Salivary lysozyme levels in patients with primary

Background: Lysozyme is a muramidase that acts on the peptideoglycan wall of Gram positive bacteria, causing cell death. It plays part in innate immunity and is present in blood, external fluid, as well in Iysossomal granules of the phagocytes. Primary Immunodeficiencies are a diverse group of iIInesses that, as a result of abnormalities of the immune system, increase susceptibility to infection. Among the examples of impaired natural immunity are defects in phagocytes and in the complement system. Innate immunity could be important in protecting mucosas against infections in patients with different forms of primary immunodeficiencies. The aim of this study was to investigate Iysozyme concentrations in saliva from patients with primary immunodeficiencies. Methods: Lysozyme levels in saliva samples from 34 patients with primary immunodeficiency (30 children and adolescents between the age of 3-13 years and 4 adults between the age of 20-33) and 60 agematched healthy controls (49 children and adolescents between the ages of 3-15 and 11 adults between the ages of 22-42) were determined by theIysoplate method. Results: There was no statistically significant difference between the Iysozyme concentrations in the saliva of the immunodeficient subjects and those of the healthy controls. Conclusion: The results in the present work clearly show that salivary Iysozyme levels in primary immunodeficient patients are equivalent to those found in healthy controls, suggesting that this enzyme still represents a remaining (but not a compensatory mechanism), contributing to the protection of there patients against infections

Introducción: La lisozima es una muramidasa que actua sobre la pared de peptidoglicano de las bacterias Gram-positivas, provocando la muerte celular. Desempeña un papel en la inmunidad innata y está presente en la sangre, secreciones externas y en los gránulos de los fagocitos. Las inmunodeficiencias primarias constituyen un grupo diverso de enfermedades que, como consecuencia de las anormalidades en el sistema inmune, presentan un aumento de susceptibilidad a las infecciones. Ejemplos de deficiencias de la inmunidad natural son los defectos de los fagocitos y del sistema de complemento. La inmunidadinnata puede ser importante para la protección contra las infecciones de las mucosas en los pacientes con diferentes tipos de inmunodeficiencia primaria. El objetivo de este estudio es investigar la concentración de lisozima en la saliva en pacientes con inmunodeficiencia primaria. Métodos: Los niveles de lisozima en las muestras de saliva de 34 pacientes con inmunodeficiencia primaria (30 niños y adolecentes con edad entre 3-13 años y 4 adultos con edad entre 20-33 años) y 60 controles sanos de la misma edad (49 niños y adolescentes con edad entre 3-15 años y 11 adultos conedad entre 22-42 años) fueron determinados por el método Iysoplate. Resultados: No se observó una diferencia estadística significativa entre las concentraciones de lisozima en la saliva de los individuos inmunodeficientesy de los controles sanos. Conclusión: Los resultados del presente trabajo claramente indican que los niveles de lisozima en la saliva de los pacientes con inmunodeficiencias primarias son equivalentes a los de los controles sanos, sugiriendo que este enzima representa un mecanismo remanescente, pero no compensador, que contribuye a la protección contra las infecciones en estos pacientes

Inhibition of enteropathogenic Escherichia coli (EPEC) adherence to HEp-2 cells by bovine colostrum and milk

Background: enteropathogenic Escherichia coli (EPEC) is the main etiological agent of infantile diarrhea in Brazil and other developing countries. Human milk IgA protects newborn intestinal mucosa by inhibiting bacterial adhesion to epithelial cells and this effect is shown by in vitro assays of EPEC adhesion to HEp-2 cultured cells. Bovine milk, if effective in promoting this protection, could be an useful tool in the absence of the natural breastfeeding, in high-risk nurseries or in hospital infections. Methods: the effect of colostrum, milk, and serum from dairy cows on the adherence to EPEC to HEp-2 cells was investigated. Colostrum from immunized and control animals and industrialized milk formulas were fractionated through a membrane device with a molecular weight cut off 10 kDa. The high molecular weight fraction (HMWF) of bovine colostrum was depleted of IgG through an affinity column and absorbed with an EPEC adherent strain. Antibodies were searched by ELISA and immunoblotting (IB). Results: colostrum and milk from EPEC-immunized animals showed and inhibitory activity on adherence similar to that of contol non-immunized animals. The inhibitory effect on adhesion was related to the HMWF. IgG-depleted colostrum partially retained the inhibitory effect, whereas IgG-rich eluate lost this property. The EPEC-absorbed fraction retained the inhibitory property. Industrialized milk formulas and respective HMWF also inhibited bacterial adherence. In IB assays, colostrum and milk samples from immunized animals recognized proteins of 30-40 kDa and 94 kDa, a molecular weight consistent with the adhesin intimin, in EPEC extracts. Conclusions: the inhibitory effect of EPEC adherence may be mediated by HMWF components, and IgG was not the only component responsible for this phenomenon (AU)

Antecedentes: Escherichia coli enteropatogénica (EPEC) es el principal agente etiológico de diarrea infantil en el Brasil y en otros países en desarrollo. La IgA presente en la leche humana protege la mucosa intestinal del recién nacido por inhibición de la acción bacteriana a las células epiteliales. Este efecto es observado por ensayos in vitro de adhesión de EPEC a células HEp-2. La leche bovina, de ser efectiva en estos mecanismos de protección, podría ser una herramienta importante en ausencia de lactancia en nurseries o en infecciones hospitalarias. Métodos: fue investigado el efecto del calostro, leche y suero de vacas en la adherencia de la EPEC a la pared de células HEp-2. Calostro de animales inmunizados y animales control, como también leche de formulación industrial fueron fraccionadas a través de una membrana con un corte para un peso molecular de 10 kDa. La fracción de mayor peso molecular (HMWF) de calostro bovino fue liberada de IgG a través de una columna de afinidad y absorbida con una cepa adherente de EPEC. Fueron investigados anticuerpos por técnicas de ELISA e immunoblotting (IB).Resultados: el calostro y leche de animales inmunizados con EPEC mostraron una actividad inhibitoria en la adherencia similar a la de los animales control no inmunizados. El efecto en la adhesión fue asociado a la HMWF. El calostro libre de IgG retuvo parcialmente el efecto inhibitorio, mientras que la fracción eluida rica en IgG perdió esta propiedad. La fracción absorbida en EPEC retuvo la propiedad inhibitoria. La leche de formulación industrial y la HMWF también inhibieron la adherencia bacteriana. En ensayos de IB, muestras de calostro y leche de animales inmunizados reconocieron proteínas de 30-40 kDa y 94 kDa, peso molecular coincidente con el de la adhesina intimina en los extractos de EPEC. Conclusiones: el efecto inhibitorio de la adherencia de la EPEC podría estar mediado por HMWF y la IgG no sería el único componente responsable por este fenómeno (AU)