Efficacy of antimicrobial therapy in association with vaccination on the bacteriological cure of subclinical mastitis caused by Staphylococcus aureus in lactating cows / Eficácia da terapia antimicrobiana associada à vacinação na cura bacteriológica de mastite subclínica causada por Staphylococcus aureus em vacas em lactação

The objective of this study was to evaluate the efficacy of the antibiotic therapy associated with vaccination on the microbiological cure rate of subclinical mastitis caused by Staphylococcus aureus in lactating dairy cows. A total of five herds, from which 72 cows (120 mammary quarters - MQ) were diagnosed with S. aureus subclinical mastitis, were included in this study. Cows were randomly allocated to one of three treatment groups: a) Control (no treatment); b) ATB (antibiotic therapy); and c) ATB+VAC (antibiotic therapy plus vaccination against S. aureus). Intramammary treatment consisted of twice-daily infusion of ampicillin 75mg + cloxacillin 200mg, for 5 days. Parenteral treatment was done by injection of a single dose (7.5mg/kg) of enrofloxacin, on the first day of the treatment protocol. Vaccinated cows received three doses of a commercial vaccine 14 days before treatment (d-14), on the first day of treatment protocol (d1), and 14 days after the treatment protocol (d+14). Non-treated cows had a lower cure rate (0.06) than cows treated with ATB (0.84) and ATB+VAC (0.85). No difference in cure rate was observed between cows treated with ATB and ATB+VAC. On the other hand, vaccinated cows had lower somatic cell count (SCC) after 28 days of the treatment protocols (4.76 log10) than non-treated cows (5.37 log10). In conclusion, treatment with intramammary ampicillin and cloxacillin, associated with intramuscular enrofloxacin presented a high cure rate for SCM caused by S. aureus during lactation. The use of vaccination against S. aureus in association with antibiotic therapy did not increase the cure rate of MQ during lactation, but it was effective in reducing the SCC when compared to non-treated MQ. Although to ensure that the decrease of the SCC in ATB+VAC group was associated with the vaccination, the study should have included an additional group of only vaccinated cows, without antimicrobial therapy, with was not done in the present study, and therefore is one of the limitations of the experimental protocol used.

O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia da antibioticoterapia associada à vacinação sobre a taxa de cura microbiológica de mastite subclínica causada por Staphylococcus aureus em vacas leiteiras em lactação. Foram selecionados 5 rebanhos, dos quais 72 vacas (120 quartos mamários, QM) foram diagnosticadas com mastite subclínica por S. aureus e foram alocadas aleatoriamente em um de três grupos de tratamento: a) Controle (sem tratamento); b) ATB (antibioticoterapia); e c) ATB+VAC (antibioticoterapia mais vacinação contra S. aureus). O tratamento intramamário consistiu em infusão de ampicilina 75 mg + cloxacilina 200 mg duas vezes ao dia, durante 5 dias. O tratamento parenteral foi feito por injeção de uma dose única (7,5 mg/kg) de enrofloxacina, no primeiro dia do protocolo de tratamento. As vacas vacinadas receberam três doses de uma vacina comercial, 14 dias antes do tratamento (d-14), no primeiro dia do protocolo de tratamento (d1) e 14 dias após o protocolo de tratamento (d+14). A taxa de cura das vacas não tratadas foi menor (0,06) do que das vacas tratadas com ATB (0,84) e ATB+VAC (0,85). Não foi observada diferença de taxa de cura entre vacas tratadas com ATB e ATB+VAC. Por outro lado, as vacas vacinadas apresentaram menor a contagem de células somáticas (CCS) após 28 dias de tratamento (4,76 log10) do que em vacas não tratadas (5,37 log10). Em conclusão, o tratamento com ampicilina e cloxacilina intramamária, associados à enrofloxacina intramuscular, apresentou alta taxa de cura para MSC causada por S. aureus durante a lactação. A utilização da vacinação contra S. aureus associada à antibioticoterapia não aumentou a taxa de cura dos QM durante a lactação, mas foi eficaz na redução do CCS quando comparada à QM não tratados. Entretanto, para ter certeza que a diminuição da CCS no grupo ATB+VAC estivesse associada à vacinação, o estudo deveria ter incluído um grupo adicional de apenas vacas vacinadas, sem terapia antimicrobiana, o que não foi feito no presente estudo e, portanto, é um das limitações do protocolo experimental utilizado.

Cloning and expression of Neospora caninum rhoptry 2 and its potential as an immunobiological for neosporosis control / Clonagem e expressão de rhoptry 2 Neospora caninum e seu potencial como um imunobiológico para o controle de neosporose

The protozoan Neospora caninum is known worldwide as one of the main causes of abortion in cattle. During infection, rhoptry proteins present in the apical complex of the parasite play important roles in adhesion and parasitophorous vacuole formation. The use of N. caninum ROP2 in experimental vaccines has shown promising protective results. In our study we performed cloning and expression in Escherichia coli of an antigenic portion of N. caninum ROP2. The recombinant protein (rROP2) was obtained in insoluble form, and the purified protein showed a size of approximately 18kDa. Even being a small truncate NcROP2 region, it was possible to conserve the antigenic epitopes which were recognized by bovine serum naturally infected with N. caninum. Vaccination with rROP2 on aluminum hydroxide adjuvant induced high levels of rROP2-specific IgG antibodies capable of recognizing native protein in tachyzoite lysates. In conclusion, our approaches were effective in obtaining the rROP2 protein, which induced specific mouse immune response and was also recognized by sera from N. caninum naturally infected cattle. These results suggest that it is a promising antigen for the development of neosporosis subunit vaccines as well as a suitable antigen for use in immunodiagnosis.(AU)

O protozoário Neospora caninum é conhecido mundialmente como uma das principais causas de aborto em bovinos. Durante a infecção, as proteínas rhoptry presentes no complexo apical do parasita desempenham papel importante na adesão e formação de vacúolos parasitóforos. O uso de ROP2 de N. caninum em vacinas experimentais tem mostrado resultados de proteção promissores. Em nosso estudo, realizamos a clonagem e expressão em Escherichia coli de uma porção antigênica de N. caninum ROP2. A proteína recombinante (rROP2) foi obtida na forma insolúvel, e a proteína purificada apresentou tamanho aproximado de 18kDa. Mesmo sendo uma pequena região truncada de NcROP2, foi possível conservar os epítopos antigênicos que foram reconhecidos pelo soro de bovinos naturalmente infectados com N. caninum. A vacinação com rROP2 adsorvida no adjuvante de hidróxido de alumínio induziu altos níveis de anticorpos IgG anti-rROP2, capazes de reconhecer a proteína nativa em lisados de taquizoítos. Em conclusão, nossas abordagens foram eficazes na obtenção da proteína rROP2, que induziu resposta imune específica em camundongos e também foi reconhecida por soros de bovinos naturalmente infectados com N. caninum. Estes resultados sugerem que rROP2 é um antígeno promissor para o desenvolvimento de vacinas de subunidades de neosporose, bem como um antígeno adequado para uso em imunodiagnóstico.(AU)

Cloning and expression of Neospora caninum rhoptry 2 and its potential as an immunobiological for neosporosis control / Clonagem e expressão de rhoptry 2 Neospora caninum e seu potencial como um imunobiológico para o controle de neosporose

The protozoan Neospora caninum is known worldwide as one of the main causes of abortion in cattle. During infection, rhoptry proteins present in the apical complex of the parasite play important roles in adhesion and parasitophorous vacuole formation. The use of N. caninum ROP2 in experimental vaccines has shown promising protective results. In our study we performed cloning and expression in Escherichia coli of an antigenic portion of N. caninum ROP2. The recombinant protein (rROP2) was obtained in insoluble form, and the purified protein showed a size of approximately 18kDa. Even being a small truncate NcROP2 region, it was possible to conserve the antigenic epitopes which were recognized by bovine serum naturally infected with N. caninum. Vaccination with rROP2 on aluminum hydroxide adjuvant induced high levels of rROP2-specific IgG antibodies capable of recognizing native protein in tachyzoite lysates. In conclusion, our approaches were effective in obtaining the rROP2 protein, which induced specific mouse immune response and was also recognized by sera from N. caninum naturally infected cattle. These results suggest that it is a promising antigen for the development of neosporosis subunit vaccines as well as a suitable antigen for use in immunodiagnosis.(AU)

O protozoário Neospora caninum é conhecido mundialmente como uma das principais causas de aborto em bovinos. Durante a infecção, as proteínas rhoptry presentes no complexo apical do parasita desempenham papel importante na adesão e formação de vacúolos parasitóforos. O uso de ROP2 de N. caninum em vacinas experimentais tem mostrado resultados de proteção promissores. Em nosso estudo, realizamos a clonagem e expressão em Escherichia coli de uma porção antigênica de N. caninum ROP2. A proteína recombinante (rROP2) foi obtida na forma insolúvel, e a proteína purificada apresentou tamanho aproximado de 18kDa. Mesmo sendo uma pequena região truncada de NcROP2, foi possível conservar os epítopos antigênicos que foram reconhecidos pelo soro de bovinos naturalmente infectados com N. caninum. A vacinação com rROP2 adsorvida no adjuvante de hidróxido de alumínio induziu altos níveis de anticorpos IgG anti-rROP2, capazes de reconhecer a proteína nativa em lisados de taquizoítos. Em conclusão, nossas abordagens foram eficazes na obtenção da proteína rROP2, que induziu resposta imune específica em camundongos e também foi reconhecida por soros de bovinos naturalmente infectados com N. caninum. Estes resultados sugerem que rROP2 é um antígeno promissor para o desenvolvimento de vacinas de subunidades de neosporose, bem como um antígeno adequado para uso em imunodiagnóstico.(AU)

Cloning and expression of Neospora caninum rhoptry 2 and its potential as an immunobiological for neosporosis control

ABSTRACT: The protozoan Neospora caninum is known worldwide as one of the main causes of abortion in cattle. During infection, rhoptry proteins present in the apical complex of the parasite play important roles in adhesion and parasitophorous vacuole formation. The use of N. caninum ROP2 in experimental vaccines has shown promising protective results. In our study we performed cloning and expression in Escherichia coli of an antigenic portion of N. caninum ROP2. The recombinant protein (rROP2) was obtained in insoluble form, and the purified protein showed a size of approximately 18kDa. Even being a small truncate NcROP2 region, it was possible to conserve the antigenic epitopes which were recognized by bovine serum naturally infected with N. caninum. Vaccination with rROP2 on aluminum hydroxide adjuvant induced high levels of rROP2-specific IgG antibodies capable of recognizing native protein in tachyzoite lysates. In conclusion, our approaches were effective in obtaining the rROP2 protein, which induced specific mouse immune response and was also recognized by sera from N. caninum naturally infected cattle. These results suggest that it is a promising antigen for the development of neosporosis subunit vaccines as well as a suitable antigen for use in immunodiagnosis.

RESUMO: O protozoário Neospora caninum é conhecido mundialmente como uma das principais causas de aborto em bovinos. Durante a infecção, as proteínas rhoptry presentes no complexo apical do parasita desempenham papel importante na adesão e formação de vacúolos parasitóforos. O uso de ROP2 de N. caninum em vacinas experimentais tem mostrado resultados de proteção promissores. Em nosso estudo, realizamos a clonagem e expressão em Escherichia coli de uma porção antigênica de N. caninum ROP2. A proteína recombinante (rROP2) foi obtida na forma insolúvel, e a proteína purificada apresentou tamanho aproximado de 18kDa. Mesmo sendo uma pequena região truncada de NcROP2, foi possível conservar os epítopos antigênicos que foram reconhecidos pelo soro de bovinos naturalmente infectados com N. caninum. A vacinação com rROP2 adsorvida no adjuvante de hidróxido de alumínio induziu altos níveis de anticorpos IgG anti-rROP2, capazes de reconhecer a proteína nativa em lisados de taquizoítos. Em conclusão, nossas abordagens foram eficazes na obtenção da proteína rROP2, que induziu resposta imune específica em camundongos e também foi reconhecida por soros de bovinos naturalmente infectados com N. caninum. Estes resultados sugerem que rROP2 é um antígeno promissor para o desenvolvimento de vacinas de subunidades de neosporose, bem como um antígeno adequado para uso em imunodiagnóstico.

About the necessity of including HoBi-like pestiviruses in bovine respiratory and reproductive viral vacines / Sobre a necessidade de incluir pestivírus HoBi-like em vacinas virais respiratórias e reprodutivas para bovinos

HoBi-like pestiviruses (HoBiPeV) constitute a novel group of bovine pestiviruses, genetically and antigenically related to bovine viral diarrhea virus 1 (BVDV-1) and BVDV-2. Recent data shows that HoBiPeV are endemic among Brazilian cattle, yet bovine reproductive/respiratory vaccines contain only BVDV-1 and BVDV-2 strains. The present study investigated the neutralizing antibody response against these pestiviruses induced by two commercial vaccines (VA = attenuated, VI = inactivated) and by three experimental, replicative, vaccine formulations (VAC1 = monovalent, BVDV-1; VAC2 = bivalent, BVDV-1 + BVDV-2; VAC3 = trivalent, BVDV-1 + BVDV-2 and HoBiPeV). Seronegative beef calves were immunized once (replicative vaccines) or twice (inactivated vaccine) and serum samples were tested by virus-neutralization (VN) 30 days after vaccination (dpv) (replicative vaccines) or 30 days after the second dose (VI). We considered a threshold VN titer of ≥60 indicative of protection against clinical disease. At 30 dpv, VA induced protective titers against BVDV-2 in 7/7 animals (GMT=289.8) and against BVDV-1 and HoBiPeV in 5/7 animals (GMTs=97.5 and 80, respectively). VI induced protective titers against BVDV-1 in 1/7 animal (GMT=16.4), 2/7 animals against BVDV-2 (GMT=53.8) and in none of the calves against HoBiPeV (GMT=12.2). When a pool of sera of each vaccine group was tested against individual Brazilian isolates, VA induced protective titers against 3/7 BVDV-1 isolates, to 9/10 (BVDV-2) and 1/8 (HoBiPeV); VI induced protective titers against 1/7 (BVDV-1), 1/10 (BVDV-2) and none (0/8) HoBiPeV isolates. The experimental vaccine VAC1 induced protective titers against BVDV-1 in 9/9 animals (GMT=320) but in no animal against BVDV-2 or HoBiPeV (GMT<10). VAC2 induced protective titers to BVDV-1 and BVDV-2 in 9/9 animals (GMTs=160 and 640, respectively), and against HoBiPeV in 7/9 animals (GMT=108.5). Finally, VAC3 induced protective titers in all animals against BVDV-1 (GMT=234.3), BVDV-2 (294.9) and HoBiPeV (201.1). Testing the pool of sera against pestivirus isolates, VAC1 induced titers ≥ 60 against 4/7 BVDV-1 but to none BVDV-2/HoBiPeV isolate; VAC2 induced protective titers against 4/7 BVDV-1; 10/10 BVDV-2 and 2/8 HoBiPeV; VAC3 induced protective titers against all BVDV-1, BVDV-2 and HoBiPeV isolates. These results indicate that vaccines composed by BVDV-1+BVDV-2, especially those containing inactivated virus, may not induce serological response against a variety of HoBiPeV isolates. Thus, the need of inclusion of HoBiPeV in vaccine formulations should be considered.(AU)

Os pestivírus HoBi-like (HoBiPeV) compõe um grupo novo de pestivírus de bovinos, genética e antigenicamente relacionados com os vírus da diarreia viral bovina 1 e 2 (BVDV-1, BVDV2). Dados recentes indicam que os HoBiPeV são endêmicos na população bovina do Brasil, mas as vacinas respiratórias e reprodutivas bovinas contêm apenas cepas de BVDV-1 e BVDV-2. O presente estudo investigou a atividade neutralizante contra estes pestivírus induzidas por duas vacinas comerciais (VA = atenuada, VI = inativada) e por três vacinas experimentais replicativas (VAC1 = monovalente, BVDV-1; VAC2 = bivalente, BVDV-1 + BVDV-2; VAC3 = trivalente, BVDV-1 + BVDV-2 e HoBiPeV). Bezerros soronegativos foram imunizados uma vez (vacinas replicativas) ou duas (vacina inativada) e amostras de soro foram testadas por vírus-neutralização (VN) 30 dias após a vacinação (dpv) (vacinas replicativas) ou 30 dias após a segunda dose (VI). Títulos neutralizantes ≥60 foram considerados indicativos de proteção contra doença clínica. Nesta data, a VA induziu títulos protetivos contra o BVDV-2 em 7/7 animais (GMT=289,8) e contra BVDV-1 e HoBiPeV em 5/7 animals (GMTs=97,5 e 80, respectivamente). VI induziu títulos protetores contra BVDV-1 em 1/7 animal (GMT=16,4), em 2/7 animais contra BVDV-2 (GMT=53,8) e em nenhum contra HoBiPeV (GMT=12,2). Quando um pool de soro de cada grupo vacinal foi testado frente a isolados Brasileiros, a VA induziu títulos protetores contra 3/7 isolados de BVDV-1, 9/10 (BVDV-2) e 1/8 (HoBiPeV); VI induziu títulos protetores em 1/7 contra BVDV-1, 1/10 (BVDV-2) e em nenhum (0/8) contra isolados de HoBiPeV. A VAC1 induziu títulos protetores contra BVDV-1 em 9/9 animais (GMT=320) mas em nenhum animal contra BVDV-2 ou HoBiPeV (GMT<10). VAC2 induziu títulos protetores contra BVDV-1e BVDV-2 em 9/9 animais (GMTs=160 e 640, respectivamente),e contra HoBiPeV em 7/9 animais (GMT=108,5). Finalmente, VAC3 induziu títulos protetores em todos os animais contra BVDV-1 (GMT=234,3), BVDV-2 (294,9) e HoBiPeV (201,1). No teste de pool de soro contra isolados de pestivírus, VAC1 induziu títulos ≥60 contra 4/7 BVDV-1 mas contra nenhum isolado de BVDV-2/HoBiPeV; VAC2 induziu títulos protetores contra 4/7 BVDV-1; 10/10 BVDV-2 e 2/8 HoBiPeV; VAC3 induziu títulos protetores contra todos BVDV-1, BVDV-2 e HoBiPeV. Esses resultados indicam que vacinas contendo apenas BVDV-1 BVDV-2, especialmente aquelas inativadas, podem não conferir resposta sorológica protetora contra vários isolados de HoBiPeV. Portanto, a necessidade de se incluir cepas de HoBiPeV nas vacinas deve ser considerada.(AU)

About the necessity of including HoBi-like pestiviruses in bovine respiratory and reproductive viral vacines / Sobre a necessidade de incluir pestivírus HoBi-like em vacinas virais respiratórias e reprodutivas para bovinos

HoBi-like pestiviruses (HoBiPeV) constitute a novel group of bovine pestiviruses, genetically and antigenically related to bovine viral diarrhea virus 1 (BVDV-1) and BVDV-2. Recent data shows that HoBiPeV are endemic among Brazilian cattle, yet bovine reproductive/respiratory vaccines contain only BVDV-1 and BVDV-2 strains. The present study investigated the neutralizing antibody response against these pestiviruses induced by two commercial vaccines (VA = attenuated, VI = inactivated) and by three experimental, replicative, vaccine formulations (VAC1 = monovalent, BVDV-1; VAC2 = bivalent, BVDV-1 + BVDV-2; VAC3 = trivalent, BVDV-1 + BVDV-2 and HoBiPeV). Seronegative beef calves were immunized once (replicative vaccines) or twice (inactivated vaccine) and serum samples were tested by virus-neutralization (VN) 30 days after vaccination (dpv) (replicative vaccines) or 30 days after the second dose (VI). We considered a threshold VN titer of ≥60 indicative of protection against clinical disease. At 30 dpv, VA induced protective titers against BVDV-2 in 7/7 animals (GMT=289.8) and against BVDV-1 and HoBiPeV in 5/7 animals (GMTs=97.5 and 80, respectively). VI induced protective titers against BVDV-1 in 1/7 animal (GMT=16.4), 2/7 animals against BVDV-2 (GMT=53.8) and in none of the calves against HoBiPeV (GMT=12.2). When a pool of sera of each vaccine group was tested against individual Brazilian isolates, VA induced protective titers against 3/7 BVDV-1 isolates, to 9/10 (BVDV-2) and 1/8 (HoBiPeV); VI induced protective titers against 1/7 (BVDV-1), 1/10 (BVDV-2) and none (0/8) HoBiPeV isolates. The experimental vaccine VAC1 induced protective titers against BVDV-1 in 9/9 animals (GMT=320) but in no animal against BVDV-2 or HoBiPeV (GMT<10). VAC2 induced protective titers to BVDV-1 and BVDV-2 in 9/9 animals (GMTs=160 and 640, respectively), and against HoBiPeV in 7/9 animals (GMT=108.5). Finally, VAC3 induced protective titers in all animals against BVDV-1 (GMT=234.3), BVDV-2 (294.9) and HoBiPeV (201.1). Testing the pool of sera against pestivirus isolates, VAC1 induced titers ≥ 60 against 4/7 BVDV-1 but to none BVDV-2/HoBiPeV isolate; VAC2 induced protective titers against 4/7 BVDV-1; 10/10 BVDV-2 and 2/8 HoBiPeV; VAC3 induced protective titers against all BVDV-1, BVDV-2 and HoBiPeV isolates. These results indicate that vaccines composed by BVDV-1+BVDV-2, especially those containing inactivated virus, may not induce serological response against a variety of HoBiPeV isolates. Thus, the need of inclusion of HoBiPeV in vaccine formulations should be considered.(AU)

Os pestivírus HoBi-like (HoBiPeV) compõe um grupo novo de pestivírus de bovinos, genética e antigenicamente relacionados com os vírus da diarreia viral bovina 1 e 2 (BVDV-1, BVDV2). Dados recentes indicam que os HoBiPeV são endêmicos na população bovina do Brasil, mas as vacinas respiratórias e reprodutivas bovinas contêm apenas cepas de BVDV-1 e BVDV-2. O presente estudo investigou a atividade neutralizante contra estes pestivírus induzidas por duas vacinas comerciais (VA = atenuada, VI = inativada) e por três vacinas experimentais replicativas (VAC1 = monovalente, BVDV-1; VAC2 = bivalente, BVDV-1 + BVDV-2; VAC3 = trivalente, BVDV-1 + BVDV-2 e HoBiPeV). Bezerros soronegativos foram imunizados uma vez (vacinas replicativas) ou duas (vacina inativada) e amostras de soro foram testadas por vírus-neutralização (VN) 30 dias após a vacinação (dpv) (vacinas replicativas) ou 30 dias após a segunda dose (VI). Títulos neutralizantes ≥60 foram considerados indicativos de proteção contra doença clínica. Nesta data, a VA induziu títulos protetivos contra o BVDV-2 em 7/7 animais (GMT=289,8) e contra BVDV-1 e HoBiPeV em 5/7 animals (GMTs=97,5 e 80, respectivamente). VI induziu títulos protetores contra BVDV-1 em 1/7 animal (GMT=16,4), em 2/7 animais contra BVDV-2 (GMT=53,8) e em nenhum contra HoBiPeV (GMT=12,2). Quando um pool de soro de cada grupo vacinal foi testado frente a isolados Brasileiros, a VA induziu títulos protetores contra 3/7 isolados de BVDV-1, 9/10 (BVDV-2) e 1/8 (HoBiPeV); VI induziu títulos protetores em 1/7 contra BVDV-1, 1/10 (BVDV-2) e em nenhum (0/8) contra isolados de HoBiPeV. A VAC1 induziu títulos protetores contra BVDV-1 em 9/9 animais (GMT=320) mas em nenhum animal contra BVDV-2 ou HoBiPeV (GMT<10). VAC2 induziu títulos protetores contra BVDV-1e BVDV-2 em 9/9 animais (GMTs=160 e 640, respectivamente),e contra HoBiPeV em 7/9 animais (GMT=108,5). Finalmente, VAC3 induziu títulos protetores em todos os animais contra BVDV-1 (GMT=234,3), BVDV-2 (294,9) e HoBiPeV (201,1). No teste de pool de soro contra isolados de pestivírus, VAC1 induziu títulos ≥60 contra 4/7 BVDV-1 mas contra nenhum isolado de BVDV-2/HoBiPeV; VAC2 induziu títulos protetores contra 4/7 BVDV-1; 10/10 BVDV-2 e 2/8 HoBiPeV; VAC3 induziu títulos protetores contra todos BVDV-1, BVDV-2 e HoBiPeV. Esses resultados indicam que vacinas contendo apenas BVDV-1 BVDV-2, especialmente aquelas inativadas, podem não conferir resposta sorológica protetora contra vários isolados de HoBiPeV. Portanto, a necessidade de se incluir cepas de HoBiPeV nas vacinas deve ser considerada.(AU)

Effect of doses and administration routes of 9R vaccine on protection of Japanese quails against experimental infection with Salmonella Gallinarum / Efeito das doses e vias de administração da vacina 9R na proteção de codornas japonesas contra infeccção experimental com Salmonella Gallinarum

Coturniculture has increased significantly in the last decades. There are several pathogens that can affect these birds. Among the diseases, fowl typhoid stands out as a disease with a potentially great impact to the poultry industry. The objective of this the study was to evaluate the effect of doses and administration routes of live 9R vaccine on protection of Japanese quails against experimental infection with Salmonella Gallinarum (SG). Two hundred and fifty birds were used, divided into five groups: G1, oral vaccination with one dose; G2, oral vaccination with 2 doses; G3, subcutaneous vaccination with one dose; G4, subcutaneous vaccination with two doses and G5 not vaccinated. All birds from all five groups were challenged with SG at an age of 45 days. SG was quantified in the periods of one, four, seven and twelve days after the challenge. The presence of clinical signs and macroscopic lesions of the disease were observed. The groups vaccinated by subcutaneous route had a higher egg production and lower mortality rate. Birds receiving a dose of the vaccine by subcutaneous route also showed lower amount of SG in the liver and spleen seven days after the challenge.(AU)

A coturnicultura tem aumentado significativamente nas últimas décadas. Existem vários patógenos que podem afetar essas aves. Entre as doenças, o tifo aviário se destaca como uma doença de grande impacto para a indústria avícola. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de doses e vias de administração da vacina viva 9R na proteção de codornas japonesas contra infecção experimental por Salmonella Gallinarum (SG). Foram utilizadas duzentos e cinquenta aves, divididas em cinco grupos: G1, vacinação oral com uma dose; G2, vacinação oral com 2 doses; G3, vacinação subcutânea com uma dose; G4, vacinação subcutânea com duas doses e G5 não vacinado. Todas as aves dos cinco grupos foram desafiadas com SG aos 45 dias de idade. A SG foi quantificada nos períodos de um, quatro, sete e doze dias após o desafio. Foi observada a presença de sinais clínicos e lesões macroscópicas da doença. Os grupos vacinados por via subcutânea apresentaram maior produção de ovos e menor taxa de mortalidade. Aves recebendo uma dose da vacina por via subcutânea também apresentaram menor quantidade de SG no fígado e baço sete dias após o desafio.(AU)

Effect of doses and administration routes of 9R vaccine on protection of Japanese quails against experimental infection with Salmonella Gallinarum / Efeito das doses e vias de administração da vacina 9R na proteção de codornas japonesas contra infeccção experimental com Salmonella Gallinarum

Coturniculture has increased significantly in the last decades. There are several pathogens that can affect these birds. Among the diseases, fowl typhoid stands out as a disease with a potentially great impact to the poultry industry. The objective of this the study was to evaluate the effect of doses and administration routes of live 9R vaccine on protection of Japanese quails against experimental infection with Salmonella Gallinarum (SG). Two hundred and fifty birds were used, divided into five groups: G1, oral vaccination with one dose; G2, oral vaccination with 2 doses; G3, subcutaneous vaccination with one dose; G4, subcutaneous vaccination with two doses and G5 not vaccinated. All birds from all five groups were challenged with SG at an age of 45 days. SG was quantified in the periods of one, four, seven and twelve days after the challenge. The presence of clinical signs and macroscopic lesions of the disease were observed. The groups vaccinated by subcutaneous route had a higher egg production and lower mortality rate. Birds receiving a dose of the vaccine by subcutaneous route also showed lower amount of SG in the liver and spleen seven days after the challenge.(AU)

A coturnicultura tem aumentado significativamente nas últimas décadas. Existem vários patógenos que podem afetar essas aves. Entre as doenças, o tifo aviário se destaca como uma doença de grande impacto para a indústria avícola. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de doses e vias de administração da vacina viva 9R na proteção de codornas japonesas contra infecção experimental por Salmonella Gallinarum (SG). Foram utilizadas duzentos e cinquenta aves, divididas em cinco grupos: G1, vacinação oral com uma dose; G2, vacinação oral com 2 doses; G3, vacinação subcutânea com uma dose; G4, vacinação subcutânea com duas doses e G5 não vacinado. Todas as aves dos cinco grupos foram desafiadas com SG aos 45 dias de idade. A SG foi quantificada nos períodos de um, quatro, sete e doze dias após o desafio. Foi observada a presença de sinais clínicos e lesões macroscópicas da doença. Os grupos vacinados por via subcutânea apresentaram maior produção de ovos e menor taxa de mortalidade. Aves recebendo uma dose da vacina por via subcutânea também apresentaram menor quantidade de SG no fígado e baço sete dias após o desafio.(AU)

Occurrence of vaccine abscesses in bovines after the administration of bivalent foot-and-mouth disease vaccine / Ocorrência de abscessos vacinais em bovinos após aplicação da vacina antiaftosa bivalente

The aim of the present study is to identify the occurrence of abscesses in cattle after the administration of bivalent foot-and-mouth disease vaccine as adverse reaction to components in the new commercial vaccine formulation. Thirty bovines were divided into three groups composed of 10 animals, each. Groups 1 and 2 were vaccinated by researchers based on good vaccination practices criteria. Group 1 was intramuscularly administered with the vaccine, Group 2 received it through subcutaneous route and Group 3 was vaccinated by breeders through subcutaneous route. Animals were selected and observed in vivo in three different moments (7, 28 and 45 days after vaccination). Subsequently, they were observed during post mortem inspection in order to assess the occurrence of vaccine abscesses. Vaccine abscesses were recorded in 40% of bovines in Group 1, in 50% of the ones in Group 2 and in 60% of those in Group 3. There was no significant difference between experimental groups based on the Chi-square test and on Cramer's V analysis; there was no significant difference among experimental groups. Excess of carcass parts presenting vaccine abscesses during post mortem inspection resulted in the meat loss of 1.775 kg in Group 1, of 2.303 kg in Group 2 and of 3.268 kg in Group 3. In conclusion, despite changes in bivalent foot-and-mouth disease vaccine formulation, care should be taken at vaccination time to minimize the occurrence of vaccine abscesses and, consequently, meat losses at slaughter, as well as to reduce losses in beef production chain.(AU)

O presente estudo objetivou identificar a ocorrência de abcessos em bovinos após a aplicação da vacina antiaftosa bivalente, como reação adversa aos componentes da nova formulação comercial. Foram avaliados 30 bovinos divididos em três grupos de 10 animais. Os Grupos 1 e 2 foram vacinados pelos pesquisadores seguindo os critérios de boas práticas de vacinação, sendo o Grupo 1 vacinado pela via intramuscular e o Grupo 2 pela via subcutânea, já o Grupo 3 foi vacinado pelo produtor rural utilizando a via subcutânea. Os animais foram isolados e observados in vivo em três momentos (7°, 28° e 45° dias após a vacinação), em seguida foram observados durante a inspeção post mortem para constatação da ocorrência de abscessos vacinais. Registrou-se a ocorrência de abscessos vacinais em 40% dos bovinos do Grupo 1, em 50% do grupo 2 e em 60% do grupo 3. Não houve diferença significativa entre os grupos experimentais segundo o teste do Qui-quadrado e a análise do V de Cramer. A partes cárneas excisadas das carcaças com abcessos vacinais durante a inspeção post mortem resultaram em uma perda cárnea de 1.775 kg no Grupo 1, de 2.303 kg no Grupo 2 e de 3.268 kg no Grupo 3. Conclui-se, que mesmo com a alteração da formulação da vacina antiaftosa, são necessários cuidados no ato da vacinação, a fim de minimizar a ocorrência de abscessos vacinais e consequentes perdas cárneas no ato do abate dos animais, diminuindo assim os prejuízos à cadeia produtiva da carne.(AU)

Occurrence of vaccine abscesses in bovines after the administration of bivalent foot-and-mouth disease vaccine / Ocorrência de abscessos vacinais em bovinos após aplicação da vacina antiaftosa bivalente

The aim of the present study is to identify the occurrence of abscesses in cattle after the administration of bivalent foot-and-mouth disease vaccine as adverse reaction to components in the new commercial vaccine formulation. Thirty bovines were divided into three groups composed of 10 animals, each. Groups 1 and 2 were vaccinated by researchers based on good vaccination practices criteria. Group 1 was intramuscularly administered with the vaccine, Group 2 received it through subcutaneous route and Group 3 was vaccinated by breeders through subcutaneous route. Animals were selected and observed in vivo in three different moments (7, 28 and 45 days after vaccination). Subsequently, they were observed during post mortem inspection in order to assess the occurrence of vaccine abscesses. Vaccine abscesses were recorded in 40% of bovines in Group 1, in 50% of the ones in Group 2 and in 60% of those in Group 3. There was no significant difference between experimental groups based on the Chi-square test and on Cramer's V analysis; there was no significant difference among experimental groups. Excess of carcass parts presenting vaccine abscesses during post mortem inspection resulted in the meat loss of 1.775 kg in Group 1, of 2.303 kg in Group 2 and of 3.268 kg in Group 3. In conclusion, despite changes in bivalent foot-and-mouth disease vaccine formulation, care should be taken at vaccination time to minimize the occurrence of vaccine abscesses and, consequently, meat losses at slaughter, as well as to reduce losses in beef production chain.

O presente estudo objetivou identificar a ocorrência de abcessos em bovinos após a aplicação da vacina antiaftosa bivalente, como reação adversa aos componentes da nova formulação comercial. Foram avaliados 30 bovinos divididos em três grupos de 10 animais. Os Grupos 1 e 2 foram vacinados pelos pesquisadores seguindo os critérios de boas práticas de vacinação, sendo o Grupo 1 vacinado pela via intramuscular e o Grupo 2 pela via subcutânea, já o Grupo 3 foi vacinado pelo produtor rural utilizando a via subcutânea. Os animais foram isolados e observados in vivo em três momentos (7°, 28° e 45° dias após a vacinação), em seguida foram observados durante a inspeção post mortem para constatação da ocorrência de abscessos vacinais. Registrou-se a ocorrência de abscessos vacinais em 40% dos bovinos do Grupo 1, em 50% do grupo 2 e em 60% do grupo 3. Não houve diferença significativa entre os grupos experimentais segundo o teste do Qui-quadrado e a análise do V de Cramer. A partes cárneas excisadas das carcaças com abcessos vacinais durante a inspeção post mortem resultaram em uma perda cárnea de 1.775 kg no Grupo 1, de 2.303 kg no Grupo 2 e de 3.268 kg no Grupo 3. Conclui-se, que mesmo com a alteração da formulação da vacina antiaftosa, são necessários cuidados no ato da vacinação, a fim de minimizar a ocorrência de abscessos vacinais e consequentes perdas cárneas no ato do abate dos animais, diminuindo assim os prejuízos à cadeia produtiva da carne.

Meta-analysis of brucellosis vaccinology in natural hosts / Meta-análise da vacinologia de brucelose em hospedeiros naturais

Brucellosis is a relevant zoonotic disease for which the most important tool for control is vaccination of susceptible animals. Assessment of vaccine efficacy in natural hosts is based on prevention of abortion and Brucella infection in organs of immunized animals. A meta-analysis of experimental vaccination of Brucella spp. natural hosts was performed, including 45 PubMed and/or Scopus-indexed publications, representing 116 individual experiments. Difference of risk was calculated as an indicator of protection, and a temporal analysis (1980-2016) demonstrated that experimental vaccines tested on natural hosts provided levels of protection that were stable over the past decades. The meta-regression model developed in this study included different vaccine categories (attenuated, inactivated, mutant, subunit, and vectored) considering the difference of risk as the dependent variable. The subcutaneous route of vaccination provided better protection when compared to the intramuscular and oral routes of vaccination. Surprisingly, inactivated vaccines provided better protection than live naturally attenuated vaccine strains (spontaneous mutations) that were considered the reference, whereas subunit vaccines provided lower levels of protection. This is the first meta-analysis of Brucella vaccinology in the natural hosts. These results are useful for the development of new vaccination protocols for controlling animal brucellosis.(AU)

Brucelose é uma doença zoonótica relevante, para a qual a vacinação de animais susceptíveis é a ferramenta mais importante de controle. Avaliação da eficácia vacinal em hospedeiros naturais é baseada na prevenção de aborto e da colonização de órgãos pela Brucella spp. em animais imunizados. Foi realizada meta-análise de estudos de vacinação experimental de Brucella spp. em hospedeiros naturais, incluindo 45 publicações indexadas pela PubMed e/ou Scopus, representando 116 experimentos individuais. Diferença de risco foi calculada como indicador de proteção e uma análise temporal (1980-2016) demonstrou que vacinas experimentais testadas em hospedeiros naturais promoveram níveis de proteção que foram estáveis ao longo das últimas décadas. O modelo de meta-regressão desenvolvido neste estudo incluiu diferentes categorias de vacinas (atenuada, inativada, mutante, subunidade e vetorial) considerando a diferença de risco como variável dependente. A via de vacinação subcutânea promoveu melhor proteção quando comparada às vias intramuscular e oral. Surpreendentemente, vacinas inativadas promoveram melhor proteção que vacinas vivas atenuadas (com mutações espontâneas) que foram consideradas como referência, enquanto vacinas de subunidades promoveram menor proteção. Este é o primeiro estudo de meta-análise da vacinologia de Brucella em hospedeiros naturais. Estes resultados são úteis para o desenvolvimento de novos protocolos vacinais para controle de brucelose animal.(AU)

Meta-analysis of brucellosis vaccinology in natural hosts / Meta-análise da vacinologia de brucelose em hospedeiros naturais

Brucellosis is a relevant zoonotic disease for which the most important tool for control is vaccination of susceptible animals. Assessment of vaccine efficacy in natural hosts is based on prevention of abortion and Brucella infection in organs of immunized animals. A meta-analysis of experimental vaccination of Brucella spp. natural hosts was performed, including 45 PubMed and/or Scopus-indexed publications, representing 116 individual experiments. Difference of risk was calculated as an indicator of protection, and a temporal analysis (1980-2016) demonstrated that experimental vaccines tested on natural hosts provided levels of protection that were stable over the past decades. The meta-regression model developed in this study included different vaccine categories (attenuated, inactivated, mutant, subunit, and vectored) considering the difference of risk as the dependent variable. The subcutaneous route of vaccination provided better protection when compared to the intramuscular and oral routes of vaccination. Surprisingly, inactivated vaccines provided better protection than live naturally attenuated vaccine strains (spontaneous mutations) that were considered the reference, whereas subunit vaccines provided lower levels of protection. This is the first meta-analysis of Brucella vaccinology in the natural hosts. These results are useful for the development of new vaccination protocols for controlling animal brucellosis.(AU)

Brucelose é uma doença zoonótica relevante, para a qual a vacinação de animais susceptíveis é a ferramenta mais importante de controle. Avaliação da eficácia vacinal em hospedeiros naturais é baseada na prevenção de aborto e da colonização de órgãos pela Brucella spp. em animais imunizados. Foi realizada meta-análise de estudos de vacinação experimental de Brucella spp. em hospedeiros naturais, incluindo 45 publicações indexadas pela PubMed e/ou Scopus, representando 116 experimentos individuais. Diferença de risco foi calculada como indicador de proteção e uma análise temporal (1980-2016) demonstrou que vacinas experimentais testadas em hospedeiros naturais promoveram níveis de proteção que foram estáveis ao longo das últimas décadas. O modelo de meta-regressão desenvolvido neste estudo incluiu diferentes categorias de vacinas (atenuada, inativada, mutante, subunidade e vetorial) considerando a diferença de risco como variável dependente. A via de vacinação subcutânea promoveu melhor proteção quando comparada às vias intramuscular e oral. Surpreendentemente, vacinas inativadas promoveram melhor proteção que vacinas vivas atenuadas (com mutações espontâneas) que foram consideradas como referência, enquanto vacinas de subunidades promoveram menor proteção. Este é o primeiro estudo de meta-análise da vacinologia de Brucella em hospedeiros naturais. Estes resultados são úteis para o desenvolvimento de novos protocolos vacinais para controle de brucelose animal.(AU)

Efficacy of three methods used to control staphylococcal mastitis in dairy goats / Eficácia de três métodos empregados no controle da mastite estafilocócica em cabras leiteiras

Goat and sheep farming in Brazil relies on an expressive herd, especially in the Northeast region of the country, where small ruminants constitute a relevant economic activity, with milk production being an important source of income in some dry areas of the Northeastern states. However, there are still some sanitary problems in the management of dairy goats, among which mastitis is highlighted, especially that of the subclinical type. Therefore, the aim of this study was to evaluate the use of antibiotics, exclusively or in combination with vaccines, in the control of sub-clinical mastitis in small ruminants. The study was conducted on a rural property located in Santa Maria da Boa Vista-PE. Fifty-three female Saanen dairy goats were allocated into four experimental groups. An antibiotic therapy with a commercial antimicrobial based on cloxacillin was used in group 1. Group 2 received the commercial vaccine indicated for herds with an incidence of Staphylococcus strains and the same antibiotic described for Group 1. Group 3 was evaluated for the exclusive use of vaccination, and Group 4 was the control group. A microbiological examination of the milk was carried out to confirm cases of mastitis. The percentage of udders, infected by coagulase-negative Staphylococcus spp. (CNS) before and after the antibiotic + vaccine treatment was 42.8 and 7.1%, respectively. It was observed that the cloxacillinbased antibiotic could be used alone or in combination with mastitis vaccines to control staphylococcal mastitis in small ruminants. Vaccination alone was not effective in reducing the number of mastitis cases; therefore, a cross reaction against CNS was not observed. Thus, further studies to determine the potential of vaccines to control sub-clinical mastitis in small ruminants are necessary.

A caprinovinocultura brasileira dispõe de um expressivo rebanho, principalmente na região Nordeste do país, onde os pequenos ruminantes constituem uma relevante atividade econômica sendo a produção de leite uma importante fonte renda em algumas zonas secas dos estados do Nordeste. No entanto, ainda existem alguns problemas de ordem sanitária no manejo de cabras leiteiras, dentre esses, tem-se a mastite, principalmente aquela do tipo subclínica. Portanto, objetivou-se com este trabalho avaliar o uso isolado ou combinação de antibióticos e vacinas no controle da mastite em pequenos ruminantes. O estudo foi realizado em uma propriedade localizada no município de Santa Maria da Boa Vista - PE. Um total de 53 fêmeas leiteiras Saanen foram divididas em quatros grupos experimentais. No grupo 01 foi utilizada a antibioticoterapia, com antimicrobiano comercial a base de cloxacilina. O grupo 02 recebeu vacina comercial indicada para rebanhos com incidência de cepas do gênero Staphylococcus e o mesmo antibiótico descrito para o grupo 01. Em um terceiro grupo apenas a vacina foi empregada, e por último, foi constituído um grupo controle. Empregou-se o exame microbiológico do leite para confirmação dos casos de mastite. A porcentagem de tetos infectados por Staphylococcus coagulase negativa (SCN) antes e após o tratamento Antibiótico + Vacina foi de 42,8 e 7,1%, respectivamente. Observou-se que o antibiótico a base de cloxacilina pode ser usado isoladamente ou em associação a vacinas anti-mastíticas para controle da mastite estafilocócica em pequenos ruminantes. O tratamento que preconizava a aplicação apenas da vacina não foi eficiente na redução dos casos da doença, portanto, não foi observada uma reação cruzada contra os SCN. Assim, faz-se necessária a continuidade dos estudos acerca do potencial das vacinas para o controle da mastite em pequenos ruminantes.

Efficacy of three methods used to control staphylococcal mastitis in dairy goats / Eficácia de três métodos empregados no controle da mastite estafilocócica em cabras leiteiras

Goat and sheep farming in Brazil relies on an expressive herd, especially in the Northeast region of the country, where small ruminants constitute a relevant economic activity, with milk production being an important source of income in some dry areas of the Northeastern states. However, there are still some sanitary problems in the management of dairy goats, among which mastitis is highlighted, especially that of the subclinical type. Therefore, the aim of this study was to evaluate the use of antibiotics, exclusively or in combination with vaccines, in the control of sub-clinical mastitis in small ruminants. The study was conducted on a rural property located in Santa Maria da Boa Vista-PE. Fifty-three female Saanen dairy goats were allocated into four experimental groups. An antibiotic therapy with a commercial antimicrobial based on cloxacillin was used in group 1. Group 2 received the commercial vaccine indicated for herds with an incidence of Staphylococcus strains and the same antibiotic described for Group 1. Group 3 was evaluated for the exclusive use of vaccination, and Group 4 was the control group. A microbiological examination of the milk was carried out to confirm cases of mastitis. The percentage of udders, infected by coagulase-negative Staphylococcus spp. (CNS) before and after the antibiotic + vaccine treatment was 42.8 and 7.1%, respectively. It was observed that the cloxacillinbased antibiotic could be used alone or in combination with mastitis vaccines to control staphylococcal mastitis in small ruminants. Vaccination alone was not effective in reducing the number of mastitis cases; therefore, a cross reaction against CNS was not observed. Thus, further studies to determine the potential of vaccines to control sub-clinical mastitis in small ruminants are necessary.(AU)

A caprinovinocultura brasileira dispõe de um expressivo rebanho, principalmente na região Nordeste do país, onde os pequenos ruminantes constituem uma relevante atividade econômica sendo a produção de leite uma importante fonte renda em algumas zonas secas dos estados do Nordeste. No entanto, ainda existem alguns problemas de ordem sanitária no manejo de cabras leiteiras, dentre esses, tem-se a mastite, principalmente aquela do tipo subclínica. Portanto, objetivou-se com este trabalho avaliar o uso isolado ou combinação de antibióticos e vacinas no controle da mastite em pequenos ruminantes. O estudo foi realizado em uma propriedade localizada no município de Santa Maria da Boa Vista - PE. Um total de 53 fêmeas leiteiras Saanen foram divididas em quatros grupos experimentais. No grupo 01 foi utilizada a antibioticoterapia, com antimicrobiano comercial a base de cloxacilina. O grupo 02 recebeu vacina comercial indicada para rebanhos com incidência de cepas do gênero Staphylococcus e o mesmo antibiótico descrito para o grupo 01. Em um terceiro grupo apenas a vacina foi empregada, e por último, foi constituído um grupo controle. Empregou-se o exame microbiológico do leite para confirmação dos casos de mastite. A porcentagem de tetos infectados por Staphylococcus coagulase negativa (SCN) antes e após o tratamento Antibiótico + Vacina foi de 42,8 e 7,1%, respectivamente. Observou-se que o antibiótico a base de cloxacilina pode ser usado isoladamente ou em associação a vacinas anti-mastíticas para controle da mastite estafilocócica em pequenos ruminantes. O tratamento que preconizava a aplicação apenas da vacina não foi eficiente na redução dos casos da doença, portanto, não foi observada uma reação cruzada contra os SCN. Assim, faz-se necessária a continuidade dos estudos acerca do potencial das vacinas para o controle da mastite em pequenos ruminantes.(AU)

Rapid test to detect cytotoxic activity in vaccines against foot-and-mouth disease / Prova rápida para detectar atividade citotóxica em vacinas para febre aftosa

Substances with cytotoxic activity present in vaccines against the foot-and-mouth disease may interfere with methods used to detect residual live virus in the product or cause undesirable postvaccination reactions. This study describes a rapid in vitro test to detect cytotoxic activity in water-in-oil vaccines against foot-and-mouth disease using a commercial saponin as a cytotoxic agent and a solution of sheep's red blood cells as substrate. Hemolytic and cytotoxic activity was analyzed using experimental and commercial vaccines prepared with and without saponin. The hemolytic and cytotoxic potential of preparations containing saponin was evident. In contrast, hemolytic and cytotoxic activities were not observed in vaccines without saponin in their composition. The method described here allows to easily detect if the vaccine under study has cytotoxic activity, making it possible to select the most appropriate method to process the sample to be used for the innocuity test. Additionally, due to undesirable effects that may be observed in animals receiving vaccines containing saponin in their formulation, the use of the rapid test described here allows to identify those vaccines with cytotoxic activity and to verify the presence of saponin on them, through the mass spectrometry method.(AU)

Substâncias com atividade citotóxica presentes em vacinas contra febre aftosa podem interferir com o método utilizado para a detecção de vírus ativo residual no produto ou causar reações pós-vacinais indesejáveis. O presente trabalho descreve uma prova rápida in vitro para detectar atividade citotóxica em vacinas oleosas contra febre aftosa utilizando uma saponina comercial como agente citotóxico e uma solução de hemácias de carneiro como substrato. Analisaram-se as atividades hemolítica e citotóxica utilizando-se vacinas experimentais e comerciais preparadas com e sem saponina. O potencial hemolítico e citotóxico dos preparados que continham saponina na sua formulação foi evidente. Em contraste, não se observou atividade hemolítica e citotóxica nas vacinas sem saponina. O método descrito permite conhecer rapidamente se a vacina em estudo apresenta atividade citotóxica e, dessa maneira, selecionar o método mais adequado para processar a amostra que será utilizada para investigar a presença de vírus ativo residual. Adicionalmente, devido aos efeitos indesejáveis que podem ser observados em animais que recebem vacinas que contêm saponina na sua formulação, o uso da prova rápida descrita permite selecionar aquelas vacinas com atividade citotóxica para posteriormente verificar a presença de saponina através de técnicas analíticas como a espectrometria de massas.(AU)

Rapid test to detect cytotoxic activity in vaccines against foot-and-mouth disease / Prova rápida para detectar atividade citotóxica em vacinas para febre aftosa

Substances with cytotoxic activity present in vaccines against the foot-and-mouth disease may interfere with methods used to detect residual live virus in the product or cause undesirable postvaccination reactions. This study describes a rapid in vitro test to detect cytotoxic activity in water-in-oil vaccines against foot-and-mouth disease using a commercial saponin as a cytotoxic agent and a solution of sheep's red blood cells as substrate. Hemolytic and cytotoxic activity was analyzed using experimental and commercial vaccines prepared with and without saponin. The hemolytic and cytotoxic potential of preparations containing saponin was evident. In contrast, hemolytic and cytotoxic activities were not observed in vaccines without saponin in their composition. The method described here allows to easily detect if the vaccine under study has cytotoxic activity, making it possible to select the most appropriate method to process the sample to be used for the innocuity test. Additionally, due to undesirable effects that may be observed in animals receiving vaccines containing saponin in their formulation, the use of the rapid test described here allows to identify those vaccines with cytotoxic activity and to verify the presence of saponin on them, through the mass spectrometry method.(AU)

Substâncias com atividade citotóxica presentes em vacinas contra febre aftosa podem interferir com o método utilizado para a detecção de vírus ativo residual no produto ou causar reações pós-vacinais indesejáveis. O presente trabalho descreve uma prova rápida in vitro para detectar atividade citotóxica em vacinas oleosas contra febre aftosa utilizando uma saponina comercial como agente citotóxico e uma solução de hemácias de carneiro como substrato. Analisaram-se as atividades hemolítica e citotóxica utilizando-se vacinas experimentais e comerciais preparadas com e sem saponina. O potencial hemolítico e citotóxico dos preparados que continham saponina na sua formulação foi evidente. Em contraste, não se observou atividade hemolítica e citotóxica nas vacinas sem saponina. O método descrito permite conhecer rapidamente se a vacina em estudo apresenta atividade citotóxica e, dessa maneira, selecionar o método mais adequado para processar a amostra que será utilizada para investigar a presença de vírus ativo residual. Adicionalmente, devido aos efeitos indesejáveis que podem ser observados em animais que recebem vacinas que contêm saponina na sua formulação, o uso da prova rápida descrita permite selecionar aquelas vacinas com atividade citotóxica para posteriormente verificar a presença de saponina através de técnicas analíticas como a espectrometria de massas.(AU)

Serological response against bovine herpesvirus and bovine viral diarrhea virus induced by commercial vaccines in Holstein heifers

ABSTRACT: Vaccination is a strategy to the prevention and control of reproductive diseases caused by bovine viral diarrhea virus (BVDV) and bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1), however the various compositions of commercial vaccines should be evaluated for their ability to induce protection mediated by antibodies. The objective of this research was to evaluate the production of specific neutralizing Abs against BVDV-1 and 2, and BoHV-1 induced by commercial vaccines composed by different adjuvants. Holstein heifers were vaccinated and distributed in three experimental groups: Group I (G1) was vaccinated with a commercial vaccine containing inactivated BVDV-1, BVDV-2 and BoHV-1 diluted in alum hydroxide as adjuvant (n=9); Group II (G2) was vaccinated with an product containing inactivated strains of BVDV-1, BVDV-2, BoHV-1 and BoHV-5 diluted in oil emulsion as adjuvant (n=10); Group III (G3) was vaccinated with a commercial vaccine containing inactivated BVDV-1 and BVDV-2, besides live modified thermosensitive BoHV-1, diluted in Quil A, amphigen and cholesterol (n=10); A control, non-vaccinated group (n=6) was mock vaccinated with saline. Heifers received two subcutaneous doses of 5mL of each commercial vaccine on the right side of the neck, with 21 days interval. Humoral immune response was assessed by the virus neutralization test (VN) against BVDV-1 (NADL and Singer strains), BVDV-2 (SV253 strain) and BoHV-1 (Los Angeles strain) in serum samples collected on vaccination days zero (D0), 21 (D21) and 42 (D42; 21 days after boosting). Neutralizing Abs against BVDV-1 NADL was detected only in D42, regardless of the vaccine used. Similar geometric mean titers (GMT) for BVDV-1 NADL were observed between G1 (log2=5.1) and G3 (log2=5.1). The seroconversion rate (%) was higher in G1 (78%) when compared to G2 (10%) and G3 (40%). For BVDV-1 Singer, it was also possible to detect Abs production in G1 (log2=5.8, 100% seroconversion rate) and G3 (log2=3.5, seroconversion rate = 60%), only after the booster dose (D42). Neutralizing Abs to BVDV-2 (SV253) were detected only in G3, observing 90% seroconversion associated with high titers of Abs (log2=6.7) after the 2nd dose of vaccine (D42). Heifers from G1 and G3 responded to BoHV-1 after the first dose (D21): G1 (log2=2.5, seroconversion rate = 67%) and G3 (log2=0.7, seroconversion rate = 80%). In D42, a higher magnitude response was observed in the heifers from G3 (log2=6.1, 100%) compared with G1 (log2=4.3, 100%) and G2 (log2=2.7, 60%). Based on the data obtained, it can be concluded that the commercial vaccine contained aluminum hydroxide (G1) was most effective in the induction of antibodies against BVDV-1. On the other hand, this vaccine did not induce the production of neutralizing Abs against BVDV-2. Only the heifers from G3 (Quil A, amphigen and cholesterol) generated neutralizing Abs against BVDV-2. The animals that received commercial vaccine containing oil emulsion as adjuvant (G2) had a weak/undetectable response against BVDV-1 and BVDV-2. The best protective response against BoHV-1 was observed in heifers vaccinated with the live modified thermosensitive virus.

RESUMO: A vacinação é utilizada como estratégia para a prevenção e controle das doenças reprodutivas, causadas pelos vírus da diarreia viral bovina (BVDV) e herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1), entretanto, as diversas composições de vacinas comerciais devem ser avaliadas quanto a sua eficiência protetiva mediada por anticorpos (Acs). O objetivo desta pesquisa foi avaliar a produção Acs neutralizantes específicos para cepas de BVDV-1 e 2, e BoHV-1 induzida por vacinas comerciais contendo diferentes tipos de adjuvantes. Para tal, novilhas Holandesas foram vacinadas e distribuídas em três grupos experimentais: Grupo I (G1) foi vacinado com uma vacina comercial composta por cepas inativadas de BVDV-1, BVDV-2 e BoHV-1 diluídas em hidróxido de alumínio como adjuvante (n=9); Grupo II (G2) foi vacinado com produto contendo as cepas inativadas de BVDV-1, BVDV-2, BoHV-1 e BoHV-5 em uma emulsão oleosa como adjuvante (n=10); O Grupo III (G3) foi vacinado com uma vacina comercial contendo BVDV-1 e BVDV-2 inativado, além do BoHV-1 vivo modificado e termosensivel, diluídos em adjuvante contendo Quil A, Amphigem e colesterol (n=10); O Grupo Controle não vacinado (n=6) foi inoculado com solução salina. As novilhas receberam duas doses das respectivas vacinas ou solução salina (5mL), com intervalo de 21 dias, por via subcutânea, na tábua do pescoço do lado direito. A resposta imune humoral foi avaliada pelo teste de vírus neutralização (VN) contra o BVDV-1 (cepas NADL e Singer), BVDV-2 (cepa SV253) e BoHV-1 (cepa Los Angeles) em amostras de soro coletadas nos dias (D) de vacinação zero (D0), 21 dias após 1ª dose (D21)e 42 (D42; 21 dias após A 2ª dose). Os anticorpos neutralizantes contra o BVDV-1 NADL foram detectados apenas em D42, independentemente da vacina utilizada. Os títulos médios geométricos (GMT) de anticorpos foram semelhantes entre G1 (log2=5,1) e G3 (log2=5,1). A taxa de soroconversão foi maior no G1 (78%) quando comparado ao G2 (10%) e G3 (40%). Para o BVDV-1 Singer, somente após D42 foi observada a produção de Acs no G1 (log2=5,8; taxa de soroconversão de 100%) e G3 (log2=3,5; taxa de soroconversão = 60%). Os anticorpos contra BVDV-2 (SV253) foram detectados apenas nas novilhas do G3, observando-se taxa de soroconversão de 90% com altos títulos de anticorpos neutralizantes (log2=6,7) em D42. Novilhas G1 e G3 responderam ao BoHV-1 após a primeira dose (D21): G1 (log2=2,5; taxa de seroconversão = 67%) e G3 (log2=0,7; taxa de seroconversão = 80%). Em contrapartida, foi observada uma maior magnitude de resposta para as novilhas G3 (log2=6,1; 100%) em D42, em relação aos animais G1 (log2=4,3; 100%) e G2 (log2=2,7; 60%). Com base nos dados obtidos, foi possível concluir que a vacina composta por hidróxido de alumínio (G1) foi mais eficaz na produção de anticorpos contra o BVDV-1, em contrapartida esse produto não induziu anticorpos contra o BVDV-2. Apenas as novilhas do G3 (Quil A, amphigen e colesterol) geraram Acs neutralizantes contra o BVDV-2. Os animais que receberam a vacina em emulsão oleosa (G2) como adjuvante apresentaram uma resposta fraca/indetectável contra o BVDV-1 e BVDV-2. A melhor resposta protetiva contra o BoHV-1 foi observada nas novilhas vacinadas com a vacina viva modificada termosensível.

Serological response against bovine herpesvirus and bovine viral diarrhea virus induced by commercial vaccines in Holstein heifers / Resposta sorológica contra herpesvírus bovino e vírus da diarreia viral bovina induzida por vacinas comerciais em novilhas Holandesas

Vaccination is a strategy to the prevention and control of reproductive diseases caused by bovine viral diarrhea virus (BVDV) and bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1), however the various compositions of commercial vaccines should be evaluated for their ability to induce protection mediated by antibodies. The objective of this research was to evaluate the production of specific neutralizing Abs against BVDV-1 and 2, and BoHV-1 induced by commercial vaccines composed by different adjuvants. Holstein heifers were vaccinated and distributed in three experimental groups: Group I (G1) was vaccinated with a commercial vaccine containing inactivated BVDV-1, BVDV-2 and BoHV-1 diluted in alum hydroxide as adjuvant (n=9); Group II (G2) was vaccinated with an product containing inactivated strains of BVDV-1, BVDV-2, BoHV-1 and BoHV-5 diluted in oil emulsion as adjuvant (n=10); Group III (G3) was vaccinated with a commercial vaccine containing inactivated BVDV-1 and BVDV-2, besides live modified thermosensitive BoHV-1, diluted in Quil A, amphigen and cholesterol (n=10); A control, non-vaccinated group (n=6) was mock vaccinated with saline. Heifers received two subcutaneous doses of 5mL of each commercial vaccine on the right side of the neck, with 21 days interval. Humoral immune response was assessed by the virus neutralization test (VN) against BVDV-1 (NADL and Singer strains), BVDV-2 (SV253 strain) and BoHV-1 (Los Angeles strain) in serum samples collected on vaccination days zero (D0), 21 (D21) and 42 (D42; 21 days after boosting). Neutralizing Abs against BVDV-1 NADL was detected only in D42, regardless of the vaccine used. Similar geometric mean titers (GMT) for BVDV-1 NADL were observed between G1 (log2=5.1) and G3 (log2=5.1). The seroconversion rate (%) was higher in G1 (78%) when compared to G2 (10%) and G3 (40%). For BVDV-1 Singer, it was also possible to detect Abs production in G1 (log2=5.8, 100% seroconversion rate) and G3 (log2=3.5, seroconversion rate = 60%), only after the booster dose (D42). Neutralizing Abs to BVDV-2 (SV253) were detected only in G3, observing 90% seroconversion associated with high titers of Abs (log2=6.7) after the 2nd dose of vaccine (D42). Heifers from G1 and G3 responded to BoHV-1 after the first dose (D21): G1 (log2=2.5, seroconversion rate = 67%) and G3 (log2=0.7, seroconversion rate = 80%). In D42, a higher magnitude response was observed in the heifers from G3 (log2=6.1, 100%) compared with G1 (log2=4.3, 100%) and G2 (log2=2.7, 60%). Based on the data obtained, it can be concluded that the commercial vaccine contained aluminum hydroxide (G1) was most effective in the induction of antibodies against BVDV-1. On the other hand, this vaccine did not induce the production of neutralizing Abs against BVDV-2. Only the heifers from G3 (Quil A, amphigen and cholesterol) generated neutralizing Abs against BVDV-2. The animals that received commercial vaccine containing oil emulsion as adjuvant (G2) had a weak/undetectable response against BVDV-1 and BVDV-2. The best protective response against BoHV-1 was observed in heifers vaccinated with the live modified thermosensitive virus.(AU)

A vacinação é utilizada como estratégia para a prevenção e controle das doenças reprodutivas, causadas pelos vírus da diarreia viral bovina (BVDV) e herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1), entretanto, as diversas composições de vacinas comerciais devem ser avaliadas quanto a sua eficiência protetiva mediada por anticorpos (Acs). O objetivo desta pesquisa foi avaliar a produção Acs neutralizantes específicos para cepas de BVDV-1 e 2, e BoHV-1 induzida por vacinas comerciais contendo diferentes tipos de adjuvantes. Para tal, novilhas Holandesas foram vacinadas e distribuídas em três grupos experimentais: Grupo I (G1) foi vacinado com uma vacina comercial composta por cepas inativadas de BVDV-1, BVDV-2 e BoHV-1 diluídas em hidróxido de alumínio como adjuvante (n=9); Grupo II (G2) foi vacinado com produto contendo as cepas inativadas de BVDV-1, BVDV-2, BoHV-1 e BoHV-5 em uma emulsão oleosa como adjuvante (n=10); O Grupo III (G3) foi vacinado com uma vacina comercial contendo BVDV-1 e BVDV-2 inativado, além do BoHV-1 vivo modificado e termosensivel, diluídos em adjuvante contendo Quil A, Amphigem e colesterol (n=10); O Grupo Controle não vacinado (n=6) foi inoculado com solução salina. As novilhas receberam duas doses das respectivas vacinas ou solução salina (5mL), com intervalo de 21 dias, por via subcutânea, na tábua do pescoço do lado direito. A resposta imune humoral foi avaliada pelo teste de vírus neutralização (VN) contra o BVDV-1 (cepas NADL e Singer), BVDV-2 (cepa SV253) e BoHV-1 (cepa Los Angeles) em amostras de soro coletadas nos dias (D) de vacinação zero (D0), 21 dias após 1ª dose (D21)e 42 (D42; 21 dias após A 2ª dose). Os anticorpos neutralizantes contra o BVDV-1 NADL foram detectados apenas em D42, independentemente da vacina utilizada. Os títulos médios geométricos (GMT) de anticorpos foram semelhantes entre G1 (log2=5,1) e G3 (log2=5,1). A taxa de soroconversão foi maior no G1 (78%) quando comparado ao G2 (10%) e G3 (40%). Para o BVDV-1 Singer, somente após D42 foi observada a produção de Acs no G1 (log2=5,8; taxa de soroconversão de 100%) e G3 (log2=3,5; taxa de soroconversão = 60%). Os anticorpos contra BVDV-2 (SV253) foram detectados apenas nas novilhas do G3, observando-se taxa de soroconversão de 90% com altos títulos de anticorpos neutralizantes (log2=6,7) em D42. Novilhas G1 e G3 responderam ao BoHV-1 após a primeira dose (D21): G1 (log2=2,5; taxa de seroconversão = 67%) e G3 (log2=0,7; taxa de seroconversão = 80%). Em contrapartida, foi observada uma maior magnitude de resposta para as novilhas G3 (log2=6,1; 100%) em D42, em relação aos animais G1 (log2=4,3; 100%) e G2 (log2=2,7; 60%). Com base nos dados obtidos, foi possível concluir que a vacina composta por hidróxido de alumínio (G1) foi mais eficaz na produção de anticorpos contra o BVDV-1, em contrapartida esse produto não induziu anticorpos contra o BVDV-2. Apenas as novilhas do G3 (Quil A, amphigen e colesterol) geraram Acs neutralizantes contra o BVDV-2. Os animais que receberam a vacina em emulsão oleosa (G2) como adjuvante apresentaram uma resposta fraca/indetectável contra o BVDV-1 e BVDV-2. A melhor resposta protetiva contra o BoHV-1 foi observada nas novilhas vacinadas com a vacina viva modificada termosensível.(AU)

Serological response against bovine herpesvirus and bovine viral diarrhea virus induced by commercial vaccines in Holstein heifers / Resposta sorológica contra herpesvírus bovino e vírus da diarreia viral bovina induzida por vacinas comerciais em novilhas Holandesas

Vaccination is a strategy to the prevention and control of reproductive diseases caused by bovine viral diarrhea virus (BVDV) and bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1), however the various compositions of commercial vaccines should be evaluated for their ability to induce protection mediated by antibodies. The objective of this research was to evaluate the production of specific neutralizing Abs against BVDV-1 and 2, and BoHV-1 induced by commercial vaccines composed by different adjuvants. Holstein heifers were vaccinated and distributed in three experimental groups: Group I (G1) was vaccinated with a commercial vaccine containing inactivated BVDV-1, BVDV-2 and BoHV-1 diluted in alum hydroxide as adjuvant (n=9); Group II (G2) was vaccinated with an product containing inactivated strains of BVDV-1, BVDV-2, BoHV-1 and BoHV-5 diluted in oil emulsion as adjuvant (n=10); Group III (G3) was vaccinated with a commercial vaccine containing inactivated BVDV-1 and BVDV-2, besides live modified thermosensitive BoHV-1, diluted in Quil A, amphigen and cholesterol (n=10); A control, non-vaccinated group (n=6) was mock vaccinated with saline. Heifers received two subcutaneous doses of 5mL of each commercial vaccine on the right side of the neck, with 21 days interval. Humoral immune response was assessed by the virus neutralization test (VN) against BVDV-1 (NADL and Singer strains), BVDV-2 (SV253 strain) and BoHV-1 (Los Angeles strain) in serum samples collected on vaccination days zero (D0), 21 (D21) and 42 (D42; 21 days after boosting). Neutralizing Abs against BVDV-1 NADL was detected only in D42, regardless of the vaccine used. Similar geometric mean titers (GMT) for BVDV-1 NADL were observed between G1 (log2=5.1) and G3 (log2=5.1). The seroconversion rate (%) was higher in G1 (78%) when compared to G2 (10%) and G3 (40%)...

A vacinação é utilizada como estratégia para a prevenção e controle das doenças reprodutivas, causadas pelos vírus da diarreia viral bovina (BVDV) e herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1), entretanto, as diversas composições de vacinas comerciais devem ser avaliadas quanto a sua eficiência protetiva mediada por anticorpos (Acs). O objetivo desta pesquisa foi avaliar a produção Acs neutralizantes específicos para cepas de BVDV-1 e 2, e BoHV-1 induzida por vacinas comerciais contendo diferentes tipos de adjuvantes. Para tal, novilhas Holandesas foram vacinadas e distribuídas em três grupos experimentais: Grupo I (G1) foi vacinado com uma vacina comercial composta por cepas inativadas de BVDV-1, BVDV-2 e BoHV-1 diluídas em hidróxido de alumínio como adjuvante (n=9); Grupo II (G2) foi vacinado com produto contendo as cepas inativadas de BVDV-1, BVDV-2, BoHV-1 e BoHV-5 em uma emulsão oleosa como adjuvante (n=10); O Grupo III (G3) foi vacinado com uma vacina comercial contendo BVDV-1 e BVDV-2 inativado, além do BoHV-1 vivo modificado e termosensivel, diluídos em adjuvante contendo Quil A, Amphigem e colesterol (n=10); O Grupo Controle não vacinado (n=6) foi inoculado com solução salina. As novilhas receberam duas doses das respectivas vacinas ou solução salina (5mL), com intervalo de 21 dias, por via subcutânea, na tábua do pescoço do lado direito. A resposta imune humoral foi avaliada pelo teste de vírus neutralização (VN) contra o BVDV-1 (cepas NADL e Singer), BVDV-2 (cepa SV253) e BoHV-1 (cepa Los Angeles) em amostras de soro coletadas nos dias (D) de vacinação zero (D0), 21 dias após 1ª dose (D21)e 42 (D42; 21 dias após A 2ª dose). Os anticorpos neutralizantes contra o BVDV-1 NADL foram detectados apenas em D42, independentemente da vacina utilizada. Os títulos médios geométricos (GMT) de anticorpos foram semelhantes entre G1 (log2=5,1) e G3 (log2=5,1). A taxa de soroconversão foi maior no G1 (78%) quando comparado ao G2 (10%) e G3 (40%)...(AU)

Características de carcaça e carne de novilhos Aberdeen Angus submetidos à castração cirúrgica ou imunológica / Carcass characteristics and meat of Aberdeen Angus steers submitted to surgical or immunological castration

Objetivou-se avaliar as características de carcaça e carne de novilhos Aberdeen Angus castrados cirurgicamente em duas idades ou imunocastrados com dois protocolos. Foram utilizados 48 bezerros, monitorados a partir do nascimento e desmamados, com idade e peso médio inicial de seis meses e de 160±16,54kg, respectivamente. Os animais foram distribuídos aleatoriamente nos seguintes tratamentos: castração cirúrgica ao nascer; castração cirúrgica ao desmame; imunocastração com três doses da vacina Bopriva® e imunocastração com quatro doses da vacina Bopriva®. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente ao acaso. Novilhos imunocastrados com três doses apresentaram maior quebra ao resfriamento e menor espessura de gordura ajustada para 100kg de carcaça fria que castrados cirurgicamente ao nascer (P<0,05). A imunocastração com três doses proporcionou incremento na participação de músculo, em relação às castrações cirúrgicas, mas reduziu a gordura em relação à castração cirúrgica ao nascimento (P<0,05). A relação músculo:osso foi superior nos imunocastrados com três doses em relação a castrados cirurgicamente no desmame (P<0,05). Apesar de variações na participação tecidual na carcaça, a castração imunológica mostrou-se viável em substituição à castração cirúrgica, não alterando os padrões qualitativos da carne.(AU)

The objective of this study was to evaluate the carcass and meat characteristics of Aberdeen Angus steers surgically castrated at two ages or immunocastrated with two protocols. Forty-eight calves we used, monitored from birth and weaned, with age and initial mean weight of six months and 160±16.54kg, respectively. The animals were randomly assigned to the following treatments: surgical castration at birth; surgical castration at weaning; immunocastration with three doses of the Bopriva ® vaccine and immunocastration with four doses of the Bopriva ® vaccine. The experimental design was completely randomized. Immunocastrated steers with three doses had a greater cooling break and lower fat thickness adjusted for 100kg of cold carcass than surgically castrated at birth (P< 0.05). Immunocastration with three doses provided an increase in muscle participation in relation to surgical castration but reduced fat in relation to surgical castration at birth (P< 0.05). The muscle:bone ratio was higher in the immunocastrated with three doses compared to surgically castrated at weaning (P< 0.05). Despite variations in tissue involvement in the carcass, the immunological castration proved to be viable to replace surgical castration, not changing the quality of the meat standards.(AU)