B-mode and Doppler ultrasound of bitches' kidneys with mammary neoplasia submitted to adjuvant chemotherapy / Ultrassonografia modo-B e Doppler dos rins de cadelas com neoplasias mamárias submetidas à quimioterapia adjuvante

Mammary neoplasia represents the most frequently diagnosed type of neoplasia in bitches. Although surgical removal is the procedure of choice for therapeutic management, chemotherapy protocols appear as important allies and adjuvants. Despite the great advances that have occurred in the field of cancer therapy, the systemic repercussions of these drugs still impose important limitations on their use. In this sense, the development of increasingly targeted therapeutic protocols and preventive monitoring of patients represent important strategies to avoid possible complications - among them, Acute Kidney Injury (AKI). Routinely, ultrasound evaluation is used to identify morphological or metastatic variations in abdominal cavity organs. Acting complementary to the B-mode evaluation, Doppler mapping proves to be efficient in recognizing alterations in vascular hemodynamics. Therefore, the objective of the present study was to evaluate the use of B-mode and Doppler ultrasound to identify renal morphological and hemodynamic alterations in bitches with mammary neoplasia submitted to adjuvant chemotherapy protocols that associate gemcitabine with carboplatin. Thirteen bitches were included, without distinction of breed and between seven and 13 years of age. The animals were evaluated ultrasonographically at two different times during three consecutive chemotherapy cycles: before (T0) and one and a half hours after each cycle (T1), for 42 days. No morphological changes were observed in B-mode throughout the chemotherapy protocol. However, the Doppler velocimetry indices demonstrated statistical differences before (T0) and after (T1) the administration of the drugs. It was concluded that Doppler ultrasound could be used as a complementary method for monitoring the renal response of patients exposed to nephrotoxic drugs and potentially causing renal injury.

As neoplasias mamárias representam o tipo de neoplasma mais frequentemente diagnosticado em fêmeas da espécie canina. Embora a remoção cirúrgica seja o procedimento de eleição para a conduta terapêutica, os protocolos quimioterápicos aparecem como importantes aliados e adjuvantes. Apesar dos grandes avanços ocorridos na área da terapia oncológica, as repercussões sistêmicas destes fármacos ainda impõem importantes limitações ao seu uso. Neste sentido, o desenvolvimento de protocolos terapêuticos cada vez mais direcionados e o monitoramento preventivo dos pacientes representam estratégias importantes para evitar possíveis complicações - dentre elas, a injúria renal aguda (IRA). Rotineiramente, a avaliação ultrassonográfica é utilizada para identificação de variações morfológicas ou metastáticas em órgãos da cavidade abdominal. Atuando de forma complementar à avaliação em modo-B, o mapeamento Doppler mostra-se eficiente no reconhecimento de alterações na hemodinâmica vascular. Portanto, o objetivo do presente estudo foi avaliar a utilização da ultrassonografia modo-B e Doppler como método para identificação de alterações morfológicas e hemodinâmicas renais em cadelas com neoplasias mamárias submetidas a protocolos quimioterápicos adjuvantes que associam a gencitabina à carboplatina. Foram incluídas 13 fêmeas caninas, sem distinção quanto a raça e com idades entre sete e 13 anos. Os animais foram avaliados ultrassonograficamente em dois momentos distintos durante três ciclos quimioterápicos consecutivos: antes (T0) e uma hora e meia após a realização de cada ciclo (T1), totalizando 42 dias. Não foram observadas alterações morfológicas em modo-B ao longo do protocolo quimioterápico. Entretanto, os índices dopplervelocimétricos demonstraram diferenças estatísticas antes (T0) e após (T1) a administração dos fármacos. Concluiu-se que a ultrassonografia Doppler pode ser utilizada como método complementar para o monitoramento da resposta renal de pacientes expostos a fármacos nefrotóxicos e potencialmente causadores de injúrias renais.

INFLUÊNCIA DA ADMINISTRAÇÃO PERIOPERATÓRIA DO SULFATO DE MAGNÉSIO EM CADELAS ANESTESIADAS COM PROPOFOL E FENTANIL PARA OVARIOHISTERECTOMIA

A anestesia balanceada envolve a administração de diferentes agentes para criar o estado anestésico. Essa abordagem evita a dependência exclusiva de opióides para controlar a nocicepção no período transoperatório e a dor no pós-operatório. Com base no fato de que o sulfato de magnésio (MgSO4) impede a sensibilização central causada pela estimulação nociceptiva periférica atuando como um antagonista do receptor NMDA, seu efeito analgésico e redutor de anestésico, foi demonstrado em modelos animais e humanos. Dessa maneira, o objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da administração de sulfato de magnésio no requerimento anestésico de propofol e fentanil, na resposta ao estímulo nociceptivo durante o período transoperatório e na analgesia pós-operatória imediata de cadelas submetidas à ovariohisterectomia. Trinta e duas cadelas, sedadas com acepromazina 0,02 mg/kg intramuscular, foram divididas aleatoriamente por sorteio em quatro grupos: PMFA - MgSO4 e fentanil alta dose; PFA - NaCl 0,9% e fentanil alta dose; PMFB- MgSO4 e fentanil baixa dose; PFB - NaCl 0,9% e fentanil baixa dose. As pacientes foram induzidas com propofol 1mg/kg/min dose efeito, ato contínuo permaneceram em infusão contínua dos tratamentos selecionados, com titulação da taxa de propofol de acordo com as variáveis cardiorrespiratórias e plano anestésico. Caso houvesse incremento de 20% da FC, FR ou PAS, foi administrado fentanil 2,5mcg/kg. Durante o transoperatório, avaliou-se a dose de propofol necessária para indução e manutenção anestésica, efeito antinociceptivo transoperatório através das variáveis cardiorrespiratórias, com o requerimento de doses adicionais de fentanil, qualidade de indução, de intubação e de relaxamento muscular transoperatório. Após o término da cirurgia foram avaliados os tempos de extubação, de sustentação de cabeça e posicionamento espontâneo em esternal, a qualidade de recuperação anestésica e a avaliação da dor utilizando a escala de Glasgow e os parâmetros fisiológicos. A concentração sérica de magnésio total foi mensurada em três diferentes tempos. Quanto aos resultados, houve diferença estatística entre os grupos quanto ao número cadelas que necessitaram doses adicionais de fentanil no transoperatório PMFA (4/8) PFA (4/8), PMFB (5/8) e PFB (7/8). No pós-operatório não houve diferença significativa na avaliação de dor pela escala de Glasgow, porém mais cadelas do grupo PFB, necessitaram resgate analgésico. No trans e pós-operatório, a concentração média de magnésio sérico total foi estatisticamente maior do que o valor pré-operatório (p <0,005) nos grupos PMFA e PMFB. Nas demais variáveis avaliadas, não houve diferença estatística entre os grupos. Este estudo não encontrou benefício clínico evidente na administração de sulfato de magnésio em cadelas sedadas com acepromazina e anestesiadas com fentanil e propofol em cirurgia de ovariohisterectomia

Balanced anesthesia involves administering different agents to create an optimal anesthetic state. This approach avoids exclusive dependence on opioids to control intraoperative nociception and postoperative pain. Magnesium sulfate (MgSO4) prevents central sensitization caused by peripheral nociceptive stimulation by acting as an NMDA receptor antagonist, its analgesic and anesthetic-reducing effects have been demonstrated in animal and human models. Thus, the aim of the present study was to evaluate the effect of magnesium sulphate administration on the anesthetic requirement of propofol and fentanyl, on the response to nociceptive stimulus during the intraoperative period and on the immediate postoperative analgesia of bitches undergoing ovariohysterectomy. Thirty-two bitches sedated with acepromazine 0.02 mg/kg intramuscularly, were randomly divided into four groups: PMFA - MgSO4 and high dose fentanyl; PFA - 0.9% NaCl and high dose fentanyl; PMFB - MgSO4 and low dose fentanyl; PFB - 0.9% NaCl and low dose fentanyl. Anesthesia was induced with propofol (1 mg/kg/min) to effect and maintained with continuous rate infusion of selected treatments. Propofol rate was titrated to maintain cardiorespiratory variables within normal range and an adequate anesthetic plan. If a 20% increase in HR, RR or SAP were noted, 2.5mcg/kg fentanyl was administered. The total dose of propofol necessary for anesthetic induction and maintenance was evaluated. Intraoperative antinociceptive effect was assessed through cardiorespiratory variables and the requirement of additional doses of fentanyl. Other variables such as quality of induction, intubation and intraoperative degree of muscle relaxation were evaluated. Time to extubation, head support and spontaneous sternal recumbency were recorded. The quality of anesthetic recovery and pain were assessed using subjective scales. Serum magnesium concentrations were measured at three different time points (pre-, intra- and postoperatively). The present study demonstrated a significant difference among the groups regarding the number of bitches that needed additional doses of fentanyl in the intraoperative period PMFA (4/8) PFA (4/8), PMFB (5/8) and PFB (7/8). There was no significant difference in pain assessment using the Glasgow pain scale in the postoperative period, however, more bitches in the PFB group required analgesic rescue (2/8). The mean serum magnesium concentration was higher in the postoperative than its preoperative values (p <0.005) in the PMFA and PMFB groups. The other variables evaluated did not differ significantly among the groups. This study did not find clear clinical benefits in administering magnesium sulfate in bitches sedated with acepromazine and anesthetized with fentanyl and propofol undergoing ovariohysterectomy.

Two tank-mix adjuvants effect on yield and quality attributes of wheat treated with growth retardants / Aplicação combinada de retardadores de crescimento com adjuvantes sobre a produtividade e a qualidade do grão de trigo

The objective of this study was to evaluate the quality of seeds and yield of winter wheat under different retardants application. The two years field trials on winter wheat were carried out in the Institute of Plant Protection - National Research Institute in Poznan (Poland). Treatments consisted of trinexapac-ethyl, chlormequat and prohexadione calcium applied in mixtures with paraffin oil adjuvant or organosilicone surfactant in BBCH 31 growth stage of winter wheat. No lodging occurred in any experimental year. The retardants had varying effect on the quality parameters of wheat grain. The highest fluctuations in the content of protein, gluten and the Zeleny value were observed after the application of chlormequat chloride. Starch content in wheat grain, regardless of the retardant application method, was negatively correlated with others grain quality parameters evaluated in the experiment. Depending on the year of study and weather conditions, increased or decreased wheat quality.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar o tamanho e a qualidade do grão de trigo de inverno em condições de aplicação de diferentes retardadores e a possibilidade de os combinar com adjuvantes e herbicidas. Durante dois anos, o Instituto de Proteção de Plantas - Instituto Nacional de Pesquisa em Pozna (Polônia) realizou ensaios no campo de trigo de inverno. Os tratamentos consistiram em: trinexapac-etil ou clormequat ou prohexadiona-cálcio, aplicados em misturas com óleo adjuvante ou surfactante organossilicone na fase BBCH 31. Não se observou acamamento de plantas em nenhum ano dos ensaios. Os retardadores apresentaram efeitos variados sobre os parâmetros de qualidade do grão de trigo. As maiores variações no teor de proteínas, glúten e no índice de Zeleny foram observadas após a aplicação de clormequat. O teor de amido no grão, independentemente do retardador utilizado e do modo da sua aplicação, foi negativamente correlacionado com outros parâmetros de qualidade avaliados nos ensaios. Dependendo do ano de estudos, aumentava ou reduzia a qualidade do grão.(AU)

Efeito do extrato aquoso de própolis marrom sobre a produção de IFN- Após imunização contra parvovírus canino (CPV) e coronavírus canino (CCoV) / Effect of water extract from brown propolis on production of IFN- After immunization against canine parvovirus (CPV) and canine coronavirus (CCoV)

The purpose of this study was to evaluate the imunnostimulatory adjuvant capacity of water extract from brown propolis (WEBP) when added to a vaccine against canine parvovirus (CPV) and canine coronavirus (CCoV), regarding the production of IFN-?. Mice were vaccinated with CPV and CCoV (3.0 x 106 TCID50) with or without 400 µg/dose of WEBP. Thirty days after the third dose, splenocytes were cultured to measure the expression levels of IFN-? mRNA in the immunized animals. Increased levels of IFN-? mRNA expression for CCoV were evidenced by RT-PCR, in the splenocytes of mice inoculated with the vaccine containing 400 ?g/dose of WEBP, demonstrating the ability of propolis to stimulate cellular immune responses against the antigens of this virus. In contrast, the levels of IFN-? to CPV were not influenced by the presence of WEBP.

O objetivo deste estudo foi avaliar a capacidade adjuvante imunoestimulatória do extrato aquoso de própolis marrom (EAPM) quando associado a uma vacina contra parvovírus canino (CPV) e coronavírus canino (CCoV), com relação à produção de IFN-?. Camundongos foram vacinados com CPV e CCoV (3,0x106 TCDI50) em associação ou não com 400 ?g/dose de EAPM. Trinta dias após a terceira dose foi realizado cultivo de esplenócitos para mensuração dos níveis de expressão de mRNA para IFN-? nos animais imunizados. O aumento nos níveis de expressão de mRNA para IFN-? para CCoV nos esplenócitos dos camundongos inoculados com a vacina contendo 400 ?g/dose de EAPM foi evidenciado por RT-PCR, demonstrando a capacidade da própolis em estimular a resposta imune celular contra os antígenos desse vírus. Ao contrário, os níveis de IFN-? para CPV não sofreram influência da presença do EAPM.

Efeito do extrato aquoso de própolis marrom sobre a produção de IFN- Após imunização contra parvovírus canino (CPV) e coronavírus canino (CCoV) / Effect of water extract from brown propolis on production of IFN- After immunization against canine parvovirus (CPV) and canine coronavirus (CCoV)

The purpose of this study was to evaluate the imunnostimulatory adjuvant capacity of water extract from brown propolis (WEBP) when added to a vaccine against canine parvovirus (CPV) and canine coronavirus (CCoV), regarding the production of IFN-?. Mice were vaccinated with CPV and CCoV (3.0 x 106 TCID50) with or without 400 µg/dose of WEBP. Thirty days after the third dose, splenocytes were cultured to measure the expression levels of IFN-? mRNA in the immunized animals. Increased levels of IFN-? mRNA expression for CCoV were evidenced by RT-PCR, in the splenocytes of mice inoculated with the vaccine containing 400 ?g/dose of WEBP, demonstrating the ability of propolis to stimulate cellular immune responses against the antigens of this virus. In contrast, the levels of IFN-? to CPV were not influenced by the presence of WEBP.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar a capacidade adjuvante imunoestimulatória do extrato aquoso de própolis marrom (EAPM) quando associado a uma vacina contra parvovírus canino (CPV) e coronavírus canino (CCoV), com relação à produção de IFN-?. Camundongos foram vacinados com CPV e CCoV (3,0x106 TCDI50) em associação ou não com 400 ?g/dose de EAPM. Trinta dias após a terceira dose foi realizado cultivo de esplenócitos para mensuração dos níveis de expressão de mRNA para IFN-? nos animais imunizados. O aumento nos níveis de expressão de mRNA para IFN-? para CCoV nos esplenócitos dos camundongos inoculados com a vacina contendo 400 ?g/dose de EAPM foi evidenciado por RT-PCR, demonstrando a capacidade da própolis em estimular a resposta imune celular contra os antígenos desse vírus. Ao contrário, os níveis de IFN-? para CPV não sofreram influência da presença do EAPM.(AU)

EFEITO DO EXTRATO AQUOSO DE PRÓPOLIS MARROM SOBRE A PRODUÇÃO DE IFN- APÓS IMUNIZAÇÃO CONTRA PARVOVÍRUS CANINO (CPV) E CORONAVÍRUS CANINO (CCoV)

The purpose of this study was to evaluate the imunnostimulatory adjuvant capacity of water extract from brown propolis (WEBP) when added to a vaccine against canine parvovirus (CPV) and canine coronavirus (CCoV), regarding the production of IFN-. Mice were vaccinated with CPV and CCoV (3.0 x 106 TCID50) with or without 400 µg/dose of WEBP. Thirty days after the third dose, splenocytes were cultured to measure the expression levels of IFN- mRNA in the immunized animals. Increased levels of IFN- mRNA expression for CCoV were evidenced by RT-PCR, in the splenocytes of mice inoculated with the vaccine containing 400 g/dose of WEBP, demonstrating the ability of propolis to stimulate cellular immune responses against the antigens of this virus. In contrast, the levels of IFN- to CPV were not influenced by the presence of WEBP.

O objetivo deste estudo foi avaliar a capacidade adjuvante imunoestimulatória do extrato aquoso de própolis marrom (EAPM) quando associado a uma vacina contra parvovírus canino (CPV) e coronavírus canino (CCoV), com relação à produção de IFN-. Camundongos foram vacinados com CPV e CCoV (3,0x106 TCDI50) em associação ou não com 400 g/dose de EAPM. Trinta dias após a terceira dose foi realizado cultivo de esplenócitos para mensuração dos níveis de expressão de mRNA para IFN- nos animais imunizados. O aumento nos níveis de expressão de mRNA para IFN- para CCoV nos esplenócitos dos camundongos inoculados com a vacina contendo 400 g/dose de EAPM foi evidenciado por RT-PCR, demonstrando a capacidade da própolis em estimular a resposta imune celular contra os antígenos desse vírus. Ao contrário, os níveis de IFN- para CPV não sofreram influência da presença do EAPM.

Estratégias profiláticas contra estreptococose mediante diferentes metodologias de inativação, adjuvantes e suplementação com Mananoligossacarídeos em tilápias-do-nilo

O presente estudo teve como objetivo desenvolver estratégias profilácticas contra Streptococcus agalactiae mediante distintas metodologias de inativação, adjuvantes e suplementação com mananoligossacarídeos em tilápias-do-nilo. Para isto, no primeiro experimento foram comparadas três vacinas inativadas, usando três metodologias: formaldeído, peróxido de hidrogênio e manipulação de pH. Seguido, foi realizado um segundo experimento avaliando o efeito de dois adjuvantes na vacina selecionada e finalmente um terceiro experimento avaliando o efeito de mananoligossacarídeos durante o período pós- vacinação. Vinte oito dias após vacinação, os peixes foram desafiados com cepa homóloga de S. agalactiae utilizando uma dose letal (DL50%-15d). Além disso, se avaliou o efeito da vacinação nos níveis de anticorpos IgM anti-Streptococcus agalactiae, nas variáveis hematológicas e na resposta imune inata. Os resultados revelaram não diferença significativa entre as três metodologias e uma eficácia moderada. Adicionalmente, a vacina inativada com peróxido de hidrogênio e administrada principalmente com adjuvante incompleto de Freund conferiu ótima proteção contra S. agalactiae e a inclusão de MOS na dieta pós-vacinação até o desafio não interferiu na eficácia da vacina experimental com peróxido de hidrogênio.

The aim of the present study was to develop prophylactic strategies against Streptococcus agalactiae by using different inactivation methods, adjuvants and supplementation with mannan oligosaccharides (MOS) in Nile tilapias. For that, in the first trial were compared three inactivated vaccines by using three methods: formaldehyde, hydrogen peroxide and pH manipulation. The second trial compared the effect of two adjuvants on the hydrogen peroxide-inactivated vaccine and finally, the third trial investigated the effect of dietary supplementation with MOS after vaccination. Twenty-eight days after vaccination, fish were challenged with a homologous strain of S. agalactiae. In addition, were determined the anti-Streptococcus agalactiae IgM antibodies, hematological parameters and innate immune response. The results revealed no significant difference between the three methods and a moderate efficacy of the vaccines. Also, the results in this study demonstrated that hydrogen peroxide-inactivated vaccine administered with either aluminum hydroxide or FIA induce optimal levels of protection, with a superior performance for FIA vaccine and the dietary inclusion of MOS after vaccination for a period of 28 days had no influence on vaccine efficacy and confirmed the high efficacy of the novel hydrogen peroxide-inactivated vaccine.

Use of masitinib mesylate as an adjuvant treatment of metastatic canine mast cell tumor / Utilização do mesilato de masitinibe no tratamento adjuvante do mastocitoma canino metastático

Background: The proliferative disorders of mast cells include, in addition to mast cell tumor, systemic mastocytosis and myeloid leukemia of mast cells. Surgery is the treatment of choice for tumors in the skin, in regions which allow wide excision but adjuvant treatments should be performed in selected patients. However, the use of adjuvant chemotherapy remains empirical, due to the absence of controlled studies. Despite the relevance of the use of tyrosine kinase inhibitors for the treatment of mast cell tumors, studies with these drugs have focused primarily on neoadjuvant scenery. Case: A 13-year-old male Poodle dog, weighing 4.6 kg, was presented with bilateral increase in inguinal lymph nodes and a vesicular cutaneous lesion, in the inguinal region, 75 days after surgery for the removal of a scrotum grade II mast cell tumor. Patient was admitted for surgery and the tissues removed were sent for pathological examination that allowed the diagnosis of grade II mast cell tumor and metastasis in all inguinal lymph nodes. The immunohistochemical study for CD117 revealed an aberrant expression of KIT receptor (KIT II), while the PCR for mutations in exon 11 of c-KIT gene revealed internal tandem duplications. The patient underwent a session of chemotherapy with lomustine, however it had serious side effects that resulted in discontinuation of treatment, opting for utilization...(AU)

Use of masitinib mesylate as an adjuvant treatment of metastatic canine mast cell tumor / Utilização do mesilato de masitinibe no tratamento adjuvante do mastocitoma canino metastático

Background: The proliferative disorders of mast cells include, in addition to mast cell tumor, systemic mastocytosis and myeloid leukemia of mast cells. Surgery is the treatment of choice for tumors in the skin, in regions which allow wide excision but adjuvant treatments should be performed in selected patients. However, the use of adjuvant chemotherapy remains empirical, due to the absence of controlled studies. Despite the relevance of the use of tyrosine kinase inhibitors for the treatment of mast cell tumors, studies with these drugs have focused primarily on neoadjuvant scenery. Case: A 13-year-old male Poodle dog, weighing 4.6 kg, was presented with bilateral increase in inguinal lymph nodes and a vesicular cutaneous lesion, in the inguinal region, 75 days after surgery for the removal of a scrotum grade II mast cell tumor. Patient was admitted for surgery and the tissues removed were sent for pathological examination that allowed the diagnosis of grade II mast cell tumor and metastasis in all inguinal lymph nodes. The immunohistochemical study for CD117 revealed an aberrant expression of KIT receptor (KIT II), while the PCR for mutations in exon 11 of c-KIT gene revealed internal tandem duplications. The patient underwent a session of chemotherapy with lomustine, however it had serious side effects that resulted in discontinuation of treatment, opting for utilization...

INFLUÊNCIA DA CICLOFOSFAMIDA NA FARMACOCINÉTICA DA CARBOPLATINA EM CADELAS COM CARCINOMAS MAMÁRIOS E GRADUAÇÃO DOS EFEITOS ADVERSOS DECORRENTES DA QUIMIOTERAPIA

MACHADO, M. C. A. Influência da ciclofosfamida na farmacocinética da carboplatina em cadelas com carcinomas mamários e graduação dos efeitos adversos decorrentes da quimioterapia. 2019. 105p. Tese (Doutor em Ciência Animal nos Trópicos) Escola de Medicina Veterinária e Zootecnia Universidade Federal da Bahia, 2019. Em virtude da importante casuística dos carcinomas mamários na cadela, se torna imprescindível estudar e propor tratamentos combinados, que favoreçam a maior eficiência terapêutica para este tipo de neoplasia, com menores efeitos adversos. Neste contexto, objetivou-se com a realização do presente estudo avaliar a influência da ciclofosfamida na farmacocinética (PK) da carboplatina em cadelas portadoras de carcinomas mamários, além de verificar possíveis efeitos adversos associados ao tratamento. Foram estudadas 16 cadelas, todas com diagnóstico histopatológico de carcinoma mamário, divididas em dois grupos experimentais, sendo o Grupo 1 constituído por cadelas tratadas apenas com carboplatina na modalidade de quimioterapia convencional (n=8) e Grupo 2 constituído por cadelas tratadas com carboplatina como quimioterapia convencional associado a ciclofosfamida em regime metronômico (n=8). Todas as cadelas foram submetidas à avaliação clínica, mastectomia, quimioterapia com carboplatina e análise da farmacocinética, além da avaliação da taxa de sobrevida e da graduação de efeitos adversos, periodicamente. Os resultados revelaram que houve diferença significativa nos parâmetros farmacocinéticos da carboplatina + ciclofosfamida (constante de eliminação (p=0,0132), meia vida (p=0,014), volume de distribuição (p=0,025), clearance (p=0,036) e área sob a curva (p=0,045)) na quarta sessão de carboplatina, com notável redução dos valores hematológicos (variáveis hemácias (p<0,0001), plaquetas (p=0,0005), leucócitos totais (p=0,0002) e neutrófilos segmentados (p=0,0007)), nas cadelas submetidas a este protocolo quimioterápico. No entanto, estes não foram suficientes para alterarem a graduação dos efeitos adversos provocados por este tipo de tratamento. Estes resultados avaliados conjuntamente indicam que a associação entre carboplatina e ciclofosfamida representa uma alternativa factível de tratamento adjuvante de cadelas com carcinomas mamários de alto grau e/ou com metástase para linfonodo regional, pois contribui para o aumento na taxa de sobrevida (p=0,0044) destas cadelas, em comparação com a carboplatina como tratamento quimioterápico único.

MACHADO, M. C. A. Influence of cyclophosphamide and pharmacokinetics of carboplatin on female dogs with mammary carcinomas and degree of adverse effects of chemotherapy. 2019. 105p. Tese (Doutor em Ciência Animal nos Trópicos) Escola de Medicina Veterinária e Zootecnia Universidade Federal da Bahia, 2019. Due to the important casuistic of the mammary carcinomas in the female dog, it is essential to study and propose combined treatments, which favor the greater therapeutic efficiency for this type of neoplasm, with lower adverse effects. In this context, the objective of this study was to evaluate the influence of cyclophosphamide on the pharmacokinetics (PK) of carboplatin in female dogs with mammary carcinomas, and to verify possible adverse effects associated with the treatment. We studied 16 female dogs, all with histopathological diagnosis of mammary carcinoma, divided into two experimental groups: Group 1 consisted of female dogs treated with carboplatin alone in the conventional chemotherapy modality (n=8) and Group 2 consisting of female dogs treated with carboplatin as conventional chemotherapy associated with cyclophosphamide in metronomic regimen (n=8). All female dogs underwent clinical evaluation, mastectomy, chemotherapy with carboplatin, and pharmacokinetic analysis, as well as the evaluation of survival rate and adverse effect score periodically. The results showed that there was a significant difference in the pharmacokinetic parameters of carboplatin + cyclophosphamide (elimination constant (p=0.0132), half-life (p=0.014), volume of distribution (p=0.025), clearance (p=0.0005), and area under the curve (p=0,045)), with significant reduction in hematological values (red blood cells (p<0.0001), platelets (p=0.0005), total leukocytes (p=0.0002) and segmented neutrophils (p=0.0007) to this chemotherapeutic protocol. However, these were not sufficient to alter the degree of adverse effects caused by this type of treatment. These jointly assessed results indicate that the association between carboplatin and cyclophosphamide represents a feasible alternative for adjuvant treatment of female dogs with high grade mammary carcinomas and/or regional lymph node metastasis, as it contributes to the increase in survival rate (p=0,0044) of these female dogs, compared to carboplatin as a single chemotherapy treatment.

Estimativas de perdas econômicas causadas por reação granulomatosa local após uso de vacina oleosa contra febre aftosa em bovinos de Mato Grosso do Sul / Estimates of economic losses caused by local granulomatous reaction after use of an oily vaccine against FMD in cattle of Mato Grosso do Sul

Lesões exacerbadas à vacina contra a febre aftosa foram observadas em 1.815 de um total de 5.000 bovinos abatidos em frigorífico com inspeção federal. Essas lesões resultaram na condenação de parte das carcaças de acordo com o Regulamento da Inspeção Industrial e Sanitária de Produtos de Origem Animal. Os bovinos haviam sido vacinados em maio de 2012 e abatidos em setembro do mesmo ano e divididos em Lotes 1 e 2 constituídos respectivamente por 1.500 e 315 bovinos. As lesões de reação vacinal eram caracterizadas por nódulos protuberantes, circunscritos, bem delimitados, firmes e de tamanhos variáveis, distribuídos multifocalmente na musculatura do aspecto lateral do pescoço; ao corte apresentavam exsudato purulento. Amostras da lesão de 28 bovinos foram avaliadas histologicamente e os principais achados foram piogranulomas com espaços claros circulares de tamanhos variados no centro, circundados por intenso infiltrado de neutrófilos íntegros e necróticos, circundados por macrófagos epitelioides com citoplasma vacuolizado, ocasionais células gigantes multinucleadas e, mais externamente, por abundante tecido conjuntivo em meio observavam-se linfócitos e plasmócitos. Culturas bacterianas realizadas em amostras do exsudato da lesão de seis bovinos resultaram negativas. Quando as carcaças afetadas foram submetidas ao toalete foi retirado em média 1,8 e 2,0 kg de músculo da área afetada, respectivamente dos Lotes 1 e 2. O prejuízo econômico da propriedade de origem dos bovinos afetados foi de R$ 20.424,00, considerando o preço pago pela arroba do boi no mês e ano da ocorrência. Esses valores à época seriam suficientes para adquirir 29,17 bezerros desmamados para engorda. Se considerarmos 5.000 bovinos vacinados forem considerados como população sob risco o coeficiente de morbidade seria de 0,36%. Os resultados deste estudo demonstram que perdas por reação vacinal, mesmo quando não provocam sinais clínicos marcantes, podem ocasionar importantes prejuízos econômicos.(AU)

Lesions caused by excessive reaction to foot and mouth vaccine were observed in 1,815 out of 5,000 cattle slaughtered in a slaughterhouse under federal meat inspection. Such lesions resulted in condemnation of the affect parts of the carcasses in accordance with the Brazilian Federal Meat Inspection Regulations. The affected cattle had been vaccinated on May 2012 and then slaughtered in September of the same year. They were allotted to two groups with 1,500 (Groups 1) and 315 cattle (Group 2). Post vaccination lesions were characterized as salient, firm variable sized nodules multifocally distributed in the musculature of the lateral neck. Pus oozed at the cut surface of these nodules. Samples of 28 cattle were submitted for histopathological examination; main findings were pyogranulomas with central variable-sized clear spaces surrounded by marked infiltrate of viable and dead neutrophils, which were surrounded by epithelioid macrophages with vacuolated cytoplasm and occasional multinucleated giant cell. This inflammatory reaction was walled by abundant connective tissue infiltrated by lymphocytes and plasma cells. Samples of the lesion of six cattle were submitted to bacteriological culture with negative results. When affected carcasses went through dressing, there was an average of 1.8 and 2.0 kg of muscle tissue cut off from the carcasses respectively of Group 1 and 2. Economic losses in the farm of origin of the affected cattle was R$ 20,424.00, considering the price paid by kg of cattle for slaughter at the time of the occurrence. This amount at that time was enough to buy 29.17 weaned calves for fattening. If one considers theses 5,000 cattle vaccinated on the farm as the population at risk, the morbidity rate would be 0.36%. These results indicate that the losses due to vaccine reaction, even with no overt clinical signs, may cause important economic losses.(AU)

Freund's adjuvant-induced inflammation: clinical findings and its effect on hepcidin mRNA expression in horses / Inflamação induzida por Adjuvante de Freund: achados clínicos e efeitos sobre a expressão do RNAm da hepcidina em equinos

Hypoferremia observed during systemic inflammatory disorders is regulated by hepcidin. Hepcidin up-regulation is particularly important during acute inflammation, as it restricts the availability of iron, which is necessary for pathogenic microorganism growth before adaptive immunity occurs. The aim of this study was to evaluate the clinical findings and hepatic hepcidin mRNA expression in horses using a Freund's complete adjuvant (FCA) model of inflammation. The expression of hepcidin mRNA in the liver was determined in healthy horses following two intramuscular injections of FCA at 0 h and 12 h. Plasma iron and fibrinogen concentrations were measured at multiple time points between 0 h and 240 h post-FCA injection (PI). Hepcidin mRNA expression was determined by RT-qPCR using liver biopsy samples performed at 0 h (control), 6 h and 18 h PI. The mean plasma fibrinogen level was significantly different from the control values only between 120 and 216 h PI. The mean plasma iron level was significantly lower than the control between 16 and 72 h PI, reaching the lowest levels at 30 h PI (33 % of the initial value), and returned to the reference value from 96 h PI to the end of the experiment. Hepcidin mRNA expression increased at 6 h PI and remained high at 18 h PI. The iron plasma concentration was an earlier indicator of inflammatory processes in horses when compared with fibrinogen and might be useful for the early detection of inflammation in the horse. FCA administration caused the rapid onset of hypoferremia, and this effect was likely the result of up-regulated hepatic hepcidin gene expression. This study emphasizes the importance of hepcidin and iron metabolism during inflammation in horses.(AU)

A hipoferremia observada durante os processos inflamatórios sistêmicos é mediada pela hepcidina. O aumento da expressão da hepcidina é particularmente importante durante a inflamação aguda, por restringir a disponibilidade de ferro necessária para o crescimento de microrganismos patogênicos antes que a imunidade adaptativa ocorra. O objetivo deste estudo foi avaliar os achados clínicos e a expressão hepática do RNA mensageiro (RNAm) da hepcidina em cavalos após a indução da inflamação com Adjuvante completo de Freund (FCA). A expressão hepática do RNAm da hepcidina foi determinada em cavalos sadios após duas administrações intramusculares de FCA às 0 h (M0) e 12 h (M12). As concentrações plasmáticas de ferro e fibrinogênio foram mensuradas em múltiplos momentos entre 0 h e 240 h (M240) após a primeira administração de FCA (PI). A expressão do RNAm da hepcidina foi determinada por RT-qPCR usando amostras de biopsias hepáticas colhidas as 0 h (controle), 6 h (M6) e 18 h (M18) PI. A concentração plasmática média de fibrinogênio foi estatisticamente diferente do M0 entre 120 h e 216 h PI. A concentração plasmática média de ferro foi significantemente menor que o controle entre 16 h e 72 h PI, alcançou o nível mais baixo às 30 h PI (33% do valor inicial) e retornou aos valores de referência entre 96 h PI e até o final do experimento. A expressão do RNAm da hepcidina aumentou no M6 e permaneceu alta no M18. A concentração plasmática de ferro foi um indicador precoce da inflamação quando comparada com o fibrinogênio e pode ser útil na detecção precoce da inflamação em cavalos. A administração do FCA causou um rápido início da hipoferremia, e isto foi resultante do aumento da expressão hepática da hepcidina. Estes resultados enfatizam a importância da hepcidina e do metabolismo do ferro durante a inflamação em cavalos.(AU)

Resposta imunológica em caprinos vacinados contra agalaxia contagiosa / Immune response in goats vaccinated against contagious agalactia

Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiência de duas vacinas inativadas contra agalaxia contagiosa contendo adjuvante oleoso e aquoso. Para tanto, foram utilizados 73 caprinos, agrupados em dois experimentos. No experimento I, para avaliar a inocuidade das vacinas, foram utilizados 15 caprinos, subdivididos em três grupos de cinco animais cada, sendo que o grupo A1 foi imunizado com a vacina aquosa, o grupo B1 com a vacina oleosa e o grupo C não imunizado, foi o controle. No experimento II, para avaliar a resposta imune foram utilizados 58 caprinos, subdivididos em dois grupos, sendo o grupo A2, com 28 animais imunizados com a vacina aquosa e o grupo B2, com 30 animais imunizados com a vacina oleosa. Os animais do experimento II receberam uma terceira dose, 180 dias após a segunda dose vacinal. Os níveis de anticorpos foram determinados por ELISA indireto, realizado no dia de cada vacinação e 30 dias após a segunda dose (experimento I) e 30 dias após a terceira dose vacinal (experimento II). Os animais do grupo B1 e B2 (vacina oleosa) apresentaram níveis de anticorpos estatisticamente superiores (P<0,05) quando comparados aos dos grupos A1 e A2 (vacina aquosa) nos dois experimentos.(AU)

This study aimed to evaluate the efficacy of two inactivated vaccines against contagious agalactia containing adjuvant oily and watery. For this, 73 goats were divided in two experiments. In the experiment I was verified the vaccine safety and 15 goats were divided into three experimental groups of five animals each. A1 and B1 groups were immunized with vaccine containing either aluminum or oil, respectively, and group C was the control group without immunization. In the experiment II, the immune response against the vaccines was evaluated by immunization of 58 goats that were divided in to two groups: group A2, 28 animals were immunized with the aluminum based vaccine; and group B2, 30 animals were immunized with the oil based vaccine. In the experiment II, the animals received a third dose on 180 day after the second dose. Antibody levels were determined by indirect ELISA from ssamples collected on vaccination days and on 30 day after the second dose (Experiment I) and on 30 day after the third dose (Experiment II). The animals from B1 and B2 groups (oil based vaccine) demonstrated higher antibody levels (P<0.05) than A1 and A2 (aluminum based vaccine) in both experiments.(AU)

Bloqueio peribulbar com associação de clonidina e hialuronidase à ropivacaína em cães submetidos à facectomias

Diversas oftalmopatoias afetam a qualidade visual dos animais de companhia, dentre elas a opaficificação dos cristalino ou catarata. Sob essas demandas de procedimentos corretivos eficazes e seguros, opta-se pela técnica de facectomia, que exige uma anestesia geral e bulbo ocular centralizado, midríase, acinesia do bulbo ocular, manutenção da pressão intraocular (PIO) e inibição do reflexo óculo-cardíaco (ROC) e como alternativa têm se empregado os bloqueios locais para realizar as exigências, afim de promover conforto e segurança para o paciente. Foi estudado a associação entre ropivacaína-clonidina-hialuronidase na anestesia peribulbar em cirurgias de facectomia em cães, avaliando-se parâmetros oculares e fisiológicos sistêmicos. O teste foi realizado em oito animais, utilizando-se dezesseis olhos, oito para o bloqueio anestésico (OB) e oito contralaterais para controle (OC). Realizou-se o bloqueio peribulbar em um único ponto com volume de 1 mL, contendo clonidina (1 g/kg), ropivacaína 1% (10 mg/mL) e hialuronidase (25 UTR) seguido da pré-medicação, indução e anestesia geral inalatória. Os parâmetros avaliados: PIO (medidas nos tempos 0, 1 e 10 minutos), diâmetro pupilar, centralização do bulbo ocular, latência e duração do bloqueio motor, frequência cardíaca, frequência respiratória, pressão arterial média, ritmo cardíaco, capnometria e temperatura retal. Os pacientes eram ASA 2 (75%) e ASA 3 (25%). O tempo cirúrgico foi de cerca de 72,87 ± 17,41 minutos no qual o tempo de midríase ocorreu em 67,75 ± 43,38 segundos, a centralização do bulbo ocular em 89,13 ± 38,23 segundos e a duração do bloqueio motor de 162 ± 18,9 minutos. A dilatação pupilar foi significativa após o bloqueio. Não houve mudanças significativas nos valores da PIO - T0 (OC: 13,13 ± 3,37 OB: 12,13 ± 1,76), TBP1 (OC: 13,50 ± 2,96 OB: 12,13 ± 2.37) e TBP10 (OC: 13,53 ± 4,18 OB: 12,75 ± 2,17). Não houve correlação significativa entre as doses recebidas de ropivacaína e o seu efeito no bloqueio, contudo, destacamos que as doses de ropivacaína foram todas abaixo dos limites terapêuticos. Os parâmetros fisiológicos foram esperados de um procedimento anestésico e retornaram aos valores basais após o despertar, sem complicações. Não foi relatada ocorrência de ROC ou qualquer complicação referente à técnica do bloqueio peribulbar em quaisquer pacientes. Conclui-se que o bloqueio peribulbar para facectomia utilizando-se a associação ropivacaína 1% - clonidina (1 g/kg) hialuronidase (25UTR) numa solução de 1 mL promove baixa latência, boa duração, midríase adequadas para a facectomia e sem efeitos adversos.

A wide range of ophtalmopathies affects animals visual quality as in lens opacification or cataract. To adress this, safer and efficient corrections are demanded and facectomy is the ellected thecnique, which, demands a general anesthesia, centralization and acenesia of ocular bulb, mydriasis, maintenance do intraocular pressure (IOP) and inhibition of ocularcardiac reflexes (OCR). Alternatively, to general anesthesia, local block is preferred bacause if promotes the other signs safely and provides more comfort to the patient. WE investigated the association of clonidine-hyaluronidase-ropivacaine in peribulbar anesthesia in dogs evaluating ocular and sistemic physiological parameters. Eight animals were investigated, counted 16 eyes, arrangeg 8 eyes for local block (OB) and the controlateral was defined as control (n=8, OC) . We performed a single-point low-volume (1.0 ml) thechnique. Injection volume contained clonidine (1 g/kg), hyaluronidase (25 UTR) and ropivacaine 1% (10mg/mL) and was followed by premedication, induction and inhalatory general anesthesia. We evaluated parameters at time 0 (T0) before peribulbar block, and post peribulbar block at 1 minute (T1) and at 10 mintues for IOP; we measured pupilar diameter, latency and time duration of motor block, akinesia and centralization of eye bulb as well as physiological parameters as cardiac and respiratory rate and frequency, mean arterial pressure, cardiac rhythm, capynometry and rectal temperature. Patients were rated as ASA 2 (75%) and ASA 3 (25%). Facectomy time extended for 72.87± 17.41 minutes, in which, mydriasis ocorrued at 67.75 ± 43.38 seconds; bulb centralizations at 67.75 ± 43.38 seconds; motor block extended for 162 ± 18.9 minutes. Pupilar dialation was significant after peribulbar block. No significant rate was observed for IOP - T0 (OC: 13.13 ± 3.37 OB: 12.13 ± 1.76), TBP1 (OC: 13.50 ± 2.96 OB: 12.13 ± 2.37) e TBP10 (OC: 13.53 ± 4.18 OB: 12.75 ± 2.17). No positive correlation between ropivacaine dose and peribulbar block effect could be determined, however, we detach that ropivacaine dosage for each animal was below the indicated therapeutcis limits for the specie. Physiological parameter were considered normally observed along the anesthesia procedure and reverted to basal rates at recovery and no complications were diagnosed. In all patientes, OCR or any complication relationed to peribulbar block were not observed. We conclude that periblubar block for facectomy using clonidine-hyaluronidase-ropivacaine (C-H-R) association in a 1 mL volume promotes low latency, long duration and mydriasis with no side effects.

Neuroestimulação Elétrica Transcutânea no controle da dor pós-operatória de cães submetidos a procedimentos cirúrgicos ortopédicos em membros pélvicos

Os procedimentos cirúrgicos ortopédicos geralmente não podem ser evitados, e mesmo com analgesia preempitiva é necessário controle efetivo da dor pósoperatória, uma vez que tais procedimentos têm potencial de gerar dor intensa, diretamente relacionada ao longo período de recuperação do paciente. A dor pós-operatória, quando não tratada de forma eficaz, torna-se patológica, podendo desencadear uma série de distúrbios, incluindo imunossupressão, alterações cardiovasculares e emaciação, atraso na cicatrização e na evolução para cura, tornando-se crônica. Os opioides são frequentemente utilizados no tratamento da dor pós-operatória de intensidade moderada a severa, em doses altas muitas vezes requeridas em pacientes submetidos a cirurgias ortopédicas, o que favorece a instalação dos efeitos deletérios desta classe de analgésicos. Nesse sentido, o uso de terapias multimodais e não farmacológicas vem ganhando destaque no sentido de aperfeiçoar a terapia analgésica e diminuir o uso dos mesmos, ou até como alternativa em pacientes para os quais restrições farmacológicas existam. Um destes meios é a Neuroestimulação Elétrica Transcutânea (TENS), técnica já utilizada com sucesso na medicina humana com eficácia comprovada, de fácil aplicação, não invasiva, sem contraindicações e financeiramente acessível. Este estudo foi desenvolvido para avaliar o controle da dor pós-operatória de 14 cães, de até 25 kg, submetidos a cirurgias ortopédicas em um dos membros pélvicos no Hospital Veterinário da UFV, mediante autorização dos proprietários. A medicação pré-anestésica foi morfina na dose de 0,3 mg/kg intramuscular, indução anestésica com propofol na dose de 4 a 6 mg/kg, seguida de manutenção com isoflurano e aplicação de bolus de 0,1 ml/kg de fentanil nos casos que se fizeram necessários. Ao final do procedimento cirúrgico, os animais foram divididos aleatoriamente em dois grupos: GT que receberam sessões de TENS convencional próxima a ferida, baixa intensidade e alta frequência de impulso elétrico (100 Hz), com duração de 30 min, com intervalos de 90 min entre as sessões, e GC que receberam os eletrodos, entretanto o equipamento não foi ligado. Em todos os animais foi realizada avaliação de dor antes do procedimento cirúrgico, ao final do mesmo, assim que o animal retomou a consciência após anestesia, e a cada 120 minutos durante 11 horas. O avaliador não teve conhecimento do tratamento aplicado e utilizou duas escalas de dor: a Escala de dor de Glasgow modificada e a Escala de dor da Universidade de Melbourne. Nos casos em que o animal obteve um escore de dor, pela escala da Universidade de Melbourne acima de 33,3% da pontuação máxima que é de 27 pontos, foi realizada administração de morfina (0,3 mg/kg) intramuscular, respeitando o intervalo mínimo de 4 horas entre as aplicações. A pontuação em cada avaliação, o número de administrações adicionais de morfina pós-operatória e o tempo para a primeira aplicação foram comparadas entre os grupos. A analgesia da TENS, segundo as escalas de dor utilizadas para avaliação, se mostrou semelhante à da morfina, promovendo escores iguais ou menores aos encontrados no grupo tratado apenas com morfina. A probabilidade de haver resgates analgésicos no pósoperatório nos dois grupos foi semelhante, sugerindo um controle eficaz da dor pela aplicação de TENS. Conclui-se que a TENS foi capaz de promover analgesia pós-operatória eficaz e semelhante à da morfina, diminuindo o número de resgates analgésicos durante a avaliação.

Orthopedic surgical procedures generally cannot be avoided, and even with preemptive anesthesia, effective control of postoperative pain is necessary, since such procedures have the potential to generate intense pain, directly related to the long recovery period of the patient. Postoperative pain, when left untreated, become pathological and may trigger a series of disorders, including immunosuppression, cardiovascular changes and emaciation, delayed healing and progression to cure, and becoming chronic. Opioids are often used in the treatment of postoperative pain of moderate to severe intensity, at high doses often required in patients undergoing orthopedic surgery, which favors the installation of the deleterious effects of this class of analgesics. In this sense, the use of multimodal and non-pharmacological therapies has gained prominence in the sense of improving analgesic therapy and diminishing their use, or even as an alternative for patients where pharmacological restrictions exist. One of these means is the Transcutaneous Electrical Nerve stimulation (TENS), a technique already successfully used in human medicine with proven efficacy, easy to apply, noninvasive, without contraindications and financially accessible. This study will evaluate the postoperative pain control of 14 dogs, up to 25 kg, submitted to orthopedic surgeries in one of the pelvic limbs at the Veterinary Hospital of the UFV, with authorization from the owners. The pre-anesthetic medication was intramuscular morfine 0.3 mg / kg, anesthetic induction with propofol at 4 to 6 mg / kg, followed by maintenance with isoflurane and bolus application of 0.1 ml / kg of fentanyl whem necessary. At the end of the procedure, the animals were randomly divided into two groups: GT who received sessions of conventional TENS, low intensity and high electric pulse frequency (100Hz), with duration of 30 min, with intervals of 90 min between sessions, and GC that received the electrodes, however the equipment was not connected. All animals were evaluated for pain before the surgical procedure, at the end of the procedure, as soon as the animal regained consciousness after anesthesia, and every 120 minutes for 11 hours. The evaluator was not aware of the treatment applied and used two pain scales: the modified Glasgow Pain Scale and the University of Melbourne Pain Scale. In the cases in which the animal obtained a pain score, by the University of Melbourne scale above 33.3% of the maximum score that is 27 points, administration of intramuscular morphine (0.3 mg / kg) was performed, respecting the minimum interval of 4 hours between applications. The score at each evaluation, the number of additional administrations of postoperative morphine and the time for the first application were compared between the groups. TENS analgesia, according to the pain scales used for evaluation, was similar to that of morphine, promoting scores equal to or lower than those found in the group treated with morphine only. The probability of postoperative analgesic rescues in the two groups was similar, suggesting an effective pain control by the application of TENS. Proving that TENS could promote effective and morphine-like postoperative analgesia, reducing the number of analgesic rescues during the evaluation.

Utilização de Peptídeo Intracelular (EL28) como Imunoestimulante da Vacina de Raiva.

CHIPANA, Melissa Mercedes Torres. Utilização de Peptídeo Intracelular (EL28) como Imunoestimulante da Vacina de Raiva. 2017. 90 f Dissertação (Mestrado em Ciências) Faculdade de Ciências Farmacêuticas, Universidade de São Paulo, São Paulo, 2017. No mercado, a vacina rábica veterinária com o adjuvante hidróxido de alumínio (Al(OH)3), tem sido citada como a causa de diversos casos de reações adversas, principalmente o fibrosarcoma. Recentemente, houve o desenvolvimento de um peptídeo intracelular funcional obtido através do estímulo celular com INF- , denominado EL28, tendo como principal caracterisitica a biodegradebilidade, porém, no momento carece de ensaios de imunoestimulação associados com antígenos vacinais "in vivo". Neste trabalho, verificou-se a atividade imunoestimulante do EL28, associado ao vírus rábico inativado (VRI). Realizou-se a produção do antígeno VRI, e prepararam-se formulações vacinais: VRI associado ao EL28, VRI associado com Al(OH)3 e VRI sem presença de adjuvante, para imunização de camundongos Balb/c e avaliação da resposta imune humoral. A produção de anticorpos IgG totais, IgG1 e IgG2a foram determinados pelo ensaio de ELISA. E os anticorpos neutralizantes para o vírus rábico foram quantificados através do método RIFFT. Os resultados do Elisa foram expressos como Dose Imunoenzimática 50% (DI50) e mostraram que não houve aumento na produção de anticorpos na resposta imune humoral (IgG totais) entre a vacina associada ao EL28 (DI50= 3,0 X 10-3L) e a vacina sem adjuvante (DI50=2,0 X 10-3 L); os resultados obtidos em relação ao quantitativos de IgG2a e IgG1 estão relacionados ao perfil da resposta Th1 e Th2 respectivamente, o qual mostrou uma tendência para resposta Th2 predominante (IgG2a/IgG1 < 1,0). O método de RIFFT mostrou um aumento na potência de anticorpos neutralizantes na vacina associada ao EL28. Portanto, esses resultados demonstram a aumento da especificidade na resposta imunológica da vacina associada ao EL28. Sendo assim, pelos resultados apresentados, o EL28 teria maior eficiência se associado a um adjuvante já estabelecido que possivelmente auxiliaria o desenvolvimento de vacinas com maior potencia e segurança.

CHIPANA, Melissa Mercedes Torres. Use of Intracellular Peptide (EL28) as Immunostimulant of Rabies Vaccine. 2017. 90 f Dissertation (Master in Science) - Faculty of Pharmaceutical Sciences, University of São Paulo, São Paulo, 2017. In the market, the veterinary rabies vaccine with the adjuvant aluminum hydroxide (Al(OH)3) has been cited as the cause of several cases of adverse reactions, especially fibrosarcoma. Recently, a functional intracellular peptide obtained through the INF- cellular stimulus, EL28, has been developed, with the main characteristic of biodegradability, but at presents it lacks immunostimulation assays associated with in vivo vaccine antigens. The Immunostimulatory activity of EL28 associated with inactivated rabies virus (IRV) was observed in this work. VRI antigen production was performed, and vaccine formulations were prepared: VRI associated with EL28, VRI associated with Al(OH)3 and VRI without presence of adjuvant, for immunization of Balb/c mice and assessment of humoral immune response. The production of total IgG antibodies, IgG1 and IgG2a were determined by the ELISA assay. And neutralizing antibodies to rabies virus were quantified using the RIFFT method. Elisa's results were expressed as 50% Immunoenzymatic Doses (ID 50) and showed no increase in antibody humoral immune response (IgG total) between the EL28 associated vaccine (DI 50 = 3.0 X 10-3 L) and the vaccine without Adjuvant (DI 50 = 2.0 x 10-3 L); The results obtained in relation to the quantitative IgG2a and IgG1 are related to the profile of the Th1 and Th2 response respectively, which showed a tendency for predominant Th2 response (IgG2a / IgG1 <1.0 The RIFFT method showed an increase in the potency of neutralizing antibodies in the vaccine associated with EL28. Therefore, these results demonstrate increased specificity in the immune response of the vaccine associated with EL28. Therefore, EL28 would be more efficient if associated with an already established adjuvant that would possibly help the development of vaccines with greater potency and safety.

Avaliação da formação de nódulos oriundos da vacinação contra febre aftosa e seus impactos biológicos

A vacinação sistemática de bovinos contra doenças altamente contagiosas como a febre aftosa foi uma das medidas que proporcionou o crescimento observado nos últimos anos da produção e exportação de carne bovina no país, em contra partida a vacinação vem causando diversos efeitos adversos, entre eles a formação de nódulos. A presença de nódulos vacinais promove uma depreciação financeira significativa sobre as carcaças de bovinos. Desta forma o presente trabalho teve como objetivo investigar a influência da assepsia no manejo vacinal sobre o surgimento de nódulos vacinais em bovinos submetidos a vacinação contra a febre aftosa, bem como compreender sua formação através de estudos histopatológicos e microbiológicos. Para tal foram realizados experimentos comparando a adoção de medidas assépticas durante o manejo vacinal como também a coleta e análise de nódulos encontrados em carcaças provenientes de abatedouro. Foi observado através do presente estudo, que o surgimento de nódulos vacinais não está relacionado a assepsia no momento da vacinação, e sim a componentes da formulação da vacina, como o adjuvante oleoso. O entendimento sobre o surgimento de nódulos vacinais pode trazer grande contribuição no combate ao seu surgimento, favorecendo a obtenção de carcaças de maior qualidade sanitária, como também diminuir os prejuízos ocasionados pela mesma à produtores.

Systematic vaccination of cattle against highly contagious diseases such as foot-and-mouth disease was one of the measures that provided the growth observed in the last years of the production and export of bovine meat in the country, in contrast to vaccination has caused several adverse effects, among them training of nodules. The presence of vaccine nodules promotes a significant financial depreciation on bovine carcasses. In this way the present work had as objective to investigate the influence of asepsis in the vaccine management on the appearance of vaccine nodules in cattle submitted to vaccination against foot and mouth disease, as well as to understand its formation through histological and microbiological studies. For this, experiments were carried out comparing the adoption of aseptic measurements during the vaccination, as well as the collection and analysis of nodules found in carcasses from slaughterhouse. The appearance of vaccine nodules appears to be related to several factors, mainly the addition of oily adjuvant in the vaccine formulation. The understanding of the appearance of vaccine nodules can make a great contribution in the fight against its appearance, favoring the obtaining of carcasses of higher sanitary quality, as well as reducing the damages caused by it to the producers.

DESENVOLVIMENTO E AVALIAÇÃO DA EFICÁCIA DE UMA VACINA INATIVADA DO VÍRUS DA BRONQUITE INFECCIOSA AVIÁRIA ENCAPSULADO EM NANOPARTÍCULAS DE QUITOSANA

Vacinação é a forma mais eficiente para prevenir e controlar a infecção pelo vírus da bronquite infecciosa (VBI). Vacinas formuladas com nanopartículas de quitosana têm sido utilizadas como sistema de entrega de antígenos pela via mucosa e imunopotenciador. O objetivo do presente estudo foi desenvolver e avaliar a eficácia de uma vacina inativada formulada com o genótipo BR-I do VBI encapsulado em nanopartículas de quitosana (VBI-CS) administrada por via mucosa em aves. Além disso, objetivou-se comparar a eficácia da vacina desenvolvida com a de uma vacina inativada convencional do mesmo vírus incorporada a um adjuvante oleoso (Montanide ISA 71) (VBI-O), administrada por via intramuscular. Foram avaliadas as respostas imunes humoral e celular (RIC) nos compartimentos de mucosa e sistêmico induzidas pelas vacinas VBI-CS e VBI-O quando associadas ou não a uma vacina viva atenuada da estirpe H120 do VBI. A proteção induzida pelos diferentes protocolos vacinais foi avaliada após o desafio com a estirpe homóloga virulenta do genótipo BR-I. A vacina VBI-CS usada sozinha induziu altos níveis de anticorpos IgA anti-VBI na mucosa e também a expressão dos genes de RIC (CD8, Granzima A e IFN) na traqueia, enquanto que associada a uma vacina viva atenuada heteróloga, induziu maiores níveis de anticorpos IgG anti-VBI (mucosa e sistêmico) e RIC caracterizada pelo aumento da expressão dos genes CD8, Granzima A e IFN, principalmente na traqueia. Além disso, foi observado que os protocolos vacinais utilizando a vacina VBI-CS induziram proteção nas aves contra o desafio com a estirpe homóloga do genótipo BR-I do VBI, conforme demonstraram as intensidades significativamente menores das alterações patológicas (ciliostase, histopatologia e carga viral) avaliadas na traqueia e nos rins, as quais ainda apresentaram correlações negativas significativas com as respostas imunes humoral e celular induzidas. Em relação aos resultados da vacina VBI-O, verificou-se que quando usada sozinha, esta vacina foi incapaz de induzir respostas imunes celular e humoral mais robustas nos compartimentos de mucosa e não protegeu de forma efetiva as aves contra o desafio, contudo quando utilizada conjuntamente com a vacina viva atenuada, induziu altos níveis de anticorpos IgG anti-VBI (nos compartimentos da mucosa e sistêmico), e a expressão aumentada dos genes de RIC (Granzima A e Perforina) na traqueia e rim, respectivamente, conferindo proteção efetiva contra o desafio. Conclui-se que a vacina VBI-CS administrada sozinha ou associada a uma vacina viva atenuada heteróloga induziu respostas imunes humoral e celular nos sítios primário e secundário sistêmico de replicação do VBI e foi efetiva em conferir proteção contra a desafio com essa estirpe variante do VBI.

Vaccination is the most efficient way to prevent and control infection caused by the infectious bronchitis virus (IBV). Vaccines formulated with chitosan nanoparticles have been used as an antigen delivery system in mucosal and immunopotentiator. The aim of this study was to develop and evaluate the efficacy of an inactivated vaccine formulated with IBV BR-I genotype encapsulated in chitosan nanoparticles (IBV-CS) administered by the mucosal route in chickens. In addition, this study aimed to compare the efficacy of the developed vaccine with a conventional inactivated vaccine of the same virus incorporated into oily adjuvant (Montanide ISA 71) (IBV-O) administered intramuscularly. The humoral and cellular (CMI) mediated immune responses in the mucosal and systemic compartments induced by IBV-CS and IBV-O vaccines were evaluated, when these vaccines were associated or not with a live attenuated H120 serotype vaccine. The protection induced by the different vaccine protocols was evaluated after the challenge with the virulent homologous strain of BR-I genotype. The IBV-CS vaccine used alone induced high levels of IgA anti-IBV antibodies in mucosal and also the expression of CMI genes (CD8, Granzyme A and IFN genes) in the trachea, while associated with a live attenuated vaccine, it induced higher levels of IgG anti-IBV antibodies (mucosal and systemic compartments) and the expression of CMI genes, mainly in trachea. In addition, the vaccine protocols using the IBV-CS vaccine induced protection for chickens against challenge with the homologous IBV BR-I strain, as demonstrated by the significantly lower intensity of the pathological alterations (ciliostasis, histopathology and viral load) in the trachea and in the kidneys, which still had significant negative correlations with the antibody and cellular immune responses induced in the vaccinated chickens. The IBV-O vaccine was unable to induce alone a robust antibody and cellular immune responses in mucosal and did not confer effective protection to vaccinated chickens against the challenge with BR-I virulent strain. However, when IBV-O vaccine was used in conjunction with the live attenuated vaccine, it induced high levels of IgG anti-IBV at mucosal and systemic compartments and the expression of CMI genes such as Granzyme A and Perforin genes, in the trachea and in the kidney, respectively, providing effective protection against the challenge. IBV-CS vaccine administered alone or associated with a heterologous attenuated live vaccine induced humoral and cellular immune responses at the primary and secondary systemic sites of IBV replication and it proved to be effective against the challenge with a variant strain of IBV.

Curva de anticorpos pós-vacinais em ovinos imunizados com uma ou duas doses de bacterina oleosa anti-leptospirose, produzida com a sorovariedade Hardjo, tipo Hardjoprajitno, estirpe Norma, isolada no Brasil / Post vaccinal antibodies profile of sheep immunized with one or two doses of an oil emulsified anti leptospirosis bacterin produced with serovar Hardjo, type Hardjoprajitno, strain Norma, isolated in Brazil

Foi comparado o nível de anticorpos de ovelhas imunizadas com uma ou duas doses de bacterina oleosa produzida com a sorovariedade Hardjo, tipo Hardjoprajitno, estirpe Norma, isolada da urina de bovino no Brasil. Culturas de 2x10(8) leptospiras/mL foram inativadas com formalina a 0,3 por cento, à concentração final e emulsionada em óleo Emulsigen® 12 por cento. A dose da vacina foi padronizada para a concentração de 1x10(8) leptospiras/mL. Quarenta ovinos adultos, da raça Santa Inês, de um rebanho livre de leptospirose por exames clínicos e sorológicos durante um ano foram escolhidos para o experimento. O grupo A (n=15) recebeu duas doses de 3,0mL da vacina por via subcutânea, com intervalo de 30 dias. O grupo B (n=15) recebeu dose única de 3,0mL, via subcutânea e o grupo C (controle) recebeu uma dose subcutânea de 3,0mL de solução 0,85 por cento de cloreto de sódio. Os títulos de anticorpos pós-vacinação foram mensurados pelo teste de soroaglutinação microscópica (SAM) e um teste imunoenzimático (ELISA) a cada 30 dias durante 120 dias. Os títulos dos grupos A e B na primeira colheita variaram de 80 a 160. No grupo A, após a segunda dose, os títulos aumentaram duas a quatro vezes, até 3.200, enquanto no grupo B os títulos de aglutininas foram menores que 160 e diminuíram uma a duas vezes após 60 dias da vacinação. Utilizando-se dose única, os anticorpos persistiram por somente 30 dias e, com duas doses, com 30 dias de intervalo, os anticorpos foram detectáveis por 60 dias por meio do teste de SAM e 120 dias no teste de ELISA. Assim, o teste de SAM detectou títulos de IgM vacinal somente por 60 dias, enquanto o teste de ELISA foi capaz de detectar anticorpos durante os 120 dias. No grupo controle negativo, ocorreram no ELISA reações inespecíficas de títulos até 80, porém no SAM os títulos dos mesmos animais se mantiveram em zero. O teste de ELISA pode ser utilizado para medir anticorpos vacinais para a sorovariedade Hardjo, tipo Hardjoprajitno, estirpe Norma em ovinos.(AU)

It was compared the level of antibodies of sheep immunized with one or two doses of an oil bacterin produced with serovar Hardjo, type Hardjoprajitno, strain Norma, isolated from cattle urine in Brazil. Cultures of 2x10(8) leptospires/mL were inactivated with formalin 0.3 percent, final concentration and emulsified in oil Emulsigen® 12 percent. The vaccine dose was standardized to the concentration of 1x10(8) leptospires/mL. Forty adult sheep, Santa Inês breed from a herd free of leptospirosis by clinical and serological examinations during one year were chosen for the experiment. Group A (n=15) received two subcutaneous 3.0 mL vaccine dose, interval of 30 days. Group B (n=15) received one subcutaneous 3.0 mL vaccine dose. Group C (control) received one subcutaneous dose of 3.0 mL of 0.85 percent sodium chloride solution. Post vaccination antibody titers were measured by microscopic agglutination test (MAT) and an in house enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) every 30 days during 120 days. At 30 days post-vaccination, the titers of the groups A and B ranged from 80 to 160. In group A, after the booster dose, the titers increased two to four times until 3,200, while in the group B the titers were lower than 160 and decreased by one to two times after 60 days after vaccination. Using a single dose, the antibodies persisted for only 30 days, and with two doses with 30 days of interval, the antibodies were detectable for 60 days through the MAT test and 120 days through the ELISA. The MAT test detected IgM titers of vaccine only for 60 days, while the ELISA was able to detect antibodies during the 120 days. In the negative control group, nonspecific reactions occurred in the ELISA up to titer 80, however titers in the MAT of the same animals remained at zero. The ELISA test can be used to assess anti leptospire vaccinal antibody level to the serovar Hardjo, type Hardjoprajitno, strain Norma in sheep.(AU)

AVALIAÇÃO DA RESPOSTA IMUNE DO TOXOIDE ÉPSILON DE Clostridium perfringens TIPO D COM DIFERENTES ADJUVANTES

Clostridium perfringens tipo é um bacilo anaeróbio, de ampla distribuição geográfica, podendo ser encontrado no solo, pastagens, água doce e salgada e como habitante normal do trato digestivo dos animais e do homem. É o principal micro-organismo produtor da toxina épsilon. Essa toxina tem ação necrótica e letal, provocando aumento da permeabilidade da mucosa intestinal, edema em vários órgãos, hidropericárdio e lesões renais. A enterotoxemia é a principal doença causada pelo Clostridium perfringens tipo D em ovinos, caprinos e bovinos, submetidos a fatores predisponentes, como mudança brusca na alimentação e alteração na microbiota intestinal. Trata-se de uma doença altamente letal, ocorrendo, na maioria dos casos, morte dos animais durante as primeiras 6 a 18 horas de infecção. Por sua rápida evolução e gravidade, o controle da doença baseia-se em medidas de manejo e em vacinações sistemáticas dos rebanhos. As vacinas comerciais possuem o toxoide adsorvido em hidróxido de alumínio, porém, em muitos casos, a eficiência destas vacinas não é boa, promovendo apenas uma proteção parcial, níveis de anticorpos protetores de curta duração e/ou estímulo de resposta celular deficiente (LOBATO, 2000). O interesse de estudar novos adjuvantes para uso em vacinas é antigo e de grande importância na medicina veterinária. Associado ao aumento de vacinas desenvolvidas com subunidades purificadas (que são mais seguras, porém menos imunogênicas), pesquisadores buscam o desenvolvimento de sistemas de liberação que promovam a estimulação eficiente do sistema imunológico. De modo geral espera-se que o adjuvante promova uma elevada e prolongada resposta imune, além de direcionar essa resposta imune para uma resposta protetora, evitando a doença (MOTA, 2006). O objetivo desse trabalho é o desenvolvimento de novas formulações de vacinas com diferentes candidatos a adjuvantes, utilizando o toxoide épsilon como modelo. Foram desenvolvidas vacinas contendo microemulsão e micropartículas de quitosana, como adjuvantes. As formulações de micropartícula de quitosana foram caracterizas quanto ao tamanho, potencial zeta e morfologia. A potência das vacinas foi avaliada por imunização em coelhos, seguida de titulação dos soros em células MDCK. O hidróxido de alumínio foi utilizado como adjuvante padrão, por ser o mais utilizado comercialmente em vacinas contra a toxina épsilon.

Clostridium perfringens is an anaerobic bacillus widely distributed and can be found in soil, pastures, water and as normal inhabitant of the digestive tract of animals and mans. It is the major microorganism producer of epsilon toxin. This toxin have lethal and necrotizing action, causing increased permeability of the intestinal mucosa, edema, hydropericardium and renal lesions. The enterotoxemia is the main disease caused by Clostridium perfringens type D in sheep, goats and cattle, submitted to predisposing factors, such as sudden change in diet and changes in intestinal microbiota. This is a highly lethal disease, occurring in most cases death of the animals, during the first 6 to 18 hours of infection. For being a rapid disease progression and severity, its control is based on management measures and in systematic vaccination of flocks. The commercial vaccines have toxoid adsorbed in aluminum hydroxide, but in many cases the effectiveness of these vaccines is not good, promoting only partial protection, protective antibody levels of short duration (LOBATO, 2000). The interest in studying new adjuvants for use in vaccines is old and of great importance in the veterinary medicine. Associated with increased of vaccines developed with purified subunits (which are safer, but less immunogenic), researchers seek to develop delivery systems that promote the efficient stimulation of the immune system. In general it is expected that the adjuvant promotes a high and prolonged immune response and direct this immune response to a protective response, avoiding the disease (MOTA, 2006). The aim of this work is the development of new formulations of vaccines with different candidates the adjuvants, using the epsilon toxoid as a model. Vaccines have been developed containing microemulsion and chitosan microparticles as adjuvants. The chitosan microparticle formulations was characterized s by size, zeta potential and morphology. The potency of the vaccines was evaluated by immunization of rabbits, followed by titration of the sera in MDCK cells. Aluminum hydroxide was used as standard adjuvant, for being the most used commercially in vaccines against epsilon toxin.