Laparoscopic adrenalectomy: comparison between pneumoperitoneum and the use of a laparoscopic lift device in dog cadavers / Adrenalectomia laparoscópica: comparação entre o pneumoperitônio e o uso de dispositivo paraliftlaparoscopy em cadáveres de cães

This study evaluated the feasibility of abdominal liftfor laparoscopic adrenalectomy and compared it with the conventional laparoscopic technique using pneumoperitoneum with medicinal CO2 in dog cadavers. The total surgical time (TST), adrenalectomy time (AT), and gland integrity after removal were evaluated. Thirty-eight adrenalectomies were performed in 19 cadavers. Regardless of the antimere, the TST was significantly lower in the CO2 procedures than in the lift laparoscopy procedures (P=0.001). When comparing the techniques between antimeres, the TST was significantly higher on the left side with lift laparoscopy than with CO2 (P=0.015) and similar between the techniques on the right side of the animals (P=0.086). In the comparison of AT, regardless of the execution side, no differences were observed between the techniques (P=0.05). The same was observed when AT was evaluated separately using antimeres (P=0.902). Of the 38 adrenals evaluated, 92.1% were removed in a single block, and 32.29% had a superficial lesion in the capsule. There was no difference between the groups in the removal capacity in a single block (P=0.340) and capsule integrity (P=0.287). Abdominal lift for laparoscopic adrenalectomy is a feasible technique in dog cadavers; however, it requires a longer surgical time than the conventional technique. The traction force used to elevate the abdominal wall must be evaluated.

O presente trabalho teve como objetivo avaliar a exequibilidade da adrenalectomia laparoscópica utilizando dispositivo de elevação da parede abdominal via liftlaparoscopy e comparar com a técnica laparoscópica convencional utilizando pneumoperitônio com CO2 medicinal em cadáveres de cães. Para isso, avaliou-se tempo cirúrgico total (TCT), tempo de adrenalectomia (TA) e integridade das glândulas após remoção. Foram realizadas 38 adrenalectomias em 19 cadáveres. Independentemente do antímero, o TCT foi significativamente menor nos procedimentos com CO2 do que com liftlaparoscopy (P=0,001). Na comparação das técnicas entre antímeros, o TCT foi significativamente maior no lado esquerdo com liftlaparoscopy do que com CO2 (P = 0,015) e semelhante entre as técnicas no lado direito dos animais (P=0,086). Já na comparação do TA, independente do lado de execução, não foram observadas diferenças entre os métodos (P=0,05). O mesmo foi observado quando o TA foi avaliado separadamente por antímero (P=0,902). Das 38 adrenais avaliadas, 92,1% foram removidas em um único bloco e destas, 32,29% apresentaram lesão superficial na cápsula. Não houve diferença entre grupos para capacidade de remoção em um único bloco (P=0,340) e da integridade da cápsula (P=0,287). A adrenalectomia laparoscópica por elevação da parede abdominal é factível de ser realizada em cadáveres de cães, entretanto, demanda maior tempo cirúrgico quando comparada à técnica convencional. Além disso, a força de tração empregada para elevar a parede abdominal necessita ser avaliada.

Economic impact of gastrointestinal nematodes in Morada Nova sheep in Brazil / Impacto econômico de nematódeos gastrintestinais em ovinos Morada Nova no Brasil

Abstract This study evaluated the economic impact of gastrointestinal nematode (GIN) infection in Morada Nova lambs under different parasite chemical control conditions. For this, 246 lambs, in the rainy and dry season, were randomized into groups according to their anthelmintic treatment with levamisole: control (CT: no treatment); routine treatment (RT: treated every 42 days); and targeted selective treatment (TST: treated according to the average daily weight gain, DWG). From 63 days of age (D63) to D210, the lambs were weighed and monitored for GIN infection parameters. Spending on anthelmintics in the production system was 1.3% of the total economic result. The economic result per animal (R$ 5.00 = US$ 1.00) was higher in the RT group, amounting to US$ 6.60 in the rainy and US$ 5.69 in the dry season, due to higher DWG. Thus, RT presented economic results 14.4% and 10.9% higher than CT, and 7.2% and 1.9% higher than TST, in the rainy and dry season, respectively. However, fast development of resistance made RT unfeasible. Here, the economic impact of GIN infection on a national scale is discussed, demonstrating its importance and the impossibility of profitable and sustainable sheep production without adequate control.

Resumo Este estudo avaliou o impacto econômico da infecção por nematoides gastrintestinais (NGI), em cordeiros Morada Nova, sob diferentes condições de controle químico dos parasitas. Para isso, 246 cordeiros, na estação chuvosa e seca, foram randomizados em grupos de acordo com o tratamento com levamisol: controle (TC: sem tratamento); tratamento rotineiro (TR: tratado a cada 42 dias); e tratamento seletivo direcionado (TST: tratado de acordo com o ganho de peso médio diário, GMD). Dos 63 dias de idade (D63) ao D210, os cordeiros foram pesados ​​e monitorados quanto aos parâmetros de infecção por NGI. O gasto com anti-helmínticos no sistema produtivo foi de 1,3% do resultado econômico total. O resultado econômico por animal (R$ 5,00 = US$ 1,00) foi maior no grupo RT, totalizando US$ 6,60 na estação chuvosa e US$ 5,69 na seca, devido ao maior GMD. Assim, o RT apresentou resultados econômicos 14,4% e 10,9% superiores ao TC, e 7,2% e 1,9% superiores ao TST, no período chuvoso e seco, respectivamente. Entretanto o rápido desenvolvimento de resistência inviabiliza o TR. O impacto econômico da infecção por NGI em escala nacional são aqui discutidos, demonstrando sua importância e a impossibilidade de uma ovinocultura lucrativa e sustentável sem o controle adequado.

Bovine abortion associated with Staphylococcus aureus infection: characterization of S. aureus strain isolated from fetal tissues / Aborto bovino associado à infecção por Staphylococcus aureus: caracterização da cepa de S. aureus isolada a partir de tecidos fetais

Staphylococcus aureus is a gram-positive bacterium, commonly found colonizing the skin and mucous membranes of humans and animals. This report describes a case of fetal loss associated with S. aureus infection in a cow. A six-month old, crossbred male bovine fetus from a beef farm was submitted for necropsy. At gross examination fibrinous pleuropneumonia was observed. Histologically, lesions were restricted to the lungs and consisted of marked multifocal to coalescing areas of inflammatory infiltrate of neutrophils, abundant fibrin exudation, necrosis of bronchiolar epithelium and numerous aggregates of coccoid bacteria. Lung and abomasal fluid bacterial culture yielded pure culture of S. aureus, which was characterized as a multidrug resistant strain. Molecular analysis indicated that the studied strain presented several genes of virulence factors including toxic shock syndrome toxin-1 (tst), staphylococcal enterotoxin type A (sea), Panton-Valentine leukocidin (pvl), alpha-hemolysin (hla) and delta-hemolysin (hld). This report documents an infrequent case of fetal loss in cattle due to infection with a highly virulent S. aureus strain.(AU)

Staphylococcus aureus é uma bactéria gram-positiva, comumente encontrada colonizando a pele e as membranas mucosas de humanos e animais. O presente relato descreve um caso de aborto bovino associado à infecção por S. aureus. Um feto bovino, macho, cruzado, com seis meses de idade gestacional proveniente de uma fazenda de gado de corte foi submetido para a necropsia. Pleuropneumonia supurativa foi observada na avaliação macroscópica. Histologicamente as lesões encontravam-se restritas aos pulmões e eram representadas por infiltrado inflamatório acentuado, multifocal a coalescente de neutrófilos, acentuada exsudação de fibrina, necrose do epitélio bronquiolar e numerosos agregados bacterianos cocoides. A cultura bacteriana de fragmento de pulmão e líquido do abomaso revelou o crescimento puro de S. aureus, que foi caracterizado como uma cepa multirresistente a drogas. Análises moleculares indicaram que a cepa estudada apresentava vários fatores de virulência, incluindo toxina 1 da síndrome do choque tóxico (TSST-1), enterotoxina estafilocócica tipo A (sea), leucocidina Panton-Valentine (pvl), hemolisina alfa (hla) e hemolisina delta (hld). O presente relato documenta um caso infrequente de aborto bovino devido à infecção por uma cepa altamente virulenta de S. aureus.(AU)

Prevalence of bovine tuberculosis in the Aksu Region of Xinjiang, China, between 1985 and 2016 / Prevalência de tuberculose bovina na região Aksu de Xinjiang, China, entre 1985 e 2016

Prevalence of bovine tuberculosis infection in cattle in Aksu Prefecture determined by intradermal tuberculin skin test (TST), between 1985 and 2016. Cattle were analyzed according to region, feeding pattern, herds and age. A total of 890,009 cattle were tested, with overall bovine tuberculosis prevalence of 0.13% (1172/890009). Statistically significant difference was found in feeding pattern and herds. Prevalence in cows (0.19%, 615/327022) was higher than that in beeves (P< 0.01, OR= 1.903, 95% CI = 1.696 to 2.134). Significant difference (P< 0.01; OR= 2.238, 95%; CI= 1.937 to 2.585) was evident for rates for bovine tuberculosis in the peasant household (0.12%, 942/802343) and farm groups (0.26%, 230/87666). The overall prevalence of bTB was decreased in the Aksu Prefecture, especially the positive rate was under 0.1% in 2010s. We concluded that the control measures forbovine tuberculosis in the Aksu region cattle herds are effective.(AU)

Prevalência de infecção por tuberculose bovina em gado na prefeitura de Aksu determinada por teste cutâneo tuberculínico (TST) entre 1985 e 2016 foi avaliada. O gado foi analisado de acordo com região, padrão alimentar, rebanho e idade. Um total de 890009 animais foram testados, com prevalência de 0,13% de tuberculose bovina (1172/890009). Diferença estatisticamente significativa foi encontrada em padrão alimentar e rebanhos. Prevalência em vacas (0,19%, 615/327022) foi mais alta que em bois (P< 0,01, OR= 1,903, 95% CI = 1,696 a 2,134). Diferenças significativas (P< 0,01; OR= 2,238, 95%; CI= 1,937 a 2,585) foram evidentes em taxas para tuberculose bovina em casas de camponeses (0,12%, 942/802343) e grupos de fazendeiros (0,26%, 230/87666). A prevalência de bTB caiu na prefeitura Aksu, a taxa positiva se encontrava abaixo de 0.1% a partir de 2010. Conclui-se que as medidas de controle para tuberculose bovina na região de Aksu foram eficazes.(AU)

Prevalence of bovine tuberculosis in the Aksu Region of Xinjiang, China, between 1985 and 2016 / Prevalência de tuberculose bovina na região Aksu de Xinjiang, China, entre 1985 e 2016

Prevalence of bovine tuberculosis infection in cattle in Aksu Prefecture determined by intradermal tuberculin skin test (TST), between 1985 and 2016. Cattle were analyzed according to region, feeding pattern, herds and age. A total of 890,009 cattle were tested, with overall bovine tuberculosis prevalence of 0.13% (1172/890009). Statistically significant difference was found in feeding pattern and herds. Prevalence in cows (0.19%, 615/327022) was higher than that in beeves (P< 0.01, OR= 1.903, 95% CI = 1.696 to 2.134). Significant difference (P< 0.01; OR= 2.238, 95%; CI= 1.937 to 2.585) was evident for rates for bovine tuberculosis in the peasant household (0.12%, 942/802343) and farm groups (0.26%, 230/87666). The overall prevalence of bTB was decreased in the Aksu Prefecture, especially the positive rate was under 0.1% in 2010s. We concluded that the control measures forbovine tuberculosis in the Aksu region cattle herds are effective.(AU)

Prevalência de infecção por tuberculose bovina em gado na prefeitura de Aksu determinada por teste cutâneo tuberculínico (TST) entre 1985 e 2016 foi avaliada. O gado foi analisado de acordo com região, padrão alimentar, rebanho e idade. Um total de 890009 animais foram testados, com prevalência de 0,13% de tuberculose bovina (1172/890009). Diferença estatisticamente significativa foi encontrada em padrão alimentar e rebanhos. Prevalência em vacas (0,19%, 615/327022) foi mais alta que em bois (P< 0,01, OR= 1,903, 95% CI = 1,696 a 2,134). Diferenças significativas (P< 0,01; OR= 2,238, 95%; CI= 1,937 a 2,585) foram evidentes em taxas para tuberculose bovina em casas de camponeses (0,12%, 942/802343) e grupos de fazendeiros (0,26%, 230/87666). A prevalência de bTB caiu na prefeitura Aksu, a taxa positiva se encontrava abaixo de 0.1% a partir de 2010. Conclui-se que as medidas de controle para tuberculose bovina na região de Aksu foram eficazes.(AU)

Ocorrência de genes codificadores de enterotoxinas estafilocócicas em amostras de leite de vacas / Occurrence of genes encoding staphylococcal enterotoxins isolated from cow's milk samples

Objetivou-se com este trabalho identificar a ocorrência de genes codificadores de enterotoxinas estafilocócicas (sea, seb, sec e seg) e do gene da toxina 1 responsável pela síndrome do choque tóxico (tst) em isolados de Staphylococcus aureus procedentes de casos de mastite bovina, no estado de Pernambuco, Brasil. Foram analisados 93 isolados e observou-se a presença de genes toxigênicos em 20 (21,6%) deles, dos quais 11 (55,0%) foram positivos para o gene tst, sete (35,0%) para o gene sec e dois (10,0%) para o gene seg. Dentre os 20 isolados que amplificaram na PCR para presença dos genes sec, seg e tst, 16 (80,0%) foram positivos apenas para um gene e quatro (20,0%) foram positivos para dois genes (sec e tst). Das 17 propriedades de onde as amostras tiveram origem, sete (41,2%) apresentaram amostras positivas para pelo menos um dos genes sec, seg e tst. Este é primeiro registro de ocorrência dos genes codificadores das enterotoxinas SEC e TST-1 em amostras de leite de vacas com mastite no estado de Pernambuco, Brasil.

The objective of this study was to identify the occurrence of genes expressing staphylococcal enterotoxin (sea, seb, sec, and seg) and the toxin gene 1 of toxic shock syndrome (tst) in Staphylococcus aureus coming from cases of bovine mastitis in the state of Pernambuco, Brazil. We analyzed 93 isolates and we observed the presence of toxigenic gene in 20 (21.6%) samples, of which 11 (55.0%) were positive for tst gene, seven (35.0%) for the sec gene, and two (10.0%) for the seg gene. Of the 20 isolates amplified in PCR for the presence of the sec gene, seg and tst, 16 (80.0%) were positive for only one gene and four (20.0%) were positive for two genes (sec and tst). Of the 17 properties from which the samples originated, seven (41.2%) had positive samples for at least one of the genes sec, seg, and tst. This is the first record of the occurrence of the genes encoding the enterotoxin SEC and TST-1 in milk samples from cows with mastitis in the state of Pernambuco, Brazil.

Ocorrência de genes codificadores de enterotoxinas estafilocócicas em amostras de leite de vacas / Occurrence of genes encoding staphylococcal enterotoxins isolated from cow's milk samples

Objetivou-se com este trabalho identificar a ocorrência de genes codificadores de enterotoxinas estafilocócicas (sea, seb, sec e seg) e do gene da toxina 1 responsável pela síndrome do choque tóxico (tst) em isolados de Staphylococcus aureus procedentes de casos de mastite bovina, no estado de Pernambuco, Brasil. Foram analisados 93 isolados e observou-se a presença de genes toxigênicos em 20 (21,6%) deles, dos quais 11 (55,0%) foram positivos para o gene tst, sete (35,0%) para o gene sec e dois (10,0%) para o gene seg. Dentre os 20 isolados que amplificaram na PCR para presença dos genes sec, seg e tst, 16 (80,0%) foram positivos apenas para um gene e quatro (20,0%) foram positivos para dois genes (sec e tst). Das 17 propriedades de onde as amostras tiveram origem, sete (41,2%) apresentaram amostras positivas para pelo menos um dos genes sec, seg e tst. Este é primeiro registro de ocorrência dos genes codificadores das enterotoxinas SEC e TST-1 em amostras de leite de vacas com mastite no estado de Pernambuco, Brasil.(AU)

The objective of this study was to identify the occurrence of genes expressing staphylococcal enterotoxin (sea, seb, sec, and seg) and the toxin gene 1 of toxic shock syndrome (tst) in Staphylococcus aureus coming from cases of bovine mastitis in the state of Pernambuco, Brazil. We analyzed 93 isolates and we observed the presence of toxigenic gene in 20 (21.6%) samples, of which 11 (55.0%) were positive for tst gene, seven (35.0%) for the sec gene, and two (10.0%) for the seg gene. Of the 20 isolates amplified in PCR for the presence of the sec gene, seg and tst, 16 (80.0%) were positive for only one gene and four (20.0%) were positive for two genes (sec and tst). Of the 17 properties from which the samples originated, seven (41.2%) had positive samples for at least one of the genes sec, seg, and tst. This is the first record of the occurrence of the genes encoding the enterotoxin SEC and TST-1 in milk samples from cows with mastitis in the state of Pernambuco, Brazil.(AU)

Agronomic and nutritional responses of Carajas elephant grass fertilized with protected and non-protected urea / Respostas agronômicas e nutricionais de capim elefante Carajas adubado com ureia protegida e não protegida

The objective of this study was to assess the agronomic and nutritional responses of the elephant grass cultivar Carajas when subjected to fertilization with protected and conventional urea. A randomized block design with 4×2+1 factorial arrangement was adopted. The treatments consisted of four doses (100, 200, 400, and 800 kg N ha-¹), two nitrogen sources (conventional and protected urea), and one additional treatment without fertilization. The experiment was carried out from October 2015 to March 2016, in a semi-arid region with a dystrophic yellow latosol type soil. The application of conventional urea was done with each of the multiple cuts performed per year, whereas the protected urea was applied in a single dose. Total senescence rate (TSR), leaf and stem elongation, height, tiller density, total forage biomass, green leaf and stem biomass, and dry matter all increased with increasing N doses. However, the phyllochron, live material/dead material ratio, and agronomic efficiency all decreased with N increasing dose. Plants fertilized with protected urea presented greater TSR and phyllochron. Mineral matter content was higher in plants fertilized with conventional urea. Neutral detergent fiber content was maximized at a dose of 437.63 kg N ha-¹. The protected urea resulted in a higher value of leaf/stem ratio at the 400 kg N ha-¹ dose, whereas ether extract and crude protein at the 800 kg N ha-¹. With application of conventional urea, the highest crude protein value occurred at a dose of 100 kg N ha-¹. The morphogenesis, structure, production, and chemical composition of elephant grass 'Carajas' were all positively influenced when nitrogen doses were increased, with the recommended optimal dose for use being 400 kg N ha-1 for both sources. The use of protected urea is recommended because of its slow release and need for only a single application.(AU)

Objetivou-se avaliar as respostas agronômicas e nutricionais do capim elefante cultivar Carajas submetido à adubação com ureia protegida e convencional. Adotou-se o delineamento em blocos casualizado com arranjo fatorial 4x2+1. Os tratamentos constituíram-se por quatro doses (100; 200; 400 e 800 kg N ha-¹) e duas fontes de nitrogênio (ureia convencional e protegida) e um tratamento adicional sem fertilidade. O experimento foi conduzido durante os meses de outubro de 2015 a março de 2016, em uma região com clima semiárido e em um solo do tipo latossolo amarelo distrófico. A aplicação da ureia convencional foi de acordo com o número de cortes por ano e a ureia protegida foi em dose única. As taxas de senescência total (TST), alongamento de folha e colmo, altura, densidade de perfilhos, biomassa de forragem total, biomassa de lâmina verde, de colmo e matéria seca elevaram-se com aumento das doses de N. O filocrono, a relação material vivo/morto e a eficiência agronômica reduziram. As plantas adubadas com ureia protegida apresentaram maior TST e filocrono. A matéria mineral foi maior em plantas adubadas com a ureia convencional. Fibra em detergente neutro apresentou valor máximo na dose 437,63 kg N ha-¹. A ureia protegida apresentou maior valor para relação folha/colmo na dose 400 kg N ha-¹, enquanto extrato etéreo e proteína bruta na dose 800 kg N ha¹. Maiores valores de proteína bruta foram observados em plantas adubadas com a ureia convencional na dose 100 kg N ha-¹. A morfogênese, estrutura, produção e composição química do capim-elefante cv. Carajas são influenciadas positivamente quando as doses de nitrogênio foram aumentadas, sendo recomendado o uso da dose 400 kg N ha-¹ para ambas as fontes. Recomenda-se utilizar a ureia protegida por apresentar liberação lenta e única aplicação.(AU)

ESTUDO DO IMPACTO DA INFECÇÃO POR NEMATÓDEOS GASTRINTESTINAIS NO DESEMPENHO DE CORDEIROS MORADA NOVA PARA DESENVOLVIMENTO DE MÉTODO SELETIVO DE CONTROLE PARASITÁRIO

Os nematódeos gastrintestinais (NGI) são um grande entrave para a ovinocultura. Cordeiros da raça Morada Nova são resilientes aos NGI, podendo apresentar elevadas infecções sem manifestação de sinais clínicos, tais como a anemia, afetando o uso do método FAMACHA. Diante desses fatores, o objetivo deste trabalho foi adequar um método para realizar o controle de NGI dos animais da raça Morada Nova por meio de tratamento seletivo (TST), utilizando a média de ganho de peso diário (GMD) dos cordeiros como parâmetro. Além disso, verificou-se a aplicabilidade da espectroscopia no infravermelho próximo (NIRS) no diagnóstico da infecção por NGI. A partir dos dados obtidos, realizou-se estimativa das perdas econômicas advindas da infecção por NGI nos diferentes grupos experimentais. Para tanto, 114 cordeiros na estação chuvosa e 102 na estação seca foram randomizados em três tratamentos: Controle (TC sem tratamento), Rotineiro (TR - tratados a cada 42 dias) e Seletivo (TST - tratados de acordo com o GMD). Do 63º dia de vida (D63) até o D210, a cada 21 dias, os animais foram pesados e foram coletadas amostras de sangue (mensuração do volume globular (VG) e avaliação de espectros NIRS), de fezes (contagem de ovos por gramas de fezes (OPG) e coproculturas) e leitura do grau FAMACHA. Para averiguar a resistência dos parasitos ao anti-helmíntico utilizado nos grupos experimentais (levamisol 9,4 mg/kg), realizou-se o teste de redução da contagem de OPG (TRCOF), o RESISTA-Test© para o cálculo das concentrações letais (CLs) e o teste molecular (detecção de indel de 63 bp no gene acr-8 em H. contortus). No estudo econômico foram analisados e comparados os parâmetros de custo operacional dos tratamentos anti-helmínticos e o resultado econômico advindo destes. Nos grupos TC, TR e TST, respectivamente, as médias de OPG (p 0,05) foram 4665,1, 3063,5 e 3462,1 na estação chuvosa e de 4475,1, 1341,7 e 2863,4 na estação seca. As médias do VG foram 32,1%, 33,4% e 32,3% na estação chuvosa e 33,9%, 36,0% e 35,1% na estação seca. Os GMD médios foram 0,087 Kg, 0,101 Kg e 0,094 Kg na estação chuvosa e 0,102 Kg, 0,113 Kg e 0,112 Kg na estação seca. A 10 eficácia do levamisol no TRCOF foi de 66,4%, 24,1% e 76,4% nas chuvas e de 90,7%, 12,4% e 64,8% na seca, respectivamente. No RESISTA-Test© as CL50 foram 0,482, 1,926 e 0,117 g/mL na estação chuvosa e 0,437, 0,851 e 0,045 g/mL na estação seca, respectivamente. No teste molecular, a frequência do genótipo homozigoto de resistência foi de 57,1%, 71,4% e 40,0% na estação chuvosa e de 47,8%, 55,9% e 41,9% na seca. Não foi observada diferença significativa entre os tratamentos TST e TR em relação à média de ganho de peso, peso final e GMD, especialmente na estação seca, na qual a carga parasitária foi menor. A eficácia do tratamento anti-helmíntico reduziu de forma mais drástica no TR. Especificidades das raças ovinas e das condições ambientais precisam ser avaliadas antes da aplicação do TST por GMD no controle de NGI. O estudo dos espectros NIRS foi realizado a partir da classificação dos cordeiros Morada Nova entre doentes e saudáveis para a infecção parasitária e apresentou uma sensibilidade de 93,33% e especificidade de 73,21%. A técnica foi capaz de interagir os componentes do sangue e fazer classificações, demonstrando ser uma técnica mais sensível que o FAMACHA, bem como rápida e versátil para aplicação a campo. Em relação ao levantamento econômico, os animais do TR chegaram no D210 mais pesados em relação ao TC, gerando maior faturamento bruto em ambas as estações. Em relação ao TC, pode-se verificar um resultado econômico expressivo a favor do TR de R$ 33,00 por cabeça na estação chuvosa e de R$ 28,45 na estação seca. O TR apresentou resultado econômico 14,4% e 10,9% superior ao TC e 7,2% e 1,9% superior ao TST, no período das águas e da seca, respectivamente, mas o rápido desenvolvimento da resistência inviabilizou seu uso. Os gastos com o uso de anti-helmínticos são estimados em torno de 1,3% no resultado econômico total do sistema de produção. Considerando-se a redução no ganho de peso desencadeada pelos NGI nos rebanhos nacionais, estima-se um potencial impacto econômico R$ 472,6 milhões/ano e que as perdas por mortes na ovinocultura Brasileira sejam de R$ 65 milhões/ano.

Gastrointestinal nematodes (GIN) are a major obstacle to sheep farming. Morada Nova lambs are resilient to GIN, and may present high infections without clinical signs, such as anemia, affecting the use of the FAMACHA method. In view of these factors, the objective of this study was to adapt a method to GIN control in Morada Nova animals through selective treatment (TST), using the average daily weight gain (DWG) of the lambs as a parameter. In addition, the applicability of near-infrared spectroscopy (NIRS) in the diagnosis of Haemonchus contortus infection was verified. Based on the data obtained, estimates of economic losses resulting from GIN infection were made in the different experimental groups. For this, 114 lambs in the rainy season and 102 in the dry season were randomized into three treatments: Control (CT without treatment), Routine (RT - treated every 42 days), and Selective (TST - treated according to DWG). From the 63rd day of life (D63) to the D210, each 21 days, the animals were weighed and blood samples (packed cell volume (PCV) measurement and NIRS spectra evaluation), feces (egg count per gram of feces (EPG) and coprocultures) and FAMACHA grade reading were collected. To investigate the resistance of parasites to anthelmintic used in the experimental groups (levamisol 9.4 mg/kg), the EPG count reduction test (FECRT), the RESISTA-Test© for lethal concentration (LC) calculation and the molecular test (detection of indel 63 bp in the gene acr-8 in H. contortus) were performed. In the economic study, the parameters of operational cost of anthelmintic treatments and the economic result from them were analyzed and compared. In the CT, RT and TST groups, respectively, the mean EPG (p 0.05) were 4665.1, 3063.5 and 3462.1 in the rainy season and 4475.1, 1341.7 and 2863.4 in the dry season. The averages of the PCV were 32.1%, 33.4% and 32.3% in the rainy season and 33.9%, 36.0% and 35.1% in the dry season. Mean DWG was 0.087 Kg, 0.101 Kg and 0.094 Kg in the rainy season and 0.102 Kg, 0.113 Kg and 0.112 Kg in the dry season. The efficacy of levamisole in the FECRT was 66.4%, 24.1% and 76.4% in rainy and 90.7%, 12.4% and 64.8% in dry, respectively. In the RESISTA-Test© the LC50 were 0.482, 1.926 and 0.117 g/mL in the rainy season and 12 0.437, 0.851 and 0.045 g/mL in the dry season, respectively. In the molecular test, the frequency of homozygous resistance genotype was 57.1%, 71.4% and 40.0% in the rainy season and 47.8%, 55.9% and 41.9% in the dry season. No significant difference was observed between the TST and RT treatments in relation to the mean weight gain, final weight and DWG, especially in the dry season, in which the parasite load was lower. The efficacy of the anthelmintic treatments was more drastically reduced in the RT. Specificities of sheep breeds and environmental conditions need to be assessed prior to the application of TST by DWG for GIN control. The study of the NIRS spectra was performed based on the classification of Morada Nova lambs among sick and healthy for parasitic infection and presented a sensitivity of 93.33% and specificity of 73.21%. The technique was able to interact with blood components and make classifications, demonstrating that it can be more sensitive than FAMACHA, as well as a quick and versatile technique for field application. In relation to the economic survey, the animals of the RT arrived in the D210 heavier in relation to the CT, generating higher gross sales in both seasons. In relation to CT, one can verify an expressive economic result in favor of RT of R$ 33.00 per head in the rainy season and R$ 28.45 in the dry season. The RT presented economic results 14.4% and 10.9% higher than the CT and 7.2% and 1.9% higher than the TST, in the rainy and dry periods, respectively, but the fast development of resistance made its use unfeasible. Expenses with the use of anthelmintics are estimated at around 1.3% in the total economic result of the production system. Considering the reduction in weight gain triggered by GIN in national flocks, it is estimated a potential economic impact of R$ 472.6 million/year and that losses from deaths in the Brazilian sheep production are of R$ 65 million/year.

Ocorrência do gene da toxina da síndrome do choque tóxico em Staphylococcus spp. isolados de leite de vacas com mastite e de leite cru refrigerado / Occurrence of the toxic shock syndrome toxin gene in Staphylococcus spp.isolated from bovine mastitis milk and refrigerated raw milk

Avaliou-se a presença do gene (tst-1) para Toxina da Síndrome do Choque Tóxico-1 (TSST-1), utilizando-se a técnica de Reaçãoem Cadeia da Polimerase (PCR) em um total de 264 Staphylococcus spp. isolados de leite. Desses, 221 eram Staphylococcusaureus, 33 Staphylococcus coagulase negativo (SCN) e 10 Staphylococcus coagulase positivo (SCP). As amostras eram oriundasde vacas com mastite (n=96) e de leite cru refrigerado (n=168), coletadas de 46 e 22 propriedades, respectivamente. As amostrasforam coletadas de rebanhos localizados em diferentes regiões dos Estados de Minas Gerais e Rio de Janeiro. Observou-seproduto de amplificação (250 pares de base-pb) na reação de PCR para tst-1 em sete amostras (2,6%), sendo todas as estirpesidentificadas como Staphylococcus aureus isoladas de leite cru refrigerado. Embora a detecção do gene não indique a produçãoda toxina, o monitoramento de estirpes bacterianas potencialmente produtoras torna-se importante como forma de realizar umlevantamento epidemiológico e controle dos rebanhos leiteiros brasileiros, uma vez que esse gene está associado aos elementosgenéticos móveis, representando um risco à possível transferência horizontal de genes para outras bactérias. Além disso, a presençadesses genes tem sido associada à presença de genes para enterotoxinas estafilocócicas, o que pode implicar o aumento dapatogenicidade dos isolados bacterianos e um potencial risco à saúde pública.(AU)

Was evaluated the presence of the gene (tst -1) for toxic shock syndrome toxin - 1 (TSST -1), using the technique of PolymeraseChain Reaction (PCR) on a total of 264 Staphylococcus spp. isolated from milk. Of these, 221 were Staphylococcus aureus, 33Staphylococcus coagulase negative (SCN) and 10 Staphylococcus coagulase positive (SCP). The samples were from cows withmastitis (n=96) and refrigerated raw milk (n=168), collected from 46 and 22 dairy herds, respectively. Samples were collectedfrom herds located in different regions of Minas Gerais and Rio de Janeiro States. Was observed PCR amplification of the tst-1gene (250 base pairs-bp) in seven (2.6 %) samples, and all strains of Staphylococcus aureus isolated from refrigerated raw milk.Although its detection in isolated does not mean that it will be expressed, monitoring of bacterial strains producing potentiallybecomes important as performing an epidemiological survey and control of Brazilian dairy herds, since this gene is associatedwith mobile genetic elements, representing a risk to possible horizontal gene transfer to other bacteria. Furthermore, the presenceof these genes have been associated with the presence of genes for enterotoxins, which may result in increased pathogenicity ofthe isolates and a potential risk to public health.(AU)

Ocorrência do gene da toxina da síndrome do choque tóxico em Staphylococcus spp. isolados de leite de vacas com mastite e de leite cru refrigerado / Occurrence of the toxic shock syndrome toxin gene in Staphylococcus spp.isolated from bovine mastitis milk and refrigerated raw milk

Avaliou-se a presença do gene (tst-1) para Toxina da Síndrome do Choque Tóxico-1 (TSST-1), utilizando-se a técnica de Reaçãoem Cadeia da Polimerase (PCR) em um total de 264 Staphylococcus spp. isolados de leite. Desses, 221 eram Staphylococcusaureus, 33 Staphylococcus coagulase negativo (SCN) e 10 Staphylococcus coagulase positivo (SCP). As amostras eram oriundasde vacas com mastite (n=96) e de leite cru refrigerado (n=168), coletadas de 46 e 22 propriedades, respectivamente. As amostrasforam coletadas de rebanhos localizados em diferentes regiões dos Estados de Minas Gerais e Rio de Janeiro. Observou-seproduto de amplificação (250 pares de base-pb) na reação de PCR para tst-1 em sete amostras (2,6%), sendo todas as estirpesidentificadas como Staphylococcus aureus isoladas de leite cru refrigerado. Embora a detecção do gene não indique a produçãoda toxina, o monitoramento de estirpes bacterianas potencialmente produtoras torna-se importante como forma de realizar umlevantamento epidemiológico e controle dos rebanhos leiteiros brasileiros, uma vez que esse gene está associado aos elementosgenéticos móveis, representando um risco à possível transferência horizontal de genes para outras bactérias. Além disso, a presençadesses genes tem sido associada à presença de genes para enterotoxinas estafilocócicas, o que pode implicar o aumento dapatogenicidade dos isolados bacterianos e um potencial risco à saúde pública.

Was evaluated the presence of the gene (tst -1) for toxic shock syndrome toxin - 1 (TSST -1), using the technique of PolymeraseChain Reaction (PCR) on a total of 264 Staphylococcus spp. isolated from milk. Of these, 221 were Staphylococcus aureus, 33Staphylococcus coagulase negative (SCN) and 10 Staphylococcus coagulase positive (SCP). The samples were from cows withmastitis (n=96) and refrigerated raw milk (n=168), collected from 46 and 22 dairy herds, respectively. Samples were collectedfrom herds located in different regions of Minas Gerais and Rio de Janeiro States. Was observed PCR amplification of the tst-1gene (250 base pairs-bp) in seven (2.6 %) samples, and all strains of Staphylococcus aureus isolated from refrigerated raw milk.Although its detection in isolated does not mean that it will be expressed, monitoring of bacterial strains producing potentiallybecomes important as performing an epidemiological survey and control of Brazilian dairy herds, since this gene is associatedwith mobile genetic elements, representing a risk to possible horizontal gene transfer to other bacteria. Furthermore, the presenceof these genes have been associated with the presence of genes for enterotoxins, which may result in increased pathogenicity ofthe isolates and a potential risk to public health.

DETECTION OF VIRULENCE AND ANTIMICROBIAL RESISTANCE GENES IN Staphylococcus aureus ISOLATED FROM BOVINE MASTITIS IN BRAZIL

Staphylococcus aureus pode expressar diferentes fatores de virulência e resistência a vários agentes antimicrobianos em casos de mastite bovina. O presente estudo teve como objetivo avaliar os fatores de virulência e os mecanismos genéticos de resistência à drogas em 400 isolados de S. aureus de mastite bovina no Brasil, bem como verificar a associação entre essas características, ano de isolamento e origem geográfico. A identificação dos genes de virulência e resistência foi realizada por PCR singleplex e multiplex. A identificação fenotípica de formação de exopolissacarídeos (biofilme) foi realizado no caldo Triptona de Soja com Vermelho Congo e sacarose e incubados a 37 °C por 48 horas. Como resultado, 83,5% dos isolados foram produtores de biofilme. Os genes de resistência icaAD foram detectados em 98,5% isolados. Os genes luk (leucocidina Panton-Valentine), seb (enterotoxina estafilocócica B), sec (enterotoxina estafilocócica C), sed (enterotoxina estafilocócica D), tst (toxina 1 da síndrome do choque tóxico) foram observados em 3,5%, 0,5%, 1%, 0,25% e 0,74% dos isolados, respectivamente. Os genes das hemolisinas foram observados em 82,85% (hla + hlb +), 16,5% (hla +), 0,75% (hlb +). O gene blaZ, associado à resistência à penicilina, foi detectado em 82,03% dos isolados, enquanto os genes tetK de resistência à tetraciclina e aac(6) -Ieaph(2)-Ia de resistência à aminoglicosídeos foi exibido em 33,87% e 45.15% dos isolados, respectivamente. O gene mepA associado a resistência a fluoroquinolonas foi detectado pela primeira vez em todos os isolados. Os genes de resistência identificados com menor frequência foram tetM (3,22%), tetL (1,61%), ermA (14,29%), ermB (14,29%), ermC (33,3%), ermT (9,52%), ermY (4,76%), msrA (9,52). %), mphC (9,52%). Concluí-se que houve uma alta frequência de S. aureus carregando genes de virulência para biofilme e hemolisina. Além disso, foi encontrada uma grande variedade de genes de resistência que conferem resistência a todas as classes de antimicrobianos utilizados em animais e população humana. Esses resultados mostram o potencial patogênico de S. aureus isolados de mastite bovina para causar doenças tanto em humanos quanto em animais.

Staphylococcus aureus can present many mechanisms in order to remain in mammary gland. The present study aimed to evaluate virulence factors and genetic mechanisms of drug resistance in 400 S. aureus strains isolated from bovine mastitis in Brazil, as well as to assess the association between these characteristics, year of isolation and geographic origin of the strains. Singleplex and multiplex PCR was used to identify virulence factors and drug resistance encoding genes. Detection of biofilm-forming was carried out using Congo red Tryptic Soy Broth assay. As a result, 83.5% isolates were biofilm-forming and 98.5% strains exhibited the biofilm gene icaAD. Virulence genes luk (PantonValentine Leukocidin), seb (Staphylococcal Enterotoxin B), sec (Staphylococcal Enterotoxin C), sed (Staphylococcal Enterotoxin D), tst (Toxic shock syndrome toxin 1) were observed in 3.5%, 0.5%, 1%, 0.25% and 0.74% of the strains, respectively. Hemolysin genes were observed in 82.85% (hla+ hlb+ ), 16.5% (hla+ ) and 0.75% (hlb+ ) isolates. The gene blaZ, associated with penicillin resistance, was detected in 82.03% isolates, whereas tetracycline resistance gene tetK and aminoglycoside gene aac(6)-Ieaph(2)-Ia were observed in 33.87% and 45.15%, respectively. Fluoroquinolone resistance gene mepA was detected for the first time in all fluoroquinolone resistance S. aureus isolates. Resistance genes tetM (3.22%), tetL (1.61%), ermA (14.29%), ermB (14.29%), ermC (33.3%), ermT (9.52%), ermY (4.76%), msrA (9.52%) and mphC (9.52%) were detected in low frequency among the isolates. Our results showed a high frequency of S. aureus carrying mainly biofilm and hemolysin genes. Moreover, a wide variety of antimicrobial resistance genes that confers resistance to all classes of antimicrobial agents used in animals and human population were observed. These results highlight the pathogenic potential of S. aureus from cattle to cause severe disease in both humans and animals. K

TRATAMENTO SELETIVO BASEADO EM CRITÉRIOS PRODUTIVOS E CLÍNICOS PARA O CONTROLE DOS NEMATÓDEOS GASTRINTESTINAIS EM CORDEIROS

A resistência aos anti-helmínticos é um problema mundialmente conhecido na produção de ovinos. Em animais adultos, alguns métodos alternativos no controle da verminose gastrintestinal já são utilizados como, por exemplo, o tratamento seletivo (TST). Em cordeiros, diferentes parâmetros têm sido avaliados para serem incluídos como critério de tratamento no TST. O objetivo do presente estudo foi avaliar critérios produtivos e clínicos no TST e avaliar a sensibilidade e a especificidade do método FAMACHA© em cordeiros na fase de terminação. Foram realizados dois experimentos em duas fazendas produtoras de ovinos no Estado do Paraná, Brasil. Experimento 1: cordeiros (n=70) criados exclusivamente a pasto, foram avaliados dos 75 dias de vida até atingirem 38kg e/ou 150 dias de avaliação. Experimento 2: cordeiros (n=48) criados a pasto e com suplementação de concentrado comercial, avaliados dos 60 dias de vida até atingiram 38/40kg e/ou 150 dias de avaliação. Quinzenalmente, eram realizadas análises parasitológicas (contagem de ovos nas fezes OPG e cultura de larvas), produtivas (ganho médio de peso diário - GMD) e clínicas (hematócrito - Ht e método FAMACHA© - F). Os cordeiros foram distribuídos em 4 grupos experimentais com diferentes critérios para o tratamento com anti-helmíntico (AH): Grupo controle (TC) tratamento com AH a cada 30 dias; Grupo Famacha© (TF) tratamento com AH para os cordeiros classificados como F3, F4 e F5; Grupo ganho de peso diário (TGP) tratamento com AH para os cordeiros com GMD que a média de GMD menos um desvio padrão do TC; Grupo Famacha© + ganho de peso diário (TFGP) tratamento com AH para os cordeiros classificados como F3, F4 e F5 e/ou GMD que a média de GMD menos um desvio padrão do TC. Os dados de Ht e FAMACHA© desses experimentos foram utilizados para a avaliação da sensibilidade (S) e especificidade (E) do método FAMACHA©. Para o cálculo da S e E foram utilizados dois critérios: critério 1 - cordeiros classificados como F4 e F5 foram considerados anêmicos (teste positivo) e não anêmicos, F1, F2 e F3 (teste negativo); critério 2 - cordeiros F3, F4 e F5 considerados anêmicos (teste positivo) e não anêmicos, F1 e F2 (teste negativo). Para a determinação da anemia, três valores de Ht (padrão ouro) foram utilizados: 22%, 18% e 15%. No experimento 1, na média geral do GMD e do Ht, não foram observadas diferenças significativas (p>0,05) entre os grupos experimentais; porém, a menor média de OPG foi observada no grupo TC (p<0,05). No experimento 2, a menor média de OPG (p<0,05) também foi observada no grupo TC, e a maior média (p<0,05) no TF. Houve diferença no GMD nos grupos TC e TFGP, que foram superiores ao grupo TF (p<0,05) e semelhantes ao TGP (p>0,05). Em ambos os experimentos, na média total do número de tratamentos com AH, o TF teve o menor número de cordeiros tratados com AH (p<0,05), com os grupos TGP e TFGP semelhantes entre si (p>0,05). A sensibilidade encontrada quando os cordeiros F3 foram considerados anêmicos foi de 13,9%, 30,8% e 66,6%, respectivamente, para os valores de hematócrito 22%, 18% e 15%. Quando não houve inclusão do F3, o valor máximo de sensibilidade encontrada foi de 14,9%, com especificidade de 100% em todos os graus de anemia atribuídos ao critério 1. O GMD é um critério que pode ser incluído no TST de cordeiros na fase de terminação. O método FAMACHA©, com baixos valores de sensibilidade, não deve ser utilizado isoladamente no controle da verminose em cordeiros na fase de terminação.

Resistance to anthelmintics is a worldwide known problem in sheep production. In adult sheep some alternative methods in the management of gastrointestinal verminosis are already used, for example targeted selective treatment (TST). In lambs, different parameters have been evaluated to be included as treatment criteria for TST. The objective of the present study was to evaluate productive and clinical criteria in the TST and to evaluate the sensitivity and the specificity of the FAMACHA© method in lambs. Two experiments were carried out on two sheep farms in the State of Paraná, Brazil. The experiments encompassed the years 2015 and 2016. Experiment 1; lambs (n=70) raised on pasture exclusively, were evaluated in their first 75 days of age until reaching 38kg and/or 150 days of evaluation. Experiment 2: 48 lambs, with 60 days of age were also evaluated until reaching 38/40 kg and/or 150 days of evaluation. The lambs were checked every 15 days through different criteria: parasitological (egg per gram of faeces EPG), productive (daily weight gain - DWG) and clinical (hematocrit Ht and the FAMACHA© method - F). The lambs were allocated in 4 experimental groups with distinct criteria for the anthelmintic treatment (AH): Control Group (TC) with AH treatment every 30 days; Famacha© Group (TF) with AH treatment to lambs classified as F3, F4 and F5; Daily Weight Gain Group (TGP) with AH treatment applied to lambs with daily weight gain (DWG) lower than the DWG minus one standard deviation of TC; Famacha© Group + Daily Weight Gain Group (TFGP) with AH treatment to lambs classified as F3, F4 e F5 and/or to lambs with DWG lower than the DWG minus one standard deviation of TC. The data of Ht and FAMACHA© method of these experiments were used together to evaluate the sensitivity and specificity of the FAMACHA© method. Sensitivity and specificity were calculated according to two criteria: criterion 1- lambs classified as F4 and F5 were considered anemic (positive test) and lambs F1, F2 and F3, not anemic (negative test); criterion 2- lambs F3, F4 and F5 were considered anemic (positive test) and lambs F1 and F2, not anemic (negative test). As a gold standard for the determination of anemia, three Ht values were used: 22%, 18% and 15%. In the experiment 1, in the average of DWG and Ht, no significant differences (p>0.05) were observed among the experimental groups; however, the lowest EPG was observed in the TC group (p<0.05). In experiment 2, the lowest EPG average (p<0.05) was also observed in the TC group, and the highest average (p <0.05) in the TF. There were differences in DWG in the TC and TFGP groups, which were higher than the TF group (p <0.05) and similar to TGP (p> 0.05). In both experiments, of the total mean number of AH treatments, TF had the lowest number of lambs treated with AH (p <0.05), with TGP and TFGP groups similar to each other (p> 0.05). The sensitivity found for lambs when F3 was considered anemic was 13.9%, 30.8% and 66.6%, respectively, for hematocrit values 15%, 18% and 22%. When F3 was not included as anemic, the maximum sensitivity was 14.9%, with a specificity of 100% for all levels of anemia attributed to criterion 1. The DWG can be included as a criterion for the TST in lambs. The FAMACHA© method presented a low sensitivity in lambs and should not be used as the unique parameter in the control of haemonchosis in young animals.

DETECÇÃO DE GENES DE TOXINAS EM Staphylococcus spp. RESISTENTES ISOLADOS DE MASTITE BOVINA

Staphylococcus spp. estão entre os principais agentes etiológicos da mastite bovina. Esses microrganismos são relatados como importantes contaminantes de leite cru e seus derivados, sendo capazes de produzir diversas toxinas, capazes de provocar surtos de intoxicação alimentar, e síndrome do choque tóxico em humanos. Embora as intoxicações alimentares estejam mais relacionadas a Staphylococcus aureus, há relatos de cepas de Staphylococcus coagulase negativa (SCN) produtoras de toxinas. Neste cenário, o objetivo deste estudo foi investigar a presença dos genes sea, sec e tst, responsáveis pela produção das enterotoxinas estafilocócicas A, C e da TSST-1, respectivamente, em 67 cepas de Staphylococcus spp. resistentes a princípios ativos antimicrobianos (27-S. aureus, e 40-SNC), isoladas de amostras de secreção láctea de novilhas e vacas com mastite clínica ou subclínica de propriedades comerciais e experimentais do estado de São Paulo, Brasil. Por meio da técnica de PCR, não foram encontrados em nenhuma das 67 cepas os genes sea e tst, entretanto o gene sec foi detectado em 20 cepas (29,85%) de S. aureus. A presença do gene sec em amostras de leite de vacas com mastite pode representar um sério risco do ponto de vista epidemiológico, uma vez que, quando se trata de saúde pública, a detecção de genes de virulência em amostras de alimentos, pode representar um risco à saúde do consumidor. Além disso, esses microrganismos podem conter outros genes de virulência não avaliados no presente estudo.

Staphylococcus spp. are considered one of the main etiological agents of bovine mastitis. These microorganisms are reported as important contaminants of raw milk and dairy products, being able to produce various toxins, causing food poisoning outbreaks, and toxic shock syndrome in humans. While food poisoning is more related to Staphylococcus aureus, there are reports of Coagulase Negative Staphylococcus (CNS) strains produced from toxins. With that scenery, the objective of this study was to investigate the presence of genes sea, sec and tst, responsible for the production of staphylococcal enterotoxin A, C and TSST-1, respectively, in 67 strains of Staphylococcus spp resistant to antimicrobial (27-S aureus, and 40-CNS) isolates from milk secretory samples of heifers and cows with clinical or subclinical mastitis of commercial and experimental farms in São Paulo State, Brazil. By PCR technique, they were not found in any of the 67 strains of the sea genes, however the gene was detected in 20 strains (29.85%) of S. aureus. The presence of the gene in samples of cow's milk with mastitis may represent an epidemiological risk, a detection of virulence genes in food samples may pose a risk to consumer health. Although these microorganisms may contain other virulence genes not assessed in the present study.

CARACTERÍSTICAS MORFOGÊNICAS, ESTRUTURAIS, PRODUÇÃO E COMPOSIÇÃO QUÍMICA DO CAPIM-ELEFANTE CV. CARAJÁS ADUBADO COM UREIA CONVENCIONAL E PROTEGIDA

Objetivou-se avaliar as características morfogênicas, estruturais, produção e composição química do capim-elefante cultivar Carajás adubado com ureia convencional e protegida. O delineamento experimental adotado foi em blocos ao acaso com arranjo fatorial de 5 x 2, onde os tratamentos foram constituídos por cinco doses de nitrogênio (0; 100; 200; 400 e 800 kg ha-1 ano-1) e duas fontes de nitrogênio (ureia convencional e ureia protegida por polímeros). Foi avaliada a taxa de alongamento foliar (TAlF), taxa de aparecimento foliar (TApF), taxa de alongamento do colmo (TAlC), filocrono, taxa de senescência total (TST), altura, densidade populacional de perfilhos por touceira (DPPT), relação folha/colmo (F/C), relação material vivo/material morto (MV/MM), biomassa de forragem total (BFT), biomassa de lâmina verde (BLV), biomassa de colmo verde (BCV), matéria seca (MS), matéria mineral (MM), proteína bruta (PB), extrato etéreo (EE), fibra em detergente neutro (FDN) e ácido (FDA). A TApF, TAlF, TAlC, TST, altura, DPPT, BFT, BLV, BCV e MS apresentaram incremento de 0,0002 folhas/dia; 0,0041 cmperf-1dia-1; 0,0004 cmperf-1dia-1; 0,0007 cmperf-1dia-1; 0,0148 cm; 0,0274 perf/metro linear; 0,0223 tMSha-1ano-1; 0,0094 tMSha-1ano-1; 0,1214 tMSha-1ano-1 e 0,0017%, respectivamente, para cada unidade de nitrogênio aplicado. O filocrono e MV/MM apresentaram uma redução de 0,0024 dias e 0,0026, respectivamente, para cada aumento de um quilograma de nitrogênio aplicado. Para o filocrono e TST as plantas adubadas com ureia protegida apresentaram maiores valores do que às plantas adubadas com ureia convencional, já para MM as plantas adubadas com ureia convencional apresentaram maiores teores do que as adubadas com ureia protegida. Para a relação F/C apenas na dose 400 kg Nha-1 ano-1 houve diferença entre as fontes, onde a ureia protegida apresentou maior relação F/C que a ureia convencional. A FDN apresentou valor máximo na dose 437,63 kg Nha-1ano-1. A FDA não mostrou efeito para a interação, fontes e doses de nitrogênio. O EE apresentou diferença entre as fontes apenas para a dose 800 kg de Nha-1ano-1, onde a ureia protegida apresentou um teor mais elevado do que a ureia convencional. Para PB apenas nas doses 100 e 800 kg de Nha-1ano-1 houve diferença entre as fontes, onde dose 100 kg de Nha-1ano-1 a ureia convencional mostrou-se superior em relação à ureia protegida e na dose 800 kg de Nha-1ano-1 a ureia protegida apresentou maior teor na PB. As características morfogênicas, estruturais, produção e composição química do capim-elefante cv. Carajás são influenciadas positivamente com o aumento da dose de nitrogênio. Recomenda-se a utilização da ureia protegida por apresentar liberação lenta e aplicação em dose única.

The objective in this study was to evaluate the morphogenic, structural and production characteristics, and chemical composition of Elephant-grass cultivar Carajás, fertilized with conventional and polymer-protected urea. The experimental design adopted was randomized blocks with factorial arrangement 5x2, where the treatments consisted of five nitrogen doses (0, 100, 200, 400 and 800 kg ha-1 year-1) and two nitrogen sources (conventional and polymer-protected urea). The leaf elongation rate (LER), leaf appearing rate (LAR), stem elongation rate (SER), phyllochron, total senescence rate (TSR), height, population density of tillers per clump (PDTC), leaf/stem ratio (L/S), live material/dead material ratio (LM/DM), total forage biomass (TFB), green leaf biomass (GLB); green stem biomass (GSB), dry matter content (DM), mineral matter (MM), crude protein (CP), ether extract (EE), neutral detergent fiber (NDF) and acid detergent fiber (ADF) were evaluated. LAR, LER, SER, TSR, height, PDTC, TFB, GLB, GSB and DM presented increase of 0.0002 leaves/day, 0.0041 cmtiller-1day-1, 0,0004 cmtiller-1day-1; 0,0007 cmtiller-1day-1; 0,0148 cm; 0,0274 tiller/linear meter; 0,0223 tonDMha-1year-1; 0,0094 tonDMha-1year-1; 0,1214 tonDMha-1year-1 e 0,0017%, respectively for each nitrogen unit applied. Phyllochron and LM/DM presented decrease of 0,0024 days and 0,0026 respectively, for each kilogram of nitrogen applied. For phyllochron and TSR the plants fertilized with protected urea presented higher values than plants fertilized with conventional urea, whereas for MM the plants fertilized with conventional urea presented higher contents than those fertilized with protected urea. For the L/S ratio only at 400 kg Nha-1year-1, there was difference between the sources, where protected urea presented higher L/S ratio than conventional urea. The NDF presented maximum value at the dose 437.63 kg Nha-1year-1. The ADF showed no effect on the interaction, sources or doses of nitrogen. The EE showed difference between the sources only for the dose 800 kg of Nha-1year-1, where protected urea presented a higher content than conventional urea. For PB only at doses 100 and 800 kg of Nha-1year-1 there was difference between the sources, where at the dose 100 kg of Nha-1year-1 the conventional urea was superior to the protected urea and at the dose 800 kg of Nha-1year-1 the protected urea presented higher CP content. The morphogenic, structural and production characteristics and chemical composition of elephant grass cv. Carajás are positively influenced by the increase of the nitrogen dose. The use of protected urea is recommended because of it slow release and single dose application.

QUALIDADE MICROBIOLOGICA E PESQUISA DE GENES CODIFICADORES DE FATORES DE VIRULÊNCIA DO Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Bacillus cereus E Salmonella, EM SUSHIS

A segurança de alimentos de origem animal é uma das preocupações da medicina veterinária preventiva e um interesse de saúde pública, como os sushis preparados com peixe cru e consumidos sem tratamento térmico. Diante dessa preocupação aliada a expansão da culinária japonesa no Brasil, esse estudo objetivou avaliar a qualidade microbiológica e pesquisa de genes codificadores de fatores de virulência do Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Bacillus cereus e Salmonella, em sushis. Para tanto, 60 amostras foram coletadas em restaurantes e avaliados pela quantificação Staphylococcus spp., S. coagulase positivo e número mais provável de coliformes totais e termotolerantes. Também foram realizadas pesquisas da presença do B. cereus, da E. coli, do S. aureus e da Salmonella spp., e estudo da ocorrência de genes codificadores fatores de virulência para B. cereus, E. coli, S. aureus. Das amostras analisadas 80,0% (48/60) apresentaram Staphylococcus spp., com populações variando de 1,0 x 102 a 5,3 x 105 UFC.g-1, sendo que 31,7 % (19/60) foram caracterizados como S. coagulase positivo e 8,3% (5/60) apresentaram valores de populações acima do limite estabelecido. As populações de coliformes totais e termotolerantes variaram de ausência (< 3,0) a exponenciais de 105 e 104 NMP.g-1, respectivamente, sendo que 60,0% (36/60) das amostras apresentaram valores acima de 102 NMP.g-1, limite máximo previsto pela legislação brasileira para coliformes termotolerantes. Das amostras analisadas 75,0% (45/60) apresentaram B. cereus e o gene bceT foi mais o frequente sendo amplificado em 35,6% (16/45), seguido pelos genes nheB 26,7% (12/45), nheC 22,2% (10/45), hblA 17,8% (8/45) e cytK 15,6% (7/45). Os genes hblC, hblD e entFM apresentaram a menor ocorrência, 11,1% (5/45) em cada. Quanto a presença da E. coli, foi confirmada em 21,7% (13/60), e dessas amostras 23,0% (3/13) apresentaram amplificação dos genes de toxinas aea e estB. A presença S. aureus foi identificada em 11,7% (7/60) amostras, sendo que todas apresentaram gene codificador coa e foram positivas na prova da coagulase. Dentre as 7 amostras de S. aureus os genes eta e hlg foram os mais frequentes (4/7), seguidos pelos genes sea, sei e tst (2/7),e o gene seg (1/7). O gene mecA foi identificado em 6 amostras das 48, totalizando 12,5%. O gene para detecção da Salmonella sp. não foi amplificado neste trabalho. O B. cereus, E. coli, S. aureus e seus genes codificadores de toxinas estão presentes no sushi, oferecendo risco a saúde pública e podendo ocasionar surtos de intoxicações alimentar quando os padrões boas praticas de fabricação de alimentos não forem corretamente aplicadas.

The safety of animal origin food is one of the concerns of preventive veterinary medicine and a public health interest, such as the sushis prepared with raw fish and consumed without heat treatment. Given this concern, added to the expansion of Japanese cuisine in Brazil, this study evaluated the microbiological quality and research of genes encoding virulence factors of Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Bacillus cereus and Salmonella, in sushis. For that, 60 samples were collected from restaurants and evaluated by the quantification of Staphylococcus spp., coagulase positive S. and the most probable number of total and thermotolerant coliforms. Research of B. cereus, E. coli, S. aureus and Salmonella spp. presence, and the study of the occurrence of encoding virulence factors genes for B. cereus, E. coli, S. aureus. From the analyzed samples, 80.0% (48/60) presented Staphylococcus spp., with populations varying from 1.0 x 102 to 5.3 x 105 CFU.g-1, 31.7% (19/60) were characterized as coagulase positive S. and 8.3% (5/60) presented values of populations above the established limit. Total and thermotolerant coliform populations ranged from absent (<3.0) to exponentials of 105 and 104 MPN.g-1, respectively, and 60.0% (36/60) of the samples presented values above 102 MPN.g-1, the maximum limit established by Brazilian legislation for thermotolerant coliforms. The samples analyzed, 75.0% (45) presented B. cereus and the bceT gene was more frequent, being amplified in 35.6% (16/45), followed by genes nheB 26.7% (12/45), nheC 22.2% (10/45), hblA 17.8% (8/45) and cytK 15.6% (7/45). The hblC, hblD and entFM genes had the lowest occurrence, 11.1% (5/45) in each. E. coli presence was confirmed in 21.7% (13/60), and of these samples 23.0% (3/13) presented amplification of the aea and estB toxin genes. S. aureus presence was identified in 11.7% (7/60) samples, all of which presented coa coding gene and were positive in the coagulase test. Among the 7 S. aureus samples, the eta and hlg genes were the most frequent (4/7), followed by the sea, sei and tst (2/7) genes, and the seg gene (1/7). The mecA gene was identified in 6 samples from 48, totaling 12.5%. The Salmonella spp. gene was not amplified in this work. B. cereus, E. coli, S. aureus and their toxin encoding genes are present in sushi, posing a risk to public health and may lead to outbreaks of food poisoning when good food manufacturing standards are not correctly applied.

OCORRÊNCIA DE GENES DE CITOTOXINAS, TOXINAS ESFOLIATIVAS E PIROGÊNICAS EM ISOLADOS DE Staphylococcus pseudintermedius DE ESPÉCIES DOMÉSTICAS E SILVESTRES

Staphylococcus pseudintermedius é uma espécie coagulase-positiva do SIG (grupo Staphylococcus intermedius). É um agente patogênico oportunista que pode causar infecções em diversos sítios e ainda possui potencial zoonótico. Embora o conhecimento sobre o processo de patogenicidade do S. pseudintermedius seja limitado, é de conhecimento a detenção de diversos fatores de virulência por este patógeno. As toxinas são incluídas nestes fatores, e estudos epidemiológicos sobre sua distribuição em S. pseudintermedius são praticamente inexistentes. Podem ser classificadas em três principais grupos: toxinas pirogênicas com propriedades de superantígenos (TSST-1 e SEs), toxinas esfoliativas e citotoxinas (leucocidinas, hemolisinas). Neste estudo a ocorrência de genes para 8 toxinas (sea, sec, tst-1, SIET, EXI, LuK F-I, Luk S-I e hlg ) foi estudada em isolados de S. pseudintermedius através da Reação em Cadeia da Polimerase em 4 espécies de animais domésticos (cães, gatos, bovino e suíno) e 2 espécies silvestres (lobinho e guaxinim) provindos de diversos sítios de infecção. Todas as amostras apresentaram ao menos um gene de alguma toxina, isoladamente ou em associação. As maiores ocorrências foram relatas para Luk S-I (94,83%), Luk F-I (91,38%) e SIET (91,38%) e a menor em hlg (5,17). Não houve associação entre toxina, espécie infectada ou sitio de infecção. A extensa ocorrência destes genes indica um papel importante na gravidade de infecções causadas por estes microrganismos quando patogênicos.

Staphylococcus pseudintermedius is a coagulase-positive species of SIG (Staphylococcus intermedius Group). It is an opportunistic pathogen that can cause infections in several places and also has zoonotic potential. Although knowledge about the pathogenic process of S. pseudintermedius is limited, it is known the arrest of several virulence factors of this pathogen. Toxins are included in these factors, and epidemiological studies of their distribution in S. pseudintermedius are virtually nonexistent. They can be classified into three main groups: pyrogenic toxin superantigens with properties (SEs and TSST-1), exfoliative toxins and cytotoxins (leucocidins, hemolysin). In this study the occurrence of toxins 8 (sea, sec, tst-1, SIET, EXI, LuK F-I, Luk S-I and hlg ) was studied in isolates of S. pseudintermedius by Polymerase Chain Reaction in 4 species of domestic animals (dogs , cats, cow and swine) and two wild species (Crab-eating Fox and Crab-eating Raccoon) stemmed from several sites of infection. All samples showed the gene of at least one type of toxin, alone or in combination. The highest occurrences were relates in LukS-I (94.83%), Luk F-I (91.38%) and EXI (91.38%) and the lowest in hlg (5.17%). There was association of occurrence of hlg and LukF-I genes (p = 0.0175). The extensive occurrence of these genes indicates an important role in the severity of infections caused by these pathogenic commensal microorganisms when.

Estudo fenotípico preliminar de camundongos fêmeas Swiss espontaneamente obesas

A obesidade é um sério problema de saúde pública. Este estudo teve como objetivo avaliar o crescimento de camundongos fêmeas Swiss, oriundas do biotério do Departamento de Patologia da FMVZ-USP, que se tornam espontaneamente obesas, tentando identificar em que período se iniciam estas características de obesidade. Para isso, foram realizados dois experimentos: Exp. 1 - as fêmeas foram acompanhadas do dia pós-natal 303 (DPN 303) até o DPN 491; Exp. 2 - as fêmeas foram acompanhadas do DPN 1 até o DPN 240. No Exp. 1, os animais foram divididos em dois grupos: obesas (OB) e não obesas (NOB), todas receberam dieta padrão. No Exp. 2, ao completarem 21 dias de vida, as fêmeas foram divididas em 4 grupos: dieta padrão (DP), grupos DP-OB e DP-NOB e dieta hiperlipídica (DHF), grupos DHF-OB e DHF-NOB; receberam DHF somente durante a peripuberdade (DPN 21-DPN 60). Em ambos os experimentos foram realizados acompanhamento de peso corporal, acompanhamento de ingestão alimentar, medição de comprimento corporal e medição de circunferência abdominal. No DPN 470, foi realizado o teste de tolerância à insulina (TTI) e no DPN 472 o teste de tolerância oral à glicose (TTOG) nas fêmeas do Exp. 1 e da mesma forma nos DPN 230 e 232 nas fêmeas do Exp. 2. Foi realizado teste de suspensão pela cauda (TSC) nos animais do Exp. 2. Ao final dos experimentos foram realizadas dosagens séricas de triglicérides, colesterol total, AST, leptina e insulina, além das pesagens dos órgãos: gorduras gonadal e retroperitoneal, fígado, rim com adrenal e útero com ovários. Os resultados obtidos em cada experimento foram avaliados por meio de ANOVA de duas vias seguida do teste de Bonferroni e t Student, p<0,05. Em ambos os experimentos os animais obesos apresentaram maior comprimento corporal e circunferência abdominal, além de pesagem elevada dos órgãos fígado, rim e gorduras. As dosagens de leptina foram significantes para todos os animais obesos e as dosagens de triglicérides foram significantes nos grupos OB e DP-OB. No Exp. 1, houve diferença significante na resposta à insulina entre os grupos OB e NOB (TTI) e as fêmeas OB tiveram maior pico de glicemia aos 20 minutos de teste e permaneceram por mais tempo com os níveis glicêmicos elevados (TTOG); os animais do grupo OB tiveram aumento significante do ganho de peso corporal ao longo do tempo, atingindo 70g; as dosagens de AST foram significantes nos animais OB. No Exp. 2, os animais do grupo DP-OB tiveram aumento significante do ganho de peso corporal ao longo do tempo, mostrando ganho de peso elevado após o DPN 81; as dosagens de insulina foram significantes no grupo DP-OB em relação ao grupo DP-NOB; TSC não apresentou resultados significantes. Portanto, as alterações de ganho de peso elevado, maior crescimento corporal e maior circunferência abdominal podem ser observadas nas fêmeas DP-OB já no início da vida adulta. Entretanto, as alterações metabólicas aparecem somente em idade avançada (Exp. 1). Assim, mais estudos são necessários a fim de que se possa elucidar a origem das alterações fenotípicas encontradas.

Obesity is a serious public health problem. This study aimed to evaluate Swiss female mice growth that were born in the Department of Pathology (FMVZ-USP) and became obesa spontaneously, trying to identify in which period these obesity signs start. Therefore, two experiments were conducted: Exp. 1 females were observed from post-natal day 303 (PND 303) to PND 491; Exp. 2 females were observed from PND 1 to PND 240. In the Exp. 1, animals were assigned to either one of two groups: obese (OB) and non-obese (NOB), where both groups received standard chow. In the Exp. 2, when females were 21 days old, they were assigned to either: standard chow (DP), DP-OB or DP-NOB groups, and high fat diet (DHF), DHF-OB and DHF-NOB groups; these animals received DHF only in the peripuberty period (PND 21- PND 60). Body weight gain, food intake, body length and abdominal circunference were measured in both experiments. In PND 470, insulin tolerance test (ITT) and PND 472 the oral glucose tolerance test (OGTT) were performed in the females from Exp. 1, and in PND 230 and PND 232, respectively, in the animals from Exp. 2. The tail suspension test (TST) was performed in the animals from Exp. 2. In the end of experiments, blood levels of triglycerides, total colesterol, AST, leptin and insulin were evaluated and the following organs were weighted: gonadal fat pad, retroperitoneal fat pad, liver, kidney including adrenals and uterus with ovaries. Results were analysed by two-way ANOVA with Bonferroni post-test and t Student test, p<0.05. Obese animals in both experiments showed bigger body length and abdominal circunference, including heavier organs such as liver, kidney and fat pads. Leptin levels were significant higher in all obese animals and triglycerides levels were significant in OB and DP-OB groups. In the Exp. 1, there was a significant diference in the response to insulin injection in between groups OB and NOB (ITT) and OB females reached higher glicemic levels 20 min after the glucose administration, keeping these levels high longer (OGTT); OB females showed a significant increase in the body weight gain over time, reaching 70g; AST levels were significant in OB animals. In the Exp. 2, animals from DP-OB group had significant higher body weight gain over time, showing heavier body weights after PND 81; insulin levels were significant in the DP-OB group comparing to DP-NOB; there was no significant results in the TST. Therefore, heavier body weights, bigger body length and bigger abdominal circunference were observed in DP-OB females in the beginning of adult life. However, metabolic alterations can be detected only in late adult life (Exp. 1). Thus, more studies need to be done aiming to clarify the origin of the phenotypic alterations found here.

Use of pcr to detect classical enterotoxins genes (ent) and toxic shock syndrome toxin-1 gene (tst) in staphylococcus aureus isolated from crude milk and determination of toxin productivities of s. aureus isolates harboring these genes

ABSTRACT During a 2-year period (2003-2004), 132 strains of Staphylococcusaureus isolated from crude milk (without thermal treatment) collected in different places in Piracicaba, São Paulo State, Brazil, were investigated for the presence of genes for enterotoxins (ent) and toxic shock syndrome toxin-1 (tst). Polymerase-chain reaction (PCR) was performed by using 6 pairs of relevant oligonucleotide primers. Ninety isolates (68.18%) were positive for (47 strains) or 2 (43 strains) toxin genes. The combination of entA and tst showed the highest prevalence (33 strains).The good correlation between PCR results and toxin protein detection and identification by optimum-sensitivity-plate (OSP) test was observed when 44.45% of strains showed positive for toxin production.

RESUMO Durante um período de 2 anos (20032004), 132 cepas de Staphylococcus aureus isoladas de leite cru foram coletadas de diferentes regiões de Piracicaba, no Estado de São Paulo. Foi investigada a presença dos genes de enterotoxinas (ent) e genes da Toxina-1 da Síndrome do Choque Tóxico (tst). A reação da polimerase em cadeia (PCR) foi executada usando 6 pares de oligonucleotídeos específicos para cada gene em questão. Noventa e quatro isolados (68,18%) se mostraram positivos para a presença de um (47 isolados) ou mais genes (43 isolados). A combinação da presença de entA e tst mostrou alta prevalência (33 isolados). Houve boa correlação entre a presença do gene e a produção/detecção da toxina, feita pelo teste da sensibilidade ótima em placas (OSP), que foi observada quando 44,44% dos isolados mostraramse positivos para a produção de toxina.

Epidemiologia molecular aplicada ao monitoramaento de estirpes de Staphylococcus aureus envolvidas em casos de mastite bovina

Entre agosto de 2005 e dezembro de 2006, foram obtidas 245 estirpes de Staphylococcus aureus isoladas de amostras de leite de vacas com mastite, de óstios papilares da glândula mamária e de insufladores da ordenhadeira, procedentes de um rebanho bovino produtor de leite tipo B. Com a finalidade de monitorar as estirpes de S. aureus envolvidas em casos de mastite bovina por meio da verificação da relação epidemiológica existente entre as estirpes isoladas, especialmente com vistas aos sítios de localização e vias de transmissão, as estirpes foram submetidas à Eletroforese de Campo Pulsado (PFGE), à amplificação das seqüências codificadoras (sea, seb, sec, sed e tst), por intermédio da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), e suas sensibilidades in vitro a 12 antimicrobianos foram determinadas. Os resultados obtidos revelaram 51 diferentes perfis, sendo que a resistência à penicilina foi a predominante entre as 179 (73,1%) estirpes de S. aureus, quando considerada de forma particular (54,8%) ou em conjunto (29,4%). As 66 (26,9%) estirpes restantes foram sensíveis aos 12 antimicrobianos testados e a vancomicina foi o único princípio ativo que se mostrou eficiente a 100% das estirpes testadas. A PFGE revelou 39 pulsotipos distintos, dos quais 25 (64,1%) encontraram-se distribuídos nas 137 (55,9%) estirpes obtidas do leite. Dentre estas, 92 (67,1%) estirpes apresentaram resistência a um ou mais antimicrobianos e foram agrupadas em 22 (88,0%) pulsotipos distintos. Foi observado, também, por meio da PFGE, que nenhum pulsotipo foi isolado por mais de três colheitas consecutivas e que somente o pulsotipo 29 foi identificado em 5 (31,2%) colheitas

Two hundred and forty five Staphylococcus aureus strains were isolated between August of 2005 and December of 2006 from samples collected from a type-B milk-producing herd. Samples encompassed milk collected directly from mastitic cows, papillas osteuns of mammary glands, and milking machine cups. Samples were subjected to Pulsed Field Gel Electrophoresis (PFGE) to monitor for the strains of S. aureus and to determine epidemiologic relationships between the isolated strains, taking into account the different precedence of strains. PFGE was used to monitor the presence of specific coding sequences (i.e., sea, seb, sec, sed, and tst) in the milk samples using polymerase chain reaction (PCR) amplification. Moreover, sensitivity of strains to 12 different antibiotics was determined in vitro. Results revealed the presence of 51 different PFGE profiles of S. aureus in the samples, and highlighted 179 (73.1%) penicillin resistant strains. Nonetheless, the 66 (26.9%) other strains were sensitive to all 12 antibiotics tested, and vancomycin was the only antibiotic effective against all tested strains. PFGE also revealed 39 distinct peaks with 25 of them (64.1%) being present in 137 (55.9%) strains obtained from milk. Of these strains, 92 (67.1%) were resistant to one or more antibiotics, and were further grouped in 22 (88.0%) distinct peaks. Additionally, PFGE revealed the presence of no distinct peaks in samples from three consecutive collection times, and that peak 29 was the only one identified in 5 collection times (31.2%). Importantly, PGFE also indicated that in the periods A and H, which corresponded to 12.5% of the total time points, the isolated strains from one collection day (samples from all 3 sources) all had the peaks 2 and 12, respectively