Estudo dos efeitos morfológicos, comportamentais e epigenéticos da administração de doxorrubicina no período da infância de ratos Wistar, tratados ou não com resveratrol ou curcumina, e avaliados em idade adulta

As antraciclinas são potentes agentes quimioterápicos que revolucionaram o manejo do câncer infantil. Elas formam a base de uma série de protocolos terapêuticos usados para tratar tumores sólidos e hematológicos em crianças. Efeitos físicos e psicológicos adversos de longo prazo acompanham a sobrevivência de muitas das crianças curadas e submetidas a protocolos quimioterapêuticos e podem não se manifestar até a idade adulta, afetando diversos aspectos da função cognitiva, incluindo alterações de atenção, memória, velocidade de processamento, intelecto, desempenho acadêmico e saúde emocional. Objetivo: O presente estudo busca investigar a ocorrência da disfunção cognitiva em ratos adultos tratados com doxorrubicina (DOX) durante a infância, em associação ou não com o resveratrol (RSV), um polifenol natural que possui efeitos nootrópicos, ou com a curcumina (CUR), um pigmento amarelo extraído da Curcuma longa, que possui ação antioxidante e anti-inflamatória, analisando-se os possíveis efeitos morfológicos, comportamentais e epigenéticos de tais administrações. Métodos: Foram utilizados ratos Wistar machos, com duas semanas de idade, injetados com DOX (2,5 mg/kg, uma vez por semana, via intraperitoneal - IP, durante três semanas e 0,1 mL/kg/dia de água destilada por via oral - VO), em associação ou não com RSV (10 mg/kg/dia, durante o mesmo período, VO), ou com CUR (100 mg/kg/dia, durante o mesmo período, VO). Os animais do grupo controle receberam uma injeção semanal de solução fisiológica a 0,9% por via IP (mesmo volume) e água destilada diariamente (VO). Durante o período experimental, foram realizados estudos comportamentais, incluindo o teste de campo aberto, o teste de reconhecimento de novos objetos e o teste do labirinto de Barnes. Os encéfalos foram coletados e analisados pela técnica de coloração com hematoxilina-eosina e por imuno-histoquímica para a GFAP (glial fibrillary acidic protein) em astrócitos; para o marcador de micróglia Iba1 e para o marcador de apoptose caspase-3. As áreas analisadas incluíram o córtex frontal, o hipocampo (CA1, CA2 e CA3) e o hipotálamo. A análise morfométrica demonstrou que os ratos injetados com DOX apresentaram maior expressão de GFAP, Iba1 e caspase 3 em todas as áreas analisadas e que, tanto o RSV, quanto a CUR, foram capazes de diminuir tais expressões. A administração de DOX durante a infância foi capaz de causar prejuízos à memória espacial, e às memórias de curto e de longo prazo na vida adulta dos animais. Tais alterações foram prevenidas pela CUR, mas não pelo RSV. A DOX, em associação ou não com RSV e CUR, também demonstrou interferir, a longo prazo, na atividade de enzimas modificadoras da metilação (SET1A, SUV39, EZH2, KDM5B, KDM4A e KDM6B) e da acetilação de histonas (HAT1, SIRT1 e PCAF) na região do hipocampo destes animais. Os resultados sugerem que a astrogliose, a microgliose e a apoptose apresentadas na idade adulta estão relacionadas com o uso de DOX durante a infância e que o tratamento com RSV ou CUR foi capaz de minimizar tais alterações. No entanto, só a CUR demonstrou exercer efeito protetor em relação aos déficits de memória induzidos pela quimioterapia. Conclusão: Por fim, as alterações encontradas em importantes enzimas moduladoras da metilação e da acetilação de histonas na região do hipocampo sugerem que tais alterações morfológicas e comportamentais podem ser influenciadas por fatores epigenéticos e que o RSV e a CUR podem exercer ações protetivas aos danos tardios induzidos pela quimioterapia na infância.

Anthracyclines are potent chemotherapeutic agents that have revolutionized childhood cancer management. They form the backbone of a range of therapeutic treatments used to treat solid, hematologic tumors in children. Long-term adverse physical and psychological effects accompany cured children following chemotherapeutic protocols and may not manifest until adulthood, affecting several aspects of cognitive function, including changes in attention, memory, processing speed, intellect, performance academic and emotional health. The present study aims to investigate the occurrence of cognitive dysfunction in adult rats treated with doxorubicin (DOX) during childhood, in association or not with resveratrol (RSV), a natural polyphenol that has nootropic effects, or with curcumin (CUR), a yellow pigment extracted from Curcuma longa, which has antioxidant and anti-inflammatory actions, analyzing the morphological, behavioral, and epigenetic effects of such administrations. Two-week-old male Wistar rats injected with DOX (2.5 mg / kg, once a week, intraperitoneally - IP, for three weeks and 0.1 mL / kg / day of distilled water by oral - VO), in association or not with RSV (10 mg / kg / day, during the same period, VO), or with CUR (100 mg / kg / day, during the same period, VO). The animals in the control group received a weekly injection of 0.9% saline solution via IP (same volume) and daily distilled water (VO). During the experimental period, behavioral studies were carried out, including the open field test, the new object recognition test, and the Barnes maze test. The brains were collected and analyzed by the hematoxylin-eosin staining technique and by immunohistochemistry for GFAP (glial fibrilary acidic protein) in astrocytes; for the microglia marker Iba1 and for the apoptosis marker caspase-3. Areas investigated included the frontal cortex, the hippocampus (CA1, CA2 and CA3) and the hypothalamus. Morphometric analysis showed that rats injected with DOX presented increased expression of GFAP, Iba1 and caspase 3 in all areas and that both RSV and CUR were able to prevent such increases. The administration of DOX during childhood was able to impair spatial memory, and short- and long-term memories during adult life. Such deficits were prevented by CUR administration, but not with RSV. DOX, in association or not with RSV and CUR also affected, in the long term, the activity of methylation modifying enzymes (SET1A, SUV39, EZH2, KDM5B, KDM4A and KDM6B) and of acetylation enzymes (HAT, SIRT1 and PCAF) for histones in the hippocampus of these animals. The results suggest that astrogliosis, microgliosis and apoptosis in adulthood are related to the use of DOX during childhood and that treatment with RSV or CUR was able to minimize changes. However, only CUR presented a protective effect in relation to chemotherapy-induced memory deficits. Finally, changes found in important histone methylation and acetylation modulating enzymes in the hippocampus suggest that morphological and behavioral changes may be influenced by epigenetic factors and that RSV and CUR may exert preventive actions against late changes induced by childhood chemotherapy.

AVALIAÇÃO DO EFEITO CARDIOPROTETOR DO CARVEDILOL EM CÃES SUBMETIDOS À QUIMIOTERAPIA COM DOXORRUBICINA

A doxorrubicina tem um alto poder citotóxico e é usada para tratar um amplo espectro de malignidades humanas e de animais, entretanto, seu uso pode ser limitado devido a efeitos adversos causados por doses cumulativas. A cardiotoxicidade é um dos efeitos adversos mais conhecidos e irreversíveis, basicamente causado pelo estresse oxidativo e pela disfunção mitocondrial. A incidência da cardiotoxicidade induzida pela doxorrubicina diverge de acordo com a raça, enquanto que o desenvolvimento da cardiotoxicidade clínica varia de 4,0 a 18,3%. Em raças de cães com alto risco de desenvolvimento de cardiomiopatia dilatada a incidência é de 15,4% e em raças de baixo risco a incidência chega a 3,0%. Estudos foram realizados com o uso da doxorrubicina e os efeitos cardioprotetores do carvedilol e alguns mostraram que o carvedilol previne a disfunção sistólica e diastólica do ventrículo esquerdo, além de danos estruturais e funcionais. No entanto, esses estudos foram feitos com diferentes espécies desde camundongos até humanos, mas não com cães com neoplasias. Portanto, este ensaio clínico foi delineado para avaliar o efeito cardioprotetor do carvedilol em cães. Um estudo prospectivo, randomizado, duplo-cego, controle placebo foi realizado em cães tratados com doxorrubicina. Foram incluídos 13 cães, os quais foram randomizados em dois grupos experimentais consistindo de seis cães no grupo carvedilol e sete cães no grupo placebo. No grupo carvedilol, a dose de 0,39mg/kg ± 0,04 de carvedilol por via oral, duas vezes ao dia foi iniciado no mesmo dia da primeira quimioterapia com doxorrubicina e mantido durante todo o protocolo quimioterápico até a última avaliação cardiológica (15 dias após a última dose de doxorrubicina). Avaliações cardiológicas (ecocardiografia, eletrocardiograma e pressão arterial) foram realizadas antes da administração de doxorrubicina e a cada 10 a 15 dias após cada sessão de quimioterapia com doxorrubicina (T0, T1, T2, T3 e T4). Testes de troponina I e estresse oxidativo foram feitos com soro coletado dos cães na avaliação cardiológica inicial e final (T0 a T4). O estudo Doppler mostrou um aumento significativo (p = 0,001) do tempo de desaceleração do fluxo mitral (TDE) no grupo placebo e diferença significativa nas velocidades da onda E (p = 0,0482), tempo de desaceleração do fluxo mitral (TDE) (p = 0,0029) e relação E/TRIV (p = 0,0155) entre os grupos. Houve diferença significativa (p = 0,0326) na amplitude da onda R na derivação pré-cordial V4 entre os grupos e o intervalo QT teve um aumento significativo (p = 0,0269) desde o início até o final da quimioterapia no grupo placebo. Não houve diferença significativa nos parâmetros sistólicos, pressão arterial, mortalidade, troponina I e testes de estresse oxidativo. Em conclusão, o grupo carvedilol apresentou melhor desempenho na função diastólica e na despolarização e repolarização ventricular. Portanto, podemos sugerir que o carvedilol pode ter efeito benéfico em cães com câncer recebendo doxorrubicina. Contudo, mais estudos são necessários para demonstrar o efeito cardioprotetor do carvedilol contra a doxorrubicina em cães.

Doxorubicin has a powerful cytotoxic effect and it is used to treat a wide spectrum of human and animal malignancies, but its use can be limited due to adverse effects caused by cumulative doses. Cardiotoxicity is one of the most known and irreversible adverse effects, which is basically caused by oxidative stress and mitochondrial dysfunction. The incidence of doxorubicin-induced cardiotoxicity differs according to breed in dogs, while development of clinical cardiotoxicity varies from 4.0 to 18.3%. In high-risk breeds for developing dilated cardiomyopathy the incidence is 15.4% and in low-risk breeds the incidence reaches 3.0%. Many different studies have been done with use of doxorubicin and cardioprotective effects of carvedilol and some had shown that carvedilol prevented the left ventricular systolic and diastolic dysfunction, beyond structural and functional damage. However, these studies were made with different species since mice until humans, but not with dogs as cancer patients. Therefore, we designed this clinical trial to evaluate the cardioprotective effect of carvedilol in dogs. A prospective, randomized, double-blind, placebo control study was done in dogs treated with doxorubicin. We enrolled 13 dogs and they were randomized in two experimental groups consisting of 6 dogs in carvedilol group and 7 dogs in placebo group. In the carvedilol group, 0.39mg/kg ± 0.04 twice-daily oral carvedilol was started in the same day of first doxorubicin chemotherapy and maintained during all chemotherapy protocol until last cardiological evaluation (15 days after last dose of doxorubicin). Cardiological evaluations (echocardiography, electrocardiogram and blood pressure) were performed before doxorubicin administration and every 10 to 15 days after each session of chemotherapy with doxorubicin (T0, T1, T2, T3 e T4). Troponin I and oxidative stress tests were made with serum collected from dogs at the initial and last cardiological evaluation (T0 e T4). Doppler study showed a significant increase (p = 0.001) of mitral flow deceleration time (EDT) in the placebo group and significant difference at E velocities (p = 0.0482), mitral flow deceleration time (EDT) (p = 0.0029) and E/IVRT ratio (p = 0.0155) between groups. There was significant difference (p = 0.0326) in R voltage at V4 precordial chest lead between groups and QT interval had a significant increase (p = 0.0269) from baseline until end of chemotherapy in placebo group. There was no significant difference in systolic parameters, blood pressure, mortality, troponin I and oxidative stress tests. In conclusion, carvedilol group presented best performance in diastolic function and depolarization and repolarization ventricular. Therefore, we may suggest that carvedilol may have a beneficial effect in dog with cancer receiving doxorubicin. More studies are needed to demonstrate the cardioprotective effect of carvedilol against doxorubicin in dogs.

Extrato hidroalcoolico da casca do pequi (Caryocar brasiliense) em ratos submetidos à aplicação de doxorrubicina

The objective of this study was to evaluate the antioxidant effect of the hydroalcoholic extract of pequi peel (HEPP) in rats after administration of doxorubicin (DOX). Were used 26 Wistar rats divided into four groups, which G1 (n=6) received water and saline solution (control group), G2 (n=7) HEPP and saline solution, G3 (n=7) water and DOX, and G4 (n=6) HEPP and DOX. The HEPP was administered by gavage for 10 days to G2 and G4 and water to G1 and G3. DOX and saline solution were administered intravenously on day seven after the start of the experiment, with the DOX (10mg kg-1) applied in G3 and G4, and saline solution 0.9% in G1 and G2. Were evaluated weight and mortality rate. Ten days after the start of the experiment were evaluated creatina kinase MB (CK-MB), troponin and myoglobin, and the rats were euthanized and evaluated morphologically. There was no difference between treatments in weight of animals (P>0.05). About the mortality rate an increase in group 2 was showed (P 0.05). The results of the qualitative test for the detection of CK-MB, troponin I and myoglobin in the four groups were negative and there were no macroscopic changes in different rat's organs of different groups. Multifocal and moderate to severe acute tubular necrosis in cortical and medullary regions of the kidneys was observed in all rats studied. DOX intravenous and in a one dose of 10mg kg-1 don't induce cardiac changes in rats and the HEPP in conditions here evaluated increase the rate of mortality of rats, which may be related to toxic substances in the peel of this fruit.

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito antioxidante do extrato hidroalcoolico da casca do pequi (EHCP) em ratos após a administração de doxorrubicina (DOX). Foram utilizados ratos da raça Wistar, distribuídos em quatro grupos, sendo que os animais do G1 (n=6) receberam água e solução salina (grupo controle), G2 (n=7) EHCP e solução salina, G3 (n=7) água e DOX e G4 (n=6) EHCP e DOX. O EHCP foi administrado por gavagem durante 10 dias aos ratos dos grupos G2 e G4 e água aos dos G1 e G3. DOX na dose de 10mg kg-1 e solução salina 0,9% foram administradas por via intravenosa no dia sete após o início do experimento aos animais de G3 e G4 e aos de G1 e G2, respectivamente. Foram avaliados peso e taxa de mortalidade. Dez dias após o início do experimento, foi avaliada a concentração sérica de creatina quinase MB (CK-MB), troponina e mioglobina, e os ratos foram submetidos à eutanásia e à avaliação anatomopatológica. Não houve diferença entre os tratamentos quanto ao peso dos animais (P 0,05). Com relação à taxa de mortalidade, houve aumento no grupo 2 (P 0,05). Os resultados do teste qualitativo para a detecção de CK-MB, troponina I e mioglobina nos quatro grupos foram negativos e não foram observadas alterações macroscópicas nos órgãos dos ratos dos diferentes grupos. Constatou-se necrose tubular aguda multifocal de intensidade moderada a acentuada nas regiões cortical e medular nos rins de todos os ratos avaliados. A DOX em dose única de 10mg kg-1 e via intravenosa não promove alterações cardíacas em ratos e o EHCP nas condições avaliadas aumenta o índice de mortalidade em ratos, o que pode estar relacionado a substâncias tóxicas presentes na casca desse fruto.

Extrato hidroalcoolico da casca do pequi (Caryocar brasiliense) em ratos submetidos à aplicação de doxorrubicina

The objective of this study was to evaluate the antioxidant effect of the hydroalcoholic extract of pequi peel (HEPP) in rats after administration of doxorubicin (DOX). Were used 26 Wistar rats divided into four groups, which G1 (n=6) received water and saline solution (control group), G2 (n=7) HEPP and saline solution, G3 (n=7) water and DOX, and G4 (n=6) HEPP and DOX. The HEPP was administered by gavage for 10 days to G2 and G4 and water to G1 and G3. DOX and saline solution were administered intravenously on day seven after the start of the experiment, with the DOX (10mg kg-1) applied in G3 and G4, and saline solution 0.9% in G1 and G2. Were evaluated weight and mortality rate. Ten days after the start of the experiment were evaluated creatina kinase MB (CK-MB), troponin and myoglobin, and the rats were euthanized and evaluated morphologically. There was no difference between treatments in weight of animals (P>0.05). About the mortality rate an increase in group 2 was showed (P 0.05). The results of the qualitative test for the detection of CK-MB, troponin I and myoglobin in the four groups were negative and there were no macroscopic changes in different rat's organs of different groups. Multifocal and moderate to severe acute tubular necrosis in cortical and medullary regions of the kidneys was observed in all rats studied. DOX intravenous and in a one dose of 10mg kg-1 don't induce cardiac changes in rats and the HEPP in conditions here evaluated increase the rate of mortality of rats, which may be related to toxic substances in the peel of this fruit.

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito antioxidante do extrato hidroalcoolico da casca do pequi (EHCP) em ratos após a administração de doxorrubicina (DOX). Foram utilizados ratos da raça Wistar, distribuídos em quatro grupos, sendo que os animais do G1 (n=6) receberam água e solução salina (grupo controle), G2 (n=7) EHCP e solução salina, G3 (n=7) água e DOX e G4 (n=6) EHCP e DOX. O EHCP foi administrado por gavagem durante 10 dias aos ratos dos grupos G2 e G4 e água aos dos G1 e G3. DOX na dose de 10mg kg-1 e solução salina 0,9% foram administradas por via intravenosa no dia sete após o início do experimento aos animais de G3 e G4 e aos de G1 e G2, respectivamente. Foram avaliados peso e taxa de mortalidade. Dez dias após o início do experimento, foi avaliada a concentração sérica de creatina quinase MB (CK-MB), troponina e mioglobina, e os ratos foram submetidos à eutanásia e à avaliação anatomopatológica. Não houve diferença entre os tratamentos quanto ao peso dos animais (P 0,05). Com relação à taxa de mortalidade, houve aumento no grupo 2 (P 0,05). Os resultados do teste qualitativo para a detecção de CK-MB, troponina I e mioglobina nos quatro grupos foram negativos e não foram observadas alterações macroscópicas nos órgãos dos ratos dos diferentes grupos. Constatou-se necrose tubular aguda multifocal de intensidade moderada a acentuada nas regiões cortical e medular nos rins de todos os ratos avaliados. A DOX em dose única de 10mg kg-1 e via intravenosa não promove alterações cardíacas em ratos e o EHCP nas condições avaliadas aumenta o índice de mortalidade em ratos, o que pode estar relacionado a substâncias tóxicas presentes na casca desse fruto.

EFEITOS CARDIOTÓXICOS, HEMATOTÓXICOS E HISTOPATOLÓGICOS INDUZIDOS PELA DOXORRUBICINA ASSOCIADA À TERAPIA ANTIOXIDANTE COM CAPTOPRIL EM RATOS WISTAR

A doxorrubicina (DOX), um antibiótico do grupo das antraciclinas, é utilizada na quimioterapia para muitos tumores malignos e exibe vários efeitos colaterais; em particular, este agente produz efeito cardiotóxico pronunciado. Estudos das bases estruturais da cardiotoxicidade e dos mecanismos celulares moleculares de remodelação e regeneração do miocárdio em condições de terapia antitumoral com a DOX e o desenvolvimento de métodos e meios de proteção do aparelho cardiovascular a partir dos efeitos destrutivos desse tratamento, com base nos resultados destes, são de importância crucial. Apesar do fato dos distúrbios morfológicos e funcionais do miocárdio sob os efeitos das antraciclinas serem suficientemente bem conhecidos, ainda não existe um método efetivo para a prevenção da toxicidade cardíaca causada pela formação de espécies reativas de oxigênio (EROs). Entre os agentes com prováveis efeitos cardioprotetores está o captopril (CAP), um inibidor da enzima conversora da angiotensina (IECA) que reduz os níveis circulantes e teciduais da angiotensina II. Além disso, é um potente antioxidante contendo o grupo tiol em sua fórmula química que possui potencial antiinflamatório. A presente pesquisa foi realizada para avaliar a influência cardioprotetora do antioxidante captopril sobre o dano oxidativo induzido pela doxorrubicina em ratos Wistar machos adultos hígidos (n=30). Os animais experimentais foram divididos em cinco grupos com seis animais cada: 1) não tratado NT; 2) grupo I tratados por via intraperitoneal (IP) com 20mg/m² de DOX, quatro doses com intervalo de sete dias; 3) grupo II tratados por via IP com 20mg/m² de DOX, quatro doses com intervalo de sete dias; 4) grupo III tratados por via IP com 20mg/m² de DOX, quatro doses com intervalo de sete dias e oralmente captopril (15 mg/kg), durante 27 dias; 5) grupo IV tratados por via IP com 30mg/m² de DOX, quatro doses com intervalo de sete dias e oralmente captopril (25 mg/kg), durante 27 dias. O coração de cada animal foi coletado e examinado histológica (H&E) e histoquimicamente (Picrosirius red) para avaliar a eficácia dos protocolos, enquanto a possível toxicidade dos tratamentos foi avaliada pelo peso dos animais e do coração, análise morfológica do coração, hemograma e quantificação de colágenos tipos I e tipo III. Os ratos tratados com doxorrubicina 30mg/m² apresentaram menor ganho de peso corporal resultando em aumento significativo no índice cardiossomático dos animais desse grupo. As análises hematológicas mostraram diminuição do hematócrito e do valor de hemoglobina no grupo com a maior dose de doxorrubicina (II), além de anisocitose, policromasia e macrocitose intensas, compatíveis com anemia regenerativa. O mesmo não ocorreu na terapia associada ao captopril. Trombocitopenia e leucopenia não foram encontradas no presente estudo. As medições das espessuras das paredes de ventrículo esquerdo, ventrículo direito e septo interventricular não mostraram diferenças estatísticas significativas (p>0,05). A histopatologia cardíaca demonstrou grande infiltrado inflamatório, principalmente macrófagos e linfócitos, naqueles que receberam apenas doxorrubicina (I e II). O uso do captopril efetivou-se em prevenir a inflamação do tecido cardíaco. A quantificação de colágeno tipo III entre as fibras musculares foi maior nos grupos tratados com o quimioterápico (I e II), que apresentou resultados aproximadamente 27% acima do grupo NT. Nos grupos que receberam a terapia coadjuvante (III e IV), os resultados foram em média 46% menores, demonstrando a eficácia do captopril em prevenir a formação do colágeno tipo III e posterior fibrose tecidual causada pela cardiotoxicidade. O antioxidante captopril por meio de análises hematológicas e histopatológicas mostrou-se eficaz em minimizar os efeitos deletérios provocados pela cardiotoxicidade induzida pela DOX.

Doxorubicin (DOX) an anthracycline antibiotic is used in chemotherapy for many malignancies and exhibits various side effects, in particular, this agent produces pronounced cardiotoxic effect. Studies of the structural bases of cardiotoxicity and molecular cellular mechanisms of remodeling and myocardial regeneration under conditions of antitumor therapy with DOX and the development of methods and means of protection of the cardiovascular system from the destructive effects of this treatment, based on the results of these are of crucial importance. Despite the fact that morphological and functional disorders of the myocardium under the effects of anthracyclines are sufficiently well known, there is as yet no effective method for the prevention of cardiac toxicity caused by the formation of reactive oxygen species (ROS). Among the agents with probable cardioprotective effects are captopril (CAP), an angiotensin converting enzyme (ACE) inhibitor that reduces circulating and tissue levels of angiotensin II. In addition, it is a potent antioxidant containing the thiol group in its chemical formula that has antiinflammatory potential. To evaluate the cardioprotective influence of the antioxidant captopril on oxidative damage induced by doxorubicin in healthy adult male Wistar rats (n = 30). The experimental animals were divided into five groups containing six animals each: 1) untreated - NT; 2) group I - were treated intraperitoneally with 20 mg/m² of DOX, four doses with a seven day interval; 3) group III - were treated intraperitoneally (IP) with 20 mg/m² of DOX, four doses with interval of seven days; 4) group III - the rats received IP 20 mg/m² of DOX, four doses with a seven day interval and orally captopril (15 mg / kg) for 27 days; 5) group IV - received IP 30mg/m² of DOX, four doses with a seven day interval and orally captopril (25 mg / kg) for 27 days. The hearts of all animals were collected and examined histologically (H&E) and histochemically (Picrosirius red). Histopathology and morphometry were used to evaluate the efficacy of the protocols, while the possible toxicity of the treatments was evaluated by weight of the animals and the heart, morphological analysis of the heart, blood count and quantification of collagens types I and III. The mice treated with doxorubicin 30 mg/m² presented lower body weight gain resulting in a significant increase in the cardiosomatic rate of the animals in this group. Hematological analysis showed a decrease in hematocrit and hemoglobin value in the group with the highest dose of doxorubicin (II), besides intense anisocytosis, polychromasia and macrocytosis compatible with regenerative anemia. The same did not occur in therapy associated with captopril. Thrombocytopenia and leukopenia were not found in the present study. Measurements of wall thicknesses of the left and right ventricles and interventricular septum did not show statistically significant differences (p>0.05). Cardiac histopathology determined a large inflammatory infiltrate, mainly macrophages and lymphocytes, in those who received only doxorubicin (I and II). The use of captopril was effective in preventing inflammation of cardiac tissue. The quantification of type III collagen between muscle fibers was higher in the groups treated with chemotherapy (I and II), which presented results approximately 27% above the NT group, and the groups that received the adjuvant therapy (III and IV) the results were on average 46% lower, demonstrating the efficacy of captopril in preventing the formation of type III collagen and subsequent tissue fibrosis caused by cardiotoxicity. The antioxidant captopril by means of hematological and histopathological analyzes proved effective in minimizing the deleterious effects caused by DOX-induced cardiotoxicity.

Toxicidade do cloridrato de doxorrubicina na dose cumulativa de 120mg/m², em cadelas com tumor venéreo transmissível

O Cloridrato de Doxorrubicina(DOX) é considerado um dos agentes mais ativos disponíveis para o tratamento quimioterápico do câncer, além de ser um dos antineoplásicos mais utilizados para o tratamento de tumor venéreo transmissível canino resistente à vincristina. Com intuito de melhor conhecimento dos efeitos adversos promovidos pelo uso da DOX em cães, foi delineado um estudo composto por um grupo de 10 cães domésticos, do sexo feminino, sem raça definida, com peso entre 4,5 e 24 kg e idade média de 5 anos, portadores de TVT de ocorrência natural, confirmados por avaliação citológica, sem metástases clinicamente detectáveis ou quimioterapia prévia, que receberam o Cloridrato de Doxorrubicina na dose de 30 mg/m2 ou 1mg/kg para os animais com peso inferior a 15kg. Foram avaliados os efeitos da DOX sob o sangue periférico e medula óssea, além de avaliação da bioquímica sanguínea e resposta de citotoxicidade tumoral. A determinação da toxicidade gerada pelo tratamento quimioterápico com DOX baseou-se nos critérios de efeitos adversos estabelecidos pelo consenso da cooperativa de oncologia veterinária (VCOOG). Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística pelo método de variância com medidas repetidas; regressão linear, quadrática e cúbica e quando houve diferença significativa entre médias (P < 0,05), estas foram comparadas entre si pelo teste de Tukey. Os valores da série vermelha do sangue não apresentaram alterações significativas entre os momentos; a contagem de leucócitos totais foi significativamente maior no momento inicial (M0) quando comparada com o 14º dia após a quarta sessão (M7); os neutrófilos segmentados apresentaram redução significativa no 14º dia após a primeira e após a terceira sessão quimioterápica quando comparados com o momento inicial; os valores de linfócitos, basófilos, eosinófilos e neutrófilos bastonetes não diferiram entre os momentos avaliados. No mielograma, as contagens de rubrícitos, metarubrícitos apresentaram aumento significativo 21 dias após o término do tratamento quimioterápico (M8); a relação mieloide:eritroide apresentou diminuição significativa ao final do tratamento (M8); os neutrófilos bastonetes e neutrófilos segmentados, demonstraram redução dos valores no M8. Os parâmetros bioquímicos (ALT, AST, FA, albumina, creatinina, ureia e proteína total), mesmo variação dos valores estatisticamente significativos entre os momentos, permaneceram dentro dos parâmetros de normalidade para a espécie canina. A mensuração tumoral em cm² realizada através de ultrassonografia confirmou que o tumor foi significativamente maior no M0 diferenciando-se dos demais momentos (M2 M8) em virtude de uma alta resposta de citotoxicidade tumoral logo após a primeira sessão quimioterápica com DOX. Os resultados obtidos neste estudo evidenciaram que o uso de DOX na dose cumulativa de 120mg/m² no tratamento de cães portadores de TVT foi eficaz para a cura do tumor na maioria dos pacientes, e o grau de toxicidade do fármaco não promoveu alterações clínicas graves.

Doxorubicin (DOX) is considered one of the most active agent avaliable for chemotherapy treatment of cancer, in addition to be one of the most antineoplastic drug used for the treatment of canine Transmissible Venereal Tumor resistant to vincristine. For a better understanding of the side effects caused by the use of DOX in dogs, we did an study composed by 10 domestic, female, mixed breed dogs with Transmissible Venereal Tumor of natural ocurrence, diagnosed by cytology, with no evidence of metastasis and without previous chemotherapy treatment, that received DOX in dose of 30 mg/m² ou 1 mg/kg for animals weighing less than 15 kg. Were evaluated the effects of DOX in the peripheral blood and bone marrow, blood biochemistry and tumor cytotoxicity response. In order to standardize the toxicity level, we applied the terminology based on the addapted tables of the veterinary co-operative oncology group-Common terminology criteria for adverse events VCOG-CTCAE). Statistical data were analyzed by the variance method with repeated measures; linear regression, quadratic and cubic and when there was a significant difference between means (P <0.05), these were compared by Tukey test. The values of red blood series did not change significantly between moments; the white blood cell count was significantly higher at baseline (M0) when compared to the 14th day after the fourth session (M7); segmented neutrophils had significant reduction on the 14th day after the first and third chemotherapy session when compared with the initial moment; lymphocytes, basophils, eosinophils and neutrophils rods did not differ between the moments. In The myelogram, rubrícitos, metarubrícitos ratio, showed a significant increase 21 days after the end of chemotherapy (M8), and myeloid: erythroid relationship showed significantly decreased after the treatment (M8); neutrophils rods and segmented neutrophils showed reduced values in M8. Biochemical parameters (ALT, AST, AP, albumin, creatinine, urea and total protein), even with a statistically significant variation in values between moments, remained within normal parameters for dogs. The tumor size were measured in cm² by ultrasound and confirm that was significantly higher in M0, differing from the other moments (M2 M8) because of a high response tumor cytotoxicity after the first chemotherapy session with DOX. The results of this study showed that the use of DOX in cumulative dose of 120mg/m² in the treatment of dogs with TVT was effective in tumor cure in most patients, and the degree of toxicity of the drug did not cause clinically significant changes.

Carbon catabolite repression of retamycin production by Streptomyces olindensis ICB20

Retamycin is an anthracyclinic antitumoral complex produced by Streptomyces olindensis ICB20. In this work the influence of different glucose concentrations in the feed medium on the production of retamycin was studied. Chemostat cultures employing glucose concentration varying between 10 g/L and 25 g/L showed that use of high glucose concentration resulted in catabolite repression of the biosynthesis of the antitumoral. The highest specific retamycin production rate, qRTM = 7.8 mg/g.h, was obtained when glucose concentration was 10 g/L. The lowest value of qRTM, 2.5 mg/g.h, was observed when glucose concentration was 20 and 25 g/L. The residual glucose concentration varied from 0 to 13 g/L, as the glucose concentration in the feed was increased from 10 to 25 g/L.

A retamicina é um complexo antitumoral antraciclínico produzido por Streptomyces olindensis ICB20. Neste trabalho estudou-se a influência de diferentes concentrações de glicose no meio de alimentação sobre a produção de retamicina. Os resultados de cultivos contínuos mostraram que o uso de elevadas concentrações de glicose resultou em repressão catabólica da biossíntese do antitumoral. A maior velocidade específica de produção de retamicina, qRTM = 7,8 mg/g.h, foi obtida quando a concentração de glicose foi de 10 g/L. O menor valor de qRTM, 2,5 mg/g.h, foi observado quando a concentração de glicose foi de 20 e 25 g/L. A concentração de glicose residual aumentou de 0 a 13 g/L conforme a concentração de glicose na alimentação foi incrementada de 10 a 25 g/L.