Pathology, microbiology, and molecular evaluation of tissues from equids serologically positive for Burkholderia mallei in Midwestern Brazil / Avaliação patológica, microbiológica e molecular em amostras de tecidos de equídeos sorologicamente positivos para Burkholderia mallei no Centro-Oeste do Brasil

Glanders is a disease caused by the bacterium Burkholderia mallei that primarily affects horses, mules and donkeys. The disease can cause lesions in the skin, lungs and several other organs. However, it often manifests as an asymptomatic disease. In Brazil, serological tests of high sensitivity and specificity are used to assist in the detection of antibodies against B. mallei and to contribute to the control of the disease. However, due to the mandatory euthanasia of seroreactive animals, equids with positive serology for B. mallei and asymptomatic generated great conflicts between breeders, veterinarians and diagnostic laboratories. This study clarifies the limitations of complementary diagnostic tests for detecting B. mallei. It describes the clinical, morphological and laboratory findings in 24 equines from different municipalities in the Mato Grosso State, Brazil, which reacted to the complement fixation test and were positive in the western blotting test for glanders. Data and tissue samples were collected from 24 horses for histological, microbiological and molecular analysis. In 23 horses, no clinical signs, morphological alterations, microbiological isolation, or molecular detection would characterize B. mallei infection. On the other hand, samples from an asymptomatic horse without lesional alterations showed sequence amplification compatible with B. mallei in the PCR. Considering that the infection by B. mallei is subject to the application of animal sanitary defense measures and that, by international requirement and national legislation, the serological results are tools that should support the sanitation procedures for the error of the bacteria in the Mato Grosso State, Brazil.

Mormo é uma enfermidade causada pela bactéria Burkholderia mallei que acomete primariamente cavalos, mulas e burros. A doença pode causar lesões na pele, pulmões e em diversos outros órgãos, entretanto frequentemente manifesta-se como uma enfermidade assintomática. No Brasil são utilizados testes sorológicos de elevada sensibilidade e especificidade para auxiliar na detecção de anticorpos contra B. mallei e contribuir para controle da doença. Porém, devido à obrigatoriedade da eutanásia de animais sororeagentes, os equídeos com sorologia positiva para B. mallei e assintomáticos geraram grandes embates entre criadores, médicos-veterinários e laboratórios de diagnóstico. Este trabalho esclarece as limitações dos testes diagnósticos complementares para detecção de B. mallei e descreve os achados clínicos, morfológicos e de exames laboratoriais em 24 equídeos, procedentes de diferentes municípios do estado de Mato Grosso, Brasil, que reagiram ao teste de fixação de complemento e foram positivos no teste de "western blotting" para mormo. Foram colhidos dados e amostras de tecidos de 24 equídeos para análise histológica, microbiológica e molecular. Em 23 equídeos não existiam sinais clínicos, alterações morfológicas, isolamento microbiológico ou detecção molecular que caracterizassem infecção por B. mallei. Por outro lado, amostras de um cavalo assintomático e sem alterações lesionais apresentaram amplificação de sequência compatível com B. mallei na PCR. Considerando que a infecção por B. mallei é passível da aplicação de medidas de defesa sanitária animal e que por exigência internacional e da legislação nacional, os resultados sorológicos são ferramentas que devem amparar os procedimentos de saneamento para erradicação da bactéria no estado de Mato Grosso, Brasil.

Granulomatous rhinitis by Neoconidiobolus lamprauges in a mule / Rinite granulomatosa por Neoconidiobolus lamprauges em uma mula

ABSTRACT: Conidiobolomycosis has a wide distribution, predominantly in humid tropical regions, affecting several species with significant mortality rates. The genus Conidiobolus is now divided into four genera: Capillidium, Conidiobolus, Microconidiobolus, and Neoconidiobolus. There are no confirmed reports of infection by these fungi in Equidae in Brazil. We present a rhinofacial rhinitis caused by Neoconidiobolus lamprauges in a mule from Rio de Janeiro, Brazil. The mule presented bilateral semi-occlusion of the nostrils, difficulty breathing, and weight loss. The histological examination of the nostril biopsied mass revealed multifocal necrotizing areas with nonstained images of fungal hyphae in the Splendore-Hoeppli reaction and surrounded by macrophages, eosinophils, neutrophils, and multinucleated giant cells. The Grocott methenamine silver staining revealed thin-walled, rarely septated, irregular branching hyphae, with a varying diameter of 12 μm (± 3.63 μm), and terminal ballooning dilations. The determining etiology of this rhinitis was based on the hyphae staining by immunohistochemistry and by amplifying the DNA fragment of N. lamprauges by polymerase chain reaction. Conidiobolomycosis should be included in the differential diagnosis of the causes of rhinitis in equids, mainly in tropical regions.

RESUMO: A conidiobolomicose apresenta ampla distribuição geográfica, com predominância em regiões tropicais úmidas, afeta várias espécies e apresenta taxa de mortalidade significativa. O gênero Conidiobolus está agora dividido em quatro gêneros: Capillidium, Conidiobolus, Microconidiobolus e Neoconidiobolus. Não há relatos confirmados de infecção por esses fungos em equídeos no Brasil. Relata-se o caso de uma mula com rinite rinofacial causada por Neoconidiobolus lamprauges no Rio de Janeiro, Brasil. A mula apresentava uma massa que semiocluía as narinas bilateralmente, dificuldade respiratória e emagrecimento. O exame histológico de biópsia da massa da narina revelou áreas de necrose multifocais com imagens negativas de hifas fúngicas em meio à reação de Splendore-Hoeppli, circundadas por macrófagos, eosinófilos, neutrófilos e células gigantes multinucleadas. O exame histoquímico metenamina prata de Grocott revelou hifas de parede fina, raramente septadas, com ramificação irregular, grau variável de paralelismo, e diâmetro médio de 12 μm (± 3,63) e dilatações balonosas terminais. O diagnóstico etiológico foi realizado pela associação da imuno-histoquímica e da amplificação do fragmento de DNA de N. lamprauges pela reação em cadeia da polimerase. A conidiobolomicose deve ser incluída no diagnóstico diferencial das causas de rinite em equídeos, principalmente em regiões tropicais.

Granulomatous rhinitis by Neoconidiobolus lamprauges in a mule / Rinite granulomatosa por Neoconidiobolus lamprauges em uma mula

Conidiobolomycosis has a wide distribution, predominantly in humid tropical regions, affecting several species with significant mortality rates. The genus Conidiobolus is now divided into four genera: Capillidium, Conidiobolus, Microconidiobolus, and Neoconidiobolus. There are no confirmed reports of infection by these fungi in Equidae in Brazil. We present a rhinofacial rhinitis caused by Neoconidiobolus lamprauges in a mule from Rio de Janeiro, Brazil. The mule presented bilateral semi-occlusion of the nostrils, difficulty breathing, and weight loss. The histological examination of the nostril biopsied mass revealed multifocal necrotizing areas with nonstained images of fungal hyphae in the Splendore-Hoeppli reaction and surrounded by macrophages, eosinophils, neutrophils, and multinucleated giant cells. The Grocott methenamine silver staining revealed thin-walled, rarely septated, irregular branching hyphae, with a varying diameter of 12 µm (± 3.63 µm), and terminal ballooning dilations. The determining etiology of this rhinitis was based on the hyphae staining by immunohistochemistry and by amplifying the DNA fragment of N. lamprauges by polymerase chain reaction. Conidiobolomycosis should be included in the differential diagnosis of the causes of rhinitis in equids, mainly in tropical regions.

A conidiobolomicose apresenta ampla distribuição geográfica, com predominância em regiões tropicais úmidas, afeta várias espécies e apresenta taxa de mortalidade significativa. O gênero Conidiobolus está agora dividido em quatro gêneros: Capillidium, Conidiobolus, Microconidiobolus e Neoconidiobolus. Não há relatos confirmados de infecção por esses fungos em equídeos no Brasil. Relata-se o caso de uma mula com rinite rinofacial causada por Neoconidiobolus lamprauges no Rio de Janeiro, Brasil. A mula apresentava uma massa que semiocluía as narinas bilateralmente, dificuldade respiratória e emagrecimento. O exame histológico de biópsia da massa da narina revelou áreas de necrose multifocais com imagens negativas de hifas fúngicas em meio à reação de Splendore-Hoeppli, circundadas por macrófagos, eosinófilos, neutrófilos e células gigantes multinucleadas. O exame histoquímico metenamina prata de Grocott revelou hifas de parede fina, raramente septadas, com ramificação irregular, grau variável de paralelismo, e diâmetro médio de 12 µm (± 3,63) e dilatações balonosas terminais. O diagnóstico etiológico foi realizado pela associação da imuno-histoquímica e da amplificação do fragmento de DNA de N. lamprauges pela reação em cadeia da polimerase. A conidiobolomicose deve ser incluída no diagnóstico diferencial das causas de rinite em equídeos, principalmente em regiões tropicais.

Bovine abortion due to Bacillus cereus in Midwest Brazil / Aborto bovino por Bacillus cereus no Centro-Oeste do Brasil

Bacillus cereus is a Gram-positive bacterium commonly reported in soils and plants that occupy various ecological habitats, and the main source of contamination for cattle is silage. This report described a case of fetal loss associated with B. cereus infection in a cow. An 8-month-old, Nelore female bovine fetus from a beef farm was submitted for necropsy. A gross examination revealed fibrinous pleuropneumonia and fibrin exudation on the liver surface. The morphological diagnosis was restricted to the lungs and liver. In the lungs there was fibrinosuppurative pleuropneumonia associated with numerous aggregates of rod-shaped bacteria. In the liver there was moderate focally extensive fibrinous peri hepatitis.The lungs, liver, thoracic, and abomasal fluid cultures yielded pure cultures of B. cereus, indicating that these bacteria should be recognized as a cause of bovine abortion in fetuses that macroscopically present fibrin in the abdominal and thoracic cavity.

Bacillus cereus é uma bactéria Gram-positiva, comumente encontrada em solos e plantas que ocupam diversos habitats ecológicos sendo a silagem a principal fonte de contaminação para bovinos. Este relato descreve um caso de perda fetal associada à infecção por B. cereus em uma vaca. Um feto bovino fêmea da raça Nelore, de oito meses de idade, procedente de uma fazenda de corte, foi submetido à necropsia. Ao exame macroscópico observou-se pleuropneumonia fibrinosa e exsudação de fibrina na superfície do fígado. Histologicamente, as lesões estavam restritas aos pulmões e fígado. Nos pulmões havia pleuropneumonia fibrinosupurativa associado a numerosos agregados de bactérias em forma de bastonete. No fígado haviaperi hepatitefibrinosa focalmente extensa moderada. As culturas de pulmão, fígado, líquido torácico e abomasal produziram cultura pura de B. cereus indicando que esta bactéria deve ser reconhecida como causa de aborto bovino em fetos que apresentem macroscopicamente fibrina nas cavidades abdominal e torácica.

Canine gastrointestinal pythiosis: a case report in Brazilian Pantanal from a diagnostic approach / Pitiose gastrointestinal canina: relato de caso no Pantanal brasileiro a partir de uma abordagem diagnóstica

Pythiosis is caused by an aquatic fungus-like organism (Pythium insidiosum). It is considered an important public health issue as it can affect both animals and humans. This paper reports a case of gastrointestinal pythiosis in a dog. The patient was hospitalized for four days, during which the animal received supportive and symptomatic treatment. But the applied treatment was unsuccessful and the dog's clinical condition worsened, culminating in death. Complementary imaging tests such as radiography and ultrasonography, as well as hematological tests, were performed during the hospitalization period. The definitive diagnosis was reached in the postmortem as macroscopic and microscopic characteristics suggested the presence of intestinal granuloma and accentuated multifocal suppurative necrotic enteritis. Additionally, the histological evaluation revealed morphological structures compatible with P. insidiosum. Also, the results of nested PCR performed showed partial amplification (105 bp) of the ITS1 region of the ribosomal gene of P. insidiosum.(AU)

A pitiose é causada por um organismo aquático semelhante a um fungo (Pythium insidiosum) e considerada um importante problema de saúde pública, pois pode afetar animais e humanos. Este artigo relata um caso de pitiose gastrointestinal em um cão. O paciente ficou internado por quatro dias, período em que o animal recebeu tratamento de suporte e sintomático. No entanto, o tratamento aplicado não teve sucesso e o quadro clínico do cão piorou, culminando com a morte. Exames de imagem complementares, como radiografia e ultrassonografia, bem como exames hematológicos, foram realizados durante o período de internação. O diagnóstico definitivo foi feito na autópsia, pois as características macroscópicas e microscópicas sugeriam a presença de granuloma intestinal e acentuada enterite necrótica multifocal supurativa. Além disso, a avaliação histológica revelou estruturas morfológicas compatíveis com P. insidiosum. Além disso, a nested PCR foi realizada e mostrou amplificação parcial (105 pb) da região ITS1 do gene ribossomal de P. insidiosum.(AU)

Nanotechnology in veterinary medicine: a review / Nanotecnologia em medicina veterinária: uma revisão

The purpose of this review was to address the applicability of nanotechnology in veterinary medicine, with an emphasis on research in Brazil from 2013 to 2020. Firstly, we introduced to the general aspects of applicability of nanotechnology in veterinary medicine, and lately we pointed the research involving nanoscience performed in Brazil, in the studied period. Nanotechnology is the field of science that has the capacity to organize matter in nanoscale structures (1 to 100 nm), enabling innovations in different areas including biotechnology, agriculture, disease diagnosis, food and clothing industry, electronics, and pharmacological therapies. In veterinary medicine, several studies are being carried out in the world, mainly in the areas that involve search of new treatment options and the development of immunotherapy, as well as in the diagnosis of diseases. In Brazil, it is clear that the use of nanotechnology in veterinary medicine is still incipient, but it can be considered a growing area. In addition, several points have to be reflected and researched, including some adverse effects and implications to validate the safe use of nanotechnology in veterinary medicine. Therefore, this review highlighted the nanotechnology as a promise alternative in the current context of Brazilian technological innovation involving animal health, as well as a possible diagnostic tool and highlighting its potential therapeutic use in disease control in veterinary medicine. Regarding future perspectives, we believed that greater investment in science and technology could contribute to the advancement and strengthening of nanotechnology in Brazil.

O objetivo desta revisão foi abordar a aplicabilidade da nanotecnologia na medicina veterinária, com ênfase nas pesquisas no Brasil de 2013 a 2020. Primeiramente, apresentam-se os aspectos gerais da aplicabilidade da nanotecnologia em medicina veterinária e, posteriormente, apontam-se as pesquisas envolvendo nanociência realizadas no Brasil, no período estudado. A nanotecnologia é o campo da ciência capaz de organizar a matéria em estruturas de nanoescala (1 a 100 nm), permitindo inovações em diferentes áreas, incluindo biotecnologia, agricultura, diagnóstico de doenças, indústria de alimentos e vestuário, eletrônica e terapias farmacológicas. Na medicina veterinária, diversos estudos estão sendo realizados no mundo, principalmente nas áreas que envolvem a busca de novas opções de tratamento e o desenvolvimento de imunoterapia, bem como no diagnóstico de doenças. No Brasil, está claro que o uso da nanotecnologia na medicina veterinária ainda é incipiente, mas pode ser considerada uma área em crescimento. Além disso, vários pontos devem ser refletidos e pesquisados, incluindo alguns efeitos adversos e implicações para validar o uso seguro da nanotecnologia na medicina veterinária. Nesta revisão, destaca-se a nanotecnologia como uma alternativa promissora no atual contexto de inovação tecnológica brasileira, envolvendo saúde animal, o diagnóstico e o potencial uso terapêutico no controle de doenças em medicina veterinária. Em relação às perspectivas futuras, acredita-se que maiores investimentos em ciência e tecnologia são fatores fundamentais a contribuir para o avanço e fortalecimento da nanotecnologia no Brasil.

Clinical and parasitological impact of short-term treatment using miltefosine and allopurinol monotherapy or combination therapy in canine visceral leishmaniasis / Impacto clínico e parasitológico do tratamento de curta duração com miltefosina e alopurinol em monoterapia ou terapia combinada na leishmaniose visceral canina

Canine visceral leishmaniasis is an endemic zoonosis in Brazil. Dogs are the main hosts in urban environments. The treatment has gained popularity since the Brazilian government authorized miltefosine for canine treatment. The aim of this study was to investigate the clinical and parasitological impact of short-term treatment with miltefosine and allopurinol, alone and in combination. We evaluated the ability of pharmacotherapy to reduce clinical signs of disease, antibody levels using the indirect fluorescence antibody test (IFAT) and skin parasite load via qPCR after 28 days of treatment. The therapeutic protocols promoted a significant decline in clinical signs and in the skin parasite load in dogs (p < 0.01). We observed a moderate correlation between the skin parasite load and the clinical score in all three treatment groups (r > 0.5) Antibody levels did not decrease in this short period. It was concluded that the treatment with allopurinol reduced the number of parasites in the skin of dogs with visceral leishmaniasis in the short term. However, its efficiency is potentiated when associated with miltefosine.(AU)

A leishmaniose visceral canina é uma zoonose endêmica no Brasil. Os cães são os principais hospedeiros em ambientes urbanos. O tratamento ganhou popularidade desde que o governo brasileiro autorizou a miltefosina para tratamento canino. O objetivo deste estudo foi investigar o impacto clínico e parasitológico do tratamento a curto prazo com miltefosina e alopurinol, isoladamente e/ou em combinação. Foi avaliada a capacidade da farmacoterapia em reduzir os sinais clínicos da doença e também os níveis de anticorpos, usando-se o teste de anticorpos de fluorescência indireta (RIFI) e a carga parasitária na pele, via qPCR, após 28 dias de tratamento. Os protocolos terapêuticos promoveram declínio significativo dos sinais clínicos e da carga parasitária na pele dos cães (p < 0,01). Foi observada uma correlação moderada entre a carga parasitária da pele e o escore clínico em todos os três grupos de tratamento (r > 0,5). Já os níveis de anticorpos não diminuíram nesse curto período. Concluiu-se que o tratamento com alopurinol, em curto prazo, reduziu a quantidade de parasitos na pele dos cães com leishmaniose visceral. No entanto, sua eficiência é potencializada quando associada a miltefosina.(AU)

Persistent SARS-CoV-2 antigen presence in multiple organs of a naturally infected cat from Brazil

Background: Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2) is the etiological agent of the disease coronavirus 2019 (COVID-19) in humans. SARS-CoV-2 has been identified in cats with or without clinical signs. Case presentation: We describe the pathological and molecular findings in a six-month-old asymptomatic cat with SARS-CoV-2 infection from Brazil, belonging to a human family with COVID-19 cases. The pool of nasopharynx and oropharynx swabs at day zero tested positive by RT-qPCR for SARS-CoV-2. No amplification resulted from molecular testing performed on days 7 and 14. The cat was hit by a car and died 43 days after the molecular diagnosis. Immunohistochemistry at post-mortem examination demonstrated nucleocapsid protein in samples from the lungs, kidneys, nasal conchae, trachea, intestine, brain and spleen. Conclusion: The present study has highlighted the possibility that viral antigens can be detected by immunohistochemistry in multiple organs six weeks after infection, although the same tissues tested negative by RT-PCR.(AU)

Persistent SARS-CoV-2 antigen presence in multiple organs of a naturally infected cat from Brazil

Abstract Background: Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2) is the etiological agent of the disease coronavirus 2019 (COVID-19) in humans. SARS-CoV-2 has been identified in cats with or without clinical signs. Case presentation: We describe the pathological and molecular findings in a six-month-old asymptomatic cat with SARS-CoV-2 infection from Brazil, belonging to a human family with COVID-19 cases. The pool of nasopharynx and oropharynx swabs at day zero tested positive by RT-qPCR for SARS-CoV-2. No amplification resulted from molecular testing performed on days 7 and 14. The cat was hit by a car and died 43 days after the molecular diagnosis. Immunohistochemistry at post-mortem examination demonstrated nucleocapsid protein in samples from the lungs, kidneys, nasal conchae, trachea, intestine, brain and spleen. Conclusion: The present study has highlighted the possibility that viral antigens can be detected by immunohistochemistry in multiple organs six weeks after infection, although the same tissues tested negative by RT-PCR.

Molecular detection of visceral leishmaniasis in dogs from Barão de Melgaço, Pantanal region of Mato Grosso, Brazil

ABSTRACT: The increasing expansion of visceral leishmaniasis (VL) in the Brazilian territory evidences the need for studies focused on the main reservoir of this parasite: the dog. This study aimed to conduct an epidemiological survey in the municipality of Barão de Melgaço, Pantanal region of the state of Mato Grosso (MT), Brazil. Conventional polymerase chain reaction (PCR) and qualitative SYBR®Green real-time PCR (qPCR) were used to diagnose canine VL (CVL) and characterize the factors associated with this infection. Of the 402 dogs that had blood samples collected, 31 presented the parasite DNA, representing a prevalence of 7.71% in the population studied. Positivity indices for PCR and qPCR were 3.48 (14/402) and 7.21% (29/402), respectively. Comparison of the results obtained by both techniques showed moderate agreement (Kappa = 0.5364). Of the independent variables analyzed, presence of clinical signs (p0.05) was the only one associated with CVL. Based on this study, we conclude that VL is a circulating disease, with relatively low prevalence, in dogs of Barão de Melgaço/MT, and that the presence of clinical signs is the only variable associated with canine infection.

RESUMO: A crescente expansão da leishmaniose visceral (LV) no território brasileiro evidencia a necessidade de estudos voltados ao principal reservatório doméstico do parasito: o cão. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi realizar um inquérito epidemiológico no município de Barão de Melgaço, região do Pantanal Mato-grossense, utilizando as técnicas de reação em cadeia pela polimerase convencional (PCR) e teste qualitativo SYBR®Green real-time PCR (qPCR) para o diagnóstico da LV canina (LVC), além de caracterizar os fatores associados a infecção. Do total de 402 cães que tiveram amostras sanguíneas coletadas, 31 apresentaram o DNA do parasito, perfazendo uma prevalência de 7,71% na população estudada. Os índices de positividade para a PCR e qPCR foram de 3,48% (14/402) e 7,21% (29/402), respectivamente. A comparação dos resultados obtidos por ambas técnicas apresentou moderada concordância (Kappa = 0,5364). Das variáveis independentes analisadas, a presença de sinais clínicos (p0,05) foi a única associada a ocorrência de LVC. Com base neste estudo, concluímos que a LV está circulando, com prevalência relativamente baixa, em cães de Barão de Melgaço/MT, sendo a presença de sinais clínicos a única variável associada à infecção canina.

Molecular detection of visceral leishmaniasis in dogs from Barão de Melgaço, Pantanal region of Mato Grosso, Brazil / Detecção molecular de leishmaniose visceral em cães do município de Barão de Melgaço, Pantanal Mato-Grossense, Brasil

The increasing expansion of visceral leishmaniasis (VL) in the Brazilian territory evidences the need for studies focused on the main reservoir of this parasite: the dog. This study aimed to conduct an epidemiological survey in the municipality of Barão de Melgaço, Pantanal region of the state of Mato Grosso (MT), Brazil. Conventional polymerase chain reaction (PCR) and qualitative SYBR®Green real-time PCR (qPCR) were used to diagnose canine VL (CVL) and characterize the factors associated with this infection. Of the 402 dogs that had blood samples collected, 31 presented the parasite DNA, representing a prevalence of 7.71% in the population studied. Positivity indices for PCR and qPCR were 3.48 (14/402) and 7.21% (29/402), respectively. Comparison of the results obtained by both techniques showed moderate agreement (Kappa = 0.5364). Of the independent variables analyzed, presence of clinical signs (p≤0.05) was the only one associated with CVL. Based on this study, we conclude that VL is a circulating disease, with relatively low prevalence, in dogs of Barão de Melgaço/MT, and that the presence of clinical signs is the only variable associated with canine infection.(AU)

A crescente expansão da leishmaniose visceral (LV) no território brasileiro evidencia a necessidade de estudos voltados ao principal reservatório doméstico do parasito: o cão. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi realizar um inquérito epidemiológico no município de Barão de Melgaço, região do Pantanal Mato-grossense, utilizando as técnicas de reação em cadeia pela polimerase convencional (PCR) e teste qualitativo SYBR®Green real-time PCR (qPCR) para o diagnóstico da LV canina (LVC), além de caracterizar os fatores associados a infecção. Do total de 402 cães que tiveram amostras sanguíneas coletadas, 31 apresentaram o DNA do parasito, perfazendo uma prevalência de 7,71% na população estudada. Os índices de positividade para a PCR e qPCR foram de 3,48% (14/402) e 7,21% (29/402), respectivamente. A comparação dos resultados obtidos por ambas técnicas apresentou moderada concordância (Kappa = 0,5364). Das variáveis independentes analisadas, a presença de sinais clínicos (p≤0,05) foi a única associada a ocorrência de LVC. Com base neste estudo, concluímos que a LV está circulando, com prevalência relativamente baixa, em cães de Barão de Melgaço/MT, sendo a presença de sinais clínicos a única variável associada à infecção canina.(AU)

Molecular detection of visceral leishmaniasis in dogs from Barão de Melgaço, Pantanal region of Mato Grosso, Brazil / Detecção molecular de leishmaniose visceral em cães do município de Barão de Melgaço, Pantanal Mato-Grossense, Brasil

The increasing expansion of visceral leishmaniasis (VL) in the Brazilian territory evidences the need for studies focused on the main reservoir of this parasite: the dog. This study aimed to conduct an epidemiological survey in the municipality of Barão de Melgaço, Pantanal region of the state of Mato Grosso (MT), Brazil. Conventional polymerase chain reaction (PCR) and qualitative SYBR®Green real-time PCR (qPCR) were used to diagnose canine VL (CVL) and characterize the factors associated with this infection. Of the 402 dogs that had blood samples collected, 31 presented the parasite DNA, representing a prevalence of 7.71% in the population studied. Positivity indices for PCR and qPCR were 3.48 (14/402) and 7.21% (29/402), respectively. Comparison of the results obtained by both techniques showed moderate agreement (Kappa = 0.5364). Of the independent variables analyzed, presence of clinical signs (p≤0.05) was the only one associated with CVL. Based on this study, we conclude that VL is a circulating disease, with relatively low prevalence, in dogs of Barão de Melgaço/MT, and that the presence of clinical signs is the only variable associated with canine infection.(AU)

A crescente expansão da leishmaniose visceral (LV) no território brasileiro evidencia a necessidade de estudos voltados ao principal reservatório doméstico do parasito: o cão. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi realizar um inquérito epidemiológico no município de Barão de Melgaço, região do Pantanal Mato-grossense, utilizando as técnicas de reação em cadeia pela polimerase convencional (PCR) e teste qualitativo SYBR®Green real-time PCR (qPCR) para o diagnóstico da LV canina (LVC), além de caracterizar os fatores associados a infecção. Do total de 402 cães que tiveram amostras sanguíneas coletadas, 31 apresentaram o DNA do parasito, perfazendo uma prevalência de 7,71% na população estudada. Os índices de positividade para a PCR e qPCR foram de 3,48% (14/402) e 7,21% (29/402), respectivamente. A comparação dos resultados obtidos por ambas técnicas apresentou moderada concordância (Kappa = 0,5364). Das variáveis independentes analisadas, a presença de sinais clínicos (p≤0,05) foi a única associada a ocorrência de LVC. Com base neste estudo, concluímos que a LV está circulando, com prevalência relativamente baixa, em cães de Barão de Melgaço/MT, sendo a presença de sinais clínicos a única variável associada à infecção canina.(AU)

Conidiobolomycosis in goats

ABSTRACT: The present article presents cases of conidiobolomycosis in adult goats with clinical signs characterized by serous nasal discharge, dyspnea, apathy, and weight loss. Two goats were necropsied. Necropsy displayed increased volume on the sagittal section of the head and an ulcerated surface containing a yellow friable mass with irregular and granular consistency in the nasal septum and in the ventral nasal turbinate. One goat also presented lesions on the ears skin and the right pelvic limb. Microscopically, lesions were characterized by multifocal granulomas with a central necrotic area containing non-stained fungal hyphae images surrounded by a granulomatous infiltrate. Samples of the lesions examined by immunohistochemistry and polymerase chain reaction were positive for Conidiobolus lamprauges. This is the first report of conidiobolomycosis in goats, and the disease should be considered in the differential diagnoses for rhinitis and dermatitis in goats.

RESUMO: O presente artigo apresenta casos de conidiobolomicose em cabras adultas com sinais clínicos caracterizados por secreção nasal serosa, dispneia, apatia e perda de peso. Dois caprinos foram necropsiados. Na necropsia, em corte sagital da cabeça, foi observado aumento de volume e superfície ulcerada contendo massa amarela e friável com consistência irregular e granular no septo nasal e conchas nasais ventrais. Uma cabra apresentou também lesões na pele da orelha e no membro pélvico direito. Microscopicamente, as lesões foram caracterizadas por granulomas multifocais com área central de necrose, contendo imagens de hifas fúngicas não coradas, circundadas por infiltrado inflamatório granulomatoso. Amostras das lesões submetidas à imuno-histoquímica e reação em cadeia da polimerase foram positivas para Conidiobolus lamprauges. Este é o primeiro registro de conidiobolomicose em caprinos e deve ser considerado no diagnóstico diferencial de rinite e dermatite em caprinos.

Conidiobolomycosis in goats / Conidiobolomicose em caprinos

The present article presents cases of conidiobolomycosis in adult goats with clinical signs characterized by serous nasal discharge, dyspnea, apathy, and weight loss. Two goats were necropsied. Necropsy displayed increased volume on the sagittal section of the head and an ulcerated surface containing a yellow friable mass with irregular and granular consistency in the nasal septum and in the ventral nasal turbinate. One goat also presented lesions on the ear's skin and the right pelvic limb. Microscopically, lesions were characterized by multifocal granulomas with a central necrotic area containing non-stained fungal hyphae images surrounded by a granulomatous infiltrate. Samples of the lesions examined by immunohistochemistry and polymerase chain reaction were positive for Conidiobolus lamprauges. This is the first report of conidiobolomycosis in goats, and the disease should be considered in the differential diagnoses for rhinitis and dermatitis in goats.(AU)

O presente artigo apresenta casos de conidiobolomicose em cabras adultas com sinais clínicos caracterizados por secreção nasal serosa, dispneia, apatia e perda de peso. Dois caprinos foram necropsiados. Na necropsia, em corte sagital da cabeça, foi observado aumento de volume e superfície ulcerada contendo massa amarela e friável com consistência irregular e granular no septo nasal e conchas nasais ventrais. Uma cabra apresentou também lesões na pele da orelha e no membro pélvico direito. Microscopicamente, as lesões foram caracterizadas por granulomas multifocais com área central de necrose, contendo imagens de hifas fúngicas não coradas, circundadas por infiltrado inflamatório granulomatoso. Amostras das lesões submetidas à imuno-histoquímica e reação em cadeia da polimerase foram positivas para Conidiobolus lamprauges. Este é o primeiro registro de conidiobolomicose em caprinos e deve ser considerado no diagnóstico diferencial de rinite e dermatite em caprinos.(AU)

Presença da mutação do gene BRCA1 em cadelas com tumores mamários malignos / Presence of BRCA1 gene mutation in bitches with malignant mammary tumors

Mammary tumors (MTs) in bitches are similar to breast cancers in women. Thus, they can be used as a model for human breast cancer and findings can be extrapolated for use in human medicine. BRCA1 is a tumor suppressor gene. When the gene has a mutation, it cannot repair damaged DNA, which causes genetic instability and tumorigenesis. Therefore, we aimed to study the frequency of single nucleotide polymorphisms (SNPs) in the BRCA1 gene that are associated with distinct histological types of malignant MT in bitches. The study population consisted of 91 bitches, including a control group of 6 animals with healthy mammary glands and 85 animals with MTs. All animals underwent a presurgery evaluation consisting of a questionnaire administered to the person responsible for the animal, a physical examination, collection of peripheral blood for hematological and serum biochemistry evaluations, an electrocardiogram, and a preanesthesia evaluation. In addition, distant metastasis was studied via chest radiography and abdominal ultrasound. After evaluations were complete, the animals that could undergo surgery were administered general anesthesia and underwent a mastectomy or mammary gland sample collection. Histopathological examination and molecular analysis were performed to identify mutations in the BRCA1 gene. Histopathological examinations found 10 different types of malignant tumors in 36 sick animals. Tumor samples plus samples from the 6 control animals were subjected to DNA extraction, polymerase chain reaction (PCR) analysis, and genetic sequencing. The tumor with the highest incidence (33.33%) was a complex carcinoma, followed by carcinoma in mixed tumor (13.88), tubular carcinoma (13.88) and carcinosarcoma (13.88). Molecular analysis revealed 3 different SNP points in 5 samples (4006G>A, 3619A>G, and 3761C>T). The allelic variant 4006G>A (1/36) resulted in the alteration of the amino acid valine by isoleucine (V1336 I). The mutation 3619A>G (2/36) inserted the amino acid alanine instead of threonine (T1207 A). The mutation 3761C>T (2/36) led to the alteration of the amino acid serine by phenylalanine (S1254 F), a mutation for which there are no published reports. The histological types that showed BRCA1 mutations were complex carcinoma (1/5), carcinoma in mixed tumor (1/5), papillary carcinoma (1/5) and tubular carcinoma (2/5). Software analysis identified the new SNP (nucleotide 3761) in BRCA1 and 2 point mutations in nucleotides 4006 and 3619 and responsible for genetic instability. The development of breast cancer is caused by many endogenous and exogenous factors. The results of our study show that these factors have a greater presence in female, mixed breed, uncastrated, and older dogs, confirming the data in the veterinary literature. In the present study, we found different histological types of malignant breast tumors with mutations in the BRCA1 gene, as other authors have reported. However, we also found the mutation 3761C>T, which, to the best of our knowledge, has not been reported in the literature. This shows the need for studies in veterinary medicine that assess mutations in the BRCA1 gene and the most common histological types. In conclusion, SNPs in the BRCA1 gene cause genetic instability, resulting in additional mutations that lead to the development of breast tumors. They are point mutations that affect transcription, resulting in truncated proteins. These proteins may have a loss of function, leading to carcinogenesis.(AU)

Conidiobolomycosis in goats / Conidiobolomicose em caprinos

The present article presents cases of conidiobolomycosis in adult goats with clinical signs characterized by serous nasal discharge, dyspnea, apathy, and weight loss. Two goats were necropsied. Necropsy displayed increased volume on the sagittal section of the head and an ulcerated surface containing a yellow friable mass with irregular and granular consistency in the nasal septum and in the ventral nasal turbinate. One goat also presented lesions on the ear's skin and the right pelvic limb. Microscopically, lesions were characterized by multifocal granulomas with a central necrotic area containing non-stained fungal hyphae images surrounded by a granulomatous infiltrate. Samples of the lesions examined by immunohistochemistry and polymerase chain reaction were positive for Conidiobolus lamprauges. This is the first report of conidiobolomycosis in goats, and the disease should be considered in the differential diagnoses for rhinitis and dermatitis in goats.(AU)

O presente artigo apresenta casos de conidiobolomicose em cabras adultas com sinais clínicos caracterizados por secreção nasal serosa, dispneia, apatia e perda de peso. Dois caprinos foram necropsiados. Na necropsia, em corte sagital da cabeça, foi observado aumento de volume e superfície ulcerada contendo massa amarela e friável com consistência irregular e granular no septo nasal e conchas nasais ventrais. Uma cabra apresentou também lesões na pele da orelha e no membro pélvico direito. Microscopicamente, as lesões foram caracterizadas por granulomas multifocais com área central de necrose, contendo imagens de hifas fúngicas não coradas, circundadas por infiltrado inflamatório granulomatoso. Amostras das lesões submetidas à imuno-histoquímica e reação em cadeia da polimerase foram positivas para Conidiobolus lamprauges. Este é o primeiro registro de conidiobolomicose em caprinos e deve ser considerado no diagnóstico diferencial de rinite e dermatite em caprinos.(AU)

Post mortem protozoan hemoparasites detection in wild mammals from Mato Grosso state, Midwestern Brazil / Detecção post mortem de hemoparasitas protozoários em mamíferos selvagens do estado de Mato Grosso, Centro-Oeste do Brasil

Abstract To a better insight into the epidemiology and genetic diversity of protozoan hemoparasites infections in wild mammals, this study aimed to the post mortem detection of DNA from species of the order Piroplasmida (Babesia sp., Cytauxzoon sp., and Theileria sp.) and suborder Adelorina (Hepatozoon sp.) using polymerase chain reaction based on the 18S rRNA gene followed by genetic sequencing of blood and spleen samples collected from carcasses of 164 free-ranging and captive wild mammals from Mato Grosso state. Among them, one Leopardus pardalis, three Panthera onca, two Puma concolor were positive for Cytauxzoon sp., and six Tapirus terrestris tested positive for Piroplasmida, while one L. pardalis was positive for Hepatozoon sp. Furthermore, an uncharacterized piroplasmid genetically related to Theileria sp. previously detected in cats from Brazil was described in lowland tapirs. Despite the controversy regarding the epidemiological threat of these protozoa, the detection of these tick-borne agents in wild free-living and captive mammals, even when asymptomatic, demonstrates the importance of monitoring, particularly in hotspots such as the state of Mato Grosso, to verify the circulation and genetic diversity, to anticipate the possible emergence of diseases, and even their consequences to other animals as well as humans.

Resumo Para uma melhor compreensão da epidemiologia e diversidade genética das infecções por hemoprotozoários em mamíferos selvagens, este estudo teve como objetivo a detecção post mortem de DNA de espécies da ordem Piroplasmida (Babesia sp., Cytauxzoon sp. e Theileria sp.) e subordem Adelorina (Hepatozoon sp.), utilizando-se a reação em cadeia pela polimerase, baseada no gene 18S rRNA, seguido de sequenciamento genético de amostras de sangue e baço, coletadas de 164 carcaças de mamíferos selvagens de vida livre e cativos do estado de Mato Grosso. Entre eles, um Leopardus pardalis, três Panthera onca, dois Puma concolor foram positivos para Cytauxzoon sp., e seis Tapirus terrestris testaram positivos para Piroplasmida, enquanto um L. pardalis foi positivo para Hepatozoon sp. Além disso, foi descrito em antas, um piroplasmídeo não caracterizado geneticamente, relacionado à Theileria sp., previamente detectado em gatos do Brasil. Apesar da controvérsia quanto à ameaça epidemiológica desses protozoários, a detecção desses agentes em mamíferos silvestres e cativos, mesmo quando assintomáticos, demonstra a importância do monitoramento, principalmente em hotspots, como no estado de Mato Grosso, para verificar a circulação e a diversidade genética, a fim de antecipar o possível surgimento de doenças e, até mesmo, suas consequências para outros animais, bem como os humanos.

Granulomatous pneumonia due to pythiosis in captive South American coatis (Nasua nasua) / Pneumonia granulomatosa decorrente de pitiose em quatis sul-americanos (Nasua nasua) de cativeiro

Pythiosis is an emerging infectious disease affecting captive and free-ranging wild animals. We report granulomatous pneumonia due to Pythium insidiosum in two South American coatis (Nasua nasua), who were found dead without any clinical records. Severe granulomatous pneumonia associated with pleural effusion was revealed in the necropsy. Microscopically, variably sized granulomas and pyogranulomas presented negative hyphae profiles at the periphery of their necrotic cores. Grocott methenamine silver stain highlighted these structures, and immunostain (anti- P. insidiosum) was strongly positive. Molecular analysis by polymerase chain reaction amplified P. insidiosum specific DNA. These findings characterized P. insidiosum as a cause of granulomatous pneumonia in coatis and proved that pythiosis needs to be considered in the differential diagnosis of respiratory diseases affecting this species in endemic areas.(AU)

A pitiose é uma doença infecciosa emergente que afeta animais silvestres de cativeiro e em vida livre. Reportamos dois casos de pneumonia granulomatosa decorrentes da infecção por Pythium Insidiosum em quatis sul-americanos (Nasua nasua), que foram encontrados mortos sem apresentar nenhum quadro clínico prévio. Pneumonia granulomatosa severa associada a efusão pleural foi observada durante a necropsia. Na microscopia, foram observados múltiplos granulomas e piogranulomas de tamanhos variados que continham imagens negativas de hifas na periferia de seus centros necróticos. A coloração de metenamina de prata (Grocott) evidenciou estas estruturas, e a imunomarcação (anti-P. insidiosum) foi fortemente positiva. A análise molecular pela reação de polimerase em cadeia amplificou o DNA específico do P. insidiousum. Estes achados caracterizaram o P. insidiosum como a causa da pneumonia granulomatosa nos quatis e provou que a pitiose deve ser considerada um diagnostico diferencial para outras doenças respiratórias que afetam esta espécie.(AU)

Granulomatous pneumonia due to pythiosis in captive South American coatis (Nasua nasua) / Pneumonia granulomatosa decorrente de pitiose em quatis sul-americanos (Nasua nasua) de cativeiro

Pythiosis is an emerging infectious disease affecting captive and free-ranging wild animals. We report granulomatous pneumonia due to Pythium insidiosum in two South American coatis (Nasua nasua), who were found dead without any clinical records. Severe granulomatous pneumonia associated with pleural effusion was revealed in the necropsy. Microscopically, variably sized granulomas and pyogranulomas presented negative hyphae profiles at the periphery of their necrotic cores. Grocott methenamine silver stain highlighted these structures, and immunostain (anti- P. insidiosum) was strongly positive. Molecular analysis by polymerase chain reaction amplified P. insidiosum specific DNA. These findings characterized P. insidiosum as a cause of granulomatous pneumonia in coatis and proved that pythiosis needs to be considered in the differential diagnosis of respiratory diseases affecting this species in endemic areas.(AU)

A pitiose é uma doença infecciosa emergente que afeta animais silvestres de cativeiro e em vida livre. Reportamos dois casos de pneumonia granulomatosa decorrentes da infecção por Pythium Insidiosum em quatis sul-americanos (Nasua nasua), que foram encontrados mortos sem apresentar nenhum quadro clínico prévio. Pneumonia granulomatosa severa associada a efusão pleural foi observada durante a necropsia. Na microscopia, foram observados múltiplos granulomas e piogranulomas de tamanhos variados que continham imagens negativas de hifas na periferia de seus centros necróticos. A coloração de metenamina de prata (Grocott) evidenciou estas estruturas, e a imunomarcação (anti-P. insidiosum) foi fortemente positiva. A análise molecular pela reação de polimerase em cadeia amplificou o DNA específico do P. insidiousum. Estes achados caracterizaram o P. insidiosum como a causa da pneumonia granulomatosa nos quatis e provou que a pitiose deve ser considerada um diagnostico diferencial para outras doenças respiratórias que afetam esta espécie.(AU)

Vancomycin susceptibility profiles of Staphylococcus spp. isolates from domestic and wild animals / Perfil de suscetibilidade à Vancomicina de isolados de Staphylococcus spp. de animais domésticos e silvestres

Staphylococcus spp. are bacteria involved in human and animal infections. They are resistant to antimicrobials and have become a major public health concern. In recent years, there has been a significant increase in methicillin-resistant Staphylococcus strains and vancomycin is the drug of choice for the treatment of such isolates. However, the minimum inhibitory concentration (MIC) of vancomycin necessary to combat this microorganism has been showing an increase. The aim of the present study was to determine the susceptibility profile of the Staphylococcus spp. of domestic and wild animals to vancomycin, using the microdilution in broth and E-test® techniques, as well as comparing the results of both tests. Of the 50 isolates tested, 47 (94 %) were sensitive to vancomycin in the microdilution and 43 (86 %) were sensitive to vancomycin in the E-test®. Seven (14 %) isolates had an intermediate result showing a risk to public health since the detection of these isolates may precede the occurrence of isolates resistant to vancomycin. In addition, the mecA gene was detected in 78 % of the tested samples. Six of the seven isolates with intermediate resistance to vancomycin were carriers of the mecA gene, showing that these isolates had a potential risk of becoming resistant. Thus, control measures must be taken to prevent the spread of these isolates with intermediate resistance and preserve the effectiveness of this antimicrobial for the treatment of infections caused by multiresistant Staphylococcus spp.(AU)

Staphylococcus spp. são bactérias envolvidas em infecções de humanos e animais, resistentes a antimicrobianos e tem se tornado uma grande preocupação em saúde pública. Nos últimos anos houve um aumento significativo de Staphylococcus resistentes à meticilina e a vancomicina é a droga de escolha para o tratamento desses isolados, porém vem apresentando elevação nos valores de Concentração Inibitória Mínima (CIM) necessários para combater este microrganismo. O objetivo do presente trabalho foi determinar o perfil de suscetibilidade à vancomicina para isolados de Staphylococcus spp. de animais domésticos e silvestres pelas técnicas de Microdiluição em caldo e E-test®, bem como comparar os resultados de ambos os testes. Dos 50 isolados testados 47 (94%) foram sensíveis à vancomicina na Microdiluição e 43 (86%) foram sensíveis à vancomicina no E-test®. Sete (14%) isolados tiveram resultado intermediário demonstrando um risco à saúde pública visto que a detecção destes isolados pode preceder a ocorrência de isolados resistentes à vancomicina. Ademais o gene mecA foi detectado em 78% das amostras testadas, sendo que dos sete isolados com resistência intermediária à vancomicina, seis eram portadores do gene mecA, evidenciando que esses isolados possuem potencial risco de se tornarem resistentes. Dessa forma medidas de controle devem ser tomadas para evitar a propagação destes isolados com resistência intermediária e preservar a eficácia deste antimicrobiano para o tratamento de infecções causadas por Staphylococcus multirresitentes.(AU)