RESUMO
The occurrence of foodborne diseases is increasing throughout the world. Bacteria of the genus Salmonella are responsible for food poisoning and, in some cases, may be fatal. The aim of this study was to adapt the multiplex PCR technique (mPCR) on the rapid and direct identification of the presence of Salmonella sp. as well as serotypes Enteritidis, Typhi and Typhimurium in poultry carcasses (n=127) and viscera (n=73). The implementation of the standard technique using positive controls was successfully adapted. The results of Salmonella sp. detection in refrigerated viscera showed that the mPCR was able to detect Salmonella genus in 2.74% of these samples. Traditional microbiological analysis also identified the same positive samples for Salmonella sp. but was not able to differentiate the serotype. The serotype Enteritidis was detected by mPCR in 1.37% of the samples. Our conclusion was that the mPCR was able to detect the presence of these bacteria in a short period of time and enabled the identification of serotype Enteritidis in one of the samples found positive for Salmonella sp.
Assuntos
Microbiologia de Alimentos , Carne/microbiologia , Reação em Cadeia da Polimerase/métodos , Aves Domésticas/microbiologia , Salmonella/isolamento & purificação , Animais , DNA Bacteriano/análise , Salmonella/genética , Intoxicação Alimentar por Salmonella/prevenção & controle , Salmonella enteritidis/genética , Salmonella enteritidis/isolamento & purificação , Salmonella typhi/genética , Salmonella typhi/isolamento & purificação , Salmonella typhimurium/genética , Salmonella typhimurium/isolamento & purificação , Sorotipagem/métodosRESUMO
Pathogen detection in foods by reliable methodologies is very important to guarantee microbiological safety. However, peculiar characteristics of certain foods, such as autochthonous microbiota, can directly influence pathogen development and detection. With the objective of verifying the performance of the official analytical methodologies for the isolation of Listeria monocytogenes and Salmonella in milk, different concentrations of these pathogens were inoculated in raw milk treatments with different levels of mesophilic aerobes, and then submitted to the traditional isolation procedures for the inoculated pathogens. Listeria monocytogenes was inoculated at the range of 0.2-5.2 log CFU/mL in treatments with 1.8-8.2 log CFU/mL. Salmonella Enteritidis was inoculated at 0.9-3.9 log CFU/mL in treatments with 3.0-8.2logCFU/mL. The results indicated that recovery was not possible or was more difficult in the treatments with high counts of mesophilic aerobes and low levels of the pathogens, indicating interference of raw milk autochthonous microbiota. This interference was more evident for L. monocytogenes, once the pathogen recovery was not possible in treatments with mesophilic aerobes up to 4.0 log CFU/mL and inoculum under 2.0 log CFU/mL. For S. Enteritidis the interference appeared to be more non-specific.
Assuntos
Contagem de Colônia Microbiana/métodos , Listeria monocytogenes/isolamento & purificação , Leite/microbiologia , Salmonella enteritidis/isolamento & purificação , Salmonella/isolamento & purificação , Animais , Bactérias/isolamento & purificação , BovinosRESUMO
O Agreste pernambucano é caracterizado por uma economia diversificada, com diferentes cultivos, além da pecuária de leite e de corte. Em 2004 o Estado produziu 398 milhões de litros de leite, o que representou 14,7% da produção da Região Nordeste e 1,7% da produção Nacional. Este trabalho teve como objetivo caracterizar as propriedades leiteiras da região Agreste do Estado de Pernambuco, observando condições e fatores que pudessem interferir na qualidade do leite. Foram selecionadas 41 propriedades leiteiras da região. Observou-se o predomínio das propriedades de pequeno porte, com até 25 (43,9%) animais em lactação, sendo ordenha manual em 36 (87,8%) das propriedades. Em relação às práticas de higiene na ordenha, 16 (39,0%) dos produtores lavavam os tetos antes da ordenha, mas apenas 4 (9,8%) realizavam pré-dipping e 34 (82,9%) ordenhavam na presença do bezerro. Apenas 5 (12%) das propriedades realizavam algum tipo de tratamento da água utilizada para higienização de instalações e equipamentos, mesmo a água para consumo humano era tratada em apenas 43,9% das propriedades. A refrigeração do leite era realizada por 10 (24,4%) propriedades em tanques comunitários. Quanto a sanidade do rebanho 39(95,1%) proprietários realizavam vacinação para febre aftosa e 23 (56,1%) para brucelose, enquanto 10(24,4%) realizavam teste para tuberculose. As condições de produção se revelaram precárias quanto às estruturas nas propriedades, mostrando a necessidade da melhoria das instalações e manejo dos animais e, principalmente, a implantação de Boas Práticas na ordenha, adequadas à realidade local.
The Agreste region in the state of Pernambuco is characterized by a diversified economy, with differentcultivars, besides the daily and beef farms. In 2004 the State produced 398 million liters of milk; it represented 14.7% of the Northeast Region production and 1.7% of the National production. The aim ofthis work was to characterize the milk properties of the Agreste region of Pernambuco, observingconditions and factors that could interfere with milk quality. In the survey, 41 milk farms were selected inthe region. Small milk farms were the most common found, with less than 25 (43.9%) animals in lactation,and 36 (87.8%) farms held a manual milking process. In relation to hygiene practices during milking, 16(39.0%) of the producers washed the teats before beginning, but only 4 (9.8%) performed pre-dippingand 34 (82.9%) milked in the presence the calf. Only 5 (12%) farms applied some treatment to the waterused for cleaning installations and equipment, even the water for human consumption was treated inonly 43.9% of the farms. Milk refrigeration was performed in 10 (24.4%) farms in communitarian tanks. Asfar as animal health is concerned, 39 (95.1%) owners vaccinated for food and mouth disease and 23(56.1%) for brucellosis, while 10 (24.4%) tested for tuberculosis. Regarding the farms structure theproduction conditions were precarious, showing the need of improving the structure itself and animalhandling. As well as the implementation of Good Manufacturing Practices in the milking process, properto the local reality.
Assuntos
Economia , LeiteRESUMO
High levels of microbial contamination, commonly found in animal origin foods and food processing environments, are able to hinder the growth of pathogens in these products and interfere in the results of laboratory analyses for detection of these pathogens. With the aim of verifying the possible interference of the autochthonous microbiota encountered in meat and meat products and processing plants over the presence of Listeria spp., 443 samples, collected from 11 meat retail establishments, were submitted to microbiological analysis to determine the levels of mesophilic aerobes, total coliforms and Escherichia coli and the presence of Listeria spp., according to the methodology proposed by the USDA. The results did not show evident interference of the autochthonous microbiota over Listeria spp., once the genus was detected even in the meat, meat products and environmental samples with high levels of contamination by mesophilic aerobes and coliforms.
Altos níveis de contaminação microbiana, usualmente encontrados em alimentos de origem animal e nos ambientes de processamento, podem inibir a multiplicação de microrganismos patogênicos nesses produtos e interferir nos resultados das análises laboratoriais para o isolamento desses patógenos. Com o objetivo de verificar as possíveis interferências da microbiota autóctone encontrada na carne, produtos cárneos e plantas de processamento sobre a presença de Listeria spp., 443 amostras, coletadas em 11 estabelecimentos processadores, foram submetidas a análises microbiológicas para determinação dos níveis de contaminação por aeróbios mesófilos, coliformes totais e Escherichia coli e para verificação da presença de Listeria spp., de acordo com a metodologia proposta pelo USDA. Os resultados obtidos não mostraram uma interferência evidente da microbiota autóctone sobre Listeria spp., uma vez que esse gênero foi detectado mesmo nas amostras de carne e produtos cárneos e amostras ambientais e de superfície de equipamentos que apresentaram altos níveis de contaminação por aeróbios mesófilos e coliformes.
RESUMO
Estafilococos têm grande importância na indústria de alimentos por serem associados a surtos de intoxicação alimentar, pela ação de suas exterotoxinas. A produção dessas substâncias tem alta correlação com a produção da enzima coagulase, que é detectada na identificação de cepas potencialmente patogênicas. Esse teste é tradicionalmente realizado com plasma de coelho liofilizado ou pela sua separação de sangue coletado de coelhos. O plasma liofilizado tem alto custo e a punção cardíaca, além de ser bastante cruenta, permite aobtenção apenas de pequenos volumes de material. Este trabalho tem como objetivo verificar a viabilidade da utilização de um material alternativo ao plasma de coelho, neste caso o plasma de cavalo, no teste de coagulase para estafilococos isolados de leite cru. Assim, 410 colônias típicas e atípicas de estafilococos isolados de leite cru foram submetidas ao teste de coagulase utilizando-se dois plasmas. Os resultados identificaram 284 (69,26 por cento) colônias coagulase positivas e 126 (30,73 por cento) coagulase negativas, com concordância de 100 por cento entre os dois plasmas. Os resultados obtidos indicam que a utilização do plasma de cavalo pode ser uma alternativa viável na pesquisa de estafilococos coagulase positivos em leite cru.
Assuntos
Staphylococcus , Coagulase , LeiteRESUMO
Petrifilmo EC e HS foram comparados ao método do Número Mais Provável (NMP) para determinar sua eficiência na enumeracão de coliformes totais e E. coli em 145 amostras de água (76 de água in natura e 69 de água de abastecimento). Em água in natura, Petrifilmo HS e EC mostraram boa correlacão com o método de NMP. Em água clorada (< 20 col/100 mL e negativas) a concordância foi baixa. Para enumeracão de E. coli, Petrifilmo EC mostrou boa correlacão com o método de NMP. Os resultados indicaram que Petrifilmo EC e HS podem ser usados com seguranca para enumeracão de coliformes totais e E. coli em água, desde que as contagens esperadas sejam maiores que 20/100 mL.
Assuntos
Enterobacteriaceae , Escherichia coli , Técnicas In Vitro , Microbiologia da Água , Métodos , Amostras de ÁguaRESUMO
The SimPlate (tm) TPC CI system is a rapid method to count mesophilic aerobic microorganisms (MAM) in foods, based on the use of resazurine to indicate bacterial growth. Its efficiency in pasteurized milk was evaluated using 142 pasteurized milk samples (38 type A, 43 type B and 61 type C) collected in Londrina, PR. The standard plating method, using Plate Count Agar (PCA) was used for comparison. The plates of both systems were incubated at 35§C and read after 24h and 48h. The occurrence of false-positive and false-negative wells and the predominant microorganisms in them were also evaluated. The results were compared by simple correlation and mean variance analyses. The correlation (r) and mean variance values were 0.6811 and 0.7583 for the results obtained after 24h, respectively, and 0.9126 and 0.0842 for the results obtained after 48h, respectively. These results indicate that the performance of the system increases when the plates are incubated for 48h. When the three types of milk were evaluated separately, these values were 0.9285 and 0.0817 for type A milk, 0.9231 and 0.0466 for type B milk and 0.7209 and 0.1082 for type C milk. These results indicate that the better the quality of the milk the better the performance of SimPlate (tm) TPC CI. False-negative wells, found more frequently in samples with high MAM counts, were caused by Gram positive microorganisms, poorly detected by the SimPlate (tm) TPC CI system because they grew slowly and had low reduction capacity. The results indicated a higher efficiency of the SimPlate (tm) TPC CI system in the reading at 48h.
Assuntos
Animais , Análise de Alimentos/métodos , Técnicas de Tipagem Bacteriana , Bactérias Aeróbias/isolamento & purificação , Bactérias/crescimento & desenvolvimento , Bactérias/isolamento & purificação , Técnicas In Vitro , Leite , Métodos , Técnicas Microbiológicas , Técnicas Microbiológicas/normasRESUMO
Readycult (tm) - LMX is a rapid method to test for the presence of total coliform bacteria and Escherichia coli in water, giving results in 24h. It is based on reactions of specific microbial enzymes or indicator nutrients of the medium. The goal of this paper was to study the use of Readycult (tm) - LMX to detect total coliform and E. coli in milk. One hundred twenty five samples of pasteurized and raw milk, collected in Londrina, PR, Brazil, were tested simultaneously by the most probable number (MPN) method using Brilliant Green Bile Lactose Broth (2 per cente) (BRILA) and Readycult (tm) - LMX. The Readycult (tm) - LMX test was evaluated for sensitivity, simplicity, and speed of results. There was a significant correlation between the results obtained by the two methods for total coliforms (r: 0.8224) and for E. coli (r: 0.8603). The two methods yielded similar results, but Readycult (tm) - LMX was easier to use. In addition, results were available as early as 24h.
Assuntos
Animais , Bovinos , Análise de Alimentos/métodos , Enterobacteriaceae , Escherichia coli , Técnicas In Vitro , Leite , Estudos de Amostragem , Técnicas Microbiológicas/normasRESUMO
Os psicotróficos säo relatados como microrganismos de grande importância dentro da indústria láctea de todo mundo, capazes de crescer em temperaturas de refrigeraçäo, independentemente da sua temperatura ótima de crescimento. A ocorrência deste grupo de microrganismos em leite cru e pasteurizado tem sido relatada e discutida por diversos autores de vários países, bem como a influência de boas práticas e sazonalidade na sua freqüência em leite refrigerado. Outro importante grupo de microrganismos é o de psicrotróficos termodúricos, que além de crescerem em refrigeraçäo, sobrevivem a altas temperaturas e promovem alteraçöes importantes no leite e seus derivados. Os microrganismos psicotróficos, termodúricos ou näo, podem produzir enzimas termorresistentes (lipases e proteases) que provocam alteraçöes no leite e principalmente nos derivados, causando assim prejuízos à indústria láctea. Esses microrganismos ganharam especial importância com a expansäo do resfriamento nas propriedades e a granelizaçäo da produçäo leiteira em diversos países do mundo, e recentemente também no Brasil.