Activity of essential oils from leaves, flower buds and stems of Tetradenia riparia on Rhipicephalus (Boophilus) microplus larvae / Atividade dos óleos essenciais das folhas, botões florais e caules de Tetradenia riparia sobre as larvas de Rhipicephalus (Boophilus) microplus

Around the world, the main problems of livestock are caused by ectoparasites, however, commercial acaracide are toxic to the environment and detrimental to One Health. Therefore, research has increasingly focused on development of natural products as alternatives for tick control. The purpose of this study was to evaluate the larvicidal effect on Rhipicephalus (Boophilus) microplus, through use of essential oils (EOs) extracted from the leaves, flower buds and stems of Tetradenia riparia. The chemical composition of these EOs was determined through gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS). They were tested on larvae at concentrations of 100.000 to 40 µg/mL, using the larval packet test and under semi-natural conditions. The main class of compounds in the chemical composition was sesquiterpenes (both oxygenates and hydrocarbons), whereas the predominant compounds in the leaves, flower buds and stems were 14-hydroxy-9-epi-caryophyllene, T-cadinol and 6-7-dehydroroyleanone, respectively. The leaves proved to be the most effective, with highest larvicidal activity (LC99.9 = 83.53 µg/mL). When tested under semi-natural conditions, the oils obtained efficiency above 98% in all compound tests. The results indicated that these EOs were effective against R. (B.) microplus larvae in vitro and ex-situ, proving that this plant has bioactive molecules with significant larvicidal activity.(AU)

Os principais problemas para a pecuária estão relacionados às ectoparasitoses, e ao fato dos carrapaticidas apresentarem elevada toxicidade ao meio ambiente e à saúde única. Surgem, então, demandas na busca por inovações e desenvolvimento de produtos naturais, como alternativas para o controle dos carrapatos. O objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial da atividade larvicida sobre Rhipicephalus (Boophilus) microplus a partir dos óleos essenciais de Tetradenia riparia (TrOEs) extraídos das folhas, botões florais e caules. A composição química foi determinada por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massa (GC/MS). Os TrOEs foram testados sobre larvas nas concentrações de 100.000 a 40 µg/mL pelo teste de pacote de larvas e em condições seminaturais. Na composição química, a classe majoritária foi os sesquiterpenos (oxigenados e hidrocarbonetos); já os compostos em destaques foram 14-hidroxy-9-epi-caryophyllene, T-cadinol e 6-7-dehidroroyleanone para folhas, botões florais e caules, respectivamente. As folhas demonstraram ser mais eficientes e com maior poder larvicida (CL99.9 = 83.53 µg/mL). Quando testado em condições seminaturais os óleos obtiveram eficiência acima de 98% em todos os compostos testados. Os resultados indicaram que os TrOEs, foram eficazes sobre as larvas de R. (B.) microplus in vitro e ex-situ, evidenciando que esta planta possui moléculas bioativas com ação larvicidas significativas.(AU)

Epidemiological aspects of cattle tick fever in Brazil / Aspectos epidemiológicos da tristeza parasitária bovina no Brasil

The present work reviews the epidemiologic situation of Anaplasma marginale and Babesia spp. infections and the occurrence of cattle tick fever outbreaks in Brazil. In areas of tick fever enzootic instability, environmental conditions interfere with the development of Rhipicephalus (Boophilus) microplus: chilly winter in the southern region, floods in the Pantanal, and low humidity in the Caatinga. In contrast, the climatic conditions of stable zones (Cerrado, Amazon and Atlantic Forest biomes) favor tick development. In enzootic areas, tick fever is uncommon because the animals are in frequent contact with the parasite, acquiring immunity naturally during the period of innate resistance; however, outbreaks may occur when calves become infested by considerable numbers of infected ticks during this period or in adults raised in tick-free environments that become infested for the first time when transporting to stable areas. It is necessary to better understand the disease's risk factors under stable conditions and the implications of the mechanical and other vector transmission of A. marginale. To prevent tick fever outbreaks in Brazil, it is important to develop and use anaplasmosis and babesiosis vaccines in cattle from enzootic unstable regions, especially when animals are moved to stable areas.(AU)

O presente trabalho revisa a situação epidemiológica das infecções por Anaplasma marginale e Babesia spp. e a ocorrência de surtos de Tristeza parasitária bovina (TPB) no Brasil. Em áreas de instabilidade enzoótica, as condições ambientais interferem no desenvolvimento do Rhipicephalus (Boophilus) microplus: o frio do inverno na região Sul; as inundações no Pantanal; e a baixa umidade na Caatinga. Por outra parte, as condições climáticas das zonas de estabilidade (os biomas Cerrado, Amazônia e Mata Atlântica) favorecem o desenvolvimento do carrapato. A TPB não é comum nas áreas estáveis, porque os animais estão em contato frequente com os parasitas, adquirindo imunidade naturalmente. Podem, porém, ocorrer surtos quando um número considerável de carrapatos infectados infesta bezerros, durante o período de resistência inata, ou quando adultos que foram criados em ambientes livres de carrapatos infestam-se, pela primeira vez, ao serem transportados para áreas estáveis. É necessário entender melhor os fatores de risco da doença em condições de estabilidade e a implicação da transmissão de A. marginale de forma mecânica, ou por meio de vetores diferentes do carrapato. Para prevenir surtos de TPB, no Brasil, é necessário desenvolver e usar vacinas em bovinos de regiões de instabilidade, especialmente antes de transportá-los para áreas estáveis.(AU)

EFICIÊNCIA DE ACARICIDAS COMERCIAIS SOBRE O Rhipicephalus (Boophilus) Microplus DE UMA PROPRIEDADE RURAL DO MUNICÍPIO DE VAZANTE, MG., BRASIL: EFFICIENCY OF COMMERCIAL ACARICIDES ON Rhipicephalus (Boophilus) Microplus FROM A RURAL PROPERTY IN THE CITY OF VAZANTE, MG

Os carrapatos são os ectoparasitos que causam maiores prejuízos para a produção de bovinos, e em particular o Rhipicephalus (Boophilus) microplus é responsável por graves prejuízos para os produtores de carne e leite, e seu controle vem sendo dificultado pela resistência desses ácaros de pequeno porte aos carrapaticidas comerciais. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a eficiência in vitro de 08 (oito) bases químicas presentes nos principais acaricidas do mercado, sobre o Rhipicephalus (Boophilus) microplus. Para tanto, amostras de carrapatos foram coletadas de uma propriedade rural do município de Vazante, MG, para a realização do teste de imersão de teleóginas (biocarrapaticidograma). As associações das bases químicas  Cipermetrina 20% + Clorpirifós 50%; Cirpemetrina 15% + Clorpirifós 30% + Fention 15%; Cipermetrina 15% + Clorpirifós 25% + Butóxido de Piperonila 15%+ Citronela 1% e Clorpirifós 50% + Cipermetrina 6%, apresentaram eficiência de 100% no teste in vitro. Entretanto, Diclorvós 50% + Clorpirifós 20%; Supona 50%; Amitraz 12,5% e a Deltametrina 25% apresentaram eficiência menor que 95%. Os resultados obtidos sugerem uma relação direta entre produtos presentes no mercado versus resistência do Rhipicephalus (Boophilus) microplus, enfatizando a necessidade do monitoramento dos mecanismos de resistência associado à implementação de um programa de controle

Resistance profile of Rhipicephalus (Boophilus) microplus to diazinon and cypermethrin and first report of sodium channel mutation - domain III S6 - T2134A, in field samples from the state of São Paulo, Brazil / Perfil de resistência do Rhipicephalus (Boophilus) microplus ao diazinon e à cipermetrina e primeiro relato de mutação no canal de sódio - domain III S6 - T2134A em amostras de campo, no estado de São Paulo - Brasil

Rhipicephalus (Boophilus) microplus is one of the parasites that has an impact on livestock farming in Brazil. Bioassays using the larval packet test (LPT) impregnated with cypermethrin and diazinon at different concentrations were performed to characterize phenotypic resistance (resistance level, RL), molecular resistance (mutation in domain III - S6 T2134A) and enzymatic metabolism of diazinon and cypermethrin in some populations of R. microplus that were collected in different regions of the state of São Paulo. Among the 40 farms analyzed, 18 of them presented resistance factors for cypermethrin, with RL I (53%) and RL II (47%). Mutation of domain III T2134A was found for the first time in Brazil, on seven farms. Heterozygous larvae were found on six of them and resistant homozygous larvae on four. No differences (p>0.05) in enzymatic activity of α-esterase and ß-esterase were found in tests with live and dead larvae at a cypermethrin concentration of 409.6µg/cm2. Ninety percent of the farms showed resistance to the active agent diazinon: RL I in 6%, RL II in 30% and RL III in 64%. There were significant differences (p<0.05) in enzymatic activity at the highest concentration (3.2µg/cm2).

Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini) é um dos parasitas que mais impactam a pecuária de países tropicais e subtropicais, incluindo o Brasil, com perdas em torno de US$ 3,24 bilhões por ano. Ocorrências de populações resistentes a diferentes classes de acaricidas e suas associações têm sido amplamente diagnosticadas em todo o Brasil. Para isso, bioensaios utilizando o teste de pacote larval (LPT) impregnado com cipermetrina e diazinon em diferentes concentrações foram realizados para caracterizar a resistência fenotípica (nível de resistência, RL), a resistência molecular (mutação no domínio III - S6 T2134A) e o metabolismo enzimático do diazinon e da cipermetrina em algumas populações de R. (Boophilus) microplus coletadas em diferentes regiões do estado de São Paulo. Dentre as 40 propriedades analisadas, 18 delas apresentaram fatores de resistência à cipermetrina, sendo RL I (53%) e RL II (47%). A mutação do domínio III T2134A foi encontrada pela primeira vez no Brasil, em sete fazendas. Larvas heterozigotas foram constatadas em seis delas, e larvas homozigotas resistentes em quatro. Nenhuma diferença (P>0,05) na atividade enzimática de α-esterase e ß-esterase foi observada em testes com larvas vivas e mortas em uma concentração de cipermetrina de 409,6µg/cm2. Noventa por cento das propriedades apresentaram resistência ao agente ativo diazinon: RL I em 6%, RL II em 30% e RL III em 64%. Houve diferenças significativas (P<0,05) na atividade enzimática na concentração mais elevada (3,2µg/cm2) entre os grupos de larvas vivas e mortas.

Eficiência de acaricidas comerciais sobre o Rhipicephalus (Boophilus) microplus de uma propriedade rural do município de Vazante, MG, Brasil / Efficiency of commercial acaricides on Rhipicephalus (Boophilus) microplus from a rural property in the city of Vazante, MG

Os carrapatos são os ectoparasitos que causam maiores prejuízos para a produção de bovinos, e em particular o Rhipicephalus (Boophilus) microplus é responsável por graves prejuízos para os produtores de carne e leite, e seu controle vem sendo dificultado pela resistência desses ácaros de pequeno porte aos carrapaticidas comerciais. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a eficiência in vitro de 08 (oito) bases químicas presentes nos principais acaricidas do mercado, sobre o Rhipicephalus (Boophilus) microplus. Para tanto, amostras de carrapatos foram coletadas de uma propriedade rural do município de Vazante, MG, para a realização do teste de imersão de teleóginas (biocarrapaticidograma). As associações das bases químicas Cipermetrina 20% + Clorpirifós 50%; Cirpemetrina 15% + Clorpirifós 30% + Fention 15%; Cipermetrina 15% + Clorpirifós 25% + Butóxido de Piperonila 15%+ Citronela 1% e Clorpirifós 50% + Cipermetrina 6%, apresentaram eficiência de 100% no teste in vitro. Entretanto, Diclorvós 50% + Clorpirifós 20%; Supona 50%; Amitraz 12,5% e a Deltametrina 25% apresentaram eficiência menor que 95%. Os resultados obtidos sugerem uma relação direta entre produtos presentes no mercado versus resistência do Rhipicephalus (Boophilus) microplus, enfatizando a necessidade do monitoramento dos mecanismos de resistência associado à implementação de um programa de controle estratégico de carrapatos, levando ao manejo adequado de acaricidas e uma política de fiscalização atuante por parte dos órgãos competentes com relação aos produtos químicos disponíveis no mercado para o controle do Rhipicephalus (Boophilus) microplus.(AU)

Ticks are the ectoparasites that cause greater damage to the production of cattle, and in particular Rhipicephalus (Boophilus) microplus is responsible for serious damage to meat and milk producers, and its control has been hampered by the resistance of these mites. small scale to commercial ticks. The objective of the present work was to evaluate the in vitro efficiency of 08 (eight) chemical bases present in the main acaricides in the market, on Rhipicephalus (Boophilus) microplus. For that, samples of ticks were collected from a rural property in the municipality of Vazante, MG., Brazil, to perform the teleogener immersion test (biocarrapaticidogram). The associations of the chemical bases Cypermethrin 20% + Chlorpyrifos 50%; Cirpemetrina 15% + Chlorpyrifos 30% + Fention 15%; Cypermethrin 15% + Chlorpyrifos 25% + Piperonyl Butoxide 15% + Citronella 1% and Chlorpyrifos 50% + Cypermethrin 6%, showed 100% efficiency in the in vitro test. However, Dichlorvós 50% + Chlorpyrifos 20%; Suppose 50%; Amitraz 12.5% and Deltamethrin 25% showed efficiency less than 95%. The results obtained suggest a direct relationship between products present in the market versus resistance of Rhipicephalus (Boophilus) microplus, emphasizing the need to monitor resistance mechanisms associated with the implementation of a strategic tick control program, leading to the appropriate management of mites and a active inspection policy by the competent bodies regarding the chemicals available on the market for the control of Rhipicephalus (Boophilus) microplus.(AU)

Use of anti-tick drugs in dairy farms in the microregion of Alfenas, Minas Gerais, Brazil / Uso de carrapaticidas em fazendas leiteiras na microrregião de Alfenas, Minas Gerais, Brasil

Ectoparasitic infestation in dairy cattle, the most common being Rhipicephalus (Boophilus) microplus, causes significant loss in production. The control of ectoparasites often occurs incorrectly, resulting in resistance to the active ingredients and residues in milk. To understand of acaricide use in the microregion of Alfenas, Minas Gerais (Brazil), questionnaires were applied to the owners of 100 dairy farms in the region and were selected randomly. Dairy farms were allocated according to production scale: up to 150 liters/day, 151-400 liters/day and more than 400 liters/day. The interviewees were asked about production characteristics, acaricide management and active ingredients. The interview answers were subjected to descriptive analysis. Results showed that all properties, independent of production-scale, used acaricides. The most cited was: Cypermethrin Chlorpyrifos Citronellal (31%), Fluazuron (18.6%) and Fipronil (17%). Among the interviewed, 41,1% use drugs that have restrictions that are not allowed in legislation for use in lactating dairy cows (fluazuron, fipronil, ivermectin). 15% affirmed they werent aware of the withdrawal period of medication and 73% change in the active ingredient used. In order to revert this antiparasitic drugs resistance situation and contamination of milk with drug residues, it is necessary to focus on the awareness of milk producers and training of labor.(AU)

A infestação por ectoparasitas em bovinos leiteiros, sendo o mais comum o Rhipicephalus (Boophilus) microplus, causa prejuízos significativos na produção. No entanto, o controle dos ectoparasitas geralmente ocorre incorretamente, resultando em resistência aos princípios ativos e presença de resíduos no leite. Para entender os padrões de uso de acaricidas na microrregião de Alfenas, Minas Gerais, Brasil, foram aplicados questionários aos proprietários de 100 fazendas leiteiras que foram classificadas de acordo com uma escala de produção: até 150 litros/dia, de 151 a 400 litros/dia e mais de 400 litros/dia. Os entrevistados foram questionados sobre características da produção, manejo do acaricida de gado e conhecimento sobre os princípios ativos. Todas as propriedades, independentemente da escala de produção, usavam acaricidas. Foram citados com maior frequência: Cipermetrina + Clorpirifós + Citronelal (31%), Fluazuron (18.6%) e Fipronil (17%). Entre os produtores entrevistados, 41,1 % fazem uso de drogas com restrição que não são atualmente permitidas na legislação para uso em vacas em lactação (fluazuron, fipronil, ivermectina). 15% dos produtores de leite afirmaram não estar cientes do período de carência dos medicamentos; outros relatam trocas constantes do princípio ativo utilizado. Para reverter a situação do uso indiscriminado de antiparasitários, é necessário focar na conscientização dos produtores de leite e na formação do trabalho.(AU)

Use of anti-tick drugs in dairy farms in the microregion of Alfenas, Minas Gerais, Brazil / Uso de carrapaticidas em fazendas leiteiras na microrregião de Alfenas, Minas Gerais, Brasil

Abstract Ectoparasitic infestation in dairy cattle, the most common being Rhipicephalus (Boophilus) microplus, causes significant loss in production. The control of ectoparasites often occurs incorrectly, resulting in resistance to the active ingredients and residues in milk. To understand of acaricide use in the microregion of Alfenas, Minas Gerais (Brazil), questionnaires were applied to the owners of 100 dairy farms in the region and were selected randomly. Dairy farms were allocated according to production scale: up to 150 liters/day, 151-400 liters/day and more than 400 liters/day. The interviewees were asked about production characteristics, acaricide management and active ingredients. The interview answers were subjected to descriptive analysis. Results showed that all properties, independent of production-scale, used acaricides. The most cited was: Cypermethrin Chlorpyrifos Citronellal (31%), Fluazuron (18.6%) and Fipronil (17%). Among the interviewed, 41,1% use drugs that have restrictions that are not allowed in legislation for use in lactating dairy cows (fluazuron, fipronil, ivermectin). 15% affirmed they weren't aware of the "withdrawal period" of medication and 73% change in the active ingredient used. In order to revert this antiparasitic drug's resistance situation and contamination of milk with drug residues, it is necessary to focus on the awareness of milk producers and training of labor.

Resumo A infestação por ectoparasitas em bovinos leiteiros, sendo o mais comum o Rhipicephalus (Boophilus) microplus, causa prejuízos significativos na produção. No entanto, o controle dos ectoparasitas geralmente ocorre incorretamente, resultando em resistência aos princípios ativos e presença de resíduos no leite. Para entender os padrões de uso de acaricidas na microrregião de Alfenas, Minas Gerais, Brasil, foram aplicados questionários aos proprietários de 100 fazendas leiteiras que foram classificadas de acordo com uma escala de produção: até 150 litros/dia, de 151 a 400 litros/dia e mais de 400 litros/dia. Os entrevistados foram questionados sobre características da produção, manejo do acaricida de gado e conhecimento sobre os princípios ativos. Todas as propriedades, independentemente da escala de produção, usavam acaricidas. Foram citados com maior frequência: Cipermetrina + Clorpirifós + Citronelal (31%), Fluazuron (18.6%) e Fipronil (17%). Entre os produtores entrevistados, 41,1 % fazem uso de drogas com restrição que não são atualmente permitidas na legislação para uso em vacas em lactação (fluazuron, fipronil, ivermectina). 15% dos produtores de leite afirmaram não estar cientes do "período de carência" dos medicamentos; outros relatam trocas constantes do princípio ativo utilizado. Para reverter a situação do uso indiscriminado de antiparasitários, é necessário focar na conscientização dos produtores de leite e na formação do trabalho.

Influence of agricultural extension activities on tick control among cattle on family dairy farms in the southeast Brazil

ABSTRACT The aim of the present study was to evaluate the resistance of tick populations on 16 family farms that were members of the agricultural producers cooperative of the São Pedro region of the state of São Paulo (COOPAMSP). Bioassays were conducted on nine commercial products in 2018 and 2019. Their active agents were as follows: deltamethrin, amitraz, cypermethrin + chlorpyrifos + citronella, cypermethrin + chlorpyrifos + fenthion, cypermethrin + chlorpyrifos + piperonyl butoxide, dichlorvos + chlorpyrifos, cypermethrin, chlorfenvinphos + dichlorvos, and ivermectin. On some farms, a larval packet test (LPT) was also performed. Overall, four acaricides presented mean efficacy greater than 89%, among which two were associations of pyrethroids + organophosphates and two were associations of organophosphates + organophosphates. Deltamethrin, cypermethrin and ivermectin presented mean efficacy lower than 50%. In the bioassays using the LPT, all five farms showed resistance to diazinon, while only one farm presented resistance to cypermethrin. The results were handed over to each farmer with appropriate guidance for treatments. This study demonstrated that the important points to be implemented related directly to use control strategies, based on direct assistance for farmers and diagnosis of tick population sensitivities.

Influence of agricultural extension activities on tick control among cattle on family dairy farms in the southeast Brazil

The aim of the present study was to evaluate the resistance of tick populations on 16 family farms that were members of the agricultural producers' cooperative of the São Pedro region of the state of São Paulo (COOPAMSP). Bioassays were conducted on nine commercial products in 2018 and 2019. Their active agents were as follows: deltamethrin, amitraz, cypermethrin + chlorpyrifos + citronella, cypermethrin + chlorpyrifos + fenthion, cypermethrin + chlorpyrifos + piperonyl butoxide, dichlorvos + chlorpyrifos, cypermethrin, chlorfenvinphos + dichlorvos, and ivermectin. On some farms, a larval packet test (LPT) was also performed. Overall, four acaricides presented mean efficacy greater than 89%, among which two were associations of pyrethroids + organophosphates and two were associations of organophosphates + organophosphates. Deltamethrin, cypermethrin and ivermectin presented mean efficacy lower than 50%. In the bioassays using the LPT, all five farms showed resistance to diazinon, while only one farm presented resistance to cypermethrin. The results were handed over to each farmer with appropriate guidance for treatments. This study demonstrated that the important points to be implemented related directly to use control strategies, based on direct assistance for farmers and diagnosis of tick population sensitivities.

Avaliação comparativa in vitro da sensibilidade de Rhipicephalus (boophilus) microplus a acaricidas comercializados no município de Rolim de Moura, Rondônia, Brasil / Comparative in vitro assessment of the sensitivity of Rhipicephalus (boophilus) microplus to acaricides commercialized in Rolim de Moura, Rondônia, Brazil

Objetivou-se avaliar in vitro a sensibilidade de Rhipicephalus (Boophilus) microplus aos acaricidas comercializados no município de Rolim de Moura, Rondônia, Brasil. Foram coletadas 400 partenóginas de R. (B.) microplus de bovinos naturalmente infestados, pertencentes a duas propriedades rurais. As partenóginas foram separadas em sete grupos homogêneos de 10 indivíduos cada, para análise dos perfis de sensibilidade ao diclorvós 45% + cipermetrina 5%, cipermetrina 15%, cipermetrina 20%, amitraz 12,5%, deltametrina 2,5% e fipronil 1% e o grupo controle. Foram adotados o Teste de Imersão de Adultos (TIA) e o Teste de Imersão de Larvas (TIL). Para cada grupo de 10 partenóginas foi determinado, o índice de produção de ovos, a eficiência reprodutiva e a eficiência do produto. Na propriedade 1 o produto com ação mais rápida sobre as partenóginas foi o fipronil 1%, que matou 70% (7/10) delas em menos de três dias, tendo também inibido a postura dos ovos nas sobreviventes. Enquanto na propriedade 2, a mortalidade das partenóginas só iniciaram a partir do terceiro dia com o uso do amitraz 12,5%, com 50% (5/10) de morte no vigésimo dia, porém nas partenóginas sobreviventes não houve inibição de postura. Na propriedade 1 a cipermetrina 20% e o amitraz 12,5%, inibiram 100% da eclosão dos ovos e a associação de diclorvós 45% + cipermetrina 5% obteve 98% de eficiência de produto. No entanto, na propriedade 2 não houve inibição de eclosão em nenhum grupo teste e a eficiência do produto, de 44,49% com amitraz 12,5% foi o maior, não se mostrando, mesmo assim, eficiente, dentro das normas vigentes. Quanto ao TIL, na propriedade 1, diclorvós 45% + cipermetrina 5% matou 100% das larvas e na propriedade 2 esse resultado foi observado com o fipronil 1%. Esses primeiros resultados reforçam a necessidade de controle estratégico do carrapato e o uso constante de bioensaios - testes laboratoriais de eficácia de acaricida, antes da prescrição, sobretudo no ambiente amazônico.

The objective of this study was to evaluate in vitro the sensitivity of Rhipicephalus (Boophilus) microplus to acaricides sold in the municipality of Rolim de Moura, Rondônia, Brazil. The 400 R. (B.) microplus female ticks were collected from naturally infested cattle, belonging to two rural properties. The ticks were separated into seven homogeneous groups of 10 individuals each, to analyze the sensitivity profiles to dichlorvós 45% + cypermethrin 5%, cypermethrin 15%, cypermethrin 20%, amitraz 12.5%, deltamethrin 2.5% and fipronil 1 % and the control group. The Adult Immersion Test (AIT) and the Larvae Immersion Test (LIT) were adopted. For each group of 10 ticks, the egg production index, reproductive efficiency and product efficiency were determined. At property 1, the product with the fastest action on ticks was fipronil 1%, which killed 70% (7/10) of them in less than three days, and also inhibited the laying of eggs on survivors. While on property 2, the mortality of the ticks only started from the third day with the use of amitraz 12.5%, with 50% (5/10) of death on the twentieth day, however, in the surviving ticks, there was no posture inhibition. In property 1, cypermethrin 20% and amitraz 12.5% inhibited 100% of the eggs hatching and the association of dichlorvós 45% + cypermethrin 5% obtained 98% product efficiency. However, in property 2 there was no hatching inhibition in any test group and the product's efficiency, of 44.49% with amitraz 12.5%, was the highest, not even being efficient, within the current rules. As for LIT, in property 1, dichlorvós 45% + cypermethrin 5% killed 100% of the larvae and in property 2 this result was observed with fipronil 1%. These first results reinforce the need for strategic control of the tick and the constant use of bioassays - laboratory tests for the effectiveness of acaricide, before prescription, especially in the Amazonian environment.

Avaliação comparativa in vitro da sensibilidade de Rhipicephalus (boophilus) microplus a acaricidas comercializados no município de Rolim de Moura, Rondônia, Brasil / Comparative in vitro assessment of the sensitivity of Rhipicephalus (boophilus) microplus to acaricides commercialized in Rolim de Moura, Rondônia, Brazil

Objetivou-se avaliar in vitro a sensibilidade de Rhipicephalus (Boophilus) microplus aos acaricidas comercializados no município de Rolim de Moura, Rondônia, Brasil. Foram coletadas 400 partenóginas de R. (B.) microplus de bovinos naturalmente infestados, pertencentes a duas propriedades rurais. As partenóginas foram separadas em sete grupos homogêneos de 10 indivíduos cada, para análise dos perfis de sensibilidade ao diclorvós 45% + cipermetrina 5%, cipermetrina 15%, cipermetrina 20%, amitraz 12,5%, deltametrina 2,5% e fipronil 1% e o grupo controle. Foram adotados o Teste de Imersão de Adultos (TIA) e o Teste de Imersão de Larvas (TIL). Para cada grupo de 10 partenóginas foi determinado, o índice de produção de ovos, a eficiência reprodutiva e a eficiência do produto. Na propriedade 1 o produto com ação mais rápida sobre as partenóginas foi o fipronil 1%, que matou 70% (7/10) delas em menos de três dias, tendo também inibido a postura dos ovos nas sobreviventes. Enquanto na propriedade 2, a mortalidade das partenóginas só iniciaram a partir do terceiro dia com o uso do amitraz 12,5%, com 50% (5/10) de morte no vigésimo dia, porém nas partenóginas sobreviventes não houve inibição de postura. Na propriedade 1 a cipermetrina 20% e o amitraz 12,5%, inibiram 100% da eclosão dos ovos e a associação de diclorvós 45% + cipermetrina 5% obteve 98% de eficiência de produto. No entanto, na propriedade 2 não houve inibição de eclosão em nenhum grupo teste e a eficiência do produto, de 44,49% com amitraz 12,5% foi o maior, não se mostrando, mesmo assim, eficiente, dentro das normas vigentes. Quanto ao TIL, na propriedade 1, diclorvós 45% + cipermetrina 5% matou 100% das larvas e na propriedade 2 esse resultado foi observado com o fipronil 1%. Esses primeiros resultados reforçam a necessidade de controle estratégico do carrapato e o uso constante de bioensaios - testes laboratoriais de eficácia de acaricida, antes da prescrição, sobretudo no ambiente amazônico.(AU)

The objective of this study was to evaluate in vitro the sensitivity of Rhipicephalus (Boophilus) microplus to acaricides sold in the municipality of Rolim de Moura, Rondônia, Brazil. The 400 R. (B.) microplus female ticks were collected from naturally infested cattle, belonging to two rural properties. The ticks were separated into seven homogeneous groups of 10 individuals each, to analyze the sensitivity profiles to dichlorvós 45% + cypermethrin 5%, cypermethrin 15%, cypermethrin 20%, amitraz 12.5%, deltamethrin 2.5% and fipronil 1 % and the control group. The Adult Immersion Test (AIT) and the Larvae Immersion Test (LIT) were adopted. For each group of 10 ticks, the egg production index, reproductive efficiency and product efficiency were determined. At property 1, the product with the fastest action on ticks was fipronil 1%, which killed 70% (7/10) of them in less than three days, and also inhibited the laying of eggs on survivors. While on property 2, the mortality of the ticks only started from the third day with the use of amitraz 12.5%, with 50% (5/10) of death on the twentieth day, however, in the surviving ticks, there was no posture inhibition. In property 1, cypermethrin 20% and amitraz 12.5% inhibited 100% of the eggs hatching and the association of dichlorvós 45% + cypermethrin 5% obtained 98% product efficiency. However, in property 2 there was no hatching inhibition in any test group and the product's efficiency, of 44.49% with amitraz 12.5%, was the highest, not even being efficient, within the current rules. As for LIT, in property 1, dichlorvós 45% + cypermethrin 5% killed 100% of the larvae and in property 2 this result was observed with fipronil 1%. These first results reinforce the need for strategic control of the tick and the constant use of bioassays - laboratory tests for the effectiveness of acaricide, before prescription, especially in the Amazonian environment.(AU)

Resistance of Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini, 1888) to acaricides used in dairy cattle of Teixeirópolis, Rondônia, Brazil

Rhipicephalus microplus is one of the main ectoparasites of dairy cattle in Brazil, whose control is mainly based on the use of chemicals. However, the low variety of chemicals available, coupled with the indiscriminate use of these substances, has led to increased resistance for this tick. The objective of this study was to evaluate the resistance profile of the tick Rhipicephalus microplus to different acaricidal products used on dairy cows in Teixeirópolis-RO, using the Adult Immersion Test (TIA) or biocarrapaticidogram. Data was collected from nine farms by performing nine in vitro evaluation tests on engorged R. microplus females, using six different tick repelling treatments available on the market. Replicates of each treatment with 20 teleogins were performed for each treatment and a control group in distilled water was used for positive and negative controls. The efficiency amplitudes of each group and the average effectiveness of the acaricidal compounds were evaluated and compared by the Kruskal-Wallis test with a significance level of 95%. Statistical analyses were performed in the Action Stat statistical program. The tick repellents tested presented the following effectiveness averages: 100% (Chlorpyrifos at 50% + Cypermethrin at 6%); 99.99% (15% Cypermethrin + Chlorpyrifos at 25% + Citronellal at 1%); 77.63% (Cypermethrin at 20% + Chlorpyrifos at 50%); 100%

Rhipicephalus (Boophilus) microplus(CANESTRINI, 1888) é um dos principais ectoparasitos na bovinocultura leiteira do Brasil. O controle baseia-se principalmente no usodeprodutos químicos. No entanto, a baixa diversidade de produtos químicos disponíveis, aliada ao uso indiscriminado dessas substâncias, têm levado ao aumento da resistência deste carrapato. Neste estudo, objetivou-se avaliar por meio de coleta de dados o perfil de resistência do carrapato Rhipicephalus microplusa diferentes produtos acaricidas utilizados em vacas leiteiras do município de Teixeirópolis–RO, por meio do Teste de Imersão de Adultos (TIA) ou biocarrapaticidograma. Foram coletados dados de nove propriedades realizando nove testes de avaliação in vitro de fêmeas ingurgitadas de R. microplus, utilizando seis diferentes tratamentos de carrapaticidas disponíveis no mercado, realizando uma réplica para cada tratamento onde foram consideradas 20 teleóginas para cada tratamento, foi utilizado um grupo controle em água destilada para controles de positivos e negativos. Foram avaliadas as amplitudes da eficiência de cada grupo e as médias da eficácia dos compostos acaricidas, as quais foram comparadas peloteste Kruskal-Wallis com nível de significância de 95%. As análises estatísticas foram realizadas com o auxílio do programa estatístico Action Stat. Os carrapaticidas testados apresentaram as seguintes médias de eficácia: 100% (Clorpirifós a 50% + Cipermetrina a 6%); 99,99% (Cipermetrina a 15% + Clorpirifós a 25% + Citronelal a 1%); 77,63% (Cipermetrina a 20% + Clorpirifós a 50%); 100% (Cipermetrina a 15% + Clorpirifós a 25% + Butóxido de piperonila a 1%) -; 21,68% (Amitraz a 12,5%) -; 42,17% (Deltametrinaa 5%). Os produtos com associações de princípios ativos foram os mais eficazes, sendo assim, considerados como melhor alternativa de controle carrapaticida.

Resistance of Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini, 1888) to acaricides used in dairy cattle of Teixeirópolis, Rondônia, Brazil

Rhipicephalus microplus is one of the main ectoparasites of dairy cattle in Brazil, whose control is mainly based on the use of chemicals. However, the low variety of chemicals available, coupled with the indiscriminate use of these substances, has led to increased resistance for this tick. The objective of this study was to evaluate the resistance profile of the tick Rhipicephalus microplus to different acaricidal products used on dairy cows in Teixeirópolis-RO, using the Adult Immersion Test (TIA) or biocarrapaticidogram. Data was collected from nine farms by performing nine in vitro evaluation tests on engorged R. microplus females, using six different tick repelling treatments available on the market. Replicates of each treatment with 20 teleogins were performed for each treatment and a control group in distilled water was used for positive and negative controls. The efficiency amplitudes of each group and the average effectiveness of the acaricidal compounds were evaluated and compared by the Kruskal-Wallis test with a significance level of 95%. Statistical analyses were performed in the Action Stat statistical program. The tick repellents tested presented the following effectiveness averages: 100% (Chlorpyrifos at 50% + Cypermethrin at 6%); 99.99% (15% Cypermethrin + Chlorpyrifos at 25% + Citronellal at 1%); 77.63% (Cypermethrin at 20% + Chlorpyrifos at 50%); 100%(AU)

Rhipicephalus (Boophilus) microplus(CANESTRINI, 1888) é um dos principais ectoparasitos na bovinocultura leiteira do Brasil. O controle baseia-se principalmente no usodeprodutos químicos. No entanto, a baixa diversidade de produtos químicos disponíveis, aliada ao uso indiscriminado dessas substâncias, têm levado ao aumento da resistência deste carrapato. Neste estudo, objetivou-se avaliar por meio de coleta de dados o perfil de resistência do carrapato Rhipicephalus microplusa diferentes produtos acaricidas utilizados em vacas leiteiras do município de Teixeirópolis–RO, por meio do Teste de Imersão de Adultos (TIA) ou biocarrapaticidograma. Foram coletados dados de nove propriedades realizando nove testes de avaliação in vitro de fêmeas ingurgitadas de R. microplus, utilizando seis diferentes tratamentos de carrapaticidas disponíveis no mercado, realizando uma réplica para cada tratamento onde foram consideradas 20 teleóginas para cada tratamento, foi utilizado um grupo controle em água destilada para controles de positivos e negativos. Foram avaliadas as amplitudes da eficiência de cada grupo e as médias da eficácia dos compostos acaricidas, as quais foram comparadas peloteste Kruskal-Wallis com nível de significância de 95%. As análises estatísticas foram realizadas com o auxílio do programa estatístico Action Stat. Os carrapaticidas testados apresentaram as seguintes médias de eficácia: 100% (Clorpirifós a 50% + Cipermetrina a 6%); 99,99% (Cipermetrina a 15% + Clorpirifós a 25% + Citronelal a 1%); 77,63% (Cipermetrina a 20% + Clorpirifós a 50%); 100% (Cipermetrina a 15% + Clorpirifós a 25% + Butóxido de piperonila a 1%) -; 21,68% (Amitraz a 12,5%) -; 42,17% (Deltametrinaa 5%). Os produtos com associações de princípios ativos foram os mais eficazes, sendo assim, considerados como melhor alternativa de controle carrapaticida.(AU)

Biocidal potential of Eugenia pyriformis essential oil in the control of Rhipicephalus (Boophilus) microplus in the free-living cycle

ABSTRACT: Brazil has one of the largest commercial cattle herds in the world, which naturally coexist with an enormous number of parasitic species. Southern cattle tick, Rhipicephalus (Boophilus) microplus, is among these species, interfering with animal productivity and causing losses to the beef and dairy cattle sector. The use of chemical acaricides in the control of this mite has resulted in the emergence of resistant populations. In this sense, alternative control measures using plants as sources of botanical acaricides have shown to be effective. Eugenia pyriformis Cambess is a Brazilian plant with antioxidant and antimicrobial activity; however, there are no reports on its acaricidal activity in the literature. The present study aimed to evaluate the acaricidal and larvicidal potential of E. pyriformis leaf essential oil (EO) on southern cattle tick at different stages of the reproductive cycle. E. pyriformis leaves were collected and dried, and had their EO extracted by hydrodistillation (3h) using a modified Clevenger apparatus. Chemical analysis was performed by gas chromatography coupled with mass spectrometry (GC/MS), and 32 compounds belonging to the sesquiterpene class were identified: hydrocarbons (17.98%) and oxygenated forms (81.96%), with spathulenol (43.65%) and caryophyllene oxide (12.17%) as the most common. The EO was evaluated by the Adult Immersion Test at the concentrations (500.00 to 3.12mg/mL) in which the following parameters were measured: mortality of females (%), hatchability of eggs (%), and product efficiency (%). Larvae were assessed by the Larval Packet Test at concentrations ranging from 25.00 to 0.00004mg/mL. Lethal concentrations (LC) required for killing 50 and 99.9% of adult females and larvae were determined using Probit analysis. LC50 and LC99.9 of EO were 0.06 and 24.60mg/mL and 1,208.80 and 2,538mg/mL for larvae and adult females, respectively. Action of the EO in the free-living cycle of R. (B.) microplus larvae was another parameter assessed. To this end, the larvae were deposited in pots containing Brachiaria decumbens and, after migration to the leaf apex, a solution containing LC99.9 (24.60mg/mL) of the EO was sprayed. After 24h, 72.25% of the larvae had died, indicating stability of the EO when subjected to uncontrolled temperature and humidity conditions. The mechanism of action through which the EO killed the larvae and adult females was investigated by the Bioautographic Method, which showed inhibition of 3.15mg/mL of the EO on the acetylcholinesterase (AChE) enzyme. The results found in the present experiment indicate that E. pyriformis essential oil is an alternative in the control of southern cattle tick in the larval (parasitic) and free-living cycle (non-parasitic) stages under field conditions.

RESUMO: O Brasil dispõe de um dos maiores rebanhos bovinos comerciais do mundo, sendo natural que junto a esse rebanho, coexista uma enorme quantidade de espécies parasitárias; dentre estes o carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus que interfere na produtividade animal, causando prejuízos à pecuária de corte e leite. A utilização de acaricidas químicos no controle deste ácaro tem causado o surgimento de populações resistentes e neste sentido, controles alternativos utilizando plantas como fontes de acaricidas botânicos têm se mostrado eficazes. Eugenia pyriformis Cambess é uma planta brasileira com atividades antioxidante e antimicrobiana, entretanto não há relatos da atividade acaricida. O objetivo do presente estudo consistiu na avaliação do potencial acaricida e larvicida do óleo essencial das folhas de E. pyriformis sobre o carrapato bovino nos diferentes estágios do ciclo reprodutivo. As folhas foram coletadas, secas e o OE extraído por hidrodestilação (3 horas) em aparelho Clevenger modificado. A análise química foi realizada por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG/EM) sendo identificados 32 compostos, pertencentes à classe sesquiterpenos: hidrocarbonetos (17.98%) e oxigenados (81.96%); tendo como majoritários o spathulenol (43,65%) e caryophylene oxide (12,17%). O OE foi avaliado pelo teste de imersão de adultos nas concentrações (500,00 a 3,12mg/mL) onde foram mensurados os parâmetros: mortalidade das fêmeas (%), eclodibilidade dos ovos (%) e eficiência do produto (%). As larvas foram avaliadas pelo teste de imersão larval (Larval Packet Test) nas concentrações que variaram de 25,00 a 0,00004mg/mL. Foram determinadas as concentrações letais (CLs) necessárias para matar 50 e 99,9% das fêmeas adultas e das larvas utilizando a análise de Probitos. As CL50 e CL99,9 do OE foram (0,06 e 24,60mg/mL) para as larvas e (1.208,80 e 2.538mg/mL) para as fêmeas adultas, respectivamente. Outro parâmetro avaliado em nossa pesquisa foi mensurar a ação do OE no ciclo de vida livre das larvas de R.(B.) microplus; onde as larvas foram depositadas em vasos com Brachiaria decumbens e após migração destas para o ápice das folhas, foi aspergido solução contendo a CL99,9 (24,60mg/mL) do OE. Após 24 horas, 72,25% das larvas morreram indicando que houve estabilidade do OE quando submetido a condições de temperatura e umidade não controladas. O mecanismo de ação pelo qual o OE matou as larvas e fêmeas adultas foi investigado pelo método bioautográfico, indicando uma inibição de 3,15mg/mL do óleo essencial sobre a enzima acetilcolinesterase (AChE). Os resultados encontrados no presente experimento indicaram que o óleo essencial de E. pyriformis é uma alternativa no controle do carrapato bovino no estágio larval (parasitário) e no ciclo de vida livre (estágio não parasitário) em condições de campo.

Biocidal potential of Eugenia pyriformis essential oil in the control of Rhipicephalus (Boophilus) microplus in the free-living cycle / Potencial biocida do óleo essencial de Eugenia pyriformis Cambess no controle de Rhipicephalus (Boophilus) microplus no ciclo de vida livre

Brazil has one of the largest commercial cattle herds in the world, which naturally coexist with an enormous number of parasitic species. Southern cattle tick, Rhipicephalus (Boophilus) microplus, is among these species, interfering with animal productivity and causing losses to the beef and dairy cattle sector. The use of chemical acaricides in the control of this mite has resulted in the emergence of resistant populations. In this sense, alternative control measures using plants as sources of botanical acaricides have shown to be effective. Eugenia pyriformis Cambess is a Brazilian plant with antioxidant and antimicrobial activity; however, there are no reports on its acaricidal activity in the literature. The present study aimed to evaluate the acaricidal and larvicidal potential of E. pyriformis leaf essential oil (EO) on southern cattle tick at different stages of the reproductive cycle. E. pyriformis leaves were collected and dried, and had their EO extracted by hydrodistillation (3h) using a modified Clevenger apparatus. Chemical analysis was performed by gas chromatography coupled with mass spectrometry (GC/MS), and 32 compounds belonging to the sesquiterpene class were identified: hydrocarbons (17.98%) and oxygenated forms (81.96%), with spathulenol (43.65%) and caryophyllene oxide (12.17%) as the most common. The EO was evaluated by the Adult Immersion Test at the concentrations (500.00 to 3.12mg/mL) in which the following parameters were measured: mortality of females (%), hatchability of eggs (%), and product efficiency (%). Larvae were assessed by the Larval Packet Test at concentrations ranging from 25.00 to 0.00004mg/mL. Lethal concentrations (LC) required for killing 50 and 99.9% of adult females and larvae were determined using Probit analysis. LC50 and LC99.9 of EO were 0.06 and 24.60mg/mL and 1,208.80 and 2,538mg/mL for larvae and adult females, respectively. Action of the EO in the free-living cycle of R. (B.) microplus larvae was another parameter assessed. To this end, the larvae were deposited in pots containing Brachiaria decumbens and, after migration to the leaf apex, a solution containing LC99.9 (24.60mg/mL) of the EO was sprayed. After 24h, 72.25% of the larvae had died, indicating stability of the EO when subjected to uncontrolled temperature and humidity conditions. The mechanism of action through which the EO killed the larvae and adult females was investigated by the Bioautographic Method, which showed inhibition of 3.15mg/mL of the EO on the acetylcholinesterase (AChE) enzyme. The results found in the present experiment indicate that E. pyriformis essential oil is an alternative in the control of southern cattle tick in the larval (parasitic) and free-living cycle (non-parasitic) stages under field conditions.(AU)

O Brasil dispõe de um dos maiores rebanhos bovinos comerciais do mundo, sendo natural que junto a esse rebanho, coexista uma enorme quantidade de espécies parasitárias; dentre estes o carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus que interfere na produtividade animal, causando prejuízos à pecuária de corte e leite. A utilização de acaricidas químicos no controle deste ácaro tem causado o surgimento de populações resistentes e neste sentido, controles alternativos utilizando plantas como fontes de acaricidas botânicos têm se mostrado eficazes. Eugenia pyriformis Cambess é uma planta brasileira com atividades antioxidante e antimicrobiana, entretanto não há relatos da atividade acaricida. O objetivo do presente estudo consistiu na avaliação do potencial acaricida e larvicida do óleo essencial das folhas de E. pyriformis sobre o carrapato bovino nos diferentes estágios do ciclo reprodutivo. As folhas foram coletadas, secas e o OE extraído por hidrodestilação (3 horas) em aparelho Clevenger modificado. A análise química foi realizada por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG/EM) sendo identificados 32 compostos, pertencentes à classe sesquiterpenos: hidrocarbonetos (17.98%) e oxigenados (81.96%); tendo como majoritários o spathulenol (43,65%) e caryophylene oxide (12,17%). O OE foi avaliado pelo teste de imersão de adultos nas concentrações (500,00 a 3,12mg/mL) onde foram mensurados os parâmetros: mortalidade das fêmeas (%), eclodibilidade dos ovos (%) e eficiência do produto (%). As larvas foram avaliadas pelo teste de imersão larval (Larval Packet Test) nas concentrações que variaram de 25,00 a 0,00004mg/mL. Foram determinadas as concentrações letais (CLs) necessárias para matar 50 e 99,9% das fêmeas adultas e das larvas utilizando a análise de Probitos. As CL50 e CL99,9 do OE foram (0,06 e 24,60mg/mL) para as larvas e (1.208,80 e 2.538mg/mL) para as fêmeas adultas, respectivamente. Outro parâmetro avaliado em nossa pesquisa foi mensurar a ação do OE no ciclo de vida livre das larvas de R.(B.) microplus; onde as larvas foram depositadas em vasos com Brachiaria decumbens e após migração destas para o ápice das folhas, foi aspergido solução contendo a CL99,9 (24,60mg/mL) do OE. Após 24 horas, 72,25% das larvas morreram indicando que houve estabilidade do OE quando submetido a condições de temperatura e umidade não controladas. O mecanismo de ação pelo qual o OE matou as larvas e fêmeas adultas foi investigado pelo método bioautográfico, indicando uma inibição de 3,15mg/mL do óleo essencial sobre a enzima acetilcolinesterase (AChE). Os resultados encontrados no presente experimento indicaram que o óleo essencial de E. pyriformis é uma alternativa no controle do carrapato bovino no estágio larval (parasitário) e no ciclo de vida livre (estágio não parasitário) em condições de campo.(AU)

Biocidal potential of Eugenia pyriformis essential oil in the control of Rhipicephalus (Boophilus) microplus in the free-living cycle / Potencial biocida do óleo essencial de Eugenia pyriformis Cambess no controle de Rhipicephalus (Boophilus) microplus no ciclo de vida livre

Brazil has one of the largest commercial cattle herds in the world, which naturally coexist with an enormous number of parasitic species. Southern cattle tick, Rhipicephalus (Boophilus) microplus, is among these species, interfering with animal productivity and causing losses to the beef and dairy cattle sector. The use of chemical acaricides in the control of this mite has resulted in the emergence of resistant populations. In this sense, alternative control measures using plants as sources of botanical acaricides have shown to be effective. Eugenia pyriformis Cambess is a Brazilian plant with antioxidant and antimicrobial activity; however, there are no reports on its acaricidal activity in the literature. The present study aimed to evaluate the acaricidal and larvicidal potential of E. pyriformis leaf essential oil (EO) on southern cattle tick at different stages of the reproductive cycle. E. pyriformis leaves were collected and dried, and had their EO extracted by hydrodistillation (3h) using a modified Clevenger apparatus. Chemical analysis was performed by gas chromatography coupled with mass spectrometry (GC/MS), and 32 compounds belonging to the sesquiterpene class were identified: hydrocarbons (17.98%) and oxygenated forms (81.96%), with spathulenol (43.65%) and caryophyllene oxide (12.17%) as the most common. The EO was evaluated by the Adult Immersion Test at the concentrations (500.00 to 3.12mg/mL) in which the following parameters were measured: mortality of females (%), hatchability of eggs (%), and product efficiency (%). Larvae were assessed by the Larval Packet Test at concentrations ranging from 25.00 to 0.00004mg/mL. Lethal concentrations (LC) required for killing 50 and 99.9% of adult females and larvae were determined using Probit analysis. LC50 and LC99.9 of EO were 0.06 and 24.60mg/mL and 1,208.80 and 2,538mg/mL for larvae and adult females, respectively. Action of the EO in the free-living cycle of R. (B.) microplus larvae was another parameter assessed. To this end, the larvae were deposited in pots containing Brachiaria decumbens and, after migration to the leaf apex, a solution containing LC99.9 (24.60mg/mL) of the EO was sprayed. After 24h, 72.25% of the larvae had died, indicating stability of the EO when subjected to uncontrolled temperature and humidity conditions. The mechanism of action through which the EO killed the larvae and adult females was investigated by the Bioautographic Method, which showed inhibition of 3.15mg/mL of the EO on the acetylcholinesterase (AChE) enzyme. The results found in the present experiment indicate that E. pyriformis essential oil is an alternative in the control of southern cattle tick in the larval (parasitic) and free-living cycle (non-parasitic) stages under field conditions.(AU)

O Brasil dispõe de um dos maiores rebanhos bovinos comerciais do mundo, sendo natural que junto a esse rebanho, coexista uma enorme quantidade de espécies parasitárias; dentre estes o carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus que interfere na produtividade animal, causando prejuízos à pecuária de corte e leite. A utilização de acaricidas químicos no controle deste ácaro tem causado o surgimento de populações resistentes e neste sentido, controles alternativos utilizando plantas como fontes de acaricidas botânicos têm se mostrado eficazes. Eugenia pyriformis Cambess é uma planta brasileira com atividades antioxidante e antimicrobiana, entretanto não há relatos da atividade acaricida. O objetivo do presente estudo consistiu na avaliação do potencial acaricida e larvicida do óleo essencial das folhas de E. pyriformis sobre o carrapato bovino nos diferentes estágios do ciclo reprodutivo. As folhas foram coletadas, secas e o OE extraído por hidrodestilação (3 horas) em aparelho Clevenger modificado. A análise química foi realizada por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG/EM) sendo identificados 32 compostos, pertencentes à classe sesquiterpenos: hidrocarbonetos (17.98%) e oxigenados (81.96%); tendo como majoritários o spathulenol (43,65%) e caryophylene oxide (12,17%). O OE foi avaliado pelo teste de imersão de adultos nas concentrações (500,00 a 3,12mg/mL) onde foram mensurados os parâmetros: mortalidade das fêmeas (%), eclodibilidade dos ovos (%) e eficiência do produto (%). As larvas foram avaliadas pelo teste de imersão larval (Larval Packet Test) nas concentrações que variaram de 25,00 a 0,00004mg/mL. Foram determinadas as concentrações letais (CLs) necessárias para matar 50 e 99,9% das fêmeas adultas e das larvas utilizando a análise de Probitos. As CL50 e CL99,9 do OE foram (0,06 e 24,60mg/mL) para as larvas e (1.208,80 e 2.538mg/mL) para as fêmeas adultas, respectivamente. Outro parâmetro avaliado em nossa pesquisa foi mensurar a ação do OE no ciclo de vida livre das larvas de R.(B.) microplus; onde as larvas foram depositadas em vasos com Brachiaria decumbens e após migração destas para o ápice das folhas, foi aspergido solução contendo a CL99,9 (24,60mg/mL) do OE. Após 24 horas, 72,25% das larvas morreram indicando que houve estabilidade do OE quando submetido a condições de temperatura e umidade não controladas. O mecanismo de ação pelo qual o OE matou as larvas e fêmeas adultas foi investigado pelo método bioautográfico, indicando uma inibição de 3,15mg/mL do óleo essencial sobre a enzima acetilcolinesterase (AChE). Os resultados encontrados no presente experimento indicaram que o óleo essencial de E. pyriformis é uma alternativa no controle do carrapato bovino no estágio larval (parasitário) e no ciclo de vida livre (estágio não parasitário) em condições de campo.(AU)

First molecular detection of Mycoplasma ovis (Hemotropic mycoplasmas) from Sheep in Brazil / Primeira detecção molecular de Mycoplasma ovis (Micoplasmas Hemotrópicos) em Ovinos no Brasil

Mycoplasma ovis is an emerging zoonotic pathogen with a worldwide distribution and can cause mild to severe hemolytic anemia, icterus, and poor weight gain in animals. Although M. ovis has been described in small ruminants worldwide, data on M. ovis in sheep in Brazil is unknown. The objective of the present study was to present the first report of hemotropic mycoplasma (HM) in sheep from Brazil. We evaluated factors associated with this infection, such age group, tick presence, and anemia. Blood samples were collected from 33 sheep from a farm in southern Brazil and screened for hemoplasmas using PCR. Out of 33 samples, 26 (78.8%) tested positive for M. ovis. The sequencing of positive samples showed 100% identity with multiple M. ovis 16S rDNA sequences. No association was observed between the presence of M. ovis and the FAMACHA© score (p = 0.620). Rhipicephalus (Boophilus) microplus (15/33, 45.4%) was the tick species found on the animals. No significant association between M. ovis infection and presence of ticks (p = 0.4134) and age group (p = 0.4221) was observed. This is the first report of M. ovis infection in sheep from Brazil and only the second report of this pathogen in sheep in Latin America.(AU)

Mycoplasma ovis é um patógeno zoonótico emergente com distribuição mundial e pode causar anemia hemolítica de leve a grave, icterícia e baixo ganho de peso em animais. Embora M. ovis tenha sido descrito em pequenos ruminantes em todo o mundo, os dados sobre M. ovis em ovinos no Brasil são desconhecidos. O objetivo deste estudo foi apresentar o primeiro relato de micoplasmas hemotrópicos em ovinos no Brasil. Avaliamos os fatores associados a essa infecção, como faixa etária, presença de carrapatos e anemia. Amostras de sangue foram coletadas de 33 ovelhas de uma fazenda no sul do Brasil e testadas para hemoplasmas usando a PCR. Das 33 amostras, 26 (78,8%) apresentaram resultado positivo. O sequenciamento das amostras positivas mostrou 100% de identidade com múltiplas sequências de M. ovis 16S rDNA. Não foi observada associação entre a presença de M. ovis e o escore FAMACHA© (p = 0,620). Rhipicephalus (Boophilus) microplus (15/33, 45,4%) foi a espécie de carrapato encontrada nos animais. Não houve associação significativa entre infecção por M. ovis e presença de carrapatos (p = 0,4134) e faixa etária (p = 0,4221). Este é o primeiro relato de infecção por M. ovis em ovinos no Brasil e o segundo relato deste patógeno em ovinos na América Latina.(AU)

Negative results for Borrelia burdgorferi in cows and ticks from a border region between Brazil and Paraguay: a case report / Resultados negativos para Borrelia burgdorferi em vacas e carrapatos de região fronteiriça entre Brasil e Paraguai: relato de Caso

Lyme borreliosis is an infectious disease caused by bacteria of the genus Borrelia. In ruminants, most infections are asymptomatic, but the animals can present myalgia, lameness, laminitis, arthritis, synovitis, neurological symptoms, and also decreased production and abortion. The objective was to investigate Borrelia burgdorferi DNA in cows and cattle ticks on a small dairy farm in a border region. Blood samples and ticks were collected from Holstein cows with a history of decreased milk production and abortions. Borrelia burgdorferi DNA was extracted from blood samples using a commercial extraction kit, and from ticks using an alkaline hydrolysis solution for subsequent nested-PCR. Serum and tick samples did not present Borrelia burgdorferi DNA, and 100% of the ticks were identified as Rhipicephalus (Boophilus) microplus. Although this study shows negative results it contributes to understanding the epidemiology of this etiological agent in Paraná and in Brazil, since there are few studies on bovine species. The negative results of this work demonstrate that the animals and ticks researched were not exposed to Borrelia burgdorferi, however, as it isa property located in a border region, the sanitary monitoring of the herd must be performed constantly since this is a region. vulnerable to the entry of potential threats to human, animal and environmental health from vectors and pathogenic microorganisms, given the large extension of the land border with the neighboring country and which also has different health status.

A borreliose de Lyme é uma doença infecciosa causada por bactérias do gênero Borrelia. Nos ruminantes, a infecção é assintomática, mas os animais podem apresentar mialgia, claudicação, laminite, artrite, sinovite, sintomas neurológicos e também diminuição da produção e do aborto. O objetivo foi investigar o DNA de Borrelia burgdorferi em vacas e carrapatos de uma pequena propriedade rural de gado leiteiro em uma região de fronteira. Amostras de sangue e carrapatos foram coletados de vacas da raça Holandesa com histórico de diminuição da produção de leite e abortos. O DNA de Borrelia burgdorferi foi extraído de amostras de sangue usando um kit de extração comercial e de carrapatos usando uma solução de hidrólise alcalina para subsequente nested-PCR. Amostras de soro e carrapato não apresentaram DNA de Borrelia burgdorferi, e 100% dos carrapatos foram identificados como Rhipicephalus (Boophilus) microplus. Embora este estudo apresente resultados negativos o mesmo contribui para o entendimento da epidemiologia desse agente etiológico no Paraná e no Brasil, uma vez que existem poucos estudos sobre espécies bovinas. Os resultados negativos deste trabalho demonstram que os animais e carrapatos pesquisados não foram expostos a Borrelia burgdorferi, no entanto, por se tratar de uma propriedade localizada em uma região de fronteira, o monitoramento sanitário do rebanho deve ser realizado constantemente, pois é uma região vulnerável à entrada de ameaças potenciais à saúde humana, animal e ambiental por vetores e microrganismos patogênicos, dada a grande extensão da fronteira terrestre com o país vizinho e que também apresenta diferentes condições de saúde.

Molecular identification of Ehrlichia sp. in a beef cattle from Brazilian Cerrado - case report / Identificação molecular de Ehrlichia sp em um bovino do Cerrado brasileiro - relato de caso

Ehrlichia infections in cattle are frequent in Africa but have also been reported in Brazil and North America. This paper reports natural infection by Ehrlichia sp. associated with Babesia bigemina and Anaplasma marginale in a calf in the municipality of Campo Grande, state of Mato Grosso do Sul, Brazil, presenting polioencephalomalacia. The molecular evidence, based on a fragment of the dsb gene, indicates a species of Ehrlichia genetically related to Ehrlichia canis and other species of the genus found in the tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus and a calf from Brazil (99 to 100% identity). It was not possible to associate the clinical signs with Ehrlichia infection due to co-infections and histological evidence of another disease. However, the circulation of the bacteria in bovines in Brazilian Cerrado was confirmed and more attention should be given to clinical suspicion of tick-borne pathogens in cattle to clarify the pathogenic potential of Ehrlichia sp.(AU)

Infecções por Ehrlichia em bovinos são frequentes na África, mas também foram relatadas no Brasil e na América do Norte. Este artigo relata uma infecção natural por Ehrlichia sp. associado a Babesia bigemina e Anaplasma marginale em um bezerro, no município de Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brasil, o qual apresentava polioencefalomalácia. A evidência molecular, baseada em um fragmento do gene dsb, indica uma espécie de Ehrlichia geneticamente relacionada a Ehrlichia canis e outras espécies do gênero encontradas no carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus e em um bezerro do Brasil (99 a 100% de identidade). Não foi possível associar os sinais clínicos à infecção por Ehrlichia devido a coinfecções e evidências histológicas de outra doença. No entanto, a circulação da bactéria em bovinos no Cerrado brasileiro foi confirmada, e mais atenção deve ser dada à suspeita clínica de patógenos transmitidos por carrapatos em bovinos para esclarecer o potencial patogênico de Ehrlichia sp.(AU)

Molecular identification of Ehrlichia sp. in a beef cattle from Brazilian Cerrado - case report / Identificação molecular de Ehrlichia sp em um bovino do Cerrado brasileiro - relato de caso

Ehrlichia infections in cattle are frequent in Africa but have also been reported in Brazil and North America. This paper reports natural infection by Ehrlichia sp. associated with Babesia bigemina and Anaplasma marginale in a calf in the municipality of Campo Grande, state of Mato Grosso do Sul, Brazil, presenting polioencephalomalacia. The molecular evidence, based on a fragment of the dsb gene, indicates a species of Ehrlichia genetically related to Ehrlichia canis and other species of the genus found in the tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus and a calf from Brazil (99 to 100% identity). It was not possible to associate the clinical signs with Ehrlichia infection due to co-infections and histological evidence of another disease. However, the circulation of the bacteria in bovines in Brazilian Cerrado was confirmed and more attention should be given to clinical suspicion of tick-borne pathogens in cattle to clarify the pathogenic potential of Ehrlichia sp.(AU)

Infecções por Ehrlichia em bovinos são frequentes na África, mas também foram relatadas no Brasil e na América do Norte. Este artigo relata uma infecção natural por Ehrlichia sp. associado a Babesia bigemina e Anaplasma marginale em um bezerro, no município de Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brasil, o qual apresentava polioencefalomalácia. A evidência molecular, baseada em um fragmento do gene dsb, indica uma espécie de Ehrlichia geneticamente relacionada a Ehrlichia canis e outras espécies do gênero encontradas no carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus e em um bezerro do Brasil (99 a 100% de identidade). Não foi possível associar os sinais clínicos à infecção por Ehrlichia devido a coinfecções e evidências histológicas de outra doença. No entanto, a circulação da bactéria em bovinos no Cerrado brasileiro foi confirmada, e mais atenção deve ser dada à suspeita clínica de patógenos transmitidos por carrapatos em bovinos para esclarecer o potencial patogênico de Ehrlichia sp.(AU)