Respiratory profile and gill histopathology of Carassius auratus exposed to different salinity concentrations / Perfil respiratório e histopatologia das brânquias de Carassius auratus expostas a diferentes concentrações de salinidades

The aim of this study was to evaluate the chronic salinity tolerance of Carassius auratus and the effects on blood parameters, gill morphology, and survival. In the first test, nine different concentrations (0.0, 0.5, 1.0, 2.5, 5.0, 10, 15, 20, and 25 g L-¹) of NaCl were used with nine repetitions for 96 h. The survival of fish subjected to 15 g L-¹ NaCl was 4 h, and 5 min at a concentration of 25 g L-¹. The mortality of fish with 15g L-¹ NaCl was 100%. Morphological analyses of the gills showed hyperplasia of the coated cells in the interlamellar space and hypersecretion of mucus in fish exposed to 10 g L-¹ of NaCl. At concentrations of 20 and 25 g L-¹, necrosis of the support collagen caused the cells to detach from the lamellar structure mucosa. In the chronic test, two concentrations were used, with four replications containing nine fish in each aquarium for a period of 21 days. Blood samples and gills from the fish were collected, and it was observed that the fish showed a decrease in the concentration of bicarbonate (NaHCO3) in the blood, indicating hypernatremia. Acute exposure of C. auratus to sodium chloride (NaCl) should be at a maximum of 10 g L-¹ of NaCl, after which level there would be a loss in animal performance and/or mortality. Chronic exposure to 5 g L-¹ of NaCl promotes acidemia, ionic imbalance, and pathological changes in the gills; therefore, it is not recommended.

O objetivo deste estudo foi avaliar a tolerância crônica de Carassius auratus à salinidade e os efeitos sobre os parâmetros sanguíneos, morfologia branquial e sobrevivência. No primeiro teste, foram utilizadas nove concentrações de NaCl (0.0, 0.5, 1.0, 2.5, 5.0, 10, 15, 20, e 25 g L-¹) e nove repetições por 96 h. A sobrevivência dos peixes submetidos a até 15 g L-¹ de NaCl foi de 04h00, sendo 00h05 na concentração de 25 g L-¹ de NaCl. A mortalidade dos peixes com 15 g foi de 100%. As análises morfológicas das brânquias mostraram hiperplasia das células revestidas no espaço interlamelar e hipersecreção de muco em peixes expostos a uma concentração de 10 g L-¹ de NaCl. Nas concentrações de 20 e 25 g L-¹, observou-se que a colágeno de suporte perdeu a estrutura das células da mucosa, alterando as lamelas secundárias. Em um segundo experimento, um delineamento inteiramente casualizado foi utilizado com dois tratamentos (0 e 5g L-¹ de NaCl) e quatro repetições com nove peixes por 30 L em 21 dias. Amostras de sangue e brânquias dos peixes foram coletadas e observou-se que os peixes apresentaram diminuição nas concentrações de bicarbonato (NaHCO3) no sangue, indicando hipernatremia. Conclui-se que a exposição aguda de C. auratus ao cloreto de sódio (NaCl) deve ser de no máximo 10 g L-¹, levando à perda de desempenho e/ou mortalidade dos animais. A exposição crônica a 5 g L-¹ de NaCl promove acidemia, desequilíbrio iônico e alterações patológicas nas brânquias, por isso não é recomendado.

Respiratory profile and gill histopathology of Carassius auratus exposed to different salinity concentrations / Perfil respiratório e histopatologia das brânquias de Carassius auratus expostas a diferentes concentrações de salinidades

The aim of this study was to evaluate the chronic salinity tolerance of Carassius auratus and the effects on blood parameters, gill morphology, and survival. In the first test, nine different concentrations (0.0, 0.5, 1.0, 2.5, 5.0, 10, 15, 20, and 25 g L-¹) of NaCl were used with nine repetitions for 96 h. The survival of fish subjected to 15 g L-¹ NaCl was 4 h, and 5 min at a concentration of 25 g L-¹. The mortality of fish with 15g L-¹ NaCl was 100%. Morphological analyses of the gills showed hyperplasia of the coated cells in the interlamellar space and hypersecretion of mucus in fish exposed to 10 g L-¹ of NaCl. At concentrations of 20 and 25 g L-¹, necrosis of the support collagen caused the cells to detach from the lamellar structure mucosa. In the chronic test, two concentrations were used, with four replications containing nine fish in each aquarium for a period of 21 days. Blood samples and gills from the fish were collected, and it was observed that the fish showed a decrease in the concentration of bicarbonate (NaHCO3) in the blood, indicating hypernatremia. Acute exposure of C. auratus to sodium chloride (NaCl) should be at a maximum of 10 g L-¹ of NaCl, after which level there would be a loss in animal performance and/or mortality. Chronic exposure to 5 g L-¹ of NaCl promotes acidemia, ionic imbalance, and pathological changes in the gills; therefore, it is not recommended.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar a tolerância crônica de Carassius auratus à salinidade e os efeitos sobre os parâmetros sanguíneos, morfologia branquial e sobrevivência. No primeiro teste, foram utilizadas nove concentrações de NaCl (0.0, 0.5, 1.0, 2.5, 5.0, 10, 15, 20, e 25 g L-¹) e nove repetições por 96 h. A sobrevivência dos peixes submetidos a até 15 g L-¹ de NaCl foi de 04h00, sendo 00h05 na concentração de 25 g L-¹ de NaCl. A mortalidade dos peixes com 15 g foi de 100%. As análises morfológicas das brânquias mostraram hiperplasia das células revestidas no espaço interlamelar e hipersecreção de muco em peixes expostos a uma concentração de 10 g L-¹ de NaCl. Nas concentrações de 20 e 25 g L-¹, observou-se que a colágeno de suporte perdeu a estrutura das células da mucosa, alterando as lamelas secundárias. Em um segundo experimento, um delineamento inteiramente casualizado foi utilizado com dois tratamentos (0 e 5g L-¹ de NaCl) e quatro repetições com nove peixes por 30 L em 21 dias. Amostras de sangue e brânquias dos peixes foram coletadas e observou-se que os peixes apresentaram diminuição nas concentrações de bicarbonato (NaHCO3) no sangue, indicando hipernatremia. Conclui-se que a exposição aguda de C. auratus ao cloreto de sódio (NaCl) deve ser de no máximo 10 g L-¹, levando à perda de desempenho e/ou mortalidade dos animais. A exposição crônica a 5 g L-¹ de NaCl promove acidemia, desequilíbrio iônico e alterações patológicas nas brânquias, por isso não é recomendado.(AU)

Correlation between clinical findings, mast cell count and interleukin 31 immunostaining in the skin of dogs with atopic dermatitis / Correlação entre achados clínicos, contagem de mastócitos e imunomarcação de interleucina 31 na pele de cães com dermatite atópica

In this study the correlation between the clinical score, mast cell count and interleukin 31 (IL-31) immunostaining in the skin of dogs with atopic dermatitis was determined. A total of 31 dogs of different breeds, from one to eight years of age, were chosen for the study. The 20 females and 11 males were categorized based on the CADESI-4 system, as having discrete, moderate or marked atopic dermatitis. Skin samples were collected from the axillary and interdigital regions and stained with hematoxylin and eosin for cytohistomorphological analyses and toluidine blue to evaluate the mast cell counts, and immunohistochemistry for the IL-31 immunostaining. Animals revealing higher atopic dermatitis scores had greater numbers of mast cells and IL-31 immunolabeled cells. More numbers of cells immunolabeled for IL-31 were evident in the axillary skin compared with the interdigital skin in dogs having this condition. A correlation was identified between the clinical scores and mast cell numbers in the interdigital region, as well as between the clinical scores and number of cells immunolabeled for IL-31 in the axillary area. A correlation was also reported between the mast cell numbers and IL-31 immunolabeled cells only in the axillary skin, and none in the interdigital regions. It was thus concluded that the mast cells and IL-31 are involved in the pathogenesis of the canine atopic dermatitis (CAD), as well as lymphocytes and plasma cells. It was also observed that the higher the degree of clinical severity of the disease, the more the numbers of mast cells and IL-31 in the skin of those animals suffering from CAD, which implies the influence of these immunological constituents on the genesis of pruritus and disease progression.(AU)

Este estudo avaliou a correlação entre o escore clínico, a contagem de mastócitos e a imunomarcação de interleucina 31 (IL-31) na pele de cães com dermatite atópica. Foram selecionados 31 cães de diferentes raças, com idade entre um e oito anos, sendo 20 fêmeas e 11 machos, divididos em discretamente, moderadamente e acentuadamente acometidos por dermatite atópica segundo o sistema CADESI-4. Amostras da pele das regiões axilar e interdigital foram colhidas e submetidas às colorações de hematoxilina e eosina para a avaliação cito-histomorfológica e azul de toluidina para a contagem de mastócitos, bem como a técnica de imunoistoquímica para a imunomarcação de IL-31. Os animais com maior escore de dermatite atópica apresentaram maior número de mastócitos e de células imunomarcadas para IL-31. Houve maior número de células imunomarcadas para IL-31 na pele da axila em relação à interdigital nos cães com a doença. Foi constatada correlação entre o escore clínico e a quantidade de mastócitos no interdígito, bem como entre o escore clínico e a quantidade de células imunomarcadas para IL-31 na axila. Também foi verificada correlação entre a quantidade de mastócitos e células imunomarcadas para IL-31 na pele da região axilar, mas não da interdigital. Conclui-se que mastócitos e a IL-31 estão envolvidos na patogenia da DAC, assim como linfócitos e plasmócitos. Também, quanto maior o grau de severidade clínica da doença, maior a quantidade de mastócitos e IL-31 na pele dos animais com DAC, o que remete à influência desses componentes imunológicos na gênese do prurido e progressão da doença.(AU)

Testicular histological evaluation and serum testosterone concentrations of bulls after chemical castration with calcium chloride / Avaliação histológica e das concentrações séricas de testosterona de touros após a castração química com cloreto de cálcio

Orchiectomized bulls have advantages in the meat quality and ease of handling. Chemical castration is an option for surgical castration and the sclerosing agents can be administered into the testicular or epididymis parenchyma. These agents have a lower incidence of complications than surgery, especially when associated with dimethylsulfoxide (DMSO), which has anti-inflammatory action and increases the absorption of other drugs. Thus, this study aimed to evaluate the effect of a single intratesticular injection of calcium chloride solution associated with DMSO for the chemical sterilization of bulls. Twenty-four young adult bulls were utilized, distributed into 3 groups (G20, G30 and G40, n = 8/group), according to the calcium chloride concentration (20, 30 and 40%), in 10mL volume. Serum concentrations of testosterone, body weight, testicular volume and ecotexture, clinical signs and behavior and were evaluated for 45 days. Thus, the animals were orchiectomized and testicles were assessed histologically. There were no changes in body weight, decreased serum testosterone concentrations (except G30), signs of scrotal sensitivity or changes in behavior over the period. However, there was significant increase in testicular volume, especially on the 2nd and 3rd day after treatment, with values returning to the value initials at 15 days. Testicular adherence and firm consistency were observed during orchiectomy. Ultrasound examination revealed a loss of integrity of the median raphe, with cavity formation and an alteration of the testicular echotexture. In the histological evaluation, coagulation necrosis of seminiferous tubules and interstitial cells was observed, mainly in the medial portion in all groups. Some animals presented total absence of tubular formations in all the studied groups, being the effects of greater intensity in the G40. Additionally, pronounced edema was noted in all groups, especially in G40. Inflammatory infiltrate, fibroplasia and neovascularization were found to be predominantly discrete. Based on the conditions used in this study, we conclude that calcium chloride associated with DMSO can be used as a method of chemical sterilization in bovines.(AU)

Bovinos orquiectomizados apresentam vantagens na qualidade da carne e facilidade no manejo. A quimioesterilização é uma opção à castração cirúrgica e os agentes esclerosantes podem ser administrados no parênquima testicular ou epidídimo. Estes produtos possuem menor incidência de complicações, comparados a cirurgia, especialmente quando associados ao dimetilsulfóxido (DMSO), que apresenta ação anti-inflamatória e aumenta a absorção de outros fármacos. Assim, este estudo teve como objetivo avaliar o efeito de uma única injeção intratesticular de solução de cloreto de cálcio associado com 0,5% de DMSO para a esterilização química de bovinos. Vinte e quatro touros adultos jovens foram utilizados, distribuídos em 3 grupos (G20, G30 e G40, n = 8/grupo) de acordo com a concentração de cloreto de cálcio (20, 30 e 40%), em um volume de 10mL. Foram avaliadas as concentrações séricas de testosterona, peso corporal, volume e ecotextura testicular, sinais clínicos e comportamento por 45 dias. A seguir, os animais foram submetidos à orquiectomia e os testículos avaliados histologicamente. Não foram observadas alterações do peso corporal, diminuição das concentrações de testosterona sérica (exceto no G30), sinais de sensibilidade escrotal ou alterações no comportamento no período avaliado. Porém, houve aumento significativo do volume testicular, especialmente nos 2º e 3º dia após o tratamento, com valores retornando aos iniciais aos 15 dias. Aderência e consistência firme dos testículos foram achados observados durante a orquiectomia. O exame ultrassonográfico revelou perda de integridade da rafe mediana, com formação de cavidades e alteração da ecotextura testicular. Na avaliação histológica, verificou-se necrose de coagulação de túbulos seminíferos e células intersticiais acentuada, principalmente, na porção medial em todos os grupos, sendo que em alguns animais havia ausência total das formações tubulares em todos os grupos estudados, sendo os efeitos de maior intensidade no G40. Além disso, edema foi acentuado em todos os grupos, principalmente em G40. Infiltrado inflamatório, fibroplasia e neovascularização foram achados predominantemente discretos. Com base nas condições utilizadas neste estudo, conclui-se que o cloreto de cálcio associado com o DMSO pode ser utilizado como um método de esterilização química em bovinos.(AU)

Testicular histological evaluation and serum testosterone concentrations of bulls after chemical castration with calcium chloride / Avaliação histológica e das concentrações séricas de testosterona de touros após a castração química com cloreto de cálcio

Orchiectomized bulls have advantages in the meat quality and ease of handling. Chemical castration is an option for surgical castration and the sclerosing agents can be administered into the testicular or epididymis parenchyma. These agents have a lower incidence of complications than surgery, especially when associated with dimethylsulfoxide (DMSO), which has anti-inflammatory action and increases the absorption of other drugs. Thus, this study aimed to evaluate the effect of a single intratesticular injection of calcium chloride solution associated with DMSO for the chemical sterilization of bulls. Twenty-four young adult bulls were utilized, distributed into 3 groups (G20, G30 and G40, n = 8/group), according to the calcium chloride concentration (20, 30 and 40%), in 10mL volume. Serum concentrations of testosterone, body weight, testicular volume and ecotexture, clinical signs and behavior and were evaluated for 45 days. Thus, the animals were orchiectomized and testicles were assessed histologically. There were no changes in body weight, decreased serum testosterone concentrations (except G30), signs of scrotal sensitivity or changes in behavior over the period. However, there was significant increase in testicular volume, especially on the 2nd and 3rd day after treatment, with values returning to the value initials at 15 days. Testicular adherence and firm consistency were observed during orchiectomy. Ultrasound examination revealed a loss of integrity of the median raphe, with cavity formation and an alteration of the testicular echotexture. In the histological evaluation, coagulation necrosis of seminiferous tubules and interstitial cells was observed, mainly in the medial portion in all groups. Some animals presented total absence of tubular formations in all the studied groups, being the effects of greater intensity in the G40. Additionally, pronounced edema was noted in all groups, especially in G40. Inflammatory infiltrate, fibroplasia and neovascularization were found to be predominantly discrete. Based on the conditions used in this study, we conclude that calcium chloride associated with DMSO can be used as a method of chemical sterilization in bovines.(AU)

Bovinos orquiectomizados apresentam vantagens na qualidade da carne e facilidade no manejo. A quimioesterilização é uma opção à castração cirúrgica e os agentes esclerosantes podem ser administrados no parênquima testicular ou epidídimo. Estes produtos possuem menor incidência de complicações, comparados a cirurgia, especialmente quando associados ao dimetilsulfóxido (DMSO), que apresenta ação anti-inflamatória e aumenta a absorção de outros fármacos. Assim, este estudo teve como objetivo avaliar o efeito de uma única injeção intratesticular de solução de cloreto de cálcio associado com 0,5% de DMSO para a esterilização química de bovinos. Vinte e quatro touros adultos jovens foram utilizados, distribuídos em 3 grupos (G20, G30 e G40, n = 8/grupo) de acordo com a concentração de cloreto de cálcio (20, 30 e 40%), em um volume de 10mL. Foram avaliadas as concentrações séricas de testosterona, peso corporal, volume e ecotextura testicular, sinais clínicos e comportamento por 45 dias. A seguir, os animais foram submetidos à orquiectomia e os testículos avaliados histologicamente. Não foram observadas alterações do peso corporal, diminuição das concentrações de testosterona sérica (exceto no G30), sinais de sensibilidade escrotal ou alterações no comportamento no período avaliado. Porém, houve aumento significativo do volume testicular, especialmente nos 2º e 3º dia após o tratamento, com valores retornando aos iniciais aos 15 dias. Aderência e consistência firme dos testículos foram achados observados durante a orquiectomia. O exame ultrassonográfico revelou perda de integridade da rafe mediana, com formação de cavidades e alteração da ecotextura testicular. Na avaliação histológica, verificou-se necrose de coagulação de túbulos seminíferos e células intersticiais acentuada, principalmente, na porção medial em todos os grupos, sendo que em alguns animais havia ausência total das formações tubulares em todos os grupos estudados, sendo os efeitos de maior intensidade no G40. Além disso, edema foi acentuado em todos os grupos, principalmente em G40. Infiltrado inflamatório, fibroplasia e neovascularização foram achados predominantemente discretos. Com base nas condições utilizadas neste estudo, conclui-se que o cloreto de cálcio associado com o DMSO pode ser utilizado como um método de esterilização química em bovinos.(AU)

Hematological and histological parameters of Nile tilapia in response to the challenge of different salinity levels / Parâmetros hematológicos e histológicos de tilápia do nilo em resposta ao desafio de diferentes níveis de salinidade

This research aimed to evaluate the influence of different levels of salinity on growth performance, haematological parameters and the cells of Nile tilapia chloride. 144 fish were used during a 97 day trial period, submitted to four experimental treatments of 0%o, 10%o, 20%o and 25%o salinity. Sampling were collected for monitoring of performance parameters, blood samples to determine the erythrocyte count, packed cell volume, hemoglobin concentration, the erythrocyte indices, the count of thrombocytes and leukocytes and the electrophoretic profile of serum proteins. Gill samples were also collected for counting the number of cells chloride. Significant differences were found in hemoglobin concentration, the total plasma proteins and the number of erythrocytes (p < 0.05). There was no difference in the number of white blood cells and thrombocytes. Serum proteins showed differences (p < 0.05) from pre-albunima fractions, alfa1-globulin, alfa2-globulin, beta-globulin, and gama-globulin. There was a direct relationship between the number of chloride cells and increase in salinity levels (p < 0.05). The CBC constituents, the electrophoretic profile of proteins as well as quantitative analysis of gill chloride cells can serve as indicares mechanism of adaptation and tolerance to salinity in Nile tilapia.(AU)

Esta pesquisa teve por objetivo avaliar a influência de diferentes níveis de salinidade sobre o desempenho zootécnico, parâmetros hematológicos e células de cloreto de tilápia do Nilo. 144 peixes, durante 97 dias, foram submetidos a quatro tratamentos experimentais de 0%o, 10%o, 20%o e 25%o de salinidade. Realizaram-se biometrias para acompanhamento dos índices zootécnicos, coletas de amostras sanguíneas para determinação do número de eritrócitos, volume globular, concentração de hemoglobina, índices hematimétricos, contagem de trombócitos e de leucócitos total e diferencial, além do perfil eletroforético das proteínas séricas. As amostras branquiais foram para contagem do número de células de cloreto. Diferenças significativas foram encontradas na concentração de hemoglobina, nas proteínas plasmáticas totais e no número de eritrócitos (p < 0,05). Não foi observada diferença no número de leucócitos e de trombócitos. As proteínas séricas apresentaram diferenças (p < 0,05) nas frações pré-albunima, alfa1-globulina, alfa2-globulina, beta-globulina e gama-globulina. Verificou-se relação direta entre o número de células de cloreto e o aumento nos níveis de salinidade (p < 0,05). Os constituintes do hemograma, o perfil eletroforético de proteínas, bem como a análise quantitativa de células de cloreto branquiais, podem servir como indicares do mecanismo de adaptação e de tolerância à salinidade em tilápia do Nilo.(AU)

Hematological and histological parameters of Nile tilapia in response to the challenge of different salinity levels / Parâmetros hematológicos e histológicos de tilápia do nilo em resposta ao desafio de diferentes níveis de salinidade

This research aimed to evaluate the influence of different levels of salinity on growth performance, haematological parameters and the cells of Nile tilapia chloride. 144 fish were used during a 97 day trial period, submitted to four experimental treatments of 0%o, 10%o, 20%o and 25%o salinity. Sampling were collected for monitoring of performance parameters, blood samples to determine the erythrocyte count, packed cell volume, hemoglobin concentration, the erythrocyte indices, the count of thrombocytes and leukocytes and the electrophoretic profile of serum proteins. Gill samples were also collected for counting the number of cells chloride. Significant differences were found in hemoglobin concentration, the total plasma proteins and the number of erythrocytes (p < 0.05). There was no difference in the number of white blood cells and thrombocytes. Serum proteins showed differences (p < 0.05) from pre-albunima fractions, alfa1-globulin, alfa2-globulin, beta-globulin, and gama-globulin. There was a direct relationship between the number of chloride cells and increase in salinity levels (p < 0.05). The CBC constituents, the electrophoretic profile of proteins as well as quantitative analysis of gill chloride cells can serve as indicares mechanism of adaptation and tolerance to salinity in Nile tilapia.

Esta pesquisa teve por objetivo avaliar a influência de diferentes níveis de salinidade sobre o desempenho zootécnico, parâmetros hematológicos e células de cloreto de tilápia do Nilo. 144 peixes, durante 97 dias, foram submetidos a quatro tratamentos experimentais de 0%o, 10%o, 20%o e 25%o de salinidade. Realizaram-se biometrias para acompanhamento dos índices zootécnicos, coletas de amostras sanguíneas para determinação do número de eritrócitos, volume globular, concentração de hemoglobina, índices hematimétricos, contagem de trombócitos e de leucócitos total e diferencial, além do perfil eletroforético das proteínas séricas. As amostras branquiais foram para contagem do número de células de cloreto. Diferenças significativas foram encontradas na concentração de hemoglobina, nas proteínas plasmáticas totais e no número de eritrócitos (p < 0,05). Não foi observada diferença no número de leucócitos e de trombócitos. As proteínas séricas apresentaram diferenças (p < 0,05) nas frações pré-albunima, alfa1-globulina, alfa2-globulina, beta-globulina e gama-globulina. Verificou-se relação direta entre o número de células de cloreto e o aumento nos níveis de salinidade (p < 0,05). Os constituintes do hemograma, o perfil eletroforético de proteínas, bem como a análise quantitativa de células de cloreto branquiais, podem servir como indicares do mecanismo de adaptação e de tolerância à salinidade em tilápia do Nilo.

AVALIAÇÃO TENSIOMÉTRICA E MICROBIOLÓGICA DO PERICÁRDIO BOVINO CONSERVADO EM DIFERENTES MEIOS

As membranas biológicas são tecidos compostos principalmente de colágeno e utilizadas de forma a servir de arcabouço em cirurgias reparadoras. Dentre os tecidos utilizados para essa finalidade, há o pericárdio, que é basicamente composto por tecido colágeno e uma fina camada de células epiteliais, suportando boa carga de tração em ensaios biomecânicos. O principal meio utilizado para conservação dessas membranas nas últimas décadas foi a glicerina 98%. Este trabalho objetivou analisar, primeiramente, se há diferenças na tração de acordo com o sentido da coleta em pericárdios bovinos, avaliar diferentes meios de conservação, por até 4 meses. Foi padronizado a abertura do pericárdio no sentido do maior eixo do coração (da base para o ápice), depois com a utilização de um molde realizado a coleta dos corpos de prova com 1 cm de largura e 4 cm de comprimento em sentido paralelo e perpendicular, ao corte de padronização. Foram utilizados 20 pericárdios provenientes de animais machos ou fêmeas, entre 18 e 32 meses, os pericárdios foram lavados em água corrente realizado a sua limpeza para retirada de gordura e os corpos de prova colocados para ensaio biomecânico de tração. Após a padronização do sentido de coleta perpendicular, foram colocados 14 pericárdios bovinos, utilizando o mesmo sentido de corte padronizado, colocados em caixas contendo os seguintes meios glicerina, propilenoglicol, etilenoglicol, butanol, álcool etílico e solução salina a 150%. Os meios foram avaliados mensalmente para cultura microbiológica e as membranas para ensaios biomecânicos de tração. Foi observado diferença significativa da força máxima de ruptura no sentido de coleta perpendicular ao maior eixo do coração, do que o sentido paralelo. Portanto foi padronizado o sentido de coleta perpendicular para as amostras que foram colocadas nos meios de conservação. Foi observado o aumento de força de ruptura significativamente das membranas conservadas no butanol nos períodos 30, 60 e 120 dias e no etilenoglicol com 30 dias. Já a força de deformação só não foi observada diferença estatística comparando o pericárdio fresco as membranas armazenadas no cloreto de sódio a 150%. Foi observado crescimento microbiológico somente no etilenoglicol e solução salina a 150% no momento 60 dias, nos outros meios não foi observado crescimento microbiológico. Todos os meios se demostraram viáveis para a conservação do pericárdio bovino, sendo que o butanol e o etilenoglicol proporcionaram maior resistência.

Biological membranes are tissues composed mainly of collagen and used in order to serve as a framework in reparative surgeries. Among the tissues used for this purpose, there is the pericardium, which is basically composed of collagen tissue and a thin layer of epithelial cells, supporting a good traction load in biomechanical tests. The main means used for the conservation of these membranes in the last decades was glycerin 98%. This work aimed to analyze, first, if there are differences in traction according to the direction of collection in bovine pericardiums, to evaluate different means of conservation, for up to 4 months. The opening of the pericardium in the direction of the largest axis of the heart (from the base to the apex) was standardized, then with the use of a mold, the specimens were collected 1 cm wide and 4 cm long in a parallel and perpendicular direction, to the standardization cut. Twenty pericardiums from male or female animals were used, between 18 and 32 months, the pericardiums were washed in running water, cleaned to remove fat and the specimens were placed for biomechanical traction testing. After standardizing the direction of perpendicular collection, 14 bovine pericardiums were placed, using the same standardized cutting direction, placed in boxes containing the following media: glycerin, propylene glycol, ethylene glycol, butanol, ethyl alcohol and saline solution 150%. The media were evaluated monthly for microbiological culture and the membranes for biomechanical tensile tests. There was a significant difference in the maximum rupture force in the direction of collection perpendicular to the largest axis of the heart, than in the parallel direction. Therefore, the direction of perpendicular collection was standardized for the samples that were placed in the conservation media. It was observed a significant increase in the breaking strength of the membranes conserved in butanol at periods 30, 60 and 120 days and in ethylene glycol at 30 days. However, the deformation force was not observed only when comparing the fresh pericardium with the membranes stored in sodium chloride 150%. Microbiological growth was observed only in ethylene glycol and saline solution 150% at the time of 60 days, in other media no microbiological growth was observed. All means proved to be viable for the conservation of bovine pericardium, but butanol and ethylene glycol provided greater resistance.

AVALIAÇÃO DOS EFEITOS DA INJEÇÃO INTRATESTICULAR DE CLORETO DE SÓDIO A 20% EM GATOS

A esterilização de animais domésticos é de suma importância sob a esfera da saúde única, e há a necessidade da busca por novas técnicas de esterilização para animais de companhia que sejam mais acessíveis à população, além de seguras e eficazes. Desta forma, o presente trabalho objetivou avaliar os efeitos da injeção intratesticular de cloreto de sódio 20% em gatos com objetivo de causar degeneração testicular e esterilização. Foram incluídos no estudo 16 gatos clinicamente hígidos, com ambos os testículos na cavidade escrotal de forma simétrica, com idades entre três e 13 meses, separados em grupo controle, contendo nove animais, e grupo teste, composto por sete gatos. Em jejum, os animais foram avaliados clinicamente em relação aos órgãos reprodutivos anteriormente à indução anestésica e oito, 24 horas e 60 dias após as injeções intratesticular. Após, os gatos foram submetidos à anestesia geral para os demais procedimentos. Com o plano anestésico alcançado, os animais foram posicionados em decúbito lateral, sendo realizada a biometria testicular com auxílio de paquímetro digital. A biometria foi realizada imediatamente anterior à aplicação das soluções intratesticulares (M1), oito horas após (M2), 24 horas após (M3) e 60 dias após (M4). Após, foi realizada antissepsia da escrotal com álcool 70%. No grupo controle, foi injetado cloreto de sódio 0,9% em cada testículo, na dose de um mL para cada 27 milímetros de largura testicular e, no grupo teste, cloreto de sódio 20% no mesmo protocolo. Os animais foram mantidos em observação hospitalar por 24 horas, e a avaliação do escore de dor aguda foi realizada em M2 e M3. Após 60 dias, foi realizada a orquiectomia. Os testículos removidos cirurgicamente foram identificados, pesados, e o sêmen da cauda do epidídimo foi coletado para avaliação da presença ou ausência e motilidade ou imobilidade de espermatozoides. As peças foram então imersas em formol 10%, e encaminhadas para análises histológicas. As análises dos dados obtidos permitiram verificar que, embora tenha sido verificado clinicamente um aumento do volume testicular em todos os gatos, estatisticamente não houve diferenças significativas (p<0,05) em cada momento do experimento e ao longo do tempo, independente do tratamento. Escores de dor de leve a moderado foram verificados entre 14 (87,55%) gatos, porém, quando as categorias foram avaliadas de dois a dois, não houve diferenças estatísticas entre os grupos nos diferentes momentos de avaliação. Aos 60 dias, apenas um gato, pertencente ao grupo controle, e de três meses de idade à aplicação da injeção intratesticular, não apresentava espermatozoides na cauda do epidídimo, o que pode estar correlacionado com sua idade. Microscopicamente, não foram detectadas alterações degenerativas, inflamatórias, necrose, fibrose ou desarranjo da arquitetura testicular entre os gatos de ambos os grupos. Desta forma, concluiu-se que o cloreto de sódio 20%, quando aplicado em gatos com idade igual ou superior a cinco meses de idade, não causou esterilidade nos animais no presente estudo.

Sterilization of domestic animals is of paramount importance under the sphere of unique health, and there is a need to search for new sterilization techniques for pets that are more accessible to the population, in addition to being safe and effective. Thus, this study aimed to evaluate the effects of intratesticular injection of sodium chloride 20% in domestic cats in order to cause testicular degeneration and sterilization. Sixteen clinically healthy cats were included in the study, with both testicles in the scrotal cavity symmetrically, aged between three and 13 months, separated in a control group, containing nine animals, and a test group, composed of seven cats. Fasting, the animals were clinically evaluated for reproductive organs prior to anesthetic induction and eight, 24 hours and 60 days after intratesticular injections. Afterwards, the cats were submitted to general anesthesia for the other procedures. With the anesthetic plane reached, the animals were placed in lateral decubitus, and testicular biometry was performed with the aid of a digital caliper. Biometrics were performed immediately before the application of intratesticular solutions (M1), eight hours after (M2), 24 hours after (M3) and 60 days after (M4). Afterwards, antisepsis of the scrotum was performed with 70% alcohol. In the control group, 0.9% sodium chloride was injected into each testicle, at a dose of one mL for each 27 mm of testicular width and, in the test group, 20% sodium chloride in the same protocol. The animals were kept under hospital observation for 24 hours, and the acute pain score was assessed in M2 and M3. After 60 days, an orchiectomy was performed. The surgically removed testicles were identified, weighed, and semen from the epididymis tail was collected to assess the presence or absence and motility or immobility of sperm. The pieces were then immersed in 10% formaldehyde, and sent for histological analysis. The analysis of the data obtained allowed us to verify that, although an increase in testicular volume was clinically verified in all cats, there were no statistically significant differences (p <0.05) at each moment of the experiment and over time, regardless of treatment. Mild to moderate pain scores were found among 14 (87.55%) felines, however, when the categories were assessed from two to two, there were no statistical differences between groups at different times of assessment. At 60 days, only one feline, belonging to the control group, and three months old to the application of intratesticular injection, did not have sperm in the tail of the epididymis, which may be correlated with his age. Microscopically, no degenerative, inflammatory changes, necrosis, fibrosis or derangement of the testicular architecture were detected among the cats in both groups. Thus, it was concluded that sodium chloride 20%, when applied to cats aged five months or more, did not cause sterility in the animals in the present study.

Morfologia Funcional dos órgãos envolvidos na osmorregulação de três espécies de raias Myliobatiformes em Pernambuco - Brasil

Os elasmobrânquios apresentam estratégias osmorregulatórias distintas dos demais grupos, dos órgãos relacionados à regulação osmótica nesse grupo, a glândula retal é essencial no ambiente marinho e responsável pela secreção de cloreto de sódio em grandes quantidades. Sua importância diminui em ambientes diluídos, tendo em vista a necessidade de manter e não secretar íons. É nesses ambientes (diluídos) que o infuxo de água e efluxo de íons e de uréia em excesso também são observados, sendo necessária a reabsorção de íons de forma ativa pelas brânquias e rins. Esses animais enfrentam variações abióticas muitas vezes extremas ao mudar de ambientes hipertônicos (água do mar) a hipotônicos (água doce). Neste sentido, o presente estudo analisou as variações morfológicas dos órgãos associados a osmorregulação de três espécies de raias Myliobatiformes: Aetobatus narinari, Hypanus guttatus e Hypanus marianae capturadas no litoral norte de Pernambuco, Brasil, oriundos da pesca artesanal. De cada animal, a glândula retal, os rins e brânquias (apenas do gênero Hypanus) foram coletados, processados e preparados para análise em microscopia de luz e eletrônica de varredura. A glândula retal é um órgão encapsulado, com uma fina camada de tecido musacular liso, um parêquima secretório e delimitada por um epitélio estratificado conetado ao ducto coletor/lúmen. A. narinari tem a glândula retal maior que as raias Hypanus, apesar da glândula representar apenas 2,5% da largura de disco enquanto para H. marianae e H. guttatus foi 3,9% e 4,1%, respectivamente. A raia H. marianae apresentou redução de estruturas como espessura da cápsula e lóbulos pouco divididos em relação à H. guttatus e A. narinari. A raia H. guttatus transita entre a água do mar e região estuarina e também apresentou variação nesses componentes, em ambiente diluído o parênquima secretório ocupou cerca de 49% da glândula retal, enquanto no ambiente marinho 36%. Nos rins, foram observadas variações no corpúsculo renal (CR) e em segmentos do néfron. A raia A. narinari apresentou maiores diâmetros dos CR (164,04 ± 20,67 m) em comparação a H. guttatus (106,06 ± 180,5 m) e H. marianae (81,37 ± 17,55 m). As células da porção do túbulo distal que compõem o aparelho justaglomerular variaram de cúbicas altas em A. narinari a cúbicas baixas no gênero Hypanus; o segmento intermediário do nefrón de H. marianae apresentou célular prismáticas menores resultando em maior lúmen e numa distribuição mais esparsa no lóbulo renal. Nas brânquias, as lamelas da raia H. guttatus forma mais longas do que as de H. marianae, a presença de um sacos vasculares, células mucosas e proliferação de células epitelias na porção mais externa da lamea observada nas as duas espécies. As células mucosas presentes na região interlamelar foram mais comumente observadas em H. guttata do que H. marianae. As variações observadas demonstram o nível de adaptação desses animais aos diversos ambientes sua significância na resposta fisiológica de cada espécie.

Elasmobranchs present osmoregulatory strategies that are distinct from other groups, the organs related to osmotic regulation in this group, the rectal gland is essential in marine environment and responsible for the secretion of sodium chloride in large quantities. Its importance decreases in diluted environments in view of the need to maintain and not secrete ions. In these (diluted) environments the influx of water and the ions and excess urea efflux are also observed, requiring the active resorption of ions by the gills and kidneys. These animals face abiotic variations that sometimes are too extreme when they face changing of hypertonic (seawater) to hypotonic (freshwater) environments. In this sense, the present study analyzed the morphological variations of the organs associated with the osmoregulation in three species of Myliobatiformes stingrays: spotted ray Aetobatus narinari, longnose stingray Hypanus guttatus and large-eye stingray Hypanus marianae captured on the north coast of Pernambuco, Brazil, from artisanal fisheries. From each animal, the rectal gland, kidneys and gills (only the genus Hypanus) were collected, processed and prepared for analysis in light and scanning electron microscopy. The rectal gland is an encapsulated organ, with a thin layer of smooth muscle tissue, a secretory parenchyma and bounded by a stratified epithelium connected to the collecting duct / lumen. A. narinari has a large rectal gland in comparison with Hypanus stingrays, although the gland represents only 2.5% of the disk width, whereas for H. marianae and H. guttatus was 3.9% and 4.1%, respectively. The large-eye stingray H. marianae showed a reduction in some structures, such as capsule thickness and less lobes division in relation to H. guttatus and A. narinari. The longnose stingray H. guttatus transits between seawater and estuarine regions and also showed variation in these components, in the estuarine environment the secretory parenchyma occupied about 49% of the rectal gland, while in the marine only 36%. In the kidneys, variations were observed in the renal corpuscle (RC) and in the nephron segments. The spotted ray A. narinari showed larger diameters of the RC (164.04 ± 20.67 m) compared to H. guttatus (106.04 ± 180.5 m) and H. marianae (81.37 ± 17.55 m). The cells in the portion of the distal tubule that make up the justaglomerular apparatus ranged from high in A. narinari to low cubic cells in the genus Hypanus; the intermediate segment of the H. marianae nephron showed smaller prismatic cells resulting in a larger lumen and a more sparse distribution of this segment in the renal lobe. In the gills, the lamellae of the H. guttatus are longer than those of H. marianae, and the presence of vascular sacs, mucous cells, and proliferation epithelial cells in the outermost portion of the lamella were observed in both species. Mucous cells present in the interlamellar region were more commonly seen in H. guttata than H. marianae. The observed variations demonstrate the level of adaptation of these animals to the different environments and their significance in the physiological response of each species.

EFEITO DO USO DA BETAÍNA ONTOP E REFORMULADA, COM E SEM USO DE COLINA, EM RAÇÕES DE CODORNAS JAPONESAS EM POSTURA

O objetivo foi avaliar o uso da betaína sob duas formas de valorização e uso, associada com 8 Cloreto de Colina em rações de codornas japonesas na fase de postura. Foram utilizadas 504 9 codornas japonesas (Coturnix cortunix japonica) de 74 a 208 dias de idade, em esquema 10 fatorial 3x2+1 (3 forma de uso Betaína OnTop, Reformulada 100% e Reformulada 105%, 2 11 formas de uso da colina, Sem e Com, mais um tratamento controle), em delineamento 12 inteiramente casualizado, totalizando sete tratamentos, com nove repetições de oito aves por 13 unidade experimental. PPCX30médio MAs rações foram formuladas com base nas 14 recomendações das aves na fase experimental, usando alimentos de origem vegetal. A betaína 15 entrou no nível de enriquecimento de 20% do nível de metionina digestível recomendado nas 16 rações ontop, enquanto nas dietas com uso da betaina reformulada, o nível de enriquecimento 17 foi da matriz nutricional do produto (100%) e com valorização extra de 5% (105%).O cloreto 18 de colina entrou nas dietas na dose fixa de 0,07%. Foram analisados dados de desempenho 19 produtivo, qualidade de ovos, histologia e células caliciformes do duodeno e glicogênio 20 hepático. Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância com auxílio do programa 21 estatístico com médias comparadas pelo teste Tukey a 5% de probabilidade. No desempenho, 22 apenas o peso médio dos ovos foi influenciado. O uso da betaína promoveu maior peso dos 23 ovos em relação ao controle (P=0,012), independente do modo de uso, enquanto que o uso da 24 colina promoveu resultado superior no peso dos ovos (P=0,016), entretanto, não houve 25 interação entre a betaína e o uso da colina nas rações (P=0,998) para essa variável. Na 26 qualidade dos ovos, somente percentual de casca foi influenciado. O uso da betaína com 27 reformulação a 105% promoveu maior percentual de casca (P=0,0002), quanto o modo de uso 28 a betaina On Top apresentou menor percentual de caca (P=0,006), no entento, não apresentou 29 interação (P=0,9975) O uso da betaína promoveu maior altura dos vilos no tratamento com 30 reformulação de 100% da matriz, contudo teve menor relação vilo:cripta em relação ao 31 tratamento com a reformulação enriquecida em 5% (P=0,011). O glicogênio hepático não foi 32 influenciado (P= 0,187). Nas células caliciformes, a reformulação em 5% extras da matriz foi 33 superior a matriz em 100% (P<0,001). O uso da colina reduziu a altura dos vilos (P=0,010), 34 foi numericamente superior na relação vilo:cripta, e ainda, promoveu maior numero de células 35 caliciformes (P<0,001). Nos geral, o uso da betaína se mostra interessante, pois promove 36 redução no uso de DL-Metionina nas dietas, proporciona melhoria produtiva, e, quando 37 reformulada promove um efeito adicional, potencializando o não uso de colina nas rações. Em 38 conclusão, recomenda-se o uso da betaína reformulada em 100 ou 105% de sua matriz, sem 39 uso de colina, em rações de codornas japonesas em postura.

The objective was to evaluate the use of betaine under two forms of recovery and use, associated with Choline 8 Chloride in Japanese quail rations in the laying phase. Fifty-four Japanese quail (Coturnix cortunix japonica) 9 from 74 to 208 days old were used in a factorial scheme 3x2 + 1 (3 forms of use Betaine 'OnTop, 100% 10 Reformulated and 105% Reformulated', 2 forms of choline use, No and Com ', plus one control treatment), in a 11 completely randomized design, totaling seven treatments, with nine replicates of eight birds per experimental 12 unit. The feed intake (CR, g / bird / day), posture percentage (PPTP,% / bird), feed conversion per 30 egg carton 13 (CCX30A, kg / 30 eggs) and egg mass (g / cm 3), relative weight of bark (CASCA,%), yolk (GEMA,%), bark 14 thickness (ESP, mm) ), albumen (ALBUMIN,%). The rations were formulated based on the recommendations of 15 the birds in the experimental phase, using foods of vegetal origin. Betaine was added to the enrichment level of 16 20% of the recommended digestible methionine level in the ontop rations, while in the diets with the use of the 17 reformulated betaine, the enrichment level was of the nutritional matrix of the product (100%) and with an extra 18 recovery of 5% (105%). Choline chloride entered the diets at a fixed dose of 0.07%. Data of productive 19 performance, egg quality, histology and goblet cells of the duodenum and hepatic glycogen were analyzed. Data 20 of productive performance, egg quality, histology and goblet cells of the duodenum and hepatic glycogen were 21 analyzed. The data were submitted to analysis of variance with the aid of the statistical program with averages 22 compared by the Tukey test at 5% probability. In performance, only the mean egg weight was influenced. The 23 use of betaine promoted a higher egg weight in relation to the control (P = 0.012), regardless of the mode of use, 24 whereas the use of choline promoted a superior egg weight (P = 0.016), however, there was no interaction 25 between betaine and the use of choline in feed (P = 0.998) for this variable. In egg quality, only percentage of 26 bark was influenced. The use of betaine with 105% reformulation promoted a higher percentage of bark (P = 27 0.0002), and the mode of use of betaine On Top had a lower percentage of poop (P = 0,006), therefore, no 28 interaction (P = 0,998). The use of betaine promoted higher villi height in treatment with 100% matrix 29 reformulation, however, it had lower villus: crypt ratio in relation to treatment with 5% enriched reformulation 30 (P = 0.011). Hepatic glycogen was not influenced (P = 0.187). In the goblet cells, the extra 5% reformulation of 31 the matrix was superior to the matrix in 100% (P <0.001). The use of choline reduced the height of the villi (P = 32 0.010), was numerically superior in relation to villus: crypt, and also promoted a greater number of goblet cells 33 (P <0.001). In general, the use of betaine is interesting, since it promotes a reduction in the use of DL-34 Methionine in the diets, it provides productive improvement, and, when reformulated it promotes an additional 35 effect, potentiating the non-use of choline in the diets. In conclusion, it is recommended to use re-formulated 36 betaine in 100 or 105% of its matrix, without the use of choline, in rations of Japanese laying quails.

The effect of salinity on osmoregulation and development of the juvenile fat snook, Centropomus parallelus (POEY) / O efeito da salinidade sobre a osmoregulação e o desenvolvimento do juvenil de robalo-peva, Centropomus parallelus (POEY)

Eurihaline fish support waters with different salt concentration. However, numerous studies have shown that salinity can affect fish development. Thus, the effect of salinity change from 20 to 5 and 35 on survival, weight, length, gill chloride cell ultrastructure and gill Na+, K+ ATPase activity was evaluated in Centropomus parallelus following short-term (6, 24 and 96 hours) and long-term exposure (30 and 60 days). Salinity did not affect C. parallelus survival, final weight and length. The quantity of chloride cells increased visibly at salinities of 5 and 35, with the cells exhibiting the typical features of uptake and secretory cells, respectively. Na+, K+ ATPase activity in the gill of the C. parallelus was significantly greater at a salinity of 5 than at a salinity of 20 or 35 after 96 hours, but not after 30 or 60 days. These results indicate that salinity change from high to low salt water induces gill chloride cell and Na+, K+ ATPase activity adaptations after short-term exposure. However, after long-term exposure at salinity 5, gill Na+, K+ ATPase activity is no more necessary at high levels. The increase in salinity to 35 does not induce significant change in gills. Juveniles of C. parallelus may thus be capable of acclimating to salinities of 5 to 35 for 60 days without significant effects on development.(AU)

Peixes eurihalinos suportam águas com diferentes concentrações de sal. Contudo, muitos estudos têm mostrado que a salinidade pode afetar o desenvolvimento do peixe. Portanto, o efeito da mudança de salinidade de 20 para 5 e 35 na taxa de sobrevivência, peso, comprimento, morfologia das células de cloreto branquiais e atividade da Na+, K+ ATPase foram avaliadas no Centropomus parallelus após curto (6, 24 e 96 horas) e longo tempo de exposição (30 e 60 dias). A salinidade não afetou a sobrevivência, o peso e comprimento final do robalo-peva. A quantidade de células de cloreto aumentou visivelmente nas salinidades 5 e 35, exibindo morfologias típicas de células que absorvem e secretam sal, respectivamente. A atividade da Na+, K+ ATPase nas brânquias do C. parallelus foi significativamente maior na salinidade 5 do que nas salinidades 20 ou 35 após 96 horas, mas não após 30 e 60 dias. Esses resultados indicam que a mudança de alta para baixa salinidade provoca adaptações nas células de cloreto e na atividade da Na+, K+ ATPase branquial em curto prazo. Contudo, após longa exposição na salinidade 5, a alta atividade da Na+, K+ ATPase branquial não é mais necessária. O aumento de salinidade para 35 não induz mudanças significativas nas brânquias. Portanto, juvenis de C. parallelus possuem a capacidade de aclimatação nas salinidades de 5 a 35 semefeitos significativos no desenvolvimento após 60 dias.(AU)

ADITIVOS NUTRICIONAIS PODEM AUXILIAR NA RESISTÊNCIA DO TAMBAQUI (Colossoma macropomum) AO ESTRESSE POR TRANSPORTE?

O tambaqui tem se destacado como a segunda espécie mais produzida no Brasil. Apesar do seu crescente aumento na produção, ainda há poucos estudos a respeito do adequado manejo de transporte para esta espécie. O uso de imunonutrientes e de imunoestimulantes na dieta dos peixes pode favorecer as respostas orgânicas de defesa frente ao estresse inerente à condição intensiva dos processos de produção. Por conseguinte, as perdas nestes sistemas são consideráveis e a alternativa de poder reduzi-las parece ser de grande valia, principalmente com a utilização de compostos imunoestimulantes e nutrientes que melhorem a resposta orgânica dos animais como medida profilática. Assim, este estudo teve como objetivo avaliar o potencial da utilização desta estratégia nutricional no cultivo do tambaqui melhorando o bem-estar dos animais e avaliar o seu impacto sobre os índices produtivos e resistência desta espécie frente ao estresse por transporte. Neste trabalho formulou-se três dietas; a dieta 1 (controle), dieta 2 contendo as vitaminas C e E (1155 e 351,25 mg kg-1, respectivamente) e por fim uma terceira dieta contendo as vitaminas e o -glucano (0,1%). O total de 432 tambaquis (20,91g ± 0,27g), foram distribuídos aleatoriamente em doze aquários. As coletas das amostras foram realizadas aos 30 (antes e depois do transporte) e 60 dias após o início do experimento para a determinação das análises de desempenho produtivo; hematológicas, bioquímicas e imunológicas no soro do tambaqui. O estresse por transporte e a suplementação dos aditivos nutricionais alteraram o GPD e a CA. Entretanto, a CA dos animais alimentados com a dieta contendo o -glucano não foi afetada. O número de células vermelhas foi menor para os animais do grupo que receberam a dieta controle (p = 0.0073). O estresse por transporte alterou o número de linfócitos, neutrófilos e células imaturas. Observou-se acentuado aumento da glicose após o transporte (p = 0.0002). Para os animais do grupo controle a concentração de cloreto foi significativamente menor em relação a dieta 2 (Vit C e E) (p = 0.0178), embora não tenha sido observado diferenças entre os períodos (p = 0.8749). Para a concentração de cortisol no sangue foi observado efeito para os peixes que receberam a dieta 3 antes e após o transporte (p = 0.0115). A atividade respiratória no soro dos tambaquis foi elevada após o transporte (p = 0.0496). A atividade da lisozima foi significativamente superior para os peixes que receberam a dieta 3 em relação aos peixes do grupo controle (p = 0.0246). A concentração de PPT e Ig total dos tambaquis apresentou efeito marcante no período após o transporte independentemente dos tratamentos avaliados (p < 0.0001). Desta forma, concluímos que as vitaminas e -glucano melhoraram a resistência dos tambaquis devido à manutenção dos níveis do cortisol após o transporte, o que amenizou os efeitos nocivos do estresse e evitou os distúrbios osmorregulatórios e eletrolíticos, além de melhorar a atividade da lisozima e proteger as células sanguíneas vermelhas, melhorando desta forma a saúde e as respostas da defesa primária dos peixes.

Tambaqui has highlighted as the second most produced species in Brazil. Despite its increasing production, there are still few studies on the adequate transport management for this species. The use of immunonutrients and immunostimulants in fish diet may improve organic defense responses to the stress inherent to intensive condition of production processes, such as transport. Therefore, losses in these systems are considerable and the alternative to reduce them seems to be of great value, mainly using of immunostimulating compounds and nutrients that improve the organic response of the animals as a prophylactic measure. The aim of this study was to evaluate the potential of using this nutritional strategy in the production of tambaqui, improving animal welfare and evaluating its impact on productive indexes and resistance of this species to transport stress. In this experiment, a control diet was formulated and from this the immunonutrients were added: vitamins E and C and finally a third diet containing immunonutrients and the immunostimulant -glucan. Total of 432 tambaquis (20.91g ± 0.27g) were randomly distributed in twelve aquariums. Samples were collected at 30 (before and after transportation) and 60 days after the start of the experiment to determine the growth performance, hematological, biochemical and immunological of tambaqui plasma. Transport stress affected WGD and FCR, as well as supplementation of nutritional additives. However, the FCR of the animals fed the -glucan containing diet was not affected. The number of red cells was lower for the animals in the control group (p = 0.0073). Transport stress affected the number of lymphocytes, neutrophils, and immature cells. Some increase was observed in glucose after transport (p = 0.0002). For the animals in the control group, the chloride concentration was significantly lower related to diet 2 (Vit C and E) (p = 0.0178), although no differences were observed between the periods (p = 0.8749). For the concentration of cortisol in the blood, an effect was observed for the fish that received the diet supplemented with the nutritional additives before and after transport (p = 0.0115) and 60 days after the start of the transport experiment (p < 0.0001). The leukocytes respiratory activity of tambaqui was increased after transport (p = 0.0496). The lysozyme activity was significantly higher for animals receiving diet 3 than the control group (p = 0.0246). And the concentration of SP and total Ig of the tambaquis presented a marked effect in the period after the transport independently of the evaluated treatments (p < 0.0001). In this way, we conclude that vitamins and -glucan improved the resistance of tambaquis by maintaining cortisol levels after transportation, thus alleviating the harmful effects of stress avoiding osmoregulatory and electrolytic disorders, as well as improving the activity of lysozyme and protecting red blood cells, thereby improving the health and responses of the primary defense of fish.

Parâmetros hematológicos e bioquímicos da tilápia-do-Nilo (Oreochromis niloticus L) sob estresse por exposição ao ar / Hematological parameters of Nile Tilapia (Oreochromis niloticus L) under air exposure stress

No presente trabalho avaliaram-se os parâmetros hematológicos e bioquímicos de exemplares adultos de tilápias (Oreochromis niloticus) sob a influência do fator estresse fisiológico em animais submetidos à exposição ao ar durante a engorda em sistema raceway. Foram analisados o eritrograma, teor de hemoglobina, volume globular, o volume corpuscular médio (VCM), a hemoglobina corpuscular média (HCM), a concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM), o leucograma, contagem diferencial de leucócitos, o plaquetograma, a glicose, a proteína total, o colesterol, o triglicerídeo e os eletrólitos (cálcio, cloretos, sódio e potássio). Os resultados revelaram que houve uma homogeneidade de distribuição para hemácias, volume globular, hemoglobina, índices hemantimétricos, proteína total, glicose, colesterol, e íons séricos, indicados pelos valores relativamente baixos do coeficiente de variação. Houve correlação positiva somente para leucócitos totais, células de defesa orgânica (neutrófilos e linfócitos), glicose, colesterol, sódio e cálcio. Quanto ao leucograma, à medida que os animais foram expostos ao ar, o número de leucócitos diminuiu gradativamente (leucopenia), ocorrendo simultaneamente neutrofilia e linfopenia. O índice glicêmico constituiu um bom indicador de estresse fisiológico, devido à hiperglicemia (82,0±20,88mg/dL) demonstrada nos tratamentos. A exposição ao ar constituiu um fator de desequilíbrio na homeostase iônica, e na síntese de colesterol endógeno. Entretanto, o tempo de recuperação não ocasionou a completa reabilitação fisiológica frente ao desafio imposto.(AU)

The present study evaluated the hematological and biochemical parameters of adult tilapia (Oreochromis niloticus) under the influence of the physiological stress factor in animals submitted to air exposure during fattening in raceway system. Blood cell count, hemoglobin, hematocrit, mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscular hemoglobin (MCH), mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC), leukogram, differencial leukocyte count, platelet, glucose, total protein, cholesterol, triglycerides and electrolytes (calcium, chloride, sodium and potassium) were analyzed. The results showed a uniform distribution for red blood cells, hematocrit, hemoglobin, secondary Wintrobe indices, total protein, glucose, cholesterol, and serum ions, indicated by a relatively low variation coefficient. There was positive correlation only for total white blood cells, organic defense cells (neutrophils and lymphocytes), glucose, cholesterol, sodium and calcium. As for the leukocytes (WBC), as the animals were exposed to aeration, the number of leukocytes gradually decreased (leukopenia), simultaneously occurring neutrophilia and lymphopenia. The glycemic index was a good indicator of physiological stress due to hyperglycemia (82.0±20.88mg/dL) demonstrated in the treatments. The air exposure constituted an imbalance factor at the ion homeostasis and at the endogenous cholesterol synthesis. Besides, the recovery time did not result in the complete physiological rehabilitation face the imposed challenge.(AU)

ALTERAÇÕES HISTOLÓGICAS EM LOPHIOSILURUS ALEXANDRI EXPOSTOS AO GLIFOSATO.

O Roundup® Original é um herbicida que contém em sua formulação o ingrediente ativo glifosato. Esta formulação comercial é amplamente utilizada a nível global, e sua principal função é combater ervas daninhas na agricultura. Devido às grandes aplicações deste herbicida, o glifosato e seus principais metabólitos têm sido detectados em águas superficiais e subterrâneas, gerando preocupações quanto aos seus efeitos em organismos não-alvos, principalmente animais aquáticos. O objetivo central deste estudo foi avaliar os efeitos deletérios do Roundup® Original (N-(fosfonometil) glicina, Monsanto do Brasil Ltda) em formas jovens do peixe pacamã (Lophiosilurus alexandri). Para isto, foram realizados testes de toxicidade aguda (96 h) e teste subcrônico (19 dias) de exposição ao herbicida. No primeiro teste de toxicidade aguda, foram testadas as concentrações de 0,0; 2,5; 3,0; 3,5; 4,0; 4,5 e 5,0 mg L-¹ de glifosato diluído em água, em animais de 0,05 ± 0,01 g; 1,80 ± 0,10 cm. A Concentração letal mediana (CL50; 96h) estimada foi de 2,71 mg L-¹ de glifosato. O estudo histológico possibilitou a observação de alterações branquiais, tais como: descolamento do epitélio lamelar, aneurisma, hiperplasia e fusão lamelar em animais mantidos na presença do agente tóxico. Para o segundo teste de toxicidade aguda, foram utilizados animais de 4,03 ± 1,26 g; 6,97 ± 0,65 cm. As concentrações de glifosato testadas foram de 0,0; 3,0; 6,0; 10,0; 15,0 e 20,0 mg L-¹. A CL50; 96 h e o nível de segurança estimados foram de 4,21 mg L-¹, e 0,42 mg L-¹ de glifosato, respectivamente. Brânquias e fígados avaliados neste experimento demonstraram alterações teciduais como: descolamento do epitélio lamelar com edema intersticial, hiperplasia das lamelas secundárias, hipertrofia de células de cloreto, desarranjo do formato das células hepáticas com presença de algumas áreas necróticas e com núcleos picnóticos. O terceiro experimento, caracterizado pela exposição de juvenis (21,69 ± 3,89 g; 11,45 ± 0,79 cm) às concentrações subletais de glifosato (0,0; 0,42 e 0,21 mg L-¹), ocasionou a mortalidade de 25% dos animais expostos à maior concentração de glifosato, além da presença de animais letárgicos nas concentrações testadas, com exceção do grupo controle. A histologia aplicada para fígado e brânquias dos juvenis do teste subcrônico, também demonstraram alterações teciduais, porém em menor proporção em relação aos testes de exposição aguda. Desta forma, podemos sugerir que o glifosato é potencialmente tóxico para L. alexandri, visto que concentrações baixas de glifosato provocaram mortalidade, além de alterações histológicas e comportamentais.

Roundup® Original is an herbicide that contains in its formulation the active ingredient glyphosate. This commercial formulation is widely used globally, and its main function is to combat weeds in agriculture. Due to the great applications of this herbicide, glyphosate and its main metabolites have been detected in surface water and groundwater, raising concerns about its effects on non-target organisms, mainly aquatic animals. The main objective of this study was to evaluate the deleterious effects of Roundup® Original (N- (phosphonomethyl) glycine, Monsanto of Brazil Ltda.) on juveniles of the pacamã fish (Lophiosilurus alexandri). For this, tests of acute toxicity (96 h) and subchronic (19 days) of exposure to the herbicide were performed. In the first acute toxicity test, were tested the concentrations of 0,0; 2,5; 3,0; 3,5; 4,0; 4,5 and 5,0 mg L-1 of glyphosate diluted in water, in animals of 0,05 ± 0,01 g; 1,80 ± 0,10 cm. The median lethal concentration (LC50; 96h) estimated was 2,71 mg L-1 of glyphosate. Histological studies allowed the observation of branchial alterations, such as: detachment of the lamellar epithelium, aneurysm, hyperplasia and lamellar fusion in animals kept in the presence of the toxic agent. For the second acute toxicity test, were used animals of 4,03 ± 1,26 g; 6,97 ± 0,65 cm. The concentrations of glyphosate tested were 0,0; 3,0; 6,0; 10,0; 15,0 and 20,0 mg L-1. The LC50; 96 h and the safety level estimated were 4,21 mg L-1, and 0,42 mg L-1 of glyphosate, respectively. Gills and livers evaluated in this experiment demonstrated tissue changes such as: detachment of lamellar epithelium with interstitial edema, hyperplasia of secondary lamellae, hypertrophy of chloride cells, and derangement of hepatic cell shape with the presence of some necrotic areas with pycnotic nuclei. The third experiment, characterized by exposure of the juveniles (21,69 ± 3,89 g, 11,45 ± 0,79 cm) to sublethal concentrations of herbicide (0,0; 0,42 and 0,21 mg L-1), caused mortality of 25% of the animals exposed to the highest concentration of glyphosate, in addition to the presence of lethargic animals in the tested concentrations, except for the control group. The histology applied to the liver and gills of juveniles of the subchronic test also showed tissue changes, but to a lesser extent in relation to the acute exposure tests. In this way, we can suggest that glyphosate is potentially toxic to L. alexandri, since low concentrations of glyphosate caused mortality, as well as histological and behavioral changes.

Parâmetros hematológicos e bioquímicos da tilápia-do-Nilo (Oreochromis niloticus L. ) sob estresse por exposição ao ar / Hematological parameters of Nile Tilapia (Oreochromis niloticus L. ) under air exposure stress

No presente trabalho avaliaram-se os parâmetros hematológicos e bioquímicos de exemplares adultos de tilápias (Oreochromis niloticus) sob a influência do fator estresse fisiológico em animais submetidos à exposição ao ar durante a engorda em sistema raceway. Foram analisados o eritrograma, teor de hemoglobina, volume globular, o volume corpuscular médio (VCM), a hemoglobina corpuscular média (HCM), a concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM), o leucograma, contagem diferencial de leucócitos, o plaquetograma, a glicose, a proteína total, o colesterol, o triglicerídeo e os eletrólitos (cálcio, cloretos, sódio e potássio). Os resultados revelaram que houve uma homogeneidade de distribuição para hemácias, volume globular, hemoglobina, índices hemantimétricos, proteína total, glicose, colesterol, e íons séricos, indicados pelos valores relativamente baixos do coeficiente de variação. Houve correlação positiva somente para leucócitos totais, células de defesa orgânica (neutrófilos e linfócitos), glicose, colesterol, sódio e cálcio. Quanto ao leucograma, à medida que os animais foram expostos ao ar, o número de leucócitos diminuiu gradativamente (leucopenia), ocorrendo simultaneamente neutrofilia e linfopenia. O índice glicêmico constituiu um bom indicador de estresse fisiológico, devido à hiperglicemia (82,0±20,88mg/dL) demonstrada nos tratamentos. A exposição ao ar constituiu um fator de desequilíbrio na homeostase iônica, e na síntese de colesterol endógeno. Entretanto, o tempo de recuperação não ocasionou a completa reabilitação fisiológica frente ao desafio imposto.(AU)

The present study evaluated the hematological and biochemical parameters of adult tilapia (Oreochromis niloticus) under the influence of the physiological stress factor in animals submitted to air exposure during fattening in raceway system. Blood cell count, hemoglobin, hematocrit, mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscular hemoglobin (MCH), mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC), leukogram, differencial leukocyte count, platelet, glucose, total protein, cholesterol, triglycerides and electrolytes (calcium, chloride, sodium and potassium) were analyzed. The results showed a uniform distribution for red blood cells, hematocrit, hemoglobin, secondary Wintrobe indices, total protein, glucose, cholesterol, and serum ions, indicated by a relatively low variation coefficient. There was positive correlation only for total white blood cells, organic defense cells (neutrophils and lymphocytes), glucose, cholesterol, sodium and calcium. As for the leukocytes (WBC), as the animals were exposed to aeration, the number of leukocytes gradually decreased (leukopenia), simultaneously occurring neutrophilia and lymphopenia. The glycemic index was a good indicator of physiological stress due to hyperglycemia (82.0±20.88mg/dL) demonstrated in the treatments. The air exposure constituted an imbalance factor at the ion homeostasis and at the endogenous cholesterol synthesis. Besides, the recovery time did not result in the complete physiological rehabilitation face the imposed challenge.(AU)

Leite de búfalas Murrah, criadas em São Paulo (Brasil): influência da idade, fase de lactação, momento da ordenha e isolamento bacteriano na composição físico-química e celular / Milk of Murrah buffaloes bred in São Paulo (Brazil): influence of age, lactation phase, time of milking and bacterial isolation in the physical-chemical and cell composition

O presente estudo objetivou avaliar valores físico-químicos ecelulares do leite de búfalas criadas em São Paulo, Brasil, assimcomo evidenciar relações entre o isolamento bacteriano e alteraçõesnesses constituintes, contribuindo dessa forma para o diagnósticodas diferentes formas de mastite. Os valores consideradoscomo de referência para o leite de búfalas, segundo as fases delactação (inicial, intermediária e final), foram respectivamente:para o pH 6,89; 6,85 e 6,9; para a eletrocondutividade 3,82;4,02 e 4,49 mS/cm; para os teores de cloreto 18,21; 20,13 e26,49 mg/dl; para os teores de gordura 4,25; 3,70 e 3,56 g/dl;para os teores de proteína 3,97; 4,03 e 4,5 g/dl; para os teoresde lactose 5,11; 5,08 e 4,81 g/dl; para os teores de sólidostotais 14,55; 13,88 e 13,93 g/dl e para o número de célulassomáticas 29.000; 29.000 e 26.000 cel/ml. As bactérias isoladascom maior frequência foram as dos gêneros: Corynebacterium(28,5%); Staphylococcus (24,7%); Streptococcus (15,8%); e Arcanobacteriumpyogenes (11,4%), com uma prevalência igual a20,1%. O número de isolamentos bacterianos aumentou significativamentecom o evoluir da lactação. Em contraste, o momentoda ordenha não influenciou no número de isolamentos.

The objective of the present study was to evaluate physicalchemicaland cellular contents of the milk of buffaloes bred inthe state of São Paulo, Brazil, and to draw relationships betweenthese values and microbiological results, contributing significantlyfor the diagnosis of different forms of mastitis. Reference valuesfor buffalo milk, according to the phase of lactation (beginning,middle and end of lactation) were, respectively: pH, 6.89; 6.85and 6.9; electro conductivity, 3.82; 4.02 and 4.49 mS/cm; chloridecontent, 18.72; 20.13 and 26.49 mg/dl; fat content 4.25;3.70 and 3.56 g/dl; protein content, 3.97; 4.03 and 4.5 g/dl;lactose content, 5.11; 5.08 and 4.81 g/dl; total solid content,14.55; 13.88 and 13.93 g/dl, and somatic cell counts, 29,000;29,000 and 26,000 cells/ml. Results support that the phase oflactation influence pH, electroconductivity, chloride, fat, protein,lactose and total solid contents, as well as somatic cell counts.Fat, protein, lactose, total solid and somatic cell counts contentswere influenced by the moment of sample collection (before orafter milking), respectively, with the following values: 3.90 and8.9 g/dl; 4.12 and 3.67 g/dl; 5.02 and 4.64 g/dl; 14.18 and18.31 g/dl, and 29,000 and 56,000 cells/ml. Bacterial generamore frequently isolated were Corynebacterium sp (28.5%); Staphylococcussp (24.7%); Streptococcus sp (15.8%); and Arcanobacteriumpyogenes (11.4%), with prevalence equal to 20.1%.The frequency of bacterial isolation increased significantly withlactation. However, the moment of milking did not influence isolation.There was a relationship between the variation in somemilk constituents that present clinical significance for the diagnosisof buffalo mastitis.

Leite de búfalas Murrah, criadas em São Paulo (Brasil): influência da idade, fase de lactação, momento da ordenha e isolamento bacteriano na composição físico-química e celular / Milk of Murrah buffaloes bred in São Paulo (Brazil): influence of age, lactation phase, time of milking and bacterial isolation in the physical-chemical and cell composition

O presente estudo objetivou avaliar valores físico-químicos ecelulares do leite de búfalas criadas em São Paulo, Brasil, assimcomo evidenciar relações entre o isolamento bacteriano e alteraçõesnesses constituintes, contribuindo dessa forma para o diagnósticodas diferentes formas de mastite. Os valores consideradoscomo de referência para o leite de búfalas, segundo as fases delactação (inicial, intermediária e final), foram respectivamente:para o pH 6,89; 6,85 e 6,9; para a eletrocondutividade 3,82;4,02 e 4,49 mS/cm; para os teores de cloreto 18,21; 20,13 e26,49 mg/dl; para os teores de gordura 4,25; 3,70 e 3,56 g/dl;para os teores de proteína 3,97; 4,03 e 4,5 g/dl; para os teoresde lactose 5,11; 5,08 e 4,81 g/dl; para os teores de sólidostotais 14,55; 13,88 e 13,93 g/dl e para o número de célulassomáticas 29.000; 29.000 e 26.000 cel/ml. As bactérias isoladascom maior frequência foram as dos gêneros: Corynebacterium(28,5%); Staphylococcus (24,7%); Streptococcus (15,8%); e Arcanobacteriumpyogenes (11,4%), com uma prevalência igual a20,1%. O número de isolamentos bacterianos aumentou significativamentecom o evoluir da lactação. Em contraste, o momentoda ordenha não influenciou no número de isolamentos.(AU)

The objective of the present study was to evaluate physicalchemicaland cellular contents of the milk of buffaloes bred inthe state of São Paulo, Brazil, and to draw relationships betweenthese values and microbiological results, contributing significantlyfor the diagnosis of different forms of mastitis. Reference valuesfor buffalo milk, according to the phase of lactation (beginning,middle and end of lactation) were, respectively: pH, 6.89; 6.85and 6.9; electro conductivity, 3.82; 4.02 and 4.49 mS/cm; chloridecontent, 18.72; 20.13 and 26.49 mg/dl; fat content 4.25;3.70 and 3.56 g/dl; protein content, 3.97; 4.03 and 4.5 g/dl;lactose content, 5.11; 5.08 and 4.81 g/dl; total solid content,14.55; 13.88 and 13.93 g/dl, and somatic cell counts, 29,000;29,000 and 26,000 cells/ml. Results support that the phase oflactation influence pH, electroconductivity, chloride, fat, protein,lactose and total solid contents, as well as somatic cell counts.Fat, protein, lactose, total solid and somatic cell counts contentswere influenced by the moment of sample collection (before orafter milking), respectively, with the following values: 3.90 and8.9 g/dl; 4.12 and 3.67 g/dl; 5.02 and 4.64 g/dl; 14.18 and18.31 g/dl, and 29,000 and 56,000 cells/ml. Bacterial generamore frequently isolated were Corynebacterium sp (28.5%); Staphylococcussp (24.7%); Streptococcus sp (15.8%); and Arcanobacteriumpyogenes (11.4%), with prevalence equal to 20.1%.The frequency of bacterial isolation increased significantly withlactation. However, the moment of milking did not influence isolation.There was a relationship between the variation in somemilk constituents that present clinical significance for the diagnosisof buffalo mastitis.(AU)

QUALIDADE DO LEITE DE CABRA IN NATURA PELA DETECÇÃO DE MICRORGANISMOS, SUSCEPTIBILIDADE ANTIMICROBIANA, PARÂMETROS FÍSICOS-QUÍMICOS, CONTAGEM DE CÉLULAS SOMÁTICAS, CONTAGEM TOTAL BACTERIANA E RESÍDUO ANTIMICROBIANO.

A caprinocultura leiteira vem ganhando destaque nos últimos anos impulsionado por incentivos governamentais e privados. Em contrapartida, a mastite acarreta representa grandes perdas econômicas no segmento leiteiro tanto na quantidade como na qualidade do leite produzido. Foi realizado um estudo da mastite subclínica em nove rebanhos de cabras leiteiras localizadas no Estado do Rio de Janeiro, totalizando 140 amostras de leite (uma amostras por animal), com o objetivo de avaliar a qualidade do leite de cabra pelo cultivo microbiológico e reação em cadeia da polimerase (PCR) do leite in natura para pesquisa de Staphylococcus aureus, contagem de células somáticas (CCS), contagem bacteriana total (CBT), análises físico-química, verificação do perfil de resistência antimicrobiana in vitro de Staphylococcus spp., detecção de genes de resistência a beta-lactâmicos e a presença de resíduos antimicrobianos. Houve crescimento bacteriano em 64 amostras (48%), dentre essas 10 obtiveram isolamento de dois microrganismos associados. Dos 77 isolados encontrados, 58,4% foram identificados como Staphylococcus coagulase negativa (SCN), 11,58% Staphylococcus Coagulase Positiva, 14,16% bastonetes gram negativos da família das enterobactérias (incluindo E. coli e Serratia sp.), 6,49% Bacillus spp., 5,19% Streptococcus spp. e 3,89% Enterococcus spp. A associação de SCN e bastonete gram negativo apresentou o maior número, com 50%, seguido de 20% Staphylococcus Coagulase Positiva + Enterococcus sp. e 10% SCN + Bacillus spp., Streptococcus spp. + Bacillus spp. e Streptococcus spp. + Bastonete Gram Negativo. No teste de difusão em disco realizado com 54 isolados de Staphylococcus spp., o antimicrobiano mais efetivo foi o florfenicol (1,7%) e as maiores resistências foram para ampicilina e penicilina (50%), seguida da oxacilina (32,70% ), tetraciclina (8,60%), cefoxitina( 6,89%), norfloxacina (5%), gentamicina e cefalotina (3,40%). A múltipla re¬sistência a dois ou mais antimicrobianos foi observada em 57,40% dos isolados. Nenhuma amostra de leite obteve positividade para Staphylococcus aureus no cultivo e na PCR. A média de CCS de 2.152.000 células/mL está acima do recomendado pela literatura. Não houve associação significativa entre o isolamento bacteriano e os valores obtidos na contagem de células somáticas (t-Student p > 0,05). A média de CBT de 842.000 UFC/mL de leite foi acima do preconizado pela legislação. As análises físico-químicas realizadas no leite foram: porcentagens de gordura, proteína e lactose por absorção infravermelha, bem como de sólidos totais, por soma dos valores dos componentes anteriores. A acidez, pela titulação de leite por solução alcalina (NaOH 0,1N), utilizando-se como indicador a fenolftaleína e o resultado expresso em graus Dornic (°D). A determinação de cloretos pelo método mercurométrico e densidade a 15°C em aparelho eletrônico. Alguns rebanhos não atenderam aos padrões físico-químicos exigidos pela legislação. A acidez apresentou diferença significativa quando associada ao isolamento bacteriano (p<0,05). O risco (odds ratio) de detecção bacteriana em caso de acidez elevada aumentado em 1,15 vezes quando comparado a amostras com acidez normal. A contribuição de todos os fatores físico-químicos a CBT somou 41,08%, sendo a lactose o fator que mais contribuiu isoladamente (p<0,05). Em dezenove amostras isoladas de mastite caprina subclínica dos mesmos rebanhos estudados, foi realizada a técnica proteômica MALDI-TOF para identificação das espécies; detecção fenotípica de resistência aos beta-lactâmicos pela difusão em disco simples de oxacilina, cefoxitina, penicilina G e amoxacilina + ácido clavulânico, ágar screen de oxacilina e microdiluição em caldo (MIC) de cefoxitina, e a detecção de genes de resistência à oxacilina de Staphylococcus spp. através da PCR para amplificação dos genes: mecA (MURAKAMI et al. 1991), mecA variante (MELO et al. 2014), mecI (LENCASTRE; OLIVEIRA 2002), mecRI (ROSATO et al. 2003), mecC (STEEGER et al. 2012) e blaZ (ROSATO et al. 2003). Foram identificadas como Staphylococcus epidermidis 47,36%, 15,78% como Staphylococcus warneri, 10,52% como Staphylococcus caprae e Staphylococcus aureus e 5,26% tanto para Staphylococcus lugdunensis, como para Staphylococcus simulans e Staphylococcus cohnii. Os isolados caracterizados pelo MALDI-TOF foram confirmados como Staphylococcus spp. pela PCR para o gene 16rRNA. O teste de difusão em disco demonstrou resistência de 58% para penicilina G e 26,31% tanto para cefoxitina como para oxacilina. Todas as amostras foram sensíveis a amoxicilina + ácido clavulânico e ao ágar screen de oxacilina. À MIC, 63,15% das amostras foram resistentes a cefoxitina, sendo que 52,63% com MIC 8,0 µg/ml e 10,52% com MIC 16 µg/ml. Duas amostras de Staphylococcus epidermidis apresentaram o gene mecA proposto por Murakami et al. (1991). Todos os isolados foram negativos para o gene mecA variante (MELO et. al, 2014), mecl, mecRI mecC e blaZ. Nenhuma amostra apresentou resíduo acima dos limites máximos permitidos. SCN foi o agente bacteriano isolado com maior frequência e a resistência antimicrobiana dessas cepas frente a ampicilina, penicilina e oxacilina, alertam para alterações do perfil de sensibilidade destes patógenos ao longo dos anos. A elevada taxa de resistência fenotípica acompanhada por uma baixa detecção genotípica nos isolados de Staphylococcus spp., pode estar relacionada a alterações nos genes desencadeadas por mutações, fagos, plasmídeos e transposons. Tais achados reforçam a importância deste grupo de microrganismos na etiologia da mastite subclínica em caprinos e abre perspectivas para futuras pesquisas para a investigação da epidemiologia da doença. A CCS não se correlaciona com os resultados do isolamento bacteriano, devendo ser avaliada com cautela em estudos sobre mastite subclínica em cabras. Esse estudo demonstra a importância e a necessidade de um monitoramento constante por parte dos órgãos responsáveis e por instituições de pesquisa quanto a qualidade e a integridade do leite de cabra que é fornecido a população.

Dairy goat is growing in recent years driven by government and private incentives. In contrast, mastitis leads is great economic losses in the dairy segment in both the quantity and quality of milk produced. A study of subclinical mastitis in nine herds of dairy goats in the state of Rio de Janeiro, totaling 140 samples of milk, in order to assess the quality of goat milk by microbiological culture and polymerase chain reaction (PCR) was performed of fresh milk for Staphylococcus aureus research, somatic cell count (SCC), total bacterial count (TBC), physico-chemical analysis, check in antimicrobial resistance profile vitro Staphylococcus spp., detection of beta-resistance genes lactam and the presence of antimicrobial residues. Bacterial growth in 64 samples (48%), of these 10 were obtained isolating two associated micro-organisms. Of the 77 isolates found, 58.4% were identified as coagulase negative Staphylococcus (CNS), 11.58% coagulase positive Staphylococcus, 14.16% negative rods gram of the Family Enterobacteriaceae (including E. coli and Serratia sp.), 6 49% Bacillus spp., Streptococcus spp 5.19%. and 3.89% Enterococcus spp. he combination of CNS and gram negative rod had the highest number with 50%, followed by 20% Staphylococcus coagulase positive + Enterococcus sp. SCN + 10% Bacillus spp., Streptococcus spp. + Bacillus spp. and Streptococcus spp. + Gram Negative Bacillus. In the disc diffusion test with 54 Staphylococcus spp., more effective antibiotic florfenicol was (1.7%) and the greatest resistance to ampicillin and penicillin were (50%), followed by oxacillin (32.70%), tetracycline (8.60%), cefoxitin (6.89%), norfloxacin (5%), gentamicin and cephalothin (3.40%). Multiple resistência to two or more antibiotics was observed in 57.40% of the isolates. No milk sample obtained positive for Staphylococcus aureus in culture and PCR. The SCC average of 2,152,000 cells/mL is above the recommended by the literature. There was no significant association between bacterial isolation and the values obtained in the SCC (Student t p> 0.05). The average TBC 842,000 CFU/ml of milk was higher than recommended by law. The physico-chemical analyzes in milk were: percentage of fat, protein and lactose infrared absorption, as well as total solids, by summing the values of the above components. The acidity by titration milk alkaline solution (0.1N NaOH), using phenolphthalein as an indicator and Dornic result expressed in degrees (°D). The determination of chloride by method mercurométrico and density at 15°C in electronics. Some herds did not meet the physical and chemical standards required by law. Acidity significant difference when associated with bacterial isolation (p <0.05). The risk (odds ratio) of bacterial detection in case of high acidity increased by 1.15 times as compared to samples with normal acidity. The contribution of all physicochemical factors TBC amounted to 41.08%, the lactose factor that contributed alone (p <0.05). In nineteen samples isolated from subclinical mastitis goat herds of the same study, proteomics technique MALDI-TOF was performed to identify the species; Phenotypic detection of resistance to beta-lactams by diffusion in simple disk oxacillin, cefoxitin, penicillin G and amoxicillin plus clavulanic acid, agar "screen" oxacillin and microdilution (MIC) of cefoxitin, and detection of resistance genes oxacillin of Staphylococcus spp. by PCR amplification of genes: mecA (MURAKAMI et al 1991.), mecA variant (MELO et al 2014.) mecI (LANCASTEr; OLIVEIRA 2002), mecRI (ROSATO et al., 2003), mecC (STEEGER et al. 2012) and blaZ (ROSATO et al. 2003). They were identified as Staphylococcus epidermidis 47.36% 15.78% as Staphylococcus warneri, Staphylococcus caprae as 10.52% and 5.26% Staphylococcus aureus and Staphylococcus lugdunensis so as Staphylococcus simulans and Staphylococcus cohnii. Isolates characterized by MALDI-TOF were confirmed as Staphylococcus spp. by PCR for 16S rRNA gene. The disk diffusion test demonstrated resistance to penicillin G, 58% and 26.31% for both the cefoxitin and for oxacillin. All strains were susceptible to amoxicillin + clavulanic acid and agar "screen" oxacillin. The MIC, 63.15% of the samples were resistant to cefoxitin, and 52.63% with MIC 8.0 g / ml and 10.52% with MIC 16 mg / ml. Two samples of Staphylococcus epidermidis mecA gene had proposed by Murakami et al. (1991). All isolates were negative for the mecA gene variant (MELO et al., 2014), mecl, mecRI mecC and blaZ. No samples showed residue above the maximum allowable limits. CNS was isolated bacterial agent with greater frequency and antimicrobial resistance across these strains to ampicillin, penicillin and oxacillin, warn sensitivity profile of these pathogens changes over the years. The high phenotypic resistance rate accompanied by a low genotypic detection in Staphylococcus spp., may be related to alterations in gene triggered by mutation, phage, plasmids and transposons. These findings reinforce the importance of this group of microorganisms in the etiology of subclinical mastitis in goats and opens perspectives for future research to investigate the epidemiology of the disease. The SCC is not correlated with the results of bacteriological isolation, and must be carefully evaluated in studies of subclinical mastitis in goats. This study demonstrates the importance and the need for constant monitoring by the responsible agencies and research institutions and the quality and integrity of goat milk that the population is provided.

Biosynthesis of selenium nanoparticles using Klebsiella pneumoniae and their recovery by a simple sterilization process

The use of biologically derived metal nanoparticles for various proposes is going to be an issue of considerable importance; thus, appropriate methods should be developed and tested for the biological synthesis and recovery of these nanoparticles from bacterial cells. In this research study, a strain of Klebsiella pneumoniae was tested for its ability to synthesize elemental selenium nanoparticles from selenium chloride. A broth of Klebsiella pneumoniae culture containing selenium nanoparticles was subjected to sterilization at 121ºC and 17 psi for 20 minutes. Released selenium nanoparticles ranged in size from 100 to 550 nm, with an average size of 245 nm. Our study also showed that no chemical changes occurred in selenium nanoparticles during the wet heat sterilization process. Therefore, the wet heat sterilization process can be used successfully to recover elemental selenium from bacterial cells.