Serosurvey of Borrelia in dogs, horses, and humans exposed to ticks in a rural settlement of southern Brazil / Soroprevalência e fatores associados a Borrelia em cães, equinos e humanos expostos a carrapatos em um assentamento rural do sul do Brasil

Abstract The aims of the present study were to serosurvey dogs, horses, and humans highly exposed to tick bites for anti-Borrelia burgdorferi s.l. antibodies, identify tick species present, and determine risk factors associated with seropositivity in a rural settlement of Paraná State, southern Brazil. Eighty-seven residents were sampled, along with their 83 dogs and 18 horses, and individual questionnaires were administered. Immunofluorescence antibody test (IFAT) was performed on serum samples and positive samples were subjected to western blot (WB) analysis. Anti-B. burgdorferi antibodies were found in 4/87 (4.6%) humans, 26/83 (31.3%) dogs, and 7/18 (38.9%) horses by IFAT, with 4/4 humans also positive by WB. Ticks identified were mostly from dogs and included 45/67 Rhipicephalus sanguineus, 21/67 Amblyomma ovale, and 1/67 A. cajennense sensu lato. All (34/34) horse ticks were identified as A. cajennense s.l.. No significant association was found when age, gender, or presence of ticks was correlated to seropositivity to Borrelia sp. In conclusion, although anti-Borrelia antibodies have been found in dogs, horses and their owners from the rural settlement, the lack of isolation, molecular characterization, absence of competent vectors and the low specificity of the commercial WB kit used herein may have impaired risk factor analysis.(AU)

Resumo Os objetivos do presente estudo foram realizar um levantamento sorológico de cães, cavalos e humanos altamente expostos a picadas de carrapatos para anticorpos anti-B. burgdorferi s.l., identificar as espécies de carrapatos presentes, e determinar os fatores de risco associados a soropositividade em um assentamento rural do Estado do Paraná, sul do Brasil. Oitenta e sete residentes foram amostrados junto com seus respectivos 83 cães e 118 cavalos e questionários individuais foram aplicados. O teste de imunofluorescência indireta (IFI) foi realizado nas amostras sorológicas e as positivas foram submetidas a análise por western blot (WB). Anticorpos anti-B. burgdorferi foram detectados em 4/87 (4,6%) humanos, 26/83 (31,3%) cães e 7/18 (38,9%) cavalos pela IFI, com 4/4 humanos também positivos pelo WB. Os carrapatos identificados foram em sua maioria de cães e incluíram 45/67 Rhipicephalus sanguineus, 21/67 Amblyomma ovale e 1/67 A. cajennense sensu lato. Todos (34/34) carrapatos dos cavalos foram identificados como A. cajennense s.l.. Não foram observadas diferenças estatísticas entre idade, sexo ou presença de carrapatos e soropositividade para Borrelia sp. Em conclusão, embora anticorpos anti-Borrelia tenham sido encontrados em cães, equinos e seus proprietários do assentamento rural, a ausência de isolamento, caracterização molecular, ausência de vetores competentes e baixa especificidade do kit comercial de WB utilizado podem ter limitado a análise de fatores de risco.(AU)

Serosurvey of tick-borne pathogens in dogs from urban and rural areas from Parana State, Brazil / Avaliação sorológica de patógenos transmitidos por carrapatos em cães urbanos e rurais do estado do Paraná, Brasil

Considering the zoonotic potential of tick-borne disease (TBD) agents and the fact that dogs may act as sentinels for human infection, the aim of the present study was to determine the seroprevalence of TBD agents and risk factors for exposure in two different canine populations from Parana State, Southern Brazil. A total of 138 dog serum samples from urban (UA) (n=68) and rural (RA) (n=70) areas were tested with commercial ELISA rapid test forAnaplasma phagocytophilum, Ehrlichia canisand Borrelia burgdorferi antibodies and indirect immunofluorescence assay (IFAT) for Babesia vogeli. An overall of 92∕138 (66.7%) dogs, being 62∕68 (91.2%) from UA and 30∕70 (42.9%) from RA, were seropositive for at least one TBD agent. From the total number of dogs, sixty-two were positive for E. canis (44.9%), 19 (13.8%) for A. phagocytophilum, and 64 (46.4%) for B. vogeli. Anti-B. burgdorferi antibodies were not detected. Dogs from UA showed a higher percentage of tick infestation (p = 0.0135) and were highly associated with seropositivity to E. canis (p = 0.000005), A. phagocytophilum (p = 0.0001), and B. vogeli (p = 0.0012). In summary, the findings indicate that dogs from urban areas present higher potential risk exposure to TBD pathogens than those from rural areas.

Considerando o potencial zoonótico das doenças transmitidas por carrapatos (DTCs) e que os cães podem atuar como sentinelas para infecções em humanos, os objetivos deste estudo foram determinar a soroprevalência de agentes das DTCs e fatores de risco para a exposição em duas diferentes populações caninas do Estado do Paraná, região Sul do Brasil. Um total de 138 amostras de soro de cães de área urbana (AU) (n = 68) e rural (AR) (n = 70) foram testadas utilizando um teste de ELISA comercial rápido para detecção de anticorpos contra Anaplasma phagocytophilum, Ehrlichia canis e Borrelia burgdorferi e imunofluorescência indireta (IFI) para Babesia vogeli. Um total de 92∕138 (66,7%) cães, sendo 62∕68 (91,2%) da AU e 30∕70 (42,9%) da AR, foram soropositivos para pelo menos um agente. Do número total de amostras, sessenta e duas (44,9%) foram positivas para E. canis, 19 (13,8%) para A. phagocytophilum e 64 (46,4%) para B. canis vogeli. Anticorpos anti-B. burgdorferi não foram detectados. Os cães da AU apresentaram o maior percentual de infestação por carrapatos (p = 0,0135) e foram altamente associados com a positividade para E. canis (p = 0,000005), A. phagocytophilum (p = 0,0001) e B. vogeli (p = 0,0012). Em resumo, nossos achados indicam que cães de áreas urbanas têm um maior risco potencial de exposição a agentes patogênicos das DTCs comparados aos das áreas rurais.

Serosurvey of tick-borne pathogens in dogs from urban and rural areas from Parana State, Brazil

Considering the zoonotic potential of tick-borne disease (TBD) agents and the fact that dogs may act as sentinels for human infection, the aim of the present study was to determine the seroprevalence of TBD agents and risk factors for exposure in two different canine populations from Parana State, Southern Brazil. A total of 138 dog serum samples from urban (UA) (n=68) and rural (RA) (n=70) areas were tested with commercial ELISA rapid test forAnaplasma phagocytophilum, Ehrlichia canisand Borrelia burgdorferi antibodies and indirect immunofluorescence assay (IFAT) for Babesia vogeli. An overall of 92138 (66.7%) dogs, being 6268 (91.2%) from UA and 3070 (42.9%) from RA, were seropositive for at least one TBD agent. From the total number of dogs, sixty-two were positive for E. canis (44.9%), 19 (13.8%) for A. phagocytophilum, and 64 (46.4%) for B. vogeli. Anti-B. burgdorferi antibodies were not detected. Dogs from UA showed a higher percentage of tick infestation (p = 0.0135) and were highly associated with seropositivity to E. canis (p = 0.000005), A. phagocytophilum (p = 0.0001), and B. vogeli (p = 0.0012). In summary, the findings indicate that dogs from urban areas present higher potential risk exposure to TBD pathogens than those from rural areas.

Considerando o potencial zoonótico das doenças transmitidas por carrapatos (DTCs) e que os cães podem atuar como sentinelas para infecções em humanos, os objetivos deste estudo foram determinar a soroprevalência de agentes das DTCs e fatores de risco para a exposição em duas diferentes populações caninas do Estado do Paraná, região Sul do Brasil. Um total de 138 amostras de soro de cães de área urbana (AU) (n = 68) e rural (AR) (n = 70) foram testadas utilizando um teste de ELISA comercial rápido para detecção de anticorpos contra Anaplasma phagocytophilum, Ehrlichia canis eBorrelia burgdorferi e imunofluorescência indireta (IFI) para Babesia vogeli. Um total de 92138 (66,7%) cães, sendo 6268 (91,2%) da AU e 3070 (42,9%) da AR, foram soropositivos para pelo menos um agente. Do número total de amostras, sessenta e duas (44,9%) foram positivas paraE. canis, 19 (13,8%) para A. phagocytophilum e 64 (46,4%) para B. canis vogeli. Anticorpos anti-B. burgdorferi não foram detectados. Os cães da AU apresentaram o maior percentual de infestação por carrapatos (p = 0,0135) e foram altamente associados com a positividade para E. canis (p = 0,000005), A. phagocytophilum (p = 0,0001) e B. vogeli (p = 0,0012). Em resumo, nossos achados indicam que cães de áreas urbanas têm um maior risco potencial de exposição a agentes patogênicos das DTCs comparados aos das áreas rurais.

Survey of rickettsiae in humans, dogs, horses, and ticks in northern Paraná, Brazil / Levantamento de riquétsias em humanos, cães, cavalos e carrapatos no norte do Paraná, Brasil

Brazilian Spotted Fever is a disease caused by Rickettsia rickettsii, and is transmitted to humans and animals by Amblyomma spp. The objective of this work was to study the epidemiology of spotted fever group rickettsiae in rural areas of Northern Parana. In Alvorada do Sul municipality, 88 humans, 83 dogs, and 18 horses were sampled, and in Arapongas municipality, 138 humans, 90 dogs and 18 horses were studied. All the sera were tested by IFA in which R. rickettsii and R. parkeri were used as antigens, considering titers ≥ 64 positive. Ticks collected from dogs and horses were tested by PCR. In Alvorada do Sul, 24% and 16.1% of humans, 55.6% and 22.2% of horses and, 22.9% and 18.1% of dogs were seropositive for R rickettsii and R. parkeri, respectively. In Arapongas, 9.4% and 4.3% of the humans, 5.6% and 5.6% of horses and, 13.3% and 12.2% of the dogs were seropositive for R. rickettsii and R. parkeri, respectively. PCR detected seven ticks with gltA sequences that showed similarity with R. bellii. The presence of antibodies to R. parkeri and R. rickettsii in dogs, horses and humans demonstrates a potential risk for spotted fever group rickettsiae in these areas.

Febre Maculosa Brasileira é uma doença causada por Rickettsia rickettsii, e é transmitida para humanos e animais por Amblyomma spp. O objetivo deste trabalho foi estudar a epidemiologia de riquétsias do grupo da febre em áreas rurais do Norte do Paraná. No município de Alvorada do Sul, 88 pessoas, 83 cães e 18 cavalos foram amostrados, e no município de Arapongas, 138 seres humanos, 90 cães e 18 cavalos foram estudados. Todos os soros foram testados por IFI com R. rickettsii e R. parkeri como antígenos, considerando-se os títulos ≥ 64 positivos. Carrapatos coletados de cães e cavalos foram testados por PCR. Em Alvorada do Sul, 24% e 16,1% dos seres humanos, 55,6% e 22,2% de cavalos e, 22,9% e 18,1% de cães foram soropositivos para R. rickettsii e R. parkeri, respectivamente. Em Arapongas, 9,4% e 4,3% dos seres humanos, 5,6% e 5,6% de cavalos e, 13,3% e 12,2% dos cães foram soropositivos para R. rickettsi e R. parkeri, respectivamente. A PCR detectou 7 carrapatos com seqüências gltA que mostrou semelhança com R. bellii. A presença de anticorpos para R. rickettsii e R. parkeri em cães, cavalos e seres humanos demonstra um risco potencial para riquétsias do grupo da febre maculosa nestas áreas.

Serosurvey of antibodies against spotted fever group Rickettsia spp. in horse farms in Northern Paraná, Brazil / Soroprevalência de anticorpos contra Rickettsia spp. do grupo febre maculosa em equinos de haras no Norte do Paraná, Brasil

Brazilian spotted fever (BSF) is an emerging disease most likely caused by Rickettsia rickettsii. The objective of the present study was to estimate the seroprevalence of BSF rickettsia infections in equines from six horse farms located in Londrina County, Paraná, Southern Brazil. Six owners of horse farms situated in Cambé, Santa Fé, Guaraci and Londrina municipalities participated in the study. All farms were located in areas where BSF has not been reported. A total of 273 horses were sampled and their sera were tested by indirect Immunofluorescence assay (IFA) using R. rickettsii and R. parkeri antigens. Titers equal to and greater than 64 were considered positive. Of 273 sera tested, 15 (5.5%) reacted to R. rickettsii and 5 (1.8%) to R. parkeri. Five out of the six farms studied revealed seropositive animals and seropositivity rate ranged from 0 to 13%. The titers ranged from 64 to 512, and four samples had a titer of 512. Nine animals reacted to R. rickettsii with titers four-fold higher than those for R. parkeri. These results suggest that horses in Northern Paraná may have been exposed to rickettsiae identical or closely related to R. rickettsii.(AU)

Febre Maculosa Brasileira (FMB) é uma doença emergente, sendo Rickettsia rickettsii o seu principal agente etiológico. O objetivo deste estudo foi determinar a soroprevalência de rickettsia do grupo da febre maculosa em equinos de seis haras localizados nos municípios de Cambé, Santa Fé, Guaraci e Londrina. As propriedades eram localizadas na região Norte do Paraná onde casos de FMB ainda não foram diagnosticados. Foram colhidas amostras de sangue de 273 equinos, e os soros foram testados pela RIFI, usando R. rickettsii e R. parkeri como antígenos, considerando-se como positivos títulos ≥64. Entre 273 soros, 15 (5,5%) reagiram contra R. rickettsii e 5 (1,8%) para R. parkeri. Cinco de seis haras estudados tinham animais reativos, e a taxa de sororreatividade variou de 0 a 13%. Os títulos variaram de 64 para 512, e três amostras apresentaram título de 512. Nove animais reagiram para R. rickettsii com títulos quatro vezes maiores que para R. parkeri. Esses resultados sugerem que equinos no Norte do Estado do Paraná, Brasil, podem ter sido expostos a uma rickettsia idêntica ou muito próxima a R. rickettsii.(AU)

Serosurvey of antibodies against spotted fever group Rickettsia spp. in horse farms in Northern Paraná, Brazil

Brazilian spotted fever (BSF) is an emerging disease most likely caused by Rickettsia rickettsii. The objective of the present study was to estimate the seroprevalence of BSF rickettsia infections in equines from six horse farms located in Londrina County, Paraná, Southern Brazil. Six owners of horse farms situated in Cambé, Santa Fé, Guaraci and Londrina municipalities participated in the study. All farms were located in areas where BSF has not been reported. A total of 273 horses were sampled and their sera were tested by indirect Immunofluorescence assay (IFA) using R. rickettsii and R. parkeri antigens. Titers equal to and greater than 64 were considered positive. Of 273 sera tested, 15 (5.5%) reacted to R. rickettsii and 5 (1.8%) to R. parkeri. Five out of the six farms studied revealed seropositive animals and seropositivity rate ranged from 0 to 13%. The titers ranged from 64 to 512, and four samples had a titer of 512. Nine animals reacted to R. rickettsii with titers four-fold higher than those for R. parkeri. These results suggest that horses in Northern Paraná may have been exposed to rickettsiae identical or closely related to R. rickettsii.

Febre Maculosa Brasileira (FMB) é uma doença emergente, sendo Rickettsia rickettsii o seu principal agente etiológico. O objetivo deste estudo foi determinar a soroprevalência de rickettsia do grupo da febre maculosa em equinos de seis haras localizados nos municípios de Cambé, Santa Fé, Guaraci e Londrina. As propriedades eram localizadas na região Norte do Paraná onde casos de FMB ainda não foram diagnosticados. Foram colhidas amostras de sangue de 273 equinos, e os soros foram testados pela RIFI, usando R. rickettsii e R. parkeri como antígenos, considerando-se como positivos títulos >64. Entre 273 soros, 15 (5,5%) reagiram contra R. rickettsii e 5 (1,8%) para R. parkeri. Cinco de seis haras estudados tinham animais reativos, e a taxa de sororreatividade variou de 0 a 13%. Os títulos variaram de 64 para 512, e três amostras apresentaram título de 512. Nove animais reagiram para R. rickettsii com títulos quatro vezes maiores que para R. parkeri. Esses resultados sugerem que equinos no Norte do Estado do Paraná, Brasil, podem ter sido expostos a uma rickettsia idêntica ou muito próxima a R. rickettsii.

Dynamic of the natural infection by Anaplasma marginale in Holstein cows and calves in the Londrina region, North of Paraná State, Brazil / Dinâmica da infecção natural pelo Anaplasma marginale em vacas e bezerros da raça Holandesa, na região de Londrina, Estado do Paraná, Brasil

The dynamic of the infection by Anaplasma marginale in Holstein cows and calves was studied in two dairy farms (A and B) in the Londrina region, North of Paraná. In the farm A the cows were maintained in the tie-stall system and, the calves in collective stall; in the farm B, the cows stayed in freestall system and the calves in individual cages. Every 15 days, blood samples were collected from the dams 45 days before parturition until 60 days post partum, and from their calves at birth until 240 days of age. Tick burden counting was also performed on dams and calves twice a month. Percentage of infected erythrocytes was established by Giemsa-stained smears. Blood and sera samples were examined by Polimerase Chain Reaction (PCR) and competitive Enzime-Linked Immunosorbent Assay (cELISA), respectively. In the cows, the anti-A. marginale antibody levels decreased close to the parturition, showing an adverse behavior among the farms. In the farm A the levels of antibodies increased between 30 and 60 days after the parturition and, in farm B the antibodies stayed in low levels during the accompaniment period of the cows. The anti-A. marginale antibody levels of the calves of the farm A, that were not high in the day of the birth, decreased more until 45 days post parturition and it increased again starting from 60 days, with maximum pick to the 105 days. In the farm B, where the ca

A dinâmica da infecção por Anaplasma marginale em vacas e bezerros da raça Holandesa foi estudada em duas propriedades leiteiras (A e B) com manejos distintos da região Norte do Paraná. Na propriedade A as vacas eram mantidas no sistema tie-stall e, os bezerros em bezerreiros coletivos; na propriedade B, as vacas em sistema free-stall e os bezerros em gaiolas individuais. A cada 15 dias efetuou-se a contagem de carrapatos e coletas de amostras de sangue das vacas e seus respectivos bezerros. As vacas foram monitoradas dos 45 dias antes até 60 dias após o parto, e seus bezerros, do nascimento até 240 dias de idade. A parasitemia foi determinada em esfregaços sangüíneos corados pelo Giemsa. O sangue total e as amostras de soro obtidas foram submetidos, respectivamente, as técnicas da PCR e cELISA. Nas vacas os níveis de imunoglobulinas diminuíram próximo ao parto, além de apresentarem uma dinâmica de anticorpos diferentes entre as duas propriedades. Na propriedade A os níveis de anticorpos aumentou entre 30 e 60 dias após o parto e na B os anticorpos permaneceram em níveis baixos no período de monitoramento das vacas. Os níveis de anticorpos dos bezerros da propriedade A que não eram altos no dia do nascimento, diminuíram ainda mais até 45 dias pós-parto e voltou a crescer a partir de 60 dias, com pico máximo aos 105 dias. Na propriedade B, onde os bezerros apresentavam nívei

Dynamic of the natural infection by Anaplasma marginale in Holstein cows and calves in the Londrina region, North of Paraná State, Brazil / Dinâmica da infecção natural pelo Anaplasma marginale em vacas e bezerros da raça Holandesa, na região de Londrina, Estado do Paraná, Brasil

The dynamic of the infection by Anaplasma marginale in Holstein cows and calves was studied in two dairy farms (A and B) in the Londrina region, North of Paraná. In the farm A the cows were maintained in the tie-stall system and, the calves in collective stall; in the farm B, the cows stayed in freestall system and the calves in individual cages. Every 15 days, blood samples were collected from the dams 45 days before parturition until 60 days post partum, and from their calves at birth until 240 days of age. Tick burden counting was also performed on dams and calves twice a month. Percentage of infected erythrocytes was established by Giemsa-stained smears. Blood and sera samples were examined by Polimerase Chain Reaction (PCR) and competitive Enzime-Linked Immunosorbent Assay (cELISA), respectively. In the cows, the anti-A. marginale antibody levels decreased close to the parturition, showing an adverse behavior among the farms. In the farm A the levels of antibodies increased between 30 and 60 days after the parturition and, in farm B the antibodies stayed in low levels during the accompaniment period of the cows. The anti-A. marginale antibody levels of the calves of the farm A, that were not high in the day of the birth, decreased more until 45 days post parturition and it increased again starting from 60 days, with maximum pick to the 105 days. In the farm B, where the ca

A dinâmica da infecção por Anaplasma marginale em vacas e bezerros da raça Holandesa foi estudada em duas propriedades leiteiras (A e B) com manejos distintos da região Norte do Paraná. Na propriedade A as vacas eram mantidas no sistema tie-stall e, os bezerros em bezerreiros coletivos; na propriedade B, as vacas em sistema free-stall e os bezerros em gaiolas individuais. A cada 15 dias efetuou-se a contagem de carrapatos e coletas de amostras de sangue das vacas e seus respectivos bezerros. As vacas foram monitoradas dos 45 dias antes até 60 dias após o parto, e seus bezerros, do nascimento até 240 dias de idade. A parasitemia foi determinada em esfregaços sangüíneos corados pelo Giemsa. O sangue total e as amostras de soro obtidas foram submetidos, respectivamente, as técnicas da PCR e cELISA. Nas vacas os níveis de imunoglobulinas diminuíram próximo ao parto, além de apresentarem uma dinâmica de anticorpos diferentes entre as duas propriedades. Na propriedade A os níveis de anticorpos aumentou entre 30 e 60 dias após o parto e na B os anticorpos permaneceram em níveis baixos no período de monitoramento das vacas. Os níveis de anticorpos dos bezerros da propriedade A que não eram altos no dia do nascimento, diminuíram ainda mais até 45 dias pós-parto e voltou a crescer a partir de 60 dias, com pico máximo aos 105 dias. Na propriedade B, onde os bezerros apresentavam nívei

Levantamento de riquétsias em humanos, cães, cavalos e carrapatos no Norte do Paraná, Brasil / Survey of rickettsiae in humans, dogs, horses, and ticks in Northern Paraná, Brazil

Febre Maculosa Brasileira é uma doença causada por Rickettsia rickettsii, e é transmitida para humanos e animais por Amblyomma spp. O objetivo deste trabalho foi estudar a epidemiologia de riquétsias do grupo da febre em áreas rurais do Norte do Paraná. No município de Alvorada do Sul, 88 pessoas, 83 cães e 18 cavalos foram amostrados, e no município de Arapongas, 138 seres humanos, 90 cães e 18 cavalos foram estudados. Todos os soros foram testados por IFI com R. rickettsii e R. parkeri como antígenos, considerando-se os títulos ? 64 positivos. Carrapatos coletados de cães e cavalos foram testados por PCR. Em Alvorada do Sul, 24% e 16,1% dos seres humanos, 55,6% e 22,2% de cavalos e, 22,9% e 18,1% de cães foram soropositivos para R. rickettsii e R. parkeri, respectivamente. Em Arapongas, 9,4% e 4,3% dos seres humanos, 5,6% e 5,6% de cavalos e, 13,3% e 12,2% dos cães foram soropositivos para R. rickettsii e R. parkeri, respectivamente. A PCR detectou 7 carrapatos com seqüências gltA que mostrou semelhança com R. bellii. A presença de anticorpos para R. rickettsii e R. parkeri em cães, cavalos e seres humanos demonstra um risco potencial para riquétsias do grupo da febre maculosa nestas áreas.

Brazilian Spotted Fever is a disease caused by Rickettsia rickettsii, and is transmitted to humans and animals by Amblyomma spp. The objective of this work was to study the epidemiology of spotted fever group rickettsiae in rural areas of Northern Parana. In Alvorada do Sul municipality, 88 humans, 83 dogs, and 18 horses were sampled, and in Arapongas municipality, 138 humans, 90 dogs and 18 horses were studied. All the sera were tested by IFA in which R. rickettsii and R. parkeri were used as antigens, considering titers ? 64 positive. Ticks collected from dogs and horses were tested by PCR. In Alvorada do Sul, 24% and 16.1% of humans, 55.6% and 22.2% of horses and, 22.9% and 18.1% of dogs were seropositive for R rickettsii and R. parkeri, respectively. In Arapongas, 9.4% and 4.3% of the humans, 5.6% and 5.6% of horses and, 13.3% and 12.2% of the dogs were seropositive for R. rickettsii and R. parkeri, respectively. PCR detected seven ticks with gltA sequences that showed similarity with R. bellii. The presence of antibodies to R. parkeri and R. rickettsii in dogs, horses and humans demonstrates a potential risk for spotted fever group rickettsiae in these areas. 

Infecção por Toxoplasma gondii e Leishmania spp. em humanos e cães de assentamentos rurais no Norte do Estado do Paraná, Brasil / Infection by Toxoplasma gondii and Leishmania spp. in humans and dogs from rural settlements in Northern Paraná State, Brazil

O objetivo deste estudo foi determinar a prevalência de anticorpos contra Toxoplasma gondii e Leishmania spp. em humanos e cães que vivem em dois assentamentos rurais no norte do Paraná. Um questionário epidemiológico foi aplicado para obter informações sociodemográficas e possíveis associações com as infecções, e os dados foram analisados pelo EpiInfo®. Amostras de sangue foram coletadas de 216 pessoas e 169 cães, e testados por imunofluorescência indireta. A prevalência de toxoplasmose em humanos foi de 79,1% (171/216) e em cães foi de 82,2% (139/169). Entre as variáveis analisadas para toxoplasmose em humanos a presença de gatos jovens no domicílio (p = 0,031) e maior freqüência de indivíduos >18 anos mostraram uma associação significativa. Uma maior freqüência de soropositivos foi observada em cães com idade >1 ano. A prevalência de leishmaniose em seres humanos foi de 7,4% (16/216) e em cães foi de 8,2% (14/169). A variável presença de floresta a menos de 200 metros da residência apresentou uma associação significativa entre os seres humanos e cães. Também para os cães, houve associação com a presença de matéria orgânica (folhas) em torno da casa. Em conclusão, pode afirmar-se que existe uma grande propagação de T. gondii em ambas as espécies e a ocorrência de anticorpos anti-Leishmania spp. em humanos e cães, indica que há transmissão de Leishmania spp. nessas local

The purpose of this study was to determine the seroprevalence of antibodies against Toxoplasma gondii and Leishmania spp. in humans and dogs living in two rural settlements in northern Paraná State. An epidemiological questionnaire was applied to obtain socio-demographic information and possible associations with the infections, and the data were analyzed using EpiInfo®. Blood samples were collected from 216 humans and 169 dogs, and tested by indirect immunofluorescence assay. The prevalence of toxoplasmosis in humans was 79.1% (171/216) and in dogs was 82.2% (139/169). Among the variables analyzed for toxoplasmosis in humans the presence of young cats in the household (p = 0.031) and higher frequency with individuals > 18 years showed a significant association. A higher frequency of seropositive was observed in dogs aged > 1 year. The prevalence of leishmaniasis in humans was 7.4% (16/216) and in dogs was 8.2% (14/169). The variable presence of forest less than 200 meters from the residence had a significant association among both humans and dogs. Also for dogs, there was association with the presence of organic matter (leaves) around the household. In conclusion, it can be stated that there is a high spread of T. gondii in both species and the occurrence of anti-Leishmania spp. antibodies in humans and dogs indicates that there is transmission of Leishmania spp. in thes

Infecção por Toxoplasma gondii e Leishmania spp. em humanos e cães de assentamentos rurais no Norte do Estado do Paraná, Brasil / Infection by Toxoplasma gondii and Leishmania spp. in humans and dogs from rural settlements in Northern Paraná State, Brazil

O objetivo deste estudo foi determinar a prevalência de anticorpos contra Toxoplasma gondii e Leishmania spp. em humanos e cães que vivem em dois assentamentos rurais no norte do Paraná. Um questionário epidemiológico foi aplicado para obter informações sociodemográficas e possíveis associações com as infecções, e os dados foram analisados pelo EpiInfo®. Amostras de sangue foram coletadas de 216 pessoas e 169 cães, e testados por imunofluorescência indireta. A prevalência de toxoplasmose em humanos foi de 79,1% (171/216) e em cães foi de 82,2% (139/169). Entre as variáveis analisadas para toxoplasmose em humanos a presença de gatos jovens no domicílio (p = 0,031) e maior freqüência de indivíduos >18 anos mostraram uma associação significativa. Uma maior freqüência de soropositivos foi observada em cães com idade >1 ano. A prevalência de leishmaniose em seres humanos foi de 7,4% (16/216) e em cães foi de 8,2% (14/169). A variável presença de floresta a menos de 200 metros da residência apresentou uma associação significativa entre os seres humanos e cães. Também para os cães, houve associação com a presença de matéria orgânica (folhas) em torno da casa. Em conclusão, pode afirmar-se que existe uma grande propagação de T. gondii em ambas as espécies e a ocorrência de anticorpos anti-Leishmania spp. em humanos e cães, indica que há transmissão de Leishmania spp. nessas local

The purpose of this study was to determine the seroprevalence of antibodies against Toxoplasma gondii and Leishmania spp. in humans and dogs living in two rural settlements in northern Paraná State. An epidemiological questionnaire was applied to obtain socio-demographic information and possible associations with the infections, and the data were analyzed using EpiInfo®. Blood samples were collected from 216 humans and 169 dogs, and tested by indirect immunofluorescence assay. The prevalence of toxoplasmosis in humans was 79.1% (171/216) and in dogs was 82.2% (139/169). Among the variables analyzed for toxoplasmosis in humans the presence of young cats in the household (p = 0.031) and higher frequency with individuals > 18 years showed a significant association. A higher frequency of seropositive was observed in dogs aged > 1 year. The prevalence of leishmaniasis in humans was 7.4% (16/216) and in dogs was 8.2% (14/169). The variable presence of forest less than 200 meters from the residence had a significant association among both humans and dogs. Also for dogs, there was association with the presence of organic matter (leaves) around the household. In conclusion, it can be stated that there is a high spread of T. gondii in both species and the occurrence of anti-Leishmania spp. antibodies in humans and dogs indicates that there is transmission of Leishmania spp. in thes

Produção, caracterização e avaliação da imunogenicidade do complexo protéico MSP1 recombinante (rMSP1a e rMSP1b) de isolado paranaense do Anaplasma marginale

O Anaplasma marginale (ordem Rickettsiales, família Anaplasmataceae) é o agente etiológico da anaplasmose bovina. Esta doença ocorre mundialmente, com maior freqüência nas regiões tropicais e subtropicais, determinando perdas econômicas consideráveis à pecuária bovina. O A. marginale possui seis proteínas principais de superfície designadas de MSP1a, MSP1b, MSP2, MSP3, MSP4, MSP5. A proteína MSP1a tem massa molecular de 105kDa e a MSP1b de 100kDa. Os objetivos deste trabalho foram clonar, produzir, caracterizar as MSP1a e MSP1b recombinantes (rMSP1a e rMSP1b) e avaliar a resposta imune humoral de camundongos imunizados com a Escherichia coli BL21 recombinante expressando estas proteínas. Os genes msp1? e msp1? foram obtidos pela PCR de um isolado Paranaense de A. marginale e clonados em vetores pET102 e pET101/D-TOPO, respectivamente. Após a certificação da inserção dos genes nos vetores, as proteínas foram induzidas com IPTG e purificadas em colunas de resina ligadas ao níquel. As proteínas rMSP1a e rMSP1b separadas em SDS-PAGE, reagiram com soros anti-rMSP1a e anti-rMSP1b produzidos em coelhos, pelo Western blotting, mostrando massas moleculares de 70kDa a 105kDa e 100kDa, respectivamente. A BL21/rMSP1a e a BL21/rMSP1b aglutinaram as hemácias de bovinos e esta hemaglutinação foi inibida na presença de IgY anti-rMSP1a e anti-rMSP1b, confirmando a função de adesão destas proteínas. A reação de IFI realizada com as IgY anti-rMSP1a e IgY anti-rMSP1b, produzidas em galinhas, demonstraram a presença destas proteínas na membrana externa das E. coli BL21 recombinantes. As BL21/rMSP1a e BL21/rMSP1b também foram utilizadas para imunizar camundongos Balb/c para avaliação de produção de IgG total e IgG2a, por meio de técnica de ELISA. Os animais imunizados com BL21/rMSP1a tiveram uma forte resposta humoral (IgG total e IgG2a), enquanto que os camundongos imunizados com a BL21/rMSP1b apresentaram uma fraca resposta após as três primeiras imunizações. Pelo Western blotting foi detectado, resposta de IgG total contra as proteínas rMSP1a e rMSP1b. Soros de camundongos imunizados com BL21/rMSP1a reagiram com a BL21 e rMSP1a com massas moleculares variando de 70 a 105 kDa e uma banda de 20 kDa sugerindo a quebra da proteína. Soros de animais imunizados com a BL21/rMSP1b reagiram com a BL21 e rMSP1b com massa molecular de 100 kDa. Os resultados deste trabalho confirmam o papel das MSP1a e MSP1b como adesinas no processo de invasão de eritrócitos e evidenciam a importância destas proteínas na elaboração de uma vacina de subunidades para o controle da anaplasmose bovina. Também demonstram que as BL21 expressando as rMSP1a e a rMSP1b na membrana externa são capazes de produzir resposta imune em camundongos