Equine herpesvirus myeloencephalopathy

Clinical History: A euthanized, 14-year-old, Warmblood gelding that had participated in an equine show was presented for necropsy and diagnostic workup to the San Bernardino laboratory of the California Animal Health and Food Safety Laboratory System. The animal had a 4-day history of mildly swollen limbs and hyperthermia, and developed neurologic signs shortly before euthanasia. Necropsy Findings: The urinary bladder had multifocal to coalescing hemorrhages in the mucosa and approximately 5 ml of turbid urine with sandy sludge (Figure 1). The entire spinal cord was removed and cross-sectioned serially after fixation in 10% neutral-buffered formalin during 48h. Multifocally, in multiple sections of the cervical, thoracic, and lumbar segments, there were uni- or bilateral and asymmetrical, wedge-shaped areas of gray discoloration and hemorrhage (Figures 2-4). In addition, there were extensive hemorrhages around the nerve roots of the cauda equina. Follow-up questions: Five differential diagnoses for the gross lesions in the spinal cord (Fig. 1B-1D) Microscopic description for the lesions in the spinal cord (Fig. 2A-2D) Most likely cause based on clinical history and gross and microscopic findings.

Equine coital exanthema caused by equid alphaherpesvirus 3: a report of an outbreak in northeastern Brazil

ABSTRACT: Equine coital exanthema is a venereal infectious disease poorly reported in horses in Brazil and was never described in the northeastern region of the country. This work aims to describe the clinical and pathological aspects of an outbreak of equine coital exanthema caused by equid alphaherpesvirus 3, occurred in a herd of horses at the semiarid region of the State of Rio Grande do Norte. Main clinical signs consisted of anorexia, hiporexia, fibrinous or purulent secretion in the penis mucosa and vagina. Two mares presented mild to minimal lesions that consisted of scars in the mucosa of the vagina and in the perivulvar region. In a stallion the disease consisted of severe, multifocal, umbilicated-exanthematous ulcers of approximately 1cm in diameter on the penis mucosa. Other areas where ulcers and crusts were focally observed included the skin of the scrotum and on the lips and mucocutaneous junctions of the oral cavity. Histologically, the main lesion consisted of multifocal severe ulcerative and fibrinous necrotizing balanoposthitis and mild multifocal necrotizing, lymphocytic dermatitis in the lips and scrotum. The equide alphaherpesvirus 3 DNA was amplified in blood samples and penis mucosa using the PCR technique. This is the first report of molecular diagnosis of equine coital exanthema affecting horses in northeastern Brazil. Further studies should be carried out in order to investigate the epidemiology and the importance of this herpetic disease in the country.

RESUMO: O exantema coital equino é uma doença infecciosa venérea pouco relatada em equinos no Brasil e nunca descrita na região Nordeste do país. Este trabalho tem como objetivo descrever os aspectos clínicos e patológicos de um surto de exantema coital equino causado pelo alphaherpesvirus equídeo 3, que ocorreu em um haras na região semiárida do Estado do Rio Grande do Norte. Os principais sinais clínicos consistiram em anorexia, hiporexia, secreção fibrinosa ou purulenta na mucosa do pênis e vagina. Duas éguas apresentavam lesões discretas que consistiam em cicatrizes na mucosa da vagina e na região perivulvar. Em um garanhão, a doença consistia em úlceras umbilicadas-exantematosas severas, multifocais, de aproximadamente 1 cm de diâmetro na mucosa do pênis. Outras áreas onde úlceras e crostas foram observadas focalmente incluíram a pele do escroto, lábios e junções mucocutâneas da cavidade oral. Histologicamente, as principais lesões consistiam em balanopostite multifocal ulcerativa e necrosante fibrinosa grave e dermatite linfocítica necrosante multifocal leve nos lábios e escroto. O DNA do alphaherpesvirus equídeo tipo 3 foi amplificado em amostras de sangue e mucosa do pênis pela técnica de PCR. Este é o primeiro relato de diagnóstico molecular de exantema coital equino afetando cavalos no nordeste do Brasil. Novos estudos devem ser realizados a fim de investigar a epidemiologia e a importância dessa doença herpética no país.

Equine coital exanthema caused by equid alphaherpesvirus 3: a report of an outbreak in northeastern Brazil / Exantema coital equino causado pelo alphaherpesvirus equídeo tipo 3: relato de um surto no nordeste do Brasil

Equine coital exanthema is a venereal infectious disease poorly reported in horses in Brazil and was never described in the northeastern region of the country. This work aims to describe the clinical and pathological aspects of an outbreak of equine coital exanthema caused by equid alphaherpesvirus 3, occurred in a herd of horses at the semiarid region of the State of Rio Grande do Norte. Main clinical signs consisted of anorexia, hiporexia, fibrinous or purulent secretion in the penis mucosa and vagina. Two mares presented mild to minimal lesions that consisted of scars in the mucosa of the vagina and in the perivulvar region. In a stallion the disease consisted of severe, multifocal, umbilicated-exanthematous ulcers of approximately 1cm in diameter on the penis mucosa. Other areas where ulcers and crusts were focally observed included the skin of the scrotum and on the lips and mucocutaneous junctions of the oral cavity. Histologically, the main lesion consisted of multifocal severe ulcerative and fibrinous necrotizing balanoposthitis and mild multifocal necrotizing, lymphocytic dermatitis in the lips and scrotum. The equide alphaherpesvirus 3 DNA was amplified in blood samples and penis mucosa using the PCR technique. This is the first report of molecular diagnosis of equine coital exanthema affecting horses in northeastern Brazil. Further studies should be carried out in order to investigate the epidemiology and the importance of this herpetic disease in the country.(AU)

O exantema coital equino é uma doença infecciosa venérea pouco relatada em equinos no Brasil e nunca descrita na região Nordeste do país. Este trabalho tem como objetivo descrever os aspectos clínicos e patológicos de um surto de exantema coital equino causado pelo alphaherpesvirus equídeo 3, que ocorreu em um haras na região semiárida do Estado do Rio Grande do Norte. Os principais sinais clínicos consistiram em anorexia, hiporexia, secreção fibrinosa ou purulenta na mucosa do pênis e vagina. Duas éguas apresentavam lesões discretas que consistiam em cicatrizes na mucosa da vagina e na região perivulvar. Em um garanhão, a doença consistia em úlceras umbilicadas-exantematosas severas, multifocais, de aproximadamente 1 cm de diâmetro na mucosa do pênis. Outras áreas onde úlceras e crostas foram observadas focalmente incluíram a pele do escroto, lábios e junções mucocutâneas da cavidade oral. Histologicamente, as principais lesões consistiam em balanopostite multifocal ulcerativa e necrosante fibrinosa grave e dermatite linfocítica necrosante multifocal leve nos lábios e escroto. O DNA do alphaherpesvirus equídeo tipo 3 foi amplificado em amostras de sangue e mucosa do pênis pela técnica de PCR. Este é o primeiro relato de diagnóstico molecular de exantema coital equino afetando cavalos no nordeste do Brasil. Novos estudos devem ser realizados a fim de investigar a epidemiologia e a importância dessa doença herpética no país.(AU)

Equine coital exanthema caused by equid alphaherpesvirus 3: a report of an outbreak in northeastern Brazil / Exantema coital equino causado pelo alphaherpesvirus equídeo tipo 3: relato de um surto no nordeste do Brasil

Equine coital exanthema is a venereal infectious disease poorly reported in horses in Brazil and was never described in the northeastern region of the country. This work aims to describe the clinical and pathological aspects of an outbreak of equine coital exanthema caused by equid alphaherpesvirus 3, occurred in a herd of horses at the semiarid region of the State of Rio Grande do Norte. Main clinical signs consisted of anorexia, hiporexia, fibrinous or purulent secretion in the penis mucosa and vagina. Two mares presented mild to minimal lesions that consisted of scars in the mucosa of the vagina and in the perivulvar region. In a stallion the disease consisted of severe, multifocal, umbilicated-exanthematous ulcers of approximately 1cm in diameter on the penis mucosa. Other areas where ulcers and crusts were focally observed included the skin of the scrotum and on the lips and mucocutaneous junctions of the oral cavity. Histologically, the main lesion consisted of multifocal severe ulcerative and fibrinous necrotizing balanoposthitis and mild multifocal necrotizing, lymphocytic dermatitis in the lips and scrotum. The equide alphaherpesvirus 3 DNA was amplified in blood samples and penis mucosa using the PCR technique. This is the first report of molecular diagnosis of equine coital exanthema affecting horses in northeastern Brazil. Further studies should be carried out in order to investigate the epidemiology and the importance of this herpetic disease in the country.(AU)

O exantema coital equino é uma doença infecciosa venérea pouco relatada em equinos no Brasil e nunca descrita na região Nordeste do país. Este trabalho tem como objetivo descrever os aspectos clínicos e patológicos de um surto de exantema coital equino causado pelo alphaherpesvirus equídeo 3, que ocorreu em um haras na região semiárida do Estado do Rio Grande do Norte. Os principais sinais clínicos consistiram em anorexia, hiporexia, secreção fibrinosa ou purulenta na mucosa do pênis e vagina. Duas éguas apresentavam lesões discretas que consistiam em cicatrizes na mucosa da vagina e na região perivulvar. Em um garanhão, a doença consistia em úlceras umbilicadas-exantematosas severas, multifocais, de aproximadamente 1 cm de diâmetro na mucosa do pênis. Outras áreas onde úlceras e crostas foram observadas focalmente incluíram a pele do escroto, lábios e junções mucocutâneas da cavidade oral. Histologicamente, as principais lesões consistiam em balanopostite multifocal ulcerativa e necrosante fibrinosa grave e dermatite linfocítica necrosante multifocal leve nos lábios e escroto. O DNA do alphaherpesvirus equídeo tipo 3 foi amplificado em amostras de sangue e mucosa do pênis pela técnica de PCR. Este é o primeiro relato de diagnóstico molecular de exantema coital equino afetando cavalos no nordeste do Brasil. Novos estudos devem ser realizados a fim de investigar a epidemiologia e a importância dessa doença herpética no país.(AU)

Occurrence of anti Sarcocystis spp., anti Toxoplasma gondii, and anti Neospora spp. antibodies in equines from western Santa Catarina, Brazil / Ocorrência de anticorpos anti Sarcocytis spp., anti Toxoplasma gondii e anti Neospora spp. em equinos da região Oeste de Santa Catarina

Equine raising is generally articulated as a secondary activity on farms, where animals are used for leisure or work. Thus, it is important to consider the health of these animals, seeking to understand which are the main agents that circulate in a given farm or region. In this sense, this study aimed to evaluate the presence of IgG anti-Sarcocystis spp., anti-Toxoplasma gondii, and anti-Neospora spp. antibodies in equines in western Santa Catarina, Brazil. A total of 100 serum samples from horses from 10 farms, located in the municipalities of Faxinal dos Guedes, Xaxim, and Xanxerê were analyzed from June to December 2019. The samples were evaluated by indirect immunofluorescence reaction (IIFR) to detect antibodies of IgG class against the three agents. The results showed that the equines in the region are seropositive against the three studied agents, 11% of which for Sarcocystis spp. 21% for T. gondii, and 20% for Neospora spp. The analysis of the presence of these protozoa in different environments showed that both stabled and extensively raised horses presented signs of contact with the studied agents. Animals that live only in stables had a higher occurrence of IgG anti-Sarcocystis (7/32; 21.88%) and anti-T. gondii (11/32; 34.38%) antibodies. The evaluating of animals raised on pasture, semi-extensively and extensively, showed a higher percentage of seropositivity for N. caninum (9/34; 26.47%). The high occurrence of animals seropositive to the studied protozoa reinforces the importance of controlling and preventing these agents in the region, as they have the potential to cause a high impact on equid farming, mainly involving reproductive losses and equine protozoal myeloencephalitis (EPM).

A criação de equinos geralmente está articulada como atividade secundária nas propriedades, nas quais os animais são utilizados para lazer ou trabalho. Dessa forma é importante considerar a sanidade desses animais, buscando entender quais os principais agentes que circulam em determinada propriedade ou região. Com isso, o presente trabalho teve por objetivo avaliar a presença de anticorpos IgG anti- Sarcocystis spp., anti-Toxoplasma gondii e anti-Neospora spp. em equinos na região Oeste de Santa Catarina. Foram analisadas 100 amostras de soro de equinos de 10 propriedades, localizadas nos municípios de Faxinal dos Guedes, Xaxim e Xanxerê, no período de junho a dezembro de 2019. As amostras foram avaliadas por Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) para detecção de anticorpos da classe IgG contra os três agentes. Os resultados obtidos demonstram que os equinos da região apresentam soropositividade contra os três agentes estudados, sendo 11%, para Sarcocystis spp. 21%, para T. gondii e 20 %, para Neospora spp. Na análise da presença destes protozoários em diferentes ambientes, observou-se que tanto equinos estabulados ou criados de forma extensiva ambos apresentaram já terem entrado em contato com os agentes pesquisados. Animais que vivem apenas estabulados, apresentaram maior ocorrência de anticorpos IgG anti – Sarcocystis (7/32; 21,88%) e anti-T. gondii (34.38%-11/32). Quando avaliados os animais criados a pasto, de forma semi-extensiva e extensiva, houve um percentual maior de soropositividade para N. caninum (26.47% -9/34). A alta ocorrência de animais soropositivos aos protozoários estudados reforça a importância com o controle e prevenção desses agentes na região, uma vez que estes têm potencial para causar grande impacto na equideocultura, envolvendo principalmente as perdas reprodutivas, além da mieloencefalite protozoária equina (EPM).

Occurrence of anti Sarcocystis spp., anti Toxoplasma gondii, and anti Neospora spp. antibodies in equines from western Santa Catarina, Brazil / Ocorrência de anticorpos anti Sarcocytis spp., anti Toxoplasma gondii e anti Neospora spp. em equinos da região Oeste de Santa Catarina

Equine raising is generally articulated as a secondary activity on farms, where animals are used for leisure or work. Thus, it is important to consider the health of these animals, seeking to understand which are the main agents that circulate in a given farm or region. In this sense, this study aimed to evaluate the presence of IgG anti-Sarcocystis spp., anti-Toxoplasma gondii, and anti-Neospora spp. antibodies in equines in western Santa Catarina, Brazil. A total of 100 serum samples from horses from 10 farms, located in the municipalities of Faxinal dos Guedes, Xaxim, and Xanxerê were analyzed from June to December 2019. The samples were evaluated by indirect immunofluorescence reaction (IIFR) to detect antibodies of IgG class against the three agents. The results showed that the equines in the region are seropositive against the three studied agents, 11% of which for Sarcocystis spp. 21% for T. gondii, and 20% for Neospora spp. The analysis of the presence of these protozoa in different environments showed that both stabled and extensively raised horses presented signs of contact with the studied agents. Animals that live only in stables had a higher occurrence of IgG anti-Sarcocystis (7/32; 21.88%) and anti-T. gondii (11/32; 34.38%) antibodies. The evaluating of animals raised on pasture, semi-extensively and extensively, showed a higher percentage of seropositivity for N. caninum (9/34; 26.47%). The high occurrence of animals seropositive to the studied protozoa reinforces the importance of controlling and preventing these agents in the region, as they have the potential to cause a high impact on equid farming, mainly involving reproductive losses and equine protozoal myeloencephalitis (EPM).(AU)

A criação de equinos geralmente está articulada como atividade secundária nas propriedades, nas quais os animais são utilizados para lazer ou trabalho. Dessa forma é importante considerar a sanidade desses animais, buscando entender quais os principais agentes que circulam em determinada propriedade ou região. Com isso, o presente trabalho teve por objetivo avaliar a presença de anticorpos IgG anti- Sarcocystis spp., anti-Toxoplasma gondii e anti-Neospora spp. em equinos na região Oeste de Santa Catarina. Foram analisadas 100 amostras de soro de equinos de 10 propriedades, localizadas nos municípios de Faxinal dos Guedes, Xaxim e Xanxerê, no período de junho a dezembro de 2019. As amostras foram avaliadas por Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) para detecção de anticorpos da classe IgG contra os três agentes. Os resultados obtidos demonstram que os equinos da região apresentam soropositividade contra os três agentes estudados, sendo 11%, para Sarcocystis spp. 21%, para T. gondii e 20 %, para Neospora spp. Na análise da presença destes protozoários em diferentes ambientes, observou-se que tanto equinos estabulados ou criados de forma extensiva ambos apresentaram já terem entrado em contato com os agentes pesquisados. Animais que vivem apenas estabulados, apresentaram maior ocorrência de anticorpos IgG anti Sarcocystis (7/32; 21,88%) e anti-T. gondii (34.38%-11/32). Quando avaliados os animais criados a pasto, de forma semi-extensiva e extensiva, houve um percentual maior de soropositividade para N. caninum (26.47% -9/34). A alta ocorrência de animais soropositivos aos protozoários estudados reforça a importância com o controle e prevenção desses agentes na região, uma vez que estes têm potencial para causar grande impacto na equideocultura, envolvendo principalmente as perdas reprodutivas, além da mieloencefalite protozoária equina (EPM).(AU)

Sero-epidemiological and reproductive survey for alphaherpesvirus infections in horses in the state of Pernambuco, Brazil / Inquérito soro-epidemiológico e reprodutivo associado à infecção por alfaherpesvírus em equinos no estado de Pernambuco, Brasil

Equine alphaherpesvirus is a major pathogen that causes respiratory disorders, abortion, neurological syndromes, and perinatal mortality in horse populations worldwide. The aim of this study was to determine whether the occurrence of anti-alphaherpesvirus antibodies is correlated to reproductive abnormalities in horses in the state of Pernambuco, Brazil. The virus neutralization was carried out in 322 serological samples from unvaccinated horses from 42 farms located in 16 municipalities in the Microregion of the Vale do Ipojuca, Pernambuco, Brazil. Of these horses, 23.3% (75/322; 95% CI: 18.9-28.4%) were found to be reactive to anti-alphaherpesvirus antibodies. In addition, 61.9% (26/42) of farms had at least one reactive animal, with an inter-herd variation of 5% to 100%. With regard to reproductive rates, herpetic infection was associated with the use of biological reproductive techniques such as artificial insemination (AI) and embryo transfer (ET), which uses natural mating (p = 0.003); history of perinatal mortality (p = 0.004); birth interval greater than two years (p = 0.003); and reproductive seasonality of mares with irregular cycles in the herd (p = 0.041). This is the first report on the identification of horses reactive to anti-alphaherpesvirus antibody in the state of Pernambuco, Brazil. From the results obtained, the adoption of prophylactic measures such as vaccination is suggested in order to prevent infection in susceptible animals and to reduce the viral load excreted by animals with quiescent infection.

O alfaherpesvírus equino é um importante agente patogênico causador de distúrbios respiratórios, aborto, síndrome neurológica e mortalidade perinatal em populações de equinos em todo o mundo. O objetivo deste trabalho foi determinar a ocorrência de anticorpos anti-alfaherpesvírus e relacionar às alterações reprodutivas em equinos no estado de Pernambuco, Brasil. A vírus neutralização foi realizada em 322 amostras sorológicas de equinos não vacinados, provenientes de 42 propriedades de 16 municípios pertencentes à Microrregião do Vale do Ipojuca, Pernambuco, Brasil. Observou-se uma ocorrência de 23,3% (75/322; IC 95%:18,9-28,4%) de equinos reagentes à pesquisa de anticorpos anti-alfaherpesvírus. Além disso, 61,9% (26/42) das propriedades possuíam pelo menos um animal reagente, com variação inter-rebanho de 5 a 100%. Em relação aos índices reprodutivos, associou-se à infecção herpética a utilização de biotécnicas reprodutivas, como a inseminação artificial (IA) e a transferência de embriões (TE), com a monta natural (p = 0,003); histórico de mortalidade perinatal (p = 0,004); intervalo entre partos superior a dois anos (p = 0,003); e sazonalidade reprodutiva de éguas com ciclos irregulares no rebanho (p = 0,041). Este é o primeiro relato de detecção de equinos reagentes à pesquisa de anticorpos anti-alfaherpesvírus no estado de Pernambuco, Brasil. A partir dos resultados obtidos, sugere-se a adoção de medidas profiláticas como a vacinação, a fim de prevenir a infecção nos animais suscetíveis e reduzir a carga viral excretada nos animais com infecção quiescente.

Sero-epidemiological and reproductive survey for alphaherpesvirus infections in horses in the state of Pernambuco, Brazil / Inquérito soro-epidemiológico e reprodutivo associado à infecção por alfaherpesvírus em equinos no estado de Pernambuco, Brasil

Equine alphaherpesvirus is a major pathogen that causes respiratory disorders, abortion, neurological syndromes, and perinatal mortality in horse populations worldwide. The aim of this study was to determine whether the occurrence of anti-alphaherpesvirus antibodies is correlated to reproductive abnormalities in horses in the state of Pernambuco, Brazil. The virus neutralization was carried out in 322 serological samples from unvaccinated horses from 42 farms located in 16 municipalities in the Microregion of the Vale do Ipojuca, Pernambuco, Brazil. Of these horses, 23.3% (75/322; 95% CI: 18.9-28.4%) were found to be reactive to anti-alphaherpesvirus antibodies. In addition, 61.9% (26/42) of farms had at least one reactive animal, with an inter-herd variation of 5% to 100%. With regard to reproductive rates, herpetic infection was associated with the use of biological reproductive techniques such as artificial insemination (AI) and embryo transfer (ET), which uses natural mating (p = 0.003); history of perinatal mortality (p = 0.004); birth interval greater than two years (p = 0.003); and reproductive seasonality of mares with irregular cycles in the herd (p = 0.041). This is the first report on the identification of horses reactive to anti-alphaherpesvirus antibody in the state of Pernambuco, Brazil. From the results obtained, the adoption of prophylactic measures such as vaccination is suggested in order to prevent infection in susceptible animals and to reduce the viral load excreted by animals with quiescent infection.(AU)

O alfaherpesvírus equino é um importante agente patogênico causador de distúrbios respiratórios, aborto, síndrome neurológica e mortalidade perinatal em populações de equinos em todo o mundo. O objetivo deste trabalho foi determinar a ocorrência de anticorpos anti-alfaherpesvírus e relacionar às alterações reprodutivas em equinos no estado de Pernambuco, Brasil. A vírus neutralização foi realizada em 322 amostras sorológicas de equinos não vacinados, provenientes de 42 propriedades de 16 municípios pertencentes à Microrregião do Vale do Ipojuca, Pernambuco, Brasil. Observou-se uma ocorrência de 23,3% (75/322; IC 95%:18,9-28,4%) de equinos reagentes à pesquisa de anticorpos anti-alfaherpesvírus. Além disso, 61,9% (26/42) das propriedades possuíam pelo menos um animal reagente, com variação inter-rebanho de 5 a 100%. Em relação aos índices reprodutivos, associou-se à infecção herpética a utilização de biotécnicas reprodutivas, como a inseminação artificial (IA) e a transferência de embriões (TE), com a monta natural (p = 0,003); histórico de mortalidade perinatal (p = 0,004); intervalo entre partos superior a dois anos (p = 0,003); e sazonalidade reprodutiva de éguas com ciclos irregulares no rebanho (p = 0,041). Este é o primeiro relato de detecção de equinos reagentes à pesquisa de anticorpos anti-alfaherpesvírus no estado de Pernambuco, Brasil. A partir dos resultados obtidos, sugere-se a adoção de medidas profiláticas como a vacinação, a fim de prevenir a infecção nos animais suscetíveis e reduzir a carga viral excretada nos animais com infecção quiescente.(AU)

Expressão e caracterização da glicoproteína D do herpesvírus equídeo 1 em Pichia pastoris / Expression and characterization of equid herpesvirus 1 glycoprotein D in Pichia pastoris

O herpesvírus equídeo 1 (EHV-1) apresenta distribuição mundial e causa graves prejuízos à equideocultura. É agente de surtos de doença respiratória, reprodutiva e neurológica, em equídeos jovens e adultos. A glicoproteína D (gD) do envelope viral é essencial para ligação e penetração em células permissivas e direcionamento do sistema imunológico do hospedeiro, induz respostas imunes humorais e celulares, sendo um antígeno apropriado para ser utilizado em vacinas e imunodiagnóstico. O objetivo deste trabalho foi expressar e caracterizar a gD do EHV-1 em Pichia pastoris para posterior utilização como antígeno em técnicas de imunodiagnóstico e formulação de vacinas recombinantes. Uma sequência de DNA que codifica uma forma truncada da gDEHV-1 foi clonada no vetor pPICZαA de expressão em P. pastoris. Obteve-se uma proteína de ~41 kDa, como esperado. A proteína apresentou glicosilação entre 4 kDa e 16 kDa, demonstrada por deglicosilação enzimática. A proteína recombinante foi caracterizada antigenicamente e imunogenicamente por Western blot, utilizando-se anticorpos policlonais equinos anti-EHV-1, e por ELISA indireto em modelo murino, demonstrando que a gD recombinante manteve epítopos similares aos da proteína nativa. Esses resultados sugerem que a gDEHV-1 é um antígeno promissor para uso como imunobiológico no controle do EHV-1.(AU)

Equine herpesvirus 1 (EHV-1) has a worldwide distribution and causes serious damage to horse breeding. It is an agent of respiratory, reproductive and neurological disease outbreaks in young and adult equids. Viral envelope glycoprotein D (gD) is essential for binding and penetration into permissive cells and targeting the host immune system, inducing humoral and cellular immune responses, and is an appropriate antigen for use in vaccines and immunodiagnostics. The objective of this work was to express in Pichia pastoris and to characterize EHV-1 gD for later use as an antigen in immunodiagnostic techniques and formulation of recombinant vaccines. A DNA sequence encoding a truncated form of gDEHV-1 has been cloned into the P. pastoris expression vector pPICZαA. A protein of ~41 kDa was obtained as expected. The protein presented glycosylation between 4 kDa and 16 kDa, demonstrated by enzymatic deglycosylation. The recombinant protein was antigenically and immunogenically characterized by Western blot using equine polyclonal anti-EHV-1 antibodies, and by indirect ELISA in a murine model, demonstrating that the recombinant gD maintained epitopes similar to those of the native protein. These results suggest that gDEHV-1 is a promising antigen for use as an immunobiological in the control of EHV-1.(AU)

Expressão e caracterização da glicoproteína D do herpesvírus equídeo 1 em Pichia pastoris / Expression and characterization of equid herpesvirus 1 glycoprotein D in Pichia pastoris

O herpesvírus equídeo 1 (EHV-1) apresenta distribuição mundial e causa graves prejuízos à equideocultura. É agente de surtos de doença respiratória, reprodutiva e neurológica, em equídeos jovens e adultos. A glicoproteína D (gD) do envelope viral é essencial para ligação e penetração em células permissivas e direcionamento do sistema imunológico do hospedeiro, induz respostas imunes humorais e celulares, sendo um antígeno apropriado para ser utilizado em vacinas e imunodiagnóstico. O objetivo deste trabalho foi expressar e caracterizar a gD do EHV-1 em Pichia pastoris para posterior utilização como antígeno em técnicas de imunodiagnóstico e formulação de vacinas recombinantes. Uma sequência de DNA que codifica uma forma truncada da gDEHV-1 foi clonada no vetor pPICZαA de expressão em P. pastoris. Obteve-se uma proteína de ~41 kDa, como esperado. A proteína apresentou glicosilação entre 4 kDa e 16 kDa, demonstrada por deglicosilação enzimática. A proteína recombinante foi caracterizada antigenicamente e imunogenicamente por Western blot, utilizando-se anticorpos policlonais equinos anti-EHV-1, e por ELISA indireto em modelo murino, demonstrando que a gD recombinante manteve epítopos similares aos da proteína nativa. Esses resultados sugerem que a gDEHV-1 é um antígeno promissor para uso como imunobiológico no controle do EHV-1.(AU)

Equine herpesvirus 1 (EHV-1) has a worldwide distribution and causes serious damage to horse breeding. It is an agent of respiratory, reproductive and neurological disease outbreaks in young and adult equids. Viral envelope glycoprotein D (gD) is essential for binding and penetration into permissive cells and targeting the host immune system, inducing humoral and cellular immune responses, and is an appropriate antigen for use in vaccines and immunodiagnostics. The objective of this work was to express in Pichia pastoris and to characterize EHV-1 gD for later use as an antigen in immunodiagnostic techniques and formulation of recombinant vaccines. A DNA sequence encoding a truncated form of gDEHV-1 has been cloned into the P. pastoris expression vector pPICZαA. A protein of ~41 kDa was obtained as expected. The protein presented glycosylation between 4 kDa and 16 kDa, demonstrated by enzymatic deglycosylation. The recombinant protein was antigenically and immunogenically characterized by Western blot using equine polyclonal anti-EHV-1 antibodies, and by indirect ELISA in a murine model, demonstrating that the recombinant gD maintained epitopes similar to those of the native protein. These results suggest that gDEHV-1 is a promising antigen for use as an immunobiological in the control of EHV-1.(AU)

Occurrence of antibodies against Herpesvirus and Arteritis Virus in equines from the state of Rio Grande do Norte, Brazil

Background: Equine Herpesvirus type 1 (EHV-1) and Equine Arteritis Virus (EAV) have a high capacity for dissemination, causing losses in horse breeding due to reproductive, respiratory and neurological problems. In the State of Rio Grande do Norte there is only one survey, in the municipality of Mossoró, about these diseases. The purpose of this study was therefore to determine the prevalence and assess the risk factors associated with EHV-1 and EAV infections in unvaccinated horses raised in the mesoregions of East and West Potiguar in the State of Rio Grande do Norte, Brazil. Materials, Methods & Results: Between August 2018 and February 2019, blood samples were collected from equines on farms located in sixteen municipalities in the mesoregions of East and West Potiguar for the serological diagnosis of EAV (809 samples from 90 farms) and of EHV (778 samples from 88 farms), being that, only municipalities that had at least five hundred equines were included in the study. An investigative epidemiological questionnaire was applied to each property visited, containing questions related to the breeder, property, animal and the sanitary, reproductive and nutritional management. A logistic regression was performed to assess the risk factors associated with EVH, considering the serological test (positive or negative) as the dependent variable. EAV and EVH antibodies were detected through the serum virus neutralization assay. No evidence was found of EAV [0% (0/809)], but EHV showed a prevalence rate of 32% (249/778), with 80.6% (71/88) of the farms having at least one animal that tested positive, and EHV was present in all the municipalities covered in this study. The risk factors identified were: animals raised in East Potiguar (OR = 1.36, CI 95%: 1.01-1.85, P = 0.041), extensive livestock farming system (OR = 1.79, CI 95%: 1.10-2.91, P = 0.041), working animals (OR = 3.63, IC 95%: 1.91-6.91, P =...

Primary gastric rupture in 20 horses from Midwestern Brazil: case report / Ruptura gástrica primária em 20 equinos no Centro-Oeste do Brasil: relato de caso

An 11-year (2007-2018) survey of epidemiological, clinical and pathological findings of horses with primary gastric rupture (PGR) was conducted. Twenty horses presented PGR, nine (45%) horses were clinically evaluated, eleven (55%) were sent dead, and all animals were necropsied. PGR contributed to a prevalence of 0.31% (9/2,868) of all equid attendances, 1.83% (9/491) of colic cases, and 4.1% (20/487) of all equid necropsies. Highly fermentable feed (n=7), gastric impaction (n=4), and perforating gastric ulcer (n=1) were the main causes of PGR; whilst eight horses presented idiopathic gastric rupture. Clinically evaluated horses were tachycardic, tachypneic, febrile, dehydrated, with increased abdominal tension, abnormal mucous membranes and reduced to absent intestinal borborygmi. Improper dietary management, such as the ingestion of low-quality roughage and highly fermentable feedstuffs were detected as the main factors associated with PGR in Midwestern Brazil. It is important to raise awareness in horse owners about proper feed management to minimize PGR.(AU)

Foi realizado um levantamento de 11 anos (2007-2018) dos achados epidemiológicos, clínicos e patológicos de equinos com ruptura gástrica primária (RGP). Vinte equinos apresentaram RGP, dos quais nove (45%) foram avaliados clinicamente e 11 (55%) foram enviados mortos, sendo todos os animais necropsiados. A RGP contribuiu com prevalência de 0,31% de todos os atendimentos de equídeos (9/2.868), 1,83% (9/491) dos casos de cólica, e 4,1% (20/487) das necropsias em equídeos. Alimentos altamente fermentáveis (n=7), compactação gástrica (n=4) e perfuração de úlcera gástrica (n=1) foram as principais causas de RGP, enquanto oito equinos tiveram ruptura gástrica idiopática. Os equinos avaliados clinicamente apresentaram-se taquicárdicos, taquipneicos, febris, desidratados, com mucosas anormais, aumento da tensão abdominal e motilidade intestinal reduzida. O manejo inadequado da dieta, como a ingestão de forragens de baixa qualidade e alimentos altamente fermentáveis, foi o principal fator de risco associado à RGP no Centro-Oeste do Brasil. É importante aumentar a conscientização dos proprietários de equinos sobre o manejo alimentar adequado para minimizar a RGP.(AU)

Primary gastric rupture in 20 horses from Midwestern Brazil: case report / Ruptura gástrica primária em 20 equinos no Centro-Oeste do Brasil: relato de caso

An 11-year (2007-2018) survey of epidemiological, clinical and pathological findings of horses with primary gastric rupture (PGR) was conducted. Twenty horses presented PGR, nine (45%) horses were clinically evaluated, eleven (55%) were sent dead, and all animals were necropsied. PGR contributed to a prevalence of 0.31% (9/2,868) of all equid attendances, 1.83% (9/491) of colic cases, and 4.1% (20/487) of all equid necropsies. Highly fermentable feed (n=7), gastric impaction (n=4), and perforating gastric ulcer (n=1) were the main causes of PGR; whilst eight horses presented idiopathic gastric rupture. Clinically evaluated horses were tachycardic, tachypneic, febrile, dehydrated, with increased abdominal tension, abnormal mucous membranes and reduced to absent intestinal borborygmi. Improper dietary management, such as the ingestion of low-quality roughage and highly fermentable feedstuffs were detected as the main factors associated with PGR in Midwestern Brazil. It is important to raise awareness in horse owners about proper feed management to minimize PGR.(AU)

Foi realizado um levantamento de 11 anos (2007-2018) dos achados epidemiológicos, clínicos e patológicos de equinos com ruptura gástrica primária (RGP). Vinte equinos apresentaram RGP, dos quais nove (45%) foram avaliados clinicamente e 11 (55%) foram enviados mortos, sendo todos os animais necropsiados. A RGP contribuiu com prevalência de 0,31% de todos os atendimentos de equídeos (9/2.868), 1,83% (9/491) dos casos de cólica, e 4,1% (20/487) das necropsias em equídeos. Alimentos altamente fermentáveis (n=7), compactação gástrica (n=4) e perfuração de úlcera gástrica (n=1) foram as principais causas de RGP, enquanto oito equinos tiveram ruptura gástrica idiopática. Os equinos avaliados clinicamente apresentaram-se taquicárdicos, taquipneicos, febris, desidratados, com mucosas anormais, aumento da tensão abdominal e motilidade intestinal reduzida. O manejo inadequado da dieta, como a ingestão de forragens de baixa qualidade e alimentos altamente fermentáveis, foi o principal fator de risco associado à RGP no Centro-Oeste do Brasil. É importante aumentar a conscientização dos proprietários de equinos sobre o manejo alimentar adequado para minimizar a RGP.(AU)

Ganciclovir attenuates the respiratory disease induced by Equid alphaherpesvirus 1 in rabbits

ABSTRACT: Equid alphaherpesvirus 1 (EHV-1) is an important pathogen of horses, associated with respiratory, neurological disease and abortions. As vaccination is not always effective, anti-herpetic therapy may represent an alternative to prevent the losses caused by the infection. We herein investigated the activity of ganciclovir (GCV), an anti-herpetic human drug, in rabbits experimentally infected with EHV-1. Thirty-days-old New Zealand rabbits were allocated in three groups (6 animals each) and submitted to different treatments: G1 (non-infected controls), G2 (inoculated with EHV-1) - 107 TCID50 intranasally - IN) and G3 (inoculated IN with EHV-1 and treated with GCV - 5mg/kg/day for 7 days) and monitored thereafter. All animals of G2 developed systemic signs (moderate to severe apathy, anorexia), ocular discharge and respiratory signs (serous to mucopurulent nasal discharge), including mild to severe respiratory distress. Viremia was detected in all rabbits of G2 for up to 11 days (mean duration = 6.5 days). One animal died after severe respiratory distress and neurological signs (bruxism, opistotonus). In addition, these animals gained less weight than the control (G1) and GCV-treated rabbits (G3) from days 4 to 14pi (p 0.05). The clinical score of rabbits of G2 was statistically higher than the other groups from days 3 to 6pi (p 0.05), demonstrating a more severe disease. In contrast, G3 rabbits did not present systemic signs, presented only a mild and transient nasal secretion and gained more weight than G2 animals (p 0.05). In addition, viremia was detected in only 3 rabbits and was transient (average of 2.3 days). Thus, administration of GCV to rabbits inoculated IN with EHV-1 resulted in an important attenuation of the clinical disease as demonstrated by full prevention of systemic signs, maintenance of weight gain and by drastic reduction in viremia and in the magnitude of respiratory signs. These results are promising towards further testing of GCV as a potential drug for anti-herpetic therapy in horses.

RESUMO: O alfaherpesvírus equino 1 (EHV-1) é um importante patógeno de equinos, associado com doença respiratória, neurológica e abortos. Como a vacinação nem sempre é eficaz, a terapia anti-herpética pode representar uma alternativa para prevenir as perdas causadas pela infecção. Para tal, investigou-se a atividade do ganciclovir (GCV), uma droga anti-herpética de uso humano, em coelhos infectados experimentalmente com o EHV-1. Coelhos da raça Nova Zelândia com 30 dias de idade foram alocados em três grupos (6 animais cada) e submetidos a diferentes tratamentos: G1 (controles não infectados), G2 (inoculados com o EHV-1) - 107 TCID50 intranasal - IN) e G3 (inoculados IN com o EHV-1 e tratados com GCV - 5mg/kg/dia por 7 dias), e monitorados posteriormente. Todos os animais do G2 desenvolveram sinais sistêmicos (apatia moderada a grave, anorexia), secreção ocular e sinais respiratórios (secreção nasal serosa a mucopurulenta), incluindo dificuldade respiratória leve a grave. Viremia foi detectada em todos os coelhos do G2 por até 11 dias (duração média = 6,5 dias). Um animal morreu após dificuldade respiratória grave e sinais neurológicos (bruxismo, opistótono). Além disso, esses animais ganharam menos peso que os coelhos controle (G1) e tratados com GCV (G3) entre os dias 4 e 14pi (p 0,05). O escore clínico de coelhos do G2 foi estatisticamente maior que os demais grupos dos dias 3 a 6pi (p 0,05), demonstrando uma doença mais grave. Em contraste, os coelhos do G3 não apresentaram sinais sistêmicos, apresentaram apenas secreção nasal leve e transiente e ganharam mais peso que os animais do G2 (p 0,05). Além disso, a viremia foi detectada em apenas 3 coelhos e foi transitória (média de 2,3 dias). Assim, a administração de GCV a coelhos inoculados com EHV-1 resultou em uma importante atenuação da doença clínica, como demonstrado pela prevenção completa de sinais sistêmicos, manutenção do ganho de peso e pela redução drástica da viremia e da magnitude dos sinais respiratórios. Estes resultados são promissores para testes adicionais com o GCV para potencial terapêutico anti-herpética em equinos.

Ganciclovir attenuates the respiratory disease induced by Equid alphaherpesvirus 1 in rabbits / O ganciclovir atenua a doença respiratória produzida pelo alfaherpesvírus equino 1 em coelhos

Equid alphaherpesvirus 1 (EHV-1) is an important pathogen of horses, associated with respiratory, neurological disease and abortions. As vaccination is not always effective, anti-herpetic therapy may represent an alternative to prevent the losses caused by the infection. We herein investigated the activity of ganciclovir (GCV), an anti-herpetic human drug, in rabbits experimentally infected with EHV-1. Thirty-days-old New Zealand rabbits were allocated in three groups (6 animals each) and submitted to different treatments: G1 (non-infected controls), G2 (inoculated with EHV-1) - 107 TCID50 intranasally - IN) and G3 (inoculated IN with EHV-1 and treated with GCV - 5mg/kg/day for 7 days) and monitored thereafter. All animals of G2 developed systemic signs (moderate to severe apathy, anorexia), ocular discharge and respiratory signs (serous to mucopurulent nasal discharge), including mild to severe respiratory distress. Viremia was detected in all rabbits of G2 for up to 11 days (mean duration = 6.5 days). One animal died after severe respiratory distress and neurological signs (bruxism, opistotonus). In addition, these animals gained less weight than the control (G1) and GCV-treated rabbits (G3) from days 4 to 14pi (p<0.05). The clinical score of rabbits of G2 was statistically higher than the other groups from days 3 to 6pi (p<0.05), demonstrating a more severe disease. In contrast, G3 rabbits did not present systemic signs, presented only a mild and transient nasal secretion and gained more weight than G2 animals (p<0.05). In addition, viremia was detected in only 3 rabbits and was transient (average of 2.3 days). Thus, administration of GCV to rabbits inoculated IN with EHV-1 resulted in an important attenuation of the clinical disease as demonstrated by full prevention of systemic signs, maintenance of weight gain and by drastic reduction in viremia and in the magnitude of respiratory signs. These results are promising towards further testing of GCV as a potential drug for anti-herpetic therapy in horses.(AU)

O alfaherpesvírus equino 1 (EHV-1) é um importante patógeno de equinos, associado com doença respiratória, neurológica e abortos. Como a vacinação nem sempre é eficaz, a terapia anti-herpética pode representar uma alternativa para prevenir as perdas causadas pela infecção. Para tal, investigou-se a atividade do ganciclovir (GCV), uma droga anti-herpética de uso humano, em coelhos infectados experimentalmente com o EHV-1. Coelhos da raça Nova Zelândia com 30 dias de idade foram alocados em três grupos (6 animais cada) e submetidos a diferentes tratamentos: G1 (controles não infectados), G2 (inoculados com o EHV-1) - 107 TCID50 intranasal - IN) e G3 (inoculados IN com o EHV-1 e tratados com GCV - 5mg/kg/dia por 7 dias), e monitorados posteriormente. Todos os animais do G2 desenvolveram sinais sistêmicos (apatia moderada a grave, anorexia), secreção ocular e sinais respiratórios (secreção nasal serosa a mucopurulenta), incluindo dificuldade respiratória leve a grave. Viremia foi detectada em todos os coelhos do G2 por até 11 dias (duração média = 6,5 dias). Um animal morreu após dificuldade respiratória grave e sinais neurológicos (bruxismo, opistótono). Além disso, esses animais ganharam menos peso que os coelhos controle (G1) e tratados com GCV (G3) entre os dias 4 e 14pi (p<0,05). O escore clínico de coelhos do G2 foi estatisticamente maior que os demais grupos dos dias 3 a 6pi (p<0,05), demonstrando uma doença mais grave. Em contraste, os coelhos do G3 não apresentaram sinais sistêmicos, apresentaram apenas secreção nasal leve e transiente e ganharam mais peso que os animais do G2 (p<0,05). Além disso, a viremia foi detectada em apenas 3 coelhos e foi transitória (média de 2,3 dias). Assim, a administração de GCV a coelhos inoculados com EHV-1 resultou em uma importante atenuação da doença clínica, como demonstrado pela prevenção completa de sinais sistêmicos, manutenção do ganho de peso e pela redução drástica da viremia e da magnitude dos sinais respiratórios. Estes resultados são promissores para testes adicionais com o GCV para potencial terapêutico anti-herpética em equinos.(AU)

Ganciclovir attenuates the respiratory disease induced by Equid alphaherpesvirus 1 in rabbits / O ganciclovir atenua a doença respiratória produzida pelo alfaherpesvírus equino 1 em coelhos

Equid alphaherpesvirus 1 (EHV-1) is an important pathogen of horses, associated with respiratory, neurological disease and abortions. As vaccination is not always effective, anti-herpetic therapy may represent an alternative to prevent the losses caused by the infection. We herein investigated the activity of ganciclovir (GCV), an anti-herpetic human drug, in rabbits experimentally infected with EHV-1. Thirty-days-old New Zealand rabbits were allocated in three groups (6 animals each) and submitted to different treatments: G1 (non-infected controls), G2 (inoculated with EHV-1) - 107 TCID50 intranasally - IN) and G3 (inoculated IN with EHV-1 and treated with GCV - 5mg/kg/day for 7 days) and monitored thereafter. All animals of G2 developed systemic signs (moderate to severe apathy, anorexia), ocular discharge and respiratory signs (serous to mucopurulent nasal discharge), including mild to severe respiratory distress. Viremia was detected in all rabbits of G2 for up to 11 days (mean duration = 6.5 days). One animal died after severe respiratory distress and neurological signs (bruxism, opistotonus). In addition, these animals gained less weight than the control (G1) and GCV-treated rabbits (G3) from days 4 to 14pi (p<0.05). The clinical score of rabbits of G2 was statistically higher than the other groups from days 3 to 6pi (p<0.05), demonstrating a more severe disease. In contrast, G3 rabbits did not present systemic signs, presented only a mild and transient nasal secretion and gained more weight than G2 animals (p<0.05). In addition, viremia was detected in only 3 rabbits and was transient (average of 2.3 days)...(AU)

O alfaherpesvírus equino 1 (EHV-1) é um importante patógeno de equinos, associado com doença respiratória, neurológica e abortos. Como a vacinação nem sempre é eficaz, a terapia anti-herpética pode representar uma alternativa para prevenir as perdas causadas pela infecção. Para tal, investigou-se a atividade do ganciclovir (GCV), uma droga anti-herpética de uso humano, em coelhos infectados experimentalmente com o EHV-1. Coelhos da raça Nova Zelândia com 30 dias de idade foram alocados em três grupos (6 animais cada) e submetidos a diferentes tratamentos: G1 (controles não infectados), G2 (inoculados com o EHV-1) - 107 TCID50 intranasal - IN) e G3 (inoculados IN com o EHV-1 e tratados com GCV - 5mg/kg/dia por 7 dias), e monitorados posteriormente. Todos os animais do G2 desenvolveram sinais sistêmicos (apatia moderada a grave, anorexia), secreção ocular e sinais respiratórios (secreção nasal serosa a mucopurulenta), incluindo dificuldade respiratória leve a grave. Viremia foi detectada em todos os coelhos do G2 por até 11 dias (duração média = 6,5 dias). Um animal morreu após dificuldade respiratória grave e sinais neurológicos (bruxismo, opistótono). Além disso, esses animais ganharam menos peso que os coelhos controle (G1) e tratados com GCV (G3) entre os dias 4 e 14pi (p<0,05). O escore clínico de coelhos do G2 foi estatisticamente maior que os demais grupos dos dias 3 a 6pi (p<0,05), demonstrando uma doença mais grave. Em contraste, os coelhos do G3 não apresentaram sinais sistêmicos, apresentaram apenas secreção nasal leve e transiente e ganharam mais peso que os animais do G2 (p<0,05). Além disso, a viremia foi detectada em apenas 3 coelhos e foi transitória (média de 2,3 dias)...(AU)

Identification of equine herpesvirus type 1 as cause of abortion in mares in Southern Brazil / Identificação do herpesvirus equino tipo 1 como causa de abortos em éguas no sul do Brasil

Foi realizado um estudo retrospectivo dos casos suspeitos de aborto por herpesvírus equino observados na região sul do Rio Grande do Sul entre 1978 e 2016. Foram revisados os protocolos de necropsia do Laboratório Regional de Diagnóstico da Faculdade de Veterinária da Universidade Federal de Pelotas resgatando-se os dados epidemiológicos, lesões macroscópicas e histológicas de cada caso. Foram observados dois surtos da enfermidade com prevalência entre 5,7% e 50% nos diferentes estabelecimentos, e dois casos individuais. Em todos os casos foram enviados fragmentos de órgãos fetais formolizados. Histologicamente, em todos os casos foram observados focos de necrose no fígado, pulmão e baço e presença de corpúsculos de inclusão acidofílico em hepatócitos, células epiteliais pulmonares e leucócitos. A imuno-histoquímica utilizando anticorpo policlonal comercial para herpesvirus equino-1 (EHV-1) revelou marcação positiva em todos os casos. Além disso, foi extraído DNA dos tecidos emblocados em parafina dos casos e submetidos à técnica de nested-PCR seguida de sequenciamento genômico dos amplicons em duas amostras. Estes achados indicam, que EHV-1 deve ser considerado como diagnóstico diferencial em casos de aborto em equinos no sul do Rio Grande do Sul.(AU)

Identification of equine herpesvirus type 1 as cause of abortion in mares in Southern Brazil / Identificação do herpesvirus equino tipo 1 como causa de abortos em éguas no sul do Brasil

Foi realizado um estudo retrospectivo dos casos suspeitos de aborto por herpesvírus equino observados na região sul do Rio Grande do Sul entre 1978 e 2016. Foram revisados os protocolos de necropsia do Laboratório Regional de Diagnóstico da Faculdade de Veterinária da Universidade Federal de Pelotas resgatando-se os dados epidemiológicos, lesões macroscópicas e histológicas de cada caso. Foram observados dois surtos da enfermidade com prevalência entre 5,7% e 50% nos diferentes estabelecimentos, e dois casos individuais. Em todos os casos foram enviados fragmentos de órgãos fetais formolizados. Histologicamente, em todos os casos foram observados focos de necrose no fígado, pulmão e baço e presença de corpúsculos de inclusão acidofílico em hepatócitos, células epiteliais pulmonares e leucócitos. A imuno-histoquímica utilizando anticorpo policlonal comercial para herpesvirus equino-1 (EHV-1) revelou marcação positiva em todos os casos. Além disso, foi extraído DNA dos tecidos emblocados em parafina dos casos e submetidos à técnica de nested-PCR seguida de sequenciamento genômico dos amplicons em duas amostras. Estes achados indicam, que EHV-1 deve ser considerado como diagnóstico diferencial em casos de aborto em equinos no sul do Rio Grande do Sul.(AU)

Brazilian spotted fever serological survey among equids at the Guarapiranga Dam area in the city of São Paulo, Brazil / Investigação sorológica da febre maculosa brasileira entre equídeos na área da represa de Guarapiranga, na cidade de São Paulo, Brasil

In the Guarapiranga dam region located in the metropolitan area of São Paulo, human cases have been reported of Brazilian spotted fever (BSF), a tick-borne disease caused by the bacterium Rickettsia rickettsii. In this area, R. rickettsii is known to be transmitted to humans by Amblyomma aureolatum, a typical dog tick that is not associated with horses. In other BSF-endemic areas, R. rickettsii transmission is associated with Amblyomma sculptum, a tick species that typically infest capybaras and horses. The Guarapiranga Dam bears abundant populations of capybaras and horses. However, since nothing is known about a possible cycle of transmission of R. rickettsii by A. sculptum in this area, this study evaluated such transmission by performing a serosurvey of horses living in the Guarapiranga Dam region. A total of 206 equids living in the margins of the Guarapiranga Dam were serologically tested for antibodies reactive to five Rickettsia species, four of the spotted fever group (R. rickettsii, R. parkeri, R. amblyommatis, R. rhipicephali) and one basal group species, R. bellii. Overall, 171 (83%) equids reacted positively to at least one Rickettsia species. A total of 160 (78%), 123 (60%), 80 (39%), 72 (35%), and 71 (34%), equid sera reacted to R. bellii, R. rickettsii, R. parkeri, R. rhipicephali, and R. amblyommatis, respectively, with endpoint titers ranging from 64 to 1024 for R. bellii, and 64 to 512 for the remaining four Rickettsia species. Endpoint titers to R. bellii (median: 256) was significantly higher (P<0.05) than the endpoint titers to the other four Rickettsia species, for which the median values varied from 64 to 128. A total of 65 (32%) equid sera showed endpoint titers to R. bellii at least 4-fold higher than those to any of the other four antigens, indicating that they have been exposed to R. bellii or a very closely related species. Our results provide serological evidence that the sampled equids were not frequently exposed to R. rickettsii-infected ticks. Since horses are a highly suitable sentinel for R. rickettsii transmission by A. sculptum, we conclude that this tick species has no epidemiological role in the transmission of R. rickettsii in the BSF-endemic area of the Guarapiranga Dam in the metropolitan area of São Paulo.(AU)

Na região da represa de Guarapiranga localizada na área metropolitana de São Paulo, têm sido relatados casos humanos de Febre Maculosa Brasileira (FMB), uma doença transmitida por carrapatos causada pela bactéria Rickettsia rickettsii. Nesta área de estudo, R. rickettsii é conhecida por ser transmitida aos seres humanos pelo Amblyomma aureolatum, um carrapato de cão que não está associado a cavalos. Em outras áreas endêmicas da FMB, a transmissão de R. rickettsii está associada ao Amblyomma sculptum, uma espécie de carrapato que normalmente infesta capivaras e cavalos. A represa de Guarapiranga possui populações abundantes de capivaras e cavalos; no entanto, como nada se sabe sobre um possível ciclo de transmissão de R. rickettsii por A. sculptum nessa área, este estudo avaliou essa transmissão realizando um levantamento sorológico em cavalos que vivem na região da represa de Guarapiranga. Um total de 206 equídeos que vivem nas margens da represa de Guarapiranga foram testados sorologicamente para cinco espécies de Rickettsia, sendo quatro do grupo da FMB (R. rickettsii, R. parkeri, R. amblyommatis, R. rhipicephali) e um do grupo basal (R. bellii). No geral, 171 (83%) equídeos reagiram positivamente a pelo menos uma espécie de Rickettsia. Um total de 160 (78%), 123 (60%), 80 (39%), 72 (35%) e 71 (34%), reagiram a R. bellii, R. rickettsii, R. parkeri, R. rhipicephali e R. amblyommatis, respectivamente, com títulos finais variando de 64 a 1024 para R. bellii e 64 a 512 para as quatro espécies restantes de Rickettsia. Os títulos finais para R. bellii (mediana: 256) foram significativamente maiores (P <0,05) do que os títulos para as outras quatro espécies de Rickettsia, para os quais os valores medianos variaram de 64 a 128. Um total de 65 (32%) equideos, os soros mostraram títulos finais para R. bellii pelo menos quatro vezes maior que os de qualquer um dos outros quatro antígenos, indicando que eles foram expostos a R. bellii ou a uma espécie muito próxima. Os resultados obtidos fornecem evidências sorológicas de que os equídeos amostrados não eram frequentemente expostos a carrapatos infectados por R. rickettsii. Como os cavalos são um sentinela altamente adequado para a transmissão de R. rickettsiipor A. sculptum, a conclusão obtida foi que essa espécie de carrapato não tem papel epidemiológico na transmissão da bactéria na área endêmica de FMB da represa de Guarapiranga na região metropolitana de São Paulo.(AU)

Brazilian spotted fever serological survey among equids at the Guarapiranga Dam area in the city of São Paulo, Brazil / Investigação sorológica da febre maculosa brasileira entre equídeos na área da represa de Guarapiranga, na cidade de São Paulo, Brasil

In the Guarapiranga dam region located in the metropolitan area of São Paulo, human cases have been reported of Brazilian spotted fever (BSF), a tick-borne disease caused by the bacterium Rickettsia rickettsii. In this area, R. rickettsii is known to be transmitted to humans by Amblyomma aureolatum, a typical dog tick that is not associated with horses. In other BSF-endemic areas, R. rickettsii transmission is associated with Amblyomma sculptum, a tick species that typically infest capybaras and horses. The Guarapiranga Dam bears abundant populations of capybaras and horses. However, since nothing is known about a possible cycle of transmission of R. rickettsii by A. sculptum in this area, this study evaluated such transmission by performing a serosurvey of horses living in the Guarapiranga Dam region. A total of 206 equids living in the margins of the Guarapiranga Dam were serologically tested for antibodies reactive to five Rickettsia species, four of the spotted fever group (R. rickettsii, R. parkeri, R. amblyommatis, R. rhipicephali) and one basal group species, R. bellii. Overall, 171 (83%) equids reacted positively to at least one Rickettsia species. A total of 160 (78%), 123 (60%), 80 (39%), 72 (35%), and 71 (34%), equid sera reacted to R. bellii, R. rickettsii, R. parkeri, R. rhipicephali, and R. amblyommatis, respectively, with endpoint titers ranging from 64 to 1024 for R. bellii, and 64 to 512 for the remaining four Rickettsia species. Endpoint titers to R. bellii (median: 256) was significantly higher (P<0.05) than the endpoint titers to the other four Rickettsia species, for which the median values varied from 64 to 128. A total of 65 (32%) equid sera showed endpoint titers to R. bellii at least 4-fold higher than those to any of the other four antigens, indicating that they have been exposed to R. bellii or a very closely related species. Our results provide serological evidence that the sampled equids were not frequently exposed to R. rickettsii-infected ticks. Since horses are a highly suitable sentinel for R. rickettsii transmission by A. sculptum, we conclude that this tick species has no epidemiological role in the transmission of R. rickettsii in the BSF-endemic area of the Guarapiranga Dam in the metropolitan area of São Paulo.(AU)

Na região da represa de Guarapiranga localizada na área metropolitana de São Paulo, têm sido relatados casos humanos de Febre Maculosa Brasileira (FMB), uma doença transmitida por carrapatos causada pela bactéria Rickettsia rickettsii. Nesta área de estudo, R. rickettsii é conhecida por ser transmitida aos seres humanos pelo Amblyomma aureolatum, um carrapato de cão que não está associado a cavalos. Em outras áreas endêmicas da FMB, a transmissão de R. rickettsii está associada ao Amblyomma sculptum, uma espécie de carrapato que normalmente infesta capivaras e cavalos. A represa de Guarapiranga possui populações abundantes de capivaras e cavalos; no entanto, como nada se sabe sobre um possível ciclo de transmissão de R. rickettsii por A. sculptum nessa área, este estudo avaliou essa transmissão realizando um levantamento sorológico em cavalos que vivem na região da represa de Guarapiranga. Um total de 206 equídeos que vivem nas margens da represa de Guarapiranga foram testados sorologicamente para cinco espécies de Rickettsia, sendo quatro do grupo da FMB (R. rickettsii, R. parkeri, R. amblyommatis, R. rhipicephali) e um do grupo basal (R. bellii). No geral, 171 (83%) equídeos reagiram positivamente a pelo menos uma espécie de Rickettsia. Um total de 160 (78%), 123 (60%), 80 (39%), 72 (35%) e 71 (34%), reagiram a R. bellii, R. rickettsii, R. parkeri, R. rhipicephali e R. amblyommatis, respectivamente, com títulos finais variando de 64 a 1024 para R. bellii e 64 a 512 para as quatro espécies restantes de Rickettsia. Os títulos finais para R. bellii (mediana: 256) foram significativamente maiores (P <0,05) do que os títulos para as outras quatro espécies de Rickettsia, para os quais os valores medianos variaram de 64 a 128. Um total de 65 (32%) equideos, os soros mostraram títulos finais para R. bellii pelo menos quatro vezes maior que os de qualquer um dos outros quatro antígenos, indicando que eles foram expostos a R. bellii ou a uma espécie muito próxima. Os resultados obtidos fornecem evidências sorológicas de que os equídeos amostrados não eram frequentemente expostos a carrapatos infectados por R. rickettsii. Como os cavalos são um sentinela altamente adequado para a transmissão de R. rickettsiipor A. sculptum, a conclusão obtida foi que essa espécie de carrapato não tem papel epidemiológico na transmissão da bactéria na área endêmica de FMB da represa de Guarapiranga na região metropolitana de São Paulo.(AU)