Companion psittacine birds as reservoir of gentamicin and vancomycin-resistant Enterococcus spp / Psitacídeos de companhia como reservatórios de Enterococcus spp. gentamicina e vancomicina-resistentes

Enterococcus are recognized worldwide as significant nosocomial agents that have been continuously envolving to adapt to different niches and acquire resistance to several antibiotic classes. Vancomycin and gentamicin-resistant strains of E. faecalis and E. faecium have been associated with nosocomial human infections. Some epidemiological studies suggest the participation of pets as reservoirs of vancomycin and gentamicin-resistant Enterococcus strains. However, the role of companion birds as reservoirs of these strains has been poorly studied. In this study, 126 psittacine birds were evaluated and 26.9% carried Enterococcus spp., including the species E. faecalis, E. faecium, E. hirae, E. phoeniculicola, E. gallinarum and E. casseliflavus. The antibiotic resistance profile showed four high-level gentamicin-resistance (HLGR) strains. In addition, two strains presented intermediate levels of vancomycin resistance. Resistant strains were isolated from fecal and oropharynx samples of sick and clinically healthy birds, suggesting that psittacine birds may act as reservoirs of HLGR Enterococcus spp. However, sick birds appear to be more implicated in the enterococci transmission than healthy birds.(AU)

Enterococcus são reconhecidos mundialmente como significantes agentes nosocomiais, que têm continuamente se adaptado a diferentes nichos e adquirido resistência a várias classes de antibióticos. Cepas de E. faecalis e E. faecium vancomicina e gantamicina-resistentes têm sido associadas a infecções nosocomiais em humanos. Alguns estudos epidemiológicos sugerem a participação de aves como reservatórios de cepas de Enterococcus vancomicina e gentamicina-resistentes. Entretanto, a relação das aves de companhia como reservatórios destas cepas tem sido pouco estudada. Neste estudo, 126 psitacídeos foram avaliados, e 26,9% destes eram portadores de Enterococcus spp., incluindo as espécies E. faecalis, E. faecium, E. hirae, E. phoeniculicola, E. gallinarum e E. casseliflavus. O perfil de resistência antibiótica mostrou quatro cepas com alto nível de resistência a gentamicina (ANRG). Além de duas cepas com nível intermediário de resistência a vancomicina. As cepas resistentes foram isoladas de amostras fecais e de orofaringe de aves doentes e clinicamente saudáveis, sugerindo que psitacídeos podem estar atuando como reservatórios para Enterococcus spp. com ANRG. Contudo, Aves doentes parecem estar mais relacionadas à transmissão de enterococcus, do que aves saudáveis.(AU)

Companion psittacine birds as reservoir of gentamicin and vancomycin-resistant Enterococcus spp / Psitacídeos de companhia como reservatórios de Enterococcus spp. gentamicina e vancomicina-resistentes

Enterococcus are recognized worldwide as significant nosocomial agents that have been continuously envolving to adapt to different niches and acquire resistance to several antibiotic classes. Vancomycin and gentamicin-resistant strains of E. faecalis and E. faecium have been associated with nosocomial human infections. Some epidemiological studies suggest the participation of pets as reservoirs of vancomycin and gentamicin-resistant Enterococcus strains. However, the role of companion birds as reservoirs of these strains has been poorly studied. In this study, 126 psittacine birds were evaluated and 26.9% carried Enterococcus spp., including the species E. faecalis, E. faecium, E. hirae, E. phoeniculicola, E. gallinarum and E. casseliflavus. The antibiotic resistance profile showed four high-level gentamicin-resistance (HLGR) strains. In addition, two strains presented intermediate levels of vancomycin resistance. Resistant strains were isolated from fecal and oropharynx samples of sick and clinically healthy birds, suggesting that psittacine birds may act as reservoirs of HLGR Enterococcus spp. However, sick birds appear to be more implicated in the enterococci transmission than healthy birds.(AU)

Enterococcus são reconhecidos mundialmente como significantes agentes nosocomiais, que têm continuamente se adaptado a diferentes nichos e adquirido resistência a várias classes de antibióticos. Cepas de E. faecalis e E. faecium vancomicina e gantamicina-resistentes têm sido associadas a infecções nosocomiais em humanos. Alguns estudos epidemiológicos sugerem a participação de aves como reservatórios de cepas de Enterococcus vancomicina e gentamicina-resistentes. Entretanto, a relação das aves de companhia como reservatórios destas cepas tem sido pouco estudada. Neste estudo, 126 psitacídeos foram avaliados, e 26,9% destes eram portadores de Enterococcus spp., incluindo as espécies E. faecalis, E. faecium, E. hirae, E. phoeniculicola, E. gallinarum e E. casseliflavus. O perfil de resistência antibiótica mostrou quatro cepas com alto nível de resistência a gentamicina (ANRG). Além de duas cepas com nível intermediário de resistência a vancomicina. As cepas resistentes foram isoladas de amostras fecais e de orofaringe de aves doentes e clinicamente saudáveis, sugerindo que psitacídeos podem estar atuando como reservatórios para Enterococcus spp. com ANRG. Contudo, Aves doentes parecem estar mais relacionadas à transmissão de enterococcus, do que aves saudáveis.(AU)

Isolamento de Enterococcus spp. de mortadela vendida fatiada em Niterói/RJ / Isolation of Enterococcus spp. of mortadela sold sliced in Niterói/RJ

Os derivados cárneos vêm, ao longo dos anos, se fazendo cada vez mais presentes no cardápio do brasileiro e, entre eles, a mortadela é de grande importância no setor de frios e embutidos e de maior aceite mundialmente. Foram adquiridos em estabelecimentos comerciais do bairro de Icaraí em Niterói/RJ 33 amostras de mortadela, sendo encaminhadas ao Laboratório de Controle Microbiológico de Produtos de Origem Animal da Faculdade de Veterinária da Universidade Federal Fluminense, onde foram submetidas a pesquisa de enterococos. Das 33 amostras de mortadelas analisadas no presente trabalho, 11 delas apresentaram resultados negativos para a presença de Enterococcus spp.. Entretanto, foram encontrados E. casseliflavus, E. faecium e E. faecalis. A presença do Enterococcus como microbiota contaminante pode tornar o seu consumo perigoso para a saúde humana.(AU)

Isolamento de Enterococcus spp. de mortadela vendida fatiada em Niterói/RJ / Isolation of Enterococcus spp. of mortadela sold sliced in Niterói/RJ

Os derivados cárneos vêm, ao longo dos anos, se fazendo cada vez mais presentes no cardápio do brasileiro e, entre eles, a mortadela é de grande importância no setor de frios e embutidos e de maior aceite mundialmente. Foram adquiridos em estabelecimentos comerciais do bairro de Icaraí em Niterói/RJ 33 amostras de mortadela, sendo encaminhadas ao Laboratório de Controle Microbiológico de Produtos de Origem Animal da Faculdade de Veterinária da Universidade Federal Fluminense, onde foram submetidas a pesquisa de enterococos. Das 33 amostras de mortadelas analisadas no presente trabalho, 11 delas apresentaram resultados negativos para a presença de Enterococcus spp.. Entretanto, foram encontrados E. casseliflavus, E. faecium e E. faecalis. A presença do Enterococcus como microbiota contaminante pode tornar o seu consumo perigoso para a saúde humana.

Vertebral Osteomyelitis in Broilers: A Review

ABSTRACT Locomotor diseases are still a challenge in modern poultry. Vertebral osteomyelitis (VO) is an emerging disease in broilers worldwide. The inflammatory process in the affected thoracic vertebra (T4) and subsequent spinal cord compression leads to clinical signs related to locomotor impairment, inadequate feeding and drinking, and increased mortality in the affected flocks. The pathogenesis of the disease is poorly understood and Enterococcus cecorum is the bacterium most frequently associated with the disease. However, other bacteria such as E. faecalis, E. durans, Escherichia coli and Staphylococcus aureus have been recently detected in cases of the disease, raising questions regarding its etiopathogenesis. As many questions about VO in broilers remain unanswered, knowledge on its prevention, control and treatment is limited. In this review, we compile and discuss the currently available information concerning VO in broilers and highlight important aspects of the disease.

Vertebral Osteomyelitis in Broilers: A Review

Locomotor diseases are still a challenge in modern poultry. Vertebral osteomyelitis (VO) is an emerging disease in broilers worldwide. The inflammatory process in the affected thoracic vertebra (T4) and subsequent spinal cord compression leads to clinical signs related to locomotor impairment, inadequate feeding and drinking, and increased mortality in the affected flocks. The pathogenesis of the disease is poorly understood and Enterococcus cecorum is the bacterium most frequently associated with the disease. However, other bacteria such as E. faecalis, E. durans, Escherichia coli and Staphylococcus aureus have been recently detected in cases of the disease, raising questions regarding its etiopathogenesis. As many questions about VO in broilers remain unanswered, knowledge on its prevention, control and treatment is limited. In this review, we compile and discuss the currently available information concerning VO in broilers and highlight important aspects of the disease.(AU)

Vertebral Osteomyelitis in Broilers: A Review

Locomotor diseases are still a challenge in modern poultry. Vertebral osteomyelitis (VO) is an emerging disease in broilers worldwide. The inflammatory process in the affected thoracic vertebra (T4) and subsequent spinal cord compression leads to clinical signs related to locomotor impairment, inadequate feeding and drinking, and increased mortality in the affected flocks. The pathogenesis of the disease is poorly understood and Enterococcus cecorum is the bacterium most frequently associated with the disease. However, other bacteria such as E. faecalis, E. durans, Escherichia coli and Staphylococcus aureus have been recently detected in cases of the disease, raising questions regarding its etiopathogenesis. As many questions about VO in broilers remain unanswered, knowledge on its prevention, control and treatment is limited. In this review, we compile and discuss the currently available information concerning VO in broilers and highlight important aspects of the disease.

Quorum sensing in Enterococcus faecium, Enterococcus faecalis and Bacillus cereus strains isolated from ricotta processing / Quorum sensing em cepas de Enterococcus faecium, Enterococcus faecalis e Bacillus cereus isoladas do processamento de ricota

The quorum sensing phenomenon is a process of intra- and inter-species microbial communication involving the production and detection of extracellular signaling molecules. The autoinducer AI-2 has been proposed to serve as a universal signal for interspecies communication. This study aimed to evaluate the capability of Enterococcus faecium, Enterococcus faecalis, and Bacillus cereus strains isolated from ricotta processing to produce quorum sensing signalling molecules (AI-2). The strains were evaluated for the presence of the luxS gene using the polymerase chain reaction. AI-2 quorum sensing signalling molecules were measured in relative light units (RLUs) using a luminometer. A total of 74% of E. faecium, 91% of E. faecalis, and 95% of B. cereus isolates were positive for luxS gene. In addition, the induced bioluminescence in Vibrio harveyi BB170 was observed in all strains, indicating the presence of the AI-2 autoinducer.(AU)

O fenômeno quorum sensing corresponde a um processo de comunicação intra e interespécies microbianas e é mediado por sinais químicos extracelulares, denominados moléculas sinalizadoras ou auto indutoras (AI). A molécula AI2 está envolvida na comunicação interespécies, denominada sistema universal de comunicação. Este estudo teve como objetivo avaliar a capacidade de Enterococcus faecium, Enterococcus faecalis e Bacillus cereus isolados do processamento de ricota em produzir moléculas sinalizadoras de Quorum sensing (AI-2). Os isolados foram avaliados quanto à presença do gene luxS utilizando a reação em cadeia da polimerase (PCR). As moléculas sinalizadoras (AI-2) foram medidas em unidades relativas de luz (RLU) através de um luminômetro. Um total de 74% dos isolados de E. faecium, 91% de E. faecalis e 95% de B. cereus foram positivos para o gene luxS. Além disso, todos os isolados apresentaram capacidade de induzir o fenômeno de bioluminescência em Vibrio harveyi BB170, indicando a presença de auto indutores AI-2.(AU)

AVALIAÇÃO DE ENTEROFAGOS EM AMOSTRAS DE ÁGUA E ESGOTO E SEU POTENCIAL USO COMO INDICADORES DE CONTAMINAÇÃO FECAL

O potencial uso de fagos que infectam Enterococcus spp., como marcadores de contaminação fecal em amostras de água, deve-se a capacidade dos mesmos infectarem bactérias predominantes em fezes de origem humana. Além disso, fagos são indicados como modelos para a remoção de vírus entéricos em sistemas de tratamento de efluentes. Efetivamente, os fagos podem ser um indicador mais apropriado da presença de vírus entéricos na água e nas águas residuais do que os indicadores bacterianos devido a sua similaridade com os vírus entéricos em termos de estrutura, morfologia, tamanho e resistência à inativação. Assim, sua aplicação na detecção de contaminação fecal em recursos hídricos é sugerida, pois indicam melhor a presença de patógenos entéricos, quando comparado a bactérias indicadoras. O objetivo deste trabalho foi determinar a utilização de enterofagos líticos como indicadores de contaminação fecal em amostras ambientais. Para isso, foram realizadas seis coletas de amostras de água e esgoto brutos e tratados (n = 24) de estações de tratamento na cidade de Novo Hamburgo (RS). A partir delas foi realizado o isolamento de enterofagos de Enterococcus faecalis e Enterococcus faecium, através de ensaio de placa em camada dupla de agar. Paralelamente as essas mesmas amostras, realizou-se a pesquisa de Enterococcus spp. através do teste comercial Enterolert®, e a pesquisa de Mastadenovírus espécie C sorotipo 5 (HAdV-C) usando o método quantitativo PCR. Foram identificados, em ambos os tipos de amostras, fagos que infectaram Enterococcus faecalis e Enterococcus faecium. Em amostras de água constatou-se que não houve diferença significativa entre os dois fagos, porém quando analisadas as amostras de esgoto, houve diferença estatística entre eles (p < 0,05) em esgoto pré e pós tratamento, corroborando que o E. faecalis é o hospedeiro mais adequado para a pesquisa de enterofagos neste tipo de amostra. Não foi observado correlação significativa (p> 0,05) entre a presença de HAdV-C e enterofagos em ambas amostras. Também não houve correlação significativa dos fagos de E. faecium e E. faecalis com Enterococccus spp. em ambas as amostras. Necessita-se de mais estudos sobre o uso dos enterofagos como indicadores de contaminação fecal, visto a falta de dados consistentes na literatura sobre estes fagos.

The potential use of phages that infect Enterococcus spp., as markers of fecal contamination in water samples, has been reported because these bacteriophages are capable to infect bacteria that are predominantly present in human feces. In addition, phages have been proposed as models for the removal of enteric viruses in treatment systems. Effectively, phages can be a more appropriate indicator of the presence of enteric viruses in water and wastewater than bacterial indicators due to their similarity with enteric viruses in terms of structure, morphology, size and resistance to inactivation. Thus, its application in the detection of fecal contamination in water resources is suggested, as they better indicate the presence of enteric pathogens when compared to indicator bacteria. The objective of this study was to determine the use of lytic enterophages as indicators of fecal contamination in environmental samples. For this, six samples of raw and treated water and sewage samples (n = 24) were collected from treatment plants in the city of Novo Hamburgo (RS). From them, Enterococcus faecalis and Enterococcus faecium were isolated by means of a double layer lysis plate test of Agar. In parallel, Enterococcus spp. through enterolert commercial test®, and Mastadenovirus research species C serotype 5 (HAdV-C) using the PCR quantitative method. Phages that infected Enterococcus faecalis and Enterococcus faecium were identified in both types of samples. In water samples it was found that there was no significant difference between the two phages, however, when the sewage samples were analyzed, there was a statistical difference between them (p < 0.05) in pre and post-treatment sewage, corroborating that E. faecalis is the most appropriate host for the research of enterophageals in this type of sample. There was also no significant correlation between E. faecium and E. faecalis phages with Enterococccus spp. in both samples. Further studies on the use of enterophages as indicators of fecal contamination are needed, given the lack of consistent data in the literature on these phages.

Qualidade microbiológica do leite cru produzido no Norte de Minas Gerais / Microbiological quality of raw milk produced in northern of Minas Gerais

Objetivou-se verificar a contaminação do leite cru por micro-organismos mesófilos, psicrotróficos, coliformes a 45°C e Enterococcus spp., produzido por rebanhos mestiços, em 30 unidades agrícolas familiares produtoras de leite em Juramento e Montes Claros,  na região Norte de Minas gerais. Houve quatro coletas de amostras durante um ano, sendo duas na época de chuva e duas na época da seca. Coletaram-se amostras de leite cru e cru refrigerado, observando-se a contagem total de micro-organismos mesófilos, psicrotróficos, Enterococcus spp. e a contagem de coliformes a 45°C. Coletaram-se também, amostras de Swabs de equipamentos utilizados em ordenha (baldes e latões) utilizando-se a técnica do esfregaço em superfície, a fim de avaliar a contagem total bacteriana presente nesses utensílios para verificar a sua higienização. As amostras de leite apresentaram contaminação elevada por micro-organismos aeróbios mesófilos, psicrotróficos, Enterococcus spp.,coliformes a 45°C, comprometendo a qualidade higiênico-sanitária do produto, bem como as amostras de Swabs, queapresentaram níveis de contaminação elevados, quanto à presença de aeróbios mesófilos. Existiu deficiência quanto às práticas de antissepsias adotadas nos equipamentos utilizados na ordenha, levando a contaminações acima do permitido por mesófilos aeróbios, tornando-se evidente a necessidade de adoção de boas práticas agropecuárias e maiores investimentos em treinamentos e assistência técnica de qualidade com o intuito de provocar melhorias na qualidade microbiológica do leite produzido nessa região(AU)

This study aimed to investigate the contaminationby mesophilic, psychrotrophic, coliform microorganisms at 45°C and Enterococcusspp., produced by crossbred herds, in raw milk produced in 30 family dairy farms in Juramento and Montes Claros, Northern MinasGerais. Samples were collected 4 times, 2 during the rainy season and 2 during the dry season. Raw milk samples and milk samplesrefrigerated were collected, observing the total count of mesophilic, psychrotrophic microorganisms, Enterococcus sppand coliformat 45°C. Was collected too, Swabs samples from milking materials (buckets, cans) were collected using the surface scrubbingtechnique, in order to assess the total bacterial count of those utensils to verify their hygiene. The milk samples showed highcontamination by micro-organisms aerobic mesophilic, psychrotrophic, Enterococcus spp., Coliforms at 45°C, compromising thesanitary quality of the product as well as Swab samples that hight contamination levels, with aerobic mesophilic. What compromisedthe sanitary quality of the product. There are shortcomings regarding antiseptic practices adopted on the milking equipment, leadingto aerobic mesophilic contamination higher than allowed. Becoming evident the need for adoption of good agricultural practices,greater investments in training and quality technical assistance in order to stimulate improvements in the microbiological qualityof the milk produced in the region(AU)

Prevalence and phenotypic characterization of Enterococcus spp. isolated from food in Brazil

We evaluated the frequency of enterococci from food and found 95.2% of positivity, being E. faecium and E. faecalis the most frequent species. High-level streptomycin resistance was observed, as well as gelatinase and hemolysis activity, showing the potential role of environmental strains as reservoir of virulence and resistance traits.(AU)

Probióticos na avicultura / Probiotics on poultry production

Com a proibição do uso de antibióticos como melhoradores de desempenho, aumentaram as pesquisas para desenvolver produtos alternativos que fossem eficientes para melhorar o desempenho zootécnico dos animais de produção e manter a saúde intestinal deles, por meio da redução de patógenos e da imuno modulação do trato gastrointestinal. O uso de probióticos já é conhecido há muito tempo, entretanto os mecanismos de ação destes produtos e a interação deles com o organismo animal hospedeiro estão sendo mais profundamente pesquisados agora. Sabe-se que os probióticos auxiliam no equilíbrio da microbiota intestinal, podendo, por meio deste efeito, melhorar o desempenho dos animais. Esta atividade se dá pela produção de diferentes metabólitos com ação antimicrobiana e também pela competição por sítios de ligação com bactérias patogênicas na mucosa do trato gastrointestinal ou através de imunomodulação no organismo animal. Devido a todas as ações dos probióticos, eles são utilizados como melhoradores de desempenho animal e também podem ser uma ferramenta para controle de enterobactérias de importância em saúde pública.(AU)

As antibiotics growth promoters have been banned from animal feed, probiotics have received special attention as alternative products to enhance performance from livestock and keep their gastrointestinal health. Probiotics benefits are known since long time ago, however, the mechanisms of action of these products are being better researched now. Is known that probiotics could balance intestinal microbiot and due to this, they can improve animal performance. This activity is due to the production of different metabolites with antimicrobial activity and competition by bind sites on gastrointestinal mucosal. Due to all this probiotic actions, they are recommended as animal growth promoters and also may be an important tool to control enterobacterias considered risky to public health.(AU)

Micro-organismos de importância veterinária e zoonóticos em pombos domésticos (Columba livia domestica) do Distrito Federal, Brasil

Pombos domésticos estão amplamente distribuídos nos centros urbanos e podem constituir um reservatório de patógenos fúngicos e bacterianos. Este trabalho teve como objetivos caracterizar micro-organismos de importância veterinária e zoonóticos em swab cloacal de Columba livia domestica clinicamente saudáveis mantidos em criatórios e em um laboratório de experimentação animal no Distrito Federal. Das 100 amostras de swab cloacal analisadas, 75% foram positivas no cultivo microbiológico em ágar sangue, sendo que Escherichia coli (64%) e Enterococcus spp. (18%) caracterizaram-se como as bactérias mais frequentes. Nenhuma amostra mostrou-se positiva para Salmonella spp. e em apenas uma (1%) foi identificado Cryptococcus spp. Em relação à sensibilidade de E. coli aos antimicrobianos, tetraciclina, estreptomicina e sulfazotrim constituíram as drogas menos eficazes in vitro. Nos isolados de Enterococcus spp. testados, os menores percentuais de sensibilidade observados foram para oxacilina, cefalexina e ácido nalidíxico. A ciprofloxacina destacou-se como a droga mais eficaz in vitro para ambas as espécies. Doze (18,1%) isolados de E. coli e oito (80%) de Enterococcus spp. demonstraram resistência múltipla a três ou mais classes de drogas testadas. A formação de biofilme foi evidenciada em todos os isolados de Enterococcus spp. avaliados e em 61% das cepas de E. coli. A caracterização filogenética de E. coli revelou que a maior parte dos isolados pertenceram ao grupo B2 (46,9%), seguido dos grupos A (29,7%) e D (23,4%). Os pombos domésticos avaliados são portadores de micro-organismos multirresistentes e potencialmente patogênicos para humanos, incluindo Enterococcus spp. resistente à vancomicina.

Domestic pigeons are widely distributed in urban centers and may constitute a reservoir of fungic and bacterial pathogens. This work aimed to characterize microorganisms of veterinary and zoonotic significance in cloacal swabs of healthy Columba livia domestica from pigeons breeders and from na animal experimentation laboratory located in Distrito Federal. Of the 100 samples of cloacal swabs analyzed, 75% were positive in the microbiological culture in blood agar, being Escherichia coli (64%) and Enterococcus spp. (18%) the most frequent bacteria. No samples were positive for Salmonella spp. and only one (1%) was positive to Cryptococcus spp. Regarding the sensitivity of E. coli to antimicrobials, tetracycline, streptomycin and sulfazotrim were the least effective drugs in vitro. For Enterococcus spp. isolates, the lowest percentages of sensitivity were observed for oxacillin, cephalexin and nalidixic acid. Ciprofloxacin was the most effective drug in vitro for both species. Twelve (18.1%) E. coli isolates and eight (80%) Enterococcus spp. showed multiple resistance to three or more classes of drugs tested. Biofilm formation was evidenced in all Enterococcus spp. evaluated and in 61% of E. coli strains. The phylogenetic characterization of E. coli revealed that most of the isolates belonged to group B2 (46.9%), followed by groups A (29.7%) and D (23.4%). The evaluated domestic pigeons are carriers of multiresistant and potentially pathogenic microorganisms, including vancomycin resistant Enterococci.

PERFIL MICROBIOLÓGICO DE SUPLEMENTOS LÁCTEOS PARA IDOSOS

Idosos são mais suscetíveis a agentes etiológicos de origem alimentar. A proteína do soro de leite, comumente encontrada em suplementos lácteos, é uma fonte benéfica de proteína. No entanto, ela pode conter microrganismos de origem láctica. Endosporos e esporos podem resistir à processamento tecnológico, sendo capazes de produzir toxinas termo estáveis. Todos esses fatores exigem atenção para a produção de suplementos seguros. Os objetivos deste estudo foram realizar as contagens de coliformes totais, Bacillus cereus, estafilococos coagulase positiva, Enterococcus spp., bactérias lácticas e fungos, além da pesquisa de Salmonella spp. e Cronobacter sakazakii. Determinação da resistência bacteriana a antimicrobianos e perfil micotoxicológico de espécies fúngicas isoladas também caracterizaram o nível de qualidade sanitária dos suplementos. Para as análises bacteriológicas foram utilizadas a metodologia descrita pela instrução normativa 62 do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA); os métodos padrão de análise de água e de águas Residuais (APHA); o manual Merck e o método ISO / TS 22964 modificado. Para a resistência bacteriana aos antimicrobianos utilizou-se a metodologia do Clinical and Laboratory Standards Institute, e a contagem de fungos, identificação e perfil micotoxicológico seguindo determinações por Pitt; Hocking em Fungos e alimentos. Contagens bacterianas relevantes se resumiram a Enterococcus spp. Não foi encontrada resistência bacteriana aos antimicrobianos. Contagens de fungos estavam acima do determinado pela USP (10 UFC/g), superando 104 UFC/g, mostrando também elevado coeficiente de variação (CV 0,33). Associada com a atividade de água de baixa encontrada (0,47 ± 0,15) sugere condições adequadas para a manutenção de conídios fúngicos. Há também um risco potencial de germinação de fungos neste substrato, devido ao potencial higroscópico do material. Todas as marcas de suplementos analisadas foram consistentes com os padrões estabelecidos pela legislação brasileira. No entanto, contagens de fungos excederam o estipulado pela USP. Esta contaminação confere potencial risco para a população idosa.

Elders are more susceptible to food born etiologic agents. Whey protein, commonly found in dairy supplements, is a very beneficial source of protein. However, it can contain microorganisms of lactic origins. Endospores and spores can resist the technological processing, being able to produce thermo stable toxins. All those factors demand attention to the production of safe supplements. The aims of this study are realizing the counts of total coliforms, Bacillus cereus, staphylococci positive for coagulase, Enterococcus spp., acid lactic bacteria and fungus, plus the research of Salmonella spp. and Cronobacter sakazakii. Determination of bacterial resistance to antibiotics and mycotoxicological profile of fungi´s species isolated to better characterize the level of sanitary quality of supplements. For the bacteriologic analysis were used the methodology described by the normative instruction n. 62 from by Brazilian Ministry of Agriculture, Livestock and Supply (MAPA); the Standard Methods of the Examination of Water and Waste Water (APHA); the Merck manual and the modified method ISO/TS 22964. For bacterial resistance to antibiotics, the Clinical and Laboratory Standards Institute methodology was followed. Fungi count, identification and mycotoxicological profile followed determinations by Pitt; Hocking in Fungi and food. Relevant bacterial counts resumed to Enterococcus spp. No bacterial resistance to antibiotics were found. Fungal counts were above the determined by the USP (10 CFU/g), in higher order than 104 CFU/g, also showing high coefficient of variation (CV 0.33). Associated with the low water activity founded (0.47 ±0.15) suggests suitable conditions for maintenance of fungal conidia. There is also a potential risk for contamination by fungi sprouting process in this substrate, due to the hygroscopic potential material. All brands of supplements analyzed were consistent with the standards established by Brazilian legislation. However, fungi count exceeded the stipulated by USP. Such contamination confers potential risk to the elder population.

Enterococcus spp., COLIFORMES E VÍBRIOS EM OSTRAS (Crassostrea rhizophorae) ADQUIDIRDAS NO MANGUE DE BARRA DE GUARATIVA RJ

As ostras do gênero Crassostrea dão origem a um alimento rico em nutrientes que são importantes para o desempenho de diversas funções no organismo humano. Os moluscos bivalves se desenvolvem no ambiente natural de forma sustentável, pois se alimentam de partículas em suspensão devido a um eficiente sistema de filtração e fixação de nutrientes. Os bivalves são considerados bioindicadores da qualidade do ambiente aquático onde vivem, uma vez que acumulam diversas bactérias, incluindo importantes patógenos que podem ser provenientes de contaminação ou da microbiota indígena estuarina ou marinha. Enquanto alimento e, sendo consumidos preferencialmente crus, permitem a veiculação de bactérias patogênicas. A ocupação desordenada das regiões estuarinas provoca intensa contaminação dos manguezais por efluentes domiciliares que pode ser estimada através da análise de bivalves extraídos destas regiões. Na presente pesquisa, foram determinados os Números Mais Prováveis (NMP) de coliformes totais, Escherichia coli e Enterococcus spp.; identificadas algumas espécies dos gêneros Enterococcus e Vibrio e foi verificado o perfil de susceptibilidade a agentes antimicrobianos de espécimes do gênero Enterococcus isoladas a partir de ostras oriundas do manguezal de Barra de Guaratiba, Rio de Janeiro. A determinação do NMP de coliformes totais, de E. coli e de Enterococcus spp. foi realizada empregando-se métodos cromogênicos rápidos. O isolamento de Enterococcus spp. foi realizado em Ágar m-enterococos a partir do crescimento nos tubos do meio cromogênico. A identificação presuntiva do gênero Enterococcus foi realizada por provas bioquímicas tradicionais. Para o isolamento e identificação presuntiva do gênero Vibrio, foi utilizada a metodologia descrita pela APHA (2001). A fim de se identificar as espécies, as cepas triadas foram analisadas pela técnica da ionização por dessorção a laser assistida por matriz e detecção de tempo de vôo com análise por espectrometria de massas (do inglês MALDI-TOF-MS). Para determinação da susceptibilidade das bactérias do gênero Enterococcus aos antimicrobianos, empregou-se a metodologia indicada pelo CLSI (2014). Pela técnica de MALDI-TOF-MS, identificou-se 75,7% das bactérias presuntivamente pertencentes ao gênero Enterococcus em nível de espécie e 21,2% em nível de gênero, mas só foram identificadas 13,5% das cepas de vibrios em nível de espécie e 70,3% em nível de gênero. Foram isoladas duas cepas de E. faecalis resistentes a três diferentes classes de antimicrobianos, incluindo resistência a altas doses de estreptomicina. Também foi isolada uma cepa de E. faecalis com resistência intermediária à vancomicina. Conforme a legislação brasileira do extinto Ministério da Pesca e Aquicultura (BRASIL, 2013), os valores encontrados para os NMP de E. coli foram indicativos da necessidade de processamento do molusco antes de sua comercialização ou seu consumo. Além da concentração de E. coli, a presença de cepas resistentes a múltiplos agentes antimicrobianos e à vancomicina é considerada um risco para o consumo in natura das ostras extraídas no manguezal de Barra de Guaratiba. Também reflete a contaminação da água e, possivelmente, de outras espécies de pescado, o que representa uma ameaça para aquele ambiente e para a saúde pública dos residentes e consumidores de pescado provenientes daquela região.

The Crassostrea spp. oysters are rich in essential nutrients for human body. In the natural environment, bivalve mollusks grow in a sustainable way since they are filter feeders and remove plankton and suspended particles from the water column using their efficient filtering system and nutrients fixation capacity. This process leads to very few residues that are expelled and used by other organisms present in the same environment. Bivalve mollusks are considered bioindicators of the environment quality because they accumulate different bacteria, including important pathogens coming from either fecal pollution or indigenous microbiota of estuarine or marine environment. As a human food, oysters are preferably consumed raw, allowing foodborne disease to occur. The unruled urban occupation of estuarine areas causes considerable contamination of mangrove by raw sewage. This contamination level can be estimated through the analysys of bivalve mollusks extracted from these areas. In the present study, Most Probable Number (MPN) of Total Coliforms, Escherichia coli and Enterococcus spp. was estimated; Enterococcus and Vibrio species were identified and the Enterococcus spp. antimicrobial susceptibility profile was evaluated for isolates obtained from Barra de Guaratiba Mangrove (Rio de Janeiro, Brazil) oysters. MPN was estimated through rapid chromogenic methods. Enterococcus spp. was isolated in m-Enterococcus agar after growth in chromogenic media. The presumptive identification of Enterococcus spp. used classical microbiological phenotypic characterization methods. The isolation and presumptive identification of Vibrio spp. were based on APHA (2001) methodology. For species identification, selected strains were analysed through matrix-assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF-MS). For the Enterococcus spp. antimicrobial susceptibility profile determination it was used the CLSI (2014) methodology. Through MALDI TOF MS, it was possible to identify the species of 75.7% of the isolates presumed to be Enterococcus spp. Another group of 21.2% of the isolates was confirmmed to be Enterococcus spp. (without positive identification of species). For presumed Vibrio spp. strains, MALDI TOF MS was able to confirm the species of 13.5% of the isolates and to confirm the genus of 70.3% of the isolates. Two E. faecalis strains were resistant to three different antimicrobial categories, including high-level resistance to streptomycin. One E. faecium strain showed intermediate resistance to vancomycin. According to the Brazilian legislation from the now extint Ministry of Fishery and Aquiculture (BRASIL, 2013), the MPN calculated for E. coli in the present study indicates the need for some oysters processing before either trade or consumption. Besides the E. coli concentration, the presence of strains that are resistant to multiple antimicrobial drugs and to vancomycin is another risk fator for the in natura (raw) consumption of the oysters from the Barra de Guaratiba Mangrove. It is also an indication for water and other fish species contamination, what represents a threat for that environment and for public health of both local residents and fish consumers.

Antimicrobial resistance profile of Enterococcus spp isolated from food in Southern Brazil

Fifty-six Enterococcus spp. strains were isolated from foods in Southern Brazil, confirmed by PCR and classified as Enterococcus faecalis (27), Enterococcus faecium (23) and Enterococcus spp(6). Antimicrobial susceptibility tests showed resistance phenotypes to a range of antibiotics widely administrated in humans such as gentamycin, streptomycin, ampicillin and vancomycin.

Cinqüenta e seis cepas de Enterococcus spp. foram isoladas de alimentos no Sul do Brasil, confirmados por PCR e classificadas como Enterococcus faecalis (27), Enterococcus faecium (23) e Enterococcus spp. (6). Testes de susceptibilidade aos antimicrobianos demonstraram fenótipos de resistência a uma gama de antibióticos administrados em humanos, como gentamicina, estreptomicina, ampicilina e vancomicina.

Correlation between API 20 STREP and multiplex PCR for identification of Enterococcus spp. isolated from Brazilian foods

We evaluated the suitability of API 20 STREP and multiplex PCR to speciate 52 Enterococcus spp. obtained from Brazilian foods. A high percentage of isolates (78.9%) presented discrepant results between evaluated tests. Similar results were obtained for six E. faecalis and five E. faecium. The PCR multiplex was more effective than API 20 STREP for complete identification of the isolates.

A identificação das espécies de 52 Enterococcus spp. isolados de amostras de alimentos foi realizada empregando-se duas metodologias: sistema API 20 STREP e PCR multiplex. Os resultados obtidos revelaram que 78,9% dos isolados apresentaram resultados diferentes nos dois testes utilizados. Apenas seis E. faecalis e cinco E. faecium apresentaram resultados concordantes pelos dois métodos. PCR multiplex permitiu a identificação completa de um número significantemente maior de enterococos do que o sistema API 20 STREP.

Caracterização físico-química e bacteriológica de peixes anchovados

Este estudo objetivou avaliar a qualidade de peixes anchovados de diferentes marcas e origens comercializadas no mercadovarejista de Niterói-RJ. Foram estudadas através de parâmetros bacteriológicos e físico-químicos, 17 amostras processadasno Brasil, Peru, Itália, Argentina e Marrocos. Os resultados demonstraram que os valores de N-BVT extrapolaram, em 100%das amostras, o limite oficial (30mgN/100g) variando entre 42,84 203,80 mg N/100g. Todas as amostras apresentaramhistamina, sendo que em 76,47% (13 amostras), o limite oficial (10mg/100g) foi extrapolado. Somente em três amostras nãoforam observadas a presença de putrescina e cadaverina. Os valores de pH variaram entre 5,08 e 5,73, de Atividade de águaentre 0,55 e 0,70. O percentual de cloretos observado foi de 9,78 a 17,50. Quanto aos parâmetros bacteriológicos, as amostrasanalisadas encontram-se dentro do padrão oficial, no que se refere à análise qualitativa de Salmonella spp. Para coliformestermotolerantes também se encontram adequados à legislação. Dentre as amostras analisadas, somente duas estãoinadequadas quando avaliada a presença de Staphylococcus coagulase positivo. A enumeração de Enterococcus spp., noproduto analisado não é prevista pela Resolução da Diretoria Colegiada n 12 de 2 de janeiro de 2001. Entretanto, osresultados obtidos sugerem uma relação entre a presença desta bactéria e a produção de histamina.

Caracterização físico-química e bacteriológica de peixes anchovados

Este estudo objetivou avaliar a qualidade de peixes anchovados de diferentes marcas e origens comercializadas no mercadovarejista de Niterói-RJ. Foram estudadas através de parâmetros bacteriológicos e físico-químicos, 17 amostras processadasno Brasil, Peru, Itália, Argentina e Marrocos. Os resultados demonstraram que os valores de N-BVT extrapolaram, em 100%das amostras, o limite oficial (30mgN/100g) variando entre 42,84 203,80 mg N/100g. Todas as amostras apresentaramhistamina, sendo que em 76,47% (13 amostras), o limite oficial (10mg/100g) foi extrapolado. Somente em três amostras nãoforam observadas a presença de putrescina e cadaverina. Os valores de pH variaram entre 5,08 e 5,73, de Atividade de águaentre 0,55 e 0,70. O percentual de cloretos observado foi de 9,78 a 17,50. Quanto aos parâmetros bacteriológicos, as amostrasanalisadas encontram-se dentro do padrão oficial, no que se refere à análise qualitativa de Salmonella spp. Para coliformestermotolerantes também se encontram adequados à legislação. Dentre as amostras analisadas, somente duas estãoinadequadas quando avaliada a presença de Staphylococcus coagulase positivo. A enumeração de Enterococcus spp., noproduto analisado não é prevista pela Resolução da Diretoria Colegiada n 12 de 2 de janeiro de 2001. Entretanto, osresultados obtidos sugerem uma relação entre a presença desta bactéria e a produção de histamina.

Resistência antimicrobiana de cepas de enterococcus isoladas de carcaças de frango comercializadas no Distrito Federal

O objetivo deste trabalho foi realizar o isolamento de cepas de Enterococcus de carcaças de frango resfriadas e congeladas, comercializadas no Distrito Federal, analisar o perfil de resistência antimicrobiana através da realização de antibiograma, promover uma pesquisa de genes de resistência antimicrobiana e diferenciação das espécies Enterococcus faecalis e Enterococcus faecium através da reação em cadeia da polimerase. Foram analisadas 100 carcaças de frango congeladas e resfriadas, das quais foram isoladas 50 cepas de Enterococcus spp, sendo 42% de E. faecalis e 2% de E. faecium. O teste de susceptibilidade antimicrobiana demonstrou que todas as cepas isoladas apresentaram resistência a pelo menos um antimicrobiano, dos quais 90,47% das cepas de E. faecalis, 100% das cepas de E. faecium e 82,14% dos Enterococcus spp apresentaram resistência à Tetraciclina; 80,95% das cepas de E. faecalis e 35,71% das cepas de Enterococcus spp foram resistentes à Eritromicina; 39,28% dos Enterococcus spp e 23,80% dos E. faecalis à Ciprofloxacina e 28,57% dos E. faecalis apresentaram resistência ao Cloranfenicol. Foram detectados os genes de resistência antimicrobiana tet(M), sendo o mais encontrado, seguido pelo erm(B), vanC-1, aph(3)-llla, ant(6)-la, vanB, vanA, aac(6)-le-aph(2)-la e erm(A). O isolamento de cepas de Enterococcus com resistência antimicrobiana em carcaças de frango, observados neste estudo, pode acarretar sérios problemas para a saúde pública, devido à resistência propriamente dita, e devido a esses microrganismos terem a capacidade de transmitir genes de resistência antimicrobiana para outros microrganismos presentes na microbiota intestinal de humanos e animais, podendo inviabilizar o uso destas drogas para uso clínico