Prevalence of gastrointestinal parasitic infection in cows and buffaloes in Lower Dir, Khyber Pakhtunkhwa, Pakistan

Abstract Gastrointestinal (GI) Parasitic infection is a hot issue for cattle management. There is variation of GI parasites effects in sex, age of cattle, drinking water condition, nutrition, and severity of infection. Studies on prevalence of GI parasites among cattle population in Dir Lower are lacking. A total of 40 farms were selected randomly in six tehsil namely Tehsil Adenzai, Tehsil Timergara, Tehsil Balambat, Tehsil Munda ,Tehsil Lalqala, Tehsil Khall. Freshly cattle fecal samples were collected randomly from the selected farms during March 2018 till December 2018. Out of 314 buffaloes and cattle examined 58.59% (184/314) were positive for eggs, cyst/oocyst of one or more species of GI Parasites. The prevalence of parasitic infection was higher in Buffaloes 63.55% (75/118) as compared to Cow 55.61% (109/196) but the difference was not significant (p>0.05) Entamoeba,spp, Moniezia spp, Haemonchus spp and Coccidian spp were found in this study. The non-treated animals indicated the highest percentage of infection in cow 57.71% (101/175) and buffalo 68.13% (62/91).GI parasite prevalence in female animal were higher female cow 62.58% (87/139) and female buffalo 77.33% (58/75) as compared to male. But the difference is non-significant (p> 0.05) Yearling calves had the lower rate of GI parasitic infection than adults. Future investigations are necessary to evaluate the economic loss due to GI parasites in cattles.

Resumo A infecção gastrointestinal (GI) parasitária é um assunto importante para o manejo do gado. Existem variações nos efeitos dos parasitas GI quanto a sexo, idade do gado, condição da água potável, nutrição e gravidade da infecção. Faltam estudos sobre a prevalência de parasitas GI entre a população de gado em Lower Dir. Um total de 40 fazendas foi selecionado aleatoriamente em seis tehsil, nomeadamente Tehsil Adenzai, Tehsil Timergara, Tehsil Balambat, Tehsil Munda, Tehsil Lalqala, Tehsil Khall. Amostras fecais de gado fresco foram coletadas aleatoriamente das fazendas selecionadas de março de 2018 até dezembro de 2018. Dos 314 búfalos e bovinos examinados, 58,59% (184/314) foram positivos para ovos, cisto/oocisto de uma ou mais espécies de parasitas GI. A prevalência de infecção parasitária foi maior em Buffaloes 63,55% (75/118) em comparação com vaca 55,61% (109/196), mas a diferença não foi significativa (p > 0,05). Entamoeba spp, Moniezia spp, Haemonchus spp e Coccidian spp foram encontrados neste estudo. Os animais não tratados indicaram a maior porcentagem de infecção em vacas 57,71% (101/175) e búfalos 68,13% (62/91). A prevalência do parasita GI em fêmeas foi maior em vacas fêmeas 62,58% (87/139) e búfalas 77,33% (58/75) em comparação ao masculino. Mas a diferença não é significativa (p > 0,05). A modelagem linear geral mostrou que o tratamento do animal estava significativamente relacionado com a prevalência de parasitas GI. Bezerros de um ano tiveram a maior taxa de infecção parasitária gastrointestinal. Futuras investigações são necessárias para avaliar a perda econômica devido aos parasitas GI em bovinos.

Isospora bertoi n. sp. of the saffron finch, Sicalis flaveola (Aves: Passeriformes) from Brazil / Isospora bertoi n. sp. do canário-da-terra, Sicalis flaveola (Aves: Passeriformes) do Brasil

A new species of coccidia (Protozoa: Apicomplexa: Eimeriidae) is described from the saffron finch, Sicalis flaveola, is reported from Brazil. Sporulated oocysts of Isospora bertoi n. sp. are spherical to subspherical; 23.6 (21.1-26.5) x 22.0 (19.4-24.6) µm; shape Index (L/W ratio) 1.1 (1.0-1.2) µm; with bilayer smooth walls, ~1.1 μm. Micropyle and oocyst residuum are absent, but polar granules are present. Sporocysts are elongated ellipsoidal, 16.2 (13.6-17.9) x 10.1 (8.9-12.4) µm. Stieda body is button-shaped and Sub-Stieda and Para-Stieda body are absent. Sporocyst residuum is compact and composed of hundreds of granules scattered among the sporozoites. The sporozoite is claviform with an elongated posterior refractile body and nucleus.

Uma nova espécie de coccídio (Protozoa: Apicomplexa: Eimeriidae) do canário-da-terra, Sicalis flaveola, é relatada no Brasil. Oocistos esporulados de Isospora bertoi n. sp. são esféricos a subesféricos; 23,6 (21,1-26,5) x 22,0 (19,4-24,6) µm com índice morfométrico (L/W) de 1,1 (1,0-1,2); com parede lisa constituída por duas camadas com ~1,1 μm. Micrópila e resíduo de oocisto estão ausentes, mas grânulos polares estão presentes. Os esporocistos são elipsoidais alongados, 16,2 (13,6-17,9) x 10,1 (8,9-12,4) µm;. O corpo Stieda é em forma de botão, enquanto que os corpos de Sub-Stieda e Para-Stieda estão ausentes. O resíduo do esporocisto é compacto e constituido por centenas de grânulos espalhados entre os esporozoítos. O esporozoíto é claviforme com corpo e núcleo refráteis posteriores alongados.

Prevalence of gastrointestinal parasitic infection in cows and buffaloes in Lower Dir, Khyber Pakhtunkhwa, Pakistan / Prevalência de infecções parasitárias gastrointestinais em vacas e búfalos em Lower Dir, Khyber Pakhtunkhwa, Paquistão

Gastrointestinal (GI) Parasitic infection is a hot issue for cattle management. There is variation of GI parasites effects in sex, age of cattle, drinking water condition, nutrition, and severity of infection. Studies on prevalence of GI parasites among cattle population in Dir Lower are lacking. A total of 40 farms were selected randomly in six tehsil namely Tehsil Adenzai, Tehsil Timergara, Tehsil Balambat, Tehsil Munda ,Tehsil Lalqala, Tehsil Khall. Freshly cattle fecal samples were collected randomly from the selected farms during March 2018 till December 2018. Out of 314 buffaloes and cattle examined 58.59% (184/314) were positive for eggs, cyst/oocyst of one or more species of GI Parasites. The prevalence of parasitic infection was higher in Buffaloes 63.55% (75/118) as compared to Cow 55.61% (109/196) but the difference was not significant (p>0.05) Entamoeba,spp, Moniezia spp, Haemonchus spp and Coccidian spp were found in this study. The non-treated animals indicated the highest percentage of infection in cow 57.71% (101/175) and buffalo 68.13% (62/91).GI parasite prevalence in female animal were higher female cow 62.58% (87/139) and female buffalo 77.33% (58/75) as compared to male. But the difference is non-significant (p> 0.05) Yearling calves had the lower rate of GI parasitic infection than adults. Future investigations are necessary to evaluate the economic loss due to GI parasites in cattle's.

A infecção gastrointestinal (GI) parasitária é um assunto importante para o manejo do gado. Existem variações nos efeitos dos parasitas GI quanto a sexo, idade do gado, condição da água potável, nutrição e gravidade da infecção. Faltam estudos sobre a prevalência de parasitas GI entre a população de gado em Lower Dir. Um total de 40 fazendas foi selecionado aleatoriamente em seis tehsil, nomeadamente Tehsil Adenzai, Tehsil Timergara, Tehsil Balambat, Tehsil Munda, Tehsil Lalqala, Tehsil Khall. Amostras fecais de gado fresco foram coletadas aleatoriamente das fazendas selecionadas de março de 2018 até dezembro de 2018. Dos 314 búfalos e bovinos examinados, 58,59% (184/314) foram positivos para ovos, cisto/oocisto de uma ou mais espécies de parasitas GI. A prevalência de infecção parasitária foi maior em Buffaloes 63,55% (75/118) em comparação com vaca 55,61% (109/196), mas a diferença não foi significativa (p > 0,05). Entamoeba spp, Moniezia spp, Haemonchus spp e Coccidian spp foram encontrados neste estudo. Os animais não tratados indicaram a maior porcentagem de infecção em vacas 57,71% (101/175) e búfalos 68,13% (62/91). A prevalência do parasita GI em fêmeas foi maior em vacas fêmeas 62,58% (87/139) e búfalas 77,33% (58/75) em comparação ao masculino. Mas a diferença não é significativa (p > 0,05). A modelagem linear geral mostrou que o tratamento do animal estava significativamente relacionado com a prevalência de parasitas GI. Bezerros de um ano tiveram a maior taxa de infecção parasitária gastrointestinal. Futuras investigações são necessárias para avaliar a perda econômica devido aos parasitas GI em bovinos.

Gastrointestinal parasites in marsupials from Atlantic Forest of Northeastern Brazil / Parasitos gastrointestinais em marsupiais da Mata Atlântica do nordeste do Brasil

Os marsupiais estão envolvidos no ciclo de vida de vários patógenos de interesse médico e veterinário. O objetivo deste estudo foi relatar a ocorrência de parasitos gastrointestinais em marsupiais capturados em fragmentos da Mata Atlântica, estado de Sergipe, nordeste do Brasil. De junho de 2017 a janeiro de 2018, marsupiais foram capturados usando-se armadilhas, e foram obtidas amostras fecais frescas após defecação espontânea. Os animais foram identificados morfometricamente e as fezes analisadas pela técnica FLOTAC. Foram capturados 88 animais, sendo 37 Marmosops incanus, 30 Marmosa demerarae, 20 Didelphis albiventris e 01 Marmosa murina. A espécie mais parasitada foi D. albiventris (45,95%) seguida de M. incanus (43,24%) e M. demerarae (23,3%). No geral, ovos de helmintos foram detectados em 47,72% (42/88) das amostras, enquanto oocistos de protozoários em 32,95% (29/88). Ovos de Ancylostoma sp. predominaram sobre outros parasitos. Este estudo aponta para a ocorrência de parasitos gastrointestinais e contribui para um melhor entendimento do parasitismo em marsupiais que vivem em fragmentos florestais da Mata Atlântica.

Research for anti - Toxoplasma gondii antibodies in free-living ducks (Cairina moschata) from Rio de Janeiro, RJ, Brazil / Pesquisa de anticorpos anti - Toxoplasma gondii em patos (Cairina moschata) em vida livre do Rio de Janeiro, RJ, Brasil

Toxoplasmosis is a zoonosis determined by the protozoan Toxoplasma gondii with wide geographic distribution, which affects homeothermic animals, with felids being their definitive hosts and other mammals and birds being their intermediate hosts. Regarding the Latin American bird species Cairina moschata, there are few reports in Brazil of the exposure of these animals to this protozoan. Based on the above, this study aimed to report for the first time the exposure of C. moschata to infection by this parasite in Rio de Janeiro, Brazil, determining the serological frequency of anti-T. gondii antibodies in birds of this species. Sixty-seven specimens of C. moschata were captured in the vicinity of the Rio de Janeiro Zoo, and these animals at the time of capture were sorted by gender and type of feather. Blood samples from these animals were obtained by venipuncture to obtain the serum. The serum samples were subjected to IFAT for anti-T. gondii IgG. In general, the frequency of positive results was 58.21% (n=39), with a statistically significant association (p<0.05) between the animals with adult plumage and seropositivity. The exposure of ducks to T. gondii in the vicinity of the Zoo may indicate contamination of this area with protozoan oocysts.

Toxoplasmose é uma zoonose determinada pelo protozoário Toxoplasma gondii de ampla distribuição geográfica, que acomete animais homeotérmicos, sendo os felídeos os seus hospedeiros definitivos, e outros mamíferos e aves os seus hospedeiros intermediários. Em relação à espécie de ave latino-americana Cairina moschata, há poucos relatos no Brasil da exposição desses animais a esse protozoário. Mediante o exposto, este estudo teve como objetivo relatar pela primeira vez a exposição de C. moschata à infecção por esse parasito no Rio de Janeiro, Brasil, determinando a frequência sorológica de anticorpos anti-T. gondii em aves dessa espécie. Foram capturados, nos arredores do Zoológico do Rio de Janeiro, 67 espécimes de C. moschata, sendo esses animais, no momento da captura, triados pelo gênero e pelo tipo de pena. Amostras de sangue desses animais foram obtidas por venopunção para obtenção do soro. As amostras de soro foram submetidas à RIFI para pesquisa de anticorpos IgG anti-T. gondii. De forma geral, a frequência de positividade evidenciada foi de 58,21% (n=39), sendo observada associação estatística significativa (P<0,05) entre animais com plumagem de adultos e soropositividade. A exposição dos patos a T. gondii nos arredores do zoológico pode indicar a contaminação dessa área com oocistos do protozoário.

Molecular identification of Cryptosporidium baileyi in Muscovy ducks (Cairina moschata domesticus) in free-range production systems / Identificação molecular de Cryptosporidium baileyi em patos Muscovy (Cairina moschata domesticus) em sistemas de produção ao ar livre

Cryptosporidiosis is considered an infection with impact on animal health. It has been associated with high morbidity and mortality rates, leading to significant economic losses to the poultry industry. This study investigated the presence of Cryptosporidium spp. in domestic ducks of family Anatidae (Cairina moschata) from two rustic commercial aviaries located in the city of Rio de Janeiro, Brazil. A total of 315 fecal samples were collected from domestic ducks in two different areas (N=186 in area A and N=129 in area B). The microscopic analysis was conducted using a sugar centrifugal flotation technique for the identification of Cryptosporidium spp. oocysts, followed by PCR/sequencing analyses of the partial sequence of the 18S rDNA gene to determine the Cryptosporidium species. Of the 315 samples collected, only 10 (186/5.38%) from area A were positive for Cryptosporidium. The nucleotide sequence and phylogenetic analyses identified that all samples were identical (100%) and belonged to Cryptosporidium baileyi species, which is closely related to gastric species and of importance in animal health.

Criptosporidiose é considerada uma infeção com impacto na saúde animal. Tem sido associada a altas taxas de morbidade e mortalidade, levando a perdas econômicas significativas para a indústria avícola. Este estudo teve como objetivo investigar a presença de Cryptosporidium spp. em patos domésticos da família Anatidae (Cairina moschata) de dois aviários comerciais rústicos localizados na cidade do Rio de Janeiro, Brasil. Um total de 315 amostras fecais foram coletadas de patos domésticos em duas áreas (Área A / n= 186; Área B / n= 129). Amostras fecais foram processadas e utilizando a técnica de centrífuga e flutuação em solução saturada de açúcar para a identificação de oocistos de Cryptosporidium spp. através da observação microscópica. Naquelas amostras positivas, procedeu-se com o diagnóstico molecular para determinação de espécie de Cryptosporidium. Das 315 amostras coletadas, apenas 10 (186 / 5,38%) da área A foram positivas para Cryptosporidium. A sequência de nucleotídeos e as análises filogenéticas identificaram que todas as amostras eram idênticas (100%) e pertenciam à espécie Cryptosporidium baileyi, intimamente relacionada às espécies gástricas e de importância na saúde animal.

Contaminação das praias do município de Pelotas, por ovos, cistos e oocistos de parasitos gastrintestinais de cães / Contamination of the beaches of the municipality of Pelotas, by eggs, cysts and oocysts of gastrointestinal parasites of dogs

Este trabalho teve como objetivo detectar ovos, cistos e oocistos de parasitos com potencial zoonótico em fezes de cães encontradas na orla das praias de Pelotas/RS, Brasil. Entre os meses de setembro de 2018 e agosto de 2019, foram coletadas 12 amostras mensais em cada uma das três praias estudadas (Laranjal, Barro Duro e Colônia de pescadores Z3), correspondendo a 36 amostras por mês e totalizando 432 amostras. Várias técnicas foram utilizadas para as análises. Dentre as amostras analisadas, 73,4% (317/432) foram positivas para algum gênero de parasito. Ovos de Ancylostoma spp. foram prevalentes em todas as praias, estando presente em 54,6% das amostras. As praias de Z3 e Barro Duro apresentaram os maiores percentuais de contaminação, com médias de 85,4% e 84,7%, respectivamente, enquanto Laranjal apresentou a menor média (50,3%). Por serem locais públicos, a presença de ovos e cistos de parasitos zoonóticos indica um potencial risco para a população e animais que os frequentam. Desta forma, medidas devem ser adotadas com a finalidade de reduzir a contaminação nessas áreas e, consequentemente, diminuir a exposição a esses agentes.

This study aimed to detect eggs, cysts, and oocysts of parasites with zoonotic potential in dog feces found on the waterfront of the beaches of Pelotas, RS, Brazil. Between September 2018 and August 2019, 12 monthly samples were collected at each of the three beaches studied (Laranjal, Barro Duro, and Colony of fishermen Z3), corresponding to 36 samples per month and totaling 432 samples. Several techniques were used for analyses. Among the analyzed samples, 73.4% (317/432) were positive for some type of parasite. Ancylostoma spp. eggs were prevalent on all beaches, being present in 54.6% of the samples. Z3 and Barro Duro beaches showed the highest percentages of contamination, with averages of 85.4% and 84.7%, respectively, while Laranjal presented the lowest average (50.3%). As they are public places, the presence of eggs and cysts of zoonotic parasites indicates a potential risk for the population and animals that frequent them. Thus, measures must be adopted to reduce contamination in these areas and, consequently, decrease exposure to these agents.

Parasitos intestinais identificados em pelos de cães em Teresina/Piauí / Intestinal parasites identified in dog hair in Teresina/Piauí

A presença de cães em ambientes domiciliares se tornou bastante comum, porém é preciso manter cuidados com relação aos animais, uma vez que eles podem transmitir patógenos ao homem, causando, assim, doenças zoonóticas; e que uma das formas de transmissão pode ser por ingestão acidental de ovos de parasitos presentes nos pelos. Diante disso, o objetivo deste trabalho foi avaliar a ocorrência de parasitos intestinais em pelos de cães atendidos em duas clínicas veterinárias do município de Teresina/PI. Os pelos colhidos foram levados ao Laboratório de Parasitologia da UFPI para avaliação e passaram por um processo de lavagem por meio de uma técnica modificada para essa finalidade. De 59 amostras de pelos de cães, 11 foram positivas para helmintos ou protozoários, sendo encontrados ovos da família Taeniidae e do gênero Ancylostoma, além de cistos de Giardia spp. e oocistos de Cryptosporidium spp., importantes parasitos de potencial zoonótico. Uma vez parasitados, os cães podem oferecer risco de contaminação para os humanos, tanto por meio das fezes como por meio dos pelos. Conclui-se que ovos de helmintos da família Taeniidae e do gênero Ancylostoma e os protozoários do gênero Giardia e Cryptosporidium podem ficar aderidos nos pelos da região perianal de cães, sendo que as ocorrências destes últimos parasitos são os primeiros relatos nos pelos dessa espécie animal.

The presence of dogs in domestic environments has become quite common, but it is necessary to maintain care of the animals, since they can transmit pathogens to humans causing zoonotic diseases and one of the forms of transmission can be by accidental ingestion of parasite eggs present in the hairs. The objective of this study was to evaluate the occurrence of intestinal parasites in the hair of dogs attended at two veterinary clinics in the city of Teresina, PI. The collected hairs were taken to the Parasitology Laboratory at UFPI for evaluation and underwent a washing process through a technique modified for this purpose. Of 59 dog hair samples, 11 were positive for helminths or protozoa, being found eggs of the family Taeniidae and the genus Ancylostoma, besides to cysts Giardia spp. and oocysts of Cryptosporidium spp., important zoonotic potential parasites. Once parasitized, the dogs can pose a risk of contamination to humans through their faeces or through their hair. It is concluded that the eggs helminths of the Taeniidae family and of the Ancylostoma genus and the protozoa of the Giardia and Cryptosporidium genus can be adhered to the hairs of the perianal region of dogs, and these last parasites are the first reports in the hair in this animals species.

Evaluation of fecal smear methods for research on Cryptosporidium spp. oocysts in the feces of dairy calves / Avaliação dos métodos de esfregaço fecal para a pesquisa de oocistos de Cryptosporidium spp. nas fezes de bezerros da bovinocultura de leite

The objective of this study is to compare the direct fecal smear (DFS) and centrifugal sedimentation (CS) methods in the detection of Cryptosporidium spp. oocysts in fecal samples of dairy calves. One hundred and fourteen fecal samples were collected from calves aged up to six months from 10 dairy farms located in Palotina and Francisco Alves, Paraná, Brazil. The microscopic analysis revealed the presence of Cryptosporidium spp. oocysts in 51.75% (59/114) of the samples in both methods. In CS, 48.25% (55/114) of the samples were positive, while in DFS slides, only 6.14% (7/114) were positive. Only 4 samples were positive exclusively in DFS. To ensure that there were no false-negative results in the microscopic analysis, the 55 samples that were negative in both DFS and CS were selected for molecular analysis using the nested PCR (nPCR). Of these 55 samples, 24% (13/55) were positive and forwarded for sequencing part of the genome, which made it possible to identify C. parvum, C. bovis and C. ryanae. Besides the characterization of the Cryptosporidium species, it was possible to identify bacteria of the genus Acinetobacter interfering directly in the analyzed samples. The microscopic analysis also revealed higher sensitivity when CS was used to make the fecal smears. However, some samples that were negative in this technique had positive PCR results. Thus, molecular analysis is indicated to confirm cases of Cryptosporidium spp. Further studies are necessary to prove the specificities of the used primers since the results obtained in nPCR were positive for the protozoan but, when genetic sequencing was performed, Acinetobacter spp. was identified.(AU)

O objetivo deste trabalho foi comparar os métodos de esfregaço fecal direto (DFS) e centrífugo sedimentação (CS) para a pesquisa de oocistos de Cryptosporidium spp. em amostras fecais de bezerros leiteiros. Foram coletadas 114 amostras fecais de bezerros com até seis meses de idade, provenientes de dez propriedades leiteiras localizadas nos municípios de Palotina e Francisco Alves, Paraná. Por meio da análise microscópica, foi possível observar oocistos de Cryptosporidium spp. em 51,75% (59/114) das amostras. Pelo método da CS foi identificada positividade em 48,25% (55/114) das amostras, enquanto nas lâminas pelo método do esfregaço fecal direto (DFS), apenas 6,14% (7/114) foram positivas. Somente 4 amostras foram positivas exclusivamente no método do DFS. Para assegurar que na análise microscópica não houvesse resultados falso-negativos, as 55 amostras negativas para os dois métodos de confecção de lâminas (DFS e CS) foram selecionadas para análise molecular por meio da técnica de Nested PCR. Das 55 amostras submetidas a nPCR, 24% (13/55) apresentaram-se positivas e foram encaminhadas para o sequenciamento genético de uma porção do genoma, o qual possibilitou identificar as espécies de C. parvum, C. bovis e C. ryanae. Além da caracterização das espécies de Cryptosporidium, foi possível identificar a presença de bactérias do gênero Acinetobacter interferindo diretamente nas amostras analisadas. A análise microscópica revelou maior sensibilidade quando o método de CS foi usado para a confecção dos esfregaços fecais, entretanto, amostras negativas por meio dessa metodologia apresentaram resultados positivos na nPCR. Desta forma, para a confirmação dos casos de Cryptosporidium spp., é indicado a realização da análise molecular. Novos estudos são necessários para se comprovar a especificidade dos primers utilizados, uma vez que na nPCR o resultado obtido foi positivo, porém ao realizar o sequenciamento genético houve a identificação de Acinetobacter spp.(AU)

Evaluation of different transmission routes of Cystoisospora suis in a farm using prophylactic toltrazuril / Avaliação de diferentes vias de transmissão de Cystoisospora suis em uma granja utilizando toltrazuril profilático

Coccidiosis is an enteric disease caused by protozoa, especially Cystoisospora suis which can lead to large losses in production. Its transmission occurs through different routes, mainly affecting piglets in the first weeks of life and normally progressing with diarrhea unresponsive to antibiotic therapy. The objective of this work was to evaluate, in two seasons of the year, the occurrence of C. suis in piglets and sows, the transmission routes and source of infection and the influence of the preventive use of toltrazuril on these epidemiological parameters. Two experiments were carried out, the first being in winter; under the influence of prophylactic use of toltrazuril; and the second in the summer, six months after the suspension of the prophylactic use of toltrazuril. The study included 36 sows (18 controls, 18 treated toltrazuril). The following samples were collected: rest of the sows, water from the individual drinkers in each cage, organic swabs present in the keepers' shoes, environmental swabs pre and housing, present in the cages in the rooms and accumulations of the maternity cage. As were disclosed to coproparaological and PCR exams. The presence of C. bebe ocysts is the winter and summer control following samples: sow feces (2.84%) of the winter and summer control groups (7.60%) of the winter and summer treated groups and the treated group winter and summer, rectal swabs from litters (9.03%) in the control and treated groups in winter, collected from the environment (20.22%) from all groups. Like others, they were negative for the presence of the parasite. There was no difference between the control and toltrazuril groups and no positive samples were observed in the summer. The possible route of transmission of the agent in the present work was the water from the douros. Preventive therapy with toltrazuril in farms with low infection pressure is not necessary to control C. suis.(AU)

A coccidiose é uma doença entérica, causada por protozoários, destacando o Cystoisospora suis que pode levar a grandes perdas na produção. Sua transmissão ocorre por diferentes rotas, afetando principalmente leitões nas primeiras semanas de vida e cursando normalmente com quadros de diarreia não responsivos à antibioticoterapia. O objetivo do trabalho foi avaliar, em duas estações do ano, a ocorrência de C. suis em leitões e matrizes, as vias de transmissão e fonte de infecção e a influência do uso preventivo do toltrazuril sobre estes parâmetros epidemiológicos, Dois experimentos foram realizados, sendo o primeiro no inverno; sob efeito do uso profilático do toltrazuril; e o segundo no verão, seis meses após a suspensão do uso profilático do toltrazuril. O estudo incluiu 36 porcas (18 controles, 18 tratadas com toltrazuril). As seguintes amostras foram coletadas: fezes das porcas, água dos bebedouros individuais de cada gaiola, suabes retais de cada leitegada, resíduos orgânicos presentes no calçado dos tratadores, suabes ambientais pré e pós alojamento, insetos presentes nas salas analisadas e fezes acumuladas nas gaiolas da maternidade. As amostras foram submetidas a exames coproparasitológicos e PCR. A presença de oocistos de C. suis foi detectada nas seguintes amostras: fezes das porcas (2,84%) dos grupos controle do inverno e verão, água dos bebedouros (7,60%) dos grupos tratado do inverno e verão e do grupo controle do verão, suabes retais das leitegadas (9,03%) nos grupos controle e tratado no inverno, fezes coletadas do ambiente (20,22%) de todos os grupos. As outras amostras foram negativas para a presença do parasita. Não houve diferença entre o grupo controle e tratado e não foram observadas amostras positivas no verão. A possível via de transmissão do agente no presente trabalho foi a água dos bebedouros. A terapia preventiva com toltrazuril em granjas com baixa pressão de infecção não é necessária para o controle de C. suis.(AU)

Epidemiological aspects of the occurrence of anti-Sarcocystis spp. andanti-Toxoplasma gondii antibodies in dogs in the Northern region of Brazil / Aspectos epidemiológicos da ocorrência de anticorpos anti-Sarcocystisspp. e anti-Toxoplasma gondii em cães da região norte do Brasil

We conducted aseroepidemiological study on the occurrence of anti-Sarcocystisspp. and anti-Toxoplasma gondii antibodies in dogs from family farming properties in the municipality of Ji-Paraná, Rondônia.Blood samples were collected from apparently healthy dogs between September 2012 and November 2013. In total, 181 blood serum samples were analyzed using an indirect immunofluorescence assay, among which 57 (31.49%) and 20 (11.04%) were positive for anti-T. gondii and anti-Sarcocystis spp., respectively. Statistical analyses showed that the type of food fed to the dogs was associated with the occurrence of anti-Sarcocystisspp. antibodies. In contrast, age and access to bovine carcasses were the risk factors for anti-T. gondii.The high occurrence of seropositive dogs for Sarcocystis spp. and T. gondii evidences the wide distribution of these agents in the studied area, possibly due to human and animal exposure to these protozoan species. In addition, anti-T. gondii antibodies were directly proportional to dog age. The increase in the number of positive animals with age was statistically significant. Furthermore, high antibody titers (up to 800) against Sarcocystis spp. in dogs suggest the possibility of recent exposure, in addition to environmental contamination by oocysts/sporocysts eliminated by the feces of these animals.

Conduzimos um estudo soroepidemiológico sobre a ocorrência de anticorpos anti- Sarcocystis spp. e anti-Toxoplasma gondiiem cães de propriedades de agricultura familiar no município de Ji-Paraná, Rondônia. Amostras de sangue foram coletadas de cães aparentemente saudáveis, entre setembro de 2012 e novembro de 2013. Ao todo, foram analisados 181 soros sanguíneos por meio do ensaio de imunofluorescência indireta, sendo positivas 57 (31,49%) e 20 (11,04%) amostras para anticorpos anti-T. gondii e anti-Sarcocystis spp., respectivamente. As análises estatísticas demonstraram que o tipo de alimentação fornecida aos cães esteve associado à ocorrência de anticorpos anti-Sarcocystis spp. Em contraste a idade e o acesso à carcaça bovina foram fatores de risco para a presença de anticorpos anti-T. gondii. A alta ocorrência de cães soropositivos para Sarcocystis spp. e T. gondii evidencia a ampla distribuição desses agentes na área estudada, possivelmente devido à exposição humana e animal a essas espécies de protozoários. Além disso, o resultado dos anticorpos anti-T. gondii relacionados a idade do cão mostraram diferença estatística, com aumento significativo no número de animais positivos com a idade. Além disso, altos títulos de anticorpos (até 800) contra Sarcocystis spp. em cães sugerem a possibilidade de exposição recente, além da contaminação ambiental por oocistos/esporocistos eliminados pelas fezes desses animais.

Validation of a one-tube nested real-time PCR assay for the detection of Cryptosporidium spp. in avian fecal samples / Validação da nested PCR em tempo real em um tubo para detecção de Cryptosporidium spp. em amostras fecais de aves

Abstract The aim of this study was to validate a one-tube nested real-time PCR assay followed by genetic sequencing to detect and identify Cryptosporidium species and genotypes in birds. A total of 443 genomic DNA extracted from avian fecal samples were analyzed by one-tube nested real-time PCR and conventional nested PCR. By one-tube nested real-time PCR, 90/443 (20.3%) samples were positive for Cryptosporidium spp. In contrast, 36/443 (8.1%) samples were positive for Cryptosporidium spp. by conventional nested PCR. The analytical sensitivity test showed that one-tube nested real-time PCR detects approximately 0.5 oocyst (2 sporozoites) per reaction. An evaluation of analytical specificity did not reveal amplification of microorganisms that commonly present nonspecific amplification with primers used for the diagnosis of Cryptosporidium spp. The repeatability analysis showed the same result in 27 out of 30 samples (90%). As for the reproducibility of one-tube nested real-time PCR, 24 of the 30 samples examined (80%) showed the same result. All the 90 samples amplified by one-tube real-time nested PCR were successfully sequenced, leading to the identification of C. baileyi, C. galli, C. meleagridis, C. proventriculi, and Cryptosporidium avian genotype I. Genetic sequencing of conventional nested PCR amplicons was successful in 10/36 (27.8%) of positive samples.

Resumo O objetivo deste trabalho foi validar um protocolo de nested PCR em tempo real em um tubo (nPCR-TR-1T) seguida de sequenciamento genético para detectar e caracterizar as espécies e genótipos de Cryptosporidium em aves. Um total de 443 amostras de DNA genômico, extraído de amostras fecais de aves, foi analisado pela nPCR-TR-1T e pela nested PCR convencional. Pela nPCR-TR-1T, foi observada positividade para Cryptosporidium spp. de 20,3% (90/443), em contraste com a nested PCR convencional, que apresentou positividade de 8,1% (36/443). O teste de sensibilidade analítica mostrou que a nPCR-TR-1T detecta aproximadamente 0,5 oocisto (2 esporozoítos) por reação. A avaliação da especificidade analítica não revelou amplificação de microrganismos que comumente apresentam amplificação inespecífica com primers utilizados para o diagnóstico de Cryptosporidium spp. O cálculo da repetibilidade evidenciou o mesmo resultado em 27 de 30 amostras (90%). Em relação à reprodutibilidade da nPCR-TR-1T, foi observado o mesmo resultado em 80% (24/30) das amostras examinadas. Foi possível realizar o sequenciamento em todas as 90 amostras amplificadas pela nPCR-TR-1T, com identificação de C. baileyi, C. galli, C. meleagridis, C. proventriculi e Cryptosporidium genótipo I em aves. O sequenciamento dos fragmentos amplificados pela nested PCR convencional foi possível em 10/36 (27,8%) das amostras positivas.

Statistical Prediction of the Peak Point (Time) Required for Release of Maximum Number of Sporocysts after Eimeria Tenella Oocyst Excystation

The excystation of sporozoites from the oocyst of genus Eimeria is essential for conducting successful in vitro assays on the parasite. We tried to find the most efficient excystation conditions using glass beads for the in vitro excystation of E. tenella oocysts. The oocyst suspension was mixed with glass beads in a ratio of 1:1, and vortexed by various combinations of vortexing times and speeds in a Vortex Mixer. We analyzed the sporocyst-release data by regression analysis, and the peak point (duration) of excystation was predicted after differentiation of the obtained regression equation. The results indicated that the 1-mm glass beads at 2,000 rpm could release the maximum number of sporocysts in 1.64 min. Thus, excystation of E. tenella oocysts was considered to be the most effective under these conditions. Our data presented the best conditions for efficient excystation of E. tenella oocysts.(AU)

Statistical Prediction of the Peak Point (Time) Required for Release of Maximum Number of Sporocysts after Eimeria Tenella Oocyst Excystation

The excystation of sporozoites from the oocyst of genus Eimeria is essential for conducting successful in vitro assays on the parasite. We tried to find the most efficient excystation conditions using glass beads for the in vitro excystation of E. tenella oocysts. The oocyst suspension was mixed with glass beads in a ratio of 1:1, and vortexed by various combinations of vortexing times and speeds in a Vortex Mixer. We analyzed the sporocyst-release data by regression analysis, and the peak point (duration) of excystation was predicted after differentiation of the obtained regression equation. The results indicated that the 1-mm glass beads at 2,000 rpm could release the maximum number of sporocysts in 1.64 min. Thus, excystation of E. tenella oocysts was considered to be the most effective under these conditions. Our data presented the best conditions for efficient excystation of E. tenella oocysts.

Copro-PCR in the detection and confirmation of Toxoplasma gondii oocysts in feces of stray and domiciled cats / Copro-PCR na detecção e confirmação de oocistos de Toxoplasma gondii emfezes de gatos errantes e domiciliados

Molecular methods such as Copro-PCR stand out in the diagnosis of T. gondii, because they are highly sensitive and specific, and can distinguish T. gondii from other morphologically similar coccids. The purpose was the detection of Toxoplasma gondii copro-prevalence by polymerase chain reaction in 149 fecal samples from stray and domiciled cats, using three distinct markers (B5-B6, 18S and 529bp RE). Oocysts of T. gondii/H. hammondi were detected in 15.4% by parasitology fecal tests (PFT), and 4% of these oocysts were positively identified as T. gondii by Copro-PCR. The presence of T. gondii genetic material was detected in 16.1%, but 12% of the samples that tested positive by Copro-PCR were negative in PFT. Samples with discordant results were subjected to a new Copro-PCR with 18S marker and a 529, and of the 17 samples, 9 contained T. gondii genetic material. A comparison of the PFT and the molecular methods showed the latter was more sensitive, since it detected 22.1% while the PFT detected 15.4%. Demonstrating the high sensitivity and specificity of the Copro-PCR, particularly with the association of primers (k=0.809), but also confirms the importance of using molecular techniques in laboratories, since Copro-PCR was able to detect samples considered negative by PFT.(AU)

Métodos moleculares como a Copro-PCR se destacam no diagnóstico de T. gondii por serem altamente sensíveis e específicos, podendo distinguir T. gondii de outros coccídeos morfologicamente semelhantes. O objetivo foi a detecção da coproprevalência de Toxoplasma gondii por reação em cadeia da polimerase, em 149 amostras fecais de gatos errantes e domiciliados, utilizando-se três marcadores distintos (B5-B6, 18S e 529pb RE). Oocistos de T. gondii/H. hammondi foram detectados em 15,4% pelos exames parasitológicos de fezes (EPF), e 4% desses oocistos foram identificados positivamente como T. gondii pela Copro-PCR. A presença de material genético de T. gondii foi detectada em 16,1%, mas 12% das amostras positivas pelo Copro-PCR foram negativas no EPF. As amostras com resultados discordantes foram submetidas a uma nova Copro-PCR com os marcadores 18S e 529 e, das 17 amostras, 9 continham material genético de T. gondii. A comparação do EPF com os métodos moleculares mostrou que esse último foi mais sensível, pois detectou 22,1%, enquanto o EPF detectou 15,4%. Isso demonstra a alta sensibilidade e especificidade da Copro-PCR, principalmente com a associação de marcadores (k = 0,809); mas também confirma a importância do uso de técnicas moleculares em laboratórios, uma vez que a Copro-PCR foi capaz de detectar amostras consideradas negativas pelo EPF.(AU)

Endoparasites in fecal samples from anatids in captivity in São Paulo, Brazil / Endoparasitos em amostras fecais de anatídeos em cativeiro em São Paulo, Brasil

The objective of the present study was to identify the intestinal parasites with the highest prevalence in anatids that were reared extensively in the city of São Paulo, through coproparasitological examinations. Fecal samples (n=108) were collected at two times, with an interval of two months between them, during the year 2018. The samples were constituted from a pool of feces, and one sample was collected from each enclosure. The samples were identified as belonging to 13 species of anatids (Aix galericulata, Aix sponsa, Anser abyssinia, Chenonetta jubata, Chloephaga melanoptera, Chloephaga picta, Lophodytes cucullatus, Tadorna cana, Tadorna ferrugínea, Tadorna radjah, Tadorna tadorna, Tadorna tadornoide and Tadorna variegata). Samples of birds with or without clinical symptoms of endoparasitosis were then collected. The Coproplus® test was used to make the coproparasitological diagnosis and subsequently the material was examined individually, at Santo Amaro University in São Paulo. It was observed that 48.14% of the enclosures had birds infected by one or more endoparasites. Parasites of the order Coccidia presented the highest prevalence (22.22%), followed by those of the orders Trichuroidea (10.18%) and Ascaridia (4.63%). Moreover, Balantidium sp. was found, the cycle and relevance of these ciliates in birds is uncertain.(AU)

O objetivo do presente estudo foi identificar os parasitos intestinais de maior prevalência em anatídeos provenientes de uma criação extensiva no município de São Paulo, por meio da realização de exame coproparasitológico. Foram coletadas 108 amostras fecais em dois momentos, com intervalo de dois meses entre eles, durante o ano de 2018. As amostras foram constituídas de um pool de fezes, e coletada uma amostra para cada recinto por coleta. Foi realizada a identificação das espécies e estas pertenciam a 13 espécies de anatídeos (Aix galericulata, Aix sponsa, Anser abyssinia, Chenonetta jubata, Chloephaga melanoptera, Chloephaga picta, Lophodytes cucullatus, Tadorna cana, Tadorna ferrugínea, Tadorna radjah, Tadorna tadorna, Tadorna tadornoide e Tadorna variegata). Em seguida foram coletadas as amostras de aves com sintomatologia clínica ou não de endoparasitoses. Para o diagnóstico coproparasitológico e coleta foi utilizado o teste Coproplus® e posteriormente, o material foi examinado individualmente na Universidade Santo Amaro. Observou-se que 48,14% dos recintos possuíam animais infectados por um ou mais endoparasitos. Houve maior prevalência para parasitos da ordem Coccidia (22,22%), seguido pela ordem Trichuroidea (10,18%) e Ascaridia (4,63%) e como achado o Balantidium sp. que possui ciclo e relevância incerta em aves.(AU)

Evaluation of quantitative polymerase chain reaction for the detection of Toxoplasma gondii oocysts shed by cats / Avaliação da reação em cadeia da polimerase quantitativa para a detecção de oocistos de Toxoplasma gondii eliminados por gatos

Abstract Felines are definitive hosts of Toxoplasma gondii and can shed oocysts in their feces, contaminating the environment. Sporulated oocysts are highly resistant to the environment and have higher infectivity, which are attributed to many toxoplasmosis outbreaks. The aim of the present study was to evaluate a quantitative polymerase chain reaction (qPCR) technique for the detection of T. gondii oocysts shed by cats. Twelve cats from a previous vaccine experiment were challenged orally with 600 cysts of the TgDoveBr8 strain on day 72. Fecal samples were collected daily using the centrifugal flotation technique, with microscopic examination (Sheather technique) and qPCR for 20 days after the challenge. Cats from all groups shed oocysts in their feces. Five negative cats in the Sheather were positive according to qPCR on the 3rd day post-inoculation (dpi). Oocysts were detected on the 4th dpi using the Sheather; however, there was no statistical difference between the two methods (p=0.1116). In addition, there was no statistically significant difference in oocyst shedding between the groups according to the Sheather technique (p=0.6534) and qPCR (p=0.9670). In conclusion, these results demonstrate that qPCR can be used as an alternative to the Sheather to detect and quantify T. gondii oocysts.

Resumo Felinos são hospedeiros definitivos do Toxoplasma gondii e podem eliminar oocistos nas fezes, contaminando o meio ambiente. Oocistos esporulados são altamente resistentes ao meio ambiente com elevada infectividade, sendo atribuído a muitos surtos de toxoplasmose. O objetivo do estudo foi avaliar a reação em cadeia da polimerase quantitativa (qPCR) para a detecção de oocistos de T. gondii eliminados por gatos. Doze gatos de um experimento prévio de vacina foram desafiados por via oral com 600 cistos da cepa TgDoveBr8 no dia 72. Amostras fecais foram coletadas diariamente pela técnica de centrifugo-flutuação seguida de exame microscópico (técnica de Sheather) e qPCR por 20 dias após desafio. Gatos de todos os grupos eliminam oocistos nas fezes. Cinco gatos negativos na técnica Sheather foram positivos de acordo com a qPCR no 3º dia pós-inoculação (dpi). Oocistos foram detectados no 4º dpi no Sheather; entretanto, não houve diferença estatística entre os dois métodos (p=0,1116). Não houve diferença estatisticamente significativa na eliminação de oocistos entre os grupos de acordo com a técnica de Sheather (p = 0,6534) e qPCR (p = 0,9670). Em conclusão, esses resultados demonstram que qPCR pode ser usada como uma alternativa ao Sheather para detectar e quantificar oocistos de T. gondii.

Prevalence of infection by Cryptosporidium spp. in calves and associated risk factors in Northeastern Brazil / [Prevalência da infecção por Cryptosporidium spp. e fatores de risco associados em bezerros do Nordeste do Brasil]

Cryptosporidium spp. are zoonotic protozoa, frequently associated with diarrhea in calves, which are responsible for important economic losses. The aim of this study was to assess the prevalence of infection by Cryptosporidium spp. and its associated risk factors among calves raised in a milk production region of Northeastern Brazil. Fecal samples (n = 385) were obtained from young animals (up to ten months old) and evaluated by means of centrifugal fecal sedimentation in formalin-ether followed by the modified Ziehl-Neelsen staining technique. In addition, Odds Ratio (OR) was calculated to evaluate associations between variables and infection by these protozoa. Out of all samples analyzed, 25.7% (99/385) scored positive for the presence of Cryptosporidium spp. Contact with other species (goat and sheep) (OR = 3.33; p = 0.000), use of a semi-intensive rearing system (OR = 1.70; p = 0.024) and absence of hygienic conditions (fecal contamination of food and water) (OR = 1.64; p = 0.029) were considered to be risk factors. Data herein reported shows that the implementation of hygienic-sanitary measures on the farms studied, it is imperative to reduce Cryptosporidium spp. infection and consequently the economic impact caused by this pathogen.(AU)

Cryptosporidium spp. são protozoários zoonóticos frequentemente associados à diarreia em bezerros e responsáveis por importantes perdas econômicas. O objetivo deste estudo foi avaliar a prevalência e os fatores de risco associados à infecção por Cryptosporidium spp. em bezerros de propriedades leiteiras no Nordeste do Brasil. Amostras fecais (n = 385) foram obtidas de animais jovens (até 10 meses de idade) e avaliadas por centrífugo-sedimentação em formol éter, seguida da técnica de coloração de Ziehl-Neelsen modificada. A Odds Ratio (OR) foi calculada para avaliar a associação entre variáveis e infecção pelos protozoários. De todas as amostras analisadas, 25,7% (99/385) apresentaram oocistos de Cryptosporidium spp. Contato com outras espécies (caprino e ovino) (OR = 3,33; p = 0,000), sistema semi-intensivo de criação (OR = 1,70; p = 0,024) e ausência de condições higiênicas (contaminação fecal do alimento e da água) (OR = 1,64; p = 0,029) foram considerados fatores de risco. Com base nos resultados, é imprescindível a adoção de medidas higiênico-sanitárias nas fazendas estudadas, a fim de reduzir infecção por Cryptosporidium spp. e o impacto econômico causado por esse patógeno.(AU)

Identification and Characterization of the ATG8, a Marker of Eimeria tenella Autophagy / Identificação e Caracterização do ATG8, um marcador de autofagia em Eimeria tenella

Autophagy plays an important role in maintaining cell homeostasis through degradation of denatured proteins and other biological macromolecules. In recent years, many researchers focus on mechanism of autophagy in apicomplexan parasites, but little was known about this process in avian coccidia. In our present study. The cloning, sequencing and characterization of autophagy-related gene (Etatg8) were investigated by quantitative real-time PCR (RT-qPCR), western blotting (WB), indirect immunofluorescence assays (IFAs) and transmission electron microscopy (TEM), respectively. The results have shown 375-bp ORF of Etatg8, encoding a protein of 124 amino acids in E. tenella, the protein structure and properties are similar to other apicomplexan parasites. RT-qPCR revealed Etatg8 gene expression during four developmental stages in E. tenella, but their transcriptional levels were significantly higher at the unsporulated oocysts stage. WB and IFA showed that EtATG8 was lipidated to bind the autophagosome membrane under starvation or rapamycin conditions, and aggregated in the cytoplasm of sporozoites and merozoites, however, the process of autophagosome membrane production can be inhibited by 3-methyladenine. In conclusion, we found that E. tenella has a conserved autophagy mechanism like other apicomplexan parasites, and EtATG8 can be used as a marker for future research on autophagy targeting avian coccidia.(AU)

A autofagia desempenha um papel importante na manutenção da homeostase celular através da degradação de proteínas desnaturadas e outras macromoléculas biológicas. Nos últimos anos, muitos pesquisadores se concentraram no mecanismo da autofagia em parasitas apicomplexos, mas pouco se sabe sobre esse processo na coccidia aviária. No presente estudo, a clonagem, sequenciamento e caracterização de gene relacionado à autofagia Etatg8 foram investigados pela PCR quantitativa em tempo real (RT-qPCR), mancha ocidental (WB), ensaios indiretos de imunofluorescência (IFAs) e microscopia eletrônica de transmissão (TEM), respectivamente. Os resultados mostraram que o gene Etatg8 de E. tenella possui uma ORF de 375 bp, codificando uma proteína de 124 aminoácidos com estrutura e propriedades semelhantes à de outros apicomplexos. RT-qPCR revelou que Etatg8 é expresso durante os quatro estágios de desenvolvimento de E. tenella. Entretanto, seus níveis transcricionais foram significativamente mais elevados na fase de oocisto não esporulados. Os ensaios de manchas ocidental (WB) e de imunofluorescência (IFA) mostraram que a proteína EtATG8 foi lipidada para ligar-se à membrana do autofagossomo sob condições de deficiência nutritiva (em presença de rapamicina) e se agregar no citoplasma de esporozoítas e merozoítas. No entanto, o processo de produção de membrana do autofagossomo pode ser inibido por um inibidor de autofagia (3-meetiladeninatiladenina, 3-MA). Em conclusão, foi demonstrado que E. tenella tem um mecanismo de autofagia conservado, semelhante ao de outros parasitas apicomplexos, e que EtATG8 pode ser usado como um marcador para futuras pesquisas sobre autofagia direcionada à coccidiose aviária.(AU)

Preservação de ovos de helmintos e cistos de protozoários em iodo-mercurato de potássio. Revisitando experimentos realizados há cerca de 40 anos / Preservation of helminth eggs and protozoan cysts in potassium iodine-mercurate. Revisiting experiments carried out about 40 years ago

Foi realizada reavaliação sobre o estado de preservação de ovos de helmintos e cistos de protozoários mantidos por cerca de 40 anos em solução de iodo‑mercurato de potássio a 0,2%. Foi observado que ovos de Schistosoma mansoni, Ancylostomidae e Trichuris trichiura e oocistos de Isospora belli mantiveram‑se em condições adequadas para a sua identificação ao microscópio ótico comum. No material examinado, foi possível verificar a presença de miracídio em ovo de Schistosoma mansoni, forma larvada em ovo de T. trichiura e esporozoitos em oocistos de I. belli.

A reassessment was carried out on the preservation status of helminth eggs and protozoan cysts maintained for about 40 years in 0.2% potassium iodine‑mercurate solution. It was observed that Schistosoma mansoni, Ancylostomidae and Trichiuris trichiura eggs and Isospora belli oocysts were kept in conditions suitable for their identification under a common light microscope. In the examined material, it was possible to verify the presence of miracidium in S. mansoni egg, larvae in T. trichiura egg and sporozoites in I. belli oocysts.