Efeito da suplementação com óleo de avocado (Persea americana Mill) na temperatura superficial corpórea de equinos antes e após exercício em esteira / [Effect of supplementation with avocado oil (Persea americana Mill) on body surface temperature of horses before and after exercise on treadmill]

Oito equinos foram distribuídos em delineamento randomizado cruzado, sendo um grupo sem suplementação (GC) e outro grupo suplementado com óleo de avocado (GOAv) por um período de sete semanas. Ao fim da sexta semana, os animais foram submetidos a teste padrão de exercício progressivo (TPEP) e, após sete dias, a teste de baixa intensidade e longa duração (BILD). Após o primeiro ciclo, houve período de descanso "washout" de 30 dias para troca de grupos para o segundo ciclo, que seguiu o protocolo do primeiro. A termorregulação foi avaliada com base na temperatura retal e na temperatura superficial corpórea, obtidas por termografia, de 15 regiões de interesse. A temperatura retal e as imagens termográficas foram obtidas antes, um minuto e 15 minutos após o exercício. Não houve diferença entre os grupos GC e GOAv em nenhum momento. Os resultados obtidos neste estudo revelaram que a suplementação de 5% da matéria seca (MS) com óleo de avocado por seis e sete semanas não influenciou na termorregulação com base na temperatura superficial corpórea dos equinos submetidos ao teste padrão de exercício progressivo (TPEP) e ao exercício de baixa intensidade e longa duração (BILD), respectivamente.(AU)

Eight equines were distributed in a randomized crossover design, one control group (CG) without supplementation and another group supplemented (SG) with avocado oil for a period of six weeks. At the end of the sixth week, the animals were submitted to standard exercise test (SET) and after seven days to the low intensity test (LIT). After the first cycle, there was a 30-day washout rest period to exchange groups for the second cycle, which followed the protocol of the first one. Thermoregulation was evaluated based on rectal temperature and body surface temperature of 15 regions of interest obtained by thermography. Rectal temperature and thermographic images were obtained before, one minute and 15 minutes after exercise. There was no difference between the CG and SG at any time. The results obtained in this study revealed that the supplementation of 5% of dry matter with avocado oil for six and seven weeks did not influence the thermoregulation based on the body surface temperature of the horses submitted to SET and LIT, respectively.(AU)

Substitution of ractopamine by safflower or coconut oil as an additive in finishing pig diets / Substituição da ractopamina por óleo de cártamo ou óleo de coco como aditivos em dietas para suínos em terminação

The objective of this study was to explore the substitution of ractopamine by coconut or safflower oil in finishing pig diets. The study included 24 crossbred barrows weighing 78.00 ± 8.76 kg distributed in a randomized block design with four treatments and six replicates composed of: basal ration (BR), BR + 10 ppm ractopamine, BR + four 1 g capsules of safflower oil, and BR + four 1 g capsules of coconut oil. Performance evaluation showed that safflower oil, ractopamine, and coconut oil supplementation had a significant effect (P 0.05) on weight gain and feed conversion. Carcass-related variables were also affected by the treatments (P 0.05), with fat thickness 3 (FT3) reduced by the use of safflower oil, ractopamine, and coconut oil. Rib eye area was positively affected (P 0.05) by diet, with ractopamine, coconut oil, and safflower oil supplementation treatments showing higher values than control diet treatment. The diets also affected fatty acid profiles (P 0.05), with decreased myristic acid content in animals supplemented with ractopamine and safflower oil and increased deposition of palmitoleic and oleic acids in animals supplemented with coconut oil and safflower oil, respectively. Results suggested that both safflower oil and coconut oil can be used as substitutes for ractopamine.(AU)

Objetivou-se avaliar a substituição da suplementação da ractopamina pelo uso dos óleos de coco ou cártamo nas dietas de suínos em terminação. Foram utilizados 24 suínos machos castrados mestiços com peso médio de 78,00±8,76 kg, distribuídos em um delineamento de blocos casualizados, contendo quatro tratamentos e seis repetições compostos por: Ração Basal (RB); RB + 10 ppm de ractopamina; RB + 4 cápsulas de 1 grama cada de óleo de cártamo e RB + 4 cápsulas de 1 grama cada de óleo de coco. Na avaliação do desempenho foi observado o efeito (P 0,05) da suplementação das dietas com óleo de cártamo, ractopamina e coco no ganho de peso e conversão alimentar. As variáveis relacionadas com as carcaças também foram afetadas pelos tratamentos (P 0,05), sendo a espessura de toucinho 3 (ET3) reduzida pelo uso do óleo de cártamo, ractopamina e coco. Na avaliação da área de olho de lombo foram observados efeitos positivos (P 0,05), com maiores valores para os tratamentos suplementados com ractopamina, óleo de coco e com óleo de cártamo, quando comparados com a dieta controle. As dietas também afetaram o perfil dos ácidos graxos (P 0,05) de forma positiva, com a redução do ácido míristico do toucinho nas dietas com ractopamina e óleo de cártamo e aumento na deposição dos ácidos graxos palmitoleico e oleico do lombo nas dietas suplementadas com óleo de coco e cártamo, respectivamente. Conclui-se que tanto o óleo de coco quanto o de cártamo podem ser utilizados como substitutos da ractopamina.(AU)

Substituição do cloreto de colina por uma fonte vegetal de colina em dietas de frangos

O objetivo deste trabalho foi avaliar uma fonte vegetal de colina em substituição do cloreto de colina, e seus efeitos no desempenho animal, metabolismo e rendimento de carcaça de frangos de corte. Foram utilizados 1120 frangos de corte macho linhagem Cobb 500 de um dia de vida, distribuídos em 4 tratamentos com 8 repetições de 35 aves cada, sendo os tratamentos: 1 - controle (Colina na forma de Cloreto de Colina 60%); 2 - 75% de cloreto de colina e 25% de colina vegetal (Choline-H) como fonte de colina; 3 - 50% de cloreto de colina e 50% de colina vegetal (Choline-H) como fonte de colina; 4 - 100% de colina vegetal (Choline-H) como fonte de colina. Foi avaliado o desempenho zootécnico (ganho de peso, consumo de ração, conversão alimentar, viabilidade e uniformidade), rendimento de carcaça e cortes, padrão de empenamento, perfil bioquímico sérico, saúde do sistema locomotor e fígado, anomalias musculares peitorais, e zonas de crescimento da epífise proximal da tíbia dos frangos. Não foram encontradas diferenças significativas no desempenho zootécnico (peso médio, ganho de peso, consumo de ração, conversão alimentar e viabilidade) dos frangos em nenhuma das fases avaliadas (7, 21, 35 e 42 dias), o tratamento que utilizou apenas colina vegetal proporcionou maior uniformidade das aves a partir de 35 dias, para as variáveis de rendimento de carcaça e porcentagem de órgãos também não tiveram diferenças estatísticas. Na análise de escore de empenamento não houve diferenças, já na porcentagem de penas, os tratamentos que combinaram as duas fontes de colina obtiveram maior porcentagem de penas. Em relação as análises histopatológicas e avaliações de problemas locomotores não foram encontradas diferenças significativas entre os tratamentos. Na análise de bioquímica sérica, o tratamento com uso de somente colina vegetal diminuiu os níveis de colesterol e LDL aos 21 dias, e de LDL aos 42 dias, não apresentando diferenças significativas para os demais parâmetros avaliados (enzimas FA, GGT e AST e triglicerídeos, HDL e VLDL). Conclui-se que a fonte vegetal de colina pode substituir o integralmente o cloreto de colina em dietas de frangos de corte, sem prejudicar o desempenho e diminuindo os níveis circulantes de LDL.

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CARACTERIZAÇÃO DO USO DE LINHAGENS CELULARES DE IXODÍDEOS COMO MODELO DE ESTUDO IN VITRO DA INTERAÇÃO ENTRE CARRAPATO e LEISHMANIA SPP

A leishmaniose é um conjunto de doenças causadas por protozoários do gênero Leishmania que afetam homens e animais. A leishmaniose canina é uma doença de grande importância na saúde pública, pois os cães são o principal reservatório do parasito. A maioria dos cães infectados vem de áreas pobres, onde há ectoparasitos, como o carrapato Rhipicephalus sanguineus. Sua presença levantou a hipótese de que este poderia ser um vetor do parasito. O objetivo deste trabalho foi propor um modelo in vitro de estudo da interação entre Leishmania spp. e carrapatos Ixodídeos, usando a linhagemcelular do carrapato Ixodes scapularis (IDE8). Para esta análise, células IDE8 foram incubadas com promastigotas de L. amazonensis ou L. infantum durante: 2, 24 e 48 h a 34 ° C. Resultados mostraram que as formas promastigotas se ligam, interagem com a membrana das células de carrapato, são endocitadas e permanecem dentro de um vacúolo justaposto, como mostrado por microscopia eletrônica de transmissão e varredura. O índice de associação entre IDE8 e L. amazonensis não se alterou, mas entre IDE8 e L.infantum aumentou em cerca de 7 vezes em 48h. Os ensaios de viabilidade através da atividade de LDH mostraram que as células permanecem viáveis durante incubação com os parasitas. Além disso, L. infantum apresentou uma sobrevivência 13 vezes maior do que L. amazonenses após a interação com IDE8 em 48h. As células IDE8 apresentaram aumento de 2 vezes na produção de ROS e de 8 vezes da produção de oxiesterol após a interação com L. infantum. Os lipídeos triacilglicerol, 1,2 e 1,3 diacilgliceróis, monoacilglicerol e colesterol esterificado, todos derivados dos ácidos graxos, também apresentaram aumento após a interação. Assim, nossos dados indicam a capacidade de Leishmania spp. Interagir com células de carrapato in vitro, sobreviver a essa interação e modular reações metabólicas na célula hospedeira.

Leishmaniasis is a group of diseases caused by protozoa of the genus Leishmania that affect humans and animals. Canine leishmaniasis is a disease of great public health importance, since dogs are the main reservoir of the parasite. Most infected dogs come from poor areas where there are ectoparasites, such as the Rhipicephalus sanguineus tick. Its presence raised the hypothesis that this could be a vector of the parasite. The aim of this work was to propose an in vitro model to study the interaction between Leishmania spp. and Ixodid ticks, using the cell line from the Ixodes scapularis tick (IDE8). For this analysis, IDE8 tick cells were incubated with L. amazonensis or L. infantum promastigotes during: 2, 24 and 48 h at 34 ° C. The results showed that promastigotes bind, interact with the tick cell membrane, are endocytosed, and remain within a juxtaposed vacuole, as shown by transmission and scanning electron microscopy. The association index between IDE8 and L. amazonensis did not change, but between IDE8 and L. infantum it increased approximately 7 times up to 48 h. Viability assay through LDH activity demonstrated that IDE8 tick cell remain viable during infection with parasites. Furthermore, L. infantum showed a survival 13 times higher than L. amazonensis after interaction with IDE8. IDE8 tick cells infected with L. infantum also showed a 2-fold increase in ROS production and an 8-fold increase in oxysterol production. The lipids triacylglycerol, 1,2 and 1,3 diacylglycerols, monoacylglycerol and esterified cholesterol, derived from fatty acids, also showed an increase after the interaction. Therefore, our data indicate that Leishmania spp. are able to interact with tick cells in vitro, survive, and modulate metabolic reactions in tick cells.

Betaine and ractopamine for pigs from 90 to 140 kg

Foram conduzidos dois experimentos com fêmeas suínas dos 90 aos 140 kg. No primeiro estudo (I), o objetivo foi avaliar a suplementação de ractopamina e betaína, isolada ou em associação, no desempenho, características de carcaça, qualidade de carne e na expressão de genes relacionados ao metabolismo lipídico no tecido muscular glicolítico e oxidativo e no tecido adiposo subcutâneo. No segundo experimento (II), objetivou-se avaliar o desempenho, características de carcaça, qualidade de carne e a expressão de genes relacionados ao metabolismo lipídico no tecido muscular glicolítico e oxidativo de duas linhagens genéticas distintas consumindo ractopamina. No primeiro experimento, foram utilizadas 72 fêmeas híbridas (Agroceres PIC), com peso médio inicial de 88,96 ± 3,44 kg, distribuídos em delineamento inteiramente casualizado, com quatro tratamentos, nove repetições e dois animais por unidade experimental. Os tratamentos foram constituídos por uma ração controle (CONT), CONT + 2,5 g/kg de betaína (BET), ração com 20 ppm de ractopamina (RAC), RAC + 2,5 g/kg de betaína (RAC + BET). No segundo experimento, foram utilizadas 18 fêmeas Agroceres PIC 337 (Large White x Landrace x Duroc x Pietrain) x Camborough (Large White x Landrace) (HIB), com peso médio inicial de 88,96± 3,44 kg e 12 fêmeas DB LQ 1250 (Duroc) x DB 90 (Large White x Landrace) (DUR), com peso médio inicial de 85,63± 1,55 kg, distribuídos em delineamento inteiramente casualizado com dois tratamentos (Híbrido) ou (Duroc), com 9 e 6 repetições, respectivamente, e dois animais por unidade experimental. No experimento I, suínos consumindo RAC e RAC+BET apresentaram maior ganho de peso diário, menor conversão alimentar comparado às demais dietas e maior peso de carcaça quente e rendimento de carcaça em relação à dieta CONT. Suínos que consumiram as dietas BET, RAC e RAC+BET apresentaram maior área de olho de lombo, enquanto a espessura de toucinho foi menor nos animais que receberam a dieta RAC+BET em comparação ao CONT. A carne de animais que receberam a dieta BET apresentou menor força de cisalhamento e maior percentual de gordura intramuscular comparado ao CONT. A BET aumentou a expressão de fatores lipogênicos no Longissimus dorsi e no músculo Sóleo em relação ao CONT. Em relação ao tecido adiposo, RAC e BET aumentaram a expressão de genes relacionados a lipólise e -oxidação. Os resultados indicam que o desempenho e as características de carcaça podem ser aumentados com o uso da ractopamina, enquanto a betaína promove aumento na área de olho de lombo e na qualidade da carne suína. No experimento II, o desempenho dos suínos de ambos os grupos genéticos foi semelhante. No entanto, os suínos DUR apresentaram menor espessura de toucinho. A carne dos suínos DUR apresentou maior L* (luminosidade), menor a* (intensidade de vermelho) e maior percentual de gordura intramuscular. Suínos DUR apresentaram maior expressão do receptor ativado por proliferadores de peroxissoma gama (PPAR) e da proteína ácido graxo translocase/cluster de diferenciação (FAT/CD36), além de maior abundância do mRNA da lipase hormônio sensível (HSL) e Adiponectina (ADIP) no Longissimus Dorsi. Maior abundância do mRNA do PPAR e FAT/CD36 também foi observado no músculo Sóleo dos animais DUR, mas sem alteração na expressão de enzimas relacionadas à degradação lipídica comparado a suínos HIB. Suínos DUR apresentam carcaça com menor espessura de toucinho e melhor qualidade de carne, evidenciado pelo maior percentual de gordura intramuscular em relação aos suínos HIB. Possivelmente a maior concentração de gordura intramuscular seja devido principalmente a maior expressão de fatores de transcrição e enzimas relacionados a adipogêneses e lipogêneses no tecido muscular esquelético glicolítico e oxidativo nos suínos DUR.

Two experiments were carried out with female pigs from 90 to 140 kg. In experiment I, the objective was to evaluate the supplementation of ractopamine and betaine, alone or in association, on performance, carcass traits, meat quality and expression of genes related to lipid metabolism in skeletal glycolytic and oxidative muscle tissue and in the subcutaneous adipose tissue. In experiment II, to evaluate performance, carcass traits, pork quality and expression of genes related to lipid metabolism in glycolytic and oxidative muscle tissues of two divergent genetic lines fed ractopamine. In experiment I, a total of 72 female pigs (Agroceres PIC) with initial body weight of 88.96 ± 3.44 kg were assigned to a completely randomized design in four diets with nine replicates and two pigs per experimental unit, represented by the pen. Diets consisted of a control (CTRL) diet (without ractopamine and betaine); CTRL + 2.5 g/kg betaine (BET); CTRL+ 20 ppm ractopamine (RAC); and RAC + 2.5 g/kg de betaine (RAC + BET). In experiment II, eighteen female pigs Agroceres PIC 337 (Large White x Landrace x Duroc x Pietrain) x Camborough (Large White x Landrace) (HYB), with initial body weight of 88.96 ± 3.44 kg and 12 female pigs DB LQ 1250 (Duroc) x DB 90 (Large White x Landrace) (DUR), with initial body weight of 85.63 ± 1.55 kg were used. Pigs were allotted in a completely randomized design in two groups: HYB and DUR with nine and six replicates, respectively, and two pigs per experimental unit, represented by the pen. In experiment I, pigs fed RAC and RAC+BET diets had higher daily weight gain, lower feed conversion compared to pigs fed the other diets and higher hot carcass weight and carcass yield, compared to CTRL diet. Pigs fed BET, RAC and RAC+BET diets had greater loin muscle area. The backfat thickness was lower in pigs fed RAC+BET diet, compared to the CTRL. The meat from pigs fed BET diet had lower Warner-Bratzler shear force and higher percentage of intramuscular fat compared to CTRL. BET diet increased the expression of lipogenic factors in Longissimus dorsi and Soleus muscles compared to CTRL. In adipose tissue, RAC and BET diets increased the expression of genes related to lipolysis and -oxidation. The results indicate that performance and carcass traits can be improved with ractopamine and betaine promotes increase in loin muscle area and pork quality. In experiment II, the performance of pigs from both genetic groups was similar. However, DUR pigs had lower backfat thickness. The meat from DUR pigs had higher L* (brightness), lower a* (redness) and higher percentage of intramuscular fat. DUR pigs had higher expression of peroxisome proliferator-activated receptor gamma (PPAR) and fatty acid protein translocase/cluster differentiation (FAT/CD36), in addition to higher abundance of hormone-sensitive lipase (HSL) and Adiponectin (ADIP) mRNA in the Longissimus dorsi. Greater abundance of PPAR and FAT/CD36 mRNA was also observed in the Soleus muscle of DUR pigs with no change in the expression of enzymes related to lipid degradation compared to HYB pigs. DUR pigs had carcasses with lower backfat thickness and better meat quality, evidenced by the higher percentage of intramuscular fat compared to HYB pigs. Possibly the higher concentration of intramuscular fat is mainly due to the higher expression of transcription factors and enzymes related to adipogenesis and lipogenesis in glycolytic and oxidative skeletal muscle tissue in DUR pigs

Metabolismo lipídico de oócitos e embriões bovinos - Efeitos da suplementação e da cinética de desenvolvimento

Os mecanismos pelos quais a produção in vitro de embriões (PIVE) bovinos gera embriões com excessivo acúmulo lipídico, diferenças metabólicas e padrões epigenéticos não estão totalmente elucidados. Também permanece desconhecido quando essas alterações acontecem, se acontecem desde a maturação oocitária ou após início da clivagem embrionária. O presente estudo objetivou avaliar os efeitos suplementação lipídica e da cinética de desenvolvimento em oócitos e embriões produzidos in vitro. Para isso o trabalho foi dividido em 2 estudos: No estudo 1, intitulado Suplementação lipídica para doadoras altera a qualidade de embriões submetidos a vitrificação foram avaliados os efeitos da adição de linhaça na dieta de vacas Pantaneira sobre parâmetros digestivos e na produção in vitro de embriões submetidos a vitrificação. Foram analisados coeficientes de digestibilidade, perfil de metabolitos séricos, viabilidade oocitária, produção de embriões e criotolerância embrionária. A partir dos dados obtidos neste estudo, concluímos que a suplementação de 0,800 Kg/animal/dia de linhaça em grão, uma fonte rica em ácido linolênico, para fêmeas da raça Pantaneira incrementou a qualidade e criotolerância dos embriões produzidos in vitro. No estudo 2 intitulado Metabolismo lipídico e atividade mitocondrial em oócitos e embriões bovinos produzidos in vitro com diferentes cinéticas de desenvolvimento analisou-se o conteúdo lipídico, atividade mitocondrial e a tri-metilação da H3K4 em oócitos e embriões bovinos em diferentes fases de desenvolvimento e concluímos que o acúmulo de lipídeos ocorre nas primeiras 4 horas da maturação in vitro de COCs de Bos taurus. Blastocistos rápidos apresentam maior conteúdo lipídico que os embriões lentos, sem interferência da atividade mitocondrial nessa fase. A H3K4me3 parece ser essencial para o desenvolvimento embrionário, especialmente no que diz respeito as células do embrioblasto mas isso não parece mediar a velocidade de desenvolvimento e metabolismo lipídico.

The mechanisms by which in vitro bovine embryo production (IVEP) generates embryos with excessive lipid accumulation, metabolic differences and epigenetic patterns are not fully understood. It also remains unknown when these changes occur, whether they occur since oocyte maturation or after embryonic cleavage begins. The present study aimed to evaluate the effects of lipid supplementation and developmental kinetics in oocytes and embryos produced in vitro. For this, the research was divided into 2 studies: in paper 1, entitled Lipid supplementation for donors alters the quality of embryos submitted to vitrification, we evaluated the effects of adding flaxseed to the diet of Pantaneira cows on digestive parameters and in vitro production of embryos submitted to vitrification. We analyzed the digestibility coefficients, serum metabolite profile, oocyte viability, embryo production and embryonic cryotolerance. From the data obtained in this study, we conclude that the supplementation of 0.800 kg/animal/day of grain flaxseed, a rich source of linolenic acid, for females of the Pantaneira breed increased the quality and cryotolerance of embryos produced in vitro. In paper 2 entitled "Lipid metabolism and mitochondrial activity in bovine oocytes and embryos produced in vitro with different developmental kinetics", the lipid content, mitochondrial activity and H3K4 tri-methylation in bovine oocytes and embryos at different stages of development were analyzed and we conclude that the accumulation of lipids occurs in the first 4 hours of maturation in vitro of Bos taurus COCs. Fast blastocysts have a higher lipid content than the slow ones, without interference from mitochondrial activity in this stage. H3K4me3 appears to be essential for embryonic development, especially in regards to embryoblast cells, but this does not appear to mediate the speed of development and lipid metabolism.

LIPIDOGRAMA EM CÃES: O JEJUM É REALMENTE NECESSÁRIO?

A análise do perfil lipídico sérico têm ganhado mais atenção por parte dos clínicos veterinários. Ele consiste em mensurar os parâmetros de triglicerídios, colesterol total, lipoproteína de baixa densidade (LDL) e lipoproteína de alta densidade (HDL). Assim, o objetivo desta dissertação é explanar sobre o perfil lipídico e sua importância em cães e apresentando o resultado da pesquisa desenvolvida durante o período de mestrado. O estudo constituiu em avaliar os parâmetros de lipidograma de 32 cães em quatro momentos (horas): 1, 4, 8 e 12 pós-prandial. Os cães tinham entre dois a sete anos de idade, de ambos os sexos (machos inteiros e fêmeas em anestro), acima de 30 kg, das raças Fila Brasileiro n=11 (alimento seco comercial), Pastor Belga de Malinois n=10 (alimentos seco comercial e quirera de arroz) e Rottweiler n=11 (alimento super premium seco e pescoço de frango cru). A análise estatística utilizada foram os testes ANOVA, Shapiro-Wilk e Friedman com nível de significância de 5%. Com os resultados obtidos foi possível concluir que amostras sanguíneas de cães em jejum ou pós prandial permaneceram dentro dos valores de referências utilizadas mundialmente para cães.

The analysis of the serum lipid profile has gained more attention on the part of veterinary clinicians. It consists of measuring the parameters of triglycerides, total cholesterol, low density lipoprotein (LDL) and high density lipoprotein (HDL). Thus, the objective of this dissertation is to explain about the lipid profile and its importance in dogs and presenting the result of the research developed during the master's period. The study consisted of evaluating the lipid parameters of 32 dogs in four moments (hours): 1, 4, 8 and 12 postprandial. The dogs were between two and seven years old, of both sexes (whole males and females in anestrus), over 30 kg, of the Fila Brasileiro n = 11 (commercial dry food), Belgian Shepherd of Malinois n = 10 ( commercial dry food and rice cookers) and Rottweiler n=11 (super premium dry food and raw chicken neck). The statistical analysis used was the ANOVA, Shapiro-Wilk and Friedman tests with a significance level of 5%. With the results obtained it was possible to conclude that blood samples from dogs fasting or post prandial remained within the reference values used worldwide for dogs.

EXPRESSÃO GÊNICA EM EXPLANTES DE GLÂNDULA MAMÁRIA DE OVELHAS LACTANTES CULTIVADOS IN VITRO COM ÁCIDOS PALMÍTICO E ESTEÁRICO

BESSANI, D. T. C. EXPRESSÃO GÊNICA EM EXPLANTES DE GLÂNDULA MAMÁRIA DE OVELHAS LACTANTES CULTIVADOS IN VITRO COM ÁCIDOS PALMÍTICO E ESTEÁRICO. Dissertação (Mestrado em Ciência Animal Área: Produção Animal). Universidade do Estado de Santa Catarina. Programa de Pós-Graduação em Ciência Animal. Lages, 2020. O objetivo deste estudo foi verificar o efeito dos ácidos palmítico, esteárico e sua combinação na expressão de genes envolvidos na síntese lipídica em explantes de glândula mamária de ovelhas lactantes, cultivados in vitro. Foram utilizados explantes de tecido mamário de 3 ovelhas lactantes com partos gemelares, da raça Lacaune, com 30 (± 4) dias de lactação, produzindo em uma ordenha 1,3 ± 0,8 kg de leite/dia, peso vivo médio de 70,5 ± 9,5 kg e escore de condição corporal 3,0 ± 0,5. O cultivo foi feito em placas de 6 poços em estufa a 37°C com 5% deCO2 e com umidade saturada por 24h. Utilizou-se osseguintestratamentos: a) Controle: 6 ml de meio de cultivo + albumina sérica bovina (0,1% BSA); b) C16: 6 ml de meio de cultivo + 100M de ácido palmítico; c) C18: 6 ml de meio de cultivo + 100M de ácido esteárico; d) C16C18: 6 ml de meio de cultivo + 100M de ácido palmítico + 100M de ácido esteárico. Após as 24h de cultivo, os explantes foram retirados das placas e realizou-se a extração de RNA, síntese de DNA complementar e análise de PCR quantitativo em tempo real (RT-qPCR). Os dados foram analisados pelo software estatístico SAS através do procedimento MIXED, a um nível de 5% de significância e tendência quando entre 5 e 10%. O tratamento C16 aumentou a abundância do RNAm da SCD em 227,4% e reduziu em 50% a abundância do RNAm da AGPAT6 em relação ao Controle. O tratamento C16C18 aumentou a abundância do RNAm da FASN, CD36, FABP4, SCD, GPAT e PPAR- em 71,6, 111,7, 114,1, 218,6, 31,2 e 96,9%, respectivamente, em relação ao Controle. Concluindo, a adição do tratamento C16C18 em explantes de glândula mamária de ovelhas lactante, cultivados in vitro, foi capaz de aumentar a expressão dos genes envolvidos na síntese lipídica.

BESSANI, D. T. C. GENE EXPRESSION IN MAMMARY GLAND EXPLANTS OF LACTATING EWES CULTIVATED IN VITRO WITH PALMITIC AND STEARIC ACIDS. Dissertation (Master Degree in Animal Sciences Area: Animal Production). University of the State of Santa Catarina. Post-graduate Program in Animal Sciences. Lages, 2020. The objective of this study was to verify the effect of the palmitic and stearic acids, and their combination on the expression of genes involved in the lipid synthesis in mammary gland explants of lactating ewes cultivated in vitro. The mammary tissue explants from 3 lactating Lacaune ewes rearing twins, with 30 (± 4) days of lactation, to produce 1.3 ± 0.8 kg of milk / day, average live weight of 70, 5 ± 9.5 kg and body condition score 3.0 ± 0.5 were cultivated for 24 hours in 6-well plates in an oven at 37 ° C with 5% CO2 and saturated humidity. The treatments were: a) Control: 6 mL of culture medium + bovine serum albumin (0.1% BSA); b) C16: 6 mL of culture medium + 100M of palmitic acid; c) C18: 6 mL of culture medium + 100M of stearic acid; d) C16C18: 6 mL of culture medium + 100M palmitic acid + 100M stearic acid. After cultivating for 24 hours, the explants were removed from the plates, RNA was extracted, complementary DNA synthesized, and the quantitative real-time PCR analysis (RT-qPCR) performed. The data were analyzed using software SAS through the MIXED procedure at a level of 5% of significance and trend between 5 to 10%. The C16 treatment increased the abundance of SCD RNAm by 227.4% and reduced the abundance of AGPAT6 RNAm by 50% when relation to the control. In addition, the C16C18 treatment increased the abundance of FASN, CD36, FABP4, SCD, GPAT, and PPAR- mRNA by 71.6, 111.7, 114.1, 218.6, 31.2 and 96.9%, respectively, compared to the control treatment. Therefore, the addition of the C16C18 treatment in mammary gland explants of lactating ewes, cultivated in vitro, increased the expression of the genes involved in lipid synthesis.

Efeitos da L-Cartinina e de fontes lipídicas na dieta sobre o status antioxidante de matrizes e reprodutores de jundiá

Este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito de rações com inclusão de L-carnitina e diferentes fontes lipídicas, sobre parâmetros bioquímicos sanguíneos, atividade de enzimas do sistema antioxidante e a histologia de fígado e gônadas de matrizes e reprodutores de jundiá. Foram utilizados 360 machos e fêmeas de jundiá (167,33 ± 9,24 g), distribuídos em um delineamento experimental com estrutura bi-fatorial 4x2, sendo dietas contendo quatro níveis de inclusão de L-carnitina (0, 150, 450, 750 mg·kg-1 de ração) e duas fontes lipídicas (óleo de soja e óleo de peixe marinho), totalizando oito tratamentos com três repetições. Os peixes foram alimentados durante 153 dias com estas dietas, isoproteicas (36,2% de proteína bruta) e isoenergéticas (3.188,9 kcal de energia digestível·kg-1). Foram analisados glicose, triglicérideos, colesterol, lipoproteína de alta densidade (HDL), alanina aminotransferase (ALT), aspartato aminotransferase (AST) e albumina plasmáticos. No fígado e gônadas, foram analisadas a histologia e a atividade da superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT) e glutationa S-transferase (GST). Para as fêmeas, as dietas com 750 mg de L-carnitina proporcionaram maiores níveis de glicose. A dieta, com 450 mg de L-carnitina associada ao óleo de soja, levou a maiores níveis de triglicerídeos, colesterol, HDL, e maior atividade da SOD no fígado. A dieta, com 150 mg de L-carnitina + óleo de peixe, levou à menor ALT e maior albumina. Dietas com 150 mg de L-carnitina ocasionaram maior AST. A atividade da GST não foi diferente entre os tratamentos. Pela histologia dos ovários, todas as fêmeas estavam aptas a desovar, sem diferenças no percentual de ovócitos vitelogênicos. Os fígados apresentaram tecido hepático normal, sem presença de vacúolos. Para os machos, a dieta com 750 mg de L-carnitina + óleo de peixe levou à menor média de HDL e maiores glicose plasmática e atividade da SOD nos testículos. O maior nível de colesterol foi observado nas dietas contendo 150 mg de L-carnitina. As dietas contendo óleo de peixe proporcionaram animais com maiores médias para glicose, triglicerídeos, colesterol, ALT e albumina, e menor AST. Não houve efeito das dietas sobre a atividade das enzimas antioxidantes no fígado. Conforme análise histológica, todos os machos estavam aptos a espermiar, e no fígado não foi verificada a presença de vacúolos. Conclui-se que a suplementação de 450 mg de L-carnitina · kg-1 de ração, associada ao óleo de soja, pode alterar o metabolismo lipídico e influenciar positivamente o status antioxidante de fêmeas de jundiá, e a associação de 750 mg de L-carnitina · kg-1 de ração com o óleo de peixe, pode influenciar positivamente o status antioxidante de machos de jundiá.

This study aimed to evaluate the effect of diets with inclusion of L-carnitine and different lipid sources, on blood biochemical parameters, activity of antioxidant enzymes and the histology of liver and gonads of jundiá broodstocks. Males and females of jundiá (n=360; 167.33 ± 9.24 g) were distributed in a 4x2 bi-factorial experimental design, with diets containing four levels of inclusion of L-carnitine (0, 150, 450, 750 mg kg-1 feed) and two lipid sources (soybean oil and marine fish oil), totaling eight treatments with three repetitions. Fish were fed on these diets, isoproteic (36.2% crude protein) and isoenergetic (3,188.9 kcal digestible energy kg-1) for 153 days. Glucose, triglycerides, cholesterol, high-density lipoprotein (HDL), alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST) and plasma albumin were analyzed. Liver and gonads were analyzed for histology and activity of superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and glutathione S-transferase (GST). For females, diets with 750 mg L-carnitine resulted in higher levels of glucose. The diet with 450 mg L-carnitine combined with soybean oil led to higher levels of triglycerides, cholesterol, HDL, and higher SOD activity in the liver. The diet with 150 mg L-carnitine combined with fish oil led to lower ALT and higher albumin. Diets with 150 mg L-carnitine resulted in higher AST. GST activity was not different between treatments. According to the histology of the ovaries, all females were able to spawn, with no difference in the percentage of vitellogenic oocytes. Liver had normal liver tissue, without the presence of vacuoles. For males, the diet with 750 mg L-carnitine combined fish oil led to the lowest mean value of HDL and higher mean levels of plasma glucose and SOD activity in testicles. The highest cholesterol level was found with diets containing 150 mg L-carnitine. Diets containing fish oil provided animals with higher mean values for glucose, triglycerides, cholesterol, ALT and albumin, and lower AST. There was no effect of diets on the activity of antioxidant enzymes in the liver. According to histological analysis, all males were able to spermiate, and their liver cells showed no vacuoles. The supplementation with 450 mg L-carnitine kg-1 feed, combined with soybean oil, can alter the lipid metabolism and positively influence the antioxidant status of jundiá females, and the combination of 750 mg L-carnitine kg-1 feed and fish oil can positively influence the antioxidant status of jundiá males.

Soybean oil and calcium salts of fatty acids as fat sources for Holstein dairy cows in transition period

This study aimed to evaluate the effects of using different lipid sources in diets for dairy cows during the transition period and early lactation on productive performance and physiological parameters in Holstein cows. The cows were fed with the following diets: 1) control; 2) Refined soybean oil; 3) Calcium salts of unsaturated fatty acids (Megalac-E). Diets were formulated to meet the nutritional requirements of cows during the pre-partum and postpartum period. The experimental diets affected the dry matter intake, body weight, body condition score, and energy balance in the postpartum period. The experimental diets did not affect the biochemical parameters in serum: glucose, total protein, albumin, urea, serum urea nitrogen, total cholesterol, HDL-cholesterol, non-esterified fatty acids, -hydroxybutyrate, aspartate aminotransferase, -glutamyl transferase, alkaline phosphatase, also not being observed differences between the contrasts analyzed. The lipid sources soybean oil and calcium salts not directly influence the plasmatic physiological parameters of dairy cows in the period transition. But, fat supplementation in the transition period resulted in a better metabolic status and productive performance, mainly improving energy balance post-partum

Objetivou-se com este estudo avaliar os efeitos do uso de diferentes fontes de ácido graxo ômega 6 na dieta de vacas leiteiras no período de transição e início da lactação sobre o desempenho produtivo e bioquímico em vacas da raça Holandesa. As vacas foram alimentadas com as seguintes dietas: 1) controle, 2) óleo de soja refinado, 3) os sais de cálcio de ácidos graxos insaturados (Megalac-E). As dietas foram formuladas para atender às exigências nutricionais das vacas durante o período de pré-parto e pós-parto, dentro de cada grupo experimental. As dietas experimentais afetaram o consumo de matéria seca, o peso corporal, escore de condição corporal e equilíbrio de energia no período pós-parto. As dietas experimentais não afetaram os parâmetros bioquímicos no soro: glicose, proteína total, albumina, uréia, uréia sérica, colesterol total, HDL-colesterol, ácidos graxos não esterificados, -hidroxibutirato, aspartato aminotransferase, -glutamil transferase, fosfatase alcalina, também não sendo observadas diferenças entre os contrastes analisados. As fontes de ácido graxo ômega 6 não influenciaram diretamente o bioquímico de vacas leiteiras no período de transição.

INFLUÊNCIA DA SUPLEMENTAÇÃO COM ÓLEO DE AVOCADO (Persea americana Mill) NA TEMPERATURA SUPERFICIAL CORPÓREA DE EQUINOS SUBMETIDOS A EXERCÍCIO EM ESTEIRA

O cavalo atleta necessita de um sistema termorregulatório eficiente para garantir sua homeostasia e funções vitais. O nível de exigência das competições aumenta a cada dia, sendo necessário uma alta conversão energética para produção de trabalho, sem sobrecarga gástrica e com menor produção de calor metabólico. A inclusão de óleos na alimentação equina tem sido realizada neste intuito. Objetivou-se analisar a influência da suplementação com óleo de avocado na termorregulação de equinos submetidos a exercício em esteira, com base nas temperaturas retal e superficial corpórea. Oito equinos machos da raça Árabe, não treinados, foram distribuídos em delineamento randomizado cruzado, sendo um grupo sem suplementação (GC) e outro grupo suplementado com óleo de avocado (GOAv) por um período de seis semanas. Ao fim da sexta semana, os animais foram submetidos a teste padrão de exercício progressivo (TPEP) e após sete dias a teste de baixa intensidade e longa duração (BILD). Após o primeiro ciclo, houve período de descanso washout de 30 dias para troca de grupos para o segundo ciclo, que seguiu o protocolo do primeiro. A termorregulação foi avaliada com base na temperatura retal e na temperatura superficial corpórea, obtidas por termografia, de 15 regiões de interesse, sendo 10 na face dorsal distal do membro torácico, quatro na face caudal proximal dos membros pélvicos e uma na face lateral esquerda da cabeça. A temperatura retal e as imagens termográficas foram obtidas antes, um minuto e 15 minutos após o exercício. Não houve diferença entre os grupos GC e GOAv em nenhum momento. Os resultados obtidos neste estudo revelaram que a suplementação de 5% da MS com óleo de avocado por seis e sete semanas não influenciou na termorregulação com base na temperatura superficial corpórea dos equinos submetidos a teste padrão de exercício progressivo e exercício de baixa intensidade e longa duração, respectivamente.

The athletic horse needs an efficient thermoregulatory system to ensure its homeostasis and vital functions. The level of demands of the competitions increases every day, requiring a high energy conversion for work production, without gastric overload and with less metabolic heat production. The inclusion of oils in equine feed has been carried out for this purpose. The objective of this study was to analyze the influence of supplementation with avocado oil on the thermoregulation of horses submitted to treadmill exercise, based on rectal and body surface temperatures. Eight non-trained Arabian male equines were distributed in a randomized crossover design, one control group (CG) without supplementation and another group supplemented (SG) with avocado oil for a period of six weeks. At the end of the sixth week, the animals were submitted to standard exercise test (SET) and after seven days the low intensity test (LIT). After the first cycle, there was a 30-day washout rest period to exchange groups for the second cycle, which followed the protocol of the first one. Thermoregulation was evaluated based on rectal temperature and body surface temperature, obtained by thermography, of 15 regions of interest, ten of the dorsal distal aspect of the thoracic limb, four of the proximal caudal aspect of the pelvic limbs and one of the left lateral aspect of the head. Rectal temperature and thermographic images were obtained before, one minute and 15 minutes after exercise. There was no difference between the CG and SG at any time. The results obtained in this study revealed that the supplementation of 5% of DM with avocado oil for six and seven weeks did not influence the thermoregulation based on the body surface temperature of the horses submitted to SET and LIT, respectively.

EFEITOS FISIOPATOLÓGICOS DA INGESTÃO DE NOZ DA ÍNDIA (ALEURITES MOLUCCANA) EM RATOS WISTAR OBESOS E NÃO OBESOS

A Aleurites moluccana é uma planta medicinal utilizada popularmente para o tratamento de gastrite, febre, dores, diarreia, asma e inflamações, podendo ainda apresentar efeitos antibacterianos e antivirais. No Brasil, a planta também é conhecida por Nogueira de Iguapé ou Nogueira da Índia. Sua semente, denominada Noz da Índia (NI), vem sendo utilizada, com finalidades estéticas e de emagrecimento rápido, devido às suas supostas propriedades laxativas e diuréticas. Assim, objetivou-se com este estudo avaliar os efeitos fisiopatológicos do consumo da Noz da Índia por ratos Wistar. Esta dissertação está dividida em dois capítulos. No primeiro, realizou-se uma revisão sistemática em que se investigou os efeitos medicinais gerais da Aleurites moluccana. Foram selecionados 13 artigos por meio de uma pesquisa eletrônica nas bases de dados Pubmed, Scopus, Science Direct e Bireme, utilizando as palavras-chave Aleurites moluccana, function e effects. Verificou-se que a planta apresenta efeitos analgésicos, anti-inflamatórios, cicatrizantes e lipolíticos. A maior parte dos resultados foram provenientes de modelos experimentais com animais, sendo ainda a evidência científica insuficiente para indicação terapêutica específica para cada condição patológica. No segundo capítulo, são apresentados os resultados de ensaio experimental com 30 ratos machos Wistar que foram divididos em esquema fatorial 2x3 [(obeso ou não obeso e três tratamentos: sem NI, utilização da NI em esquema terapêutico popular (8 dias administração oral de 0,2 mg/kg seguidos de 20 dias com doses orais de 0,4 mg/kg), e utilização do dobro da dose do esquema terapêutico popular da NI (8 dias administração oral de 0,4 mg/kg seguidos de 20 dias com doses orais de 0,8 mg/kg - 2NI)]. O período experimental foi de 28 dias, sendo que a indução da obesidade foi realizada por meio de dieta de cafeteria durante 30 dias antes do início da terapia. Os animais que ingeriram Noz da Índia apresentaram quantidades menores de gordura visceral quando comparados aos controles. O percentual de gordura na carcaça também diminuiu à medida que se aumentou as concentrações de NI. Os níveis séricos de colesterol total, LDL-c, HDL-c, VLDL-c e triacilgliceróis tiveram seus valores reduzidos nos grupos que receberam NI e 2NI (p<0,05), bem como redução da glicemia (p<0,05). As concentrações plasmáticas de aspartato aminotransferase (AST) e gama glutamiltransferase (GGT) reduziram com a ingestão de NI e se elevaram no tratamento 2NI (p<0,05). Já os níveis plasmáticos da alanina aminotransferase (ALT) e os parâmetros relativos ao índice aterogênico não apresentaram diferença significativa entre os tratamentos (p>0,05). Concluiu-se que a Noz da Índia foi capaz de reduzir parâmetros relacionados à gordura corporal e lipídeos plasmáticos em ambas as doses empregadas, além de diminuir o grau de vaculolização hepática em animais obesos. Porém, a utilização da dose 2NI causou aparecimento de infiltrado monocuclear no tecido hepático e aumentou os valores de AST e GGT, sugerindo sobrecarga hepática.

Aleurites moluccana is a medicinal plant popularly used for the treatment of gastritis, fever, pain, diarrhea, asthma and inflammations, and it may have antibacterial and antiviral effects. In Brazil, the plant is also known as Nogueira de Iguapé; or Nogueira da India. Its seed, called Nuts of India, has been used for aesthetic and rapid weight loss purpose due to its supposed laxative and diuretic properties. Thus, the objective of this study was to evaluate the pathophysiological effects of Nut of India consumption on Wistar rats. This dissertation is divided into two chapters. In the first, a systematic review was carried out investigating the general medicinal effects of Aleurites moluccana. Thirteen articles were selected by means of an electronic search in the databases Pubmed, Scopus, Science Direct and Bireme, using the keywords Aleurites moluccana, function and effects. It has been found that the plant has analgesic, anti-inflammatory, healing and lipolytic effects. Most of the results came from experimental models with animals, and the scientific evidence is insufficient for specific therapeutic indications for each pathological condition. In the second chapter, we present the results of the experiment test with 30 male Wistar rats that were divided into a 2x3 factorial scheme [(obese or non-obese and three treatments: without NI, use of NI according to popular therapeutic scheme (8 days of oral administration of 0,2 mg/kg followed by 20 days with oral dosage of 0,4 mg/kg), and use of NI folded dosage of the popular therapeutic scheme (8 days of oral administration of 0,4 mg/kg followed by 20 days of oral dosage of 0,8 mg/kg 2NI). The experimental period was 28 days and obesity was induced through a cafeteria diet for 30 days prior to initiation of therapy. Animals that ingested Nut of India had less visceral fat when compared to the control groups. The percentage of fat in the carcass also decreased as the concentrations of Nut of India increased. The serum levels of total cholesterol, LDL-c, HDL-c, VLDL-c and triacylglycerols were reduced in the groups that received NI and 2NI (p<0.05), as well as glycemia (p<0.05). Plasma concentration of aspartate aminotransferase (AST) and gamma glutamyltransferase (GGT) decreased with NI intake and increased in 2NI treatment (p<0.05). Plasma levels of alanine aminotransferase (ALT) and the parameters related to the atherogenic index did not present significant difference among treatments (p>0,05). It has been concluded that the Nut of India was able to reduce parameters related to body fat and plasma lipids in both dosages used, in addition to decreasing the degree of hepatocyte vacuolation in obese animals. However, the use of 2NI dosage caused the appearance of mononuclear cell infiltration in the hepatic tissue and increased plasma levels of AST and GGT, suggesting hepatic overload.

EXPRESSÃO DE GENES E FATORES DE TRANSCRIÇÃO LIPOGÊNICOS EM EXPLANTES MAMÁRIOS DE OVELHAS LACTANTES CULTIVADOS IN VITRO COM ÁCIDO PALMÍTICO

A suplementação lipídica com ácido palmítico (C16:0), tem se mostrado eficiente em dar suporte à produção e aumentar o teor de gordura do leite. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do C16:0 na expressão de genes envolvidos na síntese de novo (ACC- PII, ACC- PIII e FASN), internalização (CD36), transporte intracelular (FABP 3 e 4) e dessaturação (SCD) de ácidos graxos, e também em um dos fatores de transcrição (PPAR-) envolvidos na regulação de enzimas envolvidas na síntese da gordura do leite. Foram realizados cultivos de explantes mamários de três ovelhas da raça Lacaune com 40 dias em lactação, obtidos através de biópsia. Os explantes foram cultivados por 24 horas, com os tratamentos: controle [meio de cultivo + albumina bovina (98%; BSA) a 75 M] e ácido palmítico [meio de cultivo + C16:0 (99%) a 75 M + albumina bovina (98%; BSA)]. Posteriormente foi extraído o RNA total, sintetizado o DNA complementar (cDNA) e realizada a análise quantitativa da reação em cadeia da polimerase em tempo real (RT-qPCR). Os dados foram analisados pelo programa estatístico SAS, utilizando o procedimento MIXED. O C16:0 aumentou, respectivamente, a expressão gênica da ACC- PIII, ACC- PII e FASN em 1,5, 1,3 e 1,3 vezes, quando comparado ao controle. A expressão gênica da CD36, FABP3, FABP4, SCD e PPAR- não sofreu efeito de tratamento. O aumento de ácidos graxos de cadeia curta e média observados na literatura pode justificar o aumento da expressão gênica das enzimas envolvidas na síntese de novo no presente estudo. O motivo pelo qual os genes envolvidos na via da captação de AG da circulação sanguínea não foram afetados pelo ácido palmítico não está claro.

Lipid supplementation with palmitic acid (C16:0) has been shown to increase milk production and milk fat content. The objective of this study was to evaluate the effect of C16:0 in the expression of genes involved in de novo synthesis (ACC- PII, ACC- PIII and FASN), internalization (CD36), intracellular transport (FABP 3 and 4) and fatty acids desaturation (SCD), and also in the transcription factor (PPAR-) involved in the regulation of genes involved in the milk fat synthesis. Mammary explants from three Lacaune ewes with 40 days in milk, obtained through biopsy were cultured for 24 hours with one of the following treatments: control [culture medium + bovine albumin (98%; BSA) at 75 M] and palmitic acid [culture medium + C16:0 (99%) at 75 M]. Subsequently, total RNA was extracted, complementary DNA (cDNA) was synthesized and carried out the real-time quantitative polymerase chain reaction analysis (RT-qPCR). The data were analyzed by the SAS statistical software, using the MIXED procedure. C16:0 increased, respectively, ACC- PIII, ACC- PII and FASN gene expression in 1.5, 1.3 and 1.3 fold, when compared to the control. The CD36, FABP3, FABP4, SCD and PPAR- gene expression had no treatment effect. The increase in short and medium-chain fatty acids observed in the literature may justify the increase in gene expression of the enzymes involved in de novo synthesis in the present study. The reason the genes involved in the FA uptake pathway from the bloodstream were not affected by palmitic acid is unclear.

AVALIAÇÃO DOS NÍVEIS DE COLESTEROL E TRIGLICERÍDEOS EM CÃES SAUDÁVEIS SUBMETIDOS A DIFERENTES TEMPOS DE JEJUM

PISANI, Rafaela Bruno Faria. Avaliação dos níveis de colesterol e triglicerídeos em cães saudáveis submetidos a diferentes tempos de jejum. 2017. Dissertação (Mestrado em Medicina Veterinária, Ciências Clínicas). Instituto de Veterinária. Departamento de Medicina e Cirurgia Veterinária. Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Seropédica, RJ, 2017. A dislipidemia é uma condição importante emergente nos cães da atualidade e é consequência do aumento na ingesta de gorduras alimentares ou decorrente de distúrbios endógenos no metabolismo lipídico. Tem sido considerada uma condição relativamente benigna na maioria dos casos, mas, evidências científicas sugerem que pode preceder doenças de importância clinica como pancreatite, resistência insulínica, e doença hepatobiliar. Seu correto diagnóstico é realizado através da dosagem de triglicerídeos e colesterol séricos com jejum alimentar adequado. O objetivo do trabalho foi avaliar a relação entre os diferentes tempos de jejum alimentar e análise da dosagem dos níveis de colesterol e triglicerídeos, uma vez que os tempos de jejum determinados para avaliação desses parâmetros, são baseados em estudos na espécie humana e erros na interpretação são comumente realizados. Foram utilizados 28 cães (14 machos e 16 fêmeas) oriundos do canil de Beagles do Laboratório de Quimioterapia Experimental em Parasitologia Veterinária (LQEPV) saudáveis (não obesos) com idades entre 1 a 6 anos e inteiros (não castrado). Foram coletadas amostras de sangue para análise de colesterol e triglicerídeos a cada 2 horas, iniciando com jejum alimentar de 6 horas e terminando com 16 horas. Não houve diferenças significativas na interpretação do tempo de coleta entre machos e fêmeas, logo possuem interpretações diferentes. O tempo de jejum indicado para avaliação de colesterol em fêmeas saudáveis foi de 10 horas, enquanto em machos 12 horas. Já para avaliação de triglicerídeos, o tempo de jejum indicado nas fêmeas foi de 14 horas e em machos deve ser a partir de 16 horas, considerando uma frequência de alimentação a cada 24 horas. Os valores médios de colesterol total com jejum de 6,8,10,12,14 e 16 horas, foi maior em fêmeas (179,6; 180,1;164,9; 162,5; 162,2; 162,5 mg/dL) do que em machos (165,1; 158,7; 146; 142,5; 140,5; 144,7 mg/dL) respectivamente, do mesmo modo, os valores de triglicerídeos com jejum de 6,8,10,12,14 e 16 horas, também foram maiores em fêmeas (176,7; 131,9; 91,5; 73,7; 50,7; 52,1; mg/dL) do que em machos (106,4; 72,6; 56,8; 44,8; 45,8; 37,6;mg/dL) respectivamente. Palavras-chave: metabolismo lipídico, jejum alimentar, dislipidemia

PISANI, Rafaela Bruno Faria. Evaluation of cholesterol and triglyceride levels in healthy dogs submitted to different fasting times. 2017. Dissertation (Master's Degree in Veterinary Medicine). Institute of Veterinary Medicine. Department of Medicine and Veterinary Surgery. Federal Rural University of Rio de Janeiro, Seropédica, RJ, 2017. Dyslipidemia is an important condition emerging in dogs today and is a consequence of the increase in dietary fat intake or due to endogenous disorders in lipid metabolism. It has been considered a relatively benign condition in most cases, but scientific evidence suggests that it may precede diseases of clinical importance such as pancreatitis, insulin resistance, and hepatobiliary disease. Its correct diagnosis is made through the dosage of serum triglycerides and cholesterol with adequate food fasting. The objective of this study was to evaluate the relationship between the different fasting times of food and analysis of the levels of cholesterol and triglycerides levels, since the fasting times determined for the evaluation of these parameters are based on studies in the human species and errors in the interpretation are commonly performed. Twenty-eight dogs (14 males and 16 females) from the Beagles kennel of the Laboratory of Experimental Chemotherapy in Veterinary Parasitology (LQEPV), healthy (non-obese), aged 1 to 6 years and intact (not castrated) were used. Blood samples were collected for analysis of cholesterol and triglycerides every 2 hours, starting with a 6-hour fasting and ending with 16 hours. It was concluded that there are significant differences in the interpretation of collection time between males and females, so they have different interpretations. The fasting time indicated for evaluation of cholesterol in healthy females was 10 hours, while in males 12 hours. For the evaluation of triglycerides, the fasting time indicated in females was 14 hours and in males should be from 16 hours, considering a frequency of feeding every 24 hours. The mean values of fasting total cholesterol of 6,8,10,12,14 and 16 hours were higher in females (179.6, 180.1, 164.9, 162.5, 162.2, 162.5 mg/dL) than in males (165.1, 158.7, 146, 142.5, 140.5, 144.7 mg/dL), similarly fasting triglyceride values of 6, 8,10,12,14 and 16 hours were also higher in females (176.7, 131.9, 91.5, 73.7, 50.7, 52.1, mg/dL) than in males (106.4, 72.6, 56.8, 44.8, 45.8, 37.6, mg/dL) respectively. Key words: lipid metabolism, fasting food, dyslipidemia

Níveis de ácido linoleico e ácido linolênico em dietas para tambaqui (Colossoma macropomum)

Os peixes, assim como os outros vertebrados, não são capazes de sintetizar de novo os ácidos graxos da série n-6 e n-3 e, consequentemente, requerem sua suplementação na dieta. Diferente dos peixes marinhos, os peixes tropicais de água doce apresentam exigência de ácidos graxos linoleico (LA, C18:2n-6) e linolênico (ALA, C18:3n-3), uma vez que são capazes de alongar e dessaturar esses precursores em compostos de maior valor biológico. O LA é precursor do ARA (C20:4n-6) e o ALA do EPA (C20:5n-3) e DHA (C22:6n-3), visto que esses ácidos graxos de 18 carbonos competem pelas mesmas alongases e dessaturases. Portanto, além do fornecimento de cada precursor separado, a relação entre eles é de grande importância. Além disso, os peixes estão entre as principais fontes de EPA e DHA, na nutrição humana, que são compostos, metabolicamente, essenciais e de grande importância à manutenção da saúde. Assim, objetivou-se avaliar o efeito da relação de ácidos graxos n-6/n-3 dietética no desempenho, parâmetros morfométricos, composição bromatológica, lipoproteínas plasmáticas, metabolismo energético e perfil de ácidos graxos no fígado e filé de tambaquis (Colossoma macropomum). Foi realizado um ensaio experimental, com dietas isoproteicas e isolipídicas, sendo seis dietas com diferentes relações LA/ALA (3,1; 3,8; 5,0; 7,2; 12,0; e 26,9) e uma dieta controle com óleo de peixe. Não foram observadas diferenças no desempenho, parâmetros morfométricos e nas lipoproteínas plasmáticas dos animais alimentados com as relações LA/ALA ou controle, exceto HDL-C, que foi menor na relação 3,8 que na 3,1 ou 5,0 (P<0,05). A glicemia foi maior nos peixes alimentados com a relação 7,2 (P<0,05). Além disso, observou-se um efeito no teor de glicose, no músculo dos tambaquis, sendo menor nos peixes alimentados com a relação 26,9 (P<0,05). As avaliações na composição demonstraram que a proteína na carcaça foi menor nos peixes alimentados com a dieta controle e relação 3.1 (P<0,05). De maneira geral, os ácidos graxos do fígado refletiram a composição de ácidos graxos da dieta. A relação LA/ALA afetou o perfil de ácidos graxos e a qualidade nutricional do filé de tambaqui. O teor de EPA diminuiu com o aumento da relação LA/ALA da dieta. A maior concentração de ARA, DHA e EPA+DHA, no filé, foi observada nos animais alimentados com a relação LA/ALA de 5,0 entre aqueles alimentados com óleo vegetal. Conclui-se que a relação LA/ALA de 5,0 é a melhor para juvenis de tambaqui, além de não afetar o desempenho ou metabolismo, tal relação melhora a qualidade nutricional do peixe para a alimentação humana.

Fish, like other vertebrates, are not able to synthesize fatty acids of the n-6 and n-3 series again, and require supplementation in their diet. Unlike marine fish, freshwater tropical fish demand linoleic (LA, C18:2n-6) and linolenic (ALA, C18:3n-3) fatty acids, since they are capable of elongate and desaturate these precursors to compounds with higher biological value. The LA is the precursor of ARA (C20:4n-6) and ALA precursor of EPA (C20:5n-3) and DHA (C22: 6n-3), and these precursors of 18 carbons compete for the same elongases and desaturates. Therefore, besides providing each separate precursor, the relation between them is of great importance. Furthermore, fish is among the main sources of EPA and DHA in human nutrition, which are metabolically essential compounds and of great importance in health maintenance. Thus, the objective was to evaluate the effect of the ratio of n-6/n-3 fatty acids dietary on performance, morphometric parameters, bromatological composition, plasma lipoproteins, energetic metabolism and fatty acid profile in liver and fillet of tambaqui (Colossoma macropomum). An experimental trial was conducted with iso-protein and iso-lipidic diets, in which six diets were with different ratios of LA/ALA (3.1; 3.8; 5.0; 7.2; 12.0; and 26.9) and a control diet with fish oil. There were no differences observed in performance, morphometric parameters and plasma lipoproteins of animals fed with the LA/ALA or control ratios, except HDL-C, which was lower in 3.8 ratio than in 3.1 or 5.0 (P<0.05). Blood glucose was higher in the fish fed with the 7.2 ratio (P<0.05). Furthermore, it was observed an effect on the glucose content in the muscle of tambaqui, being lower in fish fed with the 26.9 ratio (P<0.05). The measurements of composition showed that the protein in carcass was lower in fish fed with the control diet and 3.1 ratio (P<0.05). In general, the liver fatty acids reflected the composition of fatty acids of the diet. The LA/ALA ratio affected the fatty acid profile and the nutritional quality of tambaqui fillet. The EPA content decreased with the increase of LA/ALA ratio of the dietary. The higher concentration of ARA, DHA and EPA+DHA in the fillet was observed in animals fed with the LA/ALA ratio of 5.0, among the fish fed with vegetable oil. In conclusion, the 5.0 LA/ALA ratio is the best for young tambaqui, which besides not affecting performance or metabolism, this ratio improves the nutritional quality of fish for human consumption.

Controle molecular do consumo voluntário de ração, metabolismo lipídico e do sistema de defesa antioxidante em frangos de corte.

O consumo voluntário de ração é um processo que integra o sistema nervoso central e os tecidos periféricos do organismo, sendo influenciado basicamente por fatores inerentes aos animais como o sexo, a idade, e alguns neuropeptídios relacionados ao consumo de ração; e fatores externos, como a temperatura ambiental. Condições ambientais com altas temperaturas às quais as aves são expostas, e a maior deposição de gordura em detrimento à deposição de carne magra, são fatores que afetam o desenvolvimento dos animais. Nesse sentido, com este trabalho os nossos objetivos foram avaliar o efeito do sexo, da idade, do estresse térmico agudo e da suplementação de metionina sobre o desempenho, expressão de genes relacionados ao consumo, envolvidos no metabolismo lipídico, e genes relacionados ao sistema antioxidante em frangos. Para isto, no primeiro experimento, frangos de corte machos e fêmeas com 42 dias de idade, recebendo dieta formulada para atender as necessidades nutricionais, foram mantidos em conforto térmico ou expostos ao estresse térmico agudo (38C por 24 horas, iniciando aos 41 dias de idade). No segundo experimento, frangos de corte machos e fêmeas, de 1-21 e 22-42 dias de idade, recebendo dietas formuladas para atender as necessidades nutricionais, foram mantidos em ambiente com temperatura de conforto térmico. No terceiro experimento, frangos de corte de 1-21 e de 22-42 dias de idade foram divididos em dois tratamentos referentes à suplementação de metionina: sem suplementação de metionina (MD) e nível recomendado de metionina (MS). Um grupo de animais foi mantido em conforto térmico e o outro grupo de animais foi exposto ao estresse térmico agudo (38C por 24 horas, iniciando aos 20 ou aos 41 dias de idade, dependendo da fase experimental avaliada). Nestes experimentos, foram avaliados o desempenho e a expressão dos genes: neuropeptídeo Y (NPY), proteína quinase ativada por AMP subunidade -1 (AMPK-1), pró-ópiomelanocortina (POMC), grelina (GHRL), proteína quinase hepática B1 (LKB1), acetil-CoA-carboxilase (ACC),xv ácido graxo sintase (FAS), adiponectina (ADIPOQ), apolipoproteína A-I (APOA-I), apolipoproteína B (APOB), superóxido dismutase (SOD), tioredoxina (TRx), tioredoxina redutase (TRxR1), metionina sulfóxido redutase A (MsrA), catepsina L2 (CTSL2), além de alguns marcadores biológicos do estresse oxidativo. No primeiro trabalho, observamos que aves em estresse térmico reduziram o consumo de ração e apresentaram perda de peso significativa. Observamos ainda que machos apresentaram maior consumo de ração do que as fêmeas. O maior valor de expressão do gene NPY foi observado em machos em ambiente de conforto, e o menor valor em machos submetidos ao estresse térmico. Machos submetidos ao estresse térmico apresentaram maior valor de expressão do gene AMPK-1. Com relação à expressão do gene POMC, comparando animais que permaneceram em conforto térmico, observamos que fêmeas apresentaram maior expressão deste gene. Machos apresentaram maior nível de expressão do gene LKB1. Não foi observado nenhum efeito significativo sobre o gene da grelina (GHRL). Com relação ao metabolismo lipídico, comparando aves de 42 dias de idade, observamos que machos apresentaram maior consumo. Maior ganho de peso foi observado em machos e nos animais com 42 dias de idade. Fêmeas com 21 dias de idade apresentaram maior valor de expressão dos genes ACC, LKB1 e ADIPOQ. Em relação ao gene FAS, maior nível de expressão foi observado em machos com 21 dias de idade. Maior expressão do gene AMPK-1 foi observada nos machos e em animais com 21 dias de idade. A respeito da expressão do gene APOB, observamos maior expressão em fêmeas, e em aves com 42 dias de idade. A expressão do gene APOA-I foi maior em animais com 21 dias de idade. No experimento em que avaliamos os efeitos da suplementação da metionina e do estresse calórico agudo, observamos que o estresse térmico aumentou a temperatura corporal e reduziu o consumo de ração e o ganho de peso dos animais, entretanto animais na fase de crescimento sob condição de conforto térmico recebendo dieta MS apresentaram maior consumo de ração. Na fase de 1-21 e de 22-42 dias observamos que aves em estresse térmico recebendo dieta MD apresentaram maior valor de atividade da alanina aminotransferase (ALT). Na fase de 1- 21 dias observamos que o conteúdo de creatinina foi maior nas aves em conforto térmico recebendo dieta MD. Já o estresse térmico reduziu o conteúdo de ácido úrico, a atividade da enzima creatina quinase (CK), e aumentou a expressão do gene SOD. A suplementação de metionina, por sua vez, aumentou o conteúdo de ácido úrico e também a expressão do gene SOD. Em animais estressados pelo calor recebendo dieta MS, observamos maior valor de expressão dos genes TRxR1 e MsrA. Na fase de 22-42 xvi dias, observamos que aves expostas ao estresse térmico apresentaram maior valor de expressão dos genes SOD, TRxR1 e MrsA. Observamos menor atividade enzimática da creatina quinase (CK), maior atividade da aspartato aminotransferase (AST), maior conteúdo de creatinina plasmática e menor conteúdo de ácido úrico em animais estressados pelo calor. Aves recebendo dieta MS apresentaram maior valor de expressão dos genes SOD, TRxR1 e MsrA, e também menor valor de atividade da AST, maior valor de atividade da CK, e menor conteúdo de creatinina. O contéudo de homocisteína foi menor em aves estressadas pelo calor em ambas as fases avaliadas. Nossos resultados de forma conjunta nos permitem sugerir que alguns genes hipotalâmicos podem estar envolvidos nas diferenças observadas no consumo voluntário de ração entre animais de diferentes sexos e expostos a diferentes condições ambientais, e que o controle do consumo ocorre em função do balanço entre a ação de substâncias orexígenas e anorexígenas. Ainda contribui para caracterizar alguns dos mecanismos que diferenciam machos de fêmeas, e animais de 21 de animais de 42 dias no que se refere ao metabolismo lipídico. A maior deposição de gordura geralmente observada em fêmeas e em animais mais velhos pode decorrer da maior expressão de genes relacionados à síntese de lipídeos como a ACC, FAS e APOB. E animais que necessitam de maior aporte energético devido à maior taxa metabólica podem lançar mão de vias relacionadas à maior oxidação lipídica através da maior expressão dos genes LKB1, AMPK-1, e APOA-I. Suporta-se ainda a hipótese de que uma dieta suplementada com metionina pode atenuar os efeitos do estresse térmico sofridos pelos animais, por aumentar a capacidade antioxidante e por agir em via metabólica que promove o crescimento dos frangos.

Voluntary feed intake is a process that integrates the central nervous system and peripheral tissues, being influenced primarily by factors inherent to animals such as sex, age, and some neuropeptides; and external factors, such as the ambient temperature. Environmental conditions with high temperatures that birds are exposed to, and the greater fat deposition compared to lean meat, are factors that affect the development of animals. In this sense, by this work our main objective was to evaluate the effect of sex, age, acute heat stress and methionine supplementation on the performance, gene expression related to feed intake, involved in lipid metabolism, and antioxidant system related genes in broilers. For that, in the first experiment male and female broiler with 42 days of age, receiving diet formulated to meet the nutritional needs, were kept in thermal comfort or exposed to acute heat stress (38° C for 24 hours starting at 41 days of age). In the second experiment male and female broiler, 1-21 and 22-42 days of age, fed diets formulated to meet the nutritional needs were kept in an environment with a temperature of thermal comfort. In the third experiment broilers of 1-21 and 22-42 days of age were divided into two treatments regarding to methionine requeriment: without any methionine supplementation (MD) and recommended level of methionine (MS). One group of animals was kept under thermal comfort and another group of animals were exposed to heat stress (38ºC for 24 hours starting at 20 or at 41 days of age, depending on the assessed experimental phase). In these experiments, we evaluated performance, the gene expression of: neuropeptide Y (NPY), AMP-activated protein kinase subunit -1 (AMPK -1), pro-opiomelanocortin (POMC), ghrelin (GHRL), liver kinase B1 (LKB1), acetyl-CoA carboxylase (ACC), fatty acid synthase (FAS), adiponectin (ADIPOQ), apolipoprotein A-I (APOA-I), apolipoprotein B (APOB), superoxide dismutase (SOD), thioredoxin (TRx), thioredoxin reductase (TRxR1), methionine sulfoxide reductase A (MsrA), cathepsin L2 (CTSL2), besides a few xviii biological markers of oxidative stress. In the first work, we observed that birds under heat stress enviroment decreased its feed intake and showed significant weight loss. We still observed that males had higher feed intake than females. The greatest value of NPY gene expression was observed in males under thermal comfort, and the smallest value in males under thermal stress. Males under thermal stress had higher value of AMPK-1 gene expression. Regarding the expression of the POMC gene, comparing animals that remained in thermal comfort, we found that females had higher expression of this gene. Males had higher expression of LKB1 gene. There were no significant effect on ghrelin gene (GHRL). With respect to the lipid metabolism of 42-day-old broilers, males had higher feed intake. Greater weight gain was observed in males and in animals with 42- day-old. 21-day-old females had higher value of ACC, LKB1 and ADIPOQ expression. Considering FAS gene, higher level of expression was observed in males with 21 days of age. Greater AMPK-1 expression was observed in males and in birds with 21 days of age. Regarding to the APOB expression, we observed higher values for females, and in birds with 42 days of age. The APOA-I expression was higher at 21 days of age. In the experiment that we have evaluated the effects of supplementation and acute heat stress, we observed that high temperatures increased body temperature and reduced feed intake and weight gain of broilers, however animals on stage of growth under thermal comfort fed MS diet had higher feed intake. For the periods of 1 to 21 and 22 to 42 days we observed that birds in heat stress fed MD diet showed higher activity value for alanine aminotransferase (ALT). In the phase 1-21 days we observed that the creatinine content was higher in birds under thermal comfort and in birds fed MD diet. But thermal stress reduced the content of uric acid, the activity of creatine kinase (CK), and increased the SOD expression. Methionine supplementation increased the content of uric acid and the SOD expression. Broiler kept under heat stress fed MS diet, showed higher TRxR1 and MsrA genes expression. At phase 22-42 days of age we observed that birds under heat stress had higher expression values of SOD, TRxR1 and MrsA genes. We observed lower enzymatic activity of creatine kinase (CK), while aspartate aminotransferase (AST) activity was increased, as well as plasma creatinine, but uric acid values were smaller in birds under heat stress. Birds fed MS diet had higher value of SOD, TRxR1 and MsrA genes expression, lower values of AST activity, greater value of CK activity, and lower creatinine content. The homocysteine content was lower in heat stress birds in both phases. Our results jointly enable us to suggest that some hypothalamic genes may be involved in the observed differences in voluntary feed xix intake between animals of different sexes and exposed to different environmental conditions, and the control of intake is a function of the balance between orexigenic and anorectic action. Also contributes to characterize some of the mechanisms that differentiate males from females, and animals at 21 days old from animals at 42 days old in relation to lipid metabolism. The higher fat deposition usually observed in females and in older animals may result from increased expression of genes related to the synthesis of lipids such as ACC, FAS and APOB. And animals that need more energy intake due to the increased metabolic rate may resort pathways related to increased lipid oxidation through increased expression of LKB1 gene, AMPK-1 and APOA-I. It also supports the hypothesis that a diet supplemented with methionine can attenuate the effects of thermal stress suffered by the animals to increase the antioxidant capacity and act on metabolic pathways that promote the growth of chickens.

Caracterização molecular de ovócitos suínos de animais pré-púberes e púberes durante a maturação in vitro

Ovócitos de folículos antrais são dependentes de uma adequada regulação da expressão gênica para iniciar e completar seu processo de maturação. A maturação in vitro (MIV) é uma parte essencial da produção in vitro de embriões (PIVE). A qualidade dos ovócitos tem um papel essencial na produção e qualidade dos embriões resultantes, e a maturidade sexual da doadora é um fator que influencia as taxas de maturação. Este estudo teve como objetivo caracterizar o perfil de expressão de genes relacionados a apoptose, metabolismo lipídico e metilação do DNA e o perfil lipídico de ovócitos suínos de animais pré-púberes e púberes durante a maturação in vitro. Levando-se em consideração a maturidade sexual das fêmeas doadoras de ovócitos, as fêmeas púberes apresentaram melhores resultados tanto na recuperação como na maturação dos ovócitos (p<0,001, para ambas as analises). A quantidade de RNAm para o gene BAX foi diferente entre ovócitos imaturos e maturos in vitro de porcas, mostrando menor abundância relativa em imaturos (P = 0,09). Entre os genes relacionados ao metabolismo lipídico, o gene SLC27A4 apresentou menor abundância relativa de RNAm em ovócitos imaturos comparados com os maturos in vitro em porcas (P = 0,05). Os genes CPT2 e PLIN2 apresentaram níveis de RNAm mais baixos em ovócitos imaturos em comparação com ovócitos maturos in vitro em marrãs (P = 0,05; P = 0,02). Em relação aos genes relacionados à reprogramação da metilação do DNA, os genes DNMT3A eTET3 apresentaram níveis de RNAm mais baixos em ovócitos imaturos em relação aos maturos in vitro em marrãs (P = 0,02; P = 0,0005). Além disso, a expressão de TET3 também foi diferente nos ovócitos de porcas, mostrando níveis mais baixos nos ovócitos imaturos (P = 0,02). Diferente de todos outros genes, TET1 apresentou maior abundância relativa de RNAm em ovócitos imaturos em comparação com os ovócitos maturos in vitro em porcas (P = 0,05). Em relação ao perfil lipídico, houve uma aproximação dos perfis moleculares entre os ovócitos maturos de porcas e marrãs após o processo de maturação, com um agrupamento de lipídeos com massa superior a 700m/z que compõem uma faixa de fosfolipídios complexos. Com base em nossos resultados, podemos concluir que o armazenamento de RNAm materno (herança materna), importante para a ovogênese e para o desenvolvimento inicial do embrião, assim como uma reorganização da composição lipídica do ovócito, só são totalmente estabelecidos durante o final da ovogênese, dentro do processo de maturação do ovócito. Esse trabalho mostrou que mesmo ao final da ovogênese, com o ovócito totalmente crescido e dentro de um processo de divisão meiótica, ainda há eventos de transcrição gênica e tradução e uma grande reorganização de perfis lipídicos. Assim, é importante estudar os possíveis efeitos de diferentes sistemas de maturação in vitro sobre o estabelecimento final dos estoques maternos de RNAm e de lipídeos, essenciais ao correto desenvolvimento embrionário posterior. Finalmente, os genes que foram diferencialmente expressos durante a maturação in vitro, bem como o perfil lipídico dos ovócitos maturados, são potenciais candidatos para serem utilizados como marcadores moleculares para qualidade de ovócitos, subsidiando o desenvolvimento e adaptação de novos protocolos de maturação in vitro em mamíferos.

Oocytes from antral follicles are dependent on adequate gene expression regulation to initiate and to undergo oocyte maturation. In vitro maturation (IVM) is an essential part of the in vitro embryo production (IVP). The quality of oocytes plays an important role in determining the production and quality of the resulting embryos, and the sexual maturity of the donor is a factor that influences the maturation rate. This study aimed to characterize the expression profile of genes related to apoptosis, lipid metabolism and DNA methylation and the lipid profile in pig oocytes during in vitro maturation. Oocytes from gilts and sows were obtained from abattoirs and were matured in vitro. Regarding sexual maturity of females donors, oocytes from pubertal females showed better results both in recovery and maturation of oocytes (p<0.001 for both analyses. Considering the sexual maturity, comparing gene expression during in vitro maturation, the quantity of BAX mRNA was different between immature and in vitro matured oocytes from sows, showing lower relative abundance in immature ones (P=0.09). Among genes related to lipid metabolism, SLC27A4 showed lower relative abundance in immature compared to in vitro matured oocytes from sows (p = 0.05). CPT2 and PLIN2 genes showed lower levels in immature compared to in vitro matured oocytes from gilts (P=0.05;P=0.02). Regarding genes related to DNA methylation reprogramming, DNMT3A and TET3 showed lower levels in immature than in in vitro matured oocytes from gilts (P=0.02; P=0.0005); moreover, TET3 was different in oocytes from sows, showing lower levels in immature than in in vitro matured (P=0.02). Different of all other genes, TET1 showed higher relative abundance in immature oocytes compared to in vitro matured oocytes from sows (P=0.05). It was also observed, in relation to lipid profile, that there was an alignment between the mature oocyte of sows and gilts after the maturation process, with a group of lipids with mass greater than 700m/z, which comprise a range of complex phospholipids. Based on our results, we can conclude that the maternal mRNA storage, important to oogenesis and initial embryo development, is only totally established during the oocyte maturation. This work showed that even at the and of oogenesis, with fully grown oocyte within meiosis process, there is still gene transcription and translation events and a major lipid profiles reorganization. Thus, is important study the possible effects of different in vitro maturation systems in the final establishment of maternal mRNA and lipids stocks, which are essential to the correct subsequent embryonic development. Finally, the genes the genes were differentially expressed during in vitro maturation and the lipid profile of the maturated oocytes are potential candidates for use as molecular markers for oocyte quality, supporting the development and adaptation of new in vitro maturation protocols for mammals.

Efeito de tratamento cirúrgico sobre a atividade da enzima hepática lecitina: colesterol aciltransferase (LCAT) na esquistossomose mansônica

Schistosomiasis mansoni is a tropical disease and remains as an important public healthy problem in Northeast - Brazil, where it is highly endemic. This disease has the liver as the major focus of its histological lesions, physiopathological alterations and clinical manifestations. Previous studies have shown alteration on lipid metabolism in the hepatosplenic form of Schistosomiasis. One of the main alterations is the reduction on lecithin: cholesterol acyltransferase (LCAT) activity, an hepatic enzyme that catalyze the esterification of cholesterol in plasma In this work, we evaluate the LCAT activity in plasma from patients with hepatosplenic Schistosomiasis mansoni who were subjected to a new surgical treatment, which consists of splenectomy followed by auto-transplantation of spleen tissue. LCAT activity was detected by using a radioactive substrate. Both [14C]free and esterified cholesterol produced by the LCAT reaction were separated by thin layer chromatography, and the sample radioactivity was counted in a liquid scintilation analyzer. LCAT activity from plasma of patients subjected to splenectomy and spleen tissue implantation were reduced by 32 %, in comparison to the control group. However, in Schistosoma mansoni patients who were only clinically treated the reduction on LCAT activity was twice (64%) as much as that found in plasma of patients subjected to splenectomy and spleen tissue implantation. These results suggest a significant improvement on LCAT activity after the surgical treatment of patients with the hepatosplenic form of Schistosomiasis mansoni.

A esquistossomose mansônica é uma doença tropical que constitui um importante problema de saúde pública, na Região Nordeste do Brasil, onde é encontrada em alta endemicidade. Essa parasitose tem o fígado como principal alvo de suas lesões histológicas, alterações fisiopatológicas e manifestações clínicas. Estudos anteriores reportam alterações no metabolismo lipídico associadas à forma hepatoesplênica da esquistosomose.Uma das principais alterações consiste na redução da atividade da enzima hepática LCAT, responsável pela esterificação do colesterol no plasma. Neste trabalho, avaliamos a atividade da LCAT no plasma de pacientes portadores da esquistossomose mansônica hepatoesplênica, os quais foram submetidos a esplenectomia e reimplante de parte de tecido do baço. A atividade enzimática da LCAT foi determinada com substrato radioativo. O [14C]colesterol livre e esterificado, formados por ação da LCAT, foram separados por cromatografia em camada delgada e a radioatividade das amostras foi contada em analisador de cintilação líquida. A atividade da LCAT nos pacientes submetidos a esplenectomia e reimplante de tecido do baço apresentou redução de 32 %, em relação ao grupo controle. Contudo, nos portadores da doença que não foram submetidos ao procedimento cirúrgico a redução na atividade da LCAT foi o dobro (64%) da observada em pacientes esplenectomizados e com reimplante de parte do tecido do baço. Esses resultados sugerem haver uma melhora significativa no efeito da forma grave da esquistossomose mansônica sobre a atividade da LCAT.

Efeito de tratamento cirúrgico sobre a atividade da enzima hepática lecitina: colesterol aciltransferase (LCAT) na esquistossomose mansônica

Schistosomiasis mansoni is a tropical disease and remains as an important public healthy problem in Northeast - Brazil, where it is highly endemic. This disease has the liver as the major focus of its histological lesions, physiopathological alterations and clinical manifestations. Previous studies have shown alteration on lipid metabolism in the hepatosplenic form of Schistosomiasis. One of the main alterations is the reduction on lecithin: cholesterol acyltransferase (LCAT) activity, an hepatic enzyme that catalyze the esterification of cholesterol in plasma In this work, we evaluate the LCAT activity in plasma from patients with hepatosplenic Schistosomiasis mansoni who were subjected to a new surgical treatment, which consists of splenectomy followed by auto-transplantation of spleen tissue. LCAT activity was detected by using a radioactive substrate. Both [14C]free and esterified cholesterol produced by the LCAT reaction were separated by thin layer chromatography, and the sample radioactivity was counted in a liquid scintilation analyzer. LCAT activity from plasma of patients subjected to splenectomy and spleen tissue implantation were reduced by 32 %, in comparison to the control group. However, in Schistosoma mansoni patients who were only clinically treated the reduction on LCAT activity was twice (64%) as much as that found in plasma of patients subjected to splenectomy and spleen tissue implantation. These results suggest a significant improvement on LCAT activity after the surgical treatment of patients with the hepatosplenic form of Schistosomiasis mansoni.

A esquistossomose mansônica é uma doença tropical que constitui um importante problema de saúde pública, na Região Nordeste do Brasil, onde é encontrada em alta endemicidade. Essa parasitose tem o fígado como principal alvo de suas lesões histológicas, alterações fisiopatológicas e manifestações clínicas. Estudos anteriores reportam alterações no metabolismo lipídico associadas à forma hepatoesplênica da esquistosomose.Uma das principais alterações consiste na redução da atividade da enzima hepática LCAT, responsável pela esterificação do colesterol no plasma. Neste trabalho, avaliamos a atividade da LCAT no plasma de pacientes portadores da esquistossomose mansônica hepatoesplênica, os quais foram submetidos a esplenectomia e reimplante de parte de tecido do baço. A atividade enzimática da LCAT foi determinada com substrato radioativo. O [14C]colesterol livre e esterificado, formados por ação da LCAT, foram separados por cromatografia em camada delgada e a radioatividade das amostras foi contada em analisador de cintilação líquida. A atividade da LCAT nos pacientes submetidos a esplenectomia e reimplante de tecido do baço apresentou redução de 32 %, em relação ao grupo controle. Contudo, nos portadores da doença que não foram submetidos ao procedimento cirúrgico a redução na atividade da LCAT foi o dobro (64%) da observada em pacientes esplenectomizados e com reimplante de parte do tecido do baço. Esses resultados sugerem haver uma melhora significativa no efeito da forma grave da esquistossomose mansônica sobre a atividade da LCAT.

Estudo de parâmetros bioquímicos de cães relacionando com condição corporal, jejum e alimentação

O objetivo deste trabalho foi estudar os parâmetros bioquímicos metabólicos de cães relacionando com condição corporal, jejum e alimentação. Para avaliação da glicemia, com glicosímetro digital, foi utilizada uma gota de sangue capilar e venoso, enquanto que para dosagem pelo método enzimático foi utilizado sangue venoso. Para estudar a curva metabólica foram realizadas coletas sanguíneas em jejum e 0:30, 1:00, 1:30, 3:00, 6:00, 9:00 e 12:00 horas após o fornecimento de ração industrial premium. As análises laboratoriais foram feitas por determinação enzimática através da colorimetria. Para relacionar os escores corporais com a morfometria canina, definimos o escore corporal, o índice de massa corporal (IMC) e as médias das dobras cutâneas na região do gradil costal direito, do peitoral e da base da cauda. Além disso, medimos a razão entre as circunferências torácica e inguinal. Para comparar os escores corporais com o metabolismo de carboidratos e lipídios os cães foram classificados em peso ideal, sobrepeso e obeso. Mensurou-se a glicemia, o colesterol total e frações, e os triglicerídeos. Os valores médios da glicemia, obtida por glicosímetro portátil, de sangue capilar e venoso foram, respectivamente, 84,60 mg/dl (± 11,15) e 76,65 mg/dl (± 10,73), enquanto que pelo método enzimático laboratorial foi 80,7 mg/dL (± 9,97), não sendo demonstradas diferenças estatísticas. Em relação à curva metabólica, a glicemia apresentou diferença estatística entre a coleta de jejum e 1:00 e 1:30 enquanto que a fração VLDL (very low density lipoprotein) e o triglicerídeo apresentaram diferença entre a coleta realizada à 1:00 e 12:00 após a alimentação. Os demais parâmetros avaliados não apresentaram variações estatísticas significativas. O pico glicêmico ocorreu 1:30, e dos triglicerídeos ocorreu 1:00 após a alimentação, os demais parâmetros não sofreram mudanças significativas. Os cães com peso ideal, sobrepeso e obesos apresentaram, respectivamente, os seguintes valores médios: IMC = 14,4 kg/m², 16,7 kg/m² e 21,5 kg/m²; dobras cutâneas = 0,8 cm, 1,2 cm e 1,8 cm; e razão entre circunferências = 1,2 cm, 1,1 cm e 1,0 cm. Foram demonstradas diferenças estatísticas (p=0,001) em relação ao IMC, média das dobras cutâneas e razão entre circunferências entre cães com peso ideal e obesos. Os valores da fração VLDL e os triglicerídeos diferiram estatisticamente (p=0,02) nos cães com sobrepeso e obesos, não havendo diferenças nos demais parâmetros analisados. Conclui-se que as médias dos valores da glicemia capilar e venosa aferidas por glicosímetro digital são próximas, enquanto que o valor médio obtido pelo método laboratorial ficou na faixa intermediária dos obtidos pelo glicosímetro. Os níveis glicêmicos, da fração VLDL e dos triglicérides, são alterados após a alimentação, enquanto os demais parâmetros analisados (colesterol total e frações HDL e LDL) não. O IMC de cães com peso ideal varia de 5,5 a 25 kg/m², dobras cutâneas 0,30 a 1,66 cm, razão entre circunferências 1,10 a 1,59 cm. Para cães com sobrepeso o IMC varia de 9,0 a 25,1 kg/m²; as dobras cutâneas de 0,6 a 2,36 cm e a razão das circunferências de 1,0 a 1,36 cm. Finalmente, os cães obesos apresentaram os seguintes valores são: 12,5 a 35,3 kg/m²; 0,7 a 3,4 cm e 0,89 a 1,1 cm. O aumento de peso e obesidade em cães estão relacionados com o aumento dos valores de triglicerídeos e da fração VLDL, mas não com aumento dos valores glicêmicos, do colesterol total e frações HDL e LDL