Resumo
Abstract Species of the genus Cordia have shown biological activities, such as anti-inflammatory, analgesic, antioxidant, antiviral, and antifungal activities. The species Cordia glabrata (MART) A.DC. Has no information concerning its phytochemical profile and possible biological activities. Thus, this study aimed to evaluate this profile in ethanolic extracts of young, adult and senescent leaves, as well as their antioxidant, photoprotective, antimicrobial, and virucidal potentials. Phytochemical analysis was performed by TLC (thin-layer chromatography) and showed the presence of flavonoids, tannins, and terpenes. The evaluation by UPLC-MS/MS (Ultra performance liquid chromatography - tandem mass spectrometer) evidenced the presence of caffeic (3.89 mgL-1), p-cumaric (6.13 mgL-1), and ferulic (0.58 mgL-1) acids, whilst, in GC/MS (Gas chromatography-mass spectrometry) analysis there was a greater amount of palmitic (51.17%), stearic (20.34%), linoleic (9.62%), and miristic (8.16%) fatty acids. The DPPH (2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl) and ABTS+ (2′-Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)) radicals were used to verify the potential antioxidant activity, observing a better activity for the leaf extract in the adult phenological stage: 54.63 ± 1.06 µgmL-1 (DPPH) and 44.21 ± 1.69 mM (ABTS). The potential photoprotective activity of the extracts was determined by spectrophotometry and the in vitro values of SPF (Sun Protection Factor) in young and adult leaves (5.47 and 5.41, respectively) showed values close to the minimum SPF of 6.0 required by ANVISA (Brazilian Health Regulatory Agency). It was not observed an antimicrobial activity for Staphylococcus aureus with a minimum inhibitory concentration of 2000 μgmL-1, however the anti-herpetic assay against the Herpes simplex virus type 2 (HSV-2) showed a potent virucidal activity at the tested concentrations with CV50 value <0.195 μgmL-1 and a Selectivity Index (SI = CC50 / CV50) greater than 448. The results obtained in this study suggest that extracts of leaves of C. glabrata in their adult phenological stage have potential antioxidant, photoprotective and virucidal activity, considering in vitro test results.
Resumo Espécies do gênero Cordia apresentam atividades biológicas, como anti-inflamatória, analgésica, antioxidante, antiviral e antifúngica. Para a espécie Cordia glabrata (MART) A.DC., ainda não existem informações sobre seu perfil fitoquímico e possíveis atividades biológicas, deste modo, o presente estudo teve como objetivo avaliar este perfil em extratos etanólicos de folhas jovens, adultas e senescentes, bem como o potencial antioxidante, fotoprotetor, antimicrobiano e virucida. A análise fitoquímica foi realizada por CCD (Cromatografia em Camada Delgada), mostrando a presença de flavonóides, taninos e terpenos. Na avaliação por CLAE EM/EM (Cromatografia Líquida de Ultra Eficiência acoplada a Espectrometria de Massas) foi evidenciado a presença dos ácidos caféico (3,89 mgL-1), p-cumárico (6,13 mgL-1) e ferúlico (0,58 mgL-1), paralelamente, na CG/EM (Cromatografia Gasosa acoplada a Espectrometria de Massas) verificou-se maior quantidade dos ácidos graxos palmítico (51,17%), esteárico (20,34%), linoléico (9,62%) e mirístico (8,16%). Os radicais DPPH (2,2-Difenil-1-picrilhidrazil) e ABTS+ (2′-Azino-bis (ácido 3-etilbenzotiazolina-6-sulfônico)) foram utilizados para verificar o potencial antioxidante, observando-se uma atividade superior para o extrato da folha em sua fase fenológica adulta: 54,63 ± 1,06 µgmL-1 (DPPH) e 44,21 ± 1,69 mM (ABTS+). A potencial atividade fotoprotetora dos extratos foi determinada espectrofotometricamente e os valores in vitro de FPS (Fator de Proteção Solar) em folhas jovens e adultas (5,47 e 5,41 respectivamente) apresentaram valores próximos ao FPS mínimo de 6,0 exigido pela ANVISA (Agência Nacional de Vigilância Sanitária). Não foi observada atividade antimicrobiana para Staphylococcus aureus sendo a concentração inibitória mínima de 2000 μgmL-1, no entanto o ensaio anti-herpético contra o vírus Herpes simplex tipo 2 (HSV-2) mostrou uma potente atividade virucida nas concentrações testadas com um valor de CV50 <0,195 μgmL-1 e um Índice de Seletividade (IS = CC50 / CV50) maior que 448. Os resultados obtidos neste estudo sugerem que extratos de folhas de C. glabrata em seu estágio fenológico adulto apresentam potencial antioxidante, fotoprotetora e virucida, considerando os resultados de testes in vitro.
Assuntos
Cordia , Anti-Infecciosos , Antivirais/farmacologia , Brasil , Extratos Vegetais/farmacologia , Cromatografia Líquida , Folhas de Planta , Espectrometria de Massas em Tandem , Antioxidantes/farmacologiaResumo
Abstract Species of the genus Cordia have shown biological activities, such as anti-inflammatory, analgesic, antioxidant, antiviral, and antifungal activities. The species Cordia glabrata (MART) A.DC. Has no information concerning its phytochemical profile and possible biological activities. Thus, this study aimed to evaluate this profile in ethanolic extracts of young, adult and senescent leaves, as well as their antioxidant, photoprotective, antimicrobial, and virucidal potentials. Phytochemical analysis was performed by TLC (thin-layer chromatography) and showed the presence of flavonoids, tannins, and terpenes. The evaluation by UPLC-MS/MS (Ultra performance liquid chromatography - tandem mass spectrometer) evidenced the presence of caffeic (3.89 mgL-1), p-cumaric (6.13 mgL-1), and ferulic (0.58 mgL-1) acids, whilst, in GC/MS (Gas chromatographymass spectrometry) analysis there was a greater amount of palmitic (51.17%), stearic (20.34%), linoleic (9.62%), and miristic (8.16%) fatty acids. The DPPH (2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl) and ABTS+ (2-Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)) radicals were used to verify the potential antioxidant activity, observing a better activity for the leaf extract in the adult phenological stage: 54.63 ± 1.06 µgmL-1 (DPPH) and 44.21 ± 1.69 mM (ABTS). The potential photoprotective activity of the extracts was determined by spectrophotometry and the in vitro values of SPF (Sun Protection Factor) in young and adult leaves (5.47 and 5.41, respectively) showed values close to the minimum SPF of 6.0 required by ANVISA (Brazilian Health Regulatory Agency). It was not observed an antimicrobial activity for Staphylococcus aureus with a minimum inhibitory concentration of 2000 gmL-1, however the anti-herpetic assay against the Herpes simplex virus type 2 (HSV-2) showed a potent virucidal activity at the tested concentrations with CV50 value 0.195 gmL-1 and a Selectivity Index (SI = CC50 / CV50) greater than 448. The results obtained in this study suggest that extracts of leaves of C. glabrata in their adult phenological stage have potential antioxidant, photoprotective and virucidal activity, considering in vitro test results.
Resumo Espécies do gênero Cordia apresentam atividades biológicas, como anti-inflamatória, analgésica, antioxidante, antiviral e antifúngica. Para a espécie Cordia glabrata (MART) A.DC., ainda não existem informações sobre seu perfil fitoquímico e possíveis atividades biológicas, deste modo, o presente estudo teve como objetivo avaliar este perfil em extratos etanólicos de folhas jovens, adultas e senescentes, bem como o potencial antioxidante, fotoprotetor, antimicrobiano e virucida. A análise fitoquímica foi realizada por CCD (Cromatografia em Camada Delgada), mostrando a presença de flavonóides, taninos e terpenos. Na avaliação por CLAE EM/EM (Cromatografia Líquida de Ultra Eficiência acoplada a Espectrometria de Massas) foi evidenciado a presença dos ácidos caféico (3,89 mgL-1), p-cumárico (6,13 mgL-1) e ferúlico (0,58 mgL-1), paralelamente, na CG/EM (Cromatografia Gasosa acoplada a Espectrometria de Massas) verificou-se maior quantidade dos ácidos graxos palmítico (51,17%), esteárico (20,34%), linoléico (9,62%) e mirístico (8,16%). Os radicais DPPH (2,2-Difenil-1-picrilhidrazil) e ABTS+ (2-Azino-bis (ácido 3-etilbenzotiazolina-6-sulfônico)) foram utilizados para verificar o potencial antioxidante, observando-se uma atividade superior para o extrato da folha em sua fase fenológica adulta: 54,63 ± 1,06 µgmL-1 (DPPH) e 44,21 ± 1,69 mM (ABTS+). A potencial atividade fotoprotetora dos extratos foi determinada espectrofotometricamente e os valores in vitro de FPS (Fator de Proteção Solar) em folhas jovens e adultas (5,47 e 5,41 respectivamente) apresentaram valores próximos ao FPS mínimo de 6,0 exigido pela ANVISA (Agência Nacional de Vigilância Sanitária). Não foi observada atividade antimicrobiana para Staphylococcus aureus sendo a concentração inibitória mínima de 2000 gmL-1, no entanto o ensaio anti-herpético contra o vírus Herpes simplex tipo 2 (HSV-2) mostrou uma potente atividade virucida nas concentrações testadas com um valor de CV50 0,195 gmL-1 e um Índice de Seletividade (IS = CC50 / CV50) maior que 448. Os resultados obtidos neste estudo sugerem que extratos de folhas de C. glabrata em seu estágio fenológico adulto apresentam potencial antioxidante, fotoprotetora e virucida, considerando os resultados de testes in vitro.
Resumo
Species of the genus Cordia have shown biological activities, such as anti-inflammatory, analgesic, antioxidant, antiviral, and antifungal activities. The species Cordia glabrata (MART) A.DC. Has no information concerning its phytochemical profile and possible biological activities. Thus, this study aimed to evaluate this profile in ethanolic extracts of young, adult and senescent leaves, as well as their antioxidant, photoprotective, antimicrobial, and virucidal potentials. Phytochemical analysis was performed by TLC (thin-layer chromatography) and showed the presence of flavonoids, tannins, and terpenes. The evaluation by UPLC-MS/MS (Ultra performance liquid chromatography - tandem mass spectrometer) evidenced the presence of caffeic (3.89 mgL-¹), p-cumaric (6.13 mgL-¹), and ferulic (0.58 mgL-¹) acids, whilst, in GC/MS (Gas chromatographymass spectrometry) analysis there was a greater amount of palmitic (51.17%), stearic (20.34%), linoleic (9.62%), and miristic (8.16%) fatty acids. The DPPH (2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl) and ABTS+ (2′-Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)) radicals were used to verify the potential antioxidant activity, observing a better activity for the leaf extract in the adult phenological stage: 54.63 ± 1.06 µgmL-¹ (DPPH) and 44.21 ± 1.69 mM (ABTS). The potential photoprotective activity of the extracts was determined by spectrophotometry and the in vitro values of SPF (Sun Protection Factor) in young and adult leaves (5.47 and 5.41, respectively) showed values close to the minimum SPF of 6.0 required by ANVISA (Brazilian Health Regulatory Agency). It was not observed an antimicrobial activity for Staphylococcus aureus with a minimum inhibitory concentration of 2000 µgmL-¹, however the anti-herpetic assay against the Herpes simplex virus type 2 (HSV-2) showed a potent virucidal activity at the tested concentrations with CV50 value <0.195 µgmL-¹ and a Selectivity Index (SI = CC50 / CV50) greater than 448. The results [...].
Espécies do gênero Cordia apresentam atividades biológicas, como anti-inflamatória, analgésica, antioxidante, antiviral e antifúngica. Para a espécie Cordia glabrata (MART) A.DC., ainda não existem informações sobre seu perfil fitoquímico e possíveis atividades biológicas, deste modo, o presente estudo teve como objetivo avaliar este perfil em extratos etanólicos de folhas jovens, adultas e senescentes, bem como o potencial antioxidante, fotoprotetor, antimicrobiano e virucida. A análise fitoquímica foi realizada por CCD (Cromatografia em Camada Delgada), mostrando a presença de flavonóides, taninos e terpenos. Na avaliação por CLAE EM/EM (Cromatografia Líquida de Ultra Eficiência acoplada a Espectrometria de Massas) foi evidenciado a presença dos ácidos caféico (3,89 mgL-¹), p-cumárico (6,13 mgL-¹) e ferúlico (0,58 mgL-¹), paralelamente, na CG/EM (Cromatografia Gasosa acoplada a Espectrometria de Massas) verificou-se maior quantidade dos ácidos graxos palmítico (51,17%), esteárico (20,34%), linoléico (9,62%) e mirístico (8,16%). Os radicais DPPH (2,2-Difenil-1-picrilhidrazil) e ABTS+ (2′-Azino-bis (ácido 3-etilbenzotiazolina-6-sulfônico)) foram utilizados para verificar o potencial antioxidante, observando se uma atividade superior para o extrato da folha em sua fase fenológica adulta: 54,63 ± 1,06 µgmL-¹ (DPPH) e 44,21 ± 1,69 mM (ABTS+). A potencial atividade fotoprotetora dos extratos foi determinada espectrofotometricamente e os valores in vitro de FPS (Fator de Proteção Solar) em folhas jovens e adultas (5,47 e 5,41 respectivamente) apresentaram valores próximos ao FPS mínimo de 6,0 exigido pela ANVISA (Agência Nacional de Vigilância Sanitária). Não foi observada atividade antimicrobiana para Staphylococcus aureus sendo a concentração inibitória mínima de 2000 µgmL-¹, no entanto o ensaio anti-herpético contra o vírus Herpes simplex tipo 2 (HSV-2) mostrou uma potente atividade virucida nas concentrações testadas [...].
Assuntos
Anti-Infecciosos/análise , Antioxidantes/análise , Compostos Fitoquímicos/análise , Compostos Fitoquímicos/biossíntese , Cordia/química , Cromatografia/métodos , Polifenóis/análise , Técnicas In VitroResumo
Species of the genus Cordia have shown biological activities, such as anti-inflammatory, analgesic, antioxidant, antiviral, and antifungal activities. The species Cordia glabrata (MART) A.DC. Has no information concerning its phytochemical profile and possible biological activities. Thus, this study aimed to evaluate this profile in ethanolic extracts of young, adult and senescent leaves, as well as their antioxidant, photoprotective, antimicrobial, and virucidal potentials. Phytochemical analysis was performed by TLC (thin-layer chromatography) and showed the presence of flavonoids, tannins, and terpenes. The evaluation by UPLC-MS/MS (Ultra performance liquid chromatography - tandem mass spectrometer) evidenced the presence of caffeic (3.89 mgL-¹), p-cumaric (6.13 mgL-¹), and ferulic (0.58 mgL-¹) acids, whilst, in GC/MS (Gas chromatographymass spectrometry) analysis there was a greater amount of palmitic (51.17%), stearic (20.34%), linoleic (9.62%), and miristic (8.16%) fatty acids. The DPPH (2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl) and ABTS+ (2′-Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)) radicals were used to verify the potential antioxidant activity, observing a better activity for the leaf extract in the adult phenological stage: 54.63 ± 1.06 µgmL-¹ (DPPH) and 44.21 ± 1.69 mM (ABTS). The potential photoprotective activity of the extracts was determined by spectrophotometry and the in vitro values of SPF (Sun Protection Factor) in young and adult leaves (5.47 and 5.41, respectively) showed values close to the minimum SPF of 6.0 required by ANVISA (Brazilian Health Regulatory Agency). It was not observed an antimicrobial activity for Staphylococcus aureus with a minimum inhibitory concentration of 2000 µgmL-¹, however the anti-herpetic assay against the Herpes simplex virus type 2 (HSV-2) showed a potent virucidal activity at the tested concentrations with CV50 value <0.195 µgmL-¹ and a Selectivity Index (SI = CC50 / CV50) greater than 448. The results [...].(AU)
Espécies do gênero Cordia apresentam atividades biológicas, como anti-inflamatória, analgésica, antioxidante, antiviral e antifúngica. Para a espécie Cordia glabrata (MART) A.DC., ainda não existem informações sobre seu perfil fitoquímico e possíveis atividades biológicas, deste modo, o presente estudo teve como objetivo avaliar este perfil em extratos etanólicos de folhas jovens, adultas e senescentes, bem como o potencial antioxidante, fotoprotetor, antimicrobiano e virucida. A análise fitoquímica foi realizada por CCD (Cromatografia em Camada Delgada), mostrando a presença de flavonóides, taninos e terpenos. Na avaliação por CLAE EM/EM (Cromatografia Líquida de Ultra Eficiência acoplada a Espectrometria de Massas) foi evidenciado a presença dos ácidos caféico (3,89 mgL-¹), p-cumárico (6,13 mgL-¹) e ferúlico (0,58 mgL-¹), paralelamente, na CG/EM (Cromatografia Gasosa acoplada a Espectrometria de Massas) verificou-se maior quantidade dos ácidos graxos palmítico (51,17%), esteárico (20,34%), linoléico (9,62%) e mirístico (8,16%). Os radicais DPPH (2,2-Difenil-1-picrilhidrazil) e ABTS+ (2′-Azino-bis (ácido 3-etilbenzotiazolina-6-sulfônico)) foram utilizados para verificar o potencial antioxidante, observando se uma atividade superior para o extrato da folha em sua fase fenológica adulta: 54,63 ± 1,06 µgmL-¹ (DPPH) e 44,21 ± 1,69 mM (ABTS+). A potencial atividade fotoprotetora dos extratos foi determinada espectrofotometricamente e os valores in vitro de FPS (Fator de Proteção Solar) em folhas jovens e adultas (5,47 e 5,41 respectivamente) apresentaram valores próximos ao FPS mínimo de 6,0 exigido pela ANVISA (Agência Nacional de Vigilância Sanitária). Não foi observada atividade antimicrobiana para Staphylococcus aureus sendo a concentração inibitória mínima de 2000 µgmL-¹, no entanto o ensaio anti-herpético contra o vírus Herpes simplex tipo 2 (HSV-2) mostrou uma potente atividade virucida nas concentrações testadas [...].(AU)
Assuntos
Cordia/química , Compostos Fitoquímicos/análise , Compostos Fitoquímicos/biossíntese , Cromatografia/métodos , Polifenóis/análise , Antioxidantes/análise , Anti-Infecciosos/análise , Técnicas In VitroResumo
Abstract In the current report, we studied the possible inhibitors of COVID-19 from bioactive constituents of Centaurea jacea using a threefold approach consisting of quantum chemical, molecular docking and molecular dynamic techniques. Centaurea jacea is a perennial herb often used in folk medicines of dermatological complaints and fever. Moreover, anticancer, antioxidant, antibacterial and antiviral properties of its bioactive compounds are also reported. The Mpro (Main proteases) was docked with different compounds of Centaurea jacea through molecular docking. All the studied compounds including apigenin, axillarin, Centaureidin, Cirsiliol, Eupatorin and Isokaempferide, show suitable binding affinities to the binding site of SARS-CoV-2 main protease with their binding energies -6.7 kcal/mol, -7.4 kcal/mol, -7.0 kcal/mol, -5.8 kcal/mol, -6.2 kcal/mol and -6.8 kcal/mol, respectively. Among all studied compounds, axillarin was found to have maximum inhibitor efficiency followed by Centaureidin, Isokaempferide, Apigenin, Eupatorin and Cirsiliol. Our results suggested that axillarin binds with the most crucial catalytic residues CYS145 and HIS41 of the Mpro, moreover axillarin shows 5 hydrogen bond interactions and 5 hydrophobic interactions with various residues of Mpro. Furthermore, the molecular dynamic calculations over 60 ns (6×106 femtosecond) time scale also shown significant insights into the binding effects of axillarin with Mpro of SARS-CoV-2 by imitating protein like aqueous environment. From molecular dynamic calculations, the RMSD and RMSF computations indicate the stability and dynamics of the best docked complex in aqueous environment. The ADME properties and toxicity prediction analysis of axillarin also recommended it as safe drug candidate. Further, in vivo and in vitro investigations are essential to ensure the anti SARS-CoV-2 activity of all bioactive compounds particularly axillarin to encourage preventive use of Centaurea jacea against COVID-19 infections.
Resumo No presente relatório, estudamos os possíveis inibidores de Covid-19 de constituintes bioativos de Centaurea jacea usando uma abordagem tripla que consiste em técnicas de química quântica, docking molecular e dinâmica molecular. Centaurea jacea é uma erva perene frequentemente usada em remédios populares de doenças dermatológicas e febre. Além disso, as propriedades anticâncer, antioxidante, antibacteriana e antiviral de seus compostos bioativos também são relatadas. A Mpro (proteases principais) foi acoplada a diferentes compostos de Centaurea jacea por meio de docking molecular. Todos os compostos estudados, incluindo apigenina, axilarina, Centaureidina, Cirsiliol, Eupatorina e Isokaempferide, mostram afinidades de ligação adequadas ao sítio de ligação da protease principal SARS-CoV-2 com suas energias de ligação -6,7 kcal / mol, -7,4 kcal / mol, - 7,0 kcal / mol, -5,8 kcal / mol, -6,2 kcal / mol e -6,8 kcal / mol, respectivamente. Dentre todos os compostos estudados, a axilarina apresentou eficiência máxima de inibidor, seguida pela Centaureidina, Isokaempferida, Apigenina, Eupatorina e Cirsiliol. Nossos resultados sugeriram que a axilarina se liga aos resíduos catalíticos mais cruciais CYS145 e HIS41 do Mpro, além disso a axilarina mostra 5 interações de ligações de hidrogênio e 5 interações hidrofóbicas com vários resíduos de Mpro. Além disso, os cálculos de dinâmica molecular em uma escala de tempo de 60 ns (6 × 106 femtossegundos) também mostraram percepções significativas sobre os efeitos de ligação da axilarina com Mpro de SARS-CoV-2 por imitação de proteínas como o ambiente aquoso. A partir de cálculos de dinâmica molecular, os cálculos RMSD e RMSF indicam a estabilidade e dinâmica do melhor complexo ancorado em ambiente aquoso. As propriedades ADME e a análise de previsão de toxicidade da axilarina também a recomendaram como um candidato a medicamento seguro. Além disso, as investigações in vivo e in vitro são essenciais para garantir a atividade anti-SARS-CoV-2 de todos os compostos bioativos, particularmente a axilarina, para encorajar o uso preventivo de Centaurea jacea contra infecções por Covid-19.
Assuntos
Humanos , Preparações Farmacêuticas , Centaurea , COVID-19 , Inibidores de Proteases , Simulação de Dinâmica Molecular , Simulação de Acoplamento Molecular , SARS-CoV-2Resumo
Caprine arthritis encephalitis is a lentiviral disease that leads to considerable losses in goat farming. In the acute phase of viral infection, though antiviral antibodies are produced by the host's immune system, they are not sufficient to be detected by serological tests. Acute infections begin with an incubation period, during which the viral genome replicates and host innate responses are initiated. Matrix metalloproteinases (MMPs) are enzymes that play an important role in the physiological and pathological processes of tissue remodeling. The present study aimed to evaluate the expression of MMPs and their activity in the blood serum of male goats experimentally infected with caprine arthritis encephalitis virus (CAEV). Five dairy male goats, aged 3-4 years, were intravenously inoculated with CAEV Cork strain (titer: 105-6 TCID50/mL) after being tested negative for CAEV thrice at consecutive intervals of 30 days using western blot analysis and nested-PCR. The study included three stages: S1 or pre-infection stage; S2 or seroconversion stage, corresponding to the occurrence of first seroconversion; and S3 or post-seroconversion stage, corresponding to 23 weeks after seroconversion. Zymography was performed for the samples using gelatin zymography gels (12.5%), which were subjected to electrophoresis at 170V, 1A, and 300W for 50-70 min. The density of MMP-2 was found to be lower at S1 (1456.20 pixels) than that at S2 and S3 (1943.80 and 2104.40 pixels, respectively) (P < 0.05); and the density of MMP-9 was found to be lower at S3 (133.60 pixels) than that at S1 and S2 (359.60 and 370.60 pixels, respectively). The density of proMMP-2 was low at S1 and S3 (130.45 and 145.20 pixels, respectively). On the other hand, the density of proMMP-9 was statistically different between S1 and S3 (89.22 vs. 415.60 pixels). Both proMMP-2 and proMMP-9 were absent at S2. Thus, MMP-2 and MMP9 exhibited opposite behaviors depending on the stage [...].
A encefalite por artrite caprina é uma doença lentiviral que leva a perdas consideráveis na criação de caprinos. Na fase aguda da infecção viral, embora os anticorpos antivirais sejam produzidos pelo sistema imunológico do hospedeiro, eles não são suficientes para serem detectados por testes sorológicos. As infecções agudas começam com um período de incubação, durante o qual o genoma viral se replica e as respostas inatas do hospedeiro são iniciadas. As metaloproteinases da matriz (MMPs) são enzimas que desempenham um papel importante nos processos fisiológicos e patológicos da remodelação tecidual. O presente estudo teve como objetivo avaliar a expressão de MMPs e sua atividade no soro sanguíneo de reprodutores caprinos infectados experimentalmente pelo vírus da encefalite por artrite caprina(CAEV). Cinco machos caprinos, com idades entre 3-4 anos, foram inoculadas por via intravenosa com a cepa de CAEV Cork (título: 105-6 TCID50/mL) após serem testados negativamente para CAEV três vezes em intervalos consecutivos de 30 dias usando a análise de western blot e nested-PCR. O estudo incluiu três etapas: estágio S1 ou pré-infecção; S2 ou estágio de soroconversão, correspondente à ocorrência de primeira soroconversão; e S3 ou pós-soroconversão, correspondendo a 23 semanas após a soroconversão. A zimografia foi realizada para as amostras utilizando gel de gelatina (12,5%), que foram submetidos à eletroforese em 170V, 1A e 300W por 50-70 min. Verificou-se que a densidade de MMP-2era menor em S1 (1456,20 pixels) do que em S2 e S3 (1943,80 e 2104,40 pixels, respectivamente) (P <0,05); e a densidade de MMP-9 foi menor em S3 (133,60 pixels) do que em S1 e S2 (359,60 e 370,60 pixels, respectivamente). A densidade do proMMP-2 era baixa em S1 e S3 (130,45 e 145,20 pixels, respectivamente). Por outro lado, a densidade do proMMP-9 foi estatisticamente diferente entre S1 e S3(89,22 vs. 415,60 pixels). ProMMP-2 e proMMP-9 estavam ausentes no S2. Assim, MMP-2 e [...].
Assuntos
Masculino , Animais , Infecções por Lentivirus/enzimologia , Infecções por Lentivirus/sangue , Infecções por Lentivirus/veterinária , Lentivirus Ovinos-Caprinos/patogenicidade , Metaloproteases/sangue , Ruminantes/sangue , Ruminantes/virologiaResumo
Caprine arthritis encephalitis is a lentiviral disease that leads to considerable losses in goat farming. In the acute phase of viral infection, though antiviral antibodies are produced by the host's immune system, they are not sufficient to be detected by serological tests. Acute infections begin with an incubation period, during which the viral genome replicates and host innate responses are initiated. Matrix metalloproteinases (MMPs) are enzymes that play an important role in the physiological and pathological processes of tissue remodeling. The present study aimed to evaluate the expression of MMPs and their activity in the blood serum of male goats experimentally infected with caprine arthritis encephalitis virus (CAEV). Five dairy male goats, aged 3-4 years, were intravenously inoculated with CAEV Cork strain (titer: 105-6 TCID50/mL) after being tested negative for CAEV thrice at consecutive intervals of 30 days using western blot analysis and nested-PCR. The study included three stages: S1 or pre-infection stage; S2 or seroconversion stage, corresponding to the occurrence of first seroconversion; and S3 or post-seroconversion stage, corresponding to 23 weeks after seroconversion. Zymography was performed for the samples using gelatin zymography gels (12.5%), which were subjected to electrophoresis at 170V, 1A, and 300W for 50-70 min. The density of MMP-2 was found to be lower at S1 (1456.20 pixels) than that at S2 and S3 (1943.80 and 2104.40 pixels, respectively) (P < 0.05); and the density of MMP-9 was found to be lower at S3 (133.60 pixels) than that at S1 and S2 (359.60 and 370.60 pixels, respectively). The density of proMMP-2 was low at S1 and S3 (130.45 and 145.20 pixels, respectively). On the other hand, the density of proMMP-9 was statistically different between S1 and S3 (89.22 vs. 415.60 pixels). Both proMMP-2 and proMMP-9 were absent at S2. Thus, MMP-2 and MMP9 exhibited opposite behaviors depending on the stage [...].(AU)
A encefalite por artrite caprina é uma doença lentiviral que leva a perdas consideráveis na criação de caprinos. Na fase aguda da infecção viral, embora os anticorpos antivirais sejam produzidos pelo sistema imunológico do hospedeiro, eles não são suficientes para serem detectados por testes sorológicos. As infecções agudas começam com um período de incubação, durante o qual o genoma viral se replica e as respostas inatas do hospedeiro são iniciadas. As metaloproteinases da matriz (MMPs) são enzimas que desempenham um papel importante nos processos fisiológicos e patológicos da remodelação tecidual. O presente estudo teve como objetivo avaliar a expressão de MMPs e sua atividade no soro sanguíneo de reprodutores caprinos infectados experimentalmente pelo vírus da encefalite por artrite caprina(CAEV). Cinco machos caprinos, com idades entre 3-4 anos, foram inoculadas por via intravenosa com a cepa de CAEV Cork (título: 105-6 TCID50/mL) após serem testados negativamente para CAEV três vezes em intervalos consecutivos de 30 dias usando a análise de western blot e nested-PCR. O estudo incluiu três etapas: estágio S1 ou pré-infecção; S2 ou estágio de soroconversão, correspondente à ocorrência de primeira soroconversão; e S3 ou pós-soroconversão, correspondendo a 23 semanas após a soroconversão. A zimografia foi realizada para as amostras utilizando gel de gelatina (12,5%), que foram submetidos à eletroforese em 170V, 1A e 300W por 50-70 min. Verificou-se que a densidade de MMP-2era menor em S1 (1456,20 pixels) do que em S2 e S3 (1943,80 e 2104,40 pixels, respectivamente) (P <0,05); e a densidade de MMP-9 foi menor em S3 (133,60 pixels) do que em S1 e S2 (359,60 e 370,60 pixels, respectivamente). A densidade do proMMP-2 era baixa em S1 e S3 (130,45 e 145,20 pixels, respectivamente). Por outro lado, a densidade do proMMP-9 foi estatisticamente diferente entre S1 e S3(89,22 vs. 415,60 pixels). ProMMP-2 e proMMP-9 estavam ausentes no S2. Assim, MMP-2 e [...].(AU)
Assuntos
Animais , Masculino , Lentivirus Ovinos-Caprinos/patogenicidade , Infecções por Lentivirus/sangue , Infecções por Lentivirus/enzimologia , Infecções por Lentivirus/veterinária , Ruminantes/sangue , Ruminantes/virologia , Metaloproteases/sangueResumo
The genus Streptomyces is associated with the ability to produce and excrete a variety of bioactive compounds, such as antibiotic, antifungal and antiviral. Biological active polyketide and peptide compounds with applications in medicine, agriculture and biochemical research are synthesized by PKS-I and NRPS genes. The evaluation of the presence of these genes associated with the biosynthesis of secondary metabolites in different phytopathogenic Streptomyces strains were performed using degenerated primers. The positive signal was observed in 58/63 Streptomyces strains for NRPS gene, 43/63 for PKS-I, and for PKS-II all the 63 strains showed positive signal of amplification. These strains also were tested with double layer agar-well technique against bacterial with clinical importance, and it was possible to observe the Streptomyces spp. strains were able to inhibit the growth of 14, 20, 13 and 3 isolates Gram-positive and Gram-negative bacteria, Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Bacillus cereus (ATCC 14579), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853) and Escherichia coli (ATCC 11775) respectively. The Streptomyces sp. strains IBSBF 2019 and IBSBF 2397 showed antibacterial activity against all four bacteria-target tested.(AU)
O gênero Streptomyces apresenta alta capacidade de produzir e excretar uma grande variedade de compostos biologicamente ativos, como antibióticos, antifúngicos e antivirais. Compostos biologicamente ativos de policetídeos e peptídeos com aplicações na medicina, agricultura e pesquisas bioquímicas são sintetizados pelos genes PKS-I e NRPS. A avaliação da presença desses genes associados à biossíntese de metabólitos secundários em diferentes linhagens de Streptomyces fitopatogênicas foi realizada através do uso de primers degenerados. O sinal positivo foi observado em 58/63 linhagens de Streptomyces para o gene NRPS, 43/63 para o gene PKS-I e, para o gene PKS-II, todas as 63 linhagens apesentaram o sinal positivo de amplificação. Essas linhagens também foram testadas através da técnica de dupla camada contra bactérias de importância clínica e foi possível observar que as linhagens de Streptomyces spp. foram capazes de inibir o crescimento de 14, 20, 13 e 3 isolados de bactérias Gram-positivas e Gram-negativas, Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Bacillus cereus (ATCC 14579), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853) e Escherichia coli (ATCC 11775), respectivamente. As linhagens de Streptomyces sp. ISBSF 2019 e 2397 apresentaram atividade antibacteriana contra todas as bactérias-alvo testadas.(AU)
Assuntos
Pseudomonas aeruginosa/crescimento & desenvolvimento , Staphylococcus aureus/crescimento & desenvolvimento , Streptomyces/metabolismo , Bacillus cereus/crescimento & desenvolvimento , Escherichia coli/crescimento & desenvolvimento , Antibacterianos/metabolismo , Peptídeo Sintases/genética , Streptomyces/genética , Amplificação de Genes , Reação em Cadeia da Polimerase , Análise de Sequência de DNA , Primers do DNA , Policetídeo Sintases/genética , Antibacterianos/farmacologiaResumo
The genus Streptomyces is associated with the ability to produce and excrete a variety of bioactive compounds, such as antibiotic, antifungal and antiviral. Biological active polyketide and peptide compounds with applications in medicine, agriculture and biochemical research are synthesized by PKS-I and NRPS genes. The evaluation of the presence of these genes associated with the biosynthesis of secondary metabolites in different phytopathogenic Streptomyces strains were performed using degenerated primers. The positive signal was observed in 58/63 Streptomyces strains for NRPS gene, 43/63 for PKS-I, and for PKS-II all the 63 strains showed positive signal of amplification. These strains also were tested with double layer agar-well technique against bacterial with clinical importance, and it was possible to observe the Streptomyces spp. strains were able to inhibit the growth of 14, 20, 13 and 3 isolates Gram-positive and Gram-negative bacteria, Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Bacillus cereus (ATCC 14579), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853) and Escherichia coli (ATCC 11775) respectively. The Streptomyces sp. strains IBSBF 2019 and IBSBF 2397 showed antibacterial activity against all four bacteria-target tested.(AU)
O gênero Streptomyces apresenta alta capacidade de produzir e excretar uma grande variedade de compostos biologicamente ativos, como antibióticos, antifúngicos e antivirais. Compostos biologicamente ativos de policetídeos e peptídeos com aplicações na medicina, agricultura e pesquisas bioquímicas são sintetizados pelos genes PKS-I e NRPS. A avaliação da presença desses genes associados à biossíntese de metabólitos secundários em diferentes linhagens de Streptomyces fitopatogênicas foi realizada através do uso de primers degenerados. O sinal positivo foi observado em 58/63 linhagens de Streptomyces para o gene NRPS, 43/63 para o gene PKS-I e, para o gene PKS-II, todas as 63 linhagens apesentaram o sinal positivo de amplificação. Essas linhagens também foram testadas através da técnica de dupla camada contra bactérias de importância clínica e foi possível observar que as linhagens de Streptomyces spp. foram capazes de inibir o crescimento de 14, 20, 13 e 3 isolados de bactérias Gram-positivas e Gram-negativas, Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Bacillus cereus (ATCC 14579), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853) e Escherichia coli (ATCC 11775), respectivamente. As linhagens de Streptomyces sp. ISBSF 2019 e 2397 apresentaram atividade antibacteriana contra todas as bactérias-alvo testadas.(AU)
Assuntos
Pseudomonas aeruginosa/crescimento & desenvolvimento , Staphylococcus aureus/crescimento & desenvolvimento , Streptomyces/metabolismo , Bacillus cereus/crescimento & desenvolvimento , Escherichia coli/crescimento & desenvolvimento , Antibacterianos/metabolismo , Peptídeo Sintases/genética , Streptomyces/genética , Amplificação de Genes , Reação em Cadeia da Polimerase , Análise de Sequência de DNA , Primers do DNA , Policetídeo Sintases/genética , Antibacterianos/farmacologiaResumo
A injúria tecidual por isquemia é bastante nociva e, em situações de reperfusão, pode provocar a formação exacerbada de espécies reativas do oxigênio (ERO), que interferem diretamente na cascata de sinalização celular, com efeitos deletérios como a peroxidação lipídica da membrana celular, a oxidação de proteínas e a lesão ao DNA. As pesquisas têm mostrado os efeitos benéficos dos antioxidantes presentes nos vegetais e, entre eles encontrase a curcumina, um pigmento antioxidante do rizoma da Curcuma longa L., conhecida como açafrão ou cúrcuma. Essa planta demonstra atividades farmacológicas, que são relatadas desde a antiguidade, como antioxidante, anti-inflamatório, antibacteriano, antifúngico, antitumoral, antiparasitário, antiviral, cicatrizante, hipoglicemiante, neuroprotetor e imunomodulador. Diante disso, objetivou-se com essa pesquisa avaliar a possível ação antioxidante da curcumina sobre as células endoteliais de veia umbilical humana (HUVEC), em cultivo, submetidas e não submetidas ao estresse oxidativo (EO). Este estudo foi dividido em três fases. Na primeira fase avaliou-se a ação da curcumina padrão (Sigma Aldrich, Referência C1386) em diferentes concentrações (0 mol, 20 mol, 50 mol, 100 mol e 1000 mol) e por três tempos diferentes de exposição contínua (24 h, 48 h e 72 h). O ensaio de EO foi induzido por meio da exposição celular ao peróxido de hidrogênio a 1% e por meio do ensaio de redução do MTT (metil-tiazolil-tetrazólio), pôde-se avaliar a viabilidade celular e a citotoxicidade. Na segunda fase do estudo determinou-se a presença e o teor de compostos antioxidantes no extrato etanólico da Curcuma longa L. (EEC) proveniente de Mara Rosa- GO. As amostras do EEC foram submetidas aos testes de Folin-Ciocalteau, à captura do radical DPPH (2,2-difenil-1- picril-hidrazil) e ao método de HPLC-Fluorescence. Na terceira fase da pesquisa avaliou-se o efeito do EEC em cultivos de HUVEC sob as mesmas condições experimentais da primeira fase, além disso, pesquisou-se as vias de sinalização tanto de sobrevivência, quanto de morte celular possivelmente ocorridas. Os resultados demonstraram que as células tratadas com 20 mol de curcumina padrão e nos tempos de 24 h e 48 h apresentaram melhor viabilidade celular e consequentemente, menor citotoxicidade. A ocorrência do estresse oxidativo foi validada pelo decréscimo na viabilidade celular dentro das três variáveis de tempo utilizadas, com uma proteção antioxidativa na dosagem de 50 mol de curcumina. No EEC pôde-se identificar o ácido gálico, a curcumina (16,7%) e a quantidade de 18,1 g/mL de extrato, para se reduzir em 50% o radical DPPH. Os resultados da terceira fase indicaram que o EEC possivelmente amenizou a injúria celular por estresse oxidativo, na dosagem de 100 g/ml, por diminuição da imunoexpressão de caspase3 e pelo aumento da sinalização da rota de sobrevivência SIRT1. Concluiu-se que tanto a curcumina pura, quanto o EEC pode aumentar a viabilidade celular de células endoteliais sob estresse oxidativo.
Ischemic tissue injury is quite harmful, however, reperfusion causes an exacerbated level of reactive oxygen species (ROS), which directly interfere in the cell signaling cascade, with cell deleterious effects such as lipid peroxidation, protein oxidation and DNA damage. Researches had shown the beneficial effects of antioxidants present in vegetables and among them is curcumin, an antioxidant pigment found in Curcuma longa L. rhizomes, known as turmeric or saffron. This plant has demonstrated pharmacological activities, which have been reported since antiquity, as antioxidant, anti-inflammatory, antibacterial, antifungal, antitumor, antiparasitic, antiviral, healing, hypoglycemic, neuroprotective and immunomodulatory. Therefore, the aim of this research was to evaluate the possible antioxidant action of curcumin on human umbilical vein endothelial cells (HUVEC), in culture, submitted and not submitted to oxidative stress (EO). This study was divided into three phases. In the first time, the action of standard curcumin (Sigma Aldrich, Reference C1386) was evaluated at different concentrations (0 mol, 20 mol, 50 mol, 100 mol and 1000 mol) and for three different times of continuous exposure (24 h, 48 h h and 72 h). The EO assay was induced through cellular exposure to 1% hydrogen peroxide and through the MTT (methyl-thiazolyltetrazolium) reduction assay, cell viability and cytotoxicity could be assessed. In the second phase, we determinated the presence and content of antioxidant compounds in the ethanol extract of Curcuma longa L. (EEC) from Mara Rosa-GO. EEC samples were subjected to Folin-Ciocalteau tests, capture of the DPPH radical (2,2-diphenyl-1-picryl-hydrazil) and the HPLC-Fluorescence method. In the third phase of this research, the effect of EEC in HUVEC cultures was evaluated under the same experimental conditions as the first phase, in addition with the possible signaling pathways of both survival and cell death. The results showed that the cells treated with 20 mol of standard curcumin and at 24 h and 48 h showed better cell viability and, consequently, less cytotoxicity. The occurrence of oxidative stress was validated by the decrease in cell viability within the three times variables used, but an antioxidative protection was found at 50 mol of curcumin. In EEC, we identified gallic acid, curcumin (16.7%) and the amount of 18.1 g / mL of extract, to reduce the DPPH radical by 50%. Results from the third phase indicated that the EEC possibly alleviated cell damage by oxidative stress at the dosage of 100 g / ml, by decreasing the immunoexpression of caspase3 and by increasing the signaling of the SIRT1 survival route. It was concluded that both pure curcumin and EEC can improve the cell viability of HUVEC under oxidative stress.
Resumo
O interesse científico nas moléculas de líquido iônico (LIs) é crescente, principalmente devido à suas propriedades químicas e físicas, que os tornam moléculas mais estáveis e de certa versatilidade. Algumas moléculas de LIs possuem um grupo cabeça hidrofílico, e carregado, e pelo menos uma cauda hidrofóbica, o que lhes confere natureza anfifílica. Algumas ações biológicas já foram descritas para LIs, tais como, antifúngica, antibiofilme e larvicida. Deste modo, buscou-se avaliar o potencial antiviral de 9 LIs de anel imidazol catiônico com diferentes cadeias R substituintes e dois ânions diferentes, 1 composto com anel imidazol neutro e 1 LI com anel piridínico, frente a três vírus com características diferentes: dois com genoma DNA, um envelopado Human alphaherpesvirus 1 (HSV-1) e outro não envelopado Human mastadenovirus C (HAdV), e um outro com genoma RNA e envelopado Zika virus (ZIKV). Primeiramente, ensaios de citotoxicidade foram realizados nas linhagens e nos tempos necessários para a replicação de cada um dos vírus, utilizando-se duas metodologias: a de incorporação do corante vermelho neutro e a de redução do sal MTT. Para avaliar o potencial antiviral, foram realizados ensaios de redução do número de placas, utilizando concentrações estabelecidas a partir dos resultados de CC50. O potencial virucida também foi estimado frente ao ZIKV, para 4 compostos com comprimentos de cadeia substituintes e ânions diferentes. Os resultados de potencial antivirais mais significativos foram encontrados para o ZIKV, com inibição de 51,7% para [C10MImMeS] em 2,50 µM. Para o HSV-1 os valores de redução foram inferiores a 37% para todos os compostos. Efeitos pró-virais foram encontrados para HAdV; porém, também foi observada redução (33,3%) do número de placas para [(C10)2MImCl] em 0,20 µM. Quanto à ação virucida, destaca-se o [C18MImCl] com redução de 81,5% (2,50 µM). Apesar de nenhuma ação antiviral completa ter sido observada, [C10MImMeS] e [C18MImCl] apresentaram inibição parcial frente ao vírus envelopado de RNA. Além disto, os LIs testados apresentaram potencial virucida frente ao ZIKV. Sendo assim a estrutura destas moléculas pode ser modificada visando melhorar sua atividade frente a agentes virais.
The scientific interest on the ionic liquid molecules (ILs) is growing, primarily their chemical and physical properties, which make them molecules more stable and versatile. Some IL molecules have a hydrophilic, charged "head" group, and at least one hydrophobic tail, which give them an amphiphilic nature. Some actions have been described for ILs, such as antibiofilm and antifungal. Thus, the antiviral potential of 9 ILs imidazole ring with different substituent R chains and two different anions, 1 with neutral imidazole ring and 1 with pyridine ring. ILs were tested against three viruses with different characteristics: two with a DNA genome, one enveloped Human alphaherpesvirus 1 (HSV-1) and one non-enveloped Human mastadenovirus C (HAdV), and another with RNA genome and enveloped Zika virus (ZIKV). Firstly, cytotoxicity assays were performed in the cells and in the time required for the replication of each virus, using two methodologies, uptake of Neutral Red and the reduction of the MTT salt. To evaluate the antiviral potential, assays plaque were performed using established concentrations from results of CC50. The virucidal potential was also estimated, for 4 compounds, with different substituents and anion chain lengths, for Zika virus. The most significant antiviral potential results were found for ZIKV, with 51.7% inhibitions for [C10MImMeS] (2.50 µM). For HSV-1 the reduction was lower than 37% for all compounds. Pro-viral effects were found for HAdV; however, a reduction of 33.3% for [(C10) 2MImCl] was also observed in 0.20 M. Virucidal action was higher for [C18MImCl] with reductions of 81.5% (2.50 µM). Although no complete antiviral action has been observed, we can highlight the potential of these molecules, mainly the potential of [C10MImMeS] and [C18MImCl], against enveloped RNA viruses. In addition, ILs have a high virucidal potential against ZIKV. Thus, some changes in the structures of these molecules may improve their activity against viral agents.
Resumo
No sistema de terminação de bovinos em semi confinamento são necessárias estratégias nutricionais para que ocorra a redução do ciclo produtivo. A suplementação com aditivos pode ser uma dessas medidas para auxiliar no aproveitamento dos alimentos e produzir carne de qualidade. De modo geral, estas substâncias são ionóforos ou antibióticos. Todavia, essas substâncias estão proibidas na União Europeia e em vias de proibição nos Estados Unidos. Desta forma, é necessário o desenvolvimento de substâncias alternativas e seguras na alimentação animal. Assim sendo, os aditivos naturais tornaram-se objetivos de várias pesquisas no mundo. Entre esses aditivos, os óleos essenciais e os óleos vegetais têm merecido destaque. Entretanto, para sua adição na alimentação animal é necessário caracterizar os vários produtos de plantas, bem como conhecer o modo de ação destas substâncias, que possuem comprovado efeito flavorizante, estimulante da secreção enzimática, ação antimicrobiana, antioxidante, anti-inflamatória, antiparasitária, antiviral, entre outras. Ainda mais, esses compostos têm uma ampla variedade de efeitos sobre a qualidade da carne, podendo retardar o processo de oxidação aumentando o tempo de vida útil, além de serem incorporados nos músculos e poder contribuir na saúde do consumidor, incluindo efeitos positivos sobre as doenças cardiovasculares, alguns tumores, processos inflamatórios, e em geral, doenças nas quais ocorre uma proliferação descontrolada de radicais livres. Este trabalho foi realizado para avaliar o desempenho animal, as características de carcaça e a qualidade da carne de 40 novilhos mestiços (½ Bons Mara x ½ Nelore) com cerca de 20 meses de idade, peso corporal inicial médio de 416,9 ± 5,56, sem adição (controle) ou com níveis (1.500, 3.000, 4.500 ou 6000 mg/dia/animal) de uma mistura de aditivos naturais (AN), contendo óleo essencial de cravo, óleo de mamona, óleo de caju e uma mistura de princípios ativos microencapsulados de eugenol, timol e vanilina durante 80 dias sobre o desempenho animal e qualidade da carne. Os resultados sugerem que, embora o uso da mistura de óleos não tenha modificado o ganho de peso dos animais, o suplemento teve efeito curvo linear na ingestão de forragem, e consequentemente na matéria seca, proteína bruta, fibra em detergente neutro e carboidratos não fibrosos. A maior ingestão de matéria seca foi observado no tratamento com 1.500 mg e a menor ingestão no tratamento com 6.000 mg. A digestibilidade da proteína foi menor e dos carboidratos não fibrosos foi maior nos tratamentos com AN em todas as dosagens. Um aumento nas concentrações de nitrogênio amoniacal ruminal, e nos ácidos graxos voláteis propiônico e isovalérico foram observados nos tratamentos com AN em todas as dosagens. Não foram observadas diferenças nos parâmetros macroscópicos do líquido ruminal (movimentos ruminais, cor, odor, consistência, sedimentação e flutuação, potencial redox e contagem e viabilidade de protozoários). As características de carcaça não foram alteradas pelos tratamentos, mas houve alteração na composição corporal, aumentando a deposição muscular nos animais suplementados com AN. Os tratamentos não tiveram efeito nas perdas por gotejamento da carcaça. As perdas de descongelamento/armazenamento, cozimento, textura, cor, atividade antioxidante e oxidação lipídica foram avaliadas ao longo do tempo de armazenamento em embalagem a vácuo nos dias 1, 7 e 14 e foram observadas diferenças. Houve um efeito quadrático nas perdas por descongelamento/armazenamento no primeiro dia de armazenamento da carne, sendo que o tratamento controle perdeu menos líquido que os demais. No entanto, nas perdas por cocção esse mesmo tratamento no sétimo dia de armazenamento perdeu mais líquidos. A força de cisalhamento foi similar entre os tratamentos no dia 1 e no dia 7 de armazenamento. No dia 14, foi observado um efeito linear; a carne do tratamento controle estava mais macia. Um efeito linear na luminosidade da carne foi observado. A carne de animais do tratamento controle estava mais clara e potencialmente mais atraente para o consumidor no dia 1 de armazenamento. Após 7 e 14 dias de armazenamento, as carnes foram semelhantes entre os tratamentos. Os parâmetros de intensidade de vermelho e amarelo não foram alterados. No entanto, ao avaliar o potencial antioxidante da carne, observou-se que no dia 1 de armazenamento houve um maior número de compostos fenólicos e uma maior atividade antioxidante (DPPH e FRAP) nos tratamentos com AN. Apesar dos valores mais altos de oxidação lipídica serem notados no primeiro dia de armazenamento nos tratamentos que receberam AN na dieta, foi observado também que tratamentos com maiores dosagens de aditivos retardaram a oxidação lipídica ao longo do tempo de armazenamento. O tempo de armazenamento afetou as perdas por descongelamento/armazenamento, perdas por cocção, textura, cor e oxidação lipídica. No entanto esses resultados são devido ao processo de proteólise. Em conjunto, estes resultados sugerem que a mistura de aditivos naturais tem potencial no uso na alimentação animal e pode melhorar a estabilidade da carne, no entanto, ainda devem ser estudados com relação a dose a ser empregada em animais a pasto.
In the grazing system for cattle, nutritional strategies are necessary to shorten the production cycle; supplementation with additives can be used to maximize nutrient use and meat quality. In general, these substances are ionophores or antibiotics. However, these substances are banned in the European Union and limited use in the United States. In this way, the development of safe alternative substances in animal feed is necessary. Thus, natural additives are the subject of much research around the world. Among these additives, essential oils and vegetable oils has greater prominence. However, for their addition in animal feed it is necessary to characterize the various plant products as well as to know the mode of action of these substances. These substances have proven flavoring effect, stimulating enzymatic secretion, antimicrobial action, antioxidant, anti-inflammatory, antiparasitic, antiviral, among other actions. Furthermore, these compounds have a many of effects on the quality of the meat, which can slow down the oxidation process and increase the shelf life, as well as being incorporated into the muscles and contributing to consumer health, including positive effects on cardiovascular diseases, some tumors, inflammatory processes, and in general, diseases in which there is an uncontrolled proliferation of free radicals. The objective of the study was to evaluate the animal performance, carcass characteristics and meat quality. Forty 20-month old crossbred steers (Bons Mara x Nellore) of initial body weight 416.9 ± 5,56 kg, without addition (control) or levels (1500, 3000, 43500 or 6000 mg / day / animal) of a mixture of natural additives (NA) containing clove essential oil, castor oil, cashew oil and a blend of microencapsulated active ingredients of eugenol, vanillin and thymol for 79 days. The results suggest that, although the use of the oil mixture did not modify the animals' weight gain, the supplement had a quadratic effect on forage intake, and consequently on dry matter, crude protein, neutral detergent fiber and non-fibrous carbohydrates. The greatest intake of dry matter was observed in treatment with 1500 mg and the smallest consumption in treatment with 6000 mg. Protein digestibility was smaller and non-fibrous carbohydrates were greater in AN treatments at any dosage. An increase in ruminal ammoniacal nitrogen concentrations and in propionic and isovaleric volatile fatty acids were observed in AN treatments at any dosage. No marked differences were observed in the macroscopic parameters of ruminal fluid (ruminal movements, color, odor, consistency, sedimentation and flotation, redox potential and counting and viability of protozoa). The carcass characteristics were not altered by the treatments, but there was a change in the body composition, increasing the muscular deposition in the animals supplemented with AN. The treatments had no effect on drip losses. The thawing/ ageing losses, cooking losses, texture, color, antioxidant and lipid oxidation were evaluated over the storage time in a vacuum package for 1, 7 and 14 days and differences were observed. There was a quadratic effect observed in the thawing/ageing losses on the first day of storage of the meat, and the control treatment lost less liquid than the others. However, in cooking losses that same treatment on the seventh day of storage lost more liquids. The shear force was similar between treatments on day 1 and day 7 of storage. At day 14, a linear effect was observed, and the meat from the control treatment was tender. A linear effect on meat lightness was observed. The meat from control treatment animals was clearer and potentially more attractive to the consumer on day 1 storage. After 7 and 14 days of storage, the meats were similar between the treatments. The redness and yellowness parameters were not changed. However, when evaluating the antioxidant potential of the meat, it was observed that on day 1 of storage there was a greater number of phenolic compounds and a greater antioxidant activity (DPPH and FRAP) in AN treatments. Although greater values of lipid oxidation were observed on the first day of storage in treatments receiving AN in the diet, it was also observed that treatments with greater dosages of additives delayed lipid oxidation throughout the storage time. The storage time affected the losses by thawing/ageing losses, cooking losses, texture, color and lipid oxidation, however these results are expected due to the proteolysis process. Taken together, these results suggest that the mixture of natural additives has potential use in animal feed and may improve meat stability; however, they should still be studied with respect to dose-response.
Resumo
O lentivírus caprino apresenta-se disseminado no Brasil, propiciando a ocorrência de infecções secundárias, as quais são comuns em animais com enfermidade viral. Ademais, infecções por Mycoplasma agalactiae (M. agalactiae) são diagnosticadas em muitos estados nordestinos, os quais também se encontra presente o vírus da artrite encefalite caprina (CAEV), onde a inexistência de vacina ou tratamento eficaz propicia a eliminação de muitos reprodutores de alta qualidade genética dos rebanhos. Nesse contexto, há a necessidade de buscar métodos de evitar a disseminação do vírus pela via reprodutiva, e consequentemente evitar o estabelecimento de infecções simultâneas. Assim, objetivou-se determinar a ocorrência de coinfecção pelo lentivírus caprino e Mycoplasma agalactiae nos rebanhos leiteiros do Ceará, bem como avaliar in vitro a atividade antiviral de extratos etanólicos de Azadirachta indica A. Juss. (nim) contra esse lentivírus presente no sêmen caprino. Esse trabalho foi dividido em três etapas. Na 1ª etapa investigou-se a existência de anticorpos anti-Mycoplasma agalactiae em rebanhos leiteiros no estado do Ceará e a sua possível correlação com a artrite encefalite caprina (CAE). Utilizaram-se 417 fêmeas e 69 reprodutores caprinos (486 animais) de raças com aptidão leiteira, puros ou mestiços, de sistema intensivo ou semi-intensivo, advindos de quatro mesorregiões do estado do Ceará. Anticorpos contra o CAEV foram detectados pela microtécnica de imunodifusão em gel de ágar (IDGA) e de Western Blot (WB). Já os anticorpos anti-Mycoplasma agalactiae optou-se pelo kit comercial de imunoensaio enzimático da IDEXX Laboratories. A soroprevalência de M. agalactiae em rebanhos de caprinos leiteiros no Ceará foi de 0,62% (3/486). Não evidenciou correlação entre os resultados obtidos no ELISA para M. agalactiae e CAEV por IDGA ou por WB (p<0,05). Na 2ª etapa, buscou-se determinar a concentração ideal de dimetilsulfóxido (DMSO) a ser usado na dissolução dos extratos etanólicos. Pool de sêmen de cinco caprinos foi diluído em meio essencial mínimo (MEM) enriquecido com glicose a 0,01M, acrescido de concentrações de DMSO (0; 1,5; 1,75; 2,0; 2,25 e 2,5%). Os tratamentos foram refrigerados a 7°C e avaliados até quatro horas após adição de DMSO. Mensurou-se motilidade individual progressiva (MIP), vigor espermático (V), porcentagem de espermatozoides reativos ao teste hiposmótico (HO) e morfologicamente normais (NOR). MIP, vigor e NOR permaneceram dentro dos padrões normais para caprinos em todos os tratamentos. Com isso não foi evidenciado interferência do DMSO nos parâmetros analisados, quando adicionado a uma concentração máxima de 2,5% ao diluidor MEM, sem interferir na qualidade do sêmen caprino refrigerado. Por fim na 3ª etapa, avaliou-se o efeito dos extratos etanólicos de Azadirachta indica ao sêmen caprino, e seu potencial de inativar o CAEV no mesmo. Para tanto, pool de sêmen de quatro reprodutores caprinos foi diluído em MEM enriquecido com glicose a 0,01M e das frações testes (extrato bruto, acetato de etila e etanol) previamente dissolvidas em DMSO em duas concentrações (75g/mL e 150g/mL) e seus parâmetros espermáticos (MIP, V, NOR) avaliados a cada duas horas pós-adição dos extratos até um período máximo de quatro horas. Em seguida, um novo pool de sêmen foi infectado com cepa CAEV Cork e tratado com as respectivas frações testes (extrato bruto, acetato de etila e etanol) por 30, 60 e 90 minutos, em duas concentrações (75g/mL e 150g/mL) para então ser cocultivado com células de membrana nictitante ovina (MNO) durante 63 dias, com realização de Nested PCR do DNA pró-viral do sobrenadante coletado a cada sete dias e da respectiva passagem celular, e RT-nPCR do sobrenadante coletado na semana seguinte pós-passagem. Todos os parâmetros espermáticos permaneceram dentro da normalidade para espécie caprina em todos os tratamentos, e sem apresentar diferença estatística (p>0,05) entre os mesmos. O extrato Azadirachta indica em Acetato de Etila e Etanol na concentração de 150g/mL teve ação antiviral contra o lentivírus, no entanto, novos ensaios devem ser realizados para poder validá-lo. Como conclusão geral, essa pesquisa demonstrou que não foi verificada a existência de correlação positiva na incidência de infecção pelo CAEV e pelo M. agalactiae no presente estudo no estado do Ceará, e que em virtude da disseminação da CAE pelo estado que os extratos etanólicos de Azadirachta indica dependendo da concentração e fração, há potencial de inibir o lentivírus caprino no sêmen, podendo ser uma ferramenta válida no controle do vírus pela via reprodutiva.
The caprine lentivirus is disseminated throughout Brazil causing the occurrence of secondary infections, which are common in animals with viral disease. In addition, infections by Mycoplasma agalactiae (M. agalactiae) are frequently diagnosed in several states of the Northeastern region of Brazil, in which the caprine arthritis encephalitis virus (CAEV) is also found very often. In these locations, the lack of vaccine or effective treatment forces the elimination of many breeders that have elevated genetic value from the flocks. In this context, there is a necessity of seeking methods to avoid virus transmission through reproduction and consequently prevent simultaneous infections. Hence, this study aimed to determine the occurrence of coinfection by the caprine lentivirus and Mycoplasma agalactiae in dairy flocks of Ceará. In addition, the antiviral activity of ethanol extracts of Azadirachta indica A. Juss. (nim) against this lentivirus was evaluated in the caprine semen. This study was divided in three steps. First, the presence of anti-Mycoplasma agalactiae antibodies was assessed in dairy flocks in Ceará state and the possible correlation between these cases and the caprine arthritis encephalitis (CAE). A total of 417 female and 69 male caprine breeders (486 animals) with milk production aptitude were used in this study. These animals were pure or mix breed and reared in intensive or semi-intensive systems distributed in four mesoregions of Ceará state. CAEV antibodies were detected with micro technique of agar gel immunodiffusion (AGID) and Western Blot (WB). The presence of anti-Mycoplasma agalactiae antibodies was assessed with an enzymatic commercial kit of IDEXX Laboratories. Seroprevalence of M. agalactiae in dairy caprine flocks in Ceará was 0.62% (3/486). There was no correlation between the results obtained from ELISA to M. agalactiae and CAEV using AGID or WB (p<0.05). In the second part of the study, the ideal concentration of dimethyl sulfoxide (DMSO) to be used in the dissolution of the ethanol extracts. Pooled samples of the semen obtained from five goats were diluted in minimal essential medium (MEM) enriched with glucose at 0.01M added different DMSO concentrations (0; 1.5; 1.75; 2.0; 2.25 and 2.5%). Treatments were refrigerated at 7°C and evaluated up until four hours after the addition of DMSO. Individual progressive motility (IPM), spermatic vigor (V), percentage of spermatozoids reactive to hyposmotic test (HO) and normal morphology (NOR) were evaluated. IPM, V and NOR values were within normal levels expected for the caprine species in all treatments. Hence, there was no effect of DMSO used to perform MEM dilution in the analyzed parameters of caprine refrigerated semen even in the maximum concentration of 2.5%. In the final part of the study, the effects of ethanol extracts of Azadirachta indica in the caprine semen and the potential to inactivate the CAEV were evaluated. Pooled semen samples of four goats were diluted in MEM enriched with glucose at 0.01M and fractions to be tested (brute extract, ethyl acetate and ethanol) previously dissolved in DMSO in two concentrations (75g/mL and 150g/Ml). Sperm quality parameters (IPM, V and NOR) were evaluated every two hours after the addition of extracts until the maximum period of four hours. Then, a new pool of semen was infected with CAEV Cork strain and treated with the respective fraction tests (brute extract, ethyl acetate and ethanol) for 30, 60 and 90 minutes in two concentrations (75g/mL and 150g/mL). Then, samples were co-cultured with ovine nictitating membrane cells (NMC) for 63 days, during which nested-PCR was performed to identify pro viral DNA in supernatant collected every seven days and in the respective cellular passage, and RT-nPCR in the supernatant collected a week after the passage. All sperm parameters remained within normal standards for the caprine species in all treatments and with no statistic difference between them (p>0.05). The ethyl acetate and ethanol extracts of Azadirachta indica in the concentration of 150g/mL presented antiviral effect against the lentivirus. However, new studies must be performed to validate these results. As a general conclusion, this study demonstrated that there is no positive correlation between the incidence of CAEV and M. agalactiae in Ceará state. In addition, considering the dissemination of CAE in this state, the ethanol extracts of Azadirachta indica, depending on the fraction and concentration, may present a potential inhibition effect against the caprine lentivirus in semen, which may be a valid tool for controlling the virus in reproduction.
Resumo
The antiviral activity profile of the uterus and fetal membranes from bovine placenta, induced by the Newcastle disease virus (NDV) throughout gestation, was investigated. Explants of the endometrium and caruncles were collected from the uterus, and amniochorion, allantochorion and cotyledons, from fetal placenta. Tissue cultures were induced with ~6.0 hemagglutinating units (HU) of NDV. Supernatants were concentrated 20 fold, filtered in 100kDa cut-off membranes and antiviral activity was titrated in MDBK x VSV system. Tissues of the uterus did not exhibit antiviral activity, while allantochorion and amniochorion produced antiviral factors throughout gestation. Antiviral factors were not related with IFN-alpha, gamma, tau or TNF-alpha. The antiviral activity pattern observed showed to be related with the development of fetal membranes and increased at the end of pregnancy. Such data suggest that IFN genes inducible by virus are present in fetal membranes of the cow placenta and their expression is dependent on the age of gestation.(AU)
Investigou-se a atividade antiviral do útero e da placenta bovina, ao longo da gestação, induzidos pelo vírus da doença de Newcastle (NDV). Explantes do endométrio e carúnculas foram colhidos do útero. Os tecidos corioamniótico, corioalantóide e cotilédones foram dissecados da placenta fetal. Os cultivos celulares foram induzidos com aproximadamente 6,0 unidades hemaglutinantes do NDV. Os sobrenadantes foram concentrados 20 vezes, filtrados em dispositivos com superfície de separação de 100kDa e a atividade antiviral foi titulada em células MDBK e vírus da estomatite vesicular (VSV). Endométrio, carúnculas e cotilédones não apresentaram atividade antiviral. Corioamniótico e corioalantóide produziram fatores antivirais ao longo da gestação. Estes fatores não foram relacionados aos IFN - alfa, gama ou tau e nem ao TNF - alfa. O padrão de produção de fatores antivirais acompanhou o desenvolvimento dos tecidos fetais e títulos mais altos foram observados no final da gestação. Estes dados sugerem que os genes de IFNs induzidos por vírus localizam-se nas membranas fetais da placenta e a expressão desses genes é dependente do estádio da gestação.(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Gravidez , Bovinos , Anticorpos Antivirais/biossíntese , Interferons , Vírus da Doença de Newcastle/imunologia , Placenta/virologia , Útero/virologiaResumo
Estudos de plantas medicinais com conhecimento tradicional têm sido uma fonte potencial de substâncias com atividades farmacológicas e biológicas significantes. Guettarda angelica Mart. ex Müll. Arg. (Rubiaceae) é uma planta medicinal no qual suas raízes são popularmente utilizadas para diversos fins terapêuticos, incluindo veterinário. Estudos antimicrobianos com raízes desta planta também relataram uma atividade in vitro contra bactérias. Como as infecções virais ainda continuam sendo um sério problema mundial, a etnofarmacologia fornece uma abordagem alternativa para descoberta de novos agentes antivirais. O objetivo do presente trabalho foi o estudo antiviral de extratos da casca das raízes, folhas e sementes de G. angelica frente aos herpesvírus bovino (BoHV-1), suíno (SuHV-1) e equino (EHV-1), reovírus (ARV) e metapneumovírus aviário (aMPV). A atividade antiviral foi testada in vitro em células Vero e MDBK utilizando os ensaios de redução do título viral e o ensaio quantitativo colorimétrico através do MTT. Inicialmente, a concentração máxima não-citotóxica (MNCC) dos extratos foi determinada nas células através da observação de suas alterações morfológicas. Estudos realizados através da redução dos títulos virais mostrou que apenas o extrato aquoso de sementes (AEs) apresentou uma atividade antiviral contra o BoHV-1, SuHV-1, EHV-1 e ARV. Assim, esse extrato foi posteriormente avaliado pelo método MTT para determinação do CC50 (concentração citotóxica a 50%), IC50 (concentração inibitória a 50%) e o SI (índice de seletividade). Os valores de CC50 do extrato AEs foram 400,60 e 920,50 para células Vero e MDBK, respectivamente. E os valores de IC50 e SI foram 22, 79 e 40,39 para BoHV-1; 91,30 e 10,08 para SuHV-1; 19,95 e 20,08 para EHV-1; e 23,59 e 17,00 para ARV. Esses resultados indicam que a semente de G. angelica contém compostos com atividade antiviral promissora e baixa toxicidade
Study of medicinal plants with traditional knowledge has been a potential source of substances with significant pharmacological and biological activities. Guettarda angelica M. (Rubiaceae) is a medicinal plant where its roots are popularly used for various therapeutic purposes including veterinary. In vitro antimicrobial studies also related antibacterial activity of these roots against bacteria. Like viral infections still remain a serious worldwide problem, the ethnopharmacology provides an alternative approach for discovery of new antiviral agents. The aim of the present work was the antiviral study of extracts from roots bark, leaves and seeds of G. angelica against bovine (BoHV-1), swine (SuHV-1) and equine (EHV-1) herpesviruses, avian reovirus (ARV) and metapneumovirus (aMPV) The antiviral activity was tested in vitro on Vero and MDBK cells using the viral titer assay and the quantitative colorimetric assay through MTT. Initially, the maximum non-citotoxic concentration (MNCC) of extracts was determined in cells by observation of their morphological alterations. Studies through the reduction of viral titers showed that only the aqueous extract from seeds (AEs) presented an antiviral activity against BoHV-1, SuHV-1, EHV-1 and ARV. Then, this extract was further evaluated by MTT method to determine the CC50 (50% cytotoxic concentration), IC50 (50% inhibitory concentration) and SI (selectivity index). The values of CC50 of AEs extract were 400.60 and 920.60 to Vero and MDBK cells, respectively. And the values of IC50 and SI were 22.79 and 40.39 for BoHV-1; 91.30 e 10.08 for SuHV-1; 19.95 and 20.08 for EHV-1; 23.59 and 17.00 for ARV. These results indicate that the seeds from G. angelica contain composts with promising antiviral activity and low toxicity
Resumo
Extracts of species from the Cordia genus have been reported with potential biological activities, such as antioxidant, antimicrobial, antiviral, and antiparasitic. The aim of this study was to develop microemulsions containing ethanolic extracts of C. glabrata leaves and to evaluate their stability and biological activities. The five developed microemulsions presented physicochemical stability and presented Newtonian behavior when submitted to rheological analysis. The diameter values of the globules ranged between 225.74 and 273.33 nm and the zeta potential of the formulations remained between -22.40 and -25.08. All phenolic acids of the extract, quantified by HPLC, showed consistency after being microemulsified. The EC50 values for the antioxidant activity by the DPPH scavenging method ranged between 38.13 and 45.54 µgmL-1, and between 34.46 and 39.60 mM for the ABTS+ scavenging method. The virucidal activity presented a CV50 <0.195 µgmL-1 and a selectivity index greater than 20. The photoprotection results ranged between 2.14 to 2.84. The study revealed stable microemulsions and potentiation of the antioxidant effect in the microemulsified extracts.
Extratos de espécies do gênero Cordia têm sido relatados com potencial atividade biológica, como antioxidante, antimicrobiana, antiviral e antiparasitária. O objetivo deste estudo foi desenvolver microemulsões contendo extratos etanólicos de folhas de C. glabrata e avaliar sua estabilidade e atividades biológicas. As cinco microemulsões desenvolvidas apresentaram estabilidade físico-química e apresentaram comportamento newtoniano quando submetidas à análise reológica. Os valores de diâmetro dos glóbulos variaram entre 225,74 e 273,33 nm e o potencial zeta das formulações permaneceu entre -22,40 e -25,08. Todos os ácidos fenólicos do extrato, quantificados por CLAE, apresentaram consistência após serem microemulsionados. Os valores de EC50 para a atividade antioxidante pelo método de eliminação DPPH variaram entre 38,13 e 45,54 µgmL-1, e entre 34,46 e 39,60 mM para o método de eliminação ABTS+. A atividade viricida apresentou CV50 <0,195 µgmL-1 e índice de seletividade maior que 20. Os resultados da fotoproteção variaram entre 2,14 a 2,84. O estudo revelou microemulsões estáveis e potencialização do efeito antioxidante nos extratos microemulsionados.
Assuntos
Antivirais , Produtos Biológicos , Cordia , Fator de Proteção Solar , AntioxidantesResumo
Ivermectin is a safe and effective drug in humans and has been approved for use in numerous parasitic infections for over 50 years. In addition, many studies have already shown its antiviral activity. Ivermectin is generally well tolerated, with no indication of central nervous system-associated toxicity at doses up to 10 times the highest FDA-approved dose of 200 µg/kg. The in vitro results of ivermectin for reducing SARS-CoV-2 viral load are promising and show that Ivermectin kills SARS-CoV-2 within 48 hours. A hypothesized mechanism of action for this drug is a likely inhibition of IMPα/ß1-mediated nuclear import of viral proteins as demonstrated for other RNA viruses. However, controlled and randomized studies are needed to prove its effectiveness in COVID-19 in humans. In a single in vivo study with published results, patients confirmed to be infected with SARS-CoV-2 received at least one dose of ivermectin at any time during hospitalization. The use of ivermectin was associated with lower mortality during treatment with COVID-19, especially in patients who required increased inspired oxygen or ventilatory support. Additionally, 81 studies with the clinical use of ivermectin in humans are being carried out worldwide according to ClinicalTrials.gov. However, none of these data has been published so far. However, private and public entities in Brazil have been adopting this drug in their protocols as prophylaxis and in the initial phase of the disease. In addition, ivermectin has been used in mass treatment to prevent onchocerciasis and lymphatic filariasis in sub-Saharan Africa for many years. Surprisingly, this region has the lowest proportional mortality rate among the continents, despite the increasing numbers of infected people released by the World Health Organization.
A ivermectina é um fármaco seguro e eficaz em seres humanos e é aprovado para uso em inúmeras infecções parasitárias há mais de 50 anos. Além disso, muitos estudos já evidenciaram sua atividade antiviral. A ivermectina é geralmente bem tolerada, sem indicação de toxicidade associada ao sistema nervoso central para doses até 10 vezes a dose mais alta, aprovada pelo FDA (Food and Drug Administration), de 200 µg/kg. Os resultados in vitro da ivermectina para redução da carga viral do SARS-CoV-2 são promissores e mostram que a Ivermectina mata o SARS-CoV-2 dentro de 48 horas. Uma hipótese de mecanismo de ação para esta droga é uma provável inibição da importação nuclear de proteínas virais mediada por IMPα / ß1 como demonstrado para outros vírus de RNA. No entanto, estudos controlados e randomizados são necessários para comprovar sua eficácia na COVID-19 em humanos. Em um único estudo in vivo com resultados publicados, pacientes confirmadamente infectados por SARS-CoV-2 receberam pelo menos uma dose de ivermectina em qualquer momento durante a hospitalização. A utilização da ivermectina foi associada a menor mortalidade durante o tratamento com COVID-19, especialmente em pacientes que necessitaram de maior oxigênio inspirado ou suporte ventilatório. Adicionalmente, 81 estudos com o uso clínico da ivermectina em humanos estão sendo realizados em todo o mundo segundo o site ClinicalTrials.gov. Porém, nenhum destes teve seus dados publicados até o momento. No entanto, entidades privadas e públicas no Brasil vêm adotando este medicamento em seus protocolos como profilaxia e na fase inicial da doença. Além disto, a ivermectina é utilizada no tratamento em massa na prevenção da oncocercose e filariose linfática na África subsaariana há muitos anos. Surpreendentemente, esta região possui o menor índice de mortalidade proporcional entre os continentes, apesar dos números crescentes de contaminados divulgados pela Organização Mundial da Saúde.
Assuntos
Antivirais , Ivermectina , SARS-CoV-2 , COVID-19Resumo
Em anos recentes, os polissacarídeos sulfatatos de algas marinhas tem emergido como importante classe natural de biopolimeros que podem ser aplicado na assistencia medica humana e veterinaria, tendoi a vantagem da alsência de potencial risco de contaminação por virus animal. Algumas amostras de fucanas foram isoladas de alga marinha maron tensido estudadas quanto a sua atividader anticoagulante, antitrombótica, antiinflamatória e antiviral. O efeito biológico das fucanas tem sido dependente do grau de sulfatação e do tamanho da molecula do polissacarídeo. Neste estudo foi realizado uma analise da composição da fucana extraída da alga maron Dictyota menstrualis e o efeito na migração de leucócitos no peritonio com sua molulação influencia na modulação da sensação dolorosa periférica. O polissacarídeos sulfatado foi extraído da alga maron por digestão proteolítica sequido por precipitação com acetona produzindo 05 frações. A eletroforese em gel usando tampão 0,05 M 1,3-diaminopropano-acetato (PDA) pH 9,0 revelado com 1,0% de azul de toluidina demonstrou a presença de polissacarídeos em todas as frações. A analise química demonstrou que todas as frações são compostas principalmente de fucose, xilose, galactose, ácido uronico e sulfato. As eletroforeses em três sistemas de tampões demonstraram que a fração 2,0v possui apenas uma população de fucana. Este componente foi purificado por exclusão molecular e demonstrou uma composição de fucose, xilose, sulfato e ácido urônico de 1,0:1,7:1,1:0,5 respectivamente. O efeito desda heterofucana na migração de leucócito observado 06 horas após a aplicação zymozan no peritonio. A heterofucana demonstrou alta atividade antimigratória diminuindo a migração em 100% na concentração de 20,0mg/kg, também apresentamdo um efeito modulado da sensação dolorosa periférica de modo dose dependente. Estes resultados sugerem que este fucana possa ser utilizada como novo antiinflamatório na industria farmaceutica
In recent years, sulfated polysaccharides from marine algae have emerged as an important class of natural biopolymers with potential application in human and veterinary health care, while taking advantage of the absence of potential risk of contamination by animal viruses. Among these, fucans isolated from the cell walls of marine brown alga have been study due to their anticoagulant, antithrombotic, anti-inflammatory and antiviral activities. These biological effects of fucans have been found to depend on the degree of sulfation and molecular size of the polysaccharide chains. In the present study, we examined structural features of a fucan extracted from brown alga Dictyota menstrualis and its effect on the leukocyte migration to the peritoneum. The sulfated polysaccharides were extracted from the brown seaweed by proteolytic digestion, followed by sequential acetone precipitation producing 5 fractions. Gel lectrophoresis using 0.05 M 1,3-diaminopropane-acetate buffer, pH 9.0, stained with 0.1% toluidine blue, showed the presence of sulfated polysaccharides in all fractions. The chemical analyses demonstrated that all fractions are composed mainly of fucose, xylose, galactose, uronic acid, and sulfate. Electrophoresis in agarose gel in three different buffers demonstrated that the fraction 2.0v have only one population of fucan. This compound was purify by exclusion molecular. It has shown composition of fucose, xilose, sulfate and uronic acid in molar ration of 1.0: 1.7: 1.1: 0.5 respectively. The effect of this heterofucan on the leukocyte migration was observed 6h after zymozan (mg/g) administration into the peritoneum. The heterofucan showed higher antimigratory activity, it decrease the migration of leukocyte in 83.77% to peritoneum. The results suggest that this fucan is a new antimigratory compound with potential pharmacological appications
Resumo
Interferons (IFN) são citocinas pleiotrópicas que apresentam atividade antiviral. Na vaca, IFNs foram relacionados ao reconhecimento da gestação. Neste trabalho avaliou-se a produção de IFNs in vivo e in vitro pela placenta bovina, ao longo da gestação, em vacas Bos taurus indicus e em cruzamentos Bos taurus indicus x Bos taurus taurus. Na avaliação in vivo, amostras de líquido amniótico e alantoideano foram colhidas assepticamente, concentradas 20 X, e a atividade antiviral foi titulada em sistema MDBK x VSV. Apenas amostras de líquido alantoideano apresentaram atividade antiviral, no primeiro trimestre da gestação. De nove amostras submetidas a ensaios de neutralização com anticorpos anti-IFN bovinos, uma foi antigenicamente relacionada ao rBoIFN-?1 e outra foi neutralizada por anticorpos anti-rBoIFN-?. As demais não foram neutralizadas por anticorpos -?, -? ou -? e nem foram relacionadas ao rBoTNF-?. Nos cultivos in vitro, apenas os de origem fetal (corioamniótico e corioalantóide) apresentaram atividade antiviral, constitutivamente e induzida por vírus. A microscopia eletrônica de transmissão não evidenciou a presença de vírus, o que reforça a produção espontânea destes fatores. Antigenicamente estes fatores não foram relacionados ao rBoTNF-? e aos IFNs-?, -? ou -?. Aparentemente a atividade antiviral está relacionada a IFN do tipo I, e sua resposta à indução viral é baixa. Testes de atividade residual e titulações em paralelo do anticorpo usando-se anticorpos anti-BoIFN-a sugerem que aminoácidos 11, 16 e 19 da extremidade N-terminal destes IFNs são importantes para neutralização de sua atividade antiviral