The antifibrotic and anti-inflammatory effects of FZHY prescription on the kidney in rats after unilateral ureteral obstruction

Purpose: To explore the potential impact of traditional Chinese herb FuZhengHuaYuJiangZhuTongLuo recipe (FZHY) on renal interstitial fibrosis (RIF) in chronic kidney disease (CKD) at cellular and molecular levels. Methods: Unilateral ureteral obstruction (UUO) rats were established as the RIF mo el in vivo. The rats were given intragastric administration with FZHY once a day for consecutive 7, 14 and 21 days, respectively. The renal function parameters and inflammation indicators in kidney tissues were measured using enzyme-linked immunosorbent assay, the CD4+/CD8+ T cells in peripheral blood was detected using flow cytometry, the renal fibrosis degree was estimated using Masson's staining, and the fibrosis-related genes' expression was detected using quantitative polymerase chain reaction, western blotting, and immunohistochemistry analyses. Results: FZHY prescription reduced the serum creatinine and blood urea nitrogen, decreased the levels of c-reactive protein, interleukin-1, interleukin-6 and tumor necrosis factor-α in kidney tissues, and increased the ratio of CD4+/CD8+ T cells in peripheral blood. FZHY prescription suppressed the renal tissue fibrosis and reduced the levels of laminin, fibronectin, collagen I and collagen III. Conclusions: FZHY prescription suppressed the renal fibrosis and improved the condition of "Healthy Qi Deficiency and Evil Qi Excess" in rats with UUO, which may provide an effective method for CKD treatment.

Detection of antigens in paraffin sections of worms and snails infected by Angiostrongylus cantonensis by immunofluorescence reaction / Detecção de antígenos em cortes parafinados de vermes e caramujos infectados por Angiostrongylus cantonensis pela reação de imunofluorescência

The Indirect Immunofluorescence Assay (IFA) was used to identify stage-specific antigenic structures in paraffin sections of female larvae and worms and snails tissues, infected with third stage larvae of Angiostrongylus cantonensis. Sera from eosinophilic meningitis cases were used to assess reactivity. Non-reactive sera from patients with other parasitic diseases and from individuals without other etiologies were used as controls for cross-reactivity. Larvae and worms showed high reactivity to IgG antibodies. IgM antibodies reacted with low intensity only to larvae. Fluorescent reactions were observed in the cuticles and internal structures on worms sections, with a marked reaction in the uterus content. In the snail tissues, the larvae were found exclusively inside the granulomas, with fluorescent markings in the cuticles of the larvae and inside the granulomatous tissues. This fluorescent pattern suggests the presence of excretory/secretory antigens distributed throughout the granulomas. Expressive cross-reactivity occurred in sera from patients with other parasitic diseases, especially strongyloidiasis. The use of IFA applied to paraffin sections to identify structures with antigenic potential and the study of new serological markers, can contribute to the improvement of the laboratory diagnosis of eosinophilic meningitis. (AU)

A Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) foi utilizada para localizar antígenos em estruturas estágio-específicas em cortes parafinados de vermes fêmeas e em tecidos de caramujos do Gênero Biomphalaria infectados com larvas de terceiro estágio de Angiostrongylus cantonensis. Soros de casos confirmados de meningite eosinfílica foram usados para avaliação da reatividade. Soros não reagentes de casos suspeitos; de pacientes com outras parasitoses e de indivíduos sem outras etiologias foram utilizados como controle de reatividade cruzada. Anticorpos da classe IgG foram reativos para antígenos presentes nos dois estágios e, anticorpos IgM somente para o estágio larvário. Nos cortes de vermes, as marcações fluorescentes foram assinaladas nas cutículas e estruturas internas, com acentuada marcação para os conteúdos uterinos. Nos tecidos dos caramujos as larvas foram encontradas exclusivamente no interior dos granulomas, com marcações fluorescentes nas cutículas das larvas e no interior dos tecidos granulomatosos. O padrão de fluorescência no granuloma sugere a marcação de antígenos excretores/secretores. Reatividade cruzada mais expressiva ocorreu com anticorpos presentes em soros de pacientes com outras parasitoses, com destaque para estrongiloidíase. A RIFI em cortes parafinados abre novas perspectivas para identificação de antígenos e de marcadores sorológicos, que possam ser aplicados no aprimoramento do diagnóstico laboratorial da meningite eosinofílica. (AU)

Imunohematologia veterinária: antígenos eritrocitários caninos / Veterinary immunohematology: canine erythrocyte antigen / Inmunohematología veterinaria: antígenos eritrocitarios caninos

A imunohematologia veterinária vem ganhando interesse nos últimos anos devido a maior acessibilidade a tecnologias de detecção de antígenos e anticorpos, interesse dos donos e médicos veterinários em buscar uma melhor qualidade de vida para os animais e as necessidades de transfusões com o menor índice possível de reações indesejadas. Os cães possuem antígenos presentes na membrana de suas células vermelhas, podendo causar reações durante e após transfusões. Diferentemente de humanos e felinos, cães não possuem anticorpos naturais para os principais antígenos, a priori podendo ser transfundidos com qualquer tipo sanguíneo sem consequências posteriores, porém, se submetidos a uma segunda transfusão, sendo essa de um tipo sanguíneo incompatível e previamente sensibilizados, as chances de ocorrer reações transfusionais graves aumentam drasticamente, ocasionando danos ao animal, podendo levá-lo à morte. Por conta desses riscos se faz necessário uma maior atenção aos tipos sanguíneos desses animais onde 8 sistemas são reconhecidos internacionalmente classificados como sistema DEA, sendo eles DEA 1 e seus subtipos (DEA 1.1; DEA1.2; DEA 1.3); DEA 3; DEA 4; DEA 5; DEA 6; DEA 7 e DEA 8, e recentemente um novo sistema denominado Dal. Não há disponível ainda soros para os sistemas DEA 6 e DEA 8, tornando a pesquisa sobre esses antígenos dificultosa.(AU)

Veterinary immunohematology is gaining interest in recent years due to greater accessibility to antigen and antibody detection technologies, the interests of pet owners and veterinarians in seeking a better quality of life for animals, and requirement of transfusions with the lowest possible rate of collateral reactions. Dogs have antigens present in the membrane of their red blood cells that can cause reactions during and after transfusions. Unlike humans and cats, dogs do not have natural antibodies to the key antigens, and a priori they can be transfused with any type of blood without any further consequences. However, if they are ever subjected to a second transfusion, if using incompatible blood types and being previously sensitized, the likelihood of having serious transfusion reactions drastically increase, causing damage to the animal, which may even lead it to death. Due to those risks, greater attention is required to the blood type of those animals, which present 8 systems, internationally recognized and classified as the DEA system, namely DEA 1 and its subtypes (DEA 1.1; DEA 1.2; DEA 1.3); DEA 3; DEA 4; DEA 5; DEA 6; DEA 7 and DEA 8, and recently a new system referred to as Dal. No serum is yet available for DEA 6 and DEA 8 systems, hindering the research on those antigens.(AU)

La inmunohematología veterinaria ha ganado atención en los últimos años debido mayor accesibilidad a tecnologías de detección de antígenos y anticuerpos, interés de dueños y médicos veterinarios en buscar mejor calidad de vida para los animales y las necesidades de transfusiones con menor índice posible de reacciones indeseadas. Los perros poseen antígenos presentes en la membrana de sus células rojas, pudiendo causar reacciones durante y después de transfusiones. Diferentemente de humanos y felinos, perros no tienen anticuerpos naturales para los principales antígenos, a priori, pudiendo ser transfundidos con cualquier tipo de sangre sin consecuencias posteriores, todavía, si sometidos a una segunda transfusión, siendo esa de un tipo sanguíneo incompatible y previamente sensibilizados, la posibilidad de ocurrir reacciones transfusional grave aumenta drásticamente, ocasionando daños al animal, pudiendo llevarlo a la muerte. Por esos riesgos se hace necesario más atención a los tipos sanguíneos de esos animales, donde 8 sistemas son reconocidos internacionalmente y clasificados como sistema DEA, siendo ellos DEA 1 y sus subtipos (DEA 1.1; DEA 1.2; DEA 1.3); DEA 3; DEA 4; DEA 5; DEA 6; DEA 7 y DEA 8, y recién un nuevo sistema denominado Dal. No hay aún disponible sueros para los sistemas DEA 6 y DEA 8, haciendo dificultosa la investigación sobre esos antígenos.(AU)

Imunohematologia veterinária: antígenos eritrocitários caninos / Veterinary immunohematology: canine erythrocyte antigen / Inmunohematología veterinaria: antígenos eritrocitarios caninos

A imunohematologia veterinária vem ganhando interesse nos últimos anos devido a maior acessibilidade a tecnologias de detecção de antígenos e anticorpos, interesse dos donos e médicos veterinários em buscar uma melhor qualidade de vida para os animais e as necessidades de transfusões com o menor índice possível de reações indesejadas. Os cães possuem antígenos presentes na membrana de suas células vermelhas, podendo causar reações durante e após transfusões. Diferentemente de humanos e felinos, cães não possuem anticorpos naturais para os principais antígenos, a priori podendo ser transfundidos com qualquer tipo sanguíneo sem consequências posteriores, porém, se submetidos a uma segunda transfusão, sendo essa de um tipo sanguíneo incompatível e previamente sensibilizados, as chances de ocorrer reações transfusionais graves aumentam drasticamente, ocasionando danos ao animal, podendo levá-lo à morte. Por conta desses riscos se faz necessário uma maior atenção aos tipos sanguíneos desses animais onde 8 sistemas são reconhecidos internacionalmente classificados como sistema DEA, sendo eles DEA 1 e seus subtipos (DEA 1.1; DEA1.2; DEA 1.3); DEA 3; DEA 4; DEA 5; DEA 6; DEA 7 e DEA 8, e recentemente um novo sistema denominado Dal. Não há disponível ainda soros para os sistemas DEA 6 e DEA 8, tornando a pesquisa sobre esses antígenos dificultosa.(AU)

Veterinary immunohematology is gaining interest in recent years due to greater accessibility to antigen and antibody detection technologies, the interests of pet owners and veterinarians in seeking a better quality of life for animals, and requirement of transfusions with the lowest possible rate of collateral reactions. Dogs have antigens present in the membrane of their red blood cells that can cause reactions during and after transfusions. Unlike humans and cats, dogs do not have natural antibodies to the key antigens, and a priori they can be transfused with any type of blood without any further consequences. However, if they are ever subjected to a second transfusion, if using incompatible blood types and being previously sensitized, the likelihood of having serious transfusion reactions drastically increase, causing damage to the animal, which may even lead it to death. Due to those risks, greater attention is required to the blood type of those animals, which present 8 systems, internationally recognized and classified as the DEA system, namely DEA 1 and its subtypes (DEA 1.1; DEA 1.2; DEA 1.3); DEA 3; DEA 4; DEA 5; DEA 6; DEA 7 and DEA 8, and recently a new system referred to as Dal. No serum is yet available for DEA 6 and DEA 8 systems, hindering the research on those antigens.(AU)

La inmunohematología veterinaria ha ganado atención en los últimos años debido mayor accesibilidad a tecnologías de detección de antígenos y anticuerpos, interés de dueños y médicos veterinarios en buscar mejor calidad de vida para los animales y las necesidades de transfusiones con menor índice posible de reacciones indeseadas. Los perros poseen antígenos presentes en la membrana de sus células rojas, pudiendo causar reacciones durante y después de transfusiones. Diferentemente de humanos y felinos, perros no tienen anticuerpos naturales para los principales antígenos, a priori, pudiendo ser transfundidos con cualquier tipo de sangre sin consecuencias posteriores, todavía, si sometidos a una segunda transfusión, siendo esa de un tipo sanguíneo incompatible y previamente sensibilizados, la posibilidad de ocurrir reacciones transfusional grave aumenta drásticamente, ocasionando daños al animal, pudiendo llevarlo a la muerte. Por esos riesgos se hace necesario más atención a los tipos sanguíneos de esos animales, donde 8 sistemas son reconocidos internacionalmente y clasificados como sistema DEA, siendo ellos DEA 1 y sus subtipos (DEA 1.1; DEA 1.2; DEA 1.3); DEA 3; DEA 4; DEA 5; DEA 6; DEA 7 y DEA 8, y recién un nuevo sistema denominado Dal. No hay aún disponible sueros para los sistemas DEA 6 y DEA 8, haciendo dificultosa la investigación sobre esos antígenos.(AU)

Domestic cats blood types frequency from Pará state, Brazil / Frequência dos tipos sanguíneos de gatos domésticos oriundos do estado do Pará, Brasil

In domestic cats, blood group AB consists of three blood types A, B and AB. A preliminary identification by typing technique is essential to minimize the occurrence of transfusion reactions and neonatal isoerythrolysis. Therefore, the aim of this study was to determine the frequency of blood types and estimate the probability of random transfusion reactions in domestic cats from Pará state, Brazil. Two-hundred thirty five animals were examined in Belém and Castanhal municipalities. Blood samples were collected by puncture of the cephalic or jugular vein, stored in EDTA tubes and refrigerated until analysis. The hemagglutination and reverse typing techniques were used to confirm the blood types of cats. Type A is the most frequently detected (98.3%), followed by type AB (1.28%) and B (0.42%). Likelihood of adverse reactions in random transfusion was 2.09%, with 1.67% mild to moderate and 0.42% potentially fatal. The results showed a higher frequency of A blood type and that the frequency of AB type was higher than B type. In conclusion, to know the frequency of the blood types according to geographic region minimizes the risk of transfusion reactions.

Em felinos domésticos, o grupo sanguíneo AB é constituído por três tipos de sangue A, B e AB. A identificação prévia, por meio da técnica de tipagem, é essencial para minimizar a ocorrência de reações transfusionais e isoeritrólise neonatal. Este estudo teve por objetivos determinar a frequência dos tipos sanguíneos e estimar a probabilidade de ocorrência de reações transfusionais aleatórias em gatos domésticos oriundos do estado do Pará, Brasil. Foram utilizados 235 animais domiciliados nos municípios de Belém e Castanhal. As amostras de sangue foram coletadas por punção da veia cefálica ou jugular, armazenadas em tubos com EDTA e refrigeradas até as análises. As técnicas de hemaglutinação e tipagem reversa foram utilizadas para confirmar os tipos sanguíneos dos felinos. O tipo A foi ao mais detectado (98,3%), seguido pelo tipo AB (1,28%) e B (0,42%). A probabilidade de ocorrência de reações adversas em transfusões aleatórias foi de 2,09%, sendo 1,67% leves a moderadas e 0,42% potencialmente fatais. Os resultados encontrados demonstram que na população de felinos estudada há uma maior frequência de gatos do tipo A e que a frequência do tipo AB foi maior que o tipo B. Em conclusão, conhecer a frequência dos tipos sanguíneos de acordo com a região geográfica minimiza o risco de reações transfusionais.

Domestic cats blood types frequency from Pará state, Brazil / Frequência dos tipos sanguíneos de gatos domésticos oriundos do estado do Pará, Brasil

In domestic cats, blood group AB consists of three blood types A, B and AB. A preliminary identification by typing technique is essential to minimize the occurrence of transfusion reactions and neonatal isoerythrolysis. Therefore, the aim of this study was to determine the frequency of blood types and estimate the probability of random transfusion reactions in domestic cats from Pará state, Brazil. Two-hundred thirty five animals were examined in Belém and Castanhal municipalities. Blood samples were collected by puncture of the cephalic or jugular vein, stored in EDTA tubes and refrigerated until analysis. The hemagglutination and reverse typing techniques were used to confirm the blood types of cats. Type A is the most frequently detected (98.3%), followed by type AB (1.28%) and B (0.42%). Likelihood of adverse reactions in random transfusion was 2.09%, with 1.67% mild to moderate and 0.42% potentially fatal. The results showed a higher frequency of A blood type and that the frequency of AB type was higher than B type. In conclusion, to know the frequency of the blood types according to geographic region minimizes the risk of transfusion reactions.(AU)

Em felinos domésticos, o grupo sanguíneo AB é constituído por três tipos de sangue A, B e AB. A identificação prévia, por meio da técnica de tipagem, é essencial para minimizar a ocorrência de reações transfusionais e isoeritrólise neonatal. Este estudo teve por objetivos determinar a frequência dos tipos sanguíneos e estimar a probabilidade de ocorrência de reações transfusionais aleatórias em gatos domésticos oriundos do estado do Pará, Brasil. Foram utilizados 235 animais domiciliados nos municípios de Belém e Castanhal. As amostras de sangue foram coletadas por punção da veia cefálica ou jugular, armazenadas em tubos com EDTA e refrigeradas até as análises. As técnicas de hemaglutinação e tipagem reversa foram utilizadas para confirmar os tipos sanguíneos dos felinos. O tipo A foi ao mais detectado (98,3%), seguido pelo tipo AB (1,28%) e B (0,42%). A probabilidade de ocorrência de reações adversas em transfusões aleatórias foi de 2,09%, sendo 1,67% leves a moderadas e 0,42% potencialmente fatais. Os resultados encontrados demonstram que na população de felinos estudada há uma maior frequência de gatos do tipo A e que a frequência do tipo AB foi maior que o tipo B. Em conclusão, conhecer a frequência dos tipos sanguíneos de acordo com a região geográfica minimiza o risco de reações transfusionais.(AU)

Parasitological and immunological diagnoses from feces of captive-bred snakes at Vital Brazil Institute / Diagnóstico parasitológico e imunológico em fezes de serpentes cativas do Instituto Vital Brazil

Fecal samples from 56 snakes at the Vital Brazil Institute, in the city of Niterói, Rio de Janeiro, were tested using the sedimentation and flotation techniques to investigate the evolutionary forms of parasites such as helminths and protozoa, and using enzyme immunoassay techniques to detect antigens of Cryptosporidium sp. and Giardia sp. Among the animals tested, 80.3% were positive for parasites. Out of these, there were 16 Bothrops jararaca, 16 B. jararacussu and 13 Crotalus durissus. The prevalence of parasitic nematodes was 41.1%, and nematodes were found in all three snake species. Among these, the most frequent finding was eggs of Kalicephalus sp., which were diagnosed in 25% of the snakes. The positivity for protozoa detected using parasite concentration techniques was 75%, including oocysts of Caryospora sp. in 75%, cysts with morphology similar to Giardia sp. 3.6%, amoeboid cysts in 41.1% and unsporulated coccidia oocysts in 8.9%. Immunoassays for Cryptosporidium sp. antigens produced positive findings in 60.7%. Pseudoparasites were detected in 64.3%. These results show that there is a need to improve the sanitary handling of captive-bred snakes, and also for the animal house that supplies rodents to feed them. The results also highlight that diagnostic tests should be performed periodically on stool specimens from captive-bred snakes.

Foram analisadas amostras fecais de 56 serpentes do Instituto Vital Brazil, Niterói, Rio de Janeiro, por técnicas de sedimentação e flutuação, para pesquisa de formas evolutivas de parasitos como helmintos e protozoários, e imunoenzimáticas para detecção de antígenos de Cryptosporidium sp. e Giardia sp. Dos animais estudados, 80,3% foram positivos para parasitos, dos quais 16 pertenciam à espécie Bothrops jararaca, 16 à B. jararacussu e 13 à Crotalus durissus. A prevalência de nematódeos parasitos foi de 41,1%, sendo evidenciados nas três espécies de serpentes. Dentre estes, o mais frequente foi o encontro de ovos de Kalicephalus sp., diagnosticado em 25% das serpentes. A positividade para protozoários detectados pelas técnicas de concentração foi de 75%, nas quais oocistos de Caryospora sp. foram detectados em 75%, cistos com morfologia similar a Giardia sp. em 3,6%, cistos de amebídeos em 41,1% e oocistos não esporulados de coccídios em 8,9%. Obteve-se positividade para antígenos de Cryptosporidium sp. por imunoensaio em 60,7%. Pseudoparasitos foram detectados em 64,3%. Estes resultados apontam para a necessidade de aprimoramento do manejo sanitário das serpentes cativas, bem como no biotério que fornece roedores para sua alimentação, destacando a realização periódica de diagnóstico nas amostras fecais de serpentes cativas.

Frequência dos antígenos eritrocitários do sistema AB em felinos domésticos no estado da Paraíba / Frequency of AB blood System in domestic cats of Paraíba, Brazil

Objetivou-se com este estudo determinar a frequência de antígenos eritrocitários do sistema AB em felinos domésticos da Paraíba, Brasil. Foram selecionados aleatoriamente 178 gatos, clinicamente saudáveis, sem pré-requisitos quanto a sexo ou raça, com peso corporal acima de 1,5 kg e faixa etária acima de um ano de idade, abordados no ato da consulta ambulatorial em clínicas médicas de pequenos animais distribuídas entre três cidades da Paraíba (João Pessoa, Campina Grande e Patos). A determinação dos tipos sanguíneos foi realizada através do teste de hemaglutinação em tubo de ensaio e, a tipagem reversa foi realizada para as amostras tipos B e AB para confirmação e evidenciação de aloanticorpos naturais. Neste estudo a frequência relativa de antígenos eritrocitários A, B e AB em sua totalidade para felinos sem raça foram 98,1%, 1,21% e 0,69%, respectivamente. Todos os felinos com definição racial foram do tipo sanguíneo A. Diante destes, a probabilidade de ocorrência de reações transfusionais aleatórias obtidas foi de 2,78%, sendo cerca 40% (1,11%) potencialmente fatais. Desta forma, dado o conhecimento da frequência dos diferentes tipos sanguíneos em felinos, de uma determinada região, conclui-se que a tipagem sanguínea e o teste de compatibilidade, são importantes ferramentas que permitem ao médico veterinário tomar medidas preventivas que minimizem riscos de ocorrência de reações transfusionais e isoeletrólise neonatal e, estabelece pré-requisitos a respeito dos riscos de procedimentos hemoterápicos em felinos que circunstancialmente necessitem serem conduzidos de forma aleatória.(AU)

The objective of this study was to determine the frequency of the AB blood group antigens system in domestic cats of Paraíba, Brazil. We randomly selected 178 cats which were clinically healthy, with no prerequisites in terms of gender or race, weighing above 1.5 kg, and were over one year of age. These cats were randomly selected when they entered the small animal clinic facilities in the cities of João Pessoa, Campina Grande and Patos. The determination of blood types was made using the hemagglutination test tube, and the reverse typing was performed for samples B and AB types and for confirmation of alloantibodies natural disclosure. In this study the relative frequency of A, B and AB blood group antigens in cats without a determined breed was 98.1%, 1.21% and 0.69% respectively. All cats with breed definition were blood type A. The likelihood of random transfusion reactions was 2.78%, approximately 40% (1.11%) potentially fatal. Thus, given knowledge of the frequency of different blood types in cats, from a given region, it is concluded that blood typing and compatibility test are important tools that enable the veterinarian to take preventative measures to minimize risks of isoelectrolisys reactions and neonatal transfusion, and establishes prerequisites about the risks of hemotherapic procedures in cats that require circumstantially to be conducted randomly.(AU)

PROTEÍNAS RECOMBINANTES E SEU USO NO DIAGNÓSTICO DE LEISHMANIOSE VISCERAL CANINA

O diagnóstico de Leishmaniose Visceral Canina (LVC) é baseado em dados epidemiológicos, achados clínicos e laboratoriais, entretanto ainda é considerado um diagnóstico complexo, visto que algumas doenças compartilham sintomatologia similar. Diferentes técnicas podem ser utilizadas como testes sorológicos, exames parasitológicos e/ou moleculares. Em busca de se obter um método mais específico de diagnóstico sorológico da LV, vem se realizando pesquisas com a utilização de antígenos recombinantes de Leishmania sp., uma vez que o problema na utilização de proteínas totais para o diagnóstico da doença é a existência de reações cruzadas entre soros de animais infectados com outros patógenos. O objetivo deste trabalho foi avaliar o uso de diferentes proteínas recombinantes de Leishmania infantum chagasi no diagnóstico sorológico da leishmaniose visceral canina pelo método de ELISA. O perfil clínico dos animais foi avaliado em pontuações e o somatório dessas pontuações era dado como escore do animal incluído em uma ficha de avaliação. A técnica de ELISA foi realizada utilizando antígeno total de Leishmania (SLA) e sete (07) antígenos recombinantes (LiP2a, LiP2b, LiP0, HSP70, HSP83, KMP-11 e H2A). A leitura das placas foi realizada em espectofotômetro com comprimento de onda de 490 nm, em software SolftMax Pro 5.0. Na análise estatística foi utilizados os testes de ANOVA, Kruskal Wallis e Dunns com múltiplas comparações de média e significância de 5%. O ponto de corte de cada antígeno foi estabelecido utilizando-se a curva ROC-AUC, baseado na maior sensibilidade e especificidade. Dentre todas as proteínas testadas, a que apresentou melhor resultado foi a LiP2a, a qual conseguiu discriminar bem soros de cães positivos (sintomáticos e assintomáticos) de cães negativos e distinguiu os animais positivos dos demais grupos (erliquiose canina e vacinados contra a doença), apresentando diferença significativa, além de demostrar melhor desempenho frente ao SLA. Assim, a proteína recombinante LiP2a apresenta-se bastante promissora para ser utilizada com um antígeno alternativo para diagnóstico, com uma boa sensibilidade e especificidade nos testes de ELISA.

The diagnosis of Visceral Canine Leishmaniasis (LVC) is based on epidemiological data, clinical and laboratory findings, however it is still considered a complex diagnosis, since some diseases share similar symptoms. Different techniques can be used as serological tests, parasitological and / or molecular tests. In order to obtain a more specific method of serological diagnosis of VL, research has been carried out with the use of recombinant antigens of Leishmania sp., Since the problem in the use of total proteins for the diagnosis of the disease is the existence of reactions Animals infected with other pathogens. The objective of this work was to evaluate the use of different recombinant proteins of Leishmania infantum chagasi in the serological diagnosis of canine visceral leishmaniasis by the ELISA method. The clinical profile of the animals was evaluated in scores and the sum of these scores was given as a score of the animal included in an evaluation form. The ELISA technique was performed using total Leishmania antigen (SLA) and seven (07) recombinant antigens (LiP2a, LiP2b, LiP0, HSP70, HSP83, KMP-11 and H2A). The plates were read in a spectrophotometer with a wavelength of 490 nm in SolftMax Pro 5.0 software. In the statistical analysis, the ANOVA, Kruskal Wallis and Dunn's tests were used with multiple mean and significance comparisons of 5%. The cutoff point of each antigen was established using the ROC-AUC curve, based on the highest sensitivity and specificity. Among all the proteins tested, LiP2a was able to discriminate well from positive dogs (symptomatic and asymptomatic) from negative dogs and distinguished the positive animals from the other groups (canine and vaccinated dogs). Presenting a significant difference, besides showing a better performance against SLA. Thus, the recombinant LiP2a protein is very promising to be used with an alternative diagnostic antigen with good sensitivity and specificity in ELISA tests.

Pesquisa de Antígenos Eritrocitários Humanos em Macacos-Prego (Sapajus sp) e em Macacos Bugios (Alouatta sp)

Pesquisaram-se 28 antígenos eritrocitários pertencentes aos sistemas de grupos sanguíneos humanos ABO, H, Rh, Kell, Duffy, Kidd, Lewis, P, MNS, Lutheran e Diego, nos eritrócitos de 9 macacos-prego (Sapajus sp) e 10 macacos bugios (Alouatta sp).A maioria dos antígenos humanos pesquisados não foi observada nos 2gêneros de macacos, correspondendo a 19/28 antígenos negativos nos Sapajus sp, e 20/28 antígenos negativos nos Alouatta sp. A fenotipagem eritrocitária foi bastante semelhante em cada grupo de animais, sendo que 5 macacos-prego diferiram dos outros 4 apenas no sistema ABO, e 3 macacos bugios diferiram dos demais 7somente no sistema MNS.Houve diferenças antigênicas entre os gêneros em apenas4 sistemas de grupos pesquisados (P, ABO, Rh, MNS). Constataram-se, nos animais, alguns antígenos eritrocitários com frequências semelhantes e outros com frequências opostas às observadas em humanos ou etnias humanas. Em comparação com estudos prévios envolvendo macacos-prego e macacos bugios, observou-se concordância quanto à presença ou ausência de alguns antígenos eritrocitários, e discordância em relação a outros. Que seja do nosso conhecimento, o presente estudo é o mais completo já realizado quanto ao número de antígenos eritrocitários pesquisados em macacos do Novo Mundo, especialmente em macacos brasileiros.

The aim of this study was to evaluate the presence of 28 erythrocyte antigens of 11 human blood groups systems (ABO, H, Rh, Kell, Duffy, Kidd, Lewis, P, MNS, Lutheran and Diego) on erythrocytes of 9 nail monkeys (Sapajus sp) and 10 howler monkeys (Alouatta sp). Most of the human erythrocyte antigens were not observed in the 2 genera of monkeys, corresponding to 19/28 negative antigens in Sapajus sp, and 20/28 negative antigens in Alouatta sp. Erythrocyte phenotyping was very similar in each group, being that 5 nail monkeys differed from the other 4 only for the ABO system, and 3 howler monkeys differed from the other 7 only for the MNS system. Antigenic differences between the 2 genera were observed only for 4 blood groups systems (P, ABO, Rh, MNS). This study revealed that some monkey erythrocyte antigens were similar in frequency, and others were in opposite frequency from those observed in human or human ethnicities. When this study is compared with previous similar studies some concordance and some disagreement of findings are found, but as far as we known our study is the most complete in relation to the number of investigated erythrocyte antigens in New World monkeys, specially in the Brazilian ones.

Avaliação da eficácia vacinal e imunogenicidade de antígenos de Ascaris suum na Ascaridíase experimental

A ascaridíase humana possui uma distribuição cosmopolita sendo caracterizada também como a doença tropical mais prevalente e negligenciada do mundo. Estudos recentes estimam que aproximadamente 800 milhões de pessoas estejam infectadas em todo o mundo. Estratégias para intervenções profiláticas contra a ascaridíase humana são limitadas, uma vez que o sistema de educação em saúde e saneamento básico nas regiões endêmicas para a doença são extremamente precários, o que resulta em elevadas taxas de reinfecção mesmo após tratamento específico. Em busca da melhoria da qualidade de vida, de uma menor morbidade principalmente nos indivíduos de áreas endêmicas, buscamos o desenvolvimento de uma vacina que fosse capaz de garantir a proteção a longo prazo contra uma das principais geohelmintoses em questão. Dessa forma, por meio da imunização com diferentes antígenos de Ascaris suum, sendo: 1extrato bruto de verme adulto; 2extrato bruto de tegumento de verme adulto; e 3extrato bruto de larva infectante, o presente estudo objetivou a identificação de novos candidatos vacinais visando o desenvolvimento de uma nova estratégia profilática contra a ascaridíase. Neste estudo avaliou-se a eficácia vacinal por meio da quantificação da carga parasitária no pulmão e no lavado bronco alveolar dos animais previamente imunizados e posteriormente desafiados com ovos infectantes do parasito. Além disso, foram realizados a avaliação da imunogenicidade dos candidatos vacinais por meio do perfil de citocinas sistêmicas e teciduais, além do funcionamento pulmonar e o perfil de leucócitos presentes no lavado bronco alveolar. Por fim, foram também avaliados a participação humoral na proteção vista da carga parasitária e o perfil de produção de anticorpos após as imunizações e após infecção. Nossos resultados demonstraram uma redução significativa da carga parasitária nos animais imunizados com os antígenos de A. suum sendo o antígeno bruto de larva chegando a aproximadamente 61% de proteção, seguido pelo antígeno bruto de tegumento com 59% e por fim o antígeno bruto de verme adulto com 51% de redução da carga. Quanto ao perfil de citocinas sistêmicas foi observado uma relevante regulação da citocina IL-5 nos animais imunizados com os diferentes antígenos de A. suum, e uma significativa produção de IL-10 induzida pelo antígeno TEG em relação aos animais não imunizados. Quanto aos níveis de anticorpos IgG antígeno-específico, foi observado um aumento gradual e progressivo conforme as imunizações com um aumento principalmente das subclasses IgG1 e IgG3. Posteriormente, diante da investigação da participação humoral na redução da carga, observamos que animais submetidos ao protocolo de transferência passiva com anticorpos anti-antígenos de A. suum, apresentaram cerca de 65% de proteção frente a infecção. A partir destes resultados, podemos inferir que os antígenos de A. suum são potenciais candidatos à investigação e nos provam que é viável a utilização e desenvolvimento de uma vacina, visando principalmente o controle e diminuição da carga parasitária nos indivíduos infectados das regiões endêmicas.

Human ascariasis has a cosmopolitan distribution and is also characterized as the most prevalent and neglected tropical disease in the world. Recent studies estimate that about 800 million people are infected worldwide. Strategies for prophylactic interventions against human ascariasis are limited, since the education system in health and basic sanitation in regions endemic for the disease is extremely precarious, resulting in high reinfection rates even after specific treatment. In order to improve the quality of life and lower morbidity, especially in individuals from endemic areas, we are lookinf for the development of a vaccine that would guarantee the long-term protection against the main soil transmitted helminths in general. Thus, through immunization with different Ascaris suum antigens, being: crude extract of adult worm; crude extract of adult worm tegument; and crude extract of infective larvae, the present study aimed at the identification of new vaccine candidates aiming the development of a new prophylactic strategy against ascariasis. In this study we evaluated the vaccine efficacy by quantifying the parasite load in the lung and alveolar bronchoalveolar lavage of animals previously immunized and then challenged with infecting eggs of the parasite. In addition, the immunogenicity of the vaccine candidates was evaluated through the systemic and tissue cytokine profile, as well as the pulmonary function and the leukocyte profile present in the bronchoalveolar lavage. Finally, the humoral participation in the protection of parasite load and the profile of antibody production after immunizations and after infection were also evaluated. Our results demonstrated a significant reduction of parasite load in the animals immunized with A. suum antigens with the crude larval antigen reaching approximately 61% protection, followed by the crude tegument antigen with 59% and finally the crude adult worm antigen with 51% load reduction. Regarding the systemic cytokine profile, a significant regulation of the IL-5 cytokine in the animals immunized with the different A. suum antigens and a significant IL-10 production induced by the TEG antigen in relation to the non-immunized animals was observed. As for antigen-specific IgG antibody levels, a gradual and progressive increase was observed according to the immunizations with an increase mainly of IgG1 and IgG3 subclasses. Subsequently, in view of the investigation of the humoral participation in the reduction of the load, we observed that animals submitted to the passive transfer protocol with anti-antigen antibodies of A. suum presented approximately 65% protection against infection. From these results, we can infer that A. suum antigens are potential candidates for research and prove that it is feasible to use and develop a vaccine, mainly aimed at controlling and reducing the parasite burden in infected individuals in endemic regions.

Conjunctival inflammation in patients under topical glaucoma treatment with indication to surgery / Inflamação conjuntival em pacientes em tratamento tópico para glaucoma com indicação de cirurgia

PURPOSE: To compare the frequency of conjunctival HLA-DR expression (a surrogate marker for inflammation) in eyes treated with topical prostaglandin analogues versus eyes treated with other topical antiglaucomatous drugs. METHODS: Patients diagnosed with primary open-angle glaucoma presenting indication for trabeculectomy were divided in groups according to the use or not of prostaglandin analogues. All subjects were treated with the maximum tolerated dose of antiglaucomatous drugs until the date of the surgery. At the beginning of the surgical procedure, a 5 x 5 mm biopsy of the bulbar conjunctiva was collected, incubated with monoclonal anti-HLA-DR antibody and processed for histological analysis. RESULTS: Of the 31 eyes included (31 patients), 25 were under topical prostaglandin analogues (Group 1) and six under other topical pharmacological agents (Group 2). Fourteen eyes of Group 1 (56%) and three of Group 2 (50 %) were positive for the inflammatory marker HLA-DR (P=1.0). The percentage of stained cells ranged from 15.49 to 48.09% (median: 27.61) in Group 1, and from 18.35 to 28 (median: 20.71) in Group 2, with no differences statistically significant (p=0.33). CONCLUSION: The use of prostaglandin analogues did not increase conjunctival expression of HLA-DR compared to other topical antiglaucomatous agents.(AU)

OBJETIVO: Comparar a frequência da expressão conjuntival de HLA-DR (marcador inflamatório) em olhos tratados com análogos de prostaglandinas de uso tópico com a frequência em olhos tratados com outros medicamentos. MÉTODOS: Pacientes com glaucoma primário de ângulo aberto apresentando indicação de trabeculectomia foram agrupados segundo o uso ou não de análogos de prostaglandinas. Todos os participantes foram tratados com medicação máxima tolerada até o momento da cirurgia. Ao início do procedimento cirúrgico, uma biópsia de 5 x 5 mm da conjuntiva bulbar foi coletada, incubada com anticorpo monoclonal anti-HLA-DR e processada para análise histológica RESULTADOS: Dentre os 31 olhos incluídos (31 pacientes), 25 estavam em uso de análogos de prostaglandinas (Grupo 1) e seis em uso de outros agentes antiglaucomatosos (Grupo 2). Quatorze olhos do Grupo 1 (56%) e três do Grupo 2 (50%) apresentaram positividade para o marcador HLA-DR (p=1,0). A porcentagem de células coradas variou de 15,49 a 48,09% (mediana: 27,61%) no Grupo 1 e de 18,35 a 28% (mediana: 20,71%) no Grupo 2, com diferenças não estatisticamente significativas (p=0,33). CONCLUSÃO: O uso de análogos de prostaglandinas não aumenta a expressão conjuntival de HLA-DR comparado com outros medicamentos tópicos para o tratamento de glaucoma.(AU)

Diagnóstico de Leptospirose bovina em duas propriedades rurais utilizando MAT, ELISA e PCR

A Leptospirose é uma doença, de grande impacto econômico sobre a pecuária, além de ser uma importante zoonose que acomete várias espécies animais. Diversos sorovares podem infectar os bovinos, induzindo ou não manifestações clínicas assim sendo o diagnóstico clínico não é conclusivo, sendo necessário o auxilio dos testes de laboratório para a confirmação do diagnóstico. A Soroaglutinação Microscópica em Campo Escuro (MAT) é considerada teste padrão pela Organização Mundial de Saúde Animal (OIE), porém apresenta algumas limitações e sua interpretação pode ser subjetiva. Outros testes de diagnóstico estão sendo desenvolvidos com o objetivo de substituí-lo ou complementá-lo, como o ELISA e o PCR. Os quais podem atuar como aliados no monitoramento dos animais, por se tratarem de testes mais sensíveis e específicos, aumentando a qualidade do procedimento diagnóstico. Objetivou-se com essa pesquisa avaliar a ocorrência da infecção em duas propriedades, com e sem histórico de leptospirose com auxílio do MAT, ELISA e PCR. Para isto foram analisados 48 bovinos voltados para produção de leite, sendo que destes, 20 (41,66%) eram reagentes no MAT apresentando títulos de anticorpos maiores ou iguais a 100, 12 amostras de urina, foram selecionadas para realização da PCR sendo todas consideradas negativas ao teste. Para complementar os resultados, três ELISAs, cada um empregando antígenos diferentes para detecção de anticorpos em soros de bovinos, sendo eles: L.interrogans sorovar Hardjo, L.interrogans sorovar Hebdomadis e um pool contendo seis sorovares foram desenvolvidos. Os quais obtiveram como sensibilidade 90%, 70%, 20% respectivamente e uma especificidade de 67,10%, 80,26%, 89,47%. Com exceção do ELISA/pool, todos alcançaram uma boa concordância com o teste padrão e uma boa reprodutibilidade. Conclui-se que é sempre importante correlacionar dois ou mais testes de diagnósticos, associado ao quadro clínico, para aumentar a eficácia dos resultados.

Leptospirosis is a disease of great economic impact on livestock as well as being an important zoonosis that affects several animal species. Several serotypes can infect cattle, inducing or no clinical manifestations thus clinical diagnosis is inconclusive, requiring the help of laboratory tests to confirm the diagnosis. may or may not induce clinical manifestations clinical diagnosis is not conclusive, requiring support of laboratory tests to confirm the diagnosis. The Microagglutination test (MAT) is considered as standard by the World Organization for Animal Health (OIE) but has some limitations and their interpretation can be suggestive. Some tests in order to detect anti-Leptospira immunoglobulins are being developed in order to replace it or supplement it, as ELISA and PCR. They can act as allies in animal tracking, because they are more sensitive and specific tests, increasing the quality of the diagnostic procedure. The aim of this research is to evaluate the occurrence of infection in two properties, with and without history of leptospirosis with support of MAT, ELISA and PCR. For this were analyzed 48 cows, of these 20 (41.66%) were positive in MAT, with antibody titers equal or greater to 100, 12 urine samples were selected for PCR analysis are all considered negative to the test. To complement the results, three ELISAs, each employing different antigens to detect antibodies in cattle sera, these being: L.interrogans serovar Hardjo, L.interrogans serovar Hebdomadis and a pool with six serotypes have been developed. They presented as sensitivity, 90%, 70%, and 20% respectively, and a specificity of 67, 10%, 80, 26%, 89, 47%. Except the ELISA / pool, all have reached a good agreement with the standard test and good reproducibility. In conclusion, it is always important to relate two or more diagnostic tests, associated with the clinical diagnostic, to increase the effectiveness of the results.

Cell-free antigens from precocious Paracoccidioides brasiliensis culture induce a typical delayed-type hypersensitivity reaction

Cell-free antigens (CFAg) derived from Paracoccidioides brasiliensis have typically been used in immunodiffusion reactions for serodiagnosis or therapeutic follow-up of paracoccidioidomycosis patients. Thus, we investigated the usefulness of CFAg obtained from cultures at different ages, to evaluate cellular immunity by the footpad test, in experimental murine paracoccidioidomycosis. Male mice infected with P. brasiliensis 265 strain were challenged in the footpad with CFAg obtained from four- (4d CFAg) or 11-day-old cultures (11d CFAg). The increase in footpad swelling provoked by 4d CFAg and 11d CFAg was similar and showed significant difference in relation to control groups. However, the infiltrate pattern was strikingly different: 4d CFAg induced a predominant mononuclear infiltrate whereas 11d CFAg provoked a predominant polymophonuclear infiltrate. These different inflammatory patterns were associated with distinct electrophoretic characteristics. By comparison with 11d CFAg, 4d CFAg showed more numerous and intense bands, including a strong one of 43 kDa (gp43). These results suggest that CFAg derived from Pb 265 isolate can be used as a reagent to evaluate cellular immunity; however, the culture's age is critical because only young cultures are able to induce a typical mononuclear infiltrate. The efficacy of this new paracoccidioidin to assay the cellular immunity in infections caused by other P. brasiliensis isolates is under investigation.(AU)

Estudos de imobilização de anticorpos em nanopartículas metálicas para construção de biosensores ópticos.

Protocolos para a construção de matrizes vítreas revestidas por nanopartículas metálicas foram estudados para uso em biosensores ópticos, utilizando o princípio da Ressonância do Plasmon de Superfície Localizado (RPSL) para detecção de origens de carnes em alimentos cárneos processados. Para tanto, nanopartículas (nanoesferas de prata e ouro; nanocubos de prata) foram utilizados como revestimento de placas vítreas, e às mesmas foram depositados anticorpos anti-suíno e anti-equinos, onde foram testados a estes tratamentos antígenos homólogos e heterólogos, além de testes utilizando revestimento em Polidopamina para prevenção de oxidação de nanopartículas de prata. Resultados demonstraram que placas revestidas com Polidopamina apresentaram menor oxidação e agregação de nanopartículas de prata, além de maior especificidade das placas. O RPSL demonstrou-se uma técnica eficaz de avaliação de diferentes antígenos frente seus anticorpos homólogos, aliado à superfícies funcionalizadas e revestidas com Polidopamina

Protocols for the making of glass matrices covered by metalic nanoparticles were studied for use in optical biosensors, using the Localized Surface Plasmon Resonance (LSPR) technique for detection of meat origin in processed foodstuffs. As such, nanoparticles (gold and silver nanospheres; silver nanocubes) were used as cover for glass plates, and were deposited anti-pork and anti-horse antibodies, where were used for test homologous and heterologous antigens, as also tests using plates covered in Polydopamine to prevent silver nanoparticle's oxidation. Results showed that plates coated with Polydopamine showed less oxidation and aggregation of silver nanoparticles, and greater specificity of the plates. LSPR proved to be an effective technique for evaluating different antigens forward their counterparts antibodies, coupled with functionalized surfaces and coated with Polydopamine.

ESTUDO COMPARATIVO DE VIABILIDADE CELULAR ENTRE DIFERENTES MÉTODOS DE ACONDICIONAMENTO E TEMPO APÓS O PREPARO DE CÉLULAS TRONCO MESENQUIMAIS PARA UTILIZAÇÃO EM TERAPIA CELULAR

As células tronco mesenquimais (CTM) são consideradas uma linhagem de células tronco somáticas e estão presentes em regiões perivasculares de todos os tecidos adultos, incluindo a medula óssea (MO), tecido adiposo, periósteo, tecido muscular, parede dos vasos que compõem o cordão umbilical e os órgãos parenquimatosos. O crescente interesse nesse grupo celular para utilização em pesquisas e aplicação terapêuticas advém de sua capacidade de interagir com sistema imune do hospedeiro, imunoestimulando e/ou imunodeprimindo as células de defesa e reparadoras, em prol de um processo de cicatrização do organismo. Com o advento da terapia celular, a busca por esse tipo de terapia cresceu exponencialmente, porém, nem sempre temos laboratórios especializados perto das clínicas para o fornecimento de células, tendo assim, a necessidade de transportar essas células sem que ocorra perda na viabilidade. Atentando-se as necessidades atuais para comercialização desse tipo celular, o estudo objetivou realizar um comparativo de viabilidade celular entre diferentes métodos de acondicionamento e tempo após o preparo de células tronco mesenquimais, para utilização em terapia celular. Foram utilizadas 10 amostras de células tronco mesenquimais para quantificação de células totais, células viáveis e inviáveis, sendo as amostras acondicionadas em 72 seringas estéreis contendo 0,30mL de solução PBS 1x mais células. As seringas foram dividas aleatoriamente em três ambientes: Geladeira, Isopor com gelo, Isopor sem gelo, e em tempos predeterminados foram realizados teste de viabilidade usando o método de Azul de tripan. Foi observado que no ambiente Geladeira e Isopor com gelo a viabilidade celular permaneceu superior a 90% em todos os momentos com exceção do momento T48, já no ambiente Isopor a viabilidade permaneceu inferior a 90% nos momentos T8, T10, T12, T24 e T48. Identificou-se que temperaturas de 2ºC à 8ºC são consideradas melhores para o acondicionamento das células durante um transporte, mantendo boa viabilidade celular durante 24 horas.

Mesenchymal stem cells (MSCs) are considered a lineage of somatic stem cells and are present in perivascular regions of all adult tissues, including bone marrow (BM), adipose tissue, periosteum, muscle tissue, walls of vessels which make up the umbilical cord, and parenchymal organs. The growing interest for this cell group for use in research and therapeutic applications comes from its ability to interact with the hosts immune system, immune-stimulating and/or immune-de With the advent of cellular therapy, search for this type of therapy has grown exponentially, however specialized laboratories arent always found near the clinics for cell supplying, thus having the need to transport these cells without occurring viability loss. Keeping in mind the current needs for commercialization of this cell type, the study aimed to conduct a cell viability comparative between different conditioning methods and times after the preparation of mesenchymal stem cells, for use in cellular therapy. Ten samples of mesenchymal stem cells were used for quantification of total cells, viable and nonviable cells, and the samples conditioned in 72 sterile syringes containing 0.30 ml of 1x PBS, plus cells. The syringes were randomly divided into three environments: Refrigerator, Styrofoam box with ice, Styrofoam box without ice, and at predetermined times viability tests were performed using the Trypan blue method. It was observed that in the environments "Refrigerator" and "Styrofoam box with ice" cell viability remained higher than 90% at all times with the exception of moment T48, already, in the environment "Styrofoam box" viability remained below 90% in moments T8, T10, T12, T24, and T48. It was found that temperatures from 2ºC to 8ºC are considered best for conditioning the cells during transportation, maintaining good cell viability for 24 hours.

Comparação entre diversos antígenos para o diagnóstico de Anaplasma marginale por ELISA / Comparison between several antigens for diagnosis of Anaplasma marginale by ELISA

Anaplasmose bovina é uma doença com grande importância nas regiões tropicais e subtropicais do mundo por determinar perdas econômicas devido à mortalidade e redução da produtividade. É causada por Anaplasma marginale, uma riquétsia intraeritrocítica obrigatória cujo controle requer, além de uma vacina eficiente, uma acurada identificação de bovinos cronicamente infectados. Apesar de existirem atualmente diversos métodos de diagnóstico dessa riquétsia, os métodos sorológicos, em particular o ensaio de imunoadsorção enzimática-ELISAs, são os mais utilizados devido à sua versatilidade e praticidade. No entanto, devido ao grande número de antígenos disponíveis, atualmente torna-se necessária uma avaliação para definir quais antígenos apresentam um melhor desempenho no diagnóstico da anaplasmose. Soros de bovinos positivos e negativos para A. marginale por PCR, e soros de animais provenientes do Brasil e Costa Rica, foram testados em ELISAs baseados em MSP1a, MSP2 e MSP5 recombinantes, um pool das três proteínas recombinantes, e antígeno de lisado de corpúsculos iniciais da riquétsia (CI). Utilizando soro de bovinos positivos para A. marginale por PCR, uma maior sensibilidade foi observada no ELISA CI. No entanto, uma maior especificidade, com soro de bovinos negativos a PCR, foi observada com os ELISAs recombinantes. O porcentual de bovinos positivos do Brasil e Costa Rica foi maior com ELISA CI. Razões para essas diferenças são discutidas.(AU)

Bovine anaplasmosis is a major disease in tropical and subtropical regions of the world by determine economical loss due mortality and productive reduction. The disease is caused by Anaplasma marginale, an intraerythrocytic rickettsia whose control requires, besides an efficient vaccine, the accurate identification of chronically infected cattle. Although the existence of diverse methods of diagnosis of this rickettsia, the serological methods, in particular the enzyme immunosorbent assays (ELISAs), are the most used due to its versatility and practice. However, due to the high number of antigens currently available, an evaluation becomes necessary to define which antigens present the better performance in the diagnosis of anaplasmosis. Sera from cattle positive or negative to A. marginale by PCR, and sera from cattle proceeding from Brazil and Costa Rica, were tested by ELISAs based in recombinant MSP1a, MSP2, and MSP5, a pool of the three recombinant proteins, and initial body lisate antigen (CI). Using sera from A. marginale positive cattle by PCR, the highest sensitivity was shown by CI ELISA. Nevertheless, the highest specificity, with sera from negative cattle by PCR, was shown by recombinants ELISAs. The percentiles of positive cattle from Brazil and Costa Rica were higher with CI ELISA. Reasons for such differences were discussed.(AU)

Production of Trichophyton mentagrophytes antigens and their characterization in mice

The participation of dermatophytic antigens in the host-parasite balance is still poorly understood. One of the difficulties encountered by researchers is the lack of dominant and specific antigens that can be used in such studies. In order to contribute to a better understanding of this aspect of infection, the present study identifies antigen fractions obtained from exoantigen and cytoplasmic extracts of Trichophyton mentagrophytes. Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) revealed the presence of 13 proteins in the exoantigen extract, whose molecular weight ranged from 12.5 to 90 kDa. The cytoplasmic extract contained 18 protein fractions ranging from 11 to 110 kDa. Immunoblotting showed the presence of immunodominant antigens against IgG, IgM and IgA antibodies. This affinity was observed in three proteins of the exoantigen extract and in three proteins of the cytoplasmic extract, with respective molecular weights of 33, 39 and 59, and 40, 55 and 82 kDa. These results are promising, especially when considering that these extracts contain antigenically distinct protein fractions which, once determined, may contribute to a better understanding of dermatophytoses, and may thus help in the development of alternative strategies for the diagnosis and treatment of this condition.

Melanoma amelânico conjuntival e orbital em cão: relato de caso / Conjunctival and orbital amelanic melanom a at the orbit of a dog: case report

Melanomas são neoplasias derivadas de células capazes de formar pré-melanossomas ou melanossomas,que contém quantidade variável de pigmento. São as neoplasias oculares mais comuns em cães, emborao melanoma conjuntival seja considerado raro. Apresentam-se como lesões nodulares ou multinodularesque causam comprometimento do saco conjuntival, com frequência amelânicos. Ocorrem em animais de 1 a 17 anos, com maior frequência aos 10 anos de idade. O diagnóstico pode ser feito através do exame citológico,mas a histopatologia é necessária para determinar sua malignidade. Além disso, a imunohistoquímica pode ser necessária, especialmente em casos de melanoma conjuntival amelânico. O tratamento é cirúrgico, mas tem-se obtido sucesso com o uso de crioterapia e de miltomicina C. A recorrência local emetástases ocorrem, por isso, o acompanhamento dos pacientes é necessário. O objetivo deste trabalho érelatar um caso de melanoma conjuntival em uma cadela jovem. (AU)

Melanomas are tumors derived from cells capable of forming pre-melanosomes or melanosomes, containing a variable amount of pigment. They are the most common ocular tumors in dogs while the conjunctivalmelanoma corresponds to a rare condition. It appears as nodular or multinodular masses thatcauses distortion of the conjunctival sac, often amelanic. The tumor occurs in animals of 1-17 years, mostfrequently at 10 years of age. The diagnosis can be made via cytology but histopathology is required todetermine its mitotic index. Furthermore, immunohistochemistry may be necessary, especially in caseof conjunctival amelanic melanoma. The treatment is surgical but there has been success with the use ofcryotherapy and miltomicine C, although the latter still needs further studies. The local recurrence and metastasis occurs, therefore, monitoring of patients is required. The objective of this study is to report a case of conjunctival melanoma in orbit of a young dog. (AU)

Melanoma amelânico conjuntival e orbital em cão: relato de caso / Conjunctival and orbital amelanic melanom a at the orbit of a dog: case report

Melanomas são neoplasias derivadas de células capazes de formar pré-melanossomas ou melanossomas,que contém quantidade variável de pigmento. São as neoplasias oculares mais comuns em cães, emborao melanoma conjuntival seja considerado raro. Apresentam-se como lesões nodulares ou multinodularesque causam comprometimento do saco conjuntival, com frequência amelânicos. Ocorrem em animais de 1 a 17 anos, com maior frequência aos 10 anos de idade. O diagnóstico pode ser feito através do exame citológico,mas a histopatologia é necessária para determinar sua malignidade. Além disso, a imunohistoquímica pode ser necessária, especialmente em casos de melanoma conjuntival amelânico. O tratamento é cirúrgico, mas tem-se obtido sucesso com o uso de crioterapia e de miltomicina C. A recorrência local emetástases ocorrem, por isso, o acompanhamento dos pacientes é necessário. O objetivo deste trabalho érelatar um caso de melanoma conjuntival em uma cadela jovem.

Melanomas are tumors derived from cells capable of forming pre-melanosomes or melanosomes, containing a variable amount of pigment. They are the most common ocular tumors in dogs while the conjunctivalmelanoma corresponds to a rare condition. It appears as nodular or multinodular masses thatcauses distortion of the conjunctival sac, often amelanic. The tumor occurs in animals of 1-17 years, mostfrequently at 10 years of age. The diagnosis can be made via cytology but histopathology is required todetermine its mitotic index. Furthermore, immunohistochemistry may be necessary, especially in caseof conjunctival amelanic melanoma. The treatment is surgical but there has been success with the use ofcryotherapy and miltomicine C, although the latter still needs further studies. The local recurrence and metastasis occurs, therefore, monitoring of patients is required. The objective of this study is to report a case of conjunctival melanoma in orbit of a young dog.