Ultrasound assessment of sheep stifle joint undergone lipopolysaccharide-induced synovitis / Ultrassonografia da articulação femorotibiopatelar em ovinos submetidos à indução de sinovite por lipopolissacarídeos

Synovitis can be induced in animals through the application of bacterial wall lipopolysaccharide and has similar signs to naturally-occurring synovitis. Several studies have been using the sheep species as an experimental model to understand osteoarticular diseases of the femorotibiopatellar (FTP) joint in humans. There are echographic studies on the standardization of normality of the femorotibiopatellar joint in sheep. However, there is a gap in the literature for changes such as acute synovitis. The objective was to serially describe the sonographic aspects of the synovitis process induced by intra-articular infiltration of Escherichia coli (E. coli) lipopolysaccharide in the femorotibiopatellar joint of sheep. Twelve healthy crossbred sheep (Santa Inês x Dorper) were used. Induction of synovitis was performed only in the right FTP joints, which were serially evaluated using ultrasound examination at baseline moment (M0) and 12 (M12), 24 (M24), 48 (M48), 72 (M72), and 120 (M120) hours after lipopolysaccharide infiltration for synovitis induction. Intra-articular application of E. coli lipopolysaccharide resulted in one or more echographic signs of synovitis (increased synovial fluid volume, folding of the synovial membrane, and cellularity in the joint cavity), which were identified early, 12 hours after inoculation, and regressed over the evaluated times (p=0.0001) until disappearing after 120 hours of inoculation.

A sinovite pode ser induzida em animais por meio da aplicação de lipopolissacarídeo de parede bacteriana, e apresenta sinais semelhantes à sinovite causada de forma natural. Diversos estudos têm sido realizados utilizando a espécie ovina como modelo experimental na compreensão das enfermidades osteoarticulares da articulação femorotibiopatelar (FTP) em humanos. Existem estudos ecográficos quanto a padronização da normalidade da articulação femorotibiopatelar em ovinos. Porém, para as alterações, como a sinovite aguda há lacuna na literatura. Objetivou-se descrever, de forma seriada, os aspectos ultrassonográficos do processo de sinovite induzida por infiltração intra-articular de lipopolissacarídeo de Escherichia coli (E. coli) na articulação femorotibiopatelar de ovinos. Foram utilizados 12 ovinos mestiços (Santa Inês x Dorper), hígidos. A indução da sinovite foi realizada apenas nas articulações FTP direitas, as quais foram avaliadas, por meio do exame ultrassonográfico de forma seriada, nos momentos basal (M0) e às 12 (M12), 24 (M24), 48 (M48), 72 (M72) e 120 (M120) horas após a infiltração com lipopolissacarídeo para a indução de sinovite. A aplicação intra-articular de lipopolissacarídeo de E. coli resultou em um ou mais sinais ecográficos de sinovite (aumento de volume do fluido sinovial, pregueamento da membrana sinovial e celularidade na cavidade articular), os quais foram identificados precocemente, 12 horas após a inoculação, e regrediram ao longo dos tempos avaliados (p=0,0001), até desaparecerem após 120 horas da inoculação.

Incidence of Mycoplasma gallisepticum and Mycoplasma synoviae in broiler flocks at the Federal District of Brazil and its surrounding areas / Incidência de lotes de frangos afetados por Mycoplasma gallisepticum e Mycoplasma synoviae no Distrito Federal e Entorno, Brasil

Mycoplasma is an important avian pathogen that can cause both respiratory disease and synovitis in birds, resulting in considerable economic losses to the poultry industry worldwide. This study aimed to determine the incidence of Mycoplasma gallisepticum and M. synoviae in broiler flocks at the Federal District and its surrounding regions using polymerase chain reaction (PCR). All slaughtered lots (57 flocks) were analyzed from July to November in one of the two slaughterhouses at the Federal District with Federal inspection services. Approximately 10 samples of broiler tracheae per slaughtered batch were collected from the evisceration line. The results obtained from the accumulated incidence over the study period were 7.02% and 35.09% for M. gallisepticum and M. synoviae, respectively. A greater concentration of flocks affected by M. synoviae was observed during October. The sample design as well as the PCR technique assisted in detecting both agents in the broiler batches in the first epidemiological study of these two agents in the region.(AU)

Os micoplasmas são importantes patógenos aviários, que podem causar doenças respiratórias e sinovites em aves, resultando em consideráveis perdas econômicas para a indústria avícola em todo o mundo. O objetivo deste estudo foi determinar a incidência de Mycoplasma gallisepticum e Mycoplasma synoviae em lotes de frangos na região do Distrito Federal e Entorno, por meio da reação em cadeia de polimerase (PCR). Todos os lotes abatidos (57 lotes) foram analisados durante os meses de julho a novembro, em um dos dois abatedouros frigoríficos do Distrito Federal com Serviço de Inspeção Federal. Na linha de evisceração foram coletadas cerca de 10 amostras de traqueia de frangos de corte por lote abatido. Os resultados obtidos da incidência acumulada no período de estudo foram de 7.02% para M. gallisepticum e 35,09% M. synoviae. Uma maior concentração do número de lotes afetados por M. synoviae foi observada durante o mês de outubro. O desenho amostral, assim como a técnica de PCR, permitiu a detecção de ambos os agentes nos lotes de frangos de corte analisados, sendo este o primeiro estudo epidemiológico desses dois agentes na região de estudo.(AU)

Pedometria aplicada a estudo comparativo entre morfina e tramadol em bovinos / Pedometry applied to a comparative study using morphine and tramadol in bovine

A analgesia com opioides é limitada ou indefinida em ruminantes. Neste trabalho, objetivou-se a realização de um estudo comparativo entre dois analgésicos opioides: a morfina e o tramadol, com base nas avaliações clínica e pedométrica de animais submetidos a artrite e sinovite experimental transitórias, desenvolvidas na articulação interfalângica distal, após administração intra-articular de anfotericina B. Utilizou-se seis animais, em dois tratamentos distintos, com morfina, na dose de 0,5 mg/kg e 20 dias depois com tramadol, na dose de 1,8 mg/kg, ambos via intramuscular. Os animais foram avaliados em intervalos de três horas, num total de 27 horas, observando-se parâmetros fisiológicos, deambulação e atividade pedométrica. Claudicação e alterações pedométricas foram observadas para ambos os fármacos. Por meio das variáveis da atividade pedométrica, observou-se um padrão de inquietação compatível com nocicepção podal, não havendo a interferência dos fármacos sobre a claudicação. Concluiu-se que a morfina e o tramadol, nas doses testadas, foram incapazes de interferir na atenuação do grau de claudicação no momento de máxima estimulação dolorosa, frente ao modelo experimental de dor ortopédica.

The use of opioids for analgesia is limited or undefined in ruminants. The aim of this study was to compare two analgesics opioids, morphine and tramadol, based on the clinical and pedometric evaluations of animals submitted to a temporary experimental arthritis and synovitis, developed at the distal interphalangeal joint after an intra-articular administration of amphotericin B. Six animals were used in two different treatments, using morphine, dose of 0,5 mg/kg, and twenty days later, tramadol, dose of 1,8 mg/kg, both intramuscularly. The animals were evaluated at 3-hour intervals for a total of 27 hours, observing the physiological parameters, ambulation and pedometer activity. Lameness and pedometer variations were observed in both treatments. Based on the variables of pedometric activity, a pattern of restlessness compatible with podal nociception was observed, and there was no interference of any of the drugs on lameness. It was concluded that morphine and tramadol, at the tested doses, were incapable of interfering in the lameness attenuation during the maximum painful stimulation moment in this experimental protocol of orthopedic pain.

Pedometria aplicada a estudo comparativo entre morfina e tramadol em bovinos / Pedometry applied to a comparative study using morphine and tramadol in bovine

A analgesia com opioides é limitada ou indefinida em ruminantes. Neste trabalho, objetivou-se a realização de um estudo comparativo entre dois analgésicos opioides: a morfina e o tramadol, com base nas avaliações clínica e pedométrica de animais submetidos a artrite e sinovite experimental transitórias, desenvolvidas na articulação interfalângica distal, após administração intra-articular de anfotericina B. Utilizou-se seis animais, em dois tratamentos distintos, com morfina, na dose de 0,5 mg/kg e 20 dias depois com tramadol, na dose de 1,8 mg/kg, ambos via intramuscular. Os animais foram avaliados em intervalos de três horas, num total de 27 horas, observando-se parâmetros fisiológicos, deambulação e atividade pedométrica. Claudicação e alterações pedométricas foram observadas para ambos os fármacos. Por meio das variáveis da atividade pedométrica, observou-se um padrão de inquietação compatível com nocicepção podal, não havendo a interferência dos fármacos sobre a claudicação. Concluiu-se que a morfina e o tramadol, nas doses testadas, foram incapazes de interferir na atenuação do grau de claudicação no momento de máxima estimulação dolorosa, frente ao modelo experimental de dor ortopédica.(AU)

The use of opioids for analgesia is limited or undefined in ruminants. The aim of this study was to compare two analgesics opioids, morphine and tramadol, based on the clinical and pedometric evaluations of animals submitted to a temporary experimental arthritis and synovitis, developed at the distal interphalangeal joint after an intra-articular administration of amphotericin B. Six animals were used in two different treatments, using morphine, dose of 0,5 mg/kg, and twenty days later, tramadol, dose of 1,8 mg/kg, both intramuscularly. The animals were evaluated at 3-hour intervals for a total of 27 hours, observing the physiological parameters, ambulation and pedometer activity. Lameness and pedometer variations were observed in both treatments. Based on the variables of pedometric activity, a pattern of restlessness compatible with podal nociception was observed, and there was no interference of any of the drugs on lameness. It was concluded that morphine and tramadol, at the tested doses, were incapable of interfering in the lameness attenuation during the maximum painful stimulation moment in this experimental protocol of orthopedic pain.(AU)

Negative results for Borrelia burdgorferi in cows and ticks from a border region between Brazil and Paraguay: a case report / Resultados negativos para Borrelia burgdorferi em vacas e carrapatos de região fronteiriça entre Brasil e Paraguai: relato de Caso

Lyme borreliosis is an infectious disease caused by bacteria of the genus Borrelia. In ruminants, most infections are asymptomatic, but the animals can present myalgia, lameness, laminitis, arthritis, synovitis, neurological symptoms, and also decreased production and abortion. The objective was to investigate Borrelia burgdorferi DNA in cows and cattle ticks on a small dairy farm in a border region. Blood samples and ticks were collected from Holstein cows with a history of decreased milk production and abortions. Borrelia burgdorferi DNA was extracted from blood samples using a commercial extraction kit, and from ticks using an alkaline hydrolysis solution for subsequent nested-PCR. Serum and tick samples did not present Borrelia burgdorferi DNA, and 100% of the ticks were identified as Rhipicephalus (Boophilus) microplus. Although this study shows negative results it contributes to understanding the epidemiology of this etiological agent in Paraná and in Brazil, since there are few studies on bovine species. The negative results of this work demonstrate that the animals and ticks researched were not exposed to Borrelia burgdorferi, however, as it isa property located in a border region, the sanitary monitoring of the herd must be performed constantly since this is a region. vulnerable to the entry of potential threats to human, animal and environmental health from vectors and pathogenic microorganisms, given the large extension of the land border with the neighboring country and which also has different health status.

A borreliose de Lyme é uma doença infecciosa causada por bactérias do gênero Borrelia. Nos ruminantes, a infecção é assintomática, mas os animais podem apresentar mialgia, claudicação, laminite, artrite, sinovite, sintomas neurológicos e também diminuição da produção e do aborto. O objetivo foi investigar o DNA de Borrelia burgdorferi em vacas e carrapatos de uma pequena propriedade rural de gado leiteiro em uma região de fronteira. Amostras de sangue e carrapatos foram coletados de vacas da raça Holandesa com histórico de diminuição da produção de leite e abortos. O DNA de Borrelia burgdorferi foi extraído de amostras de sangue usando um kit de extração comercial e de carrapatos usando uma solução de hidrólise alcalina para subsequente nested-PCR. Amostras de soro e carrapato não apresentaram DNA de Borrelia burgdorferi, e 100% dos carrapatos foram identificados como Rhipicephalus (Boophilus) microplus. Embora este estudo apresente resultados negativos o mesmo contribui para o entendimento da epidemiologia desse agente etiológico no Paraná e no Brasil, uma vez que existem poucos estudos sobre espécies bovinas. Os resultados negativos deste trabalho demonstram que os animais e carrapatos pesquisados não foram expostos a Borrelia burgdorferi, no entanto, por se tratar de uma propriedade localizada em uma região de fronteira, o monitoramento sanitário do rebanho deve ser realizado constantemente, pois é uma região vulnerável à entrada de ameaças potenciais à saúde humana, animal e ambiental por vetores e microrganismos patogênicos, dada a grande extensão da fronteira terrestre com o país vizinho e que também apresenta diferentes condições de saúde.

Negative results for Borrelia burdgorferi in cows and ticks from a border region between Brazil and Paraguay: a case report / Resultados negativos para Borrelia burgdorferi em vacas e carrapatos de região fronteiriça entre Brasil e Paraguai: relato de Caso

Lyme borreliosis is an infectious disease caused by bacteria of the genus Borrelia. In ruminants, most infections are asymptomatic, but the animals can present myalgia, lameness, laminitis, arthritis, synovitis, neurological symptoms, and also decreased production and abortion. The objective was to investigate Borrelia burgdorferi DNA in cows and cattle ticks on a small dairy farm in a border region. Blood samples and ticks were collected from Holstein cows with a history of decreased milk production and abortions. Borrelia burgdorferi DNA was extracted from blood samples using a commercial extraction kit, and from ticks using an alkaline hydrolysis solution for subsequent nested-PCR. Serum and tick samples did not present Borrelia burgdorferi DNA, and 100% of the ticks were identified as Rhipicephalus (Boophilus) microplus. Although this study shows negative results it contributes to understanding the epidemiology of this etiological agent in Paraná and in Brazil, since there are few studies on bovine species. The negative results of this work demonstrate that the animals and ticks researched were not exposed to Borrelia burgdorferi, however, as it isa property located in a border region, the sanitary monitoring of the herd must be performed constantly since this is a region. vulnerable to the entry of potential threats to human, animal and environmental health from vectors and pathogenic microorganisms, given the large extension of the land border with the neighboring country and which also has different health status.(AU)

A borreliose de Lyme é uma doença infecciosa causada por bactérias do gênero Borrelia. Nos ruminantes, a infecção é assintomática, mas os animais podem apresentar mialgia, claudicação, laminite, artrite, sinovite, sintomas neurológicos e também diminuição da produção e do aborto. O objetivo foi investigar o DNA de Borrelia burgdorferi em vacas e carrapatos de uma pequena propriedade rural de gado leiteiro em uma região de fronteira. Amostras de sangue e carrapatos foram coletados de vacas da raça Holandesa com histórico de diminuição da produção de leite e abortos. O DNA de Borrelia burgdorferi foi extraído de amostras de sangue usando um kit de extração comercial e de carrapatos usando uma solução de hidrólise alcalina para subsequente nested-PCR. Amostras de soro e carrapato não apresentaram DNA de Borrelia burgdorferi, e 100% dos carrapatos foram identificados como Rhipicephalus (Boophilus) microplus. Embora este estudo apresente resultados negativos o mesmo contribui para o entendimento da epidemiologia desse agente etiológico no Paraná e no Brasil, uma vez que existem poucos estudos sobre espécies bovinas. Os resultados negativos deste trabalho demonstram que os animais e carrapatos pesquisados não foram expostos a Borrelia burgdorferi, no entanto, por se tratar de uma propriedade localizada em uma região de fronteira, o monitoramento sanitário do rebanho deve ser realizado constantemente, pois é uma região vulnerável à entrada de ameaças potenciais à saúde humana, animal e ambiental por vetores e microrganismos patogênicos, dada a grande extensão da fronteira terrestre com o país vizinho e que também apresenta diferentes condições de saúde.(AU)

Patellar luxation and articular lesions in dogs: a retrospective: study research article / Luxação de patela e lesões articulares em cães: estudo retrospectivo

This study describes lesions that occur in the stifle joints of dogs with patellar luxation. These lesions are associated with the animal's age, body weight, and degree of luxation. The rate of redislocation was also evaluated. The patellar lesions found include articular cartilage erosion, subchondral bone exposure, a flattened or concave patellar surface, and enthesophytes. Extra-patellar lesions included synovitis, osteophytes, blunting of the trochlear groove, an absent trochlea, erosion of the condylar margins, capsule thickening, a long digital extensor tendon injury, cranial cruciate ligament rupture, and meniscal prolapse. Such lesions were frequently found in animals with Grade II or III luxation who were aged 24 months or more, and they were more severe in dogs weighing more than 15 kg. Patellar luxation causes changes that favor articular degeneration and should be treated surgically. Conservative treatment relieves pain, but does not address tissue alterations.(AU)

O estudo descreve as lesões articulares em cães com luxação de patela. Elas foram associadas com a idade do animal, massa corporal e grau de luxação. Foi avaliada também a porcentagem de casos com recidiva. As lesões patelares observadas foram erosão da cartilagem articular, exposição óssea subcondral, superfície patelar achatada ou côncava e entesófitos. As lesões extra patelares incluíram sinovite, osteófitos, ausência do sulco troclear, erosão das bordas condilares, espessamento da cápsula, lesão do tendão do músculo extensor digital, ruptura do ligamento cruzado cranial e prolapso de menisco. As lesões foram encontradas com maior frequência em animais com luxação de Grau II ou III e idade de 24 meses ou mais, sendo mais graves em cães com massa corporal superior a 15 kg. A luxação patelar ocasiona alterações que favorecem a degeneração articular e devem ser tratadas cirurgicamente. O tratamento conservativo alivia a dor, mas não corrige as alterações teciduais.(AU)

Patellar luxation and articular lesions in dogs: a retrospective: study research article / Luxação de patela e lesões articulares em cães: estudo retrospectivo

This study describes lesions that occur in the stifle joints of dogs with patellar luxation. These lesions are associated with the animal's age, body weight, and degree of luxation. The rate of redislocation was also evaluated. The patellar lesions found include articular cartilage erosion, subchondral bone exposure, a flattened or concave patellar surface, and enthesophytes. Extra-patellar lesions included synovitis, osteophytes, blunting of the trochlear groove, an absent trochlea, erosion of the condylar margins, capsule thickening, a long digital extensor tendon injury, cranial cruciate ligament rupture, and meniscal prolapse. Such lesions were frequently found in animals with Grade II or III luxation who were aged 24 months or more, and they were more severe in dogs weighing more than 15 kg. Patellar luxation causes changes that favor articular degeneration and should be treated surgically. Conservative treatment relieves pain, but does not address tissue alterations.(AU)

O estudo descreve as lesões articulares em cães com luxação de patela. Elas foram associadas com a idade do animal, massa corporal e grau de luxação. Foi avaliada também a porcentagem de casos com recidiva. As lesões patelares observadas foram erosão da cartilagem articular, exposição óssea subcondral, superfície patelar achatada ou côncava e entesófitos. As lesões extra patelares incluíram sinovite, osteófitos, ausência do sulco troclear, erosão das bordas condilares, espessamento da cápsula, lesão do tendão do músculo extensor digital, ruptura do ligamento cruzado cranial e prolapso de menisco. As lesões foram encontradas com maior frequência em animais com luxação de Grau II ou III e idade de 24 meses ou mais, sendo mais graves em cães com massa corporal superior a 15 kg. A luxação patelar ocasiona alterações que favorecem a degeneração articular e devem ser tratadas cirurgicamente. O tratamento conservativo alivia a dor, mas não corrige as alterações teciduais.(AU)

Avaliação do efeito anti-inflamatório e antioxidante do ozônio medicinal em articulações sinoviais de equinos com osteocondrite dissecante

O Ozônio (O3) é um gás solúvel altamente oxidante. Vários estudos e experimentos clínicos têm demonstrado que a ozonioterapia possui efeitos positivos como redução da dor e inflamação, melhora na função e efeitos benéficos no trofismo de ossos e cartilagem, aumentando vascularização e reparo cartilagíneo e do osso subcondral. O objetivo do presente estudo foi verificar o efeito anti-inflamatório e de modulação do estresse oxidativo do O3 no pós-operatório de artroscopia para casos de osteocondrite dissecante (OCD), por meio das concentrações de interleucinas (1, 4, 6, 10 e TNF-), substância P, prostaglandina E2 (PGE2), capacidade anti-oxidante total (TAC), capacidade oxidante total (TOC), malonaldeídeo (MAD), proteína, uréia, condroitim sulfato (CS), ácido hialurônico (AH), peso molecular do AH (PMAH), além de contagem celular total (WBC) e diferencial, avaliação de burst oxidativo, exame físico, ultrassonográfico, da membrana sinovial e de claudicação. Para isso 31 articulações com OCD foram selecionadas, formando dois grupos: o grupo tratado (GT) recebeu 5 minutos de lavagem com 20g/ml de O3 após a cirurgia e, 48h depois, 5ml de O3 e 2ml de AH. O controle (GC) recebeu lavagem com gás carbônico e depois de 48h 2 ml de AH. Imediatamente antes do início da artroscopia e do tratamento às 48 horas o líquido sinovial foi coletado; as avaliações físicas foram diárias até o final do experimento e as ultrassonográficas foram realizadas antes (M0h), 48 (M48h) e 96h (M96h) após o procedimento cirúrgico. As membranas sinoviais foram coletadas no momento que se estabeleceram os portais (M0), ao final do procedimento cirúrgico (M1), e ao final da lavagem articular (M2). Às 48 horas houve aumento em ambos os grupos nas concentrações de IL-1, 4, 6, 10, substância P, TAC, TOC, MAD, CS, proteína, WBC e no índice de ativação de monócitos e neutrófilos, não sendo estatisticamente significante a diferença entre os momentos apenas do MAD e havendo diferença de IL-6 entre os grupos (p<0,05). Observou-se também que a concentração de PGE2 diminuiu no GT e aumentou significativamente no GC, e a concentração de TNF- aumentou significativamente no GT. O PMAH e as concentrações de AH e uréia diminuíram, porém sem significância estatística entre os grupos, apenas entre os momentos no PMAH. O escore ultrassonográfico diminui, sendo significativamente estatístico (p<0,05) entre o M0h e M48h e 96h em ambos os grupos, e com diferença entre os grupos no item vascularização e sinovite. No exame físico houve diferença significativa entre os grupos na frequência respiratória e no escore facial de dor (p<0,05). O tratamento foi capaz de controlar parcialmente o processo inflamatório, com diminuição na concentração de marcadores inflamatórios como a PGE2, cuja concentração diminuiu, e na IL-6, cuja concentração aumentou em menor escala no GT. Esperava-se também aumento nas concentrações de interleucinas anti-inflamatórias, contudo o aumento mais acentuado em IL-10, não foi estatisticamente significativo. Quanto ao catabolismo da matriz extracelular as concentrações de CS foram menores no GT assim como a diminuição do PMAH, embora ambas também não diferiram significativamente do GC. O escore facial de dor e a frequência respiratória foram menores no GT, demonstrando potencial efeito analgésico e anti-inflamatório. Na avaliação ultrassonográfica o item vascularização e sinovite diferiu significativamente entre os grupos, sendo menor no GT. A utilização do ozônio medicinal ao final do procedimento artroscópico em casos de osteocondrite dissecante mostrou efeito anti-inflamatório e analgésico, diminuindo a concentração de marcadores inflamatórios e de catabolismo cartilagíneo. Além disso, proporcionou melhores escores na avaliação física dos cavalos, auxiliando no período pós-operatório.

Ozone (O3) is a highly oxidizing soluble gas. Several studies and clinical experiments have shown that ozone therapy has positive effects such as reducing pain and inflammation, improving function and benefiting bone and cartilage trophism, increasing vascularization and repair of cartilage and subchondral bone. The objective of the present study was to verify the anti-inflammatory and the oxidative stress modulation effects of O3 in the postoperative period of osteochondritis dissecans (OCD) cases that went through arthroscopic surgery. The concentrations of interleukins (1, 4, 6, 10 and TNF-), substance P, prostaglandin E2 (PGE2), total antioxidant capacity (TAC), total oxidizing capacity (TOC), malonaldehyde (MAD), protein, urea, chondroitin sulfate (CS), hyaluronic acid (HA) and molecular weight of AH (MHHA) were measured as well as the total and differential cell count (WBC). In addition, evaluation of oxidative burst and physical, ultrasonographic, synovial membrane and lameness examinations were performed. Thirty-one joints with OCD were selected and allocated in two groups: the treated group (TG) received 5 minutes of gas lavage with 20g / ml of O3 after surgery and, 48h later, 5ml of O3 followed by 2ml of HA. The control (CG) was submitted to lavage with carbon dioxide and after 48h, 2 ml of HA. Synovial fluid was collected immediately before the initiation of arthroscopic procedure, and the treatment at 48 hours; the physical evaluations were performed on a daily basis until the end of the experiment and the ultrasound scans were taken before (M0h), 48 (M48h) and 96h (M96h) after the surgical procedure. Samples of synovial membranes were collected when portals were established (M0), at the end of surgical procedure (M1), and at the end of the joint lavage (M2). Results shown that at 48 hours, there was an increase, in both groups, in the concentrations of IL-1, 4, 6, 10, substance P, TAC, TOC, MAD, CS, protein, WBC and in the monocyte and neutrophil activation index, with no statistically significance only between the moments of MAD and with a difference of IL-6 between the groups (p <0.05). It was also observed that the concentration of PGE2 decreased in the TG and increased significantly in the CG, and the concentration of TNF- increased significantly in the TG. The MHHA and the concentrations of HA and urea decreased, but with no statistical significance between groups, only between the moments in the MHHA. The ultrasound scores decreased, being statistical significantly (p <0.05) between M0h and M48h and 96h in both groups, with difference between groups in the scores of vascularization and synovitis. On physical examination, there was a significant difference between the groups in respiratory rate and facial pain score (p <0.05). The treatment was able to partially control the inflammatory process, with a decrease in concentrations of inflammatory markers such as PGE2, whose concentration decreased, and in IL-6, whose concentration increased to a lesser extent in the TG. An increase in the concentrations of anti-inflammatory interleukins was also expected, however the most pronounced increase in IL-10 was not statistically significant. As for the catabolism of the extracellular matrix, the CS concentrations were lower in the TG as well as the decrease in the MHHA, although both also did not differ significantly from the CG. The facial pain score and respiratory rate were lower in the TG, demonstrating potential analgesic and anti-inflammatory effects. In the ultrasonographic evaluation, scores for vascularization and synovitis differed significantly between the groups, being smaller in the TG. The use of medicinal ozone at the end of the arthroscopic procedure in cases of osteochondritis dissecans showed anti-inflammatory and analgesic effects, decreasing the concentrations of inflammatory markers and cartilage catabolism. In addition, it provided better scores in the physical evaluation of the horses, aiding in the postoperative period

EFEITOS DO PLASMA RICO EM PLAQUETAS NOS PARÂMETROS FÍSICO-QUÍMICOS E CITOLÓGICOS DO LÍQUIDO SINOVIAL DE EQUINOS COM SINOVITE INDUZIDA

O objetivo deste estudo foi obter informações sobre a influência do uso intra-articular de PRP nas características físicas, química e citológicas no LS e avaliar o efeito do tratamento intra-articular do PRP na expressão da IL-1RA no LS da articulação radiocárpica (ARC) de equinos com sinovite induzida. Foram utilizados 12 equinos distribuídos em dois grupos: grupo controle (GC), que não recebeu tratamento intra-articular e o grupo tratamento (GT), que recebeu tratamento com PRP intra-articular, ambos compostos por 6 animais. Foram estabelecidos cinco momentos experimentais: T0, T3, T6, T24 e T48. No momento T0 todos os animais foram submetidos à artrocentese e, pelo mesmo acesso articular, receberam uma aplicação de lipopolissacarídeo de Escherichia coli. No momento T3, três horas após T0, foram colhidas novas amostras de LS de todos os animais e, pelo mesmo acesso articular, os animais do GT receberam uma aplicação de PRP. Nos momentos T6, T24 e T48, que corresponderam respectivamentem às 6, 24 e 48 horas após T3, foram colhidas as amostras subsequentes de LS de todos os animais. A artrocentese foi realizada no recesso lateral ou dorsal da ARC e o líquido sinovial acondicionado em tubos contendo EDTA e em tubos secos. O PRP foi obtido através de protocolo de dupla centrifugação e um volume de 4 mL foi aplicado por via intra-articular nos animais do GT. Houve diferença estatística na densidade e contagem de células mononucleares no momento T6. A avaliação em curto período de tempo do LS não mostrou influência nos níveis de IL-1RA, contudo foi observado aumento nos níves dessa proteína no GT em relação ao GC, ainda que não significativa nas condições deste experimento. O PRP intra-articular causou alterações visuais, físicas e químicas no líquido sinovial. Além disso, gerou aumento nas concentrações de proteínas totais e diminuição na dosagem de glicose. Porém, não foi capaz de alterar significativamente as contagens de hemácias e células nucleadas.

The objective of this research was to evaluate the concentrations of Interleukin 1 receptor antagonist (IL-1RA) in the synovial fluid(SF) of the radiocarpal joint of horses before and after induction of synovitis and after the application of intra-articular platelet-rich plasma (PRP) and to evaluate the inflammatory response generated by the PRP. Twelve horses divided into two groups were used. Control group (CG) did not receive intra-articular treatment and treatment group (TG) which received treatment with intra-articular PRP. There were 6 animals in both groups. Five experimental moments were established: T0, T3, T6, T24 and T48. At time T0, all animals were submitted to arthrocentesis and, through the same joint access, were given Escherichia coli Lipopolysaccharide. At time T3, three hours after T0, new SF samples were taken from all animals and, through the same joint access, the animals in the TG were given PRP. At the moments T6, T24 and T48, which corresponded respectively to 6, 24 and 48 hours after T3, samples of LS from all animals were collected. Arthrocentesis was performed in the lateral or dorsal approach of the ARC and the synovial fluid was put in tubes containing EDTA and in dry test tubes. The TG received 4 mL of intra-articular PRP obtained through a double centrifugation protocol. There was a statistical difference in density and number and mononuclear cells at the moment T6. The short-term evaluation of the LS did not show any influence on the levels of IL-1RA. However, an increase was observed in the levels of IL-1RA in the treatment group when compared to the control group, although not significant in the conditions of this experiment. Intra-articular PRP caused visual, physical and chemical changes in the synovial fluid. In addition, it generated an increase in total protein concentrations and a decrease in glucose dosage. However, it was not able to significantly change the amount of red blood cells and nucleated cells.

CARACTERIZAÇÃO PATOLÓGICA E BACTERIOLÓGICA DE LESÕES ARTICULARES EM SUÍNOS

Lesões articulares em suínos são frequentes e geralmente relacionadas a perdas econômicas para produtores e abatedouros. Artrites podem estar associadas a causas infecciosas e não infecciosas. Entre as artrite os agentes infecciosos mais comuns estão Erysipelothrix rhusiopathiae, Streptococcus suis, Glaesserella (Haemophilus) parasuis, Mycoplasma hyorhinis e Mycoplasma hyosynoviae, enquanto a osteocondrose é a causa não infecciosa mais importante em suínos. O objetivo deste estudo foi realizar a caracterização patológica e microbiológica de lesões articulares em suínos. As coletas foram efetuadas em dois frigoríficos no Estado do Rio Grande do Sul, Brasil. Um total de 8.808 suínos de 34 lotes foram examinados macroscopicamente durante o período do estudo. Cento e cinco lesões articulares foram coletadas, o que representou 1,19% dos suínos abatidos durante o período. As articulações femorotibiais direita e esquerda somadas foram as mais comumente envolvidas (39,04%), seguidas pelas articulações femorotibial direita (21,90%) e femorotibial esquerda (17,14%). Na microscopia, as lesões foram classificadas morfologicamente em sinovite linfoplasmocitica proliferativa (79,04%), sinovite associada com osteocondrose (12,38%) e sinovite fibrinonecrótica e supurativa (8,57%). Exame bacteriológico aeróbico foi realizado em todas as amostras coletadas. No entanto, o isolamento bacteriano foi raro e apenas 3,80% das amostras apresentaram crescimento com os métodos utilizados. As bactérias identificadas foram Streptococcus suis (1,90%), Streptococcus porcinus (0,95%) e Trueperella pyogenes (0,95%). No restante dos casos (96,19%), nenhum crescimento bacteriano significativo foi detectado. Portanto, o exame dos componentes articulares fornece informações sobre a natureza da lesão, diferenciando processos infecciosos de não-infecciosos. O exame de todas as articulações é importante para o diagnóstico mais preciso, bem como recomendase examinar mais de uma articulação quando a lesão macroscópica for evidenciada. O padrão histológico caracterizado como sinovite proliferativa linfoplasmacítica foi o mais frequentemente observado e análises moleculares são necessárias para definir a etiologia dessa lesão.

Joint injuries in swine are common and frequently related to economic losses for producers and meat industry. Arthritis may derive from infectious and non-infectious process. Among the most common infectious agents are Erysipelothrix rhusiopathiae, Streptococcus suis, Glaesserella parasuis (Haemophilus) parasuis, Mycoplasma hyorhinis, and Mycoplasma hyosynoviae, while osteochondrosis is the non-infectious cause more important to swine. The objective of this study was to perform a pathological and microbiological characterization of articular lesions in swine. Articular lesions were collected in two slaughterhouses in the state of Rio Grande do Sul, Brazil. A total of 8,808 pigs out of 34 batches were examined during the study period. One hundred five joint injuries were collected, which represented 1.19% of the amount of slaughtered pigs during the study period. The right and left femorotibial joints alongside were the most affected articulations (39.04%), followed by right femorotibial (21.90%), and left femorotibial joint with (17.14%). The lesions observed were classified according to their morphology as lymphoplasmacytic proliferative synovitis (79.04%), synovitis associated with osteochondrosis (12.38%), and fibrinonecrotic and suppurative synovitis (8.57%). Aerobic bacterial culture was performed in all samples collected. However, bacterial isolation was rare and only 3.80% (4/105) samples showed growth with the methods used. The bacteria isolated were Streptococcus suis (1.90%), Streptococcus porcinus (0.95%), and Trueperella pyogenes (0.95%). In the rest of the cases (96.19%), no significant bacterial growth or no bacterial growth was noticed. Therefore, the examination of the articular structures provides insights into the nature of the lesion, differentiating between infectious and non-infectious lesions. Besides, the examination of all joints may be necessary to diagnosis more precisely. It is recommended to evaluate all joints when macroscopic alteration is found noticed in one. The histopathologic pattern of lymphoplasmacytic proliferative synovitis were the most frequently seen and molecular analysis is necessary to define the etiology of this lesion.

ANÁLISES HISTOLÓGICAS E IMUNOCELULARES EM JOELHOS DE RATOS COM OSTEOARTROSE INDUZIDA APÓS USO DE CLODRONATO LIPOSSOMA

A osteoartrite de joelho é uma das doenças que mais causa incapacidade no mundo. Apresenta fisiopatologia complexa, onde uma série de interações mecânicas e inflamatórias promovem a destruição da superfície articular, sinovite, rigidez e perda de função. O diagnóstico é baseado em sinais clínicos e de imagem, geralmente é tardio e em fases onde o processo já se encontra irreversível. O objetivo de nosso estudo foi analisar comparativamente, alterações da cartilagem articular em joelhos de ratos com osteoartrite induzida que receberam infiltração intra-articular de clodronato revestido em lipossoma, procurando correlacionar as alterações estruturais precoces da cartilagem articular com a concentração de um biomarcador sérico da degradação do colágeno tipo II, da presença no soro da citocina Interleucina 10 (IL-10) e identificar os possíveis efeitos benéficos e preventivos na osteoartrite por meio da inativação dos macrófagos da superfície da sinóvia. Foram utilizados nos experimentos 21 ratos Wistar, divididos em 3 grupos. Um grupo designado de controle, não recebeu nenhum tipo de tratamento, nos outros 2 grupos se induziu a osteoartrose (OA) por meio da transecção do ligamento cruzado anterior (TLCA). Nos grupos submetidos a TLCA, um grupo (n=7) recebeu infiltração intra-articular no joelho de clodronato revestido em lipossoma e no outro grupo (n=7) solução fisiológica, estes procedimentos ocorreram sete dias anteriores ao procedimento cirúrgico. Durante o experimento amostras de sangue foram colhidas para avaliações laboratoriais, no sétimo e no vigésimo primeiro dia de pós-operatório (PO), quando os animais foram eutanasiados e coletado material para histologia. Os resultados identificaram que o biomarcador de degradação da matriz extracelular não foi capaz de identificar as alterações precoces na cartilagem no tempo adotado para o experimento, que não foi possível determinar concentrações significativas de IL-10 sistêmica neste período, que a técnica empregada na indução osteoartose é uma metodologia adequada a este tipo de estudo, e que a histologia tem papel fundamental na identificação das alterações iniciais de implantação da osteoartrite. Achado importante a ser destacado é que o uso do clodronato lipossoma parece ter um efeito protetor sobre a cartilagem articular.

The knee osteoarthritis is one of the most disabling diseases in the world. It presents complex pathophysiology, where a series of mechanical and inflammatory interactions promote the destruction of the joint surface, synovitis, stiffness and loss of function. The diagnosis depends of clinical and imaging signs, it is usually late and at a stage where the process has already irreversible. The aim of our study was to comparatively analyze changes in articular cartilage in the knees of rats with induced osteoarthritis that received intra-articular infiltration of liposome-coated clodronate, seeking to correlate the early structural changes in articular cartilage with the concentration of serum degradation biomarker collagen, the presence in the serum of the cytokine Interleukin 10 (IL-10) and to identify the possible beneficial and preventive effects in osteoarthritis by inactivating macrophages on the surface of the synovium. Twenty-one Wistar rats were used in the experiments, divided into 3 groups. One group, designated as control, did not receive any type of treatment, the other 2 groups induced osteoarthritis (OA) through transection of anterior cruciate ligament (TLAC). In the groups submitted to TLAC, one group (n = 7) received intraarticular knee infiltration with clodronate liposome and the other group (n = 7) received saline solution, these procedures occurred seven days before the TLAC surgical procedure. During the experiment, blood samples were collected for laboratory evaluation on the seventh day and on the twenty-first postoperative day (PO) when the animals were euthanized and material for histology was collected. The results identified that the extracellular matrix degradation biomarker was not able to identify early changes in cartilage in the time adopted for the experiment, that it was not possible to determine significant concentrations of IL-10 systemic in this period, that the technique employed in inducing osteoarthritis is adequate methodology for this type of study, and that histology has a fundamental role in the identification of the initial changes in the implantation of osteoarthritis. An important finding to be highlighted is that the use of liposome clodronate seems to have a protective effect on articular cartilage

ALTERAÇÕES OSTEOARTICULARES DE CÃES NATURALMENTE INFECTADOS POR Leishmania chagasi

A leishmaniose visceral canina (LVC) é causada pelo protozoário Leishmania chagasi tendo o cão como principal reservatório. Afeta ossos e articulações provocando o aparecimento de lesões identificadas em exames radiográficos. Sua etiologia deve-se ao próprio parasita, à circulação de imunocomplexos ou ao depósito de ambos na membrana sinovial. Cães acometidos pela doença apresentam distúrbios locomotores como sinais atípicos associados à infecção. O objetivo desta pesquisa foi caracterizar, através do exame radiográfico e histopatológico, alterações osteoarticulares e identificar a presença do parasita no líquido sinovial, por meio do exame parasitológico direto e teste de Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR) das articulações femorotibiopatelares, umerorradioulnares, radiocárpicas e tibiotársicas de cães infectados naturalmente. Para tanto, foram utilizados 30 cães positivos para leishmaniose visceral por meio do teste de imunocromatografia DPP-LVC (Bio-Manguinhos) e confirmados pelo teste de pesquisa direta utilizando como material biológico a medula óssea, provenientes da Unidade de Vigilância em Zoonoses (UVZ). 60% da amostra eram machos e 40% fêmeas, sendo 66,66% cães sem raça definida. Dos animais avaliados, 33,33% apresentaram sinais clínicos relacionados ao sistema locomotor, sendo claudicação e artralgia os mais frequentes. Na avaliação parasitológica do líquido sinovial foram identificadas formas amastigotas de Leishmania sp. em 26,66% da amostra, em um mesmo animal foi identificado o parasita em quatro articulações. Radiograficamente foram observadas lesões variadas, edema de tecidos moles 16,66% (5/30), proliferações ósseas (osteófito e entesófito) 16,66% (5/30), osteólises 16,66% (5/30), efusão articular 13,33% (4/30), edema articular 13,33% (4/30), reação periosteal lamelar 10% (3/30), trabeculado ósseo grosseiro 6,66% (2/30), sinovite 6,66% (2/30) e tenossinovite, alargamento de medular e perda da definição da cortical 3,33% (1/30), as lesões apresentaram tendência para o envolvimento bilateral. Com os resultados obtidos até o momento, infere-se que as articulações de cães infectados naturalmente por Leishmania chagasi podem sofrer diferentes injúrias visualizadas ao exame radiográfico e que o parasita pode ser encontrado no líquido sinovial destes animais. Desse modo, demonstra-se a importância da avaliação do sistema locomotor em cães de regiões endêmicas para a leishmaniose visceral canina, e assim, incluí-la no diagnóstico diferencial de doenças osteoarticulares, devendo-se considerar sinais clínicos atípicos, como claudicação e artralgia.

Canine visceral leishmaniasis (CVL) is caused by the protozoan Leishmania chagasi with the dog as the main reservoir. It affects bones and joints causing the appearance of lesions identified on radiographic examinations. Its etiology is due to the parasite itself, the circulation of immunocomplexes or the deposit of both in the synovial membrane. Dogs affected by the disease present locomotor disorders as atypical signs associated with infection. The objective of this research was to characterize, through radiographic and histopathological examination, osteoarticular changes and to identify the presence of the parasite in the synovial fluid by direct parasitological examination and polymerase chain reaction (PCR) testing of the femorotibiopatellar joints, radiocarpous joints. and tibiotarsal infections of naturally infected dogs. Thirty dogs visceral leishmaniasis positive were used by the DPP-LVC (Bio-Manguinhos) immunochromatography test and confirmed by the direct screening test using bone marrow from the Zoonoses Surveillance Unit (UVZ) as biological material. 60% of the sample were male and 40% female, with 66.66% dogs of no defined breed. Of the animals, 33.33% reported signs related to the locomotor system, with lameness and arthralgia being the most frequent. In parasitological evaluation of synovial fluid, amastigote forms of Leishmania sp. in 26.66% of the sample, in the same animal was identified or parasite in four joints. Radiographically, several lesions were observed, soft tissue edema 16.66% (5/30), bone proliferation (osteophyte and enthesophyte) 16.66% (5/30), osteolysis 16.66% (5/30), joint effusion 13.33% (30/30), joint edema 13.33% (4/30), lamellar periosteal reaction 10% (3/30), thick trabecular bone 6.66% (2/30), synovitis 6.66 % (2/30) and tenosynovitis, increase and loss of spinal cord of cortical definition 3.33% (1/30), as lesions caused by the tendency to bilateral involvement. From the results obtained so far, it can be inferred that the joints of dogs naturally infected by Leishmania chagasi can affect different lesions observed on radiographic examination and that parasites can be found in animal synovial fluid. Thus, it demonstrates the importance of locomotor system evaluation in dogs from endemic regions for a dog with visceral leishmaniasis and, therefore, includes the differential diagnosis of osteoarticular diseases, considering clinical exams such as lameness and arthralgia.

CONCENTRADO AUTÓLOGO DE PLAQUETAS NA OSTEOARTROSE INDUZIDA EM COELHOS: AVALIAÇÕES ARTROSCÓPICA, MACROSCÓPICA, HISTOLÓGICA E IMUNO-HISTOQUÍMICA DA ARTICULAÇÃO FÊMOROTÍBIO-PATELAR

Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito do concentrado autólogo de plaquetas (CAP) na osteoartrose (OA) induzida experimentalmente em coelhos, através da avaliação histológica, imuno-histoquímica e artroscópica, e simultaneamente, determinar as concentrações plasmáticas do fator de crescimento transformador 1 (TGF-1) e do fator de crescimento derivado das plaquetas (PDGF). Foram utilizados 30 coelhos machos, adultos jovens, saudáveis, da raça Nova Zelândia, com massa corporal média de 3,0kg, submetidos à ruptura do ligamento cruzado cranial (LCCr) (M1) por vídeo artroscopia para a indução da OA. Aos 21 dias depois da ruptura, os coelhos foram submetidos à reconstituição do ligamento (M2) por vídeo artroscopia e foram divididos em dois grupos de acordo com o tratamento: O grupo controle, que recebeu 0,5 ml de solução Ringer Lactato por via intra-articular e o grupo CAP, que recebeu 0,5 ml de concentrado autólogo de plaquetas por via intra-articular. As injeções intra-articulares dos tratamentos foram realizadas imediatamente após a reconstituição do ligamento, aos 15 e aos 30 dias após a reconstituição. Cinco coelhos de cada grupo foram eutanasiados aos 15 dias após a reconstituição (M3), outros cinco aos 30 (M4), e os restantes cinco coelhos de cada grupo aos 60 dias (M5) após a reconstituição. Nesses mesmos momentos, foram feitas avaliações artroscópicas para avaliar a evolução do processo degenerativo e a resposta aos tratamentos aplicados e antes de cada procedimento, foram coletados dois ml de sangue da artéria auricular central e depositados em tubos contendo EDTA e posteriormente acondicionadas em eppendorfes estéreis em duas alíquotas iguais para fazer a dosagem de TGF-1 e PDGF respectivamente. Nos M3, M4 e M5, depois da eutanásia dos animais, foram coletados fragmentos da cápsula sinovial e da cartilagem articular para a avaliação histológica e imuno-histoquímica. Foi observado na avaliação histológica que os animais que receberam o CAP apresentaram, significativamente, (p<0,05) menor inflamação sinovial, menor proliferação celular e menor degradação da matriz extra celular (MEC) quando comparados com os coelhos que receberam Ringer Lactato. Na avaliação imuno-histoquímica os animais que receberam o CAP apresentaram, significativamente, menor expressão (p<0,05) de interleucina 1 (IL-1), de fator de necrose tumoral (TNF), da proteína morfogenética 2 (BMP-2) e, significativamente, maior expressão de PDGF na membrana sinovial quando comparados com os coelhos que receberam Ringer Lactato, e na cartilagem dos animais desse mesmo grupo, expressão, significativamente (p<0,05) menor, de IL-1 e de TNF e maior expressão de BMP-2 e PDGF quando comparados com os animais do grupo controle. Na avaliação artroscópica foi observado nos animais que receberam o CAP melhora significativa (p<0,05) na inflamação da membrana sinovial, menor formação de cordões fibrosos e menos fibrilação da cartilagem. Finalmente, na avaliação da concentração dos fatores de crescimento, não foram observadas diferenças estatisticamente significativas (p>0,05) nas concentrações de TGF-1 em nenhum dos momentos avaliados após as aplicações do CAP, e foi observado diferença estatisticamente significativa na concentração plasmática do PDGF no M5 nos animais do grupo CAP quando comparado com os animais do grupo controle. Segundo os resultados deste experimento, conclui-se que o CAP é capaz de controlar o processo inflamatório que acontece durante a OA melhorando a sinovite presente na cápsula sinovial ao tempo que diminui a degradação da cartilagem articular. Adicionalmente, esse composto biológico regula a síntese e secreção de citocinas inflamatórias e aumenta a liberação do PDGF.

This study aimed to evaluate the effect of autologous platelet concentrate (APC) on osteoarthritis (OA) experimentally induced in rabbits, through histological, immunohistochemical and arthroscopic evaluation, and simultaneously determine plasma concentrations of the transforming growth factor 1 (TGF -1) and platelet-derived growth factor (PDGF). The study used 30 male rabbits, young, healthy, New Zealand breed, with an average body mass of 3.0 kg, and submitted to rupture of the cranial cruciate ligament (CrCL) (M1) by video arthroscopy to induce OA. At 21 days after the rupture, the rabbits were submitted to ligament replacement (M2) by video arthroscopy and were divided into two groups according to the treatment: The control group, which received 0.5 ml of the Ringer Lactate solution by intra-articular injections and the CAP group, which received 0.5 ml of autologous platelet concentrate by intra-articular injections. The intra-articular injections of the treatments were performed immediately after the ligament replacement, at 15 and 30 days after the replacement. Five rabbits from each group were euthanized at 15 days after replacement (M3), another five at 30 (M4), and the remaining five rabbits from each group at 60 days (M5) after replacement. At those same moments, arthroscopic evaluations were carried out to assess the evolution of the degenerative process and the response to the treatments applied and before each procedure, two ml of blood from the central auricular artery were collected and deposited in tubes containing EDTA and later stored in sterile eppendorfs in two equal aliquots to measure TGF-1 and PDGF respectively. In M3, M4 and M5, after euthanasia of the animals, fragments of the synovial capsule and articular cartilage were collected for histological and immunohistochemical evaluation. It was observed in the histological evaluation that the animals that received the CAP had significantly (p <0.05) less synovial inflammation, less cell proliferation and less degradation of the extracellular matrix (ECM) when compared to the rabbits that received Ringer Lactate. In the immunohistochemical evaluation, the animals that received the CAP showed lower secretion (p <0.05) of interleukin 1 (IL-1), tumor necrosis factor (TNF), morphogenetic protein 2 (BMP-2) and greater secretion of PDGF in the synovial membrane when compared to the rabbits that received Ringer Lactate, and in the cartilage of the animals of that same group, significantly lower (p <0.05) IL-1 and TNF secretion and greater BMP-2 synthesis and secretion and PDGF when compared to animals in the control group. In the arthroscopic evaluation, a significant improvement (p <0.05) in inflammation of the synovial membrane, less formation of fibrous cords and less fibrillation of the cartilage was observed in the animals that received CAP. Finally, when assessing the concentration of growth factors, there were no statistically significant differences (p> 0.05) in TGF-1 concentrations in any of the moments evaluated after CAP applications, and a statistically significant difference in plasma concentration was observed of PDGF in M5 in CAP group animals when compared to control group animals. According to the results of this experiment, it is concluded that the CAP is able to control the inflammatory process that occurs during OA, improving the synovitis present in the synovial capsule while decreasing the degradation of the articular cartilage. Additionally, this biological compound regulates the synthesis and secretion of inflammatory cytokines and increases the release of PDGF.

EFEITOS DO PLASMA RICO EM PLAQUETAS NA EXPRESSÃO DE METALOPROTEINASES MMP-2 E MMP-9 NO LÍQUIDO SINOVIAL DE EQUINOS COM SINOVITE INDUZIDA

O sistema musculoesquelético dos equinos sofre sobrecarga constante, o que aumenta sua predisposição a lesões e em especial o desenvolvimento de doenças articulares. Os tratamentos convencionais com anti-inflamatórios possuem efeitos passageiros e sintomáticos, além de efeitos adversos indesejados. Terapias celulares, como o Plasma Rico em Plaquetas (PRP), estão sendo estudadas e buscam a modulação dos fatores de degradação e regeneração da matriz extracelular (MEC). Um expressivo fator de degradação são as metaloproteinases (MMPs). As MMP-2 (Metaloproteinases de Matriz tipo 2) e MMP-9(Metaloproteinases de Matriztipo 9) são as mais expressivas no líquido sinovial (LS) de equinos. Portanto o objetivo dessa dissertação é revisar os elementos envolvidos nas artropatias, e investigar o efeito intra-articular do PRP nos níveis de MMP-2 e MMP-9 em equinos. Para esta pesquisa foram utilizados 12 equinos hígidos, divididos em Grupo Controle (GC) e Grupo Tratamento (GT). Foram realizadas induções de sinovite em todos os equinos com a aplicação delipopolissacarídeo (LPS) na articulação radiocárpica esquerda. O GT foi tratado com aplicação intra-sinovialde PRP preparado por dupla centrifugação. Utilizando a técnica de ELISA realizou-se análise do nível de MMP-2 e MMP-9 no líquido sinovial. Foram determinados também a densidade, pH, glicose, proteína, hemácias e contagem total e diferencial decélulas nucleadas. Essas análises foram realizadas antes e após a indução da sinovite, e seis, 24 e 48 horas após o tratamento com PRP. Quanto aos níveis de metaloproteinases, não houve diferença entre os grupos (p>0,05), assim como para a avaliação de glicose, hemácias e células nucleadas. Contudo, densidade, pH e proteínas foram diferentes na comparação entre os dois grupos, no tempo de seis horas após o tratamento com PRP (p=0,0057; p=0,0233; p=0,0152; respectivamente). No modelo experimental de sinovite induzida em equinos, o PRP influenciou os níveis de MMP-2, ainda que estatisticamente não tenha sido observado. Porém, o PRP não influênciou os níveis de MMP-9. Além disso, ele foi capaz de causar alterações nos aspectos físico-químicos e citológicos do LS.

The equine musculoskeletal system suffers contant overload, what increases its predispositon to injuries, particularly the development of joint diseases. Conventional anti-inflammatory treatments have both temporary and symptomatic effects, as well as unwanted side effects. Platelet Rich Plasma (PRP) has been studied as a regenerative cellular therapy for joint diseases as it aims the modulation of extracellular matrix degradation and regeneration (MEC) factors. Important degradation factors are the metalloproteinases (MMPs), especially MMP-2 (Matrix metalloproteinases type 2) and MMP-9 (Matrix metalloproteinases type 9) in equines. Therefore the aim of this dissertation is to review the elements involved in the arthropathies, and investigate the intra-articular effects of PRP on the MMP-2 and MMP-9expression. Twelve healthy horses were divided into groups: Control and Treatment (CG and GT). Induction of synovitis was performed in all horses by means of lipopolysaccharide (LPS) injection into the left radiocarpal joint. GT was treated with a single intrasinovial PRP injection. PRP was obtained by double centrifugation method. The expression of MMP-2 and MMP-9 in the synovial fluid was determined by ELISA test. Density, pH, glucose, protein, red blood cells and nucleated cells were also determined. These analysis were done prior to and after induction of synovitis and six, 24 and 48 hours after PRP injection. Regarding MMPs expression, there was no difference between groups (p> 0.05), as well as in the evaluation of glucose, red blood cells and nucleated cells. However, density, pH and proteins were different in the comparison between the two groups at six hours post PRP treatment (p = 0.0057; p = 0.0233; p = 0.0152, respectively). In the experimental model of induced synovitis in horses, PRP influenced MMP-2 levels, although it was not statistically observed. However, PRP is not influenced by MMP-9 levels. In addition, he was able to make use of pressure in the physical-chemical and cytological tissues of the LS.

SINOVITE EM EQUINOS: EFEITO DAS CÉLULAS TRONCO MESENQUIMAIS SOBRE A INFLAMAÇÃO ARTICULAR

A alta exigência do sistema locomotor de equinos atletas resulta em pequenas lesões articulares que, cumulativamente, provocam inflamação sinovial e liberação de diversos mediadores inflamatórios no microambiente articular, resultando no desenvolvimento da osteoartrite (OA). A utilização de células tronco mesenquimais (CTMs) nestes casos visa modificar a progressão desta enfermidade. O objetivo do presente trabalho foi verificar o comportamento das CTMs alogênicas derivadas da membrana sinovial (CTMms) frente aos eventos inflamatórios em casos de sinovite aguda em equinos. A sinovite foi induzida utilizando 0,5ng de LPS via intra-articular (IA) e os animais foram tratados 8 horas após a indução. O grupo controle recebeu como tratamento 2 ml de PBS IA, enquanto o grupo tratado recebeu 107 CTMms IA. Foram realizados, de maneira seriada, exames físicos, exames do aparelho locomotor, análise citológica do líquido sinovial e a determinação da concentração sinovial de TGF- e PGE2. Não foram observadas diferenças entre os grupos quanto à claudicação e parâmetros do exame físico. A análise citológica revelou diminuição significativa de linfócitos e macrófagos no grupo tratado (P= 0,0059 e P= 0,0003, respectivamente) que também apresentou menores níveis de TGF- (P= 0,0467) no momento 24h. Os demais parâmetros não apresentaram diferença significativa em nenhum momento. Os dados avaliados sugerem que a inflamação aguda tenha inicialmente causado inibição da capacidade imunomoduladora das CTMs, que foi retomada após 24h, com o declínio da inflamação articular, e que a interação das CTMs com os mediadores inflamatórios presentes no líquido sinovial está diretamente relacionada à condição inflamatória articular no momento da aplicação. Para a otimização do potencial imunomodulador das CTMs, os autores sugerem a adoção de estratégias para o controle da inflamação local antes de sua administração

The high requirement of the locomotor system of equine athletes often results in small joint injuries that can cause synovial inflammation and release of inflammatory mediators, leading to the development of osteoarthritis (OA). Mesenchymal stem cells (MSCs) are used in these cases to modify OA progression. This study aimed to verify the behavior of allogeneic synovial membrane derived MSCs (MSCsm) against inflammatory events in acute equine synovitis. Synovitis was induced by intra-articular (IA) administration of 0.5 ng of LPS and the subjects were treated 8 hours post-induction. The control group received 2 ml of PBS IA as treatment, while the treated group received 107 MSCsm IA. Physical exams, lameness evaluations, cytological analysis of synovial fluid and determination of synovial concentrations of TGF- and PGE2 were performed. No differences were observed in lameness and physical exam parameters between the groups. Cytological analysis revealed a significant decrease in lymphocytes and macrophages in the treated group (P=0.0059 and P=0.0003, respectively), which also had lower levels of TGF- (P=0.0467) at 24 h. The other parameters did not present significant difference. Our data suggest that acute inflammation initially caused inhibition of the immunomodulatory capacity of MSCs, which was resumed after 24h with the decline of joint inflammation, and that the interaction of MSCs with the inflammatory mediators in the synovial fluid is directly related to the inflammatory condition at the time of application. To optimize the immunomodulatory potential of MSCs, the authors suggest the adoption of strategies to control local inflammation prior to its administration.

Avaliação dos efeitos in vitro do Dimetilsulfóxido em células sinoviais de equinos e de sua utilização intra-articular como tratamento para sinovite aguda

As lesões articulares na espécie equina causam inúmeras perdas econômicas e funcionais, com objetivo de minimizá-las vários estudos sobre técnicas e terapias são realizadas e se fazem necessárias. Acredita-se que o dimetilsulfóxido (DMSO) tenha ação moduladora nos processos inflamatórios articulares agudos e ação sobre radicais livres, porém sua eficácia ainda é dúbia. Este estudo teve como objetivo avaliar os efeitos do DMSO sobre células sinoviais e a lavagem articular com diferentes concentrações de DMSO (5% e 10%), em um modelo experimental de indução da sinovite aguda em equinos, com LPS. Para tanto, este estudo foi dividido em duas etapas. A primeira etapa visou verificar o efeito do DMSO sobre células sinoviais, através da análise de viabilidade celular após a estimulação das células sinoviais pelo LPS e tratamento com o DMSO. Para a segunda etapa do estuo foram utilizadas 26 articulações tibiotársicas, distribuídas aletoriamente em quatro grupos. Os grupos foram tratados e organizados da seguinte forma: grupo solução de ringer lactato; grupo DMSO 5% em solução de ringer lactato; grupo DMSO 10% em solução de ringer lactato; e Grupo controle (apenas indução da sinovite). Foram realizadas coletas do líquido sinovial (LS) antes da infiltração das articulações com LPS, na dose de 0,5 ng (M0), após 1h (M1), antes das lavagens (M8), e após 24h e 48h (M24 e M48) da indução da sinovite, as amostras de LS foram utilizadas para contagem total de células nucleadas e diferenciação celular, quantificação de PGE2, interleucina-1, interleucina-6, TNF-, AH, CS, ureia, proteína total e análise do burst oxidativo. As células sinoviais estimuladas por LPS e tratadas com DMSO 5% apresentaram menor porcentagem de células viáveis após vinte e quatro horas, entretanto após 48h somente as células tratadas com ringer lactato apresentaram menor porcentagem de células viáveis. O equipamento Lameness Locator® foi utilizado para verificar a presença de dor articular, previamente a todas coletas. Todos os grupos apresentaram aumento na contagem total de células nucleadas, concentração de PGE2, IL-1, IL-6 e proteína total no M8. Sendo que os grupos DMSO 5% e DMSO 10% apresentaram diminuição da contagem total de células nucleadas após a lavagem articular. A concentração de PGE2 e IL-1 no grupo DMSO 10% foi menor no M48 em relação ao M8, e o grupo ringer lactato apresentou menor concentração de IL-1 que os grupos DMSO 5% e controle no M24. O grupo DMSO 10% apresentou menor concentração de IL-6 em relação aos grupos DMSO 5% e ringer lactato no momento 24. O TNF- apresentou aumento em todos os grupos no M1. Os grupos DMSO 10% e controle apresentaram menor concentração de TNF- nos M24 e M48 em relação ao M1. Os grupos DMSO 5% e controle não apresentaram diferença na concentração de IL-10, porém os grupos ringer lactato e DMSO 10% apresentaram maior concentração no M48. Os grupos DSMO 10% e ringer lactato apresentaram menor concentração de AH no M24. Todos os grupos apresentaram aumento da concentração de CS após as lavagens articulares. Não houve diferença na avaliação de dor articular, bem como na análise do burst oxidativo e concentração de ureia. Os diferentes grupos apresentaram similaridade de comportamento das células e citocinas estudadas no líquido sinovial ao longo do experimento, contudo o grupo DMSO 10% foi o que apresentou mais rapidamente o retorno próximo aos valores basais. Os resultados apresentados neste estudo permitem concluir que frente à necessidade de se realizar lavagens articulares a utilização de solução de ringer lactato com DMSO 10% é mais indicada que o uso de ringer lactato ou solução com DMSO a 5%. Entretanto, nenhum tratamento foi capaz de demonstrar efeito condroprotetor.

Joint injuries in the equine species cause numerous economic and functional losses, in order to minimize them, several studies on techniques and therapies are performed and are necessary. Dimethylsulfoxide (DMSO) is thought to have modulating action on acute joint inflammatory processes and action on free radicals, but its efficacy is still dubious. This study aimed to evaluate the effects of DMSO on synovial cells and joint lavage with different concentrations of DMSO (5% and 10%) in an experimental model of induction of acute synovitis in horses with LPS. Therefore, this study was divided into two steps. The first step aimed to verify the effect of DMSO on synovial cells by analyzing cell viability after stimulation of synovial cells by LPS and treatment with DMSO. For the second stage of the study, 26 tibiotarsal joints were used, divided into four groups. The groups were treated and organized as follows: ringer lactate solution group; 5% DMSO group in ringer lactate solution; 10% DMSO group in ringer lactate solution; and Control group (synovitis induction only). Synovial fluid (LS) was collected prior to infiltration of the joints with LPS at a dose of 0.5 ng (M0), after 1h (M1), before washes (M8), and after 24h and 48h (M24 and M48), from synovitis induction. LS samples were used for total nucleated cell count and cell differentiation, PGE2 quantification, interleukin-1, interleukin-6, TNF-, HA, CS, urea, total protein and burst oxidative analysis. The synovial cells stimulated by LPS and treated with DMSO 5% presented lower percentage of viable cells-after 24 hours, however after 48h only the cells treated with Ringer lactate showed lower percentage of viable cells. Lameness Locator® equipment was used to verify the presence of joint pain, prior to all collections. All groups showed an increase in total nucleated cell count, PGE2, IL-1, IL-6 and total protein in M8. The DMSO 5% and DMSO 10% groups showed a decrease in the total nucleated cell count after joint washing. The concentration of PGE2 and IL-1 in the 10% DMSO group was lower in M48 compared to M8, and the ringer lactate group presented lower IL-1 concentration than the 5% DMSO and control groups in M24. The 10% DMSO group showed lower IL-6 concentration compared to the 5% DMSO and ringer lactate groups at time 24. TNF- increased in all groups at M1. The 10% DMSO and control groups presented lower TNF- concentration in M24 and M48 in relation to M1. The 5% DMSO and control groups showed no difference in IL-10 concentration, but the ringer lactate and 10% DMSO groups showed higher concentration in M48. The DSMO 10% and ringer lactate groups presented lower HA concentration in M24. All groups showed increased concentration of CS after joint washes. There was no difference in joint pain evaluation, oxidative burst analysis and urea concentration. The different groups showed similarity of behavior of cells and cytokines studied in the synovial fluid throughout the experiment, however the 10% DMSO group showed the fastest return near basal values. The results presented in this study allow us to conclude that in view of the need to perform joint washes, the use of 10% DMSO lactated ringer's solution is better than the use of 5% DMSO lactated ringer's solution. However, no treatment was able to demonstrate chondroprotective effect

ULTRASSONOGRAFIA DA ARTICULAÇÃO FEMOROTIBIOPATELAR DE OVINOS COM SINOVITE EXPERIMENTAL

A articulação femorotibiopatelar do ovino é complexa por possuir elementos ósseos e de tecidos moles, sendo frequentemente utilizada como modelo experimental no estudo de doenças dessa articulação em pacientes humanos. A ultrassonografia articular constitui importante técnica de diagnóstico de doenças articulares, entretanto, poucos estudos descrevem seu uso para avaliação de lesões da articulação do joelho em ovinos como modelo experimental. O objetivo desse estudo foi descrever os aspectos ultrassonográficos da articulação femorotibiopatelar de ovinos com sinovite experimental. Em doze ovinos foi induzida sinovite mediante aplicação intra-articular de lipopolissacarídeo de parede de E. coli, na articulação femorotibiopatelar direita, e avaliados por ultrassonografia às 12, 24, 48, 72 e 120 horas após a indução. Uma avaliação antes da indução foi realizada, para meios de controle. Foram utilizados nove acessos ecográficos para avaliação: região suprapatelar; compartimento femorotibial lateral; espaço infrapatelar; compartimento femorotibial medial; porção lateral do compartimento femoropatelar; porção medial do compartimento femoropatelar; região craniolateral; recesso tendinoso; e recesso supracondilar medial. Avaliou-se alterações no volume do fluido sinovial com expansão da cavidade articular, pregueamento da membrana sinovial e celularidade. A aplicação intra-articular de lipopolissacarídeo de E. coli resultou, em sete de nove posições, em sinais ecográficos de sinovite. Foram observadas alterações intra ou periarticulares ao exame do compartimento femorotibial medial, em 11 animais (91,7%), na região craniolateral, em 10 animais (83,34%), no recesso tendinoso, em 11 animais (91,7%); e no espaço infrapatelar, porções lateral e medial do compartimento femoropatelar e recesso supracondilar medial em todos os animais (100%). Na região suprapatelar e no compartimento femorotibial lateral, não foram encontradas alterações ecográficas. A avaliação ultrassonográfica foi eficaz na identificação de alterações sugestivas à sinovite na articulação femorotibiopatelar de ovinos induzida por lipopolissacarídeo. Os sinais de sinovite mais observados foram aumento de volume do fluido sinovial e pregueamento da membrana sinovial, predominantemente vistos às 12, 24 e 48 horas após infiltração.

The ovine stifle joint is complex and multiple bone and soft tissue elements comprise its anatomy. It is used as an experimental model for human stifle joint disease studies. Articular ultrasonography is an important diagnostic technique for articular diseases. However, there is a gap in the literature regarding ultrasound assessment of the ovine stifle joint as an experimental model. Thus, the purpose of this study was to describe sonographic changes of the ovine stifle joint undergone experimentally induced synovitis. Twelve ovine received intraarticular infusion of E. coli lipopolysaccharide in the right stifle joint to induce synovitis. Injected stifles were assessed by ultrasound at baseline and 12, 24, 48, 72 and 120 hours after intra-articular injection of lipopolysaccharide. Nine ultrasound positions were used to assess the stifle joint: suprapatelar area; lateral area of the femorotibial compartment; infrapatelar space; medial area of the femorotibial compartment; lateral femoropatelar compartment; medial femoropatelar compartment; craniolateral area; sheath of the origin of the extensor muscle tendons; and medial supracondilar recess. Stifle joint was evaluated for volume changes in the synovial fluid, thickness of the synovial membrane and cellularity. Intra-articular lipopolysaccharide injection yielded echographic changes in seven out of nine scanning positions at the ovine stifle joint. Changes were observed when the medial femorotibial compartment was evaluated in 11 animals (91.7%), in the craniolateral region, in 10 animals (83,34%), in the tendinous recess, in 11 animals (91.7%), and in the infrapatellar space, lateral and medial aspects of the femoropatellar compartments and medial supracondilar recess in all animals (100%). It was not observed alterations within the suprapatellar region and the lateral femorotibial compartment. Stifle joint ultrasound assessment was efficient for detection of intra-articular changes following infiltration with lipopolysaccharide in the ovine experimental model. The most observed signs were increase of the synovial fluid volume and thickening of the synovial membrane, 12, 24 and 48 hours after infiltration.

RESPOSTA DE ANTICORPOS À APLICAÇÃO INTRA-ARTICULAR DE CÉLULAS TRONCO MESENQUIMAIS ALOGÊNICAS EM EQUINOS

O transplante de células tronco mesenquimais (CTMs) em doenças articulares vem se demons-trando eficaz. O objetivo desse estudo foi avaliar a resposta imune de repetidas aplicações intra-articulares de CTMs alogênicas e a imunogenicidade destas, utilizando ensaios de microcitotoxici-dade para avaliar as respostas de anticorpos citotóxicos dependentes de complemento. Quinze equi-nos adultos foram distribuídos aleatoriamente entre três grupos. Seis animais no grupo ALO onde articulações hígidas receberam CTMs alogênicas, seis no grupo ALO LPS em que as articulações foram previamente inflamadas, pela indução experimental da sinovite com 0,5ng de LPS e três a-nimais no grupo AUTO que foi mantido como controle negativo e receberam CTMs autólogas. Fo-ram realizadas 2 aplicações na mesma articulação de células tronco mesenquimais derivadas de membrana sinovial com intervalo de 4 semanas. Foram colhidas amostras seriadas nos 3 dias após cada aplicação e a cada 7 dias por 8 semanas do líquido sinovial para análise e soro sanguíneo para os ensaios de microcitotoxicidade e exame ultrassonográfico para avaliar efusão articular através da distância entre a superfície do talus e a cápsula articular. Para análise estatística foi utilizado os tes-tes Two Way Repeated Measures ANOVA e teste Tukey's. Foi evidenciada uma reação inflamató-ria moderada pelo aumento da celularidade do líquido sinovial após as aplicações. Também, foi observado que após a segunda aplicação alogênica, as articulações apresentaram efusão até 28 dias após aplicação quando comparada às aplicações autólogas e em relação à primeira aplicação alogê-nica. Foi observada a produção de anticorpos citotóxicos a partir de 7 dias em 2 animais do grupo ALO atingindo pelo menos 80% de morte celular e no grupo ALO LPS 3 animais. No grupo AUTO não foi observada a produção de anticorpos citotóxicos. Portanto os resultados demostraram que as CTMs alogênicas foram capazes de desencadear respostas de anticorpos citotóxicos específicos contra as CTMs doadoras, além de elucidar o aumento do infiltrado celular nas articulações sinovi-ais, assim, as respostas imunes poderiam impactar negativamente na longevidade, na viabilidade e na eficácia celular sendo estes resultados relevantes para utilização das CTMs injetadas no ambiente articular. Desta forma, a terapia de CTMs alogênicas deve ser empregada com cautela, principal-mente em repetidas aplicações na mesma articulação, para assim se obter melhor potencial biológico desta terapia.

Transplantation of mesenchymal stem cells (MSCs) in joint diseases has been shown to be effec-tive. The objective of this study was to evaluate the immune response of repeated intra-articular applications of allogeneic MSCs and their immunogenicity using microcytotoxicity assays to evalu-ate complement dependent cytotoxic antibody responses. Fifteen adult horses were randomly as-signed to three groups. Six animals in the ALO group where healthy joints received allogeneic MSCs, six in the ALO LPS group in which the joints were previously inflamed, by the experimental induction of synovitis with 0.5ng of LPS and three animals in the AUTO group that was maintained as negative control and received Autologous MSCs. Two applications were performed in the same articulation of mesenchymal stem cells derived from synovial membrane with interval of 4 weeks. Serial samples were taken 3 days after each application and every 7 days for 8 weeks of synovial fluid for analysis and blood serum for the microcytotoxicity and ultrasound examination to evaluate joint effusion through the distance between the surface of the talus and the joint capsule. Two-way ANOVA and Turkey's test were used for statistical analysis. A moderate inflammatory reaction was evidenced by increased synovial fluid cellularity after the applications. Also, it was observed that after the second allogeneic application, the joints presented effusion until 28 days after application when compared to the autologous applications and in relation to the first allogeneic application. The production of cytotoxic antibodies was observed from 7 days in 2 animals of the ALO group reach-ing at least 80% of cell death and in the ALO LPS 3 animal group. In the AUTO group, the produc-tion of cytotoxic antibodies was not observed. Therefore the results demonstrated that the allogene-ic MSCs were capable of triggering specific cytotoxic antibody responses against the donor MSCs, in addition to elucidating the increase of the cellular infiltrate in the synovial joints, the immune responses could negatively impact longevity, viability and efficacy. These results are relevant for the use of MSCs injected in joint environment. Therefore allogeneic MSC therapy should be used with caution, especially in repeated applications in the same joint, in order to obtain a better biological potential of this therapy.

EFEITO ANALGÉSICO DO TRAMADOL VIA EPIDURAL EM SINOVITE INDUZIDA EM OVINOS

Este trabalho foi dividido em três capítulos, sendo o primeiro a revisão de literatura. Nos capítulos 2 e 3, objetivou-se estabelecer a dose de lipopolissacarídeo (LPS) de E. coli, administrada via intra-articular, capaz de desenvolver sinais de sinovite em ovinos sem desencadear sinais sistêmicos, para padronização de um modelo álgico para estudos de dor, e avaliar os efeitos analgésicos do tramadol, via epidural, após indução da sinovite experimental. No estudo descrito no capítulo 2, foram utilizados 14 ovinos machos, castrados, clinicamente saudáveis. O LPS foi diluído em PBS estéril e administrado no recesso medial da articulação femorotibiopatelar direita. Na fase 1 do estudo, administrou-se 0,5 mL de PBS isoladamente (n = 2) e contendo 0,5 (n = 2); 1,0 (n = 2); 1,5 (n = 2) e 2,0 ng de LPS (n = 2) por animal. Na segunda fase, administrou-se em quatro animais 0,3 mL das doses de 1,0 (n = 2) e 2,0 g de LPS (n = 2). Na fase 3, foram inoculadas as doses de 0,5 (n = 2) e 1,0 g (n = 2). O intervalo entre as fases foi de 30 dias. Realizaram-se aferições de parâmetros clínicos (FC, FR e TR), avaliação por escalas de claudicação, dor à flexão do membro e edema local, e exame ultrassonográfico da articulação. Os momentos de avaliação foram basal e uma, três, seis, nove, 12, 18, 24 e 48 horas após a administração do LPS. As doses testadas na fase 1 não produziram resposta homogênea e os sinais de sinovite foram sutis. Na fase 2, observou-se claudicação leve a moderada para todas as doses sem evidência de sinais sistêmicos. Os escores de claudicação mantiveram-se entre 1 e 2 (0-5) em 24 horas. O máximo de dor à flexão foi observado entre nove e doze horas (escore 3; 0-3). Alterações ultrassonográficas sugeriram efusão e celularidade. Na fase 3, a dose de 0,5 g produziu resposta clínica semelhante à 1,0 g. Os escores de claudicação e dor se assemelharam à fase anterior. Achados ultrassonográficos foram semelhantes ao anterior. A dose de 0,5 g foi considerada a mais adequada, por ser a menor dose testada, capaz de causar claudicação em todos os animais, sem gerar sinais sistêmicos da inflamação. No estudo descrito no capítulo 3, foram utilizados 12 ovinos machos, castrados, clinicamente saudáveis. A dose de 0,5 g de LPS foi inoculada no recesso medial da articulação femorotibiopatelar esquerda. Os animais foram divididos em grupo tratamento (GT), tratados com 2,0 mg/kg de tramadol via epidural, e grupo controle (GC), tratados com solução salina 0,9%, a cada seis horas, durante 24 horas. Avaliou-se as frequências cardíaca e respiratória, temperaturas retal e periférica, e determinou-se escores de claudicação, dor à flexão do membro e edema local, antes e uma, três, seis, nove, 12, 24 e 48 horas após a administração do LPS. Análises cinética e cinemática da marcha foram realizadas antes, seis e 24 horas após a administração do LPS. Os resultados das variáveis clínicas e biomecânicas foram submetidos à análise de variância (ANOVA) seguida de teste de Student-Newman-Keuls. Os resultados dos escores foram submetidos aos testes de Kruskall-Wallis e Friedman. Considerou-se nível de significância de 5%. Todos os animais apresentaram claudicação, com início três horas após a indução da sinovite e máxima resposta inflamatória ocorreu em seis horas. As escalas de claudicação e dor à flexão do membro sugeriram que o tratamento reduziu a intensidade da dor entre os grupos. Todavia, o tramadol não foi capaz de adiar o início dos sinais clínicos ou interferir em sua duração. Apenas os animais do GC pouparam o membro esquerdo ao apoiarem sobre as plataformas, seis horas após a administração do LPS, e observou-se mudança significativa no ângulo mínimo da articulação e da variação angular, evidenciando que o movimento de flexão do membro foi alterado pela sensação dolorosa. A remissão completa dos sinais ocorreu em até 48 horas. A administração de 2,0 mg kg-1 de tramadol, via epidural, promoveu analgesia em ovinos submetidos a sinovite experimental, diminuindo a intensidade da sensação dolorosa nos momentos de máxima resposta inflamatória.

Our study was divided into three chapters, the first being literature review. In chapters 2 and 3, we aimed to establish the dose of lipopolysaccharide (LPS) of E. coli, administered intra-articularly, capable of developing signs of synovitis in sheep without triggering systemic signals, to standardize a pain model, and to evaluate the analgesic effects of tramadol, via epidural, after induction of experimental synovitis. In the study described in Chapter 2, 14 male, castrated, clinically healthy sheep were used. The LPS was diluted in sterile PBS and administered into the medial recess of the right femorotibiopatellar joint. In phase 1, 0.5 ml of PBS was administered alone (n = 2) and containing 0.5 (n = 2); 1.0 (n = 2); 1.5 (n = 2) and 2.0 ng LPS (n = 2) per animal. In the second phase, 0.3 mL of the doses of 1.0 (n = 2) and 2.0 g of LPS (n = 2) were administered in four animals. In phase 3, doses of 0.5 (n = 2) and 1.0 g (n = 2) were administered. The interval between phases was 30 days. Clinical parameters (HR, RR and RT), lemeness scales, limb pain on flexion and local edema, and ultrasonographic examination of the joint were evaluated. Evaluation moments were baseline and one, three, six, nine, 12, 18, 24 and 48 hours after LPS administration. The doses tested in phase 1 did not produce a homogeneous response and the signs of synovitis were subtle. In stage 2, mild to moderate lameness was observed for all doses with no evidence of systemic signs. The claudication scores were maintained between 1 and 2 (0-5) in 24 hours. The maximum flexion pain was observed between nine and twelve hours (score 3; 0-3). Ultrasonographic changes suggested effusion and cellularity. In phase 3, the 0.5 g dose produced a clinical response similar to 1.0 g. The claudication and pain scores resembled the previous phase. Ultrasonographic findings were similar to the previous one. The dose of 0.5 g was considered the most adequate because it was the lowest dose tested, capable of causing lameness in all animals, without systemic signs of inflammation. In the study described in Chapter 3, 12 male, castrated, clinically healthy sheep were used. The dose of 0.5 g LPS was inoculated into the medial recess of the left femorotibiopatellar joint. The animals were divided into treatment group (GT), treated with 2.0 mg/kg of tramadol via epidural, and control group (CG), treated with 0.9% saline every 6 hours for 24 hours. Heart and respiratory rates, rectal and peripheral temperatures were assessed, and limb lameness, limb pain on flexion and local edema were determined before and one, three, six, nine, 12, 24 and 48 hours after administration of the LPS. Kinetic and kinematic gait analyzes were performed before, six and 24 hours after LPS administration. The results of the clinical and biomechanical variables were submitted to analysis of variance (ANOVA) followed by Student-Newman-Keuls test. The results of the scores were submitted to the Kruskall-Wallis and Friedman tests. A significance level of 5% was considered. All animals presented lameness, beginning three hours after induction of synovitis and maximal inflammatory response occurred within six hours. The limb lameness and pain on flexion scales suggested that the treatment reduced the intensity of pain between the groups. However, tramadol has not been able to postpone the onset of clinical signs or interfere with its duration. Only animals GC spared the left member while bearing weight on the platform, six hours after LPS administration, and there was significant change in the minimum joint angle and angular displacement, indicating that the limb flexion movement was changed by pain. Complete remission of signs occurred within 48 hours. Administration of tramadol 2.0 mg/kg, epidural, promoted analgesia in sheep under experimental synovitis, decreasing the intensity of the pain sensation at times of maximum inflammatory response.