Comparação entre três métodos analíticos para determinação de soro em leite cru refrigerado / Comparison of three analytical methods to determine serum in refrigerated raw milk

O objetivo deste experimento foi comparar três métodos analíticos para determinação de soro em leite cru refrigerado: cromatografia líquida de alta eficiência, ninidrina ácida e colorimétrico adaptado. Foram coletadas 100 amostras de leite cru refrigerado de tanques de expansão. Estas, quando submetidas à análise pelo método da ninidrina ácida, apresentaram 10 (14,7%) amostras negativas e 58 (85,3%) positivas. O teor médio de ácido siálico encontrado na técnica da ninidrina foi de 5,58(g/mL, com valor mais frequente de 2,70(g/mL. Das 68 amostras negativas pela cromatografia líquida de alta eficiência, duas foram positivas (2,94%) e 66 (97,06%) negativas, quando analisadas pelo método colorimétrico. A frequência relativa de amostras positivas foi de 32%, com a CLAE apresentando a maior média de soro (14,37%), seguida do método colorimétrico (5,28%) e o da ninidrina ácida (3,12%). A técnica de cromatografia líquida de alta eficiência diferiu dos métodos de ninidrina ácida e colorimétrico, enquanto os métodos da ninidrina e colorimétrico não diferiram entre si, podendo ambos serem utilizados como metodologias de triagem. Entre as três técnicas, a cromatografia líquida de alta eficiência foi a metodologia mais sensível na detecção e quantificação do soro em leite cru refrigerado.(AU)

The objective of this study was to compare three analytical methods to determine serum in refrigerated raw milk. High-performance liquid chromatography (HPLC), acidic and colorimetric ninhydrin methods were applied. A collection of 100 samples of raw milk from cooled expansion tanks took place. The results showed that 10 samples (14.7%) were negative and 58 (85.3%) were positive for the acidic ninhydrin method. The mean sialic acid content found in the ninhydrin technique was 5.58µg/mL, with a more frequent value of 2.70µg/mL. From all 68 HPLC negative samples, two were positive (2.94%) and 66 (97.06%) negative to the colorimetric method. The relative frequency of positive samples was 32%, HPLC had the highest mean serum levels (14.37%), followed by the colorimetric method (5.28%) and acid ninhydrin (3.12%). The high-performance liquid chromatography method was different from the acid and colorimetric ninhydrin methods. The ninhydrin and colorimetric methods were not different from each other, both of which could be used as screening methodologies. Among the three techniques, HPLC was the most sensitive methodology for the detection and quantification of serum in refrigerated raw milk.(AU)

Comparação entre três métodos analíticos para determinação de soro em leite cru refrigerado / Comparison of three analytical methods to determine serum in refrigerated raw milk

O objetivo deste experimento foi comparar três métodos analíticos para determinação de soro em leite cru refrigerado: cromatografia líquida de alta eficiência, ninidrina ácida e colorimétrico adaptado. Foram coletadas 100 amostras de leite cru refrigerado de tanques de expansão. Estas, quando submetidas à análise pelo método da ninidrina ácida, apresentaram 10 (14,7%) amostras negativas e 58 (85,3%) positivas. O teor médio de ácido siálico encontrado na técnica da ninidrina foi de 5,58(g/mL, com valor mais frequente de 2,70(g/mL. Das 68 amostras negativas pela cromatografia líquida de alta eficiência, duas foram positivas (2,94%) e 66 (97,06%) negativas, quando analisadas pelo método colorimétrico. A frequência relativa de amostras positivas foi de 32%, com a CLAE apresentando a maior média de soro (14,37%), seguida do método colorimétrico (5,28%) e o da ninidrina ácida (3,12%). A técnica de cromatografia líquida de alta eficiência diferiu dos métodos de ninidrina ácida e colorimétrico, enquanto os métodos da ninidrina e colorimétrico não diferiram entre si, podendo ambos serem utilizados como metodologias de triagem. Entre as três técnicas, a cromatografia líquida de alta eficiência foi a metodologia mais sensível na detecção e quantificação do soro em leite cru refrigerado.(AU)

The objective of this study was to compare three analytical methods to determine serum in refrigerated raw milk. High-performance liquid chromatography (HPLC), acidic and colorimetric ninhydrin methods were applied. A collection of 100 samples of raw milk from cooled expansion tanks took place. The results showed that 10 samples (14.7%) were negative and 58 (85.3%) were positive for the acidic ninhydrin method. The mean sialic acid content found in the ninhydrin technique was 5.58µg/mL, with a more frequent value of 2.70µg/mL. From all 68 HPLC negative samples, two were positive (2.94%) and 66 (97.06%) negative to the colorimetric method. The relative frequency of positive samples was 32%, HPLC had the highest mean serum levels (14.37%), followed by the colorimetric method (5.28%) and acid ninhydrin (3.12%). The high-performance liquid chromatography method was different from the acid and colorimetric ninhydrin methods. The ninhydrin and colorimetric methods were not different from each other, both of which could be used as screening methodologies. Among the three techniques, HPLC was the most sensitive methodology for the detection and quantification of serum in refrigerated raw milk.(AU)

Efeito da contagem de células somáticas sobre o rendimento e a composição físico-química do queijo muçarela / The effect of somatic cell count on yield and physico-chemical composition of Mozzarella cheese

Determinou-se o efeito da contagem de células somáticas do leite sobre o rendimento e a composição físico-química do queijo muçarela. Foram selecionadas vacas com contagem de células somáticas (CCS) <200.000 células/mL; CCS >200.000 a <400.000 células/mL; CCS >400.000 células/mL a <750.000 células/mL e CCS >750.000 células/mL e que não receberam tratamento com antimicrobianos nos dias que antecederam a obtenção do leite utilizado no processamento. Os queijos foram avaliados por meio das análises de pH, acidez, umidade, proteína, gordura, extrato seco total e desengordurado. Os queijos elaborados do leite com alta CCS >750.000 cél./mL apresentaram menor teor de proteína, maior umidade e menor rendimento industrial. Conclui-se que a elevação da CCS cursou com alterações na qualidade do queijo muçarela, o que reflete em sua composição nutricional e microbiológica, pois ocorre um incremento na atividade de água, fator intrínseco indispensável para o crescimento microbiano e consequente redução da vida de prateleira.(AU)

The effect of somatic cell count (SCC) on the yield and composition of mozzarella cheese was evaluated. Cows with different levels of SCC in their milk (<200.000 cells/mL; >200.000 to <400.000 cells/mL; >400.000 cells/mL to <750.000 cells/mL and >750.000 cells/mL) were selected. The animals had no antimicrobial treatment prior to or on milk sampling day. The mozzarella cheese quality was evaluated analyzing pH, acidity, moisture and protein content, fat, total solids and nonfat solids. The trial was replicated four times and the experimental design was analyzed through randomized blocks. The mozzarella cheese from milk with high SCC (>750.000 cells/mL) had lower protein content, higher moisture content and lower industrial yield, compared to cheese from milk with lower levels of SCC. High numbers of SCC impaired mozzarella cheese quality, which was reflected in its nutritional and microbiological composition. We observed an increase in water activity, an intrinsic and essential factor for microbial growth.(AU)

Aspectos clínicos e laboratoriais da mastite induzida por inoculação intramamária de Staphylococcus aureus em vacas e búfalas / Clinical and laboratory aspects of mastitis induced by intramammary inoculation of Staphylococcus aureus in cows and buffaloes

Vários aspectos relacionados à mastite bubalina precisam ser esclarecidos. Muitas condutas são adaptadas a essa espécie pelo conhecimento adquirido com a espécie bovina. Com este experimento, objetivou-se evidenciar particularidades da mastite em búfalas e vacas que tiveram uma glândula inoculada com 1,0 x 103 UFC de S. aureus. Os animais foram monitorados por cultura bacteriana do leite, California Mastitis Test (CMT), e escores para avaliação da severidade da mastite. Foram utilizados os seguintes critérios: temperatura retal, apetite, produção de leite (resposta sistêmica à inflamação), contagem de células somáticas (CCS), aparência/consistência da glândula e aparência da secreção láctea (resposta localizada à inflamação). Todos os animais desenvolveram mastite clínica superaguda. A bactéria foi recuperada de todas as glândulas desafiadas, sem diferença significativa no percentual de isolamento entre as espécies até o 11º dia pós-inoculação, porém com diferença (P<0,001) no 30º dia pós-inoculação. A CCS pelo método eletrônico e o CMT detectaram nas búfalas resposta mais intensa logo após a inoculação e diminuição mais rápida da contagem ao final do experimento, quando se comparou essa espécie com as vacas. Ambos os testes demonstraram correlação com a cultura bacteriana. Na avaliação da severidade da mastite, as médias do escore total, do escore da resposta local e do escore da resposta sistêmica foram mais elevadas na espécie bovina (P<0,05). Ao longo do período de observação, verificou-se uma capacidade superior das búfalas em recuperar o status sanitário adequado, chegando, ao final do experimento, com os parâmetros avaliados mais próximos dos fisiológicos.(AU)

Several aspects related to bubaline mastits need to be clarified. Many conducts are adapted to this species by the knowledge adquired with the bovine species. This experiment aimed to evidence particularities of mastits in buffaloes and cows submitted to one-gland inoculation with 1.0 x 103 CFU of S. aureus. The animals were monitored through bacterial culturing milk, California Mastitis Test (CMT) and scores to assess the severity of mastitis. The following criteria were used: rectal temperature, appetite, milk production (systemic response to inflammation), somatic cell count (SCC), appearance/consistency of the gland and appearance of the milk secretion (localized response to inflammation). All animals developed hyperacute clinical mastitis. The bacteria was recovered from all challenged glands, with no significant difference in the percentage of isolation between the species until day 11 after inoculation, but with a difference (p<0.001) on day 30 post inoculation. The SCC with the electronic method and CMT, detected in buffaloes a more intense response right after the inoculation and a faster decrease of counting by the end of the experiment, when compared to cows. In both tests correlation with the bacterial culture was detected. In assessing the severity of mastitis, the averages of total score, of the score of local response and the systemic response score were higher in the bovine species (P<0.05). Throughout the observation period, there was a higher capacity of buffaloes in reaching the appropriate sanitary status, coming to the end of the experiment with the parameters closer to the physiological.(AU)

Study of the microbiota causing "blown pack" spoilage of vacuum-packed beef / Estudo da microbiota envolvida na deterioração "blown pack" de cortes cárneos embalados a vácuo

"Blown pack" spoilage is characterized by abundant production of gas and off-odor leading to swelling of the packing of vacuum-packed chilled meat cuts. The aim of this study was to determine possible microorganisms involved in this spoilage by quantifying and characterizing the population of Enterobacteriaceae, quantifying lactic-acid bacteria, as well as researching Clostridium estertheticum and Clostridium gasigenes by PCR in meat proper for consumption and meat presenting "blown pack" spoilage. Fifty-four vacuum-packed meat cuts were analyzed, of which 27 were spoiled and 27 non-spoiled. Average enterobacteria population was 1.7x10° CFU/mL and 5.5x103 CFU/mL for spoiled and non-spoiled samples, respectively. Average lactic-acid bacteria population was 5.5x10 and 1.0x10 CFU/mL for spoiled and non-spoiled samples, respectively. The most prevalent enterobacteria species was Hafnia alvei. Meat showing "blown pack" spoilage had higher frequency of positive samples for Clostridium estertheticum. No statistically significant difference was observed in the population of Clostridium gasigenes between "blown pack" spoilage and non-spoiled meat. It was concluded that the most efficient method to control "blown pack" spoilage is to prevent meat contamination by fecal material.

A deterioração "blown pack" é caracterizada por abundante produção de gás e odor desagradável, induzindo à completa distensão da embalagem durante o processo de estocagem sob refrigeração de cortes cárneos embalados a vácuo. Assim, o objetivo deste trabalho foi o de determinar os possíveis microrganismos envolvidos nessa deterioração através da quantificação e caracterização das populações de Enterobacteriaceae e quantificação de bactérias ácido-lácticas, além da pesquisa de Clostridium estertheticum e Clostridium gasigenes, através da PCR, em carnes próprias para o consumo e em carnes que apresentaram a deterioração "blown pack". Foram analisadas 54 peças de carne embaladas a vácuo, sendo 27 com deterioração e 27 sem deterioração. As populações médias de enterobactérias foram de 1,7x10° UFC/mL para amostras deterioradas e de 5,5x10³ UFC/mL nas não deterioradas, de bactérias ácido-lácticas foram, respectivamente, de 5,5x108 e 1,0x10 UFC/mL. Dentre as enterobactérias, a espécie de maior prevalência foi Hafnia alvei. A maior frequência de amostras positivas para o Clostridium estertheticum foram aquelas apresentando a deterioração "blown pack". Não houve diferença estatística significativa para a presença do Clostridium gasigenes entre amostras com deterioração "blown pack" e carnes não deterioradas. Concluiu-se que a principal forma de controle desta deterioração é a prevenção da contaminação da carne por material fecal.

Ocorrência de galactorréia em égua: comparação entre as composições da secreção mamária galactorreica com o leite equino saudável / Galactorrhoea in mare: comparison between the composition of the galactorrhoeic secretion and the healthy mare milk

A presente comunicação relata a ocorrência de galactorréia em égua da raça Mangalarga Marchador com o objetivo de avaliar a composição e as características microbiológicas deste tipo de secreção em relação à secreção normalmente produzida pela glândula mamária. Para tanto, realizou-se ordenha total e as seguintes análises laboratoriais: CBT, CCS, proteína total; gordura; lactose; pH e crioscopia. A secreção mamária obtida durante este episódio de galactorréia apresentou baixos níveis de proteína, lactose e gordura e altos níveis de CCS, CBT e pH. Estas alterações apontam que a secreção galactorréica apresenta composição diferente do leite normal e pode estar relacionada à presença de mastite.

This short communication presents a case of galactorrhoea in one Mangalarga Marchador mare. In the aim to of evaluate the compositional and microbiolgic aspects of the produced secretion in the diseased mammary gland, complete milking was accomplished and the following analyses were realized: TBC, SCC, total protein, fat, lactose, pH and crioscopy. The secretion obtained had presented low levels of protein, lactose and fat and high levels of SCC, TBC and pH. These alterations showed that the composition of the secretion was different from one of normal milk and suggest the occurrence of mastitis in the presence of galactorrhoea.

Infecção experimental de embriões de frango de corte com Salmonella enterica sorovar Enteritidis fagotipo 4 / Experimental infection of broiler embryos with Salmonella enterica sorovar Enteritidis phagotype 4

Avaliou-se a infecção experimental por Salmonella Enteritidis fagotipo 4 (SEpt4) em embriões de frango de corte para averiguar a habilidade de penetração através da casca e o efeito da inoculação no albúmen, considerando-se a mortalidade, a eclodibilidade e a colonização intestinal dos pintos eclodidos. Foram realizados dois experimentos, distribuídos em quatro tratamentos (T) cada, com 200 e 194 ovos incubáveis das linhagens Ross e ISA Label, respectivamente. Utilizaram-se ovos não sanitizados e inoculados na casca com Salmonella Enteritidis (T1) ou com placebo (T2); ou inoculados no albúmen com Salmonella Enteritidis (T3) ou com placebo (T4). Imediatamente após a inoculação, os ovos foram incubados, e a mortalidade embrionária avaliada após 96, 432 e 528 horas. Salmonella Enteritidis inoculada na casca manteve-se viável na casca e nas membranas durante todo o período de incubação e migrou para o interior dos ovos, entretanto não afetou os parâmetros de incubação. O patógeno inoculado no albúmen determinou mortalidade embrionária tardia nas linhagens Ross, 17,0 por cento, e ISA Label, 13,0 por cento, e originou pintos com maior freqüência de colonização intestinal por Salmonella Enteritidis, 76,7 por cento e 26,7 por cento para Ross e ISA Label, respectivamente.(AU)

The experimental infection of Salmonella Enteritidis phagotype 4 (SEpt4) was evaluated in broilers embryos to verify the ability of penetration through eggshell and the effect of albumen inoculation considering embryo mortality, hatchability, and intestinal colonization of hatched chicks. Two trials were conducted using in four treatments each, totaling 200 and 194 fertile eggs of Ross and ISA Label lineages, respectively. Non-sanitized eggs were inoculated on the shell with Salmonella Enteritidis (Treatment 1) or placebo (Treatment 2); and eggs were inoculated in albumen with Salmonella Enteritidis (Treatment 3) or placebo (Treatment 4). Immediately after inoculation, the eggs were incubated and embryo mortality was evaluated after 96, 432, and 528 hours. The results showed that Salmonella Enteritidis inoculated on egg shell remained active there and in shell membranes during all incubation period and migrated to the interior of the eggs; however, it did not affect the incubation parameters. It was observed that Salmonella Enteritidis inoculated in albumen caused late embryo mortality in Ross (17.0 percent) and ISA Label (13.0 percent) lineages, and originated chicks with high frequency of intestinal colonization by Salmonella Enteritidis, being 76.7 percent and 26.7 percent for Ross and ISA Label, respectively.(AU)

Salmonella spp. em forros de caixa de transporte e órgãos de pintos de um dia / Salmonella spp. in paper pads of chick boxes and organs of one-day-old- chicks

Estudou-se a ocorrência de Salmonella spp. em forros de caixa de transporte e em órgãos de pintos de corte de um dia, por meio de cultura bacteriológica convencional. Foram avaliadas 378 amostras de 18 lotes pertencentes a três empresas integradoras de frangos de corte do Estado de Goiás. Verificou-se a ocorrência de Salmonella spp. em 55,6 por cento (10/18) dos lotes sendo 10 lotes positivos oriundos de caixa de transporte e um lote de órgãos de pinto de um dia. A freqüência de isolamento de Salmonella spp. nos forros de caixas foi de 11,1 por cento, e nos órgãos de pintos de corte de um dia, 3 por cento. Os resultados sugerem a transmissão vertical do agente. Foram isolados os sorovares Salmonella Enteritidis e Salmonella Heidelberg, o primeiro mais freqüente (92,3 por cento)(AU)

The occurrence of Salmonella spp. in paper pads of chick boxes and organs of one-day-old chicks was studied by conventional bacteriological technique. Eighteen broilers flocks belonged to three integrated broiler organizations in the state of Goiás were evaluated. The occurrence of Salmonella spp. was registered in 55.6 % (10/18) of the flocks, 10 flocks by analysis of paper pads of chick boxes and one flock by analysis of chick organs. The paper pads of chick boxes revealed 11.1% of Salmonella recovery, while the one-day-old chick organs, 3%. This result suggested Salmonella spp. transmission by vertical way. Salmonella Enteritidis and Salmonella Heidelberg were the isolated serovars and the first one was the most frequent (92.3%).(AU)

Microbiota anaeróbia isolada de bovinos com pododermatite

The objective of this study was to isolate and identify the anaerobic bacteria species in bovine with different degrees of pododermatitis. Sixty bovines were divided into four groups of 15 as follows: group I included healthy animals, used as control; group II with animals in the initial phase of the process; group III, with animals displaying interdigital skin hyperplasia and group IV with animals with footrot. Interdigital tissue fragments were collected and processed for isolation and identification of anaerobic agents. The bacteria species isolated were: Dichelobacter nodosus in groups II, III and IV and Fusobacterium necrophorum only in groups III and IV, with frequencies of 26.7%, 6.7%, and 20.0% for the former and 6.7% and 13.3% for the latter, respectively. In addition, Fusobacterium symbiosum was present in 40.0% of group I, 6.7% of group II, 13.3% of group III and 13.3% of group IV; Bacteroides sp. in 6.7% of groups I and IV; Bacteroides ruminatus in 33.3% of group I, 6.7% of group II, 33.3% of group III and 13.3% of group IV; Bacteroides oralis in 6.7% of group III, and Fusobacterium mortiferum in 6.7% of group IV.

O presente trabalho teve como objetivo isolar e identificar espécies bacterianas anaeróbias presentes nos pés de bovinos portadores de vários graus de pododermatite. Foram utilizados 60 bovinos, distribuídos em quatro grupos de 15. O grupo I foi constituído por animais saudáveis e serviu de controle; o grupo II, por bovinos na fase inicial do processo; o grupo III, por animais portadores de pododermatite interdigital vegetativa e o grupo IV, por bovinos portadores de pododermatite necrosante. Foram colhidos fragmentos de tecido interdigital para cultura e as principais espécies bacterianas isoladas foram: Dichelobacter nodosus nos grupos II, III e IV e Fusobacterium necrophorum nos grupos III e IV, com freqüências de 26,7%, 6,7%, 20,0%, 6,7% e de 13,3%, respectivamente. Encontraram-se também Fusobacterium symbiosum em 40,0% no gb>rupo I, 6,7% no grupo II, 13,3% no grupo III e 13,3% no grupo IV, Bacteroides sp. em 6,7% nos grupos I e IV, Bacteroides ruminatus em 33,3% no grupo I, 6,7% no grupo II, 33,3% no grupo III e 13,3% no grupo IV, Bacteroides oralis em 6,7% no grupo III e Fusobacterium mortiferum em 6,7% no grupo IV.

Influência da temperatura de armazenamento e do sistema de utilização do tanque de expansão sobre a qualidade microbiológica do leite cru / Influence of the temperature of storage and of the system of utilization of the tank of expansion about the microbiological quality of the raw milk

Objetivou-se com o presente estudo avaliar a influência da temperatura de armazenamento e do sistema de utilização do tanque de refrigeração sobre a qualidade microbiológica do leite cru. Foram analisadas 1.215 amostras quanto a contagem bacteriana total (CBT), através da metodologia de citometria de fluxo. Nas amostras abaixo de 4,0ºC , entre 4,1 e 7,0ºC e acima de 7,0ºC a CBT média foi 2.733.000 UFC / ml, 3.641.000 UFC / ml e 5.687.000 UFC / ml, respectivamente. A CBT média das amostras provenientes de tanques coletivos foi 5.536.000 UFC / ml e das colhidas em tanques individuais foi 2.604.000 UFC / ml, sendo significativamente diferente (p<0,05). Observou-se que 70,21 por cento das amostras analisadas apresentaram CBT abaixo de 1.000.000 de UFC / ml. A baixa qualidade microbiológica das amostras sugere predominantemente a ocorrência de falhas na higiene de ordenha.(AU)

The purpose of this survey was to verify the effects of temperature and system of bulk tank utilization (community or single) on the microbiological quality of raw milk. The total bacterial count (TBC) of 1,215 bulk tank raw milk samples was determined by flow cytometry. On the samples with temperature under 4.0°C, between 4.1°C and 7.0°C, and higher than 7.0°C the TBC was 2,733,000 CFU /ml, 3,641,000 CFU / ml and 5,687,000 CFU/ml, respectively. The average of TBC on the samples taken from community and single bulk tanks was respectively 5,536,000 CFU /ml and 2,604,000 CPU/ ml, showing significant difference, p<0.05. 70,21% of the samples presented TBC under 1,000,000 CPU/ ml. The high TBC may be occurred due to several failures on the milking procedures. (AU)