxin genes in the strains isolated from bovine milk demonstrates a potential problem for public health.(AU)

O presente estudo foi realizado em 11 rebanhos leiteiros de quatro municípios da área rural do estado de Pernambuco, Brasil. Dos 984 quartos mamários examinados (246 vacas), 10 (1,0%) foram positivos para a mastite clínica, 562 (57,1%) para a mastite subclínica e 412 (41,9%) foram negativos para mastite. Foram isoladas 81 linhagens de Staphylococcus spp. do leite de vacas com mastite subclínica. Destes, 53 (65,0%) foram S. aureus, 16 (20,0%) estafilococos coagulase-positivo (SCP) e 12 (15,0%) estafilococos coagulase-negativo (SCN). O principal gene observado nos estafilococos foi o seg seguido pelo seh, sei e sej. Foi constatada distribuição regional dos genes dos estafilococos isolados dos animais nos municípios estudados. A presença dos genes das toxinas nas linhagens isoladas do leite de vacas representa risco potencial para a Saúde Pública.(AU)

Staphylococcal toxin genes in strains isolated from cows with subclinical mastitis / Detecção de genes de toxinas em linhagens de estafilococos isolados de vacas com mastite subclínica

The present study was carried out in 11 dairy herds in four municipal districts of the rural area of the State of Pernambuco, Brazil. Out of 984 quarter milk (246 cows), 10 (1.0 percent) were positive for clinical mastitis, 562 (57.1 percent) for subclinical mastitis and 412 (41.9 percent) were negative. A total of 81 Staphylococcus spp. isolates were obtained from milk samples from the cows diagnosed with subclinical mastitis. From these, 53 (65.0 percent) were S. aureus, 16 (20.0 percent) coagulase-positive staphylococci (CPS) and 12 (15.0 percent) coagulase-negative staphylococci (CNS). The isolates were further investigated for the presence of toxin genes by multiplex and uniplex PCR. The main gene observed was seg followed by seh, sei and sej. The distribution of these observed genes among the isolates obtained from different areas showed a regional pattern for the SEs. The presence of toxin genes in the strains isolated from bovine milk demonstrates a potential problem for public health.(AU)

O presente estudo foi realizado em 11 rebanhos leiteiros de quatro municípios da área rural do estado de Pernambuco, Brasil. Dos 984 quartos mamários examinados (246 vacas), 10 (1,0 por cento) foram positivos para a mastite clínica, 562 (57,1 por cento) para a mastite subclínica e 412 (41,9 por cento) foram negativos para mastite. Foram isoladas 81 linhagens de Staphylococcus spp. do leite de vacas com mastite subclínica. Destes, 53 (65,0 por cento) foram S. aureus, 16 (20,0 por cento) estafilococos coagulase-positivo (SCP) e 12 (15,0 por cento) estafilococos coagulase-negativo (SCN). O principal gene observado nos estafilococos foi o seg seguido pelo seh, sei e sej. Foi constatada distribuição regional dos genes dos estafilococos isolados dos animais nos municípios estudados. A presença dos genes das toxinas nas linhagens isoladas do leite de vacas representa risco potencial para a Saúde Pública.(AU)

Fatores de virulência em linhagens de Escherichia coli isoladas de mastite bovina / Virulence factors in Escherichia coli strains isolated from bovine mastitis

Avaliou-se a ocorrência de fatores de virulência e do sorotipo O157:H7 em 120 linhagens de Escherichia coli, isoladas de 80 casos de mastite clínica bovina e 40 de mastite subclínica. Verificou-se alfa-hemolisina em oito (6,7%) linhagens, isoladas de cinco casos de mastite clínica e três de mastite subclínica e em nenhuma das estirpes detectou-se enteroemolisina. A presença de sideróforos foi encontrada em 11 (9,2%) linhagens, sete de mastite clínica e quatro de subclínica. Em duas (1,7%) estirpes isoladas de mastite subclínica, identificou-se enterotoxina STa. Observou-se efeito citopático em células vero compatível com a produção de verotoxina-VT em cinco (4,2%) linhagens, duas de mastite clínica e três subclínicas. Em uma (0,8%) linhagem isolada de mastite clínica, detectou-se efeito citopático compatível com o fator necrosante citotóxico. Nenhuma estirpe apresentou-se sorbitol-negativa no MacConkey-sorbitol, tampouco aglutinou com o sorotipo O157:H7. Os antimicrobianos mais efetivos foram polimixina B (97,5%) e norfloxacina (95,8%). Observou-se multi-resistência a dois ou mais antimicrobianos em 24 (20%) estirpes, principalmente com o uso de ampicilina e ceftiofur.(AU)

The occurrence of different virulence factors and O157:H7 serotype investigation in 120 Escherichia coli strains isolated from clinical (80 cases) and subclinical (40 cases) bovine mastitis was evaluated. Alpha-haemolysin was detected in 8 (6.7%) strains (5 clinical and 3 subclinical cases). None strain showed enterohaemolysin production. E. coli growth under iron restriction conditions (siderophores production) was observed in 11 (9.2%) strains (7 clinical and 4 subclinical cases). STa enterotoxin was detected in 2 (1.7%) strains from subclinical cases. Cytotoxic effect in vero cells compatible with verotoxin-VT production was observed in 5 (4.2%) strains (2 clinical and 3 subclinical cases). One strain (0.8%) isolated from clinical mastitis showed cytophatic effect in vero cells compatible with cytotoxic-necrotic-factor production. None strain showed non-sorbitol fermenting colonies using sorbitol MacConkey agar and agglutination with specific anti-sera for E. coli O157:H7 serotype investigation. Polymixin B (97.5%) and norfloxacin (95.8%) were the most effective drugs. Multiple-drug resistance for 2 or more antimicrobials was observed in 24 (20.0%) strains, mainly with use of ampicillin and ceftiofur.(AU)