Influence of the geometry of nanostructured hydroxyapatite and alginate composites in the initial phase of bone repair

Purpose:To analyze, histomorphologically, the influence of the geometry of nanostructured hydroxyapatite and alginate (HAn/Alg) composites in the initial phase of the bone repair.Methods:Fifteen rats were distributed to three groups: MiHA - bone defect filled with HAn/Alg microspheres; GrHA - bone defect filled with HAn/Alg granules; and DV - empty bone defect; evaluated after 15 days postoperatively. The experimental surgical model was the critical bone defect, ≅8.5 mm, in rat calvaria. After euthanasia the specimens were embedded in paraffin and stained with hematoxylin and eosin, picrosirius and Masson-Goldners trichrome.Results:The histomorphologic analysis showed, in the MiHA, deposition of osteoid matrix within some microspheres and circumjacent to the others, near the bone edges. In GrHA, the deposition of this matrix was scarce inside and adjacent to the granules. In these two groups, chronic granulomatous inflammation was noted, more evident in GrHA. In the DV, it was observed bone neoformation restricted to the bone edges and formation of connective tissue with reduced thickness in relation to the bone edges, throughout the defect.Conclusion:The geometry of the biomaterials was determinant in the tissue response, since the microspheres showed more favorable to the bone regeneration in relation to the granules.(AU)

The efficiency of bees in pollinating ephemeral flowers of Jacquemontia bracteosa (Convolvulaceae)

The family Convolvulaceae is widely distributed in tropical regions, mainly in open areas. Convolvulaceae flowers are characterized mainly by being beautiful and ephemeral, attracting many flower visitors that belong to different taxonomic groups. This work aimed to investigate the interactions between insects and flowers of Jacquemontia bracteosa (Convolvulaceae), focusing on the pollination efficiency, in an area in the Brazilian semiarid. From November 2011 to October 2012, floral biology of J. bracteosa was investigated as well as the flower visit frequency, behavior, and morphology of floral visitors. The flowers of J. bracteosa are white, showy and open early in the morning, lasting less than 12 hours, with fruiting occurring both by selfing and outcrossing fecundation. A total of 337 specimens insects were collected on J. bracteosa flowers during the field observations. The Neotropical bee, Ancyloscelis apiformis, was considered the most efficient pollinator of J. bracteosa. This bee showed appropriate behavior, high frequency (64% of the total sample), and was constant on the flowers. Furthermore, they arrived soon when the flowers began to open and presented 90% of efficiency in tests of flower pollination of J. bracteosa. Other native bee species also visited the flowers of J. bracteosa and may be considered potential pollinators because they presented behavior and morphology compatible with the flowers. This study suggests that maintenance of weeds or ruderal plants, especially those that also have ornamental potential in anthropic area, may be an option for the preservation of local native pollinators, which are threatened by environmental degradation.(AU)

The efficiency of bees in pollinating ephemeral flowers of Jacquemontia bracteosa (Convolvulaceae)

The family Convolvulaceae is widely distributed in tropical regions, mainly in open areas. Convolvulaceae flowers are characterized mainly by being beautiful and ephemeral, attracting many flower visitors that belong to different taxonomic groups. This work aimed to investigate the interactions between insects and flowers of Jacquemontia bracteosa (Convolvulaceae), focusing on the pollination efficiency, in an area in the Brazilian semiarid. From November 2011 to October 2012, floral biology of J. bracteosa was investigated as well as the flower visit frequency, behavior, and morphology of floral visitors. The flowers of J. bracteosa are white, showy and open early in the morning, lasting less than 12 hours, with fruiting occurring both by selfing and outcrossing fecundation. A total of 337 specimens insects were collected on J. bracteosa flowers during the field observations. The Neotropical bee, Ancyloscelis apiformis, was considered the most efficient pollinator of J. bracteosa. This bee showed appropriate behavior, high frequency (64% of the total sample), and was constant on the flowers. Furthermore, they arrived soon when the flowers began to open and presented 90% of efficiency in tests of flower pollination of J. bracteosa. Other native bee species also visited the flowers of J. bracteosa and may be considered potential pollinators because they presented behavior and morphology compatible with the flowers. This study suggests that maintenance of weeds or ruderal plants, especially those that also have ornamental potential in anthropic area, may be an option for the preservation of local native pollinators, which are threatened by environmental degradation.

The efficiency of bees in pollinating ephemeral flowers of Jacquemontia bracteosa (Convolvulaceae)

ABSTRACT The family Convolvulaceae is widely distributed in tropical regions, mainly in open areas. Convolvulaceae flowers are characterized mainly by being beautiful and ephemeral, attracting many flower visitors that belong to different taxonomic groups. This work aimed to investigate the interactions between insects and flowers of Jacquemontia bracteosa (Convolvulaceae), focusing on the pollination efficiency, in an area in the Brazilian semiarid. From November 2011 to October 2012, floral biology of J. bracteosa was investigated as well as the flower visit frequency, behavior, and morphology of floral visitors. The flowers of J. bracteosa are white, showy and open early in the morning, lasting less than 12 hours, with fruiting occurring both by selfing and outcrossing fecundation. A total of 337 specimens insects were collected on J. bracteosa flowers during the field observations. The Neotropical bee, Ancyloscelis apiformis, was considered the most efficient pollinator of J. bracteosa. This bee showed appropriate behavior, high frequency (64% of the total sample), and was constant on the flowers. Furthermore, they arrived soon when the flowers began to open and presented 90% of efficiency in tests of flower pollination of J. bracteosa. Other native bee species also visited the flowers of J. bracteosa and may be considered potential pollinators because they presented behavior and morphology compatible with the flowers. This study suggests that maintenance of weeds or ruderal plants, especially those that also have ornamental potential in anthropic area, may be an option for the preservation of local native pollinators, which are threatened by environmental degradation.

Principais tipos de silos e microrganismos envolvidos no processo de ensilagem / The main kinds of silos and microrganisms involved in the process of ensilage

Objetivou-se abordar os principais fatores envolvidos na ensilagem, destacando os tipos de silos e os principais microrganismos envolvidos no processo. Diferentes tipos de armazenagem apresentam vantagens e desvantagens referentes, principalmente ao custo de construção, facilidade de carregamento e descarregamento e eficiência na conservação da silagem. A conservação inadequada visa a proliferação de microrganismos indesejáveis como, por exemplo, bactérias do gênero Clostridium, enterobactérias, fungos e leveduras, e neste sentido, pode influenciar na qualidade nutricional e sanitária aos animais.(AU)

In this article it was aimed to discuss about the main factors involved in the ensilage process, emphasizing the main kinds of silos and the main microbiological involved in the process. Different kind of storage have its advantages and disadvantages related primarily to the construction cost, ease of charging and discharging efficiency and conservation of silage. Also, an incorrect silage conservation tends to undesirable microrganisms proliferation such as bacteria of the genus Clostridium, Enterobacteriaceae, fungi and yeasts and, in this direction, it could influence both nutritional and sanitary qualities to the animals.(AU)

Aspectos físicos das silagens de capim elefante com diferentes niveis de inclusão de farelo de flúten de milho

Objetivou-se com este estudo avaliar a qualidade física de silagens de capim-elefante com inclusão de quatro níveis (0, 30, 60 e 90%) de Farelo Úmido de Glúten de Milho avaliados no dia da ensilagem e 50 dias após. A caracterização do aspecto físico foi visual e olfativa. Para avaliação da coloração foram definidos os seguintes padrões: amarelo claro, amarelo escuro, esverdeada, marrom e preto. O odor foi classificado em seis padrões: fraco, acético, alcoólico, adocicado, rancificado e podre. Larvas e fungos foram classificados separadamente em escala de 0 a 3 no momento de abertura dos silos (dia 50), sendo zero ausência e três forte presença de larvas e fungos. As variáveis analisadas de forma descritiva. Diferenças significativas foram verificadas entre os tratamentos quanto ao escore de larvas (p=0,02) e fungos (p=0,024) no momento de abertura dos silos de FUGM + Capim- Elefante, sendo observados maiores quantidade de larvas e fungos nos níveis de inclusão 30 e 90% de FUGM. A cor predominante dos diferentes níveis de inclusão no dia da ensilagem foi amarelo claro, tendo uma variação no nível de inclusão 0% de FUMG, o qual teve coloração esverdeada. À medida que aumenta o FUGM melhora o aspecto de cor e odor nas silagens.

The objective of this study was to evaluate the physical quality of elephant grass silages with inclusion of four levels (0, 30, 60 and 90%) of Wet Corn Gluten Feed (WCGF)assessed on the day and 50 days after ensiling. The characterization of the physical aspect was visual and olfactory. To evaluate the staining patterns were defined as follows: light yellow, dark yellow, green, brown and black. The odor was classified into six patterns: weak acetic, alcoholic, sweet, and rotten rancificado. Larvae were rated separately and fungi on scale of 0 to 3 at the time of opening of the silo (50 days), with 0 being absence and presence of three strongly larvae and fungi. The variables analyzed descriptively. Significant differences were found between treatments for larvae score (p = 0.02) and fungi (p = 0.024) at the time of opening the silos WCGF + Elephant-grass, with higher number of larvae and fungus levels inclusion of 30 and 90% WCGF. The predominant color of the different inclusion levels on ensiling was light yellow, with a variation in 0% inclusion level of WCGF, which was greenish. As WCGF increases improves the appearance of color and odor in the silages.

Caracterização das silagens de capim-elefante com diferentes níveis de inclusão de farelo úmido de glúten de milho

Objetivou-se com este estudo avaliar a qualidade física, química, teor de matéria seca (MS) de silagens de capim-elefante com inclusão de quatro níveis (0, 30, 60 e 90%) de Farelo Úmido de Glúten de Milho avaliados no dia da ensilagem e 50 dias após. Realizou-se aferições de pH, temperatura e teor de matéria seca (MS) das silagens e caracterização do aspecto físico. O delineamento foi em parcela subdividida. Não houve diferença (p<0,05) para as temperaturas das silagens de capim-elefante com 0,30 e 60% de inclusão do FUGM no dia 0, apenas o maior nível de inclusão (90%) apresentou temperatura mais elevada, 41,46ºC. No 50º dia não houve diferença (p<0,05) entre quaisquer níveis de inclusão de FUGM na silagem de capim-elefante. Nas silagens de capim elefante + FUGM, os valores de pH decresceram linearmente no dia 0 e aumentaram linearmente após 50 dias de fermentação. Os teores de MS das silagens de capim-elefante no dia 0 elevaram-se quadraticamente à medida que aumentou a inclusão de FUGM, já no dia 50 pós-fermentação todos os tratamentos apresentaram maiores valores de MS quando comparado ao dia 0. As características físicas das silagens não sofreram grandes alterações com os níveis de inclusão.

This study aimed to evaluate the physical, chemical, dry matter content (DM) of silage of elephant with inclusion of four levels (0, 30, 60 and 90%) of Wet Corn Gluten Feed (WCGF)evaluated in day and 50 days after ensiling. We carried out measurements of pH, temperature and dry matter content (DM) of silages, characterization of the physical. The design was a split plot. No significant differences (p <0.05) for the temperatures of elephant grass silages with 0.30 and 60% inclusion of WCGF on day 0, only the highest level of inclusion (90%) showed higher temperature, 41 , 46 º C. On day 50 there was no difference (p <0.05) between any of WCGF inclusion levels in the elephant grass silage. In elephant grass silages + WCGF, pH values decreased linearly at day 0 and increased linearly after 50 days of fermentation. The DM content of silages of elephant grass at day 0 rose quadratically increased as the inclusion of WCGF, now day 50 post-fermentation all treatments showed higher MS compared to day 0. The physical characteristics of the silage did not change much with the inclusion levels.

Caracterização das silagens de milho com diferentes níveis de inclusão de farelo úmido de glúten de milho

Objetivou-se com este estudo avaliar a qualidade física, química, teor de matéria seca (MS) de silagens de milho com inclusão de quatro níveis (0, 30, 60 e 90%) de Farelo Úmido de Glúten de Milho (FUGM) avaliados no dia da ensilagem e 50 dias após. Realizou-se aferições de pH, temperatura e teor de matéria seca (MS) das silagens, caracterização do aspecto físico. O delineamento foi em parcela subdividida. Houve aumento quadrático de pH no dia 0, e após 50 dias de fermentação não foram observadas diferenças significativas.As características físicas das silagens não sofreram grandes alterações com os níveis de inclusão.

This study aimed to evaluate the physical, chemical, dry matter content (DM) of silage of elephant with inclusion of four levels (0, 30, 60 and 90%) of Wet Corn Gluten Feed (WCGF)evaluated in day and 50 days after ensiling. We carried out measurements of pH, temperature and dry matter content (DM) of silages, characterization of the physical. The design was a split plot. No significant differences (p <0.05) for the temperatures of elephant grass silages with 0.30 and 60% inclusion of WCGF on day 0, only the highest level of inclusion (90%) showed higher temperature, 41 , 46 º C. On day 50 there was no difference (p <0.05) between any of WCGF inclusion levels in the elephant grass silage. In elephant grass silages + WCGF, pH values decreased linearly at day 0 and increased linearly after 50 days of fermentation. The DM content of silages of elephant grass at day 0 rose quadratically increased as the inclusion of WCGF, now day 50 post-fermentation all treatments showed higher MS compared to day 0. The physical characteristics of the silage did not change much with the inclusion levels.

Caracterização das silagens de milho com diferentes níveis de inclusão de farelo úmido de glúten de milho

Objetivou-se com este estudo avaliar a qualidade física, química, teor de matéria seca (MS) de silagens de milho com inclusão de quatro níveis (0, 30, 60 e 90%) de Farelo Úmido de Glúten de Milho (FUGM) avaliados no dia da ensilagem e 50 dias após. Realizou-se aferições de pH, temperatura e teor de matéria seca (MS) das silagens, caracterização do aspecto físico. O delineamento foi em parcela subdividida. Houve aumento quadrático de pH no dia 0, e após 50 dias de fermentação não foram observadas diferenças significativas.As características físicas das silagens não sofreram grandes alterações com os níveis de inclusão.(AU)

This study aimed to evaluate the physical, chemical, dry matter content (DM) of silage of elephant with inclusion of four levels (0, 30, 60 and 90%) of Wet Corn Gluten Feed (WCGF)evaluated in day and 50 days after ensiling. We carried out measurements of pH, temperature and dry matter content (DM) of silages, characterization of the physical. The design was a split plot. No significant differences (p <0.05) for the temperatures of elephant grass silages with 0.30 and 60% inclusion of WCGF on day 0, only the highest level of inclusion (90%) showed higher temperature, 41 , 46 º C. On day 50 there was no difference (p <0.05) between any of WCGF inclusion levels in the elephant grass silage. In elephant grass silages + WCGF, pH values decreased linearly at day 0 and increased linearly after 50 days of fermentation. The DM content of silages of elephant grass at day 0 rose quadratically increased as the inclusion of WCGF, now day 50 post-fermentation all treatments showed higher MS compared to day 0. The physical characteristics of the silage did not change much with the inclusion levels.(AU)

Caracterização das silagens de capim-elefante com diferentes níveis de inclusão de farelo úmido de glúten de milho

Objetivou-se com este estudo avaliar a qualidade física, química, teor de matéria seca (MS) de silagens de capim-elefante com inclusão de quatro níveis (0, 30, 60 e 90%) de Farelo Úmido de Glúten de Milho avaliados no dia da ensilagem e 50 dias após. Realizou-se aferições de pH, temperatura e teor de matéria seca (MS) das silagens e caracterização do aspecto físico. O delineamento foi em parcela subdividida. Não houve diferença (p<0,05) para as temperaturas das silagens de capim-elefante com 0,30 e 60% de inclusão do FUGM no dia 0, apenas o maior nível de inclusão (90%) apresentou temperatura mais elevada, 41,46ºC. No 50º dia não houve diferença (p<0,05) entre quaisquer níveis de inclusão de FUGM na silagem de capim-elefante. Nas silagens de capim elefante + FUGM, os valores de pH decresceram linearmente no dia 0 e aumentaram linearmente após 50 dias de fermentação. Os teores de MS das silagens de capim-elefante no dia 0 elevaram-se quadraticamente à medida que aumentou a inclusão de FUGM, já no dia 50 pós-fermentação todos os tratamentos apresentaram maiores valores de MS quando comparado ao dia 0. As características físicas das silagens não sofreram grandes alterações com os níveis de inclusão.(AU)

This study aimed to evaluate the physical, chemical, dry matter content (DM) of silage of elephant with inclusion of four levels (0, 30, 60 and 90%) of Wet Corn Gluten Feed (WCGF)evaluated in day and 50 days after ensiling. We carried out measurements of pH, temperature and dry matter content (DM) of silages, characterization of the physical. The design was a split plot. No significant differences (p <0.05) for the temperatures of elephant grass silages with 0.30 and 60% inclusion of WCGF on day 0, only the highest level of inclusion (90%) showed higher temperature, 41 , 46 º C. On day 50 there was no difference (p <0.05) between any of WCGF inclusion levels in the elephant grass silage. In elephant grass silages + WCGF, pH values decreased linearly at day 0 and increased linearly after 50 days of fermentation. The DM content of silages of elephant grass at day 0 rose quadratically increased as the inclusion of WCGF, now day 50 post-fermentation all treatments showed higher MS compared to day 0. The physical characteristics of the silage did not change much with the inclusion levels.(AU)

Aspectos físicos das silagens de capim elefante com diferentes niveis de inclusão de farelo de flúten de milho

Objetivou-se com este estudo avaliar a qualidade física de silagens de capim-elefante com inclusão de quatro níveis (0, 30, 60 e 90%) de Farelo Úmido de Glúten de Milho avaliados no dia da ensilagem e 50 dias após. A caracterização do aspecto físico foi visual e olfativa. Para avaliação da coloração foram definidos os seguintes padrões: amarelo claro, amarelo escuro, esverdeada, marrom e preto. O odor foi classificado em seis padrões: fraco, acético, alcoólico, adocicado, rancificado e podre. Larvas e fungos foram classificados separadamente em escala de 0 a 3 no momento de abertura dos silos (dia 50), sendo zero ausência e três forte presença de larvas e fungos. As variáveis analisadas de forma descritiva. Diferenças significativas foram verificadas entre os tratamentos quanto ao escore de larvas (p=0,02) e fungos (p=0,024) no momento de abertura dos silos de FUGM + Capim- Elefante, sendo observados maiores quantidade de larvas e fungos nos níveis de inclusão 30 e 90% de FUGM. A cor predominante dos diferentes níveis de inclusão no dia da ensilagem foi amarelo claro, tendo uma variação no nível de inclusão 0% de FUMG, o qual teve coloração esverdeada. À medida que aumenta o FUGM melhora o aspecto de cor e odor nas silagens.(AU)

The objective of this study was to evaluate the physical quality of elephant grass silages with inclusion of four levels (0, 30, 60 and 90%) of Wet Corn Gluten Feed (WCGF)assessed on the day and 50 days after ensiling. The characterization of the physical aspect was visual and olfactory. To evaluate the staining patterns were defined as follows: light yellow, dark yellow, green, brown and black. The odor was classified into six patterns: weak acetic, alcoholic, sweet, and rotten rancificado. Larvae were rated separately and fungi on scale of 0 to 3 at the time of opening of the silo (50 days), with 0 being absence and presence of three strongly larvae and fungi. The variables analyzed descriptively. Significant differences were found between treatments for larvae score (p = 0.02) and fungi (p = 0.024) at the time of opening the silos WCGF + Elephant-grass, with higher number of larvae and fungus levels inclusion of 30 and 90% WCGF. The predominant color of the different inclusion levels on ensiling was light yellow, with a variation in 0% inclusion level of WCGF, which was greenish. As WCGF increases improves the appearance of color and odor in the silages.(AU)

Comportamento ingestivo de ovelhas alimentadas com coprodutos do milgo ensilado com capim elefante

Foi realizado um experimento com o objetivo de conhecer o comportamento ingestivo de ovinos alimentados com dietas compostas de silagem de capim-elefante (Pennisetum purpureum) acrescidas de quatro diferentes níveis de Farelo Úmido de Glúten de Milho (FUGM), 0%, 30%, 60%, 90% e capim-elefante in natura (CEIN), bem como conhecer seus teores de matéria seca (MS), fibra em detergente neutro (FDN) e suas eficiências de ruminação, ingestão e tempo de mastigação total. Cinco ovelhas com 46,84 Kg de peso vivo corporal foram observadas em intervalos de cinco minutos, em períodos totais de 24 horas para avaliação dos tempos de ingestão de alimentos (TI), de ruminação (TR) e de ócio (T0). Foram verificadas eficiências de ingestão de MS (EIMS, g MS/h) e FDN (EIFDN, g FDN/h) pela divisão do consumo de MS e FDN pelo tempo de ingestão (CMS/TI e FDN/TI); a eficiência de ruminação em função do consumo de MS e FDN (ERMS, g MS/h e ERFDN, g FDN/h) foi calculada como relação entre o consumo de MS e FDN em função do tempo de ruminação (h/dia); o tempo de mastigação total (TMT), foi dado pela soma entre tempo de ingestão e ruminação. A inclusão de 60% e 90% de FUGM aumentou a MS das silagens. CMN, CMS e CFDN não apresentaram diferenças (p>0,05) entre os tratamentos. O TR foi menor para o nível de inclusão de 90% de FUGM quando comparado ao CEIN As melhores ERMS foram encontradas nos tratamentos com 60 e 90% de inclusão do FUGM. O FUGM pode ser adicionado à silagem de capim-elefante em níveis de 60 e 90%.

Comportamento ingestivo de ovelhas alimentadas com coprodutos do milgo ensilado com capim elefante

Foi realizado um experimento com o objetivo de conhecer o comportamento ingestivo de ovinos alimentados com dietas compostas de silagem de capim-elefante (Pennisetum purpureum) acrescidas de quatro diferentes níveis de Farelo Úmido de Glúten de Milho (FUGM), 0%, 30%, 60%, 90% e capim-elefante in natura (CEIN), bem como conhecer seus teores de matéria seca (MS), fibra em detergente neutro (FDN) e suas eficiências de ruminação, ingestão e tempo de mastigação total. Cinco ovelhas com 46,84 Kg de peso vivo corporal foram observadas em intervalos de cinco minutos, em períodos totais de 24 horas para avaliação dos tempos de ingestão de alimentos (TI), de ruminação (TR) e de ócio (T0). Foram verificadas eficiências de ingestão de MS (EIMS, g MS/h) e FDN (EIFDN, g FDN/h) pela divisão do consumo de MS e FDN pelo tempo de ingestão (CMS/TI e FDN/TI); a eficiência de ruminação em função do consumo de MS e FDN (ERMS, g MS/h e ERFDN, g FDN/h) foi calculada como relação entre o consumo de MS e FDN em função do tempo de ruminação (h/dia); o tempo de mastigação total (TMT), foi dado pela soma entre tempo de ingestão e ruminação. A inclusão de 60% e 90% de FUGM aumentou a MS das silagens. CMN, CMS e CFDN não apresentaram diferenças (p>0,05) entre os tratamentos. O TR foi menor para o nível de inclusão de 90% de FUGM quando comparado ao CEIN As melhores ERMS foram encontradas nos tratamentos com 60 e 90% de inclusão do FUGM. O FUGM pode ser adicionado à silagem de capim-elefante em níveis de 60 e 90%.(AU)

Production of outer membrane vesicles (OMV) in batch cultivation of Neisseria meningitidis serogroup B

Meningococcal disease is an important cause of death and morbidity throughout the world. Nearly 330,000 cases and 35,000 deaths occur yearly. Neisseria meningitidis, serogroup B strain N.44/89, is prevalent in Brazil. Its outer membrane vesicles (OMV) with iron regulated proteins (IRP) are released to the culture medium and are used as antigen for vaccine production. In order to have knowledge about the kinetic parameters, especially the final OMV concentration values, 20-h batch cultivations were carried out in Catlin medium with iron restriction. Process conditions comprised: 7 L bioreactor, 36ºC, 0.5 atm, overlay air flowrate of 1 L/min, agitation varying from 250 rpm to 850 rpm and dissolved oxygen control set at 10% of saturation condition. Biomass was determined by optical density at 540 nm and dry weight. Glycerol, lactate, pH and dissolved oxygen were measured from samples taken during cultivation. Outer membrane vesicle (OMV) concentration was determined by Lowry's method after ultracentrifugation. IRP presence was verified by SDS-PAGE. Highest biomass value, corresponding to the highest initial lactate concentration (7.84 g/L) was achieved at the 9th hour process time corresponding to 1.0 g/L dry biomass and 2.3 optical density at 540 nm. Lactate consumption was directly related to cell growth (yield factor: 0.24 g dry biomass / g lactate). Glycerol concentration in the medium did not change significantly during the process. OMV concentration reached the highest value of 80 mg/L at end cultivation time. The obtained results suggest that lactate is a main limiting growth factor and the maximum amount of antigen is obtained during stationary growth and cell death phases.

A doença meningocócica é uma causa importante de morte a nível mundial. Aproximadamente 330.000 casos e 35.000 mortes ocorrem anualmente. A cepa N.44/89 do sorogrupo B de Neisseria meningitidis é prevalente no Brasil. Suas vesículas de membrana externa (OMV - "outer membrane vesicles"), com proteínas reguladoras de ferro (IRP - "iron regulated proteins") liberadas no meio de cultura, são empregadas como antígeno para a produção da vacina. A fim ter o conhecimento sobre os parâmetros cinéticos, especialmente os valores finais da concentração de OMV, cultivos batelada de 20 hs foram realizados no meio de Catlin com limitação do ferro. As condições de processo compreenderam: biorreator de 7 litros, 36ºC, 0,5 atm, vazão de ar de 1 L/min, agitação variando entre 250 a 850 rpm, controle do oxigênio dissolvido em 10% da condição de saturação. A biomassa foi determinada pela densidade ótica em 540 nm e peso seco. Glicerol, lactato, pH e oxigênio dissolvido foram medidos das amostras retiradas durante o cultivo. A concentração de OMV foi determinada pelo método de Lowry após ultracentrifugação. A presença de IRP foi verificada por SDS-PAGE. O valor mais elevado de biomassa, correspondendo à concentração inicial mais elevada de lactato (7,84 g/L) foi obtido no tempo de processo de 9 horas, o qual corresponde a biomassa seca de 1,0 g/L e a densidade ótica de 2,3 em 540 nm. O consumo de lactato. foi relacionado diretamente ao crescimento celular (fator de conversão de 0,24 biomassa por lactato g/g). A concentração do glicerol no meio não se alterou significativamente ao longo do processo. A concentração de OMV alcançou o valor mais elevado de 80 mg/L no tempo final de cultivo. Os resultados obtidos sugerem que o lactato é o principal fator limitante do crescimento e o máximo do antígeno é obtido durante a fase estacionária de crescimento e de morte celular.

In vitro viability of canine spermatozoa frozen in tris-fructose-citric acid extender with ethylene glycol / Viabilidade in vitro do espermatozóide canino congelado em diluidor tris-frutose-ácido cítrico com etileno glicol

A utilização de sêmen congelado tornou-se extremamente comum na prática da inseminação artificial em cães, estimulando a pesquisa de métodos de congelação e diluidores. Neste estudo foram avaliadas as propriedades criopreservativas do etileno glicol na concentração final de 5%, utilizado em 3 diferentes protocolos de congelação. No Método I, uma parte de sêmen foi adicionada a duas partes de tris-frutose-ácido cítrico, contendo 7,5% de etileno glicol e congelado sem prévia refrigeração. No Método II, uma parte de sêmen foi adicionada a duas partes de tris-frutose-ácido cítrico contendo 7,5% de etileno glicol e resfrigerado até 5ºC por 1 hora antes da congelação. No Método III, uma parte de sêmen foi adicionada a uma parte de tris-frutose-ácido cítrico sem etileno glicol e refrigerado até 5ºC por 1 hora, sendo em seguida adicionada uma parte de tris-frutose-ácido cítrico, previamente refrigerado até 5ºC, contendo 15% de etileno glicol, mantido a 5ºC por mais 1 hora e congelado. Para a congelação em cada método, o sêmen foi envasado em palhetas plásticas de 0,5 ml, colocadas em vapor de nitrogênio a 5 cm da coluna líquida por 20 minutos, mergulhadas no nitrogênio líquido e armazenadas. Todas as amostras foram descongeladas em banho-maria a 37ºC durante 30 segundos e imediatamente avaliadas. O Método III não apresentou decréscimo significante da motilidade retilínea progressiva após a descongelação e apresentou os melhores resultados para o vigor espermático, comparando-se aos demais métodos. Entretanto, os 3 métodos não apresentaram diferença significativa com relação aos defeitos espermáticos pós-descongelação. Os tipos de defeitos mais freqüentemente encontrados foram cabeça solta normal, cauda dobrada, fortemente dobrada e fortemente enrolada. Foi possível concluir que o tempo de equilíbrio maior no diluidor tris-frutose-ácido cítrico seguido pela diluição em etileno glicol antes da congelação parece produzir para os espermatozóides de cães ... (AU)

Comparison of five extenders for canine semen freezing / Comparação entre cinco diluidores na congelação de sêmen de cães

Semen was collected from six stud dogs to compare five extenders in the semen freezing process. Each ejaculate was divided in five parts and added to tris-fructose-citric acid, glicine, lactose, skim milk and tris-fructose-citrate extenders. The semen was diluted at 37C in extenders without glycerol, in the ratio 1:1 and cooled for 60 minutes to reach a 5C temperature. Then, extenders with glycerol in the ratio of 2:1 were added to give the final prefreezing concentration of 4% of glycerol. The diluted semen with the cryoprotectant was maintained for a further 60 minutes in refrigeration to equilibrate the spermatozoa in the glycerol and packaged in 0.5 ml plastic straws. The straws were maintained for 30 minutes in vapor, plunged and stored in liquid nitrogen. Sperm morphology was evaluated before and after freezing, whereas progressive motility (%) and velocity of forward progression (0-5) were appraised in different periods of the freezing process. The extender tris-fructose-citric acid showed the best post thaw progressive motility and velocity of forward progression compared to the others extenders. Semen freezing increased major sperm morphological abnormalities, regardless of the extender.

Foram utilizados ejaculados de 6 cães para comparar cinco diluidores no processo de congelação de sêmen. Cada ejaculado foi dividido em 5 partes e adicionadas aos diluidores tris-fructose-ácido cítrico, glicina, lactose, leite desnatado e tris-fructose-ácido cítrico. O sêmen foi diluído a 37C sem adição de glicerol na proporção 1:1 (fração A) e refrigerado durante 60 minutos até atingir a temperatura de 5ºC, quando foi adicionada a fração dos diluidores contendo glicerol (fração B) na proporção 2:1, atingindo a concentração final de 4% de glicerol. O sêmen diluído permaneceu por 60 minutos em refrigeração para equilíbrio no glicerol, sendo envasado em palhetas de 0,5 ml, mantido por 30 minutos no vapor de nitrogênio e imerso e armazenado em nitrogênio líquido. Foram avaliados a motilidade progressiva retilínea, o vigor e os defeitos espermáticos antes da congelação e após a descongelação do sêmen em água a 37C. Os resultados mostraram que os diluidores tris-fructose-ácido cítrico e glicina apresentaram as melhores médias de motilidade progressiva retilínea e de vigor espermático após a descongelação. A congelação aumentou a freqüência dos defeitos espermáticos maiores independente do diluidor.

PRINCIPAIS TIPOS DE SILOS E MICRORGANISMOS ENVOLVIDOS NO PROCESSO DE ENSILAGEM

Objetivou-se abordar os principais fatores envolvidos na ensilagem, destacando os tipos de silos e os principais microrganismos envolvidos no processo. Diferentes tipos de armazenagem apresentam vantagens e desvantagens referentes, principalmente ao custo de construção, facilidade de carregamento e descarregamento e eficiência na conservação da silagem. A conservação inadequada visa a proliferação de microrganismos indesejáveis como, por exemplo, bactérias do gênero Clostridium, enterobactérias, fungos e leveduras, e neste sentido, pode influenciar na qualidade nutricional e sanitária aos animais.

Diferentes tipos e tempos de armazenagem do farelo úmido de glúten de milho ensilado

Objetivou-se avaliar as diferentes armazenagens (silos trincheira, superfície, bag e amontoado) com o co-produto farelo úmido de glúten de milho (FUGM) em diferentes dias de abertura dos silos. Foi realizado um delineamento inteiramente ao acaso, em parcelas subdivididas sendo os tipos de silos a parcela e dias de abertura de silos após ensilagem a subparcela, os dias de coleta foram: 0, 1°, 3°, 5°, 7°, 14°, 28°, 56° dia de armazenagem. Foram quatro tratamentos (silos) com três repetições, totalizando 12 unidades experimentais. Foi feita a caracterização da silagem de FUGM quanto a características físicas e químicas: temperatura, pH, composição químicobromatológica: análise dos teores de matéria seca (MS), de extrato etéreo (EE), de proteína bruta (PB), fibra em detergente neutro (FDN) e da fibra em detergente ácido, da digestibilidade in vitro, e análise microbiológica para quantificar os microrganismos (bolores e leveduras, lactobacilos e clostrídios) do FUGM proveniente das unidades experimentais. Todos os valores encontrados ficaram acima do pH de uma silagem adequada quando se considera pH inferior a 4,2 para a mesma. Em relação à temperatura, aos dias de abertura teve efeito a partir do 7º dia para o silo bag e do 14º para os demais silos. Por meio da regressão observou-se que os valores de MS, PB e EE foram decrescendo e os valores de FDA, FDN aumentaram com o passar dos dias, de todos os tratamentos. Compararam-se tratamentos e dias na análise microbiológica, quanto ao tratamento houve significância apenas para bolores e leveduras, já para lactobacilos e clostrídios teve relevância apenas para dias. De forma geral, os valores de pH, temperatura, composição bromatológica e microbiológica indicam fermentação inadequada em todos tratamentos, sugere-se maiores estudos com o uso de inoculantes, a fim de possibilitar o acréscimo de ácido lático, que poderia aumentar a estabilidade do material em conservação

Desenvolvimento de biblioteca de microsatélites e análise bidimensional de proteínas em Carica papaya L

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