Isolamento e classificação de micro-organismos psicrotróficos proteolíticos presentes em queijo Minas Frescal / Isolation and classification of psychrotrophic and proteolytic microorganisms in “Minas Frescal” cheese

Algumas condições da qualidade de leite e derivados estão conexas à microbiota contaminante deterioradora que é, sobretudo, representada por bactérias psicrotróficas proteolíticas. Portanto, o objetivo desse trabalho foi isolar micro-organismos psicrotróficos proteolíticos de queijo Minas Frescal comercializados em Salinas -MG. Para tanto foi realizado o isolamento de micro-organismos psicrotróficos proteolíticos presentes em queijos Minas Frescal. Logo após, foi realizada a caracterização dos isolados quanto à coloração de Gram, forma e atividade de oxidase. Os resultados obtidos evidenciaram a predominância de micro-organismos psicrotróficos Gram-positivos na microbiota dos queijos comercializados em Salinas-MG.(AU)

Isolamento e classificação de micro-organismos psicrotróficos proteolíticos presentes em queijo Minas Frescal / Isolation and classification of psychrotrophic and proteolytic microorganisms in “Minas Frescal” cheese

Algumas condições da qualidade de leite e derivados estão conexas à microbiota contaminante deterioradora que é, sobretudo, representada por bactérias psicrotróficas proteolíticas. Portanto, o objetivo desse trabalho foi isolar micro-organismos psicrotróficos proteolíticos de queijo Minas Frescal comercializados em Salinas -MG. Para tanto foi realizado o isolamento de micro-organismos psicrotróficos proteolíticos presentes em queijos Minas Frescal. Logo após, foi realizada a caracterização dos isolados quanto à coloração de Gram, forma e atividade de oxidase. Os resultados obtidos evidenciaram a predominância de micro-organismos psicrotróficos Gram-positivos na microbiota dos queijos comercializados em Salinas-MG.

Isolamento de Enterococcus spp. de mortadela vendida fatiada em Niterói/RJ / Isolation of Enterococcus spp. of mortadela sold sliced in Niterói/RJ

Os derivados cárneos vêm, ao longo dos anos, se fazendo cada vez mais presentes no cardápio do brasileiro e, entre eles, a mortadela é de grande importância no setor de frios e embutidos e de maior aceite mundialmente. Foram adquiridos em estabelecimentos comerciais do bairro de Icaraí em Niterói/RJ 33 amostras de mortadela, sendo encaminhadas ao Laboratório de Controle Microbiológico de Produtos de Origem Animal da Faculdade de Veterinária da Universidade Federal Fluminense, onde foram submetidas a pesquisa de enterococos. Das 33 amostras de mortadelas analisadas no presente trabalho, 11 delas apresentaram resultados negativos para a presença de Enterococcus spp.. Entretanto, foram encontrados E. casseliflavus, E. faecium e E. faecalis. A presença do Enterococcus como microbiota contaminante pode tornar o seu consumo perigoso para a saúde humana.(AU)

Isolamento de Enterococcus spp. de mortadela vendida fatiada em Niterói/RJ / Isolation of Enterococcus spp. of mortadela sold sliced in Niterói/RJ

Os derivados cárneos vêm, ao longo dos anos, se fazendo cada vez mais presentes no cardápio do brasileiro e, entre eles, a mortadela é de grande importância no setor de frios e embutidos e de maior aceite mundialmente. Foram adquiridos em estabelecimentos comerciais do bairro de Icaraí em Niterói/RJ 33 amostras de mortadela, sendo encaminhadas ao Laboratório de Controle Microbiológico de Produtos de Origem Animal da Faculdade de Veterinária da Universidade Federal Fluminense, onde foram submetidas a pesquisa de enterococos. Das 33 amostras de mortadelas analisadas no presente trabalho, 11 delas apresentaram resultados negativos para a presença de Enterococcus spp.. Entretanto, foram encontrados E. casseliflavus, E. faecium e E. faecalis. A presença do Enterococcus como microbiota contaminante pode tornar o seu consumo perigoso para a saúde humana.

Ácido lático na redução microbiana e cor de carcaças bovinas / Lactic acid in microbial reduction and color of bovine carcasses / Ácido láctico en reducción microbiana y color de canales bovinas

Durante o processo de abate pode ocorrer falhas nos procedimentos operacionais e inúmeros fatores podem contribuir para o aparecimento e diversificação da microbiota contaminante, tais contaminantes são divididos entre microrganismo patogênicos e deteriorantes que modificam as características normais da carne. A segurança e a qualidade da carne podem ser estimadas pela contagem de microrganismos indicadores (mesófilos aeróbios, enterobactérias e Escherichia coli) que fornecem informações sobre a ocorrência de contaminação para serem utilizadas durante o processo de verificação e validação do sistema de Análises de Perigos e Pontos Críticos de Controle (APPCC). Com isso a utilização de agentes químicos na sanitização de carcaças de animais recém-abatidos pode contribuir com a redução ou eliminação de bactérias e microrganismo, um exemplo de agente de sanitização amplamente usado são os ácidos orgânicos e o principal deles é o ácido lático que exerce efeito bactericida e bacteriostático de ação prolongada e comprovada, atuando na redução da contaminação de carcaças bovinas. Esta revisão de literatura teve como objetivo servir como objeto de ferramenta no processo de sanitização de carcaças.

During the slaughter process, operational procedures may fail and many factors may contribute to the appearance and diversification of the contaminating microbiota, such contaminants are divided into pathogenic and spoilage microorganisms that modify the normal characteristics of meat. Meat safety and quality can be estimated by counting indicator microorganisms (aerobic mesophiles, enterobacteria and Escherichia coli) that provide information on the occurrence of contamination to be used during the process of verification and validation of the Hazard Analysis and Critical Control Points (HACCP). With this, the use of chemical agents in sanitization of carcasses of recently slaughtered animals can contribute to the reduction or elimination of bacteria and microorganism. An example of a widely used sanitizing agent is organic acids and the main one is lactic acid that exerts Prolonged and proven bactericidal and bacteriostatic effect acting to reduce contamination of bovine carcasses. Thus, this literature review aimed to serve as a tool object in the carcass sanitization process to obtain quality and safe meat for consumption, as well as the effects and use of lactic acid in carcass decontamination.

Durante el proceso de sacrificio, los procedimientos operativos pueden fallar y muchos factores pueden contribuir a la aparición y diversificación de la microbiota contaminante, tales contaminantes se dividen en microorganismos patógenos y de descomposición que modifican las características normales de la carne. La seguridad y la calidad de la carne se pueden estimar contando microorganismos indicadores (mesófilos aeróbicos, enterobacterias y Escherichia coli) que proporcionan información sobre la ocurrencia de contaminación que se utilizará durante el proceso de verificación y validación del Análisis de Peligros y Puntos de control crítico (HACCP). Por lo tanto, el uso de agentes químicos para desinfectar los cadáveres de animales recién sacrificados puede contribuir a la reducción o eliminación de bacterias y microorganismos. Un ejemplo de un agente desinfectante ampliamente utilizado son los ácidos orgánicos y el principal es el ácido láctico que ejerce un efecto. Agente bacteriostático y bacteriostático de acción prolongada, que actúa para reducir la contaminación de las canales de los bovinos. Por lo tanto, esta revisión de la literatura tuvo como objetivo servir como un objeto de herramienta en el proceso de desinfección de la canal para obtener carne de calidad y segura para el consumo, así como los efectos y el uso del ácido láctico en la descontaminación de la canal.

Ácido lático na redução microbiana e cor de carcaças bovinas / Lactic acid in microbial reduction and color of bovine carcasses / Ácido láctico en reducción microbiana y color de canales bovinas

Durante o processo de abate pode ocorrer falhas nos procedimentos operacionais e inúmeros fatores podem contribuir para o aparecimento e diversificação da microbiota contaminante, tais contaminantes são divididos entre microrganismo patogênicos e deteriorantes que modificam as características normais da carne. A segurança e a qualidade da carne podem ser estimadas pela contagem de microrganismos indicadores (mesófilos aeróbios, enterobactérias e Escherichia coli) que fornecem informações sobre a ocorrência de contaminação para serem utilizadas durante o processo de verificação e validação do sistema de Análises de Perigos e Pontos Críticos de Controle (APPCC). Com isso a utilização de agentes químicos na sanitização de carcaças de animais recém-abatidos pode contribuir com a redução ou eliminação de bactérias e microrganismo, um exemplo de agente de sanitização amplamente usado são os ácidos orgânicos e o principal deles é o ácido lático que exerce efeito bactericida e bacteriostático de ação prolongada e comprovada, atuando na redução da contaminação de carcaças bovinas. Esta revisão de literatura teve como objetivo servir como objeto de ferramenta no processo de sanitização de carcaças.(AU)

During the slaughter process, operational procedures may fail and many factors may contribute to the appearance and diversification of the contaminating microbiota, such contaminants are divided into pathogenic and spoilage microorganisms that modify the normal characteristics of meat. Meat safety and quality can be estimated by counting indicator microorganisms (aerobic mesophiles, enterobacteria and Escherichia coli) that provide information on the occurrence of contamination to be used during the process of verification and validation of the Hazard Analysis and Critical Control Points (HACCP). With this, the use of chemical agents in sanitization of carcasses of recently slaughtered animals can contribute to the reduction or elimination of bacteria and microorganism. An example of a widely used sanitizing agent is organic acids and the main one is lactic acid that exerts Prolonged and proven bactericidal and bacteriostatic effect acting to reduce contamination of bovine carcasses. Thus, this literature review aimed to serve as a tool object in the carcass sanitization process to obtain quality and safe meat for consumption, as well as the effects and use of lactic acid in carcass decontamination.(AU)

Durante el proceso de sacrificio, los procedimientos operativos pueden fallar y muchos factores pueden contribuir a la aparición y diversificación de la microbiota contaminante, tales contaminantes se dividen en microorganismos patógenos y de descomposición que modifican las características normales de la carne. La seguridad y la calidad de la carne se pueden estimar contando microorganismos indicadores (mesófilos aeróbicos, enterobacterias y Escherichia coli) que proporcionan información sobre la ocurrencia de contaminación que se utilizará durante el proceso de verificación y validación del Análisis de Peligros y Puntos de control crítico (HACCP). Por lo tanto, el uso de agentes químicos para desinfectar los cadáveres de animales recién sacrificados puede contribuir a la reducción o eliminación de bacterias y microorganismos. Un ejemplo de un agente desinfectante ampliamente utilizado son los ácidos orgánicos y el principal es el ácido láctico que ejerce un efecto. Agente bacteriostático y bacteriostático de acción prolongada, que actúa para reducir la contaminación de las canales de los bovinos. Por lo tanto, esta revisión de la literatura tuvo como objetivo servir como un objeto de herramienta en el proceso de desinfección de la canal para obtener carne de calidad y segura para el consumo, así como los efectos y el uso del ácido láctico en la descontaminación de la canal.(AU)

Staphylococcal slime layers and biofilm from different origins / Slime layer e biofilme de Staphylococcus de diferentes origens

The genus Staphylococcus comprises some of the most important pathogenic bacteria for both humans and animals. It is responsible for bovine mastitis and canine otitis, besides being present in the microbiota of animals and as a contaminant in food. Its pathogenesis is related to the formation of capsule and biofilm, which contribute to its infectivity. The objective of this study was to observe the production of slime layer and formation of biofilm, which are related to the resistance to antimicrobial agents and presence of icaA and icaD genes, in 41 isolates of Staphylococcus spp. from different origins, provided by the Universidade Federal de Pelotas (UFPEL), Laboratório Regional de Diagnóstico (LRD). Strains of Staphylococcus spp. were cultivated in Congo red agar for capsule detection. Biofilm formation was detected using the 96-well microplate testing. Antimicrobial susceptibility testing was performed using the plate diffusion method. Part of the analyzed samples produced slime layer (36.6%) and formed biofilm (17.1%). However, six of those that formed biofilms were susceptible to the eight antibiotics tested in the antibiogram. In tests to determine the minimum bactericidal and inhibitory concentrations, gentamicin resistance of biofilm-forming strains was greater than that of non-forming strains. Ampicillin was the least effective antimicrobial drug (51%), followed by tetracycline (71%), neomycin (73%), and erythromycin (73%). Some isolates presented the icaA (6) and icaD (11) genes. Therefore, we suggested that the origin of an isolate can determine its expression of virulence factor and resistance to certain antibiotics.(AU)

O gênero Staphylococcus abrange algumas das bactérias patogênicas mais importantes tanto para humanos como para animais. Ele é responsável pela mastite bovina e otite canina, além de estar presente na microbiota de animais e como contaminante em alimentos. Sua patogênese está relacionada à formação de cápsula e biofilme, que contribuem para sua infectividade. O objetivo deste estudo foi observar a produção de slime layer e a formação de biofilme, que estão relacionados à resistência a antibicrobianos e à presença dos genes icaA e icaD, em 41 isolados de Staphylococcus spp. de diferentes origens fornecidos pelo Laboratório Regional de Diagnóstico (LRD) da Universidade Federal de Pelotas (UFPEL). Os isolados de Staphylococcus spp. foram cultivados em ágar vermelho do Congo para detecção de cápsulas. A formação de biofilme foi detectada usando o teste de microplaca com 96 poços. O teste de susceptibilidade antimicrobiana foi realizado usando o método de difusão em placa. Parte das amostras analisadas produziram slime layer (36,6%) e formaram biofilme (17,1%). Entretanto, seis daquelas que formaram biofilmes foram sensíveis aos oito antibióticos testados no antibiograma. Em testes para determinar as concentrações bactericidas e inibitórias mínimas, a resistência à gentamicina de cepas formadoras de biofilme foi maior que aquela das cepas não formadoras. O antimicrobiano menos eficaz foi a ampicilina (51%), seguida por tetraciclina (71%), neomicina (73%) e eritromicina (73%). Alguns isolados apresentaram os genes icaA (6) e icaD (11). Portanto, sugerimos que a origem de um isolado pode determinar sua expressão de fator de virulência e resistência a certos antibióticos.(AU)

Avaliação de métodos de contagem de BAL e da qualidade microbiológica de queijo Minas Frescal comercializado no município de Duque de Caxias/RJ / Microbiological analysis of “Minas Frescal” cheese commercialized in the municipality Duque de Caxias/RJ

O queijo Minas Frescal é um derivado lácteo de amplo consumo no Brasil, entretanto suas características favorecem o crescimento de microbiota contaminante. As amostras foram submetidas às seguintes análises microbiológicas: enumeração de coliformes a 35⁰C e a 45⁰C, contagem de Staphylococcus coagulase positiva e enumeração de Bactérias Ácido Láticas (BAL). Em 10 amostras foi observada contagem de coliformes a 45⁰C acima do padrão estabelecido na legislação, confirmadas como Escherichia coli. Em todas as amostras a contagem de Staphylococcus coagulase positiva foi superior ao permitido em legislação. Nas BALs, foi observada baixa contagem em todas as amostras. Diante dos resultados obtidos, se faz necessária a adoção de medidas a fim de melhorar a qualidade microbiológica da matriz alimentícia e garantir a inocuidade alimentar.(AU)

Avaliação de métodos de contagem de BAL e da qualidade microbiológica de queijo Minas Frescal comercializado no município de Duque de Caxias/RJ / Microbiological analysis of “Minas Frescal” cheese commercialized in the municipality Duque de Caxias/RJ

O queijo Minas Frescal é um derivado lácteo de amplo consumo no Brasil, entretanto suas características favorecem o crescimento de microbiota contaminante. As amostras foram submetidas às seguintes análises microbiológicas: enumeração de coliformes a 35⁰C e a 45⁰C, contagem de Staphylococcus coagulase positiva e enumeração de Bactérias Ácido Láticas (BAL). Em 10 amostras foi observada contagem de coliformes a 45⁰C acima do padrão estabelecido na legislação, confirmadas como Escherichia coli. Em todas as amostras a contagem de Staphylococcus coagulase positiva foi superior ao permitido em legislação. Nas BALs, foi observada baixa contagem em todas as amostras. Diante dos resultados obtidos, se faz necessária a adoção de medidas a fim de melhorar a qualidade microbiológica da matriz alimentícia e garantir a inocuidade alimentar.

Controle de Staphylococcus coagulase negativa em massa para embutido cárneo suíno pela adição de óleo essencial de Origanum vulgare (orégano)

A carne suína é a proteína animal mais produzida e consumida no mundo, sua composição rica em vitaminas e minerais, no entanto, a torna um excelente meio para a multiplicação de microrganismos com potencial de causar doenças transmitidas por alimentos (DTA). Os Staphylococcus coagulase negativa (SCN), são progressivamente mais estudados por se tratarem de microrganismos comumente presentes em alimentos e com capacidade de produção de enterotoxinas. Os aditivos naturais são cada vez mais utilizados em substituição aos conservantes sintéticos, e a utilização do óleo essencial (OE) de Origanum vulgare na forma de condimentos tem auxiliado na preservação de alimentos, graças à atuação de compostos ativos contendo substâncias antioxidantes e antimicrobianas com potencial uso na preservação de alimentos. Sendo assim, o objetivo desse trabalho foi verificar a atividade antimicrobiana do OE de O. vulgare frente a 15 isolados de SCN potencialmente produtores de enterotoxinas obtidos no fluxograma de abate suíno, bem como avaliar a sua atividade antimicrobiana sobre a microbiota contaminante em massa para embutido cárneo suíno. O efeito antimicrobiano in vitro foi verificado por meio das técnicas de disco-difusão em ágar e concentração bactericida mínima (CBM), e alíquotas da massa para embutido cárneo suíno foram experimentalmente contaminadas por três isolados de SCN mais resistentes a fim de verificar a atuação do OE de O. vulgare a 1 e 1,5%, durante três dias de estocagem a 4 ºC. O O. vulgare apresentou ação antimicrobiana na disco-difusão em ágar, formando halos superiores a 15 mm frente a todos isolados, bem como apresentou concentração bactericida mínima de 31,2 L/mL. A aplicação do OE na massa revelou que o O. vulgare nas concentrações de 1 e 1,5% foi capaz de reduzir significativamente as contagens de SCN, enquanto somente a concentração de 1,5% do OE foi capaz de reduzir a contaminação por microrganismos aeróbios mesófilos, e aparentemente ambas as concentrações foram eficientes para controlar a deterioração da massa para embutido cárneo suíno. Por último, foi constatado que SCN são capazes de se multiplicar no ambiente proporcionado pela matriz alimentar até o segundo dia de estocagem, mantendo suas contagens aparentemente estabilizadas após esse período. A utilização do OE de O. vulgare mostrou-se uma alternativa natural e promissora para o controle da contaminação por SCN, bem como para a conservação de alimentos por meio da redução de microrganismos aeróbios mesófilos.

Pork is the most produced and consumed animal protein in the world, its composition rich in vitamins and minerals, however, makes it an excellent means for the multiplication of microorganisms with the potential to cause foodborne diseases. Coagulase negative Staphylococcus (CoNS), are progressively more studied because they are microorganisms commonly present in food and capable of producing enterotoxins. Natural additives are increasingly used to replace synthetic preservatives, and the use of Origanum vulgare essential oil (EO) in the form of condiments has helped in food preservation, thanks to the action of active compounds containing potentially antioxidant and antimicrobial substances use in food preservation. Therefore, the objective of this work was to verify the antimicrobial activity of OE of O. vulgare against 15 CoNS isolates potentially producing enterotoxins obtained in the swine slaughter flowchart, as well as to evaluate its antimicrobial activity on the contaminating microbiota in bulk for pork meat sausage. The in vitro antimicrobial effect was verified by means of disk-diffusion techniques in agar and minimal bactericidal concentration (MBC), and aliquots of the mass for pork sausage were experimentally contaminated by three more resistant CoNS isolates in order to verify the performance of the EO of O. vulgare at 1 and 1.5%, during three days of storage at 4 ºC. O. vulgare showed antimicrobial action on disk-diffusion in agar, forming halos greater than 15 mm compared to all isolates, as well as presenting a minimum bactericidal concentration of 31.2 L/mL. The application of EO in the mass revealed that O. vulgare at concentrations of 1 and 1.5% was able to significantly reduce CoNS counts, while only the 1.5% concentration of EO was able to reduce contamination by microorganisms aerobic mesophiles, and apparently both concentrations were efficient to control the deterioration of the mass for pork sausage. Finally, it was found that CoNS are able to multiply in the environment provided by the food matrix until the second day of storage, keeping their counts apparently stabilized after this period. The use of OE from O. vulgare proved to be a natural and promising alternative for the control of contamination by CoNS, as well as for food preservation through the reduction of mesophilic aerobic microorganisms.

Parameters of quality of frozen fruit / Parâmetros de qualidade de polpas de frutas congeladas

The objective of this work was to evaluate the microbiological, physical and chemical qualities of frozen fruit pulp of different flavors and brands, marketed in the city of Cuiabá - MT. The experiment was conducted in DIC, arranged by a 3 x 2 factorial scheme, using samples from three brands (X, Y and Z) and from two sample collecting periods (June/2014 and October/2014) and in triplicate. The following analyses were performed: coliforms at 35 oC and 45 45 oC, Salmonella, yeasts and molds, color (L*a*b*), pH, titratable acidity, soluble solids, ratio and vitamin C. All of the analyzed frozen fruit pulp samples, regardless of the flavor, the brand and the sampling period, none of them showed coliforms at 35 oC and 45 oC, and no Salmonella either; and low counts of filamentous fungi and yeasts were found. Variations on the color (L*a*b*), pH, titratable acidity, soluble solids, ratio and vitamin C values were found among the brands and sampling periods of all of the analyzed fruit pulps samples. Some samples showed values which did not follow the limits prescribed by the NI nº 1 of 7 January 2000 of the MAPA, indicating unsatisfactory identity and quality standards.(AU)

Neste trabalho foram avaliadas as qualidades microbiológica, física e química de polpas de frutas congeladas de diferentes sabores e marcas, comercializadas no município de Cuiabá MT. O experimento foi conduzido em DIC, disposto em um arranjo fatorial 3 x 2, em amostras de três marcas (X, Y e Z) de dois períodos de coletas (junho/2014 e outubro/2014), e em triplicata. Foram realizadas análises de: coliformes a 35 oC e a 45 oC, Salmonella spp., fungos filamentosos e leveduras, cor (L*a*b*), pH, acidez titulável, sólidos solúveis, ratio e vitamina C. Todas as amostras de polpas de frutas congeladas analisadas, independentemente do sabor, da marca e do período de coleta, não apresentaram contagens de coliformes a 35 oC e a 45 oC, tampouco houve isolamento de Salmonella spp.; e baixas contagens de fungos filamentosos e leveduras foram detectadas. Houve variações dos valores de cor (L*a*b*), pH, acidez titulável, sólidos solúveis, ratio e vitamina C entre as marcas e os períodos de coletas em todas as amostras de polpas de frutas analisadas. Algumas amostras de polpas demonstraram valores fora dos limites preconizados pela IN nº 1 de 7 de janeiro de 2000 do MAPA, que indicaram padrões de identidade e de qualidade deficientes.(AU)

Evaluation of the different rinse volumes for performing the direct technique for Campylobacter spp. enumeration in chilled broiler carcasses / Avaliação de diferentes alíquotas de enxaguadura para a contagem pelo método direto de Campylobacter spp. em carcaças de frango resfriadas

The direct method for detecting and enumerating Campylobacter spp. in chicken meat is easy to perform, but the volumes of 100μL and 400μL, as recommended in some methodologies, are often unable to achieve the colonies counts due to the occurrence of confluent growth or microbial contaminants. This study aimed at evaluating the different volumes for rinsing chicken meats in order to minimize the interference of microbial contaminants, without compromising the sensitivity of direct methodology. Rinse volumes of 5, 10, 50, 100 and 400μL were tested using the modified charcoal cefoperazone deoxycholate agar (mCCDA) and modified Bolton agar. The presence of Campylobacter was confirmed by phenotypic methods and PCR assay. However, the strategy of using less than 100 µL of rinse volumes did not improve the isolation and enumeration of Campylobacter colonies, because it reduces the sensitivity of the assay. Thus, a possible solution to minimize the interference of microbial contaminants would be in developing new selective media or incorporate them into other existing antimicrobial drugs.(AU)

O método direto de detecção e contagem de Campylobacter spp. em carne de frango é de fácil execução, porém os volumes de 100 µL e de 400 µL, preconizados em algumas metodologias, muitas vezes impossibilitam a contagem de colônias pela ocorrência de crescimento confluente ou de microbiota contaminante. O objetivo do presente estudo foi de avaliar os diferentes volumes de enxaguadura de carne de frango com a finalidade de minimizar a interferência da microbiota contaminante, sem comprometer a sensibilidade do método. Os volumes de enxaguadura de 5, 10, 50, 100 e 400 µL foram testados utilizando-se os meios seletivo diferenciais ágar carvão cefoperazona desoxicolato modificado (mCCDA) e ágar Bolton modificado. A presença de Campylobacter spp. foi confirmada por métodos fenotípicos e por PCR. No entanto, a estratégia de utilização de volumes menores do que 100 µL de enxaguadura não melhoraram o isolamento e a contagem de colônias de Campylobacter, porque houve diminuição da sensibilidade do ensaio. A provável solução para minimizar a interferência da microbiota contaminante seria desenvolver novos meios seletivos ou incorporá-los aos antimicrobianos já existentes.(AU)

Microbiota contaminante em bebidas lácteas fermentada comerciais / Contaminant microbiota in commercial fermented dairy beverages

Nos últimos anos, houve aumento da popularidade das bebidas lácteas fermentadas em virtude de benefícios nutricionais, praticidade de seu consumo e baixo custo do produto para o fabricante e consequente redução do preço final para o consumidor. Durante o processo de fabricação, estes produtos podem estar sujeitos a fontes de contaminação microbiana. Neste estudo foi investigada a microbiota contaminante em bebidas lácteas fermentadas produzidas por pequenas e médias empresas, empregando-se análises de contagem de fungos filamentosos e leveduriformes, determinação do Número Mais Provável (NMP) de coliformes totais e termo tolerantes, pesquisa de Escherichia coli e de Salmonella spp. e determinação dos valores de pH. Apesar de ausência de Salmonella spp., houve elevada frequência de fungos filamentosos e leveduriformes, tendo sido detectada E. coli em cinco amostras (16,67 %); e as amostras foram classificadas como “produtos em condições sanitárias insatisfatórias”. Por conseguinte, sugere-se que programas de qualidade, como as Boas Práticas de Fabricação (BPF) e Análise de Perigos e Pontos Críticos de Controle (APPCC) sejam introduzidas e empregadas pelos produtores de alimentos, para prevenir riscos de contaminação, a fim de oferecer produtos seguros para o consumidor.(AU)

Lately, the acceptability of fermented dairy beverages has been increased, due to the nutritional benefits, the practical consumption and the low cost of product for the manufacturers, and consequently for final market price to the consumers. During the manufacturing process, these products can be susceptible to microbiological contamination. The present study investigated the contaminant microbiota in fermented dairy beverages produced by small- and medium-sized companies, by means of analyses on moulds and yeasts counting, determination of the Most Probable Number (MPN) of total and thermo tolerant coliforms, Escherichia coli and Salmonella spp. detection, and determination of pH value. In spite of the absence of Salmonella spp., a high counts of yeasts and moulds were found, and E. coli was detected in five samples (16.67 %); and the sample were classified as “products in poor sanitary conditions”, because they showed thermo-tolerant coliforms counting higher than the standard established by the legislationin force. Therefore, quality programs such as Good Manufacturing Practices (GMP) and Hazard Analysis and Critical Control Points (HACCP) should be employed to prevent any contamination risk, in order to provide safe products to consumers.(AU)

Influência da coloração da água utilizada na higienização de tanques de expansão na qualidade do leite cru refrigerado

Este trabalho objetivou avaliar a influência da cloração da água utilizada na higienização de tanques de expansão na contagem de Escherichia coli e Pseudomonas sp. do leite cru refrigerado. Amostras de leite cru e de água de18 tanques de expansão foram avaliadas por um ano, sendo que em 9 tanques não havia sistema de cloração da água implantado no decorrer de 12 meses e nos outros 9, por 6 meses não houve cloração da água e nos 6 meses seguintes o sistema foi implantado. Para determinação de E. coli no leite cru e na água utilizou-se a técnica do Número Mais Provável (NMP) e para a contagem de Pseudomonas sp. utilizou-se Ágar Para Isolamento de Pseudomonas (PIA). Constataram- -se valores médios de 1,5NMP/mL e 1,6NMP/mL de E. coli no leite e na água, respectivamente, nas amostras provenientes dos 9 tanques em que a água utilizada não foi clorada por 12 meses. As amostras de leite e água procedentes dos 9 tanques que receberam água clorada durante a limpeza por 6 meses apresentaram em média 1,8NMP/mL e < 1,1 NMP/mL de E.coli, respectivamente. A contagem média de Pseudomonas sp. nas amostras de água procedentes dos 9 tanques em que a água utilizada no processo de limpeza não recebeu cloração por 6 meses e que posteriormente passou a ser clorada foi 1,1x103UFC/mL e 1,2x102UFC/mL, respectivamente. Por outro lado, a média das contagens de Pseudomonas sp. foi de 9,8x104 UFC/mL e 5,1x105 UFC/mL nas amostras de leite procedentes dos tanques em que a água utilizada no processo de limpeza não recebeu cloração por 6 meses e que posteriormente passou a ser clorada, respectivamente, o que indica que esta bactéria acessa o leite cru a partir de diferentes fontes de contaminação, além da água. Assim, a cloração foi eficiente apenas na redução da contagem de E. coli e Pseudomonas sp. na água.(AU)

This study aimed to evaluate the influence of chlorination of water used in the hygiene of expansion tanks in the Escherichia coli and Pseudomonas sp. count of refrigerated raw milk. Samples of raw milk and water from 18 expansion tanks were evaluated for one year, and in 9 tanks there was no water chlorination system implanted during 12 months and in the other 9, for 6 months there was no chlorination of water and in the next 6 months the system was deployed. For determination of E. coli in raw milk and water, the Most Probable Number (MPN) technique was used and for the count of Pseudomonas sp. Pseudomonas Isolation Agar (PIA) was used. Mean values of 1.5 MPN/mL and 1.6 MPN/mL of E. coli in milk and water, respectively, were found in the samples from the 9 tanks where the water used was not chlorinated for 12 months. Samples of milk and water from the 9 tanks that received chlorinated water during the 6-month period showed a mean of1.8 MPN/mL and <1.1 MPN/mL of E. coli, respectively. The mean count of Pseudomonas sp. in the water samples from the 9 tanks where the water used in the cleaning process was not stained for 6 months and then chlorinated was 1.1 x 103 CFU/mL and 1.2 x 102 CFU/mL, respectively. On the other hand, the average of Pseudomonas sp. counts was 9.8 x 104 CFU/ mL and 5.1 x 105 CFU/mL in the milk samples from the tanks in which the water used in the cleaning process was not stained for 6 months and then later chlorinated, respectively, indicating that this bacterium accesses raw milk from different sources of contamination, in addition to water. Thus, chlorination was only effective in reducing the count of E. coli and Pseudomonas sp. from water.(AU)

Salmonella spp no processamento tecnológico de tambatinga (Colossoma macropomum x Piaractus brachypomus)

Salmonella spp é um patógeno responsável por grave infecção alimentar que pode ser introduzida na cadeia do pescado, por meio da manipulação e higiene inadequados ou em contato com águas contaminadas, haja vista que não é um contaminante biológico encontrado originalmente no pescado. A segurança microbiológica do pescado é uma preocupação dos consumidores, indústrias e das agências reguladoras em todo mundo pois o pescado pode agir como um veículo para a transmissão de Salmonella spp em toda a cadeia produtiva, sendo uma categoria importante de alimentos no comércio internacional sendo exportados para vários países. Ademais, existe uma preocupação com uso inadequado de antibióticos na aquicultura, resultado do aumento do isolamento de sorovares de Salmonella resistentes e multirresistentes. Nesse contexto, o objetivo desse estudo foi estudar a dinâmica da dispersão e o perfil de resistência antimicrobiana de Salmonella spp no processamento de tambatinga (Colossoma macropomum x Piaractus brachypomus) in natura resfriada, identificar fatores de risco e rotas potenciais de contaminação cruzada. Para tanto, 30 peixes foram monitorados ao longo de todas as etapas do processamento num abatedouro frigorífico de pescado com os programas de autocontrole implantados, um total de 120 amostras de lavado superficial de peixe foram coletadas e submetidas a análise bacteriológica, PCR e confirmação bioquímica dos isolados que também foram submetidos ao antibiograma. Salmonella spp viável foi identificada em todas as etapas do fluxograma, recepção, pós lavagem com água hiperclorada, pós evisceração/descamação e no resfriamento. A ocorrência encontrada de Salmonella spp no peixe in natura resfriado foi de 6,6% (2/30). Concluímos que Salmonella spp não faz parte da microbiota natural da tambatinga, entretanto o peixe contamina-se no tanque de cultivo e ao longo do transporte até o abatedouro frigorífico, transfere a bactéria para outros peixes isentos de contaminação através da água e/ou gelo. A etapa de lavagem com água hiperclorada realizada na etapa de recepção do peixe deve ser considerada um ponto de controle (PC), pois Salmonella não é eliminada caso o tempo e/ou a concentração de cloro não sejam aplicados corretamente. A evisceração/descamação são etapas do processamento que elevam o risco de contaminação cruzada e dispersão de Salmonella spp no abatedouro frigorífico, no entanto, o perigo pode ser eliminado na etapa de lavagem hiperclorada pós-evisceração, essa etapa deve ser considerada um ponto crítico de controle (PCC) e deve ser monitorada frequentemente, uma vez que nenhuma outra etapa posterior do processamento elimina Salmonella spp do produto. Todas as cepas de Salmonella spp (10) isoladas ao longo da linha de abate foram sensíveis as principais classes de antibióticos usados na clínica médica humana e veterinária. Isso indica que existe grande probabilidade de sucesso clínico, caso estes antimicrobianos sejam utilizados para tratamento de salmoneloses em humanos, causada por uma eventual contaminação através do consumo de tambatinga.

Salmonella spp is a pathogen responsible for severe foodborne infection that can be introduced into the fish chain through inadequate handling and hygiene or in contact with contaminated water, since it is not a biological contaminant originally found in fish. Microbiological safety of fish is a concern of consumers, industries and regulatory agencies worldwide because fish can act as a vehicle for the transmission of Salmonella spp throughout the production chain, being an important category of food in international trade and are often exported to several countries. In addition, there is concern about the inadequate use of antibiotics in aquaculture as a result of increased isolation of resistant and multiresistant Salmonella serovars. In this context, the objective of this study was to study the dispersion dynamics and the antimicrobial resistance profile of Salmonella spp in the processing of uncooked Tambatinga (Colossoma macropomum x Piaractus brachypomus), to identify risk factors and potential routes of cross contamination. To this end, 30 fish were monitored during all processing steps in a fish slaughterhouse with the self-control programs implanted. A total of 120 samples were collected and submitted to bacteriological analysis, PCR and biochemical confirmation of Isolates that were also submitted to the antibiogram. Viable salmonella spp was identified in all steps of the flowchart, reception, post-wash with hyperchlorinated water, post evisceration / desquamation and in the cooling. The occurrence of Salmonella spp in the cooled fresh fish was 6.6% (2/30). We conclude that Salmonella spp is not part of the natural microflora of the tambatinga, however the fish contaminates in the culture tank and along the transport to the cold slaughterhouse, transfers the bacteria to other fish free from contamination through water and / or ice. The washing step with hyperchlorinated water performed at the fish reception stage should be considered a control point (PC) because Salmonella is not eliminated if the time and / or chlorine concentration is not applied correctly. Evisceration / desquamation are stages of processing that increase the risk of cross-contamination and dispersion of Salmonella spp in the slaughterhouse, however, the danger can be eliminated in the post-evisceration hyperchlorinated washing stage, this step should be considered a critical point of Control (PCC) and should be monitored frequently, since no further processing steps eliminate Salmonella spp from the product. All strains of Salmonella spp. (10) isolated along the slaughter line were sensitive to the main classes of antibiotics used in human and veterinary medical practice. This indicates that there is a high probability of clinical success if these antimicrobials are used to treat salmonellosis in humans, caused by possible contamination through the consumption of tambatinga.

ESTUDO MICROBIOLÓGICO EM CARCAÇAS BOVINAS E INFLUÊNCIA DA REFRIGERAÇÃO SOBRE A MICROBIOTA CONTAMINANTE

ABSTRACT With the aim of evaluating the presence of microorganisms in bovine carcasses and the influence of refrigeration on the contaminating microbiotics, some samples were collected from the outer surface of half-carcasses in these regions (rump, loin and rib), after washing and after 24 hours under refrigeration. The average of the mesophilic heterotrofic, psychrotrofic andStaphylococcusmicroorgarnisms, obtained immediately after the carcass washing were respectively 1.8 x 10, 6.4 x 10 and 3.5 x 10 CFU/cm2, while for the samples collected after refrigeration these values were 1.3 x 10, 1.6 x 102 and 5.2 x 10 CFU/cm2. The populations were considered low due to the hygienic practices during the slaughter process, and the differences observed between the averages of the two groups of samples were not statistically significant, leading to the conclusion that that was not an increase of the microorganism population, thus demonstrating the efficacy of the refrigeration process after the slaughter.

RESUMO Objetivando avaliar a presença de micro-organismos indicadores e de estafilococos em carcaças bovinas e a influência da refrigeração sobre a microbiota contaminante, foram analisadas amostras de regiões da superfície externa de meias carcaças tais como coxão, lombo e ponta-deagulha, logo após a lavagem e após 24 horas sob refrigeração. As médias das populações de microorganismos heterotróficos mesófilos, psicrotróficos e Staphylococcus sp. em UFC/cm2 obtidas imediatamente após a lavagem apresentaram valores respectivamente de 1,8 x 10, 6,4 x 10 e 3,5 x 10 UFC/cm2, enquanto que para as amostras colhidas após refrigeração os valores foram de 1,3 x 10, 1,6 x 102 e 5,2 x 10 UFC/cm2. As populações foram consideradas reduzidas, decorrentes de eficientes cuidados higiênicos sanitários durante as operações de abate, e as diferenças observadas entre as médias dos dois grupos de amostras não foram significativas do ponto de vista estatístico, o que permite concluir que não houve aumento considerável da população microbiana, demonstrando a eficiência do processo de refrigeração em seguida ao abate.

Estudo microbiológico em carcaças bovinas e influência da refrigeração sobre a microbiota contaminante / Microbiological study in bovine carcasses and the influence of refrigeration on contaminating microbiota

Objetivando avaliar a presença de micro-organismos indicadores e de estafilococos em carcaças bovinas e a influência da refrigeração sobre a microbiota contaminante, foram analisadas amostras de regiões da superfície externa de meias carcaças tais como coxão, lombo e ponta-deagulha, logo após a lavagem e após 24 horas sob refrigeração. As médias das populações de microorganismos heterotróficos mesófilos, psicrotróficos e Staphylococcus sp. em UFC/cm2 obtidas imediatamente após a lavagem apresentaram valores respectivamente de 1,8 x 10, 6,4 x 10 e 3,5 x 10 UFC/cm2, enquanto que para as amostras colhidas após refrigeração os valores foram de 1,3 x 10, 1,6 x 102 e 5,2 x 10 UFC/cm2. As populações foram consideradas reduzidas, decorrentes de eficientes cuidados higiênicos sanitários durante as operações de abate, e as diferenças observadas entre as médias dos dois grupos de amostras não foram significativas do ponto de vista estatístico, o que permite concluir que não houve aumento considerável da população microbiana, demonstrando a eficiência do processo de refrigeração em seguida ao abate.

With the aim of evaluating the presence of microorganisms in bovine carcasses and the influence of refrigeration on the contaminating microbiotics, some samples were collected from the outer surface of half-carcasses in these regions (rump, loin and rib), after washing and after 24 hours under refrigeration. The average of the mesophilic heterotrofic, psychrotrofic andStaphylococcusmicroorgarnisms, obtained immediately after the carcass washing were respectively 1.8 x 10, 6.4 x 10 and 3.5 x 10 CFU/cm2, while for the samples collected after refrigeration these values were 1.3 x 10, 1.6 x 102 and 5.2 x 10 CFU/cm2. The populations were considered low due to the hygienic practices during the slaughter process, and the differences observed between the averages of the two groups of samples were not statistically significant, leading to the conclusion that that was not an increase of the microorganism population, thus demonstrating the efficacy of the refrigeration process after the slaughter.

Quantificação e identificação da contaminação bacteriana de caldo de cana em fermentação para a produção de aguardente / Identification and quantification of bacterial contamination in sugar cane juice fermentation to aguardent production

Na fermentação alcoólica para produção de aguardente, o caldo de cana, usado como matéria-prima, transporta uma microbiota bacteriana numerosa e diversa, que age como antagonista da atividade das leveduras. Os produtos secundários gerados por estes contaminantes reduzem a produtividade e alteram as propriedades sensoriais da aguardente. Neste trabalho, amostras de caldo de cana provenientes de domas de fermentação de uma indústria produtora de aguardente no estado do Ceará foram coletadas com o objetivo de I quantificar a evolução do crescimento da população bacteriana durante o ciclo fermentativo e, posteriormente, identificar os principais gêneros contaminantes. Para isso coletas foram realizadas após 3, 11 e 24 horas de fermentação e em cada tempo realizou- se a contagem total de bactérias mesófilas. Colônias com características diferentes foram selecionadas e as características microscópicas e bioquímicas foram determinadas. As contagens apresentaram 8,36 x 106 UFC/mL; 2,46 x 107 UFC/mL e I 7,17 x 107 UFC/mL após 3, 11 e 24 h de fermentação, respectivamente. Foi selecionado um total de 48 isolados que apresentaram características bioquímicas referentes aos seguintes gêneros bacterianos: 35,4% Bacillus, 35,4% Enterobacter, 6,25% Micrococcus, 6,25% Acetobacter e 6,25% Lactobacillus. Cinco isolados (10,4%) caracterizados como bacilos Gram-positivos filamentosos ainda não foram identificados. (AU)

Sugarcane juice, used as raw material for aguardent production, carries a large and diverse bacterial microbiota, which acts as antagonist of the yeasts. The byproducts generated by these contaminants reduce the productivity and change the sensory properties of aguardente. In this work, samples of sugarcane juice from vats of fermenting of an aguardente-producing industry in the state of Ceará, were collected in order to quantify the growth evolution of the bacterial population during the fermentation cycle and subsequently identify the major contaminant genera. Samples of sugar cane juice were collected at zero time and after 11 and 24 hours of fermentation and mesophilic bacterial counts were realized. Colonies with different cultural characteristics were selected and the microscopic and biochemical characteristics were determined. The counts showed the following results: 8.36 x 1rY' CFU/ml, 2.46 x 107 CFU/ mL and 7.17 x 107CFU/mL after 3,11 and 24 of fermentation, respectively. A total of 48 isolates were selected which presented microscopic and biochemical characteristics suggestive of the genera: Bacillus 35.4%, Enterobacter 35.4%, Micrococcus 6.25%, Acetobacter 6.25% and Lactobacillus 6.25%. Five isolates (10.4%) characterized as Gram-positive filamentous have not yet been identified. (AU)

Atividade Antimicrobiana de própolis sobre contaminantes da fermentação alcoólica destinada a produção de cachaça

Na produção de cachaça, a microbiota contaminante afeta diretamente o processo fermentativo, originando fermentações indesejáveis, contribuindo para menores rendimentos em álcool e um desbalanceamento na formação dos compostos secundários que caracterizam a bebida. Portanto, são necessárias práticas para minimizar e controlar essas contaminações, sendo a aplicação de antimicrobianos uma alternativa eficaz para tal controle. Dentro desse enfoque, o objetivo deste trabalho foi avaliar a eficiência de antimicrobianos naturais e sua interação com antibióticos convencionais no controle da contaminação bacteriana na produção cachaça. Para as análises tecnológicas e microbiológicas do vinho e pé-de-cuba, utilizou-se o delineamento inteiramente casualizado em parcelas sub-subdivididas, em esquema fatorial 5x2x10 com três repetições, sendo quatro biocidas (extrato de própolis marrom, extrato de própolis verde, ampicilina e interação própolis/ampicilina (P/A)) e controle (sem adição de antimicrobiano), combinando-se os tratamentos em início e final de safra por 10 ciclos fermentativos. Para as análises tecnológicas do mosto, utilizou-se o delineamento inteiramente casualizado em parcelas subdivididas, em esquema fatorial 2x10 com três repetições, sendo duas épocas da safra (inicio e final) por 10 ciclos fermentativos. Foi observado um comportamento distinto entre épocas, com maiores valores de contaminantes e acidez em mosto no final da safra. Dentre os tratamentos, o extrato de própolis marrom, própolis verde, ampicilina e interação (P/A) mantiveram os índices de viabilidade celulares a níveis elevados e superiores a 90%, com menores índices observados para o tratamento controle. As concentrações de bactérias no pé-de-cuba foram significativamente menores com o emprego dos biocidas. No tratamento controle a acidez total do vinho foi superior...

During the cachaça production, the contaminant microbiota affects directly the fermentative process, originating undesirable fermentations, minimizing the alcohol production as well an unbalancing in the secondary compounds formation that characterizes the beverage. Therefore, practices that minimize those contaminations are necessary and the antimicrobial use is one of the efficient alternatives the control. This work aimed to evaluate the natural antimicrobials efficiency as well its interaction with conventional antibiotics to control the bacterial contamination in the cachaça production. A completely randomized design in sub-divided parcels in a factorial 5x2x10 scheme with 3 replications was used, being four biocides (brown propolis extract, green propolis extract, ampicillin and propolis/ampicillin interaction ? P/A) and control, combining them in the beginning and final of harvest by 10 fermentative cycles. A different behavior between treatments was observed, being the higher contamination and acidity found in the end of the harvest. Among treatments, the brown propolis extract, green propolis extract, ampicillin and P/A kept cellular viability indexes higher than 90%, and the control treatment was lower. The bacterial concentration in the inoculums was significantly smaller when biocides were used. In the control treatment the residual reducing sugars. The propolis extract and its combination with synthetic antimicrobials were efficient to control contaminant bacteria during the fermentative process