Enumeration of heterotrophic bacteria in water for dialysis: comparison of the efficiency of Reasoner'2 agar and plate count agar

Due to the fact the incubation conditions may influence the microbiological evaluation of water for dialysis, the objective of the present study was the comparison of the efficiency of R2A and PCA media in the enumeration of heterotrophic bacteria in 193 samples of water collected in dialysis clinics from 12 cities in São Paulo, between October and December 2007. Results showed counts significantly greater in R2A, suggesting that enumeration should be carried out in R2A, suggesting that enumeration should be carried out in R2A agar associated with longer incubation times, because of the greater sensitivity.

Occurrence of toxigenic fungi in herbal drugs

The increase in the consumption of natural drugs have made their use a Public Health problem due to the possibility of access to products without adequate conditions of use. The concern with the quality of the natural products is due to the potential fungal contamination and the risk of the presence of mycotoxins. Ninety-one samples of medicinal plants were evaluated for the fungal contamination and the mycotoxigenic potential of Aspergillus and Penicillium isolated from the samples. Results indicated that predominant mycoflora was distributed in 10 genera. From these, 89.9% of the isolates corresponded to genera Aspergillus and Penicillium, which are extremely important from the mycotoxicological standpoint. 21.97% of the Aspergillus and Penicillium isolates proved to have the ability for producing aflatoxins (42.9%), ochratoxin A (22.4%) and citrinine (34.7%). The presence of toxigenic moulds represents a potential risk of mycotoxin contamination and considering the worldwide increased use of herbal products as alternative medicines, it is necessary setting standards for toxigenic moulds in crude herbal drugs in order to reduce the risks for consumers' health.

O aumento no consumo de produtos naturais transformou seu uso em um problema de Saúde Pública devido a possibilidade do acesso a produtos sem adequadas condições de uso. A preocupação com a qualidade dos produtos naturais é devida à potencialidade de contaminação por fungos e ao risco da presença de micotoxinas. Noventa e uma amostras de plantas medicinais foram avaliadas quanto à contaminação fungica e ao potencial micotoxigênico de Aspergillus e Penicillium isolados nestas amostras. Os resultados indicaram que a micoflora predominante esteve distribuída entre 10 gêneros. Entretanto, 89,9% dos isolados corresponderam aos gêneros Aspergillus e Penicillium, extremamente importantes do ponto de vista micotoxicológico. Verificou-se que 21,97% dos isolados de Aspergillus e Penicillium demonstraram capacidade para produzir aflatoxinas (42,9%), ocratoxina A (22,4%) e citrinina (34,7%). A presença de fungos toxigênicos representa risco potencial de contaminação com micotoxinas e considerando o aumento no consumo de produtos de origem vegetal como alternativa terapêutica, é necessário estabelecer padrões para a presença de fungos toxigênicos em drogas vegetais a fim de reduzir os riscos à saúde do consumidor.

The efficiency of Reasoner2 Agar for counting heterotrophic bacteria isolated from water for dialysis / Eficiência do Agar R2A na contagem de bactérias heterotróficas em água tratada para diálise

To detect the potential risk which may interfere on the quality of the water used for dialysis procedure, some assessment parameters have been established led to the definition of for its evaluation, such as the counting of heterotrophic bacteria. Considering that the chosen culture media and the incubation conditions may interfere on the results from microbiological analysis on water for dialysis, the present study evaluated the efficiency of R2A culture medium for performing the heterotrophic bacteria counting. A total of 193 samples of water collected from dialysis clinics located in the city of São Paulo and in other cities of the Grande São Paulo region were analyzed, and also the incubation temperature and the efficiency comparison on bothR2A and PCA media were evaluated. No difference between bacteria counting on R2A medium after 96hincubationat 24oC and 34oC was found. The highest bacteria counting was found on R2A medium (p 0.02), which was considered to be mostly suitable for evaluating the water for dialysis. In order to minimize the risks to the patient under dialysis, the water for dialysis should be carried out by bacteria counting technique on R2A agar because of its high sensitivity, and incubating it for longer incubation times.

Com o reconhecimento da má qualidade da água em causar potencial risco aos pacientes em tratamentos dialíticos, foram definidos os parâmetros de avaliação, entre os quais a contagem de bactérias heterotróficas. Considerando que a escolha dos meios de cultura e as condições de incubação utilizadas podem influenciar nos resultados da avaliação microbiológica da água tratada para diálise, este estudo realizou a análise da eficiência do ágar R2A para efetuar a contagem de bactérias heterotróficas. Foram analisadas 193amostras de água tratada provenientes de clínicas de diálise do município de São Paulo e de Grande São Paulo, em que foram avaliadas diferentes temperaturas de incubação, bem como o desempenho analítico de ágar R2A em comparação ao teste realizado com ágar PCA. Não houve diferença significativa entre as contagens obtidas após a incubação por 96 horas a temperaturas de 23oC e 34oC. Entretanto, contagens signifi cativamente maiores foram observadas em ágar R2A (p 0,02), sendo este, portanto, mais adequado para a avaliação da qualidade de água tratada para diálise. Com a finalidade de minimizar os riscos ao paciente sob tratamento dialítico, recomenda-se o uso do teste em ágar R2A combinado com maior tempo de incubação, em função de sua maior sensibilidade, para a efetuar a contagem de bactérias heterotróficas em água tratada para diálise.

Detection of non-fermenting Gram-negative bacteria in treated water for dialysis procedure purpose / Detecção de bactérias Gram-negativas não fermentadoras em água tratada para diálise

In Brazil, 90% of patients with renal failure depend on the hemodialysis procedures in order to remove the metabolic degradation products, water and mineral salts excesses from the organism, restoring the electrolyte and acid-base balance. Water is the main component of the dialysis therapy, and its chemical and microbiology quality is essential to avoid additional risks to patient. Dialysis solutions and equipments provide suitable environments for the microbial growth, particularly Gram-negative bacteria. In addition to bacteremia, Gram-negative microorganisms can be related to pyrogenic reactions. The objective of this study was to investigate the occurrence of non-fermenting Gram-negative bacteria in 97 dialysis water samples, and 27 dialysates analyzed from June 2005 to December 2006. Non-fermenting Gram-negative bacteria were detected in 29.6% of dialysates and in 49.5% of treated water samples. Nine bacteria species were isolated and identified; the Burkholderia cepacia complex was the most frequent (59.0%), followed by Stenotrophomonas maltophilia (13.1%).

No Brasil, 90% dos pacientes renais crônicos dependem dos procedimentos de hemodiálise para remover produtos de degradação metabólica, excesso de água e de sais minerais do organismo, e para restaurar o equilíbrio ácido-base e eletrolítico. A água é o principal componente do tratamento por diálise e suas qualidades química e microbiológica são essenciais para evitar riscos adicionais ao paciente. As soluções para diálise e os equipamentos proporcionam ambientes adequados ao desenvolvimento microbiano, especialmente bactérias Gram-negativas. Além de bacteremias, os microrganismos Gram-negativos podem estar relacionados à ocorrência de reações pirogênicas. Este estudo teve por objetivo verificar a ocorrência de bactérias Gram-negativas não fermentadoras de glicose em 97 amostras de água tratada para diálise e 27 amostras de dialisatos, avaliadas entre junho de 2005 e dezembro de 2006. As bactérias Gram-negativas não fermentadoras de glicose foram detectadas em 29,6% das amostras de dialisatos e em 49,5% das amostras de água tratada. Nove espécies foram isoladas e identificadas, sendo a mais freqüente o complexo Burkholderia cepacia (59,0%), seguido de Stenotrophomonas maltophilia (13,1%).

Antimicrobial activity evaluation of propolis products for sale in São Paulo city / Avaliação da atividade antimicrobiana de preparações de própolis comercializadas na cidade de São Paulo

Propolis is a resinous substance from diverse origins with antinflammatory and antimicrobial properties, which has been studied on some aspects. In this study, nine propolis products, sold in pharmacies and drugstores of São Paulo city, were evaluated for their claimed antimicrobial properties displayed in flask labels and/or product use instruction brochures. Antimicrobial activity was evaluated against Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Candida albicans, Enterococcus faecalis , and Streptococcus mutans. The method of diffusion in agar was used for evaluating every product in undiluted solutions, in a recommended dilution, and diluted one to tenth of recommended dilution. The results indicated that the recommended dilutions of products showed no antimicrobial activity.

A própolis é uma substância resinosa de diferentes origens, com propriedades anti-inflamatórias e antimicrobianas, a qual tem sido estudada sob vários aspectos. Neste estudo, nove preparações de própolis comercializadas em farmácias da cidade São Paulo, foram avaliadas quanto à atividade contra Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Candida albicans, Enterococcus faecalis e Streptococcus mutans. Utilizou-se o método de difusão em ágar, avaliando-se cada produto em condição não diluída, na diluição indicada e em um décimo da diluição recomendada. Os resultados indicaram que as diluições recomendadas nos rótulos dos produtos não evidenciaram atividade antimicrobiana.

Study the toxicity in vivo and in vitro in papers with sanitary purposes and microbiological quality assessment / Estudo da toxicidade in vivo e in vitro em produtos de papel para fins sanitários e sua avaliação microbiológica

Papers manufactured for sanitary purposes are absorbing products, composed by natural fibers, and usedto produce hygienic paper, handkerchiefs, towels, napkins, and hospital sheets. Sixty-five products fromdifferent manufacturers and marketed in São Paulo, Brazil were investigated by in vivo and in vitro dermaltoxicity assays and microbiological quality analysis. The assays were performed following ABNT NBR15134 Regulation and Ministerial Decree 1480. In vivo assay was carried out by Draize and Magnussonand Kligman techniques, and in vitro testing was performed by agar diffusion NCTC cell strains clone 929(ATCC-CCL1). Microbiological analysis was performed according to Ministerial Decree 1480. The analyzedproducts showed satisfactory results on both in vivo and in vitro assays. Forty-nine (75.4%) samples showedsatisfactory microbiological quality, but unsatisfactory in 16 (24.6%) samples due to the occurrence of aerobicmesophilic bacteria and Clostridium spp. In vitro cytotoxicity assay could be used as screening test, and as analternative test for replacing the animal-using methodologies. The microbiological analysis is not includedin the pertinent guidelines, but the use of analytical marker is crucial for assessing the sanitary-hygienicconditions and also to act in compliance with Good Manufacturing and Control Practices.

Os papéis para fins sanitários são produtos absorventes compostos de fibras naturais, destinados à fabricaçãode papel higiênico, lenços, toalhas, guardanapos e lençóis hospitalares. Foram analisados 65 produtos dediferentes marcas de papéis comercializadas em São Paulo para avaliar a toxicidade dérmica utilizando-seensaios in vivo e in vitro e a qualidade microbiológica. Foram utilizados ensaios recomendados pelas NormaABNT NBR 15134-30/09/2004, Portaria 1480-31/12/1990 e Farmacopeia Americana. O ensaio in vivo foirealizado utilizando-se técnicas de Draize, Magnusson e Kligman; para o teste in vitro pela difusão emágar foram empregadas as linhagens celulares NCTC clone 929 (ATCC-CCL1). Os produtos apresentaramresultados satisfatórios nos ensaios in vivo e in vitro. A qualidade microbiológica foi satisfatória em 49(75,4%) amostras, porém em 16 (24,6%) amostras os resultados foram insatisfatórios pela presença debactérias mesófilas aeróbias e de Clostridium spp. A técnica de citotoxicidade in vitro poderá ser utilizadacomo teste de triagem e como ensaio alternativo em substituição aos ensaios in vivo. Apesar da análisemicrobiológica não constar nas normas vigentes, o seu uso torna-se relevante para avaliar as condiçõeshigiênico-sanitárias e atender às normas de Boas Práticas de Fabricação e Controle.