Preparation and evaluation of a liquid fertilizer from lactic fermentation of weeds / Preparo e avaliação de um fertilizante líquido a partir da fermentaçãolática de plantas daninhas

A total of twentymixtures of weed, B-Lac and molasses were prepared in orderto evaluate an accelerated liquid fertilizer (ALF) based on these plants. A mixture of 85% weed: water (1:1), 10% molasses and 5% B-Lac showed the best characteristics and was reproduced at a pilot scale. ALF was applied to lettuce using the following treatments: one foliar application per week of 10 mL L-1 (FA1), two foliar applications per week of 10 mL L-1 (FA2), one drench application of 50 mL L-1 every week (DA1), a drench application of 50 mL L-1 every two weeks (DA2) and a control without application (CWA). The variables evaluated were total yield, commercial yield, fresh weight, height, head diameter, percentage of dry matter and the concentration of foliar nitrogen, phosphorus, and potassium.The mixtures in the laboratoryand pilot phase were evaluated in a completely randomized design. The field phase was assessed in a completely randomized block design with five treatments and four replications. No significant differences were found between the treatments, except in the percentage of dry matter and potassium content, where FA2 showed the best results (2.35% and 541 mg plant-1, respectively). The highest total yield (26.4 t ha-1) and commercial (24.11 t ha-1) were achieved with DA2; however, the nutritional content was lower than that in the other treatments. Using homolactic fermentation it was possible to recycle weeds and produce ALF, which has potential as a biofertilizer according to its chemical characterization and effects shown on lettuce cultivation.(AU)

Foram preparadas vinte misturas de ervas daninhas, B-Lac e melaço para avaliar um fertilizante líquido acelerado (ALF) baseado nessas plantas. Uma misturade 85% erva:água (1:1), 10% melaço e 5% B-Lac apresentou as melhores características e foi reproduzida em escala piloto. A ALF foi aplicada à alface utilizando os seguintes tratamentos: uma aplicação foliar por semana de 10 mL L-1(AF1), duas aplicações foliares por semana de 10 mL L-1(AF2), uma aplicação via drench de 50 mL L-1a cada semana (AD1), uma aplicação via drench de 50 mL L-1a cada duas semanas (AD2) e um controle sem aplicação (CSA). As variáveis avaliadas foram produtividade total, produtividade comercial, massa fresca, altura, diâmetro da cabeça, porcentagem de matéria seca e concentração foliar de nitrogênio, fósforo e potássio. As misturas na fase de laboratório e piloto foram avaliadas em delineamentos inteiramente casualizados. A fase decampo foi avaliada em blocos casualizados com cinco tratamentos e quatro repetições. Não foram encontradas diferenças significativas entre os tratamentos, exceto no percentual de matéria seca e no teor de potássio, onde o AF2 apresentou os melhores resultados (2,35% e 541 mg planta-1, respectivamente). As maiores produtividades total (26,4 t ha-1) e comercial (24,11 t ha-1) foram obtidas com AD2; no entanto, o teor nutricional foi inferior aos demais tratamentos. Utilizando a fermentação homolática foi possível reciclar as ervas daninhas e produzir FLA, que tem potencial como biofertilizante de acordo com sua caracterização química e efeitos demonstrados no cultivo de alface.(AU)

Quantificação de bactérias lácticas em produtos lácteos com potencial probiótico comercializados nos supermercados de Volta Redonda e Barra Mansa / Quantification of lactic bacteria with potential probiotic dairy products sold in supermarket of Volta Redonda and Barra Mansa

No setor lácteo, os alimentos funcionais que são benéficos à saúde atingiram um bom mercado consumidor. Um produto para ser considerado probiótico deve apresentar contagem de microrganismos maior ou igual a 1x107 células viáveis/g ou mL do produto. O objetivo do trabalho foi avaliar a contagem de bactérias lácticas viáveis em produtos comerciais que declaram a presença de microrganismos nos rótulos. Foram analisadas 24 amostras de 5 diferentes marcas de iogurtes e leites fermentados comercializadas em supermercados de Volta Redonda/RJ e de Barra Mansa/RJ. Foram realizadas a avaliação microbiológica de viabilidade das bactérias lácticas, a análise de pH e a acidez titulável. Todas as marcas avaliadas apresentaram contagens superiores a 107 UFC/mL de bactérias láticas. Os valores de pH e acidez titulável atendem os critérios legais.(AU)

Quantificação de bactérias lácticas em produtos lácteos com potencial probiótico comercializados nos supermercados de Volta Redonda e Barra Mansa / Quantification of lactic bacteria with potential probiotic dairy products sold in supermarket of Volta Redonda and Barra Mansa

No setor lácteo, os alimentos funcionais que são benéficos à saúde atingiram um bom mercado consumidor. Um produto para ser considerado probiótico deve apresentar contagem de microrganismos maior ou igual a 1x107 células viáveis/g ou mL do produto. O objetivo do trabalho foi avaliar a contagem de bactérias lácticas viáveis em produtos comerciais que declaram a presença de microrganismos nos rótulos. Foram analisadas 24 amostras de 5 diferentes marcas de iogurtes e leites fermentados comercializadas em supermercados de Volta Redonda/RJ e de Barra Mansa/RJ. Foram realizadas a avaliação microbiológica de viabilidade das bactérias lácticas, a análise de pH e a acidez titulável. Todas as marcas avaliadas apresentaram contagens superiores a 107 UFC/mL de bactérias láticas. Os valores de pH e acidez titulável atendem os critérios legais.

Elaboração e caracterização de iogurte saborizado com polpa de oiti (Licania tomentosa)

Objetivou-se elaboração e caracterização de iogurte saborizado com polpa de oiti (Licania tomentosa). Foram produzidos quatro formulações com diferentes concentrações da polpa de oiti. Os parâmetros físico-químicos foram pH, Acidez em ácido lático, Umidade, Atividade de água (Aw), Cinzas, Lipídeos, Proteínas, Sólidos Solúveis Totais (ºBrix), Carboidratos totais, Valor Calórico (Kcal), Açúcares Redutores, Açúcares não redutores e Açúcares Totais. As análises microbiológicas foram realizadas durante 21 dias de armazenamento. As análises físico-químicas foram submetidos à análise de variância (ANOVA) e ao teste de Tukey. As análises microbiológicas atenderam aos limites estabelecidos pela legislação. E os iogurtes apresentaram dentro dos padrões, sendo uma opção para a região produtora dessa fruta.

Antioxidant activity of essential oils from condiment plants and their effect on lactic cultures and pathogenic bacteria / Atividade antioxidante do óleo essencial de plantas condimentares e efeito sobre culturas lácticas e bactérias patogênicas

Studies about preservative and antioxidant activity of essential oils have been encouraged in recent years, given their importance to food industry. The aim of the current study was to evaluate the antioxidant properties and antimicrobial activity of essential oils deriving from Syzygium aromaticum, Cymbopogon citratus and Lippia alba against lactic and pathogenic bacteria responsible for food-borne diseases. Essential oil antibacterial activity was assessed through disc diffusion and macrodilution tests conducted in a mixed lactic culture of Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus and Streptococcus thermophilus (YF-L903) and of Escherichia coli (ATCC 8739), Staphylococcus aureus (ATCC 6538), Salmonella enterica (ATCC 6017) strains. Based on the chromatographic analysis results, the essential oils shown to be composed of eugenol (79.41%) which was the prevalent compound in S. aromaticum, geranial (31.89%), neral (24.52%) and β-myrcene (25.37%) in C. citratus, as well as of geranial (33.80%) and neral (25.63%) in L. alba. The observed antibacterial activity confirmed the dose-dependent effect of these three oils on all the assessed bacteria; there was halo inhibition at concentration 20μL mL-1. The essential oil of S. aromaticum presented better antioxidant activity, with IC50 equal to 5.76μg mL-1 and antioxidant activity index of 6.94, and it was considered strong (AAI>2.0) in comparison to the other evaluated oils. This essential oil also presented excellent antioxidant activity at concentrations lower than the one required to inhibit lactic cultures. Based in this outcome, the essential oil from S. aromaticum can be used as preservative agent in processed food whose formulation presents lactic cultures.(AU)

A atividade conservante e antioxidante de óleos essenciais são importantes ferramentas para uso na indústria de alimentos e pesquisas são estimuladas na atualidade. O objetivo deste trabalho foi avaliar as propriedades antioxidantes e a atividade antimicrobiana de óleos essenciais de Syzygium aromaticum, Cymbopogon citratuse Lippia alba (LA) contra bactérias lácticas e patogênicas com importância em doenças transmitidas por alimentos. A atividade antibacteriana dos óleos foi avaliada por testes de disco-difusão e macrodiluição em caldo, utilizando-se cultura láctica mista de Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus e Streptococcus thermophilus (YF-L903), e Escherichia coli (ATCC 8739), Staphylococcus aureus (ATCC 6538), Salmonella enterica (ATCC 6017). Os compostos dos óleos essenciais foram identificados por cromatografia, mostrando eugenol (79,41%) como composto predominante em S. aromaticum, geranial (31,89%), neral (24,52%) e β-mirceno (25,37%) em C. citratus, e o geranial (33,80%) e neral (25,63%) em L. alba. A atividade antibacteriana confirmou o efeito dose-dependente dos três óleos para todas as bactérias avaliadas, apresentando halos de inibição a partir da concentração de 20μL mL-1. O óleo essencial de S. aromaticum apresentou melhor atividade antioxidante, com IC 50 IC50 (at concentration capable of generating 50% inhibition) igual a 5.76μg mL-1 e índice de atividade antioxidante (AAI) de 6,94, considerado forte (AAI>2,0) em relação aos demais óleos avaliados. O óleo essencial de S. aromaticum apresentou excelente atividade antioxidante em menor concentração que anecessário para inibir a cultura láctica, indicando que este óleo pode ser usado como conservante em alimentos processados contendo culturas lácticas.(AU)

ESTUDO DA MICROBIOTA LÁTICA DE QUEIJOS TIPO PRATO PRODUZIDOS A PARTIR DE LEITE CRU E PASTEURIZADO

O queijo tipo Prato é amplamente conhecido e difundido em todo o Brasil. Sua formulação industrial foi influenciada pelos queijos europeus e hoje é um dos tipos mais consumidos do país. Sua produção tradicional é feita com leite pasteurizado, com adição de cultura lática indicadora composta por Lactococcus lactis sub lactis e Lactococcus lactis sub cremosis seguido por um processo de maturação para adquirir características próprias. Neste trabalho foram produzidos queijos tipo Prato a partir de leite cru (QPC1/QPC2) e leite pasteurizado (QPP1/QPP2) com tamanho reduzido (6,5 x 4,5 x 2,5 cm) a fim de acompanhar a microbiota lática durante a maturação dos queijos nos tempos de 0, 5, 15, 25, 35, 45 e 60 dias. Contagens iniciais de 5,78 e 5,56 log1o UFC mL1 foram encontradas nas duas avaliações dos queijos QPP1/QPP2 e 6,36 e 6,19log1o UFC mL1 para QPC1/QPC2. Os valores máximos de contagens foram observados entre os dias 5 e 15 com posterior queda. Também foram realizadas análises físico-químicas como pH e atividade de água (AA) e outros estudos microbiológicos como a pesquisa de Staphylococcus, enterobactérias e leveduras. Valores iniciais de pH de 5,98 e 5,80 no dia 0 foram observados com redução à medida que a maturação avançava com oscilações. Para a AA, a variação inicial foi de 0,975 a 0,979 para QPP1/QPP2 e 0,974 para QPC1/QPC2 também com oscilações e ao final dos 60 dias foi de 0,969 para QPP1/QPP2 e 0,964 e 0,973 QPC1/QPC2 respectivamente. Para enterobactérias e Staphyloccocus, ambos os grupos apresentaram altas contagens iniciais. Logo ao final dos 25 dias, QPP1/QPP2 apresentaram contagens menores de Staphylococcus e QPC1/QPC2 persistiram com contagens elevadas. As enterobactérias reduziram durante toda a maturação em todos os grupos. As leveduras apresentaram baixas contagens durante o processo e bolores foram ausentes.

The Prato type cheese is widely known and widespread throughout Brazil. Its industrial formulation was inspired by the European cheese kinds and nowadays it is one of the most consumed in the country. Its traditional production is made with pasteurized milk with the addition of an indicator lactic culture composed of Lactococcus lactis sub lactis and Lactococcus lactis sub cremosis, followed by a maturation process to acquire its own characteristics. In this work, Prato type cheeses were produced from raw milk and pasteurized milk with reduced size (6.5 x 4.5 x 2.5 cm) in order to monitor the lactic microbiota during cheese maturation in times of 0, 5, 15, 25, 35, 45 and 60 days.nitial counts of 5.78 and 5.56 log1o CFU mL1 were found in the two evaluations of QPP1/QPP2 and 6.36 and 6.19 log1o CFU mL1 cheeses for QPC1/QPC2. The maximum count values were observed between days 5 and 15 with a subsequent decrease. Physical-defined analysis such as pH, water activity (AA) and other microbiological studies such as a survey of Staphylococcus, enterobacteria and yeasts were also carried out.Initial pH values of 5.98 and 5.80 on day 0 were observed with reduction as maturation carried on with fluctuations. For AA, the initial variation was 0.975 to 0.979 for QPP1/QPP2 and 0.974 for QPC1/QPC2 also with fluctuations. By the end of 60 days it was 0.969 for QPP1/QPP2 and 0.964 and 0.973 for QPC1/QPC2 respectively. For Enterobacteriaceae and Staphylococcus, both groups had high initial counts. At the end of 25 days, QPP1/QPP2 showed lower Staphylococcus numbers and QPC1/QPC2 persisted with high counts. Enterobacteria decreased throughout maturation in all groups. Yeasts had low counts during the process and molds were absent

Silagem de ração completa à base de palma forrageira e leguminosas: Características fermentativas, populações microbianas, estabilidade aeróbia e valor nutritivo

Objetivou-se com este experimento avaliar o perfil fermentativo, perdas fermentativas, populações microbianas, estabilidade aeróbia, composição química e degradabilidade in situ de silagens de ração completa a base de palma forrageira associada a leguminosas. Os tratamentos consistiram em quatro silagens de ração completa a base de palma forrageira e concentrado SRPC e associada a leguminosas como, Gliricídia SRPG, Leucena SRPL e Mata-pasto SRPMP. Houve diferença (P<0,05) entre os tratamentos avaliados, para as variáveis pH e N-NH3, os valores de pH ficaram dentro da faixa ideal 4,2 a 4,4, já as concentrações de N-NH3 variaram de 2,21 a 0,85%. As recuperações de matéria seca para os tratamentos avaliados foram em média 89%. As populações de Bactérias ácido láticas (BAL) variaram de 5 a 6,3 log UFC/g MF entre as silagens avaliadas. Todas as silagens de ração associadas a leguminosas apresentaram contagem para Mofos em média 3,3 log UFC/g MF. Populações de Leveduras foram observadas apenas para a SRPG 5 Log UFC/g MF. As maiores estabilidades aeróbias foram observadas para a SRPC, SRPG seguida da SRPMP. A composição química das silagens de ração completa foi a esperada pela formulação das rações. A SRPC se destacou em relação as demais silagens de ração, por apresentar a maior fração solúvel (A) e a maior degradação efetiva (DE) para as três taxas de passagem avaliadas (2%/h, 5%/h e 8%/h). Conclui-se, que as silagens de ração associadas a leguminosas gliricídia e mata-pasto podem ser recomendadas, com base na fermentação e no valor nutricional.

The objective of this experiment was to evaluate the fermentative profile, fermentative losses, microbial populations, aerobic stability, chemical composition and in situ degradability of complete feed silages based on forage palm associated with legumes. The treatments consisted four complete feed silages based on the forage palm and concentrate SRPC and associated wiht legumes such as gliricidia SRPG, leucena SRPL and pasture-kills SRPMP. There was a difference (P< 0.05) between the treatments evaluated, for the pH and N-NH3 variables, the pH values evaluated within the ideal range 4.2 a 4.4, as N-NH3 paramerers varied from 2.21 to 0.85%. The dry matter recoveries for the treatments evaluated were on average 89%. The populations of lactic acid bacteria (BAL) ranged from 5 to 6.3 log CFU/ g MF among the evaluated silages. All feed silages associated with legumes dissipated for molds averaged 3.3 log CFU/g MF. Yeast populations were observed only for one SRPG 5 log CFU/g MF. As greater aerobic stability was observed for na SRPC, the SRPG followed by the SRPMP. The chemical composition of the complete feed silages was as expected by the combination of the diets. The SRPC stands out in relation to the other feed silages, for presenting the highest soluble fration (A) and the highest effective degradation (DE) for the three passage rates evaluated (2%/h; 5%/h and 8 %/h). It is concluded that the feed silages associated with leguminous gliricidia and pasture-kills can be recommended, based on fermentation and nutritional value

PROCESSO DE BACTOFUGAÇÃO PARA A ELIMINAÇÃO DOS MICRORGANISMOS ESPORULADOS E O IMPACTO EM BACTÉRIAS DE INTERESSE LÁCTEO

A verificação da quantidade e características dos microrganismos presentes no leite e derivados permite determinar a eficiência dos métodos empregados durante os processos tecnológicos e ainda estender o tempo de validade do produto final. Com o presente trabalho objetivou-se avaliar a eficiência do processo de bactofugação na redução da carga microbiana do leite de uma empresa de laticínios na região Sul Fluminense do Estado do Rio de Janeiro. Foram coletadas 34 amostras nos meses de maio de 2018 a maio 2019, sendo 17 amostras antes do processo de bactofugação e 17 após o processo. As análises bacteriológicas realizadas foram contagens de microrganismos formadores de esporos mesófilos, termófilos aeróbios, esporulados deteriorantes de produtos de baixa acidez (flat sour), Clostridium perfringens,mesófilos aeróbios, coliformes totais e Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosas, Sthapylococcus coagulase positiva e bactérias ácido láticas (BAL). A bactofugação apresentou eficiência na eliminação de microrganismos esporulados e na redução na contagem dos demais microrganismos de interesse lácteo avaliados, sendo a redução encontrada variando de 2 a 4 ciclos logarítmicos. Conclui-se que o processo é eficiente na remoção parcial destes microrganismos e é diretamente dependente da qualidade inicial da matéria-prima, sendo indicado o emprego na indústria de laticínios como uma ferramenta de controle de qualidade.

The verification of the quantity and characteristics of the microorganisms present in the milk and derivatives allows to determine the efficiency of the methods employed during the technological processes and still extend the validity time of the final product. This study aimed to evaluate the efficiency of the bactofugation process in reducing the microbial load of milk from a dairy company in the southern Fluminense region of the state of Rio de Janeiro. 34 samples were collected in the months of may 2018 the may 2019, with 17 samples before the bactofugation process and 17 after the process. The bacteriological analyses performed were counting of mesophilic spore-forming microorganisms, aerobic thermophiles, deteriorating sporulates of low-acid products ("flat sour"), Clostridium perfringens, aerobic mesophils, coliforms and Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosas, coagulase-positive Sthapylococcus and lactic acid bacteria (BAL). Bactofugation showed efficiency in the elimination of sporulated microorganisms and reduction in the count of other microorganisms of lactic interest evaluated, with a reduction of 2 to 4 logarithmic cycles. Thus, it is concluded that the process is efficient in the partial removal of these microorganisms and is directly dependent on the initial quality of the raw material, being indicated the employment in the dairy industry aiming to guarantee milk quality.

Caracterização dos isolados bacteriocinogênicos Enterococcus hirae e Pediococcus pentosaceus obtidos de queijo artesanal e suas bacteriocinas

Os produtos lácteos possuem uma microbiota autóctone bastante diversificada, na qual o grupo das Bactérias Ácido Lácticas (BAL) é de notável relevância devido às suas características benéficas, tecnológicas e bioconservantes, atraindo o interesse para sua utilização em diversos segmentos biotecnológicos, em especial na indústria de alimentos. O objetivo deste trabalho foi isolar e identificar BAL bacteriocinogênicas de queijos artesanais, caracterizando aspectos ligados à produção e purificação das bacteriocinas, inocuidade, potencial benéfico dos isolados e propriedades inibitórias contra Listeria spp. As cepas bacteriocinogênicas Enterococcus hirae ST57ACC e Pediococcus pentosaceus ST65ACC foram isoladas a partir da técnica de tripla camada e identificadas por metodologias fenotípicas e moleculares. As bacteriocinas produzidas por E. hirae ST57ACC e P. pentosaceus ST65ACC demostraram estabilidade em ampla faixa de pH e temperatura, e foram inativadas após tratamento com enzimas proteolíticas, comprovando sua natureza proteica. Tratamentos com EDTA, SDS, NaCl e Tween 80 não afetaram a atividade das bacteriocinas. Os sobrenadantes de ambos os isolados foram capazes de inibir Listeria innocua e diversas cepas de L. monocytogenes pertencentes à diferentes sorogrupos e obtidas de fontes distintas, inibindo completamente o desenvolvimento de L. monocytogenes após 12 h. Em co-culturas das cepas bacteriocinogênicas com a cepa indicadora L. monocytogenes 422 em leite desnatado, observou-se que E. hirae ST57ACC foi capaz de controlar a multiplicação do patógeno após 48 h. E. hirae ST57ACC e P. pentosaceus não apresentaram resultados positivos para 25 genes relacionados a bacteriocinas conhecidas, indicando que podem produzir novas bacteriocinas. As cepas de E. hirae ST57ACC e P. pentosaceus ST65ACC foram também avaliadas quanto ao seu potencial benéfico e segurança: ambos os isolados permaneceram viáveis após tratamento em condições gastrointestinais simuladas, exibindo altos níveis de auto e co-agregação com L. monocytogenes e níveis variados de hidrofobicidade, demonstrando que E. hirae ST57ACC e P. pentosaceus ST65ACC podem prevenir potencialmente o estabelecimento de infecções pelo patógeno. Por meio da metodologia de agar-spot, avaliou-se a possibilidade de interferência de 33 medicamentos comerciais, de diferentes grupos sobre a multiplicação de E. hirae ST57ACC e P. pentosaceus ST65ACC, revelando que apenas antiinflamatórios e medicamentos contendo loratadina e cloridrato de propranolol apresentaram atividade inibitória sobre as cepas. Testes fenotípicos para determinação da susceptibilidade antimicrobiana demonstraram que E. hirae ST57ACC e P. pentosaceus ST65ACC foram resistentes à vancomicina, oxacilina e sulfa/trimetoprim dentre os 11 antibióticos testados pelo método de disco difusão. Com relação à PCR, poucos genes relacionados à resistência a antibióticos foi foram identificados. Nenhum dos isolados amplificou genes de produção de aminas biogênicas e nem apresentou produção das mesmas. A expressão de diferentes elementos do sistema de transporte ABC e metabolismo de açúcares foi identificada para ambos os isolados. Variações na proporção de inóculo não influenciaram a taxa de multiplicação de E. hirae ST57ACC nem de P. pentosaceus ST65ACC, no entanto, a produção de bacteriocinas foi detectada apenas 9 horas após a inoculação das cepas, quando inoculadas nas proporções de 5% e 10%. Adicionalmente, verificou-se que a densidade celular das cepas bacteriocinogênicas esteve correlacionada à produção de bacteriocinas em sistemas de fermentação tradicional e fermentação com controle de pH a 5,5 e agitação. E. hirae ST57ACC e P. pentosaceus ST65ACC foram capazes de se multiplicar e produzir bacteriocinas na presença de xilo-oligossacarídeos após 6 horas de incubação, porém em níveis reduzidos quando comparados ao cultivo em meio MRS. Por fim, as bacteriocinas produzidas por E. hirae ST57ACC e P. pentosaceus ST65ACC foram purificadas a partir de diferentes metodologias. A bacteriocina produzida por P. pentosaceus ST65ACC foi purificada em duas etapas, com rendimento final de 101,33 revelandose um peptídeo com massa molecular de 3,5 a 8,5 kDa, determinado por SDS-PAGE. Em contrapartida, um protocolo de três etapas foi empregado na purificação da bacteriocina produzida por E. hirae ST57ACC, com rendimento final de 3,05. Adicionalmente, uma fração semi-purificada foi testada com a linhagem celular HT29, demonstrando que a bacteriocina não apresenta efeitos citotóxicos contra células humanas, sendo considerada segura neste aspecto. Os dados obtidos neste trabalho indicam que os isolados E. hirae ST57ACC e P. pentosaceus ST57ACC podem ser considerados importantes ferramentas biotecnológicas na produção de bacteriocinas de interesse ao controle de L. monocytogenes e na biopreservação de alimentos.

Dairy products present a rich and diverse autochthonous microbiota, in which Lactic Acid Bacteria (LAB) are relevant, due to their beneficial, technological and biopreservative features, attracting the interest for their biotechnological application, in food industry, pharmaceutic area and human and veterinary medicine fields. The aim of this study was to isolate and to identify bacteriocinogenic LAB from artisanal cheeses, characterizing some aspects linked to bacteriocin production and purification, safety and beneficial potential of the isolates, as well as their inhibitory properties against Listeria spp. Bacteriocinogenic strains Enterococcus hirae ST57ACC and Pediococcus pentosaceus ST65ACC were isolated by using the triplelayer technique and identified by phenotypical and molecular methods. Bacteriocins produced by E. hirae ST57ACC and P. pentosaceus ST65ACC were stable in a wide range of pH and temperature, losing their activity after treatment with proteolytic enzymes, confirming their proteinaceous nature. Treatments with EDTA, SDS, NaCl and Tween 80 did not affect bacteriocin activity. Cell-free supernatants from both isolates were able to inhibit Listeria innocua and several L. monocytogenes strains, from different serogroups obtained from diverse sources, eliminating L. monocytogenes after 12 h. In co-culture experiments conducted in skimmed milk with the bacteriocinogenic isolates and the target strain L. monocytogenes 422, E. hirae ST57ACC controlled the target strain growth after 48 h. E. hirae ST57ACC and P. pentosaceus ST65ACC did not present positive results for 25 known bacteriocin related genes, indicating that they might express new bacteriocins. E. hirae ST57ACC e P. pentosaceus ST65ACC were also evaluated for their beneficial and safety features: both isolates remained viable after treatment replicating gastrointestinal conditions, showing high levels of auto and co-aggregation with L. monocytogenes and diverse levels of hydrophobicity, demonstrating that E. hirae ST57ACC and P. pentosaceus ST65ACC might prevent the establishment of infections caused by this pathogen. Interference of 33 commercial drugs from different groups on growth of E. hirae ST57ACC and P. pentosaceus ST65ACC was tested by agar-spot method, revealing that only anti-inflammatories and drugs xv containing loratadine and propranolol hydrochloride influenced the growth of bacteriocinogenic strains. Phenotypical tests employed to determine antibiotic susceptibility have shown that E. hirae ST57ACC and P. pentosaceus ST65ACC were resistant to vancomycin, oxacillin and sulfa/trimethoprim out of 11 antibiotics tested by disk-diffusion test, nonetheless low number of antibiotic resistance genes was observed by PCR analysis. None of the isolates amplified biogenic amines encoding genes neither presented phenotypical evidence of their production. Expression of different ABC transporters linked to bacteriocin export and sugar metabolism was detected, for both isolates. Changes in inoculum size did not influenced the growth of E. hirae ST57ACC and P. pentosaceus ST65ACC; however, bacteriocin production was affected, and bacteriocins were detected only after 9 h with inoculation at 5% and 10% of bacteriocinogenic strains. Additionally, it was observed that cell density of both bacteriocinogenic strains was linked to bacteriocin production in traditional and pH at 5.5 and agitation controlled fermentation continuous. E. hirae ST57ACC and P. pentosaceus ST65ACC were capable to grow and produce bacteriocins in the presence of xylo-oligossacharides after 6 h of incubation, but in lower levels than those obtained with cultivation in MRS broth. Finally, E. hirae ST57ACC and P. pentosaceus ST65ACC were purified from different methods. The bacteriocin produced by P. pentosaceus ST65ACC was purified in two-steps, with final yield of 101.33, recognized as a 3.5 to 8.5 kDa peptide, determined by Tricine-SDS-PAGE. In contrast, a three-step-protocol was used to purify the bacteriocin produced by E. hirae ST57ACC, with final yield of 3.05. Moreover, a semi-purified fraction of E. hirae ST57ACC bacteriocin was tested in HT-29 cell-line, demonstrating no-cytotoxic effects in human cells, which means the bacteriocin can be considered safe in this aspect. Obtained data from this study indicate that E. hirae ST57ACC and P. pentosaceus ST57ACC may be considered as important biotechnological tools for bacteriocin production to control L. monocytogenes and as biopreservatives in food.

Características físico-químicas e sensoriais e iogurte firme e sobremesa láctea fermentada com doce de caju

o objetivo deste estudo foi desenvolver e avaliar iogurte e sobremesa láctea fermentada adicionados de doce de caju. O doce foi elaborado com proporção para atingir 40oBrix. O iogurte e a sobremesa láctea fermentada foram elaborados e avaliados quanto ao pH, acidez, proteína total, gordura, EST e cinzas após um dia de fabricação. A pós-acidificação foi avaliada durante 35 dias de armazenamento refrigerado. O teste de aceitação e intenção de compra foi realizado após 14 dias de armazenamento refrigerado. Os dados das características fisico-químicas, pós-acidificação e avaliação sensorial foram analisados por Análise de Variância e teste de Tukey (p<0,05) ou análise de regressão. Os produtos atenderam os parâmetros fisico-químicos e microbiológicos exigidos pela legislação. Na pós-acidificação, o pH dos produtos reduziu ao longo do tempo e a acidez do iogurte foi superior da sobremesa láctea fermentada sendo em média 0,12% de ácido lático durante os 35 dias de armazenamento. O iogurte apresentou maior aceitação e intenção de compra que a sobremesa láctea fermentada. A fabricação dos produtos toma-se viável do ponto econômico, fisico-químico e sensorial, além de agregar valor ao soro de leite e o caju.(AU)

The aim study was develop and evaluate yogurt and fermented dairy dessert added with cashew sweet. The sweet was prepared in proportion to 40oBrix. The yogurt and fermented dairy dessert were evaluated for pH, acidity, total protein fat, total solid and ash content after one day of manufacture. Post-acidification was evaluated during 35 days of refrigerated storage. The acceptance and purchase intention test was performed after 14 days of refrigerated storage. The results of physico-chemical characteristics, post-acidification and sensory evaluation were analyzed by Analysis of Variance and Tukey test (p<0.05) or regression analysis. The products is according the physico-chemical parameters required by the Brazilian legislation. In post-acidification, the pH of the products decreased over time and acidity of yogurt was higher than fermented dairy dessert and the acidity on average 0.12% of lactic acid during the 35 days of storage. The yogurt presented a greater acceptance and intention to purchase than the fermented dairy dessert. The manufacture of the products showed viable from the economic point of view, physicochemical and sensorial, besides adding value to the whey and cashew.(AU)

Bacteriocinogenic potential of lactic acid bacteria isolates from artisanal fermented meat products

O objetivo do presente trabalho foi isolar e caracterizar bactérias ácido láticas (BAL) presentes em embutidos cárneos fermentados artesanais através de técnicas fenotípicas e genotípicas, buscando a seleção de isolados com potencial bacteriocinogênico. BAL isoladas foram obtidas de embutidos cárneos fermentados artesanais e foram caracterizadas quanto a sua atividade bacteriocinogênica; após o isolamento e identificação foram obtidos 5 diferentes isolados: Lactobacillus curvatus 12 e 36; Lactococcus garvieae 32 e Weissella viridescens 23 e 31 e realizada a detecção de genes de bacteriocinas; devido aos resultados encontrados em relação ao espectro de atividade e efeito de substâncias químicas e temperatura na atividade inibitória, três isolados foram selecionados (L. curvatus 12 e 36 e W. viridescens 23) para as demais análises para avaliar o potencial bacteriocinogênico. Os isolados selecionados apresentaram multiplicação distinta e a produção de bacteriocinas foi mais evidente em L. curvatus 12 e W. viridescens 23. As bacteriocinas produzidas foram adsorvidas pelas cepas produtoras em diferentes níveis. As bacteriocinas parcialmente purificadas mantiveram sua atividade inibitória após a eluição com 60% de isopropanol. Os padrões de lise celular foram semelhantes para todos os isolados testados. A detecção de -galactosidase indicou desestabilização da permeabilidade da membrana celular das BAL isoladas. As bacteriocinas produzidas por L. curvatus 12 foram purificadas através do HPLC e foram identificados 4 diferentes sequências de peptídeos. Os isolados de BAL selecionados foram capazes de produzir bacteriocinas com alta atividade inibitória contra L. monocytogenes, indicando sua potencial aplicação na indústria de alimentos como bioconservadores. Para a avaliação da presença de genes de virulência, resistência a antibióticos e probióticos foram utilizados os cinco isolados anteriormente identificados. Todos os isolados testados foram positivos para mub, enquanto EF226-cbp, EF1249-fbp eEF2380-maz foram detectados em pelo menos um isolado; nenhum isolado apresentou os genes map, EFTu ou prgB. Os isolados testados apresentaram resultados variados em relação aos genes de virulência e nenhum isolado apresentou os genes gelE, cylA, efsA, cpd, int-Tn ou sprE. Os genes de resistência aos antibióticos também apresentaram resultados variados. Os isolados de BAL apresentaram alguns aspectos benéficos, além da produção de bacteriocinas, porém a presença de genes de virulência e resistência a antibióticos é um problema ao utilizar esses isolados como culturas starter ou bioconservadores em alimentos. Considerando o potencial inibitório dessas cepas, uma alternativa seria o uso de suas bacteriocinas após procedimentos de semi-purificação ou purificação. Linguiça frescal foi preparada e inoculada com diferentes combinações de L. curvatus 12 (BAL bacteriocinogênica), L. sakei ATCC 15521 (BAL não bacteriocinogênica), L. monocytogenes, nisina e a bacteriocina parcialmente purificada produzida por L. curvatus 12 e estocadas a 7 °C durante 10 dias. As análises microbiológicas foram realizadas nos dias 1, 4, 7 e 10 e as análises físico-químicas (controle) nos dias 1 e 10. No geral, as contagens de BAL não apresentaram diferenças significativas entre os tratamentos e ao longo do período de estocagem (p > 0.05). As contagens de L. monocytogenes em linguiça frescal inoculada com o patógeno e a BAL bacteriocinogênica variaram de 1.0 a 2.0 log UFC/g, sendo significativamente diferente da linguiça inoculada apenas com L. monocytogenes (p < 0.05). Nisina e a bacteriocina parcialmente purificadas também determinaram uma redução nas contagens de L. monocytogenes quando comparado com o tratamento que foi inoculado somente o patógeno, variando de 1.0 a 3.0 log UFC/g (p > 0.05). Esses resultados indicam que BAL bacteriocinogênica foi capaz de determinar uma redução significativa na contagem de L. monocytogenes em linguiça frescal estocada a 7 °C.

The aim of the study was isolate and characterized lactic acid bacteria (LAB) from artisanal fermented meat products through phenotypic and genotypic methodologies, searching for the selection of isolates with bacteriocinogenic potential. LAB isolates were obtained from artisanal fermented meat products and were characterized to their bacteriocinogenic activity; after isolation and identification were obtained 5 different isolates: Lactobacillus curvatus 12 and 36; Lactococcus garvieae 32 and Weissella viridescens 23 and 31 and the detection of bacteriocins related genes were performed; L. curvatus 12 and 36 e W. viridescens 23 were selected for the other analysis to evaluate the bacteriocinogenic potential. The selected isolates showed distinct growth and bacteriocin production was more evident in L. curvatus 12 and W. viridescens 23. The bacteriocins produced were adsorbed by the producing strains at different levels. Partially purified bacteriocins maintained their inhibitory activity after elution with 60% isopropanol. Cell lysis patterns were similar for all isolates tested. Detection of -galactosidase indicated destabilization of the cell membrane permeability of the isolated BAL. The bacteriocins produced by L. curvatus 12 were purified by HPLC and four different peptide sequences were identified. The selected BAL isolates were able to produce bacteriocins with high inhibitory activity against L. monocytogenes, indicating their potential application in the food industry as bioconservatives. For the evaluation of the presence of virulence genes, resistance to antibiotics and probiotics, the five isolates previously identified were used. All isolates tested were positive for mub, while EF226-cbp, EF1249-fbp and EF2380-maz were detected in at least one isolate; none isolated showed map, EFTu or prgB. The isolates tested presented variable results in relation to the virulence genes and no isolates showed the genes gelE, cylA, efsA, cpd, int-Tn or sprE. Antibiotic resistance genes were also detected at different patterns. LAB isolates presented some beneficial aspects besides the production of bacteriocins, but the presence of virulence genes and resistance to antibiotics is a problem when using these isolates as starter or bioconservative cultures in foods. Considering the inhibitory potential of these strains, an alternative would be the use of their bacteriocins after semi-purification or purification procedures. Fresh sausage was prepared and inoculated with different combinations of L. curvatus 12 (bacteriocinogenic BAL), L. sakei ATCC 15521 (non bacteriocinogenic BAL), L. monocytogenes, nisin and partially purified bacteriocin produced by L. curvatus 12 and stored at 7 ° C for 10 days. Microbiological analyzes were performed on days 1, 4, 7 and 10 and physical-chemical analyzes (control) on days 1 and 10. In general, LAB counts did not show significant differences between treatments and throughout the storage period (p> 0.05). The counts of L. monocytogenes in fresh sausage inoculated with the pathogen and the bacteriocinogenic LAB varied from 1.0 to 2.0 log CFU/g, being significantly different from the sausage inoculated with only L. monocytogenes (p < 0.05). Nisin and partially purified bacteriocin also determined a reduction in the counts of L. monocytogenes when compared to the treatment that was inoculated only the pathogen, ranging from 1.0 to 3.0 log CFU/g (p> 0.05). These results indicate that the bacteriocinogenic LAB was able to determine a significant reduction in the count of L. monocytogenes in fresh sausage stored at 7 ° C.

Beneficial properties and safety of lactic acid bacteria isolated from the dairy production environment

Bactérias ácido lácticas (BAL) foram isoladas do ambiente de produção de leite e avaliadas quanto ao potencial benéfico. Testes preliminares e análise por PCR foram aplicados para selecionar e identificar através de sequenciamento de rRNA 16S 15 cepas de BAL: Lactobacillus (n = 11; Lb. casei MSI1, Lb. casei MSI5, Lb. casei MRUV1, Lb. casei MRUV6, Lb. acidophilus MVA3, Lb. nagelli MSIV4, Lb. harbinensis MSI3, Lb. harbinensis MSIV2, Lb. fermentum SIVGL1, Lb. plantarum MLE5 e Lb. plantarum MSI2), Pediococcus (n = 2; P. pentosaceus MLEV8 e P. acidilactici MSI7) e Weissella (n = 2; W. paramesenteroides MRUV3 e W. paramesenteroides MSAV5). Todas as linhagens selecionadas apresentaram resistência ao baixo pH e à presença de sais biliares. O teste API ZYM foi realizado para caracterizar a atividade enzimática entre as cepas e foi observada elevada atividade galactosidase em 13 delas. Todas as cepas apresentaram alta taxa de sobrevivência ao suco gástrico e as condições intestinais simulados, capacidade de auto-agregação e coagregação com micro-organismos indicadores e alta hidrofobicidade da superfície celular. A maioria das cepas foi positiva para os genes de adesão map e EFTu. Os resultados de deconjugação de sais biliares mostraram forte desconjugação para todas as cepas. Todas as cepas mostraram bons resultados para assimilar lactose. Após esta etapa de caracterização do potencial benéfico, as 15 BAL foram avaliadas quanto ao potencial de virulência e de resistência antimicrobiana. A produção de fatores de virulência (hemólise, gelatinase, lipase, desoxirribonuclease e aminas biogênicas: lisina, tirosina, histidina e a ornitina) foi avaliada por métodos fenotípicos, a 25 °C e 37 °C, bem como a resistência a 17 antibióticos. Os isolados foram também submetidos à análise de PCR para identificar a presença de 49 genes associados a fatores de virulência. Nenhuma das cepas apresentou atividade hemolítica, produção de gelatinase, lipase, desoxirribonuclease e aminas biogênicas. Das 15 cepas selecionadas, para 12 tipos de antibióticos no método de difusão em disco, todas as amostras foram resistentes à oxacilina e sulfa/trimetoprim, 14 foram resistentes a gentamicina, 11 foram resistentes a clindamicina, nove cepas foram resistentes à vancomicina, oito cepas para rifampicina, cinco foram resistentes a eritromicina, quatro foram resistentes à tetraciclina, duas cepas foram resistentes à ampicilina, uma cepa foi resistente ao cloranfenicol e nenhuma viii apresentou resistência ao imipenem. Para um teste quantitativo do antibiograma, 5 antibióticos em fitas Etest® (bioMérieux) foram selecionados. Todas as 15 cepas foram resistentes à vancomicina, duas para rifampicina, uma para gentamicina e uma para o cloranfenicol. Em relação aos genes relacionados com virulência, 19 dos 49 genes testados estavam presentes em algumas cepas. Após a caracterização do potencial virulento das 15 BAL, estas foram avaliadas quanto ao potencial tecnológico para aplicação na indústria de laticínios. Todas as cepas apresentaram capacidade de acidificação, atingindo valores de pH entre 0.73 e 2.11 em 24 horas: Lb. casei MRUV6 apresentou maior capacidade de acidificação (pH 2.11 após 24 h). Dez cepas foram capazes de produzir diacetil a 37 °C, com exceção de Lb. casei MSI1, Lb. harbinensis MSI3, Lb. fermentum SIVGL1, Lb. plantarum MLE5 e W. paramesenteroides MRUV3. Todas as cepas foram capazes de produzir exopolissacarídeos, e apenas duas cepas apresentaram atividade proteolítica (Lb. casei MSI5 e W. paramesenteroides MSAV5). Com base nessa caracterização, Lb. casei MRUV6 foi selecionado para produzir o leite fermentado, armazenado a 4 °C e 10 °C e monitorado até 35 dias de vida útil. As amostras foram submetidas a métodos fenotípicos e moleculares para avaliar a presença de Lb. casei MRUV6 (plaqueamento convencional e RT-PCR, verificando a expressão de gapdh, um gene housekeeping) e verificar a expressão do gene bsh, relacionado à resistência à sais biliares (RT-PCR). A população de Lb. casei MRUV6 se apresentou estável durante todo o período de armazenamento a 4 °C e 10 °C a níveis em torno de 9.9 log UFC/g e também pelo monitoramento da expressão do controle endógeno GAPDH. No entanto, o gene bsh não foi expresso durante o período de armazenamento. O estudo demonstrou o potencial uso da cepa de Lb. casei MRUV6 isolada de um ambiente lácteo para a produção de um produto lácteo fermentado e sua estabilidade durante o armazenamento a 4 °C e 10 °C. Todos os isolados do estudo apresentaram características benéficas, segurança para utilização em alimentos e potencial tecnológico para utilização na indústria de laticínios. Além disso, os mesmos podem ainda ser submetidos a estudos adicionais para avaliações in vivo e realizar a caracterização como probióticos.

Lactic acid bacteria isolated from dairy environment were evaluated for beneficial potential. Preliminary screening and PCR analysis were applied to select and identified through 16s rRNA sequencing 15 LAB strains: Lactobacillus (n = 11; Lb. casei MSI1, Lb. casei MSI5, Lb. casei MRUV1, Lb. casei MRUV6, Lb. acidophilus MVA3, Lb. nagelli MSIV4, Lb. harbinensis MSI3, Lb. harbinensis MSIV2, Lb. fermentum SIVGL1, Lb. plantarum MLE5 and Lb. plantarum MSI2), Pediococcus (n = 2; P. pentosaceus MLEV8 and P. acidilactici MSI7) and Weissella (n = 2; W. paramesenteroides MRUV3 and W. paramesenteroides MSAV5). All selected strains showed resistance to acidic pH and to presence of bile salt. API ZYM test characterized enzymatic activity of the strains and high -galactosidase activity was observed in 13 strains. All strains presented high values for survival rate to simulated gastric and intestinal conditions, ability to auto and co-aggregate with indicators microorganisms and high cell surface hydrophobicity. Most of the strains were positive for map and EFTu beneficial genes. Strong bile salts deconjugation was applied for all strains and all strains showed good results for assimilating lactose. After this first part of the study, the 15 BAL were evaluated for potential virulence and antimicrobial resistance. The production of virulence factors (hemolysis, gelatinase, lipase, deoxyribonuclease and biogenic amines: lysine, tyrosine, histidine and ornithine) was assessed by phenotypic methods at 25 °C and 37 °C, as well as the resistance to 17 antimicrobials. The isolates were also subjected to PCR to identify the presence of 49 genes associated with virulence factors. None of the strains presented hemolytic activity or the production of gelatinase, lipase, deoxyribonuclease and tested biogenic amines. Of the 15 selected cultures, for 12 types of antibiotics in the disc diffusion method, all strains were resistant for oxacillin and sulfa/trimethoprim, 14 were resistant to gentamicin, 11 were resistant to clindamycin, nine strains were resistant to vancomycin, eight strains to rifampicin, five were resistant to erythromycin, four were resistant to tetracycline, two strains were resistant to ampicillin, one strain was resistant to chloramphenicol and none was resistant for imipenem. For a quantitative test of the antibiogram, five antibiotics were selected in Etest® strips (bioMérieux). All 15 strains were resistant to vancomycin, two for rifampicin, one for gentamicin and one for chloramphenicol. Regarding the x virulence related genes, 19 genes from 49 tested were present in some strains. Results showed that five cultures showed the presence of the int gene, four cultures showed the presence of the ant(4')-Ia gene, three cultures were positive for vanC2, cpd and tdc, two cultures for vanA, tet(K), tet(S), ermA, bcrR, mur-2ed, asa1 and ccf, and one culture was positive for vanC1, ermB, aph(3')-IIIa, aac(6)-le-aph(2)-Ia, bcrB and hyl. After characterizing the virulent potential of the 15 BAL, these strains were evaluated for the technological potential for application in the dairy industry. All strains presented acidification capacity, reaching pH values between 0.73 and 2.11 in 24 hours: Lb. casei MRUV6 presented the highest acidification ability (pH 2.11 after 24 h). Ten strains were able to produce diacetyl at 37 °C, except by Lb. casei MSI1, Lb. harbinensis MSI3, Lb. fermentum SIVGL1, Lb. plantarum MLE5 and W. paramesenteroides MRUV3. All strains were able to produce exopolysaccharides, and only two strains presented proteolytic activity (Lb. casei MSI5 and W. paramesenteroides MSAV5). Based on this characterization, Lb. casei MRUV6 was selected for producing fermented milk, stored at 4 °C and 10 °C and monitored until 35 days of shelf life. Samples were subjected to phenotypical and molecular methods to quantify the presence of Lb. casei MRUV6 (conventional plating and RT-PCR, by checking the expression of gapdh, a housekeeping gene) and to verify the expression of bsh gene, related to resistance to bile salts (RT-PCR). Lb. casei MRUV6 population was stable during storage period at 4 and 10 °C at levels around 9.9 log CFU/g, and by monitoring the expression of gapdh gene. However, bsh gene was not expressed during storage period. The study demonstrated the potential use of the beneficial strain Lb. casei MRUV6 isolated from a dairy environment for the production of a fermented milk product, and its stability during storage at 4 and 10 °C. All isolates from the study presented beneficial characteristics, safety for use in food and technological potential for use in the dairy industry. In addition, they may further be subjected to further studies for in vivo evaluations and characterization as probiotics.

Effects of yeast cell wall extract in dry diet on microbiology, short-chain fatty acids and fecal odor reduction of adult cats / Efeitos do extrato de parede de levedura em dieta seca sobre a microbiologia, ácidos graxos de cadeia curta e redução do odor das fezes de gatos adultos

The aim of this study was to evaluate the effects of yeast cell wall extract (YCW) in dry diet on the fecal microbiota, concentration of short-chain fatty acids (SCFA) and on the odor reduction of cats feces. We used 20 animals of both sexes, randomly assigned to four treatments and five repetitions totaling 20 experimental units: 1) dry commercial diet (control); 2) control + 0.2%, 3) control + 0.4%, and 4) control + 0.6% of YCW in dry matter. Enterobacteriaceae and lactic acid bacteria, fecal concentration of acetic, propionic and butyric acids, ammonia nitrogen and sensory panel were performed. There were no significant differences (p> 0.05) for bacterial counts and the concentration of SCFA and ammonia, but in sensory panel a reduction in the odor of feces could be noted with the use of 0.2% of YCW. We concluded that the addition of up to 0.6% YCW had no effect on the microbiology and the concentration of fatty acids, but there is potential for its use as an additive because of the improvement in the odor of feces. However, further studies are needed to understand the mechanisms of action and the effects of prebiotics for domestic cats. KEYWORDS: ammoniacal nitrogen; butyric acid; feline; lactic bacteria; mannanoligosacharide.

Objetivou-se avaliar os efeitos do extrato de parede de levedura (EPL) em dieta seca sobre a microbiota fecal, concentração de ácidos graxos de cadeia curta (AGCC) e redução do odor das fezes de gatos adultos. Foram utilizados 20 animais, dez de cada sexo, distribuídos ao acaso em quatro tratamentos e cinco repetições, totalizando 20 unidades experimentais: 1) dieta comercial seca (controle); 2) controle + 0,2%; 3) controle + 0,4%; e 4) controle + 0,6% de EPL na matéria seca da dieta. Foram realizados contagem de enterobactérias, E.coli e bactérias láticas, concentração fecal dos ácidos acético, propiônico, butírico e nitrogênio amoniacal, além de painel sensorial. Não foram observadas diferenças significativas (p>0,05) para as contagens bacterianas e a concentração de AGCC e nitrogênio amoniacal; no entanto, por meio do painel sensorial pôde ser notada redução no odor das fezes com o uso de 0,2% de EPL na dieta. Concluiu-se que a adição de até 0,6% de EPL não teve efeito sobre a microbiologia e a concentração de ácidos graxos, mas há potencial uso como aditivo devido à melhora no odor das fezes. Outros estudos são necessários para compreender os mecanismos de ação, efeitos e níveis de inclusão desse prebiótico para gatos domésticos.PALAVRAS-CHAVE: ácido butírico; bactérias láticas; felinos; mananoligossacarídeo; nitrogênio amoniacal.

AVALIAÇÃO DA MICROBIOTA LÁTICA CULTIVÁVEL DE LEITE BOVINO E QUEIJO COALHO PRODUZIDOS NO RIO GRANDE DO NORTE

Leite e derivados são alimentos de alto valor nutricional. E, consequentemente, fazem parte da dieta da população brasileira em uma ampla faixa etária. Devido a sua composição, estes alimentos representam um ótimo meio para o desenvolvimento de micro-organismos. O interesse dos consumidores por alimentos mais saudáveis faz crescer a busca por novos métodos de conservação, que preservem as características organolépticas do alimento e contribuam na qualidade. O conhecimento da população microbiana de leite e derivados auxilia na caracterização das condições de higiene da matéria-prima e dos processos de produção de derivados. Além disso, também constitui uma ferramenta para o estudo do potencial biotecnológico de bactérias ácido-láticas (BAL), naturalmente presentes nestes alimentos, as quais estão diretamente ligadas à formação do ácido lático, contribuindo na coagulação do leite. Essas bactérias são apontadas como principal fator capaz de inibir o desenvolvimento de micro-organismos patogênicos e deteriorantes. Neste contexto, objetivou-se avaliar a microbiota de leite e queijo coalho produzidos no semiárido do Brasil. Foram analisadas 23 amostras, sendo 12 de leite bovino cru e 11 de queijo coalho, submetidas a análises microbiológicas para contagem de bactérias mesófilas, contagem de Staphylococcus spp., Número Mais Provável de coliformes totais e termotolerantes, isolamento e caracterização de bactérias láticas e ainda teste de antagonismo frente a Staphylococcus aureus ATCC 25923 e Eschechia coli ATCC 25922. Apenas uma amostra apresentou contagem bacteriana reduzida, em relação a todos os micro-organismos analisados. Foram obtidas 56 cepas de BAL, das quais 29 (51,78%) foram oriundas das amostras de leite e 27 (48,22%) das amostras de queijo coalho. Do total, 36 (64,3%) isolados de bactérias ácido-láticas (BAL) demonstraram atividade antagonista contra os micro-organismos indicadores. O maior efeito inibitório observado foi obtido pelos isolados das amostras de leite frente a E. coli. As cepas de BAL demonstraram efeito inibitório frente aos micro-organismos estudados, evidenciando seu potencial tecnológico e sua possível utilização como bioconservantes em alimentos, contribuindo na melhoria da qualidade do produto e na redução da microbiota indesejada.

Milk and dairy products are of high nutritional value foods. And thus are part of the brazilian population diet in a wide age range. Due to its composition, these foods are a great way for development of micro-organism. The consumer interest in healthier foods increases the search for new conservation methods, for preserving the organoleptic characteristics of the food and contribute to their quality. Knowledge of the microbial population the milk and derivatives assists in the characterization of the hygiene conditions of the raw materials and derivatives production processes. It also provides a tool for the studying the biotechnological potential of lactic acid bacteria (LAB) naturally present in these foods. Which are directly linked to the formation of lactic acid, contributing to the coagulation of the milk. These bacteria are cited as the main factor capable of inhibiting the growth of pathogenic and spoilage micro-organisms. In this context, the objective was to evaluate the microbial rennet milk and cheese produced in the semiarid region of Brazil. Were analyzed 23 samples, 12 raw milk and 11 cheese curd, submitted will microbiological analyzes to count mesophilics bacteria, Staphylococcus spp. count, most probable number of total and thermotolerant coliforms, isolation and characterization of lactic acid bacteria and even front antagonism test to Staphylococcus aureus ATCC 25923 and Eschechia coli ATCC 25922. Only one sample showed reduced bacterial counts, for all analyzed microorganisms. We obtained 56 isolates of LAB, of which 29 (51.78%) were derived from milk samples and 27 (48.22%) of curd cheese samples. Of the total, 36 (64.3%) isolates of lactic acid bacteria (LAB) have demonstrated antagonistic activity against the indicators microorganisms. The greatest inhibitory effect was observed for isolates obtained from milk samples for E. coli. Strains of LAB showed inhibitory effect compared to the studied microorganisms, showing their technological potential and their possible use as biopreservatives in food, contributing to the improvement of product quality and reducing of unwanted microbiota.

Bactérias do acido láctico e leveduras associadas com o queijo-de-minas artesanal produzido na região da Serra do Salitre, Minas Gerais / Lactic acid bacteria and yeasts associated with the artisanal Minas cheese produced in the region of Serra do Salitre, Minas Gerais

Em 10 fazendas da região da Serra do Salitre, MG, foram coletadas amostras de leite, soro fermentado (pingo), coalhada e queijo frescal para avaliar a microbiota de bactérias láticas e leveduras presentes. Uma diversidade menor de bactérias láticas foi observada durante a produção do queijo quando comparada à de leveduras. As espécies de bactérias láticas mais freqüentes foram Lactococcus lactis, Enterococcus spp., Enterococcus faecalis e Streptococcus agalactiae e de leveduras foram Debaryomyces hansenii e Kluyveromyces lactis. Apenas as populações de Enterococcus spp., Enterococcus faecalis e Leuconostoc mesenteroides apresentaram aumento significativo durante a produção do queijo. As espécies de bactérias láticas e leveduras encontradas nos diferentes substratos estudados podem ser responsáveis pelas características de aroma e sabor do queijo artesanal da Serra do Salitre.(AU)

Samples of milk, curd, cheese whey, and cheese were collected in 10 farms located at the region of Serra do Salitre, Minas Gerais state. These samples were studied in relation to their lactic acid bacteria and yeast populations. The diversity of lactic acid bacteria species was lower than the diversity of yeasts in these samples. The isolated lactic acid bacteria were Lactococcus lactis, Enterococcus spp., Enterococcus faecalis, and Streptococcus agalactiae; and the yeasts were Debaryomyces hansenii and Kluyveromyces lactis. Only the species Enterococcus spp., Enterococcus faecalis, and Leuconostoc mesenteroides showed an increase in their populations during the production of the artisanal cheese. Lactic acid bacteria and yeasts found in this study could be responsible by the sensorial characteristics of the artisanal cheese produced in the region of Serra do Salitre.(AU)

Effect of lactic acid bacteria on extention of shelf life and growth of Listeria monocytogenes in beef steaks stored in CO2- rich atmosphere

Beef steaks were inoculated with one or other of two protective strains of lactic acid bacteria (bacteriocinogenic Lactobacillus sakei CTC 372 or the uncharacterized Lactobacillus CTC 711), and stored under modified atmospheres (20-40% CO2). Inoculation of meat with LAB inhibited growth of the spoilage bacteria. Neither CO2 in the pack atmosphere or inoculation with protective strains, nor a combination of both, affected formation of metmyoglobin or the development of off-odours. The formation of metmyoglobin in meat pigments and the sensory odour scores were compatible to those of fresh meat which had not undergone either oxidative deterioration or microbial spoilage. Listeria monocytogenes was inhibited in broth by meat surface microbiota containing the protective strains. With initial numbers of 5.6 log cfu mL-1, after 7 days incubation at 3ºC, L. monocytogenes were recovered at log mean numbers of 2.8 log cfu mL-1 when no protective strain was present. At 8ºC, the numbers of L. monocytogenes were reduced by about 2.5 or 1.5 log mL-1 in the presence of Lb. sakei CTC 372 or Lb. CTC 711, respectively. At 25ºC, the numbers of L. monocytogenes recovered from broth containing either protective strain were about 5 log lower than the numbers recovered from broth containing L. monocytogenes only.

Fatias de carne bovina foram inoculadas com uma de duas bactérias láticas protetoras (Lactobacillus sakei CTC 372 bacteriocinogênica e Lactobacillus CTC 711 não caracterizado) e armazenadas em atmosfera modificada (20-40% CO2). A inoculação da carne com bactérias láticas protetoras inibiu a multiplicação de bactérias deteriorantes. O CO2 da atmosfera e/ou a presença de bactérias láticas não causou a formação de metmioglobina ou de odores indesejáveis. A formação de metmioglobina e as características sensoriais foram equivalentes às apresentadas por carne fresca não deteriorada e não submetida a tratamento. A multiplicação de Listeria monocytogenes em caldo foi inibida por bactérias isoladas da superfície das carnes inoculadas com as bactérias láticas. Após 7 dias a 3ºC, a contagem inicial de L. monocytogenes de 5.6 log UFC.mL-1 caiu para 2.8 log UFC.mL-1 na ausência de bactéria lática protetora. A 8ºC, as contagens de L. monocytogenes foram reduzidas em 2.5 ou 1.5 log na presença de Lb. sakei CTC 372 ou Lb. CTC 711, respectivamente. A 25ºC, as contagens de L. monocytogenes no caldo contendo uma das bactérias láticas protetoras foram 5 log mais baixas do que nos caldos contendo L. monocytogenes somente.

Avaliação da concentração de bactérias láticas viáveis em iogurtes com polpas de frutas / Evaluation of attention of viable lactic acid bacteria in yogurt with fruit pulp

O presente estudo teve como objetivo avaliar a concentração de Bactérias Láticas viáveis em iogurtes com polpa de frutas. Avaliaram-se três marcas em três fases da data de validade do produto. Foram realizadas análises microbiológicas e físico-químicas nos laboratórios da UTFPR Campus Ponta Grossa. As análises microbiológicas foram realizadas segundo Silva & Junqueira (1995), para contagem de Bactérias Láticas. Para análises físico-químicas, pH e acidez, seguiram-se as Normas Analíticas do Instituto Adolf Lutz (1985). Os resultados das análises microbiológicas das marcas A, B e C apresentaram-se, na primeira e segunda fase dentro dos padrões estabelecidos pela FIL 117ª:1998, que é de 10UFC/mL. Na terceira fase as marcas A e B mantiveram os resultados, apenas a marca C apresentou contagem de 1,2 x 10UFC/mL, abaixo do padrão. Com base nesses resultados apenas a marca C apresentou-se fora dos padrões tanto para as análises microbiológicas quanto físico-químicas. Devendo a empresa da marca C ter um controle mais rigoroso do processamento e armazenamento do produto e os consumidores ficarem atentos para as características organolépticas dos iogurtes com polpa de frutas.(AU)

This work aimed to evaluate viable Lactic Bacteria in yogurt with fruit pulp. It was realized evaluation of three trademarks in three phasis of product validate period. Microbiological and physical-chemical analysis were undertaken at laboratories of UTFPR Campus Ponta Grossa. Microbiological analysis were done according to SILVA & JUNQUEIRA (1995) in order to count Lactic Bacteria. Physical-chemical, pH and acidity analysis were done according to Normas Analíticas do Instituto Adolf Lutz (1985). Microbiological analysis results of A, B and C trademarks showed at first and secondphasis to be according to the standard stablished by FIL 117A: 1998, that is 107UFC/mL. On third phasis, trend marks A and B maintained the results, while trend C showed 1,2 x 1()5UFC/ mL, below standard. Forphysical-chemical analysis, related to PH, all trend marks stayed in standard, according toVEISSEYRE (1988) and VEDAMUTHU (1991). For acidity determination all trend marks were according the standard stablished by FIL 150: 1991. On third phasis occurred acidity reduction only for trend mark C, out of stablished standards. Based on these results, only trend C was out of standard for microbiological and physico-chemical analysis. Its company needs to have a harder control of product process and storing, and customers need to be aware of organoleptic characteristics of yogurts with fruit pulp. (AU)

Iogurte com leite desnatado e extrato de erva-mate, evolução da cultura pura adicionada / Yogurt with milk and extract of Ilex paraguariensis, the evolution of pure culture added

As propriedades medicinais do iogurte e da erva-mate na saúde humana são em grande parte conhecidas. Conseqüentemente, a união de ambos em um único produto traria muitos benefícios à saúde do consumidor, mas não se tem conhecimento da ação de alguns compostos presentes na erva-mate sobre o crescimento das bactérias láticas utilizadas no iogurte, uma vez que os benefícios à saúde estão relacionados com o desenvolvimento dessas bactérias. Por esse motivo, este trabalho teve como objetivo elaborar iogurte com leite desnatado, adicionado de extrato de erva-mate, e acompanhar a evolução das bactérias lácticas, pH e acidez durante o período de armazenamento de 45 dias a 8°C. O iogurte com extrato de erva-mate apresentou menor valor de pH e maior valor de acidez em relação ao iogurte padrão, sendo estes resultados decorrentes do bom desenvolvimento das bactérias lácticas, durante os trinta primeiros dias de armazenamento no iogurte com extrato de erva-mate. O extrato de erva-mate adicionado ao iogurte apresentou características favoráveis ao desenvolvimento das bactérias láticas.(AU)

Medicinal properties of yoghurt and mate tea extract are widely known. Consequently, merging both products in onewould be profitable for consumers' health. However, the action of some chemical compounds found in mate tea extract on growth of lactic bacteria is not well known yet. This is relevant since the health benefits are related to the good development of such bacteria. This work aimed to develop a new low fat yoghurt with addition of mate tea extract, following growth of lactic bacteria; pH, and acidity during the 45-day storage period at 8ºC. The yoghurtwith mate tea extract presented lower pH and higher acidity during the first 30 days of storage, when compared to standard yoghurt, what can be attributed to the good growth of microorganisms. Addition of mate tea extract to the yoghurt can then contribute to the increase in lactic acid bacteria. (AU)

Identification of meat isolated bacteriocin-producing lactic acid bacteria using biotyping and ribotyping

Três cepas de bactérias láticas previamente isoladas a partir de produtos cárneos foram caracterizadas comparando-se resultados de testes bioquímicos e ribotipagem. Os resultados obtidos foram concordantes para Lactobacillus sake 1 e Lactobacillus curvatus 5. A cepa 16 foi identificada como Lactobacillus curvatus por testes bioquímicos e como Lactobacillus sake por ribotipagem, demonstrando a diferença entre as técnicas utilizadas. Recomenda-se, no momento, a técnica de ribotipagem para a identificação de bactérias láticas isoladas de carnes.

EFFECTS OF YEAST CELL WALL EXTRACT IN DRY DIET ON MICROBIOLOGY, SHORT-CHAIN FATTY ACIDS AND FECAL ODOR REDUCTION OF ADULT CATS / EFEITOS DO EXTRATO DE PAREDE DE LEVEDURA EM DIETA SECA SOBRE A MICROBIOLOGIA, ÁCIDOS GRAXOS DE CADEIA CURTA E REDUÇÃO DO ODOR DAS FEZES DE GATOS ADULTOS

The aim of this study was to evaluate the effects of yeast cell wall extract (YCW) in dry diet on the fecal microbiota, concentration of short-chain fatty acids (SCFA) and on the odor reduction of cats feces. We used 20 animals of both sexes, randomly assigned to four treatments and five repetitions totaling 20 experimental units: 1) dry commercial diet (control); 2) control + 0.2%, 3) control + 0.4%, and 4) control + 0.6% of YCW in dry matter. Enterobacteriaceae and lactic acid bacteria, fecal concentration of acetic, propionic and butyric acids, ammonia nitrogen and sensory panel were performed. There were no significant differences (p> 0.05) for bacterial counts and the concentration of SCFA and ammonia, but in sensory panel a reduction in the odor of feces could be noted with the use of 0.2% of YCW. We concluded that the addition of up to 0.6% YCW had no effect on the microbiology and the concentration of fatty acids, but there is potential for its use as an additive because of the improvement in the odor of feces. However, further studies are needed to understand the mechanisms of action and the effects of prebiotics for domestic cats. KEYWORDS: ammoniacal nitrogen; butyric acid; feline; lactic bacteria; mannanoligosacharide.

Objetivou-se avaliar os efeitos do extrato de parede de levedura (EPL) em dieta seca sobre a microbiota fecal, concentração de ácidos graxos de cadeia curta (AGCC) e redução do odor das fezes de gatos adultos. Foram utilizados 20 animais, dez de cada sexo, distribuídos ao acaso em quatro tratamentos e cinco repetições, totalizando 20 unidades experimentais: 1) dieta comercial seca (controle); 2) controle + 0,2%; 3) controle + 0,4%; e 4) controle + 0,6% de EPL na matéria seca da dieta. Foram realizados contagem de enterobactérias, E.coli e bactérias láticas, concentração fecal dos ácidos acético, propiônico, butírico e nitrogênio amoniacal, além de painel sensorial. Não foram observadas diferenças significativas (p>0,05) para as contagens bacterianas e a concentração de AGCC e nitrogênio amoniacal; no entanto, por meio do painel sensorial pôde ser notada redução no odor das fezes com o uso de 0,2% de EPL na dieta. Concluiu-se que a adição de até 0,6% de EPL não teve efeito sobre a microbiologia e a concentração de ácidos graxos, mas há potencial uso como aditivo devido à melhora no odor das fezes. Outros estudos são necessários para compreender os mecanismos de ação, efeitos e níveis de inclusão desse prebiótico para gatos domésticos.PALAVRAS-CHAVE: ácido butírico; bactérias láticas; felinos; mananoligossacarídeo; nitrogênio amoniacal.