Preparation of a working seed lot of BCG and quality control by PCR genotyping / Preparación de un lote semilla de trabajo de BCG y control de calidad por genotipificación por PCR

The bacillus Calmette-Guérin (BCG) was obtained in 1920 after successive passages leading to the attenuation of a Mycobacterium bovis strain. For the following 40 years, BCG had been replicated, resulting in substrains with genotypic and phenotypic differences. Several genomic studies have compared two BCG strains, M. bovis and Mycobacterium tuberculosis, and observed that deleted regions in the different strains could be related to differences in antigenic properties. In this work, a working seed lot was obtained from a lyophilized secondary seed lot from the BCG Pasteur strain 1173 P2 and genetically characterized. The genome was analyzed by PCR directed to five regions (RD1, RD2, RD14, RD15, DU2), using the seed lot and different available strains as templates. No genetic differences were found in the fragments studied as compared to the Pasteur strain. A total of 20 passages were carried out and no differences were found in the size of the fragments amplified by PCR. In conclusion, this method allows to control a working seed lot genotypically and to assess the stability of the BCG genome.

El bacilo de Calmette-Guérin (BCG) se obtuvo en 1920, después de sucesivos pasajes que llevaron a la atenuación de una cepa de Mycobacterium bovis. A lo largo de los 40 años subsiguientes la cepa BCG fue replicada y surgieron subcepas con diferencias fenotípicas y genotípicas. Se realizaron varios estudios de comparación genómica de diferentes cepas de BCG, M. bovis y Mycobacterium tuberculosis, y se observó que las deleciones de regiones en las diferentes cepas podrían estar relacionadas con diferencias en las propiedades antigénicas. En este trabajo se describe la preparación y caracterización genética de un lote semilla de trabajo obtenido a partir de un lote semilla secundaria liofilizado de la cepa BCG Pasteur 1173 P2. Se analizaron por PCR cinco regiones (RD1, RD2, RD14, RD15, DU2) en el lote semilla de trabajo utilizando como control las diferentes cepas disponibles. No se hallaron diferencias genéticas en los fragmentos estudiados al comparar el lote semilla de trabajo con la cepa BCG Pasteur 1173 P2. Asimismo, se efectuaron hasta 20 pasajes y no se encontraron diferencias en el tamaño de los fragmentos amplificados por PCR. En conclusión, se ha puesto a punto un método que permite controlar el genotipo de un lote semilla de trabajo y evaluar la estabilidad del genoma del BCG.

Vacina BCG: eficácia e indicações da vacinação e da revacinação / BCG vaccine: efficacy and indications for vaccination and revaccination

OBJETIVOS: Revisar aspectos relacionados ao efeito protetor da primeira e segunda doses da vacina BCG e discutir as suas principais indicações e contra-indicações. FONTES DOS DADOS: Utilizando o PubMed, foi realizada uma revisão sistemática da literatura abrangendo um período de, aproximadamente, 50 anos. Os estudos foram agrupados por tipo de desenho, apresentando-se separadamente os principais resultados de ensaios clínicos, estudos de caso-controle e meta-análises. Outros tópicos relevantes, como a BCG e HIV/AIDS, o uso do teste tuberculínico, aspectos relacionados à cicatriz vacinal e ao desenvolvimento de novas vacinas, dentre outros, foram também revistos. SíNTESE DOS DADOS: A vacina BCG é utilizada desde 1921. Apesar disso, ainda apresenta controvérsias e aspectos não esclarecidos. O efeito protetor da primeira dose da vacina BCG contra a tuberculose na forma miliar ou na meningite é bastante significativa. No entanto, em relação à forma pulmonar, os resultados são discordantes, variando de ausência de efeito a níveis próximos a 80 por cento. Há evidências de que uma segunda dose da BCG não aumenta o seu efeito protetor. Estudos demonstram proteção da vacina contra a hanseníase. Pesquisas sobre novas vacinas que, no futuro, poderão vir a substituir a BCG estão sendo realizadas. CONCLUSÕES:Apesar da expectativa de que, no futuro, venhamos a ter uma nova vacina para a tuberculose, no presente e ainda por muitos anos, a vacina BCG, apesar de suas deficiências, mantém-se como um importante instrumento nos esforços para controle dos efeitos danosos da tuberculose, sobretudo em países em que essa doença ocorre em médias e elevadas taxas de incidência.

Vacunación BCG: expectativas y recomendación actual en el Programa de Inmunizaciones de Chile / BCG vaccination: expectations and present recommendation in the immunization program in Chile

El objetivo de este artículo de actualización es dar a conocer la composición de la vacuna BCG, los mecanismos de acción de ésta, el significado e interpretación de la respuesta retardada a la tuberculina, la importancia de la cicatriz BCG, la seguridad, eficacia, el rol del booster en la protección contra la tuberculosis y la duración de ésta. Un tópico relevante es dar a conocer las normas de inmunización en los diferentes países, incluyendo Chile, haciendo énfasis en los argumentos del cambio de esquema de vacunación en nuestro país a contar del 2005. Por último, se muestra el éxito que esta vacuna ha tenido en la reducción de las formas graves de la tuberculosis en el niño menor de 4 años, en nuestro medio, gracias a las altas coberturas de vacunación alcanzadas.

O método polarográfico na determinaçäo da viabilidade da vacina BCG liofilizada / The polarographic method in the assays of the viability of the freezedried BCG vaccines

Estudou-se métodos alternativos a serem empregados em procedimentos de controle de qualidade da vacina BCG liofilizada. Com esse objetivo foi desenhado e contruído um polarógrafo de eletrodo de oxigênio constituído de eletrodo de platina e o de referência de Ag-AgCl embutido em peça única e dotado de sensor de temperatura, com circuito eletrônico permitindo a medida de consumo de oxigênio. Levou-se a efeito, estudo comparativo de viabilidade de vacina BCG liofilizada pela medida polarográfica de consumo de oxigênio em comparaçäo à manométrica pelo clássico método de Warburg e o método de contagem de colônias. (UFC). A análise de 66 diferentes lotes de vacina BCG liofilizada produzidas pelo Instituto Butantan, Säo Paulo, e pela Fundaçäo Ataulpho de Paiva, Rio de Janeiro, demonstrou que as técnica polarográfica revelou ser altamente reprodutível e muito mais conveniente que os métodos manométrico e de contagem de colônias. Verificou-se que entre o método polarográfico e o manométrico e UFC os resultados de regressäo linear mostraram correlaçäo positiva de alta intensidade e significante ao nível de *=0,05, permitindo indicar o método polarográfico, como procedimento de escolha para operaçöes de controle de qualidade em laboratórios de produçäo de vacina BCG bem como em Unidades de Saúde, para determinaçöes adequadas de viabilidade de lotes de vacinas

El paciente tuberculoso: un problema siempre actual para enfermería / Tuberculous patient: an problem always present to nursing

La tuberculosis actualmente continúa siendo un preocupación para la atención de enfermería. El siguiente trabajo permite a la enfermera hacer un reconocimiento del paciente tuberculoso, partiendo desde la historia natural de la enfermedad, basándose en las normas nacionales de tratamiento específico de la lucha antituberculosa en la República Argentina.

Epidemiological evaluation of BCG vaccine efficacy in Delhi--1989.

A field evaluation of efficacy of BCG vaccine to prevent tubercular meningitis was undertaken in a case control study in Delhi during 1988-89. Each case of tubercular meningitis was matched by age and neighbourhood with 2 controls from the community. Thirty-seven cases of tubercular meningitis were matched with 74 controls and thus 37 triplets were analysed. ODDS RATIO between BCG vaccinated and non vaccinated individuals for acquisition of tubercular meningitis was 11.3. This gives 84 per cent efficacy of BCG vaccine in the prevention of TB meningitis under the field conditions prevailing in Delhi. Paired matched analysis of tubercular meningitis with the control group 1 and 2 separately revealed the ODDS RATIO to be 9.5 and 15 respectively. The corresponding BCG vaccine efficacy worked out were 90 and 93 per cent respectively. Authors suggest that this method of evaluating BCG vaccine efficacy is fairly reliable and cost effective. This methodology could be further simplified by using hospital patients as control and be introduced to evaluate BCG vaccine efficacy in different areas with reference to its role in preventing tubercular meningitis under the programme of immunisation.