Ochratoxigenic fungi associated with green coffee beans (Coffea arabica L. ) in conventional and organic cultivation in Brazil.

The genera Aspergillus comprises species that produce mycotoxins such as aflatoxins, ochratoxins and patulin. These are cosmopolitan species, natural contaminants of agricultural products. In coffee grains, the most important Aspergillus species in terms of the risk of presenting mycotoxins belong to the genera Aspergillus Section Circumdati and Section Nigri. The purpose of this study was to assess the occurrence of isolated ochratoxigenic fungi of coffee grains from organic and conventional cultivation from the South of Minas Gerais, Brazil, as well as to evaluate which farming system presents higher contamination risk by ochratoxin A (OTA) produced by fungi. Thirty samples of coffee grains (Coffea arabica L.) were analysed, being 20 of them of conventional coffee grains and 10 of them organic. The microbiological analysis was done with the Direct Plating Technique in a Dichloran Rose Bengal Chloramphenicol Agar (DRBC) media. The identification was done based on the macro and micro morphological characteristics and on the toxigenic potential with the Plug Agar technique. From the 30 samples analysed, 480 filamentous fungi of the genera Aspergillus of the Circumdati and Nigri Sections were isolated. The ochratoxigenic species identified were: Aspergillus auricoumus, A. ochraceus, A. ostianus, A. niger and A. niger Aggregate. The most frequent species which produces ochratoxin A among the isolated ones was A. ochraceus, corresponding to 89.55%. There was no significant difference regarding the presence of ochratoxigenic A. ochreceus between the conventional and organic cultivation systems, which suggests that the contamination risk is similar for both cultivation systems.(AU)

Occurrence of aflatoxin B1 in natural products

The media claims for the consumption of natural resource-based food have gradually increased in both developing and developed countries. The interest in the safety of these products is partially due to the possible presence of toxigenic fungi acting as mycotoxin producers, such as aflatoxins produced during the secondary metabolism of Aspergillus flavus, A. parasiticus and A. nomius. Aflatoxins, mainly aflatoxin B1, are directly associated with liver cancer in human beings. This paper is aimed at evaluating the presence of aflatoxin B1 in a few vegetable drugs, dried plant extracts and industrialized products traded in 2010 in the city of Belo Horizonte, State of Minas Gerais, Brazil. The method used for the quantification of aflatoxin B1 was based on extraction through acetone:water (85:15), immunoaffinity column purification followed by separation and detection in high efficiency liquid chromatography. Under the conditions of analysis, the Limits of Detection and Quantification were 0.6 µg kg-1 and 1.0 µg kg-1respectively. The complete sets of analyses were carried out in duplicate. Aflatoxin B1 was noticed in a single sample (< 1.0 µg kg-1). The results revealed low aflatoxin B1contamination in the products under analysis. However, it is required to establish a broad monitoring program in order to obtain additional data and check up on the actual extension of contamination.(AU)

Avaliação da qualidade de café cru tratado por radiação gama / Evaluation of quality of raw coffee treated by gamma radiation

O tratamento por radiação gama é uma tecnologia empregada para descontaminação microbiológica dealimentos, promovendo seu consumo seguro sem comprometimento da qualidade. Neste trabalho, amostras de café cru foram irradiadas em doses que variaram de 2 a 10 kGy. Foram investigadas possíveis alterações nos teores de cafeína e ácidos clorogênicos, compostos voláteis e ácidos graxos. Os resultados mostraram que o tratamento por irradiação gama manteve a integridade do produto em relação aos seus principais componentes responsáveis pela formação do sabor amargo do café como bebida. (AU)

Treatment by gamma radiation is a technology used for microbiological decontamination of food, romoting their safe consumption without compromising quality. 1n this work, samples of raw coffee were irradiated at doses ranging from 2 to 10 kGy. Potential changes in the levels of caffeine and chlorogenic acid, volatile compounds and fatty acids were investigated after coffee irradiation processes. The results showed that gamma irradiation treatment maintained the integrity of coffee concerning main components responsible for the bitter taste of coffee as a beverage. (AU)

Gamma-irradiation effect on fumonisin B1 inactivation in corn flour and on aflatoxin M1 in fluid and powdered milk / Influência da irradiação gama na destruição de fumonisina B1 em farinha de milho e de aflatoxina M1 em leite fluido e em pó

Fumonisin B1 is a mycotoxin produced by Fusarium verticillioides and Fusarium proliferatum, and it is found chiefly in corn and corn-based products. Since its discovery fumonisin B1 has been associated with diseases in animals, such as leukoencephalomalacia in horses, and pulmonary edema in swine. On humans, the ingestion of foods with fumonisin B1 is associated with esophageal cancer. Aflatoxin M1 is the principal hydroxylated metabolite occurring in milk from animals which have consumed aflatoxin B1-contaminated feeds. It is also present in milk from nursing mothers who consumed foodstuffs with aflatoxin B1. In this study the effect of gamma-irradiation (60Co) was verified, in doses ranged from 0 to 20 kGy, in order to inactivate fumonisin B1 in corn flour and aflatoxin M1 in fluid and powdered milk. Fumonisin B1 was extracted from the samples with methanol:water (3:1). The extract was purified through immunoaffinity column followed by separation and quantification by means of high-performance liquid chromatography (HPLC) with o-phthaldialdehyde (OPA). For determining aflatoxin M1 the purification was done through immunoaffinity column followed by separation and quantification by means of HPLC with fluorescence detector. Gamma irradiation (60Co) at doses from 3 to 20 kGy reduced the fumonisin B1 content in a range of 11.2 % to 55.5 %. Gamma irradiation (60Co) at 20 kGy dose r

Fumonisina B1 é a micotoxina produzida por Fusarium verticillioides e Fusarium proliferatum e é encontrada principalmente em milho e produtos a base de milho. Desde sua descoberta a fumonisina B1 tem sido associada a doenças em animais, como leucoencefalomalácia em cavalos e edema pulmonar em suínos. Em humanos, o consumo de alimentos com fumonisina B1 tem sido associado com câncer esofágico. A aflatoxina M1 é o principal metabólito hidroxilado encontrado no leite de animais que consumiram rações contaminadas com aflatoxina B1, bem como no leite de lactantes que consumiram alimentos com esta substância. Neste estudo foi verificado o efeito da irradiação gama (60Co), em doses que variaram de 0 a 20 kGy, quanto à capacidade de inativar fumonisina B1 em farinha de milho e aflatoxina M1 em leite fluido e em pó. A fumonisina B1 foi extraída das amostras com metanol:água (8:2). O extrato foi purificado em coluna de imunoafinidade, seguido de separação e quantificação por meio de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com detector de fluorescência, após derivatização com ortoftaldialdeído. Para efetuar a determinação da aflatoxina M1, a amostra foi purificada em coluna de imunoafinidade e a separação e a quantificação por meio de CLAE com detector de fluorescência. Foi observada uma redução da concentração da fumonisina B1 na faixa de 11,2 % a 55,5% em doses de 3 a 20 kGy de

Ocratoxina A em café torrado e moído comercializado em Minas Gerais - 2006 / Ochratoxin A in roasted and ground coffee commercialized in Minas Gerais 2006

Ocratoxina A (OTA) é uma das mais importantes micotoxinas de interesse para a saúde humana. OTA é potencialmente nefrotóxica, teratogênica e imunotóxica, afetando particularmente o sistema renal. É produzida por três espécies principais de fungos: Aspergillus ochraceus, Aspergillus carbonarius e Penicillium verrucosum, com uma menor contribuição para Aspergillus niger. O café é produzido em países tropicais onde condições climáticas são favoráveis ao crescimento de fungos e produção de micotoxinas como OTA. Para avaliar a concentração de OTA em café torrado e moído consumido no estado de Minas Gerais (Brasil), 45 amostras foram coletadas pela Vigilância Sanitária do Estado de Minas Gerais, em 2006. A toxina foi isolada por coluna de imunoafinidade e quantificada por cromatografia líquida de alta eficiência, utilizando detector de fluorescência. A recuperação média de OTA a partir de amostras contaminadas (5.0 ng/g) foi 88% e o coeficientede variação de 6,7%. Os limites de detecção e quantificação foram 0,25 ng/g e 0,80 ng/g, respectivamente. Das amostras analisadas, em 7 não foram detectadas a presença de OTA e somente 3 apresentaram níveis de OTA superiores a 5,0 ng/g, que é o limite da legislação européia. Os níveis de OTA variaram de 8 ng/g a 7 73 ng/g e média de 2,64 ng/g. Os resultados revelaram que o nível de contaminação de OTA em café não foi significativa.(AU)

OchratoxinA (OTA) is one the most important mycotoxins of concern for human health. OTA is potently nephrotoxic, teratogenic and immunotoxic, particulary on the renal system. It is produced by three main species of fungi: Aspergillus ochraceus, Aspergillus carbonarius and Penicillium verrucosum, with a minor contribution by Aspergillus niger. Coffee is produced in tropical countries where climatic conditions are favourable for fungal development and mycotoxin production as OTA. In order to conduct an initial assessment of the concentration of OTA in roast and ground coffee consuming in the state of Minas Gerais, Brasil; 45 samples were collected by the Inspection Service, in 2006. The toxin was isolated in immunoaffinity column and quantified by high performance liquid chromatography using .fluorescence detector. The mean recovery of OTA [rom spiked samples (5.0 ng/g) was88% and the relative standard deviation was 6.7%. The limit of detection and quantification were 0.25 ng/g and 0.8ng/g, respectively. Of the samples analysed, in 70TA was not detected and only in 3 were detected OTA at levelsabove of5.0 ng/g, that is the limit in European Legislation. OTA levels ranged from 0.8 ng/g to 7.73 ng/g andan average of2.64 ng/g. These results showed that the contamination levels found in the coffee were not significant. (AU)

Effect of gamma-irradiation (60Co) on aflatoxin B1 inactivation in peanut (Arachis hypogaea L.) / Influência da irradiação gama (60Co) na destruição da aflatoxina B1 em amendoim (Arachis hypogaea L.)

The effect of gamma-irradiation in doses ranging from 0 to 30 kGy was verified in order to inactivate aflatoxin B1 in peanuts sample. Peanut samples of Tatu Vermelho cultivar 2001/2002 and 2002/2003 crops,cultivated in São Paulo state, naturally or experimentally contaminated with aflatoxin B1 at varied contents, were investigated. Aflatoxin B1 was extracted with methanol:4% potassium chloride moisture (270 + 30, v/ v) followed by clarification with 10% cupric sulfate and partition with chloroform. Aflatoxin quantification was done by means of thin layer chromatography, measuring the samples and the standard fluorescent areas on densitometer at 366 nm. Gamma-irradiation (60Co) at doses of 1.5 and 10 kGy reduced the aflatoxin B1 contents in around 20% in samples experimentally contaminated with 55.3, 105.8, and 159.3 µg.kg-1. In naturally contaminated peanut samples containing 84.0 µg.kg-1 and 258.3 µg.kg-1 of aflatoxin B1 ,and treated with gamma-irradiation (60Co) at 5 and 10 kGy doses, no reduction of aflatoxin B1 levels was evidenced. On the other hand, samples naturally contaminated with aflatoxin B1 (86.0 and 248.0 µg.kg-1) and irradiated with 15, 20, 25 and 30 kGy doses, showed lower values of aflatoxin B1, ranging from 49 to 72%. In conclusion, no total inactivation of aflatoxin B1 occurs by means gamma-irradiation (60Co) in natural conditions, even at 30 kGy dose.

Foi verificado o efeito da irradiação gama (60Co) em doses que variaram de 0 a 30 kGy, na destruição de diferentes níveis aflatoxina B1 em amostras de amendoim, cultivar Tatu Vermelho, artificialmente e naturalmente contaminadas, procedentes de São Paulo, safras 2001/2002 e 2002/2003. A aflatoxina B1 foi extraída em mistura de metanol e KCl 4% (270 + 30, v/v), seguido de clarificação com CuSO4 10% e partição com clorofórmio. A quantificação foi feita por cromatografia em camada delgada, medindo-se a área das fluorescências de amostras e padrões em densitômetro a 366 nm. Doses de irradiação gama (60Co) de 1, 5 e 10 kGy reduziram em cerca de 20 % os níveis de aflatoxina B1 em amostras artificialmente contaminadas com 55,3, 105,8 e 159,3 µg.kg-1. As amostras naturalmente contaminadas com aflatoxina B1 (84,0 e 258,3 µg. kg-1) e tratadas com irradiação gama (60Co) em doses de 5 e 10 kGy, não apresentaram redução do teor de aflatoxina B1. Entretanto, as amostras naturalmente contaminadas com aflatoxina B1 (86,0 e 248,0 µg.kg-1) e irradiadas nas doses de 15, 20, 25 e 30 kGy apresentaram valores menores de aflatoxina B1,com faixa de redução que variou de 49 a 72%. Desta forma, pode-se concluir que a irradiação gama (60Co) não é capaz de destruir totalmente a aflatoxina B1 em condições naturais, mesmo em doses de até 30 kGy.

Gamma-irradiation effect on aflatoxin B1 production and growth of toxigenic strain of Aspergillus flavus in peanut (Arachis hypogaea L.) / Influência da irradiação gama na produção de aflatoxina B1 e no crescimento de cepa toxigênica de Aspergillus flavus em amendoim (Arachis hypogaea L.)

Different doses of gamma-irradiation effect was verified for inactivating aflatoxigenic strain, and on aflatoxin B1 production by Aspergillus flavus IMI 190443 in peanut, Tatu Vermelho variety, 2001/2002 and 2002/2003 crops. Two tests were performed in all samples: in one of them they were firstly irradiated before being inoculated, and in another assay peanuts were inoculated with aflatoxigenic strain before being irradiated. After irradiation, Aspergillus flavus IMI 190443 destruction was observed by the percentage of fungi infection by means of direct plating technique. Aflatoxin B1 was extracted with a mixture of methanol and 4% potassium chloride (270 + 30, v/v), followed by clarification with 10% cupric sulfate and partition with chloroform. Quantification was done by thin layer chromatography, measuring the samples fluorescent areas and of standard samples in densitometer (366 nm). Previously irradiated peanuts inoculated with aflatoxigenic strain, induced the production of high levels of aflatoxin B1. The data of the present study showed that 25 and 30 kGy gamma irradiation doses were necessary to get a complete inactivation of Aspergillus flavus IMI 190443.

Foi verificado o efeito da irradiação gama (60Co), em diferentes doses, na destruição de cepa aflatoxigênica e na produção de aflatoxina B1 por Aspergillus flavus IMI 190443, em amendoim, cultivar Tatu Vermelho, safras 2001/2002 e 2002/2003. Foram feitos dois testes nas amostras, um deles envolvendo irradiação e posterior inoculação e outro, com inoculação antes da irradiação. A destruição do Aspergillus flavus IMI 190443, após irradiação, foi medida pela porcentagem de infecção fúngica, por meio da técnica do plaqueamento direto. A aflatoxina B1 foi extraída em mistura de metanol e KCl 4% (270 + 30, v/v), seguido de clarificação com CuSO4 10% e partição em clorofórmio. A quantificação foi executada por cromatografia em camada delgada, medindo-se a área das fluorescências de amostras e padrões em densitômetro a 366 nm. A inoculação de amendoim previamente irradiado, com cepa aflatoxigênica, provocou a formação de teores elevados de aflatoxina B1. Doses de irradiação gama de 25 e 30 kGy foram necessárias para a completa inativação de esporos.

Effect of gamma irradiation on the inactivation of aflatoxin B1 and fungal flora in peanut

The effect of gamma irradiation on aflatoxin B1 levels and fungal infection were investigated in peanut samples, Tatu Vermelho cultivar. At a radiation dose of 10 KGy, growth of molds was completely inhibited. Doses of 15, 20, 25 and 30 KGy were sufficient for destruction of aflatoxin B1 by 55-74%. The results suggested that the decontamination of molds by irradiation, before production of aflatoxin B1, is the most acceptable method in the preservation of peanut.

O efeito da irradiação gama nos níveis de aflatoxina B1 e na infecção fúngica foram investigadas em amostras de amendoim, cultivar Tatu Vermelho. Dose de irradiação gama (60Co) de 10 KGy inibiu completamente o crescimento de fungos. Doses de 15, 20, 25 e 30 KGy foram suficientes para destruição de aflatoxina B1 de 55 a 74%. Pode-se concluir do presente trabalho, que a descontaminação de fungos por irradiação gama antes da produção de aflatoxina B1 é o método apropriado na preservação de amendoim.

Effect of gamma irradiation on the inactivation of aflatoxin B1 and fungal flora in peanut

The effect of gamma irradiation on aflatoxin B1 levels and fungal infection were investigated in peanut samples, Tatu Vermelho cultivar. At a radiation dose of 10 KGy, growth of molds was completely inhibited. Doses of 15, 20, 25 and 30 KGy were sufficient for destruction of aflatoxin B1 by 55-74%. The results suggested that the decontamination of molds by irradiation, before production of aflatoxin B1, is the most acceptable method in the preservation of peanut.

O efeito da irradiação gama nos níveis de aflatoxina B1 e na infecção fúngica foram investigadas em amostras de amendoim, cultivar Tatu Vermelho. Dose de irradiação gama (60Co) de 10 KGy inibiu completamente o crescimento de fungos. Doses de 15, 20, 25 e 30 KGy foram suficientes para destruição de aflatoxina B1 de 55 a 74%. Pode-se concluir do presente trabalho, que a descontaminação de fungos por irradiação gama antes da produção de aflatoxina B1 é o método apropriado na preservação de amendoim.

Saccharomycopsis schoenii and Saccharomycopsis crataegensis effect on B1 and G1 aflatoxins production by Aspergillus parasiticus in peanut (Arachis hypogaea L.) / Influência de Saccharomycopsis schoenii e Saccharomycopsis crataegensis na produção de aflatoxinas B1 e G1 por Aspergillus parasiticus em amendoim (Arachis hypogaea L.)

Aflatoxins are a group of secondary metabolites produced mainly by Aspergillus flavus, A. parasiticus and A. nomius. The effect of S. schoenii and S. crataegensis in the production of aflatoxin B1 and G1 in peanuts, cultivar IAC Caiapó was investigated. Previously autoclaved and in nature peanuts samples were inoculated with A. parasiticus (1.6 x 106 spores.mL-1) and yeast cultures (1.6 x 108 cells.mL-1), followed by incubation at 25oC for seven days. Two experiments were carried out: for the first one, the filamentous fungi and the yeast suspensions were inoculated simultaneously. In the second experiment, the filamentous fungi were inoculated 3 h after yeasts inoculation. Aflatoxin quantification was performed by thin layer chromatography. The production of B1 and G1 aflatoxin was reduced in the presence of the yeasts. The percentage of reduction in aflatoxin concentration was higher when the filamentous fungus was inoculated3 h after adding yeast suspension. The reduction of B1 aflatoxin concentration came to 89.3% and 82.6%, in the presence of S. schoenii and S. crataegensis, respectively. The G1 aflatoxin levels were reduced in91.2% in the presence of S. schoenii and 93.2% in the presence of S. crataegensis.

As aflatoxinas constituem o grupo de metabólitos secundários produzidos principalmente pelos Aspergillus flavus, A. parasiticus e A. nomius. Foi investigado o efeito isolado das leveduras Saccharomycopsis schoenii e S. crataegensis na produção de aflatoxinas B1 e G1 em amendoim, cultivar IAC Caiapó. As amostras de amendoim in natura e previamente autoclavadas foram inoculadas com A. parasiticus (1,6 x106 esporos.mL-1) e cultura das leveduras (1,6 x 108 células.mL-1), seguido de incubação a 25ºC durante sete dias. Foram realizados dois experimentos: no primeiro o fungo filamentoso e as leveduras foram inoculados simultaneamente. No segundo, a levedura foi inoculada 3 h antes da adição de fungo filamentoso. A quantificação das aflatoxinas foi executada por cromatografia em camada delgada. A produção das aflatoxinas B1 e G1 foi reduzida na presença das leveduras. A porcentagem de redução da concentração das aflatoxinas foi maior quando a suspensão do fungo foi adicionada 3 h após a inoculação da suspensão de leveduras. O decréscimo da concentração de aflatoxina B1 atingiu 89,3% e 82,6%, respectivamente na presença de S.schoenii e de S. crataegensis. Os níveis de aflatoxina G1 foram reduzidos em 91,2% na presença de S. schoenii e em 93,2% quando S. crataegensis foi inoculada.

Gamma-irradiation effect on fumonisin B1 inactivation in corn flour and on aflatoxin M1 in fluid and powdered milk / Influência da irradiação gama na destruição de fumonisina B1 em farinha de milho e de aflatoxina M1 em leite fluido e em pó

Fumonisin B1 is a mycotoxin produced by Fusarium verticillioides and Fusarium proliferatum, and it is found chiefly in corn and corn-based products. Since its discovery fumonisin B1 has been associated with diseases in animals, such as leukoencephalomalacia in horses, and pulmonary edema in swine. On humans, the ingestion of foods with fumonisin B1 is associated with esophageal cancer. Aflatoxin M1 is the principal hydroxylated metabolite occurring in milk from animals which have consumed aflatoxin B1-contaminated feeds. It is also present in milk from nursing mothers who consumed foodstuffs with aflatoxin B1. In this study the effect of gamma-irradiation (60Co) was verified, in doses ranged from 0 to 20 kGy, in order to inactivate fumonisin B1 in corn flour and aflatoxin M1 in fluid and powdered milk. Fumonisin B1 was extracted from the samples with methanol:water (3:1). The extract was purified through immunoaffinity column followed by separation and quantification by means of high-performance liquid chromatography (HPLC) with o-phthaldialdehyde (OPA). For determining aflatoxin M1 the purification was done through immunoaffinity column followed by separation and quantification by means of HPLC with fluorescence detector. Gamma irradiation (60Co) at doses from 3 to 20 kGy reduced the fumonisin B1 content in a range of 11.2 % to 55.5 %. Gamma irradiation (60Co) at 20 kGy dose r

Fumonisina B1 é a micotoxina produzida por Fusarium verticillioides e Fusarium proliferatum e é encontrada principalmente em milho e produtos a base de milho. Desde sua descoberta a fumonisina B1 tem sido associada a doenças em animais, como leucoencefalomalácia em cavalos e edema pulmonar em suínos. Em humanos, o consumo de alimentos com fumonisina B1 tem sido associado com câncer esofágico. A aflatoxina M1 é o principal metabólito hidroxilado encontrado no leite de animais que consumiram rações contaminadas com aflatoxina B1, bem como no leite de lactantes que consumiram alimentos com esta substância. Neste estudo foi verificado o efeito da irradiação gama (60Co), em doses que variaram de 0 a 20 kGy, quanto à capacidade de inativar fumonisina B1 em farinha de milho e aflatoxina M1 em leite fluido e em pó. A fumonisina B1 foi extraída das amostras com metanol:água (8:2). O extrato foi purificado em coluna de imunoafinidade, seguido de separação e quantificação por meio de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com detector de fluorescência, após derivatização com ortoftaldialdeído. Para efetuar a determinação da aflatoxina M1, a amostra foi purificada em coluna de imunoafinidade e a separação e a quantificação por meio de CLAE com detector de fluorescência. Foi observada uma redução da concentração da fumonisina B1 na faixa de 11,2 % a 55,5% em doses de 3 a 20 kGy de

Effect of gamma irradiation on the inactivation of aflatoxin B1 and fungal flora in peanut

The effect of gamma irradiation on aflatoxin B1 levels and fungal infection were investigated in peanut samples, Tatu Vermelho cultivar. At a radiation dose of 10 KGy, growth of molds was completely inhibited. Doses of 15, 20, 25 and 30 KGy were sufficient for destruction of aflatoxin B1 by 55-74%. The results suggested that the decontamination of molds by irradiation, before production of aflatoxin B1, is the most acceptable method in the preservation of peanut.

O efeito da irradiação gama nos níveis de aflatoxina B1 e na infecção fúngica foram investigadas em amostras de amendoim, cultivar Tatu Vermelho. Dose de irradiação gama (60Co) de 10 KGy inibiu completamente o crescimento de fungos. Doses de 15, 20, 25 e 30 KGy foram suficientes para destruição de aflatoxina B1 de 55 a 74%. Pode-se concluir do presente trabalho, que a descontaminação de fungos por irradiação gama antes da produção de aflatoxina B1 é o método apropriado na preservação de amendoim.