Association of the moet and opu-piv in the production of bovine embryos / Associação da moet e opu-piv na produção de embriões bovinos

It has been the aim to value, in Nelore cows, the association of the assisted reproduction MOET e OPU-PIV. For this, it has tested the ovarian superovulation (SOV) 48 to 60 h after the OPU (ovum pick-up) at a random phase of the estral cycle (OPU1) and the in vitro production (PIV) of recovered oocytes embryos (OPU2) in different moments after the prostaglandin F2? (PGF2?) application. The females (n=23) after the OPU1 received progestogen implant and 48 to 60 h after the OPU, then it has began the SOV, with FSH 180 mg / cows in 8 doses, for 4 days. In 6th and 7th applications of FSH, there were administered 500 µg of PGF2?  being the implants withdrawn in the 7th dose. After 12 h of the SOV, it was applied 25mg of LH to realize AI (artificial insemination) with fixed time. In the day of the embryos recovery 6 treatments were tested: T (0-144) (n=4), T (48-120) (n=5), T (48-96) (n=4), T (72-96) (n=3), T (96-72) (n=4), T (96-48) (n=3) which varied in accordance with moments of the PGF2?  administration and of OPU2 after the SOV. The PGF2?  administration in the embryo recovery (day 0) 0, 48, 72 and 96 h after the harvest and the OPU2 was 144, 96, 72 or 48 hours after the PGF2?. There was significant difference (p> 0,05) in the oocyte number when the near OPU of the PGF2?  was recovered, so that the recuperation in T (96-48) was significantly less when (48-96) was compared to

Objetivou-se avaliar, em vacas da raça Nelore, a associação das biotécnicas MOET e OPU-PIV. Para tanto, foram testadas a superovulação ovariana (SOV), iniciada 48 a 60 horas após a aspiração folicular, em fase aleatória do ciclo estral (OPU1), e a produção in vitro (PIV) de embriões de oócitos aspirados (OPU2) em diferentes momentos após a aplicação de prostaglandina F2? (PGF2?). As fêmeas (n=23), após a OPU1, receberam implante de progestágeno, e 48 a 60 horas após a OPU iniciou-se a SOV convencional, acrescida da aplicação de 25 mg de LH exógeno para realizar a IA (inseminação artificial) com tempo fixo. No dia da colheita dos embriões, os animais foram separados para testar seis tratamentos, sendo os grupos T(0-144) (n=4), T(48-120) (n=5), T(48-96) (n=4), T(72-96) (n=3), T(96-72) (n=4), T(96-48) (n=3), que variaram de acordo com os momentos da administração de prostaglandina e da OPU2 após a SOV. Aplicou-se prostaglandina no dia da colheita (dia 0) 0, 48, 72 e 96 horas após, realizando-se a OPU2 144, 96, 72 ou 48 horas após a prostaglandina. Houve diferença (p

Annual characteristics of estrous activity in wool and hair ewe lambs under subtropical conditions

The increased emphasis placed on lamb production in Brazil points to the need for a better knowledge of the annual pattern of reproductive activity in ewe lambs. This study evaluates the annual estrous activity pattern of hair and wool ewe lambs raised in southeast Brazil. Estrous characteristics were recorded for 12 months in ten Santa Inês and 21 Romney Marsh and Suffolk ewe lambs. Santa Inês ewe lambs exhibited a greater length of the normal estrous cycle (14 to 19 days) than Romney Marsh and Suffolk ewe lambs (17.0 ± 0.1 days vs. 16.5 ± 0.2 and 15.9 ± 0.2 days). All the ewe lambs presented a greater number of periods of estrus per animal per month for single estrous cycles (up to 26 days) during autumn and winter. During spring and summer there was a reduction of this number but this decline varied according to the breed. For Santa Inês ewe lambs the reduction was only significant in the summer. For wool ewe lambs the reduction was significant in both seasons but was more accentuated for Romney Marsh. The Romney Marsh ewe lambs had a more restricted breeding season than Suffolk and both presented optimal estrus activity in autumn and winter. Santa Inês ewe lambs had a continuous distribution of estrous cycles along the year, although presenting a reduction in the number of estrous periods in the summer. The ewe lambs of three breeds presented characteristics of sexual immaturity, like irregular estrous cycles and silent ovulations.

Em função do maior interesse pela ovinocultura de corte na região Sudeste do Brasil há necessidade de conhecer melhor o padrão anual da atividade reprodutiva das borregas. Esse estudo avaliou esse padrão anual em borregas deslanadas e lanadas criadas nessa região. A atividade cíclica reprodutiva foi avaliada durante 12 meses em dez borregas da raça Santa Inês e 21 borregas das raças Romney Marsh (11) e Suffolk (10). A duração dos ciclos estrais normais (14 a 19 dias) das fêmeas Santa Inês foi maior do que a duração observada nas fêmeas Romney Marsh e Suffolk (17,0 ± 0,1 dias vs. 16,5 ± 0,2 e 15,9 ± 0,2 dias). Todas as borregas apresentaram um elevado número de períodos de estros/animal/mês para ciclos estrais simples (até 26 dias) durante o outono e inverno. Houve redução desse número durante a primavera e o verão, mas esse declínio variou conforme a raça. Para as borregas Santa Inês essa redução só foi significativa no verão enquanto que para as fêmeas das raças lanadas, a redução foi significativa em ambas as estações e mais acentuada nas fêmeas Romney Marsh. As fêmeas dessa raça também apresentaram uma estação reprodutiva mais restrita do que as fêmeas Suffolk havendo uma concentração dos estros durante o outono e inverno para as fêmeas de ambas as raças. As fêmeas Santa Inês apresentaram uma distribuição equilibrada dos estros ao longo do ano embora tenha havido uma redução do número de período de estros durante o verão. As borregas das três raças apresentaram características de imaturidade sexual como ciclos estrais irregulares e ovulações silenciosas.

Annual characteristics of estrous activity in wool and hair ewe lambs under subtropical conditions

The increased emphasis placed on lamb production in Brazil points to the need for a better knowledge of the annual pattern of reproductive activity in ewe lambs. This study evaluates the annual estrous activity pattern of hair and wool ewe lambs raised in southeast Brazil. Estrous characteristics were recorded for 12 months in ten Santa Inês and 21 Romney Marsh and Suffolk ewe lambs. Santa Inês ewe lambs exhibited a greater length of the normal estrous cycle (14 to 19 days) than Romney Marsh and Suffolk ewe lambs (17.0 ± 0.1 days vs. 16.5 ± 0.2 and 15.9 ± 0.2 days). All the ewe lambs presented a greater number of periods of estrus per animal per month for single estrous cycles (up to 26 days) during autumn and winter. During spring and summer there was a reduction of this number but this decline varied according to the breed. For Santa Inês ewe lambs the reduction was only significant in the summer. For wool ewe lambs the reduction was significant in both seasons but was more accentuated for Romney Marsh. The Romney Marsh ewe lambs had a more restricted breeding season than Suffolk and both presented optimal estrus activity in autumn and winter. Santa Inês ewe lambs had a continuous distribution of estrous cycles along the year, although presenting a reduction in the number of estrous periods in the summer. The ewe lambs of three breeds presented characteristics of sexual immaturity, like irregular estrous cycles and silent ovulations.

Em função do maior interesse pela ovinocultura de corte na região Sudeste do Brasil há necessidade de conhecer melhor o padrão anual da atividade reprodutiva das borregas. Esse estudo avaliou esse padrão anual em borregas deslanadas e lanadas criadas nessa região. A atividade cíclica reprodutiva foi avaliada durante 12 meses em dez borregas da raça Santa Inês e 21 borregas das raças Romney Marsh (11) e Suffolk (10). A duração dos ciclos estrais normais (14 a 19 dias) das fêmeas Santa Inês foi maior do que a duração observada nas fêmeas Romney Marsh e Suffolk (17,0 ± 0,1 dias vs. 16,5 ± 0,2 e 15,9 ± 0,2 dias). Todas as borregas apresentaram um elevado número de períodos de estros/animal/mês para ciclos estrais simples (até 26 dias) durante o outono e inverno. Houve redução desse número durante a primavera e o verão, mas esse declínio variou conforme a raça. Para as borregas Santa Inês essa redução só foi significativa no verão enquanto que para as fêmeas das raças lanadas, a redução foi significativa em ambas as estações e mais acentuada nas fêmeas Romney Marsh. As fêmeas dessa raça também apresentaram uma estação reprodutiva mais restrita do que as fêmeas Suffolk havendo uma concentração dos estros durante o outono e inverno para as fêmeas de ambas as raças. As fêmeas Santa Inês apresentaram uma distribuição equilibrada dos estros ao longo do ano embora tenha havido uma redução do número de período de estros durante o verão. As borregas das três raças apresentaram características de imaturidade sexual como ciclos estrais irregulares e ovulações silenciosas.

Chromosomal abnormalities atearly stages of development in zebu embryos produced in vitro / Anomalias cromossômicas no início do desenvolvimento de embriões zebuínos produzidos in vitro

Bovine embryos produced in vitro (IVF) have a high incidence of chromosomal anomalies. However, such occurrence still was not determined in zebu embryos. The aim of the present study was to evaluate the frequency of chromosomal alterations of IVF zebu embryos. It was used IVF embryos of 2; 4; 8; 16 cells and compacted morulae derived from oocytes collected from ovaries of slaughtered Nelore cows. Morulae recovered from superovulated Nelore cows (IVP) were used as control. Embryonic cells were submitted to conventional procedures (Giemsa staining) and karyotype reading with an optical microscope. Differences between normal and abnormal karyotype was established using 2 test. It was found chromosomal anomalies in 29.9% (32/107) of IVF embryos and 13.0% (3/23) of IVP embryos (P>0.05). Also, incidence of chromosomal anomalies was not influenced by the stage of development of IVF embryos. Mixoploidy and polyploidy were the only chromosomal anomalies present in both, IVF and IVP embryos.From IVF embryos that showed chromosomal anomalies, 40.6% and 59.4% were male and female embryos, respectively (P>0.05). It was concluded that about one third IVF zebu embryos at early stages of development present chromosomal anomalies and their incidence is not related to a specific period of embryonic development.

Embriões bovinos produzidos in vitro (FIV) apresentam uma alta incidência de anomalias cromossômicas. Porém, ainda não foi determinado se esse quadro acontece em embriões zebuínos. O presente trabalho objetivou avaliar a freqüência de alterações cromossômicas de embriões FIV, de origem zebuína. Foram utilizados embriões FIV nos estágios de 2; 4; 8; 16 células e mórulas, produzidos a partir de oócitos coletados de ovários de vacas Nelore abatidas. Como controle foram utilizadas mórulas recuperadas de vacas Nelore superovuladas (PIV). A leitura do cariótipo foi realizada em microscópio ótico após preparo das amostras pelo método de coloração convencional (Giemsa) e as diferenças foram estabelecidas pelo teste de 2 ou 2 com correção de Yates. Foram encontradas anomalias cromossômicas em 29,9% (32/107) dos embriões FIV e 13,0% (3/23) dos embriões PIV analisados (P>0,05). Igualmente, a incidência de anomalias cromossômicas não foi influenciada pelo estágio de desenvolvimento dos embriões. As alterações cromossômicas encontradas, tanto nos embriões FIV como nos PIV, foram mixoploidias e poliploidias. Dos embriões FIV que apresentaram anomalias cromossômicas, 59,4% eram do sexo feminino e 40,6% do masculino (P>0,05). Concluiu-se que aproximadamente um terço dos embriões zebuínos FIV apresenta anomalias cromossômicas e sua incidência não está associada a um estágio de desenvolv

Ovarian response of Nelore cows superovulated with FSH after passive immunization against bovine follicular fluid / Indução da superovulação de vacas Nelore passivamente imunizadas contra líquido folicular bovino

The aim of the present study was to evaluate the ovarian response of cows superovulated with reduced dose of FSH following passive immunization against bovine follicular fluid. Eighteen Nelore cows were used in a cross over design with the following treatments: iv injection of 80 ml of ovine anti- bovine follicular fluid (treatment 1) or ovine non immune serum (treatment 2 and 3). Six h later, cows were superovulated with 200 (treatment 1 and 2) or 400 UI (treatment 3) FSH-LH hormone (Pluset, Lab. Serono) administered in decreasing doses during 4 days. On the third day, the animais received a luteolitic dose of cloprostenol (Veteglan, Lab. Serono) and w"ere inseminated on the induced estrus. The ovarian response was evaluated 6 to 8 days after insemination by counting the corpora lutea (CL) with ultrasound scanning and by evaluation of the embryos recovered using standard techniques of cervical embryo collect. The rate of good response to superovulation (>3CL) of the treatments 1 (94.4%) and 3 (83.3%) was higher and statistically different (P 0.05) from treatment 2 (50.0%). Likewise, tlie mean number of embryos recovered from treatments 1 (4.1 ± 0.9) and 3 (5.2 ± 0.9) was higher and statistically different (P 0.05) from treatment 2 (2.1 ± 0.5). From these results, it can be concluded that passive immunization against bovine follicular fluid increase the ovarian sensiti

O presente estudo objetivou avaliar a resposta ovariana de vacas Nelore supcrovuladas com dose reduzida de FSH após imunização passiva contra líquido folicular bovino. Em um ensaio de reversão, 18 vacas Nelore receberam os seguintes tratamentos: injeção intravenosa de 80 ml de anti-líquido folicular bovino produzido cm ovelhas castradas (tratamento 1) ou soro ovino não imune (tratamentos 2 e 3). Seis horas após, os animais receberam 200 (tratamentos 1 e 2) ou 400 (tratamento 3) UI de FSH-LH (Pluset, Lab. Serono) administradas em doses decrescentes durante 4 dias. No terceiro dia, os animais receberam uma dose luteolítica de cloprostenol (Veteglan, Lab. Serono) e foram inseminados no cio induzido. A resposta ovariana foi avaliada entre os dias 6 e 8 após a inseminação pela discriminação dos corpos lúteos (C"L) utilizando ultra-sonografia e pelo número de embriões recuperados após lavagem dos cornos uterinos utilizando o método cervical convencional. A taxa de animais que responderam com mais de 3 CL ao tratamento de superovulação foi maior (P 0,05) nos tratamentos 1 (94,4%) e 3 (83,3%) que no tratamento 2 (50,0%). Igualmente, o número médio de embriões recuperados foi maior (P 0,05) nos tratamentos 1 (4.1 ± 0.9) e 3 (5,2 + 0,9) que no tratamento 2 (2.1 ± 0,5). Em função desses resultados pode-se concluir que, em vacas Nelore, a imunização passiva contra líquido folicular a

Ovarian response of Nelore cows superovulated with FSH after passive immunization against bovine follicular fluid / Indução da superovulação de vacas Nelore passivamente imunizadas contra líquido folicular bovino

The aim of the present study was to evaluate the ovarian response of cows superovulated with reduced dose of FSH following passive immunization against bovine follicular fluid. Eighteen Nelore cows were used in a cross over design with the following treatments: iv injection of 80 ml of ovine anti- bovine follicular fluid (treatment 1) or ovine non immune serum (treatment 2 and 3). Six h later, cows were superovulated with 200 (treatment 1 and 2) or 400 UI (treatment 3) FSH-LH hormone (Pluset, Lab. Serono) administered in decreasing doses during 4 days. On the third day, the animais received a luteolitic dose of cloprostenol (Veteglan, Lab. Serono) and w"ere inseminated on the induced estrus. The ovarian response was evaluated 6 to 8 days after insemination by counting the corpora lutea (CL) with ultrasound scanning and by evaluation of the embryos recovered using standard techniques of cervical embryo collect. The rate of good response to superovulation (>3CL) of the treatments 1 (94.4%) and 3 (83.3%) was higher and statistically different (P 0.05) from treatment 2 (50.0%). Likewise, tlie mean number of embryos recovered from treatments 1 (4.1 ± 0.9) and 3 (5.2 ± 0.9) was higher and statistically different (P 0.05) from treatment 2 (2.1 ± 0.5). From these results, it can be concluded that passive immunization against bovine follicular fluid increase the ovarian sensiti

O presente estudo objetivou avaliar a resposta ovariana de vacas Nelore supcrovuladas com dose reduzida de FSH após imunização passiva contra líquido folicular bovino. Em um ensaio de reversão, 18 vacas Nelore receberam os seguintes tratamentos: injeção intravenosa de 80 ml de anti-líquido folicular bovino produzido cm ovelhas castradas (tratamento 1) ou soro ovino não imune (tratamentos 2 e 3). Seis horas após, os animais receberam 200 (tratamentos 1 e 2) ou 400 (tratamento 3) UI de FSH-LH (Pluset, Lab. Serono) administradas em doses decrescentes durante 4 dias. No terceiro dia, os animais receberam uma dose luteolítica de cloprostenol (Veteglan, Lab. Serono) e foram inseminados no cio induzido. A resposta ovariana foi avaliada entre os dias 6 e 8 após a inseminação pela discriminação dos corpos lúteos (C"L) utilizando ultra-sonografia e pelo número de embriões recuperados após lavagem dos cornos uterinos utilizando o método cervical convencional. A taxa de animais que responderam com mais de 3 CL ao tratamento de superovulação foi maior (P 0,05) nos tratamentos 1 (94,4%) e 3 (83,3%) que no tratamento 2 (50,0%). Igualmente, o número médio de embriões recuperados foi maior (P 0,05) nos tratamentos 1 (4.1 ± 0.9) e 3 (5,2 + 0,9) que no tratamento 2 (2.1 ± 0,5). Em função desses resultados pode-se concluir que, em vacas Nelore, a imunização passiva contra líquido folicular a

Selection of Nelore bulls on in vitro production of embryos / Seleção de reprodutores bovinos da raça nelore na produção in vitro de embriões

This study evaluated the bull effect on the cleavage (CR) and blastocyst rate (BLR) by verifying which of these parameters can be used for selection of semen from Nelore bulls by in vitro production (IVP) of embryos. The immature oocytes from slaughterhouse cows ovaries were matured in vitro in TCM 199 medium with 10% estrous cow serum (ECS), 5µg/ml FSH and 5µg/ml LH. After 24 h of culture, the mature oocytes were incubated with frozenthawed semen from 4 Nelore bulls (A, B, C and D), which were submitted to the washing procedure and the sperm concentration adjusted to 5 x 106 cells/ml. The oocytes-sperm incubation lasted 18-21 h and the TALP-IVF supplemented with 30µg/ml heparin was the culture medium used. After this, the oocytes were transferred into microdroplets of Ménezo medium with 10% ECS and bovine oviduct epithelial cells in suspension and were further cultured by 9 days. All the cultures were performed at 38.5C with 5% CO2 in air and the data were analysed by chi-square test. There was no difference (P>0.05) among the bulls regarding to CR (A= 61.2%; B= 61.3%; C= 66.1%; D= 64.1%). In terms off BLR, bull C (4.1%) was significantly different from bulls A (10.6%), B (12.1%) and C (18.8%), which were not different to each other. The results indicated that the selection of bulls for IVP of bovine embryos should be done by using the blastocyst rate as tile goal.

O presente trabalho avaliou o efeito do reprodutor nas taxas de clivagem (TC) e de blastocistos (TBL) com a finalidade de verificar qual desses parâmetros serviria para selecionar o sêmen de reprodutores da raça Nelore para produção in vitro (PIV) de embriões. Oócitos imaturos provenientes de ovários de vacas de abatedouro foram submetidos a maturação in vitro utilizando o meio TCM 199, acrescido de 10% de soro de vaca em estro (SVE),  5µg/ml de FSH e 5µg/ml de LH. Após 24 h de cultura, os oócitos maturos foram incubados com sêmen descongelado de 4 reprodutores da raça Nelore (A, B, C e D), previamente submetidos ao procedimento de lavagem e a concentração espermática ajustada para 5 x 106 células/ml. A incubação dos oócitos-sêmen teve a duração de 18 a 21 h e o meio de cultura utilizado foi o TALP-FIV suplementado com 30µg/ml de heparina. Após este período, os oócitos foram transferidos para placas contendo microgotas de meio Ménezo suplementado com 10% de SVE e células epiteliais do oviduto bovino em suspensão, cobertas com óleo de silicone, permanecendo em cultura por mais 9 dias. Todas as culturas foram realizadas a 38,5ºC em atmosfera com 5% de CO2 e os dados foram analisados pelo Teste do Quíquadrado. Não houve diferença (P>0,05) entre os reprodutores com relação a TC (A= 61,2%; B= 61,3 %; C= 66,1%; D= 64,1%). Com relação a TBL, o reprodutor C (4,1%) foi inferior (P<

Selection of Nelore bulls on in vitro production of embryos / Seleção de reprodutores bovinos da raça nelore na produção in vitro de embriões

This study evaluated the bull effect on the cleavage (CR) and blastocyst rate (BLR) by verifying which of these parameters can be used for selection of semen from Nelore bulls by in vitro production (IVP) of embryos. The immature oocytes from slaughterhouse cows ovaries were matured in vitro in TCM 199 medium with 10% estrous cow serum (ECS), 5µg/ml FSH and 5µg/ml LH. After 24 h of culture, the mature oocytes were incubated with frozenthawed semen from 4 Nelore bulls (A, B, C and D), which were submitted to the washing procedure and the sperm concentration adjusted to 5 x 106 cells/ml. The oocytes-sperm incubation lasted 18-21 h and the TALP-IVF supplemented with 30µg/ml heparin was the culture medium used. After this, the oocytes were transferred into microdroplets of Ménezo medium with 10% ECS and bovine oviduct epithelial cells in suspension and were further cultured by 9 days. All the cultures were performed at 38.5C with 5% CO2 in air and the data were analysed by chi-square test. There was no difference (P>0.05) among the bulls regarding to CR (A= 61.2%; B= 61.3%; C= 66.1%; D= 64.1%). In terms off BLR, bull C (4.1%) was significantly different from bulls A (10.6%), B (12.1%) and C (18.8%), which were not different to each other. The results indicated that the selection of bulls for IVP of bovine embryos should be done by using the blastocyst rate as tile goal.

O presente trabalho avaliou o efeito do reprodutor nas taxas de clivagem (TC) e de blastocistos (TBL) com a finalidade de verificar qual desses parâmetros serviria para selecionar o sêmen de reprodutores da raça Nelore para produção in vitro (PIV) de embriões. Oócitos imaturos provenientes de ovários de vacas de abatedouro foram submetidos a maturação in vitro utilizando o meio TCM 199, acrescido de 10% de soro de vaca em estro (SVE),  5µg/ml de FSH e 5µg/ml de LH. Após 24 h de cultura, os oócitos maturos foram incubados com sêmen descongelado de 4 reprodutores da raça Nelore (A, B, C e D), previamente submetidos ao procedimento de lavagem e a concentração espermática ajustada para 5 x 106 células/ml. A incubação dos oócitos-sêmen teve a duração de 18 a 21 h e o meio de cultura utilizado foi o TALP-FIV suplementado com 30µg/ml de heparina. Após este período, os oócitos foram transferidos para placas contendo microgotas de meio Ménezo suplementado com 10% de SVE e células epiteliais do oviduto bovino em suspensão, cobertas com óleo de silicone, permanecendo em cultura por mais 9 dias. Todas as culturas foram realizadas a 38,5ºC em atmosfera com 5% de CO2 e os dados foram analisados pelo Teste do Quíquadrado. Não houve diferença (P>0,05) entre os reprodutores com relação a TC (A= 61,2%; B= 61,3 %; C= 66,1%; D= 64,1%). Com relação a TBL, o reprodutor C (4,1%) foi inferior (P<

Chromosomal abnormalities atearly stages of development in zebu embryos produced in vitro / Anomalias cromossômicas no início do desenvolvimento de embriões zebuínos produzidos in vitro

Bovine embryos produced in vitro (IVF) have a high incidence of chromosomal anomalies. However, such occurrence still was not determined in zebu embryos. The aim of the present study was to evaluate the frequency of chromosomal alterations of IVF zebu embryos. It was used IVF embryos of 2; 4; 8; 16 cells and compacted morulae derived from oocytes collected from ovaries of slaughtered Nelore cows. Morulae recovered from superovulated Nelore cows (IVP) were used as control. Embryonic cells were submitted to conventional procedures (Giemsa staining) and karyotype reading with an optical microscope. Differences between normal and abnormal karyotype was established using 2 test. It was found chromosomal anomalies in 29.9% (32/107) of IVF embryos and 13.0% (3/23) of IVP embryos (P>0.05). Also, incidence of chromosomal anomalies was not influenced by the stage of development of IVF embryos. Mixoploidy and polyploidy were the only chromosomal anomalies present in both, IVF and IVP embryos.From IVF embryos that showed chromosomal anomalies, 40.6% and 59.4% were male and female embryos, respectively (P>0.05). It was concluded that about one third IVF zebu embryos at early stages of development present chromosomal anomalies and their incidence is not related to a specific period of embryonic development.

Embriões bovinos produzidos in vitro (FIV) apresentam uma alta incidência de anomalias cromossômicas. Porém, ainda não foi determinado se esse quadro acontece em embriões zebuínos. O presente trabalho objetivou avaliar a freqüência de alterações cromossômicas de embriões FIV, de origem zebuína. Foram utilizados embriões FIV nos estágios de 2; 4; 8; 16 células e mórulas, produzidos a partir de oócitos coletados de ovários de vacas Nelore abatidas. Como controle foram utilizadas mórulas recuperadas de vacas Nelore superovuladas (PIV). A leitura do cariótipo foi realizada em microscópio ótico após preparo das amostras pelo método de coloração convencional (Giemsa) e as diferenças foram estabelecidas pelo teste de 2 ou 2 com correção de Yates. Foram encontradas anomalias cromossômicas em 29,9% (32/107) dos embriões FIV e 13,0% (3/23) dos embriões PIV analisados (P>0,05). Igualmente, a incidência de anomalias cromossômicas não foi influenciada pelo estágio de desenvolvimento dos embriões. As alterações cromossômicas encontradas, tanto nos embriões FIV como nos PIV, foram mixoploidias e poliploidias. Dos embriões FIV que apresentaram anomalias cromossômicas, 59,4% eram do sexo feminino e 40,6% do masculino (P>0,05). Concluiu-se que aproximadamente um terço dos embriões zebuínos FIV apresenta anomalias cromossômicas e sua incidência não está associada a um estágio de desenvolv

Evaluation of oocyte maturation conditions and bull effect on the in vitro bovine embryo production / Avaliação das condições de maturação oocitária e do efeito do reprodutor na produção in vitro de embriões bovinos

The conditions of in vitro maturation of bovine oocytes (Exp. I) and bull effect (Exp. II) on cleavage (CR) and the in vitro morulae and blastocysts (MO/BL) rates were evaluated. Imatured oocytes were matured in vitro under different conditions: B-199 medium with 5% estrous cow serum (ECS), 5% fetal calf serum (FCS) and granulosa cells (T1/Exp. I) or B-199 medium with 10% FCS, 14 IU/ml PMSG and 7 IU/ml hCG (T2/Exp I). After 24 h culture, the mature oocytes were inseminated with frozen-thawed semen from two bulls (R1 and R2/Exp. II). In the Exp. I, the T1 and T2 oocytes were inseminated with semen from R1/Exp. II and in the exp. II the semen from both bulls inseminated T1/Exp. I oocytes. After 48 h, the 2-4 cells embryos were transferred into embryo culture droplets and were further cultured for 9 days. The CR of T2/Exp I was higher (p 0.01) than T1/Exp. I. There was a significant difference (p 0.05) between bulls on CR and Mo/Bl production. The use of hormones in a maturation medium has no effect on embryo production, however the procedure seems to be simpler than with granulosa cells. The use of semen from different bulls for in vitro fertilization has affected the subsequent in vitro production of embryos.

Avaliaram-se as condições de cultura para maturação dos oócitos (Exp. I) e o efeito do reprodutor (Exp. II) sobre as taxas de clivagem (TC) e de mórulas e blastocistos (MO/BL) produzidos in vitro. Oócitos imaturos foram submetidos a maturação in vitro sob diferentes condições: meio B-199, acrescido de 5% de soro de vaca em estro (SVE), 5% de soro fetal bovino (SFB) e células da granulosa (T1/Exp. I) ou meio B-199, acrescido de 10% de SFB, 14 UI/ml de PMSG e 7 UI/ml de hCG (T2/Exp I). Após 24 h de cultura, os oócitos maturos foram inseminados com sêmen descongelado de dois reprodutores (R1 e R2 /Exp. II) e, após 48 h de incubação, os embriões de 2 e 4 células foram transferidos para placas de cultivo in vitro, onde permaneceram em cultura por mais 9 dias. No Exp. I, os oócitos de T1 e T2 foram inseminados com sêmen do R1/Exp. II. No Exp. II, os oócitos do T1/Exp. I foram inseminados com sêmen de R1 e R2/Exp. II. No Exp. I, a TC foi superior (p 0,01) para T2, quando comparado com T1. A produção de MO/BL não foi diferente (p>;0,05) entre tratamentos. No Exp. II, a TC e a taxa de MO/BL diferiram (p 0,05) para cada reprodutor. A adição de hormônios no meio de maturação, embora não tenha interferido na produção de embriões, parece ser um procedimento mais prático que o uso de células da granulosa. A utilização de sêmen de diferentes reprodutores afetou o subseqüente desenvol

ASSOCIATION OF THE MOET AND OPU-PIV IN THE PRODUCTION OF BOVINE EMBRYOS / ASSOCIAÇÃO DA MOET E OPU-PIV NA PRODUÇÃO DE EMBRIÕES BOVINOS

It has been the aim to value, in Nelore cows, the association of the assisted reproduction MOET e OPU-PIV. For this, it has tested the ovarian superovulation (SOV) 48 to 60 h after the OPU (ovum pick-up) at a random phase of the estral cycle (OPU1) and the in vitro production (PIV) of recovered oocytes embryos (OPU2) in different moments after the prostaglandin F2? (PGF2?) application. The females (n=23) after the OPU1 received progestogen implant and 48 to 60 h after the OPU, then it has began the SOV, with FSH 180 mg / cows in 8 doses, for 4 days. In 6th and 7th applications of FSH, there were administered 500 µg of PGF2?  being the implants withdrawn in the 7th dose. After 12 h of the SOV, it was applied 25mg of LH to realize AI (artificial insemination) with fixed time. In the day of the embryos recovery 6 treatments were tested: T (0-144) (n=4), T (48-120) (n=5), T (48-96) (n=4), T (72-96) (n=3), T (96-72) (n=4), T (96-48) (n=3) which varied in accordance with moments of the PGF2?  administration and of OPU2 after the SOV. The PGF2?  administration in the embryo recovery (day 0) 0, 48, 72 and 96 h after the harvest and the OPU2 was 144, 96, 72 or 48 hours after the PGF2?. There was significant difference (p> 0,05) in the oocyte number when the near OPU of the PGF2?  was recovered, so that the recuperation in T (96-48) was significantly less when (48-96) was compared to

Objetivou-se avaliar, em vacas da raça Nelore, a associação das biotécnicas MOET e OPU-PIV. Para tanto, foram testadas a superovulação ovariana (SOV), iniciada 48 a 60 horas após a aspiração folicular, em fase aleatória do ciclo estral (OPU1), e a produção in vitro (PIV) de embriões de oócitos aspirados (OPU2) em diferentes momentos após a aplicação de prostaglandina F2? (PGF2?). As fêmeas (n=23), após a OPU1, receberam implante de progestágeno, e 48 a 60 horas após a OPU iniciou-se a SOV convencional, acrescida da aplicação de 25 mg de LH exógeno para realizar a IA (inseminação artificial) com tempo fixo. No dia da colheita dos embriões, os animais foram separados para testar seis tratamentos, sendo os grupos T(0-144) (n=4), T(48-120) (n=5), T(48-96) (n=4), T(72-96) (n=3), T(96-72) (n=4), T(96-48) (n=3), que variaram de acordo com os momentos da administração de prostaglandina e da OPU2 após a SOV. Aplicou-se prostaglandina no dia da colheita (dia 0) 0, 48, 72 e 96 horas após, realizando-se a OPU2 144, 96, 72 ou 48 horas após a prostaglandina. Houve diferença (p