Acute intoxication with single oral dose of ochratoxin A (OTA) causes leukopenia, heteropenia, lymphopenia and lymphoid depletion in the bursa of Fabricius in broiler chicks / Intoxicação aguda com dose oral única de ocratoxina A (OTA) causa leucopenia, heteropenia, linfopenia e depleção linfoide na bolsa de Fabricius em pintainhos de corte

Ochratoxin A (OTA) is a mycotoxin produced by species of Penicillium and Aspergillus, agricultural product contaminants. Chronic and sub-chronic OTA intoxication by chickens ingesting contaminated feed, leads to health damages due to its hepatotoxic, nephrotoxic, cytotoxic, immunotoxic, gastrotoxic, and possibly carcinogenic effects. As there are few data on acute intoxication, the present study evaluated the effects of a single acute OTA intoxication dose on immunological and hematological parameters in chicks. Sixteen one-day-old chicks were used, separated into two groups (n=8). A single dose of OTA (1400 µg kg-1 body weight) was administered, via gavage, for the OTA group and one dose of sterile PBS for the control group. On the 13th day, blood samples were collected to assess hematological and biochemical parameters, and on the 14th day, euthanasia and collection of lymphoid organs were performed. The animals of the OTA group demonstrated a significant decrease in total circulating leukocytes (p<0.001) with heteropenia (p<0.001) and lymphopenia (p=0.023), decrease hematocrit (p=0.020), hemoglobin (p=0.032), and plasma IgA (p =0.044), and increased plasma uric acid level (p=0.045), in relation to the control group. In addition, the animals intoxicated with OTA showed depletion of lymphoid cells in the bursa of Fabricius (p=0.016), but not in the thymus or spleen (p>0.05), compared to the control. For the other parameters: total plasma proteins, plasma IgY levels, and anti-Newcastle Disease Virus (NDV) vaccine titers from matrices, there were no significant differences between the analyzed groups (p>0.05), although there was a worsening tendency in contaminated animals. In conclusion, even a single acute OTA intoxication at a high dose, leads to the suppression of the systemic immune response, also affecting some hematological or biochemical parameters in chicks.

Ocratoxina A (OTA) é uma micotoxina produzida por espécies de Penicillium e Aspergillus, contaminantes de produtos agrícolas. Intoxicação crônica e subcrônica por OTA em frangos que ingerem ração contaminada, levam à danos à saúde devido aos seus efeitos hepatotóxicos, nefrotóxicos, citotóxicos, imunotóxicos, gastrotóxicos e possivelmente carcinogênicos. Como há poucos dados sobre intoxicação aguda, o presente estudo avaliou os efeitos de uma dose única de intoxicação aguda por OTA sobre parâmetros imunológicos e hematológicos em pintainhos. Foram utilizados 16 pintainhos de um dia de idade, separados em dois grupos (n=8). Uma dose única de OTA (1400 µg kg-1 de peso corporal) foi administrada, via gavagem, para o grupo OTA e uma dose de PBS estéril para o grupo controle. No 13º dia foram coletadas amostras de sangue para avaliação dos parâmetros hematológicos e bioquímicos, e no 14º dia foi realizada a eutanásia e coleta de órgãos linfoides. Os animais do grupo OTA demonstraram diminuição significativa do total de leucócitos circulantes (p<0,001) com heteropenia (p<0,001) e linfopenia (p=0,023), diminuição do hematócrito (p=0,020), hemoglobina (p=0,032) e IgA plasmática (p=0,044) e aumento do nível plasmático de ácido úrico (p=0,045), em relação ao grupo controle. Além disso, os animais intoxicados com OTA apresentaram depleção de células linfóides na bolsa de Fabricius (p=0,016), mas não no timo ou baço (p>0,05), em relação ao controle. Para os demais parâmetros: proteínas totais do plasma, níveis plasmáticos de IgY e títulos de vacinas contra o Vírus da Doença de Newcastle (NDV) das matrizes, não houve diferenças significativas entre os grupos analisados (p>0,05), embora tenha havido uma tendência de piora nos animais contaminados. Em conclusão, mesmo uma intoxicação única aguda por OTA em alta dose, leva à supressão da resposta imune sistêmica, afetando também alguns parâmetros hematológicos ou bioquímicos em pintainhos.

Hepatoprotective effect of Zinc and Magnesium against subchronicCadmium toxicity on biochemical, histopathological andneurobehavioral parameters in Wistar rats

The aim of this study was carried out to investigate the possible hepato protective effect of Zinc and Magnesium against subchronic cadmium toxicity on biochemical, histopathological and neurobehavioral parameters in Wistar rats during 90 days. Fourty Wistar rats, were randomly divided in four experimental group: 1, control only water; 2, water and oral administration (Cd); 3, (Cd+Mg) in water oral administration; 4, (Cd+Zn) in water oral administration. Zinc and Magnesium was used to reduce hepatoxicity and neurobehavioral disorders induced by Cadmium in Wistar rats. The Cd-Zn and Cd-Mg groups received 10 mg/kg of ZnCl2, 10 mg/kg of MgCl2 added to drinking water. The Cd group received 15mg / kg of CdCl2. Blood glucose level and body weight were measured every day. According to the results, which have been obtained. There was a reduction in body weight gain due to Cd group and an increase liver weight. The results indicated also changes in biochemical parameters, which are characterized by an increase in serum glucose, serum urea, serum creatinine, of animals contaminated with cadmium compared to the control animals. However, the supplementation of (Zn) and Mg combination improved some but not all the previous parameters. Moreover, the findings showed variation in hematological parameters of Cd treated animals. In other word, there was a rise in number of white cells, and reduction of red cells counts, hemoglobin concentration and hematocrit percentage, but all these parameters returned approximately to their normal values after combined Zn and Mg addition. The neurobehavioral test shows an increase in the number of cells crossed, the number of straightening in the test. Open field in the group exposed to Cd resulting in locomotors hyperactivity compared to the control and it is minimal in other groups treated with Zn and Mg...(AU)

Hepatoprotective effect of Zinc and Magnesium against subchronicCadmium toxicity on biochemical, histopathological andneurobehavioral parameters in Wistar rats

The aim of this study was carried out to investigate the possible hepato protective effect of Zinc and Magnesium against subchronic cadmium toxicity on biochemical, histopathological and neurobehavioral parameters in Wistar rats during 90 days. Fourty Wistar rats, were randomly divided in four experimental group: 1, control only water; 2, water and oral administration (Cd); 3, (Cd+Mg) in water oral administration; 4, (Cd+Zn) in water oral administration. Zinc and Magnesium was used to reduce hepatoxicity and neurobehavioral disorders induced by Cadmium in Wistar rats. The Cd-Zn and Cd-Mg groups received 10 mg/kg of ZnCl2, 10 mg/kg of MgCl2 added to drinking water. The Cd group received 15mg / kg of CdCl2. Blood glucose level and body weight were measured every day. According to the results, which have been obtained. There was a reduction in body weight gain due to Cd group and an increase liver weight. The results indicated also changes in biochemical parameters, which are characterized by an increase in serum glucose, serum urea, serum creatinine, of animals contaminated with cadmium compared to the control animals. However, the supplementation of (Zn) and Mg combination improved some but not all the previous parameters. Moreover, the findings showed variation in hematological parameters of Cd treated animals. In other word, there was a rise in number of white cells, and reduction of red cells counts, hemoglobin concentration and hematocrit percentage, but all these parameters returned approximately to their normal values after combined Zn and Mg addition. The neurobehavioral test shows an increase in the number of cells crossed, the number of straightening in the test. Open field in the group exposed to Cd resulting in locomotors hyperactivity compared to the control and it is minimal in other groups treated with Zn and Mg...

Anthelmintic activity of nanoencapsulated carvacryl acetate against gastrointestinal nematodes of sheep and its toxicity in rodents / Atividade anti-helmíntica do acetato de carvacrila nanoencapsulado sobre nematoides gastrintestinais de ovinos e toxicidade em roedores

The objective of this study was to evaluate the efficacy of carvacryl acetate (CVA) and nanoencapsulated CVA (nCVA) on gastrointestinal nematodes of sheep. The CVA was nanoencapsulated with chitosan/gum arabic and the efficacy of nanoencapsulation (EE), yield, zeta potential, nanoparticle morphology and release kinetics at pH 3 and 8 were analyzed. Acute and subchronic toxicity were evaluated in rodents and reduction of egg counts in the faeces (FECRT) of sheep. The sheep were divided into four groups (n = 10): G1, 250 mg/kg CVA; G2, 250 mg/kg nCVA; G3, polymer matrix and G4: 2.5 mg/kg monepantel. EE and nCVA yield were 65% and 57%, respectively. The morphology of the nanoparticles was spherical, size (810.6±286.7 nm), zeta potential in pH 3.2 (+18.3 mV) and the 50% release of CVA at pHs 3 and 8 occurred at 200 and 10 h, respectively. nCVA showed LD50 of 2,609 mg/kg. CVA, nCVA and monepantel reduced the number of eggs per gram of faeces (epg) by 57.7%, 51.1% and 97.7%, respectively. The epg of sheep treated with CVA and nCVA did not differ from the negative control (P>0.05). Nanoencapsulation reduced the toxicity of CVA; however, nCVA and CVA presented similar results in the FECRT.(AU)

O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficácia do acetato de carvacrila (ACV) e do ACV nanoencapsulado (nACV) sobre nematóides gastrintestinais de ovinos. O ACV foi nanoencapsulado com quitosana/goma arábica e foi analisada a eficácia de nanoencapsulamento (EE), o rendimento, potencial zeta, morfologia das nanopartículas e cinética de liberação em pH 3 e 8. Foram avaliadas as toxicidades aguda e subcrônica em roedores e a redução da contagem de ovos nas fezes (RCOF) de ovinos. Os ovinos foram divididos em quatro grupos (n = 10): G1, 250 mg/kg ACV; G2, 250 mg/kg de nACV; G3, matriz polimérica e G4: 2,5 mg/kg de monepantel. A EE e o rendimento de nACV foram de 65% e 57%, respectivamente. A morfologia das nanopartículas foi esférica, tamanho (810,6±286,7 nm), potencial zeta no pH 3,2 (+18,3 mV) e a liberação de 50% de CVA nos pHs 3 e 8 ocorreu às 200 e 10 h, respectivamente. nACV apresentou DL50 de 2.609 mg/kg. ACV, nACV e o monepantel reduziram a contagem de ovos por grama de fezes (opg) em 57,7%, 51,1% e 97,7%, respectivamente. A contagem de opg de ovelhas tratadas com ACV e nCVA não diferiu do controle negativo (P>0,05). O nanoencapsulamento reduziu a toxicidade do AVC; no entanto, nACV e ACV apresentaram resultados semelhantes na RCOF.(AU)

Óleos essenciais e seus compostos bioativos no controle de nematoides gastrintestinais de pequenos ruminantes / Essential oils and their bioactive compounds in the control of gastrointestinal nematodes of small ruminants

Background: Gastrointestinal nematodes are one of the major health and economic problem of sheep and goats in the world. The control of these nematodes is carried out conventionally with synthetic anthelminths, which favored the selection of gastrointestinal nematode (GIN) populations multiresistant to anthelmintics. The emergence of anthelmintic resistance has stimulated the search for new alternatives to control small ruminant GIN, standing out the use of plants and their bioactives compounds, such as essential oils (EO). The objective of this review was to present the main characteristics and anthelmintic activity of EO, their isolated compounds and drug delivery systems in the control of GIN.Review: Essential oils are a complex blend of bioactive compounds with volatile, lipophilic, usually odoriferous and liquid substances. EO are composed of terpenes, terpenoids, aromatic and aliphatic constituents. EO has various pharmacological activities of interest in preventive veterinary medicine such as antibacterials, antifungals, anticoccicids, insecticides and anthelmintics. In vitro and in vivo tests are used to validate the anthelmintic activity of EO on GIN. In vitro tests are low cost screening tests that allow the evaluation of the anthelmintic activity of a large amount of bioactive compounds on eggs, first (L1) and third stage larvae (L3), and adult nematodes. The antiparasitic effect of EO is related to its main compound or to the interaction of the compounds. These bioactive compounds penetrate the cuticle of the nematodes by transcuticular diffusion, altering the mechanisms of locomotion, besides causing cuticular lesions. Following in vitro evaluation, the acute and sub-chronic toxicity test should be performed to assess the toxicity of the bioactive compounds and to define the dose to be used in in vivo tests.[...]

Óleos essenciais e seus compostos bioativos no controle de nematoides gastrintestinais de pequenos ruminantes / Essential oils and their bioactive compounds in the control of gastrointestinal nematodes of small ruminants

Background: Gastrointestinal nematodes are one of the major health and economic problem of sheep and goats in the world. The control of these nematodes is carried out conventionally with synthetic anthelminths, which favored the selection of gastrointestinal nematode (GIN) populations multiresistant to anthelmintics. The emergence of anthelmintic resistance has stimulated the search for new alternatives to control small ruminant GIN, standing out the use of plants and their bioactives compounds, such as essential oils (EO). The objective of this review was to present the main characteristics and anthelmintic activity of EO, their isolated compounds and drug delivery systems in the control of GIN.Review: Essential oils are a complex blend of bioactive compounds with volatile, lipophilic, usually odoriferous and liquid substances. EO are composed of terpenes, terpenoids, aromatic and aliphatic constituents. EO has various pharmacological activities of interest in preventive veterinary medicine such as antibacterials, antifungals, anticoccicids, insecticides and anthelmintics. In vitro and in vivo tests are used to validate the anthelmintic activity of EO on GIN. In vitro tests are low cost screening tests that allow the evaluation of the anthelmintic activity of a large amount of bioactive compounds on eggs, first (L1) and third stage larvae (L3), and adult nematodes. The antiparasitic effect of EO is related to its main compound or to the interaction of the compounds. These bioactive compounds penetrate the cuticle of the nematodes by transcuticular diffusion, altering the mechanisms of locomotion, besides causing cuticular lesions. Following in vitro evaluation, the acute and sub-chronic toxicity test should be performed to assess the toxicity of the bioactive compounds and to define the dose to be used in in vivo tests.[...](AU)

Toxicity of nitrite on shrimp Litopenaeus vannamei reared in clear water and biofloc systems / Toxicidade do nitrito para o camarão Litopenaeus vannamei cultivado em sistemas de água clara e bioflocos

This work aimed to evaluate the toxicity of N-nitrite on growth, survival and the amount of total hemocytes in the hemolymph of the shrimp juveniles Litopenaeus vannamei (1.60±0.06 g) reared in different concentrations of N-nitrite and two culture systems. The shrimps were distributed into 24 experimental units (area of 0.20 m2 and useful volume of 30 L) at a density of 75 shrimp m- 2 in a completely randomized design with 2x2 factorial scheme, using four nitrite-N concentrations (0- Control, 10, 20 and 40 mg NO2-N L-1) and two culture systems (clear water and biofloc). Juveniles of L. vannamei were fed with commercial feed (35% crude protein). The NO2-N concentrations influenced significantly (P < 0.05) body weight (1.71 to 3.36 g), survival (40.7 to 96.3%) and specific growth rate (0.15 to 2.42% day-1). The interaction between the N-nitrite concentrations and culture systems did not affect significantly (P >=0.05) the total amount of hemocytes. Thus, it is possible to culture the L. vannamei shrimp at concentrations of 10 and 20 mg N-NO2 L-1 for a period of 30 days without compromising growth and survival.(AU)

O objetivo deste trabalho foi avaliar a toxicidade do nitrito sobre o crescimento, sobrevivência e quantidade de hemócitos totais na hemolinfa de juvenis do camarão Litopenaeus vannamei (1,60±0,06 g) submetidos a diferentes concentrações de N-nitrito e dois sistemas de cultivo. Os camarões foram distribuídos em 24 unidades experimentais (área de 0,20 m2 e volume útil de 30 L), numa densidade de 75 camarões m- 2, em um delineamento experimental inteiramente casualizado, em esquema fatorial 2x2, com quatro concentrações de N-nitrito (0-Controle, 10, 20 e 40 mg N-NO2 L-1) e dois sistemas de cultivo (água clara e bioflocos). Os juvenis de L. vannamei foram alimentados com ração comercial (35% proteína bruta). As concentrações de N-NO2 influenciaram significativamente (P <0,05) o peso final (1,71 a 3,36 g), a sobrevivência (40,7 a 96,3 %) e a taxa de crescimento específico (0,15 a 2,42 % dia-1). A interação entre as concentrações de N-nitrito e os sistemas de cultivo não influenciaram significativamente (P >=0,05) a quantidade total de hemócitos. Desta forma, é possível cultivar o camarão L. vannamei em concentrações de até 20 mg N-NO2 L-1 por um período de 30 dias sem comprometer o crescimento e a sobrevivência.(AU)

Toxicity of nitrite on shrimp Litopenaeus vannamei reared in clear water and biofloc systems / Toxicidade do nitrito para o camarão Litopenaeus vannamei cultivado em sistemas de água clara e bioflocos

This work aimed to evaluate the toxicity of N-nitrite on growth, survival and the amount of total hemocytes in the hemolymph of the shrimp juveniles Litopenaeus vannamei (1.60±0.06 g) reared in different concentrations of N-nitrite and two culture systems. The shrimps were distributed into 24 experimental units (area of 0.20 m2 and useful volume of 30 L) at a density of 75 shrimp m- 2 in a completely randomized design with 2x2 factorial scheme, using four nitrite-N concentrations (0- Control, 10, 20 and 40 mg NO2-N L-1) and two culture systems (clear water and biofloc). Juveniles of L. vannamei were fed with commercial feed (35% crude protein). The NO2-N concentrations influenced significantly (P =0.05) the total amount of hemocytes. Thus, it is possible to culture the L. vannamei shrimp at concentrations of 10 and 20 mg N-NO2 L-1 for a period of 30 days without compromising growth and survival.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a toxicidade do nitrito sobre o crescimento, sobrevivência e quantidade de hemócitos totais na hemolinfa de juvenis do camarão Litopenaeus vannamei (1,60±0,06 g) submetidos a diferentes concentrações de N-nitrito e dois sistemas de cultivo. Os camarões foram distribuídos em 24 unidades experimentais (área de 0,20 m2 e volume útil de 30 L), numa densidade de 75 camarões m- 2, em um delineamento experimental inteiramente casualizado, em esquema fatorial 2x2, com quatro concentrações de N-nitrito (0-Controle, 10, 20 e 40 mg N-NO2 L-1) e dois sistemas de cultivo (água clara e bioflocos). Os juvenis de L. vannamei foram alimentados com ração comercial (35% proteína bruta). As concentrações de N-NO2 influenciaram significativamente (P =0,05) a quantidade total de hemócitos. Desta forma, é possível cultivar o camarão L. vannamei em concentrações de até 20 mg N-NO2 L-1 por um período de 30 dias sem comprometer o crescimento e a sobrevivência.

Estudo histopatológico dos órgãos reprodutivos de ratos tratados com extrato etanólico de Simarouba versicolor em ensaio de toxicidade sub-crônica / Histopathological study of the reproductive organs of rats treated with ethanol extract of Simarouba versicolor in test sub-chronic toxicity

The aim of this study was to evaluate the reproductive organs on the effect of Simarouba versicolorethanol extract (EEOH-Sv) at a dose of 10mg / kg administered for 60 days / VO. The testes, epididymis,prostate and seminal vesicles were sectioned and placed in vials Boan solution for 24 hours and then preservedin alcohol at 70%. Histopathology of organs were dehydrated in xylol, impregnated and embedded in paraffin.Subsequently cut in the microtome at a thickness of 3 m and subjected to hematoxylin-eosin. The results of thehistopathology of the testis was observed that the EEOH-Sv caused concretions in 100% of animals evaluatedand 20% of the animals showed sharp associated with degeneration of the seminiferous tubules. In theepididymis was observed in 40% epithelial thickening, and there was 100% of benign prostatic hypertrophyassociated in 20% of animals inflammatory infiltrate. Thus, it is concluded that-Sv EEOH was toxic to thisorgans except the seminal vesicle.(AU)

Estudo histopatológico dos órgãos reprodutivos de ratos tratados com extrato etanólico de Simarouba versicolor em ensaio de toxicidade sub-crônica / Histopathological study of the reproductive organs of rats treated with ethanol extract of Simarouba versicolor in test sub-chronic toxicity

The aim of this study was to evaluate the reproductive organs on the effect of Simarouba versicolorethanol extract (EEOH-Sv) at a dose of 10mg / kg administered for 60 days / VO. The testes, epididymis,prostate and seminal vesicles were sectioned and placed in vials Boan solution for 24 hours and then preservedin alcohol at 70%. Histopathology of organs were dehydrated in xylol, impregnated and embedded in paraffin.Subsequently cut in the microtome at a thickness of 3 m and subjected to hematoxylin-eosin. The results of thehistopathology of the testis was observed that the EEOH-Sv caused concretions in 100% of animals evaluatedand 20% of the animals showed sharp associated with degeneration of the seminiferous tubules. In theepididymis was observed in 40% epithelial thickening, and there was 100% of benign prostatic hypertrophyassociated in 20% of animals inflammatory infiltrate. Thus, it is concluded that-Sv EEOH was toxic to thisorgans except the seminal vesicle.

EFEITO IN VITRO DO COMPLEXO DE INCLUSÃO DE -CARIOFILENO EM -CICLODEXTRINA SOBRE Leishmania infantum E SEGURANÇA TOXICOLÓGICA EM ROEDORES

O tratamento da leishmaniose visceral (LV) com drogas sintéticas nem sempre é efetivo devido à alta toxicidade que apresenta. -cariofileno (BCP), um sesquiterpeno natural já demonstrou ter efeito anti-Leishmania spp. Trata-se de um óleo volátil e hidrofóbico, o que diminui a sua biodisponibilidade. A formação de complexos de inclusão com -ciclodextrina (-CD) é uma técnica que tem sido amplamente utilizada para aumentar a solubilidade aquosa de óleos vegetais e melhorar sua estabilidade. O objetivo deste trabalho foi desenvolver complexos de inclusão de BCP em -CD (BCP/-CD) e avaliar in silico a sua adsorção para testar sua atividade contra Leishmania infantum e avaliar a sua toxicidade, genotoxicidade e mutagenicidade em roedores. BCP/-CD foram preparados em razões molares de 1:2 (BCP: -CD) por spray dryer. Os complexos formados foram caracterizados usando métodos físico-químicos apropriados. O ensaio in silico foi usado para prever a adsorção de BCP quando inserido em -CD. A atividade contra promastigotas foi testada in vitro usando resazurina (Alamar Blue®), a citotoxicidade foi determinada usando a linhagem de macrófagos J774. Os possíveis efeitos tóxicos in vivo foram avaliados por meio de toxicidade aguda e subcrônica e os efeitos genototóxicos e mutagênicos foram avaliados por meio dos testes de micronúcleo em reticulócitos e cometa alcalino. Os complexos BCP/-CD apresentaram forma de blocos, tamanho médio de 141,5 nm, índice de polidispersão de 0,255 e eficiência de encapsulamento de 19,2%. Os ensaios in silico previram uma ligação não covalante relativamente forte de BCP/-CD, com elevada capacidade de -CD para nanoencapsular BCP. BCP/-CD apresentou IC50 de 34,19 g/mL sobre promastigotas demontrando ser menos efetivo que BCP livre (IC50 de 7.65 g/mL), provavelmente por não ter liberado BCP da cavidade de -CD. -CD foi atóxica sobre macrófagos J774 podendo ser utilizado como carreador para BCP, que apresentou certa toxicidade para estas células (IC50 de 176.7 g/mL). Porém este efeito tóxico foi minimizado ao ser encapsulado em -CD, já que o complexo BCP/-CD apresentou IC50 de 249,1 g/mL. A DL50 de BCP/-CD foi superior a 5.000 mg/kg, sendo considerado não tóxico. A administração oral de 125 mg/kg de BCP/-CD durante 28 dias foi bem tolerada por ratos Wistar conforme evidenciado pela ausência de alterações importantes nos parâmetros hematológicos, bioquímica sérica e histopatologia. Não foram observados qualquer efeito genotóxico e mutagênico induzidos por BCP/-CD. Estes resultados indicam que a atividade de BCP/-CD sobre promastigotas não foi efetiva, porém para células J774 não houve toxicidade, podendo ser testado sobre amastigotas, visto que um dos principais entraves é a dificuldade de permitir que a nanopartícula internalize nos macrófagos para atingir o fagolisossomo e assim agir contra o parasito. BCP/-CD é seguro e não tóxico in vitro sobre macrófagos J774 e quando testados em animais de experimentação.

The treatment of visceral leishmaniasis (VL) with synthetic drugs is not always effective due to the high toxicity it presents. -caryophyllene (BCP), a natural sesquiterpene has already been shown to have an anti-Leishmania effect. However, it is volatile and hydrophobic oil, which decreases its bioavailability. The formation of inclusion complexes with -cyclodextrin (-CD) is a technique that has been widely used to increase the aqueous solubility of vegetable oils and improve their stability. The aim of this work was to develop complexes of inclusion of BCP in -CD (BCP/-CD) and to evaluate its adsorption in silico to test its activity against Leishmania infantum and to evaluate its toxicity, genotoxicity and mutagenicity in rodents. BCP/-CD were prepared in molar ratios of 1:2 (BCP:-CD) by spray dryer. The complexes formed were characterized using appropriate physicochemical methods. The in silico test was used to predict the adsorption of BCP when inserted in -CD. The activity against promastigotes was tested in vitro using resazurin (Alamar Blue®), cytotoxicity was determined using the macrophage lineage J774. Possible toxic effects in vivo were assessed using acute and subchronic toxicity and the genototoxic and mutagenic effects were evaluated by means of micronucleus tests on reticulocytes and alkaline comet. The BCP/-CD complexes had a block shape, an average size of 141.5 nm, a polydispersity index of 0.255 and an encapsulation efficiency of 19.2%. In silico assays predicted a relatively strong non-covalent bond of BCP/-CD, with a high capacity of -CD for nanoencapsulate BCP. BCP/-CD showed an IC50 of 34.19 g/mL on promastigotes, demonstrating to be less effective than free BCP (IC50 of 7.65 g/mL), probably because the release of BCP from the -CD cavity did not occur. -CD was not toxic on J774 macrophages and can be used as a carrier for BCP, which presented a certain toxicity for these cells (IC50 176.7 g/mL). However its toxic effect was minimized when it was encapsulated in -CD, since the BCP/- CD complex had an IC50 of 249.1 g/mL. The LD50 of BCP/-CD was greater than 5,000 mg/kg, being considered non-toxic. Oral administration of 125 mg/kg BCP/-CD for 28 days was well tolerated by Wistar rats as evidenced by the absence of major changes in hematological parameters, serum biochemistry and histopathology. No genotoxic and mutagenic effects induced by BCP/-CD were observed. These results indicate that the activity of BCP/-CD on promastigotes was not effective, however for J774 cells there was no toxicity, and it can be tested on amastigotes, since one of the main obstacles is the difficulty of allowing the nanoparticle to internalize in the macrophages for reach the phagolysome and thus act against the parasite. BCP/-CD is safe and non-toxic in vitro on J774 macrophages and when tested on experimental animals.

DANO CARDIOVASCULAR ASSOCIADO À EXPOSIÇÃO SUBCRÔNICA INALATÓRIA E ORAL AO HERBICIDA GLIFOSATO

DANO CARDIOVASCULAR ASSOCIADO À EXPOSIÇÃO SUBCRÔNICA INALATÓRIA E ORAL AO HERBICIDA GLIFOSATO Introdução: Milhões de agricultores sofrem envenenamento e morte em países em desenvolvimento, e a exposição ocupacional e o suicídio tornam a toxicidade ao glifosato uma preocupação mundial. Objetivo: Avaliar os efeitos cardiovasculares da exposição subcrônica por via oral e inalatória ao herbicida glifosato em ratos. Material e métodos: Foram utilizados 80 ratos Wistar albinos divididos em 8 grupos (5 machos e 5 fêmeas/grupo): IC: nebulização com solução de cloreto de sódio (NaCl) a 0,9%; OC: ração nebulizada com NaCl 0,9%; LGI: nebulização com 3,71 x 10-3 gramas de ingrediente ativo por hectare (g.i.a/ha) de glifosato; LGO: ração nebulizada com 3,71 x 10-3 g.i.a/ha de glifosato; MGI: nebulização com 6,19 x 10-3 g.i.a/ha de glifosato; MGO: ração nebulizada com 6,19 x 10-3 g.i.a/ha de glifosato; HGI: nebulização com 9,28 x 10-3 g.i.a/ha de glifosato; HGO: ração nebulizada com 9,28 x 10-3 g.i.a/ha de glifosato. Após exposição de 75 dias, os animais foram eutanasiados e coletaram-se fragmentos da aorta e o coração para análise histopatológica. Resultados: Estrias de colesterol foram observadas na maioria dos animais expostos ao glifosato e foram mais incidentes nos ratos machos, independente da via de exposição (p<0,05). Não houve diferença nas medidas da espessura e na densidade de colágeno dos ventrículos direito e esquerdo em nenhum dos grupos avaliados (p>0,05). Conclusão: Nosso estudo sugere que o glifosato apresenta potencial aterogênico, independente da via de exposição. Assim, é necessário cuidado na aplicação de glifosato em lavouras e jardins, uma vez que seu uso pode causar risco à saúde.

Introduction: Millions of farmers suffer poisoning and death in developing countries, and occupational exposure and suicide make glyphosate toxicity a worldwide concern. Objective: To assess the cardiovascular effects of subchronic oral and inhalation exposure to the herbicide glyphosate in rats. Material and methods: 80 albino Wistar rats were used, divided into 8 groups (5 males and 5 females / group): CI: nebulization with sodium chloride solution (NaCl); OC: nebulized feed with NaCl; LGI: nebulization with 3.71 x 10-3 grams of active ingredient per hectare (g.i.a / ha) of glyphosate; LGO: nebulized feed with 3.71 x 10-3 g.i.a / ha of glyphosate; MGI: nebulization with 6.19 x 10-3 g.i.a / ha of glyphosate; MGO: nebulized feed with 6.19 x 10-3 g.i.a / ha of glyphosate; HGI: nebulization with 9.28 x 10-3 g.i.a / ha of glyphosate; HGO: nebulized feed with 9.28 x 10-3 g.i.a / ha of glyphosate. After 75 days of exposure, the animals were euthanized and fragments of the aorta and the heart were collected for histopathological analysis. Results: Cholesterol streaks were observed in most animals exposed to glyphosate and were more prevalent in male rats, regardless of the route of exposure (p <0.05). There was no difference in the thickness and collagen density measurements of the right and left ventricles in any of the groups evaluated (p> 0.05). Conclusion: Our study suggests that glyphosate has atherogenic potential, regardless of the route of exposure. Thus, it is necessary to be careful when applying glyphosate to crops and gardens, since its use may cause health risks.

COMPOSIÇÃO QUÍMICA, SEGURANÇA TOXICOLÓGICA E ATIVIDADE ANTI-HELMÍNTICA DO LÁTEX DE Calotropis procera (Aiton) W.T. Aiton (APOCYNACEAE) SOBRE NEMATOIDES GASTRINTESTINAIS DE OVINOS

As infecções por nematoides gastrintestinais (NGI) são um dos principais entraves à ovinocaprinocultura mundial. O controle dessas infecções utilizando anti-helmínticos sintéticos tem colaborado com a seleção de populações de nematoides multirresistentes. Assim, a busca por alternativas de controle torna-se necessária, destacando-se a fitoterapia. Diversas plantas, como a Calotropis procera, são utilizadas tradicionalmente para fins anti-helmínticos, o que estimula a validação científica deste efeito e a investigação de sua segurança toxicológica. Dessa forma, objetivou-se avaliar a composição química, o potencial anti-helmíntico e a segurança toxicológica do látex de C. procera (LCp). Para tanto, foram obtidas três frações distintas de LCp por meio de processos baseados em centrifugação e liofilização (podendo incluir etapa de diálise): fração precipitada denominada LCp-ppt; fração sobrenadante rica em metabólitos secundários, denominada inicialmente como LNP (Látex Não Proteico) e depois como LCp-fs (Fração solúvel de LCp); e fração sobrenadante rica em proteínas, denominada PLCp (proteínas do látex de C. procera). As frações de LCp foram submetidas a análises químicas e/ou bioquímicas como Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE), Espectroscopia no Infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR), dosagem de proteínas e verificação da atividade enzimática. LCp-fs e PLCp foram submetidos à testes in vitro para verificar seu efeito sobre ovos, larvas e o nematoide adulto de Haemonchus contortus (Teste de Motilidade dos Nematoides Adultos - TMNA). Parasitas coletados no TMNA foram submetidos à microscopia eletrônica de varredura (MEV) e de transmissão (MET) para verificar alterações em sua ultraestrutura. A segurança toxicológica de LCp-fs e PLCp foi verificada em testes de toxicidade aguda. Ensaio de toxicidade subcrônica foi também realizado para LCp-fs. A atividade anti-helmíntica de LCp-fs e PLCp foi avaliada em ovinos, usando o teste de eficácia anti-helmíntica controlado (TEAC) e o teste de redução da contagem de ovos nas fezes (TRECOF), respectivamente. Nematoides obtidos no TEAC foram submetidos à MET. Testes fitoquímicos em LCp-fs indicaram a presença de fenóis, esteroides, alcaloides e cardenolídeos, e a presença dos compostos ácido gálico e quercetina foi caracterizada pela CLAE. O conteúdo de proteínas em PLCp foi de 43,1 ± 1,1 mg/mL e em LCp-fs foi de 7,7 ± 0,3 mg/mL. LCp-fs e PLCp (8 mg/mL) apresentaram média de inibição da eclosão de ovos de 90% e 85%. A inibição média do desenvolvimento larvar foi de 95% e 88% para LCp-sf e PLCp (1 mg/mL). No TMNA, LCp-sf e PLCp inibiram a motilidade de 100% dos nematoides após 6 e 24 h, respectivamente, e foram observadas alterações na ultraestrutura desses nematoides. A administração de dose única de LCp-fs (DL50 = 4031.5 mg/kg) ou PLCp (DL50 > 5000 mg/kg) em camundongos apresentou segurança. Sinais de toxicidade foram observados em ratos tratados por 30 dias com LCp-fs. Ovinos tratados com LCp-fs ou PLCp apresentaram redução de 30% na carga de H. contortus e de 69% de ovos de NGI nas fezes, respectivamente. Conclui-se que as frações do látex de C. procera estudadas, apresentaram segurança toxicológica e potencial anti-helmíntico, entretanto mais investigações são necessárias para sua adoção no controle de NGI em pequenos ruminantes.

Infections with gastrointestinal nematodes (NGI) are one of the main obstacles to sheep and goats worldwide. The control of these infections using synthetic anthelmintics has collaborated with the selection of multiresistant nematode populations. Thus, the search for control alternatives is necessary, especially phytotherapy. Several plants, such as Calotropis procera, are traditionally used for anthelmintic purposes, which stimulates the scientific validation of this effect and the investigation of its toxicological safety. Thus, the objective was to evaluate the chemical composition, the anthelmintic potential and the toxicological safety of the C. procera latex (CpL). For this purpose, three distinct fractions of CpL were obtained through processes based on centrifugation and lyophilization (which may include a dialysis step): precipitated fraction called CpL-ppt; supernatant fraction rich in secondary metabolites, initially called LNP (Latex Non-Protein) and then as CpL-sf (soluble fraction of CpL); and supernatant fraction rich in proteins, called LPCp (latex proteins of C. procera). The CpL fractions were subjected to chemical and/or biochemical analyzes such as High performance liquid chromatography (HPLC), Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR), protein measurement and enzymatic activity verification. CpL-sf and LPCp were subjected to in vitro tests to verify their effect on eggs, larvae and the adult nematode of Haemonchus contortus (Adult word motility test - AWMT). Parasites collected at AWMT were subjected to scanning electron microscopy (SEM) and transmission (TEM) to verify changes in their ultrastructure. The toxicological safety of CpL-sf and LPCp has been verified in acute toxicity tests. Subchronic toxicity assay was also performed for CpL-sf. The anthelmintic activity of CpL-sf and LPCp was evaluated in sheep, using the controlled anthelmintic efficacy test (CAET) and the fecal egg count reduction test (FECRT), respectively. Nematodes obtained from CAET were submitted to TEM. Phytochemical tests in CpL-sf indicated the presence of phenols, steroids, alkaloids and cardenolides, and the presence of the compounds gallic acid and quercetin was characterized by HPLC. The protein content in LPCp was 43.1 ± 1.1 mg / mL and in CpL-sf it was 7.7 ± 0.3 mg/mL. CpL-sf and LPCp (8 mg/mL) showed mean egg hatch inhibition of 90% and 85%. The mean inhibition of larval development was 95% and 88% for CpL-sf and LPCp (1 mg/mL). In AWMT, CpL-sf and LPCp inhibited the motility of 100% of the nematodes after 6 and 24 h, respectively, and changes in the ultrastructure of these nematodes were observed. Administration of a single dose of CpL-sf (LD50 = 4031.5 mg / kg) or LPCp (LD50 > 5000 mg/kg) in mice was safe. Signs of toxicity were observed in rats treated for 30 days with CpL-sf. Sheep treated with CpL-sf or LPCp showed a 30% reduction in the burden of H. contortus and a 69% reduction in NGI eggs in feces, respectively. It is concluded that the fractions of the C. procera latex studied, presented toxicological safety and anthelmintic potential, however more investigations are necessary for its adoption in the control of NGI in small ruminants.

ATIVIDADE ANTIFÚNGICA E SEGURANÇA TOXICOLÓGICA DE FORMULAÇÕES A BASE DE SORBATO DE POTÁSSIO

Os fungos são organismos causadores de várias doenças em animais, estes micro-organismos oportunistas e patogênicos resistentes, como os Aspergillus spp., Candida spp e Penicillium spp. Para combater o crescimento e a proliferação desses organismos vários são os métodos utilizados, o uso indevido dos antifúngicos resultou em aumento significativo na prevalência de fungos resistentes a drogas convencionais. As novas drogas antifúngicas com sorbato de potássio são considerados como substituto mais promissor para os antibióticos no controle de micróbios patogênicos. São poucos os trabalhos na literatura que imputem a segurança toxicológica do uso de formulações com sorbato de potássio. Neste contexto a Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA) exige testes de genotoxicidade e citotoxicidade para admissão de novas formulações. No presente estudo têm-se como objetivo propor o uso das novas formulações com o sorbato de potássio como alternativa para o controle fúngico. Para obtenção dos resultados este projeto teve a aprovação do CEUA. Para avaliação da eficácia antifúngica foi realizado pelo método de microdiluição em microplacas estéreis de 96 poços com fundo em Upara a obtenção do CIM, foram utilizadas 4 formulações a base de sorbato de potássio em 3 gêneros fúngicos filamentosos, Aspergillus spp. Penicillium spp. Candida glabrata. Em paralelo foram avaliadas a segurança toxicológicas dessas formulações em ensaios in vitro considerou os aspectos da genotoxicidade, a qual foi avaliada através do ensaio do cometa, ocorreu um bebição das células em agarose, lisadas em tampão alcalino e foram submetidas a uma corrente elétrica, já na realização do ensaio in vivo as toxicidades aguda e sub-crônica também foram realizadas e estavam de acordo com as normas previstas pela Organização para a Cooperação de tratado econômico (OECD), 2008. Para avaliação da função hepática e renal de roedores foram realizados através do Laboratório de Patologia Clínica da Universidade Estadual Do Ceará, como também a realização dos exames de hemogramas e bioquímicos Nos resultados obtidos observou-se um potencial antifúngico, em condições laboratoriais, em todas as cepas testadas e também atendeu aos critérios de segurança toxicológica quanto a recomendação de uso das formulações pelo fabricante. Conclui-se que essas formulações contendo sorbato de potássio mostraram se eficaz no controle fúngico dos principais gêneros patogênicos, e apresentou segurança toxicológica podendo ser utilizada tanto no ambiente quanto em alimentos.

Fungi are organisms that cause various diseases in animals, these resistant opportunistic and pathogenic microorganisms, such as Aspergillus spp., Candida spp. And Penicillium spp. To combat the growth and proliferation of these various organisms are the methods used, misuse of antifungals resulted in a significant increase in the prevalence of conventional drug resistant fungi. The new antifungal drugs with potassium sorbate are considered as the most promising substitute for antibiotics in controlling pathogenic microbes. There are few studies in the literature that attribute toxicological safety to the use of formulations with potassium sorbate. In this context, the National Agency of Sanitary Surveillance (ANVISA) requires tests of genotoxicity and cytotoxicity for admission of new formulations. In the present study the objective is to propose the use of the new formulations with the potassium sorbate as an alternative for the fungal control. To obtain the results, this project was approved by CEUA. For the evaluation of the antifungal efficacy was done by the method of microdilution in sterile 96-well microplates with Upara bottom to obtain the MIC, 4 formulations based on potassium sorbate in 3 filamentous fungal genera, Aspergillus spp. Penicillium spp. Candida sphaerica. In parallel, the toxicological safety of these formulations was evaluated in in vitro assays, considering aspects of genotoxicity, which were evaluated through the comet assay, the cells were collected in agarose, lysed in alkaline buffer and subjected to an electric current, in the in vivo assay the acute and sub-chronic toxicities were also performed and were in accordance with the standards established by the OECD, 2008. To evaluate the hepatic and renal function of rodents were performed through the Laboratory of Clinical Pathology of the Universidade Estadual Do Ceará, as well as blood and biochemical tests. In the obtained results an antifungal potential was observed in laboratory conditions in all strains tested and also met the criteria of toxicological safety as to the recommendation of use of the formulations by the manufacturer. It is concluded that these formulations containing potassium sorbate showed to be effective in the fungic control of the major pathogenic genera, and it presented genotoxic safety and cytotoxic toxicity, which can be used both in the environment and in food.

Inhibition of coagulation proteases and thrombosis and sub-chronic toxicological study of a sulfated polysaccharidic fraction from the red alga Gelidiella acerosa / Inibição de proteases da coagulação e trombose e estudo toxicológico subcrônico de uma fração polissacarídica sulfatada da alga vermelha Gelidiella acerosa

Metabolites isolated from Gelidiella species (Rhodophyta) have been few studied. We evaluated a sulfated polysaccharidic fraction from G. acerosa collected from two Brazilian beaches on the northwestern coast of Brazil (Flecheiras-F and Pedra Rachada-PR) on coagulation proteases and thrombosis. Their toxicity in vivo was also assessed. Enzymatic extractions yielded 1.40%, and similar chromatographic profiles (DEAE-cellulose) were obtained, with fractions (Ga-IV) containing differences among the relative proportions of sulfate (5-42%), and revealing charge density patterns by electrophoresis. Ga-IV-PR had a discrete effect (3.01 IU mg-1) on normal human coagulation compared with heparin (193 IU mg-1) and was tested on coagulation proteases (thrombin and factor Xa) in the presence of antithrombin and in a model of venous thrombosis in rats using thromboplastin as the thrombogenic stimulus. The systems were inhibited; but at higher doses (>1.0 mg kg-1), this fraction reverted the antithrombotic effect. Regarding the toxicological study, consecutive Ga-IV (9 mg kg-1) for 14 days did not cause mortality in mice, but some biochemical and hematological parameters were discretely altered. Histopathological analysis revealed that increased liver and spleen sizes had no toxicological significance. Therefore, G. acerosa does not biochemically change its matrix polysaccharide compositi(AU)

Poucos estudos mostram metabólitos isolados de rodofíceas de espécies Gelidiella. Avaliou-se uma fração polissacarídica sulfatada de G. acerosa coletada a partir de duas praias brasileiras do Nordeste do Brasil (Flecheiras-F e Pedra Rachada-PR) sobre proteases da coagulação e trombose, e em ensaio de toxicidade in vivo. Extrações enzimáticas renderam 1,40% e foram obtidos perfis cromatográficos semelhantes (DEAE-celulose), apresentando frações (Ga-IV), contendo diferenças entre as proporções relativas de sulfato (5-42%), além de a eletroforese revelar diferenças na densidade de carga. A Ga-IV-PR apresentou discreto efeito (3,01 UI mg-1) sobre a coagulação humana normal comparada à heparina (193 UI mg-1) e foi testada sobre proteases da coagulação (trombina e fator Xa) na presença de antitrombina e em um modelo de trombose venosa em ratos usando tromboplastina com estímulo trombogênico, sendo inibidos esses sistemas. Entretanto, em elevadas doses (>1,0 mg kg-1) o efeito antitrombótico foi revertido. No estudo toxicológico, Ga-IV (9 mg kg-1) consecutiva durante 14 dias não causou mortalidade em camundongos, mas alterou discretamente alguns parâmetros bioquímicos e hematológicos. O aumento nos tamanhos do fígado e baço não apresentou significância toxicológica, segunda análise histopatológica. Portanto, G. acerosa não muda bioquimicamente a composição de polissacarídeo(AU)

TOXICIDADE DO EXTRATO ETANÓLICO DA CASCA DE PEQUI (Caryocar brasiliense Camb.) EM CAMUNDONGOS

Este trabalho teve como objetivo realizar o estudo toxicológico do extrato etanólico da casca de pequi (EECP) por meio da triagem farmacológica geral e também das diretrizes da Organization for Economic Cooperation and Development (OECD) 423 e 407 para o teste toxicológico agudo e subcrônico, respectivamente. Utilizou-se camundongos Swiss e o tempo de observação foi de 14 dias para o teste de triagem e de toxicidade aguda e, de 28 dias para o teste subcrônico. Na triagem farmacológica geral o EECP foi administrado em dose única de 300 mg/kg, 600 mg/kg, 1.200 mg/kg por via oral (v.o.) e intraperitoneal (i.p.). No estudo toxicológico agudo o EECP foi administrado em dose única de 300 mg/kg e 2.000 mg/kg, v.o. e no estudo toxicológico subcrônico o EECP foi administrado nas doses de 75 mg/kg, 150 mg/kg e 300 mg/kg, v.o. O grupo controle recebeu solução fisiológica 0,9%, v.o. ou i.p. Foi realizado o screening hipocrático, determinação da DL50 mediana, a avaliação ponderal, hemograma, exames bioquímicos, avaliação anatomopatológica, peso relativo dos órgãos e avaliação do ciclo estral. Concluiu-se que o EECP, no estudo toxicológico agudo apresentou uma baixa toxicidade. No estudo toxicológico subcrônico observou-se discretas alterações hepáticas no grupo que recebeu a maior dose do extrato, assim como no teste de triagem farmacológica geral. Observou-se uma elevada toxicidade do extrato quando administrado pela via intraperitoneal nos animais.

The aim of this study was to perform the toxicological study of ethanolic extract of pequi bark (EECP) by means of general pharmacological screening and also the OECD guidelines 423 and 407. The first one was chosen for the acute test and the second for the subchronic toxicological test. Swiss mice were used and the observation time was 14 days for the screening and acute toxicity tests and 28 days for the subchronic test. In general pharmacological screening, the EECP was administered in a single dose of 300 mg/kg, 600 mg/kg, 1,200 mg/kg orally and intraperitoneally. In the acute toxicological study EECP was administered orally as a single dose of 300 mg/kg and 2,000 mg/kg and in the subchronic toxicological study EECP was administered for 28 days at doses of 75 mg/kg, 150 mg/kg and 300 mg/kg orally. The control group received physiological solution. Hippocratic screening, determination of LD50, weight evaluation, hematological and biochemical tests, anatomohistopathological and relative weight of organs and estrous cycle evaluation were performed. It was concluded that EECP in the acute toxicological study showed a low toxicity. In the subchronic toxicological study, mild hepatic changes were present in the mice that received de highest dose of the extract, as in the general pharmacological screening test. A high toxicity of the extract was observed when administered intraperitoneally in the animals

EFEITO AGUDO E SUBCRÔNICO DA AMÔNIA SOBRE A TILÁPIA DO NILO

A presença de compostos nitrogenados em ambientes de confinamento e produção comercial de peixes é algo frequente. Estes compostos podem ser encontrados na forma de NH3, NO2 - e NO3 -, que podem atingir elevados níveis especialmente em sistemas de alta retenção de água. A amônia é a forma nitrogenada mais tóxica para os organismos aquáticos devido a sua capacidade de provocar danos ao organismo. A tilápia do Nilo é umas das espécies de peixes mais cultivadas no mundo, contudo, sua produção em sistemas intensificados, encontra problemas relativos ao acúmulo de amônia. Diante do exposto, o presente trabalho teve por objetivo estimar a concentração segura deste composto para juvenis de tilápia, estudar e avaliar as alterações causadas nos tecidos, hemático e branquial, decorrentes da exposição aguda e subcrônica à amônia e a eficácia do período de desintoxicação, buscando compreender o reflexo deste composto na criação de peixes. Os testes de toxicidade aguda duraram 96 h, enquanto o teste subcrônico e o período de desintoxicação duraram 8 e 4 dias, respectivamente. Grupos de 12 juvenis de tilápia (12,76±1, 24 cm e 34, 07±10,42 g) foram alocados em 20 tanques de 100 L de água e constituíram os tratamentos que receberam concentrações crescentes de amônia, com exceção do período de desintoxicação. Todos os tratamentos foram realizados com duas réplicas. Na etapa aguda, os animais foram submetidos às concentrações 0,42±0,03; 0,87±0,18; 1,52±0,25; 2,00±0,21; 3,77±0,46; 5,02±0,50; 5,52±0,63; 8,43± e 8,71±0,06 mg/L N-NH3 e na etapa crônica às de 0,42±0,03; 0,87±0,18; 1,52±0,25; 2,00±0,21 e 3,77±0,46 mg/L N- NH3. Os animais remanescentes dos testes agudo e crônico perfizeram os tratamentos 6 e 12 mg/L NAT, etapa de desintoxicação. A CL50 estimada para amônia em 24, 48, 72 e 96 h neste estudo foi de 133,29; 124,58; 113,52 e 112,57 mg/L N-AT; 6,08; 5,32; 4,42 e 4,35 mg/L N-NH3,respectivamente. Os parâmetros médios de lactato, ALT, AST, glicose e ureia foram maiores nas concentrações mais elevadas em comparação ao controle (P<0,05). A análise histopatológica revelou alterações nas brânquias dos animais expostos a amônia nos testes agudo (96 h), subcrônico (8 dias) e nos animais do período de desintoxicação (4 dias). Hiperplasia com fusão lamelar, perda da estrutura lamelar secundária, lamelas tortuosas com severa perda da estrutura, necrose, descolamento do epitélio, hiperplasia, aneurisma e edema foram lesões encontradas nas brânquias de animais do teste agudo e subcrônico. Houve recuperação nas brânquias de animais que passaram para o período de desintoxicação, contudo, ainda apresentavam algumas alterações. Os juvenis de tilápia se mostraram tolerantes a amônia e os níveis de segurança estimados foram considerados de fato seguros. O período de desintoxicação é eficiente para a recuperação de juvenis de tilápia intoxicados por amônia.

The presence of nitrogen compounds in closed environments and commercial fish production is frequent. These compounds can be found in the form of NH3, NO2 - and NO3 - , which can reach high levels especially in water retention systems such as Recirculated Aquaculture Systems (RAS) and Biofloc Technology (BFT). The toxicity of each of these compounds to culture animals is dependent on the concentration in the environment. Among the nitrogenous forms cited, ammonia is the most toxic to aquatic organisms due to its ability to cause damage to the animal's body. Nile tilapia is one of the most cultivated species of fish in the world, yet its production in intensified environments encounters problems with ammonia accumulation. In view of the above, the objective of this study was to estimate the LC50 of this compound for tilapia juveniles, besides studying and evaluating the changes caused in the hemic and gill tissues due to the acute and subchronic exposure to ammonia and the effectiveness of the detoxification period. The acute toxicity tests lasted 96 h, while the subchronic test and the detoxification period lasted 8 and 4 days, respectively. Groups of 12 juveniles of tilapia (12.76±1.24 cm and 34.07±10.42 g) were allocated in 20 tanks of 100 L of water and constituted the treatments that received increasing concentrations of ammonia, with exception of the detoxification period. All treatments were performed with two replicates. In the acute stage, the animals were submitted to concentrations 0,42±0,03; 0,87±0,18; 1,52±0,25; 2,00±0,21; 3,77±0,46; 5,02±0,50; 5,52±0,63; 8,43± and 8,71±0,06 mg.L -1 - NH3-N and in the chronic stage at 0,42±0,03; 0,87±0,18; 1,52±0,25; 2,00±0,21 and 3,77±0,46 mg.L -1 NH3-N. The remaining animals from the acute and subchronic tests were used in subchronic experiment (06 and 12 mg. L -1 TA-N). The estimated LC50 for ammonia at 24, 48, 72 and 96 h in this study was 133.29; 124.58; 113.52 and 112.57 mg.L -1 TA-N; 6.08; 5.32; 4.42 and 4.35 mg.L -1 NH3-N, respectively.The mean lactate, ALT, AST, glucose and urea parameters increased in the higher ammonia concentrations compared to the control (P <0.05). Histopathological analysis revealed alterations in the gills of animals exposed to ammonia in the acute (96 h), subchronic (8 days) and detoxification (4 days) tests. Hyperplasia with lamellar fusion, loss of secondary lamellar structure, lamellae with severe loss of structure, necrosis, epithelial detachment, hyperplasia, aneurysm and edema were lesions found in the gills of the acute and subchronic test animals. There was recovery in the gills of animals that went to the detoxification period, however, they still presented alterations. Tilapia juveniles were tolerant to ammonia and the estimated safety levels were considered real. The detoxification period is efficient for the recovery of tilapia juveniles intoxicated by ammonia.

AVALIAÇÃO HEPÁTICA DE SUÍNOS EXPOSTOS AO FUNGICIDA CAPTAN

O Captan é um fungicida amplamente utilizado na agricultura em todo mundo. A exposição e efeitos tóxicos crônicos são pouco conhecidos em modelos animais. O Objetivo deste trabalho foi avaliar efeitos tóxicos do fungicida Captan em suínos. O ensaio clínico foi delineado em dois grupos G1 (dieta balanceada com dose de 500ppm de ração do Fungicida Captan) e G2 (dieta balanceada com dose de 500ppm de ração Caulim). Foram alocados 07 suínos (3 meses de idade) por grupo, sendo controlados e mascarados todos os demais procedimentos, o período experimental foi de 47 dias. Os animais foram eutanasiados, realizado avaliação macroscópica e coletadas amostras de diferentes órgãos em formol a 10%. Amostras de fígado foram analisadas quantitativamente em microscopia óptica com coloração rotina (HE) e especiais (PAS, Azul da Prússia e Picro-Sirius) e cariometria. Na análise cariométrica verificou-se alterações nas dimensões e posição do núcleo do hepatócito demonstrando efeito da intervenção no G1 em relação G2. A anisonucleose é uma alteração morfológica reversível, pode induzir apoptose ou alterações mutacionais. Este estudo pode comprovar efeitos subletais subcrônicos induzidos pelo Captan em suínos. São necessários estudos de cronicidade para avaliar as consequências dessa anisonucleose em mamíferos.

Captan is a fungicide widely used in agriculture around the world. Exposure and chronic toxic effects are poorly understood in animal models. The objective of this work was to evaluate the toxic effects of Captan fungicide on swine. The clinical trial was delineated in two G1 groups (balanced diet with a dose of 500ppm of Captan Fungicide) and G2 (a balanced diet with a dose of 500ppm Caulim). Seven pigs (3 months old) were allocated per group, all other procedures being controlled and masked, the experimental period was 47 days. The animals were euthanized, performed a macroscopic evaluation and collected samples of different organs in 10% formalin. Liver samples were analyzed quantitatively under optical microscopy with routine (HE) and special staining (PAS, Prussian Blue and Picro-Sirius) and cariometry. In the cariometric analysis, it was verified changes in the dimensions and position of the hepatocyte nucleus demonstrating the effect of the intervention on G1 in relation to G2. Anisonucleosis is a reversible morphological change, it can induce apoptosis or mutational changes. This study can demonstrate subchronic sublethal effects induced by Captan in swine. Chronicity studies are required to evaluate the consequences of this anisonucleosis in mammals.

ALTERAÇÕES HISTOLÓGICAS EM LOPHIOSILURUS ALEXANDRI EXPOSTOS AO GLIFOSATO.

O Roundup® Original é um herbicida que contém em sua formulação o ingrediente ativo glifosato. Esta formulação comercial é amplamente utilizada a nível global, e sua principal função é combater ervas daninhas na agricultura. Devido às grandes aplicações deste herbicida, o glifosato e seus principais metabólitos têm sido detectados em águas superficiais e subterrâneas, gerando preocupações quanto aos seus efeitos em organismos não-alvos, principalmente animais aquáticos. O objetivo central deste estudo foi avaliar os efeitos deletérios do Roundup® Original (N-(fosfonometil) glicina, Monsanto do Brasil Ltda) em formas jovens do peixe pacamã (Lophiosilurus alexandri). Para isto, foram realizados testes de toxicidade aguda (96 h) e teste subcrônico (19 dias) de exposição ao herbicida. No primeiro teste de toxicidade aguda, foram testadas as concentrações de 0,0; 2,5; 3,0; 3,5; 4,0; 4,5 e 5,0 mg L-¹ de glifosato diluído em água, em animais de 0,05 ± 0,01 g; 1,80 ± 0,10 cm. A Concentração letal mediana (CL50; 96h) estimada foi de 2,71 mg L-¹ de glifosato. O estudo histológico possibilitou a observação de alterações branquiais, tais como: descolamento do epitélio lamelar, aneurisma, hiperplasia e fusão lamelar em animais mantidos na presença do agente tóxico. Para o segundo teste de toxicidade aguda, foram utilizados animais de 4,03 ± 1,26 g; 6,97 ± 0,65 cm. As concentrações de glifosato testadas foram de 0,0; 3,0; 6,0; 10,0; 15,0 e 20,0 mg L-¹. A CL50; 96 h e o nível de segurança estimados foram de 4,21 mg L-¹, e 0,42 mg L-¹ de glifosato, respectivamente. Brânquias e fígados avaliados neste experimento demonstraram alterações teciduais como: descolamento do epitélio lamelar com edema intersticial, hiperplasia das lamelas secundárias, hipertrofia de células de cloreto, desarranjo do formato das células hepáticas com presença de algumas áreas necróticas e com núcleos picnóticos. O terceiro experimento, caracterizado pela exposição de juvenis (21,69 ± 3,89 g; 11,45 ± 0,79 cm) às concentrações subletais de glifosato (0,0; 0,42 e 0,21 mg L-¹), ocasionou a mortalidade de 25% dos animais expostos à maior concentração de glifosato, além da presença de animais letárgicos nas concentrações testadas, com exceção do grupo controle. A histologia aplicada para fígado e brânquias dos juvenis do teste subcrônico, também demonstraram alterações teciduais, porém em menor proporção em relação aos testes de exposição aguda. Desta forma, podemos sugerir que o glifosato é potencialmente tóxico para L. alexandri, visto que concentrações baixas de glifosato provocaram mortalidade, além de alterações histológicas e comportamentais.

Roundup® Original is an herbicide that contains in its formulation the active ingredient glyphosate. This commercial formulation is widely used globally, and its main function is to combat weeds in agriculture. Due to the great applications of this herbicide, glyphosate and its main metabolites have been detected in surface water and groundwater, raising concerns about its effects on non-target organisms, mainly aquatic animals. The main objective of this study was to evaluate the deleterious effects of Roundup® Original (N- (phosphonomethyl) glycine, Monsanto of Brazil Ltda.) on juveniles of the pacamã fish (Lophiosilurus alexandri). For this, tests of acute toxicity (96 h) and subchronic (19 days) of exposure to the herbicide were performed. In the first acute toxicity test, were tested the concentrations of 0,0; 2,5; 3,0; 3,5; 4,0; 4,5 and 5,0 mg L-1 of glyphosate diluted in water, in animals of 0,05 ± 0,01 g; 1,80 ± 0,10 cm. The median lethal concentration (LC50; 96h) estimated was 2,71 mg L-1 of glyphosate. Histological studies allowed the observation of branchial alterations, such as: detachment of the lamellar epithelium, aneurysm, hyperplasia and lamellar fusion in animals kept in the presence of the toxic agent. For the second acute toxicity test, were used animals of 4,03 ± 1,26 g; 6,97 ± 0,65 cm. The concentrations of glyphosate tested were 0,0; 3,0; 6,0; 10,0; 15,0 and 20,0 mg L-1. The LC50; 96 h and the safety level estimated were 4,21 mg L-1, and 0,42 mg L-1 of glyphosate, respectively. Gills and livers evaluated in this experiment demonstrated tissue changes such as: detachment of lamellar epithelium with interstitial edema, hyperplasia of secondary lamellae, hypertrophy of chloride cells, and derangement of hepatic cell shape with the presence of some necrotic areas with pycnotic nuclei. The third experiment, characterized by exposure of the juveniles (21,69 ± 3,89 g, 11,45 ± 0,79 cm) to sublethal concentrations of herbicide (0,0; 0,42 and 0,21 mg L-1), caused mortality of 25% of the animals exposed to the highest concentration of glyphosate, in addition to the presence of lethargic animals in the tested concentrations, except for the control group. The histology applied to the liver and gills of juveniles of the subchronic test also showed tissue changes, but to a lesser extent in relation to the acute exposure tests. In this way, we can suggest that glyphosate is potentially toxic to L. alexandri, since low concentrations of glyphosate caused mortality, as well as histological and behavioral changes.

POTENCIAL TOXICOLÓGICO E O IMPACTO DO PIRIPROXIFENO NOS PARÂMETROS ZOOTÉCNICOS DE TILÁPIA DO NILO (Oreochromis niloticus, Linnaeus, 1758)

A piscicultura é uma das atividades que mais cresce mundialmente com destaque para o cultivo de Tilápias em lagos e represas, sendo, portanto vulneráveis a exposição de produto químico lançado nestes corpos hídricos. O objetivo deste trabalho foi determinar a concentração letal 50% (CL50-24 e 96h) de formulações comerciais do Piriproxifeno em distintas concentrações, bem como o impacto destas no desempenho zootécnico, comportamento locomotor, e ainda avaliar seu potencial toxicológico em Tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus). Foi realizado teste de toxicidade aguda para determinação da CL50-24 e 96h com 09 tratamentos em duplicata em 18 aquários de 20L. As CL50-24 e 96h para alevinos de Tilápia foi de 10,70 mg/L e 2,77 mg/L, respectivamente. Teste de toxicidade crônica no período de 96h de exposição para quantificação da acetilcolinesterase, com 04 tratamentos em triplicata em 12 aquários de 20L, juntamente com as filmagens de vídeo rastreamento. Animais expostos às concentrações do Piriproxifeno no período de 96h não apresentaram alterações no seu comportamento locomotor. Animais expostos às distintas concentrações do Piriproxifeno ao longo das 96h apresentaram diferenças significativas, tanto na concentração proteica quanto na atividade específica da acetilcolinesterase cerebral. No teste de toxicidade subcrônica com duração de 28 dias de exposição, os animais submetidos às maiores concentrações apresentaram os piores desempenhos. O vídeo rastreamento demonstrou após 28 dias diminuição da atividade motora. Lesões mais severas no tecido hepático foram encontrados à concentração de 1,2 mg/L.

Fish farming is one of the world's fastest growing activities, with emphasis on the cultivation of Tilapia in lakes and dams, and therefore the exposure of the chemical released in these water bodies is vulnerable. The objective of this work was to determine the 50% lethal concentration (LC50-24 and 96h) of commercial formulations of Pyriproxyfen in different concentrations, as well as their impact on zootechnical performance, locomotive behavior, and to assess their toxicological potential in Nile Tilapia Oreochromis niloticus). An acute toxicity test was performed to determine LC50-24 and 96h with 09 treatments in duplicate in 18 20L aquaria. The LC50-24 and 96h for Tilapia fingerlings were 10.70 mg / L and 2.77 mg / L, respectively. Chronic toxicity test in the 96h exposure period for quantification of acetylcholinesterase with 04 treatments in triplicate in 12 20L aquaria along with video filming. Animals exposed to the concentrations of Piriproxifene in the period of 96h did not present alterations in their locomotive behavior. Animals exposed to different concentrations of Piriproxifene over the 96 hours presented significant differences in both protein concentration and specific activity of cerebral acetylcholinesterase. In the subchronic toxicity test with duration of 28 days of exposure, the animals submitted to the highest concentrations presented the worst performances. The video tracking demonstrated after 28 days decreased motor activity. More severe lesions in hepatic tissue were found at a concentration of 1.2 mg / L.