Dry-eye syndrome in Shih Tzu dog: Ocular surface clinical and morphological aspects in the different stages of keratoconjunctivitis sicca / Síndrome do olho seco em Shih Tzu: aspectos clínicos e morfológicos da superfície ocular nas diferentes fases da ceratoconjuntivite seca

ABSTRACT: This study analyzed clinical and cyto-histomorphological parameters of the ocular surface of Shih Tzu dogs, non-carriers and carriers of quantitative keratoconjunctivitis sicca (KCS) at different stages. Thirty-five eyes from 23 male and female Shih Tzu dogs between two and eight years were evaluated in four groups: control group (CG - without KCS), mild KCS group (KCS1), moderate KCS group (KCS2), and severe KCS group (KCS3). Most clinical variables among KCS carrier groups worsened at the more advanced stages of the disease, with a negative correlation between the Schirmer tear test (STT-1) and tear film break-up time (TBUT). Squamous metaplasia, lymphoplasmacytic inflammatory infiltrate, and decrease in conjunctival goblet cells on histopathological examination comprised disease severity parameters. Quantitative KCS non-carried Shih Tzu dogs have qualitative and tear film distribution changes. The cytomorphological exam is limited to evaluating the inflammatory infiltrate and quantifying conjunctival goblet cells. However, intermediate epithelial cells were higher in healthy eyes compared to eyes with KCS in Shih Tzu dogs. Also, moderate and severe KCS carrier Shih Tzu dogs have qualitative dysfunction of the tear film. KCS in Shih Tzu dogs is common and chronic and may be responsible for the loss of vision of these animals. Early identification of the disease and routine evaluation can improve these dogs' quality of life and ocular health.

RESUMO: Este estudo analizou os parâmetros clinicos e cito-histomorfológicos da superfície ocular de cães da raça Shih Tzu, portadores e não portadores de ceratoconjuntivite seca quantitative (CCS) em diferentes estágios. Trinta e cinco olhos de 23 cães da raça Shih Tzu, machos e fêmeas, entre as idades de dois e oito anos foram avaliados em quatro grupos: grupo controle (GC - sem CCS), grupo CCS inicial (CCS1), grupo CCS moderada (CCS2) e grupo CCS severa (CCS3). A maioria das variáveis clínicas dentro os grupos portadores de CCS pioraram a medida que os estágios da doença avançam, com correlações negativas entre o teste lacrimal de Schirmer (TLS) e o tempo de ruptura do filme lacrimal (TRFL). Metaplasia escamosa, infiltrado inflamatório linfoplasmocítico e diminuição das células caliciformes no exame histopatológico compreenderam parâmetros de severidade da doença. Cães Shih Tzu não portadores de CCS quantitativa tem alterações qualitativas e na distribuição do filme lacrimal. O exame citomorfológico é limitado para a avaliação do infiltrado inflamatório e quantificação de células caliciformes. Entretanto, células inermediárias epiteliais são mais presents nos olhos saudáveis quando comparados aos olhos portadores de CCS em Shih Tzus. Também, Shih Tzus portadores de CCS nos estágios moderados e severos possuem disfunções qualitativas da lágrima. A CCS em Shih Tzu é comum, crônica e pode ser responsável pela perda de visão dos animais. A identificação precoce da doença e avaliações rotineiras podem aumentar a qualidade de vida e a saúde ocular nesses cães.

Deep anterior lamellar keratoplasty (DALK) as a treatment of a deep stromal ulcer in a dog: case report / Ceratoplastia lamelar anterior profunda(DALK) como tratamento de úlcera estromal profunda em cão: relato de caso

Characterized by the rupture of the corneal epithelium, corneal ulcers threaten ocular integrity, with multifactorial development, such as decreased protection and excessive abrasion applied to the corneal surface. Keratoplasty restores the corneal anatomy, removing the inflamed or infected tissues, in order to promote visual acuity. The technique of deep anterior lamellar keratoplasty (DALK) selectively removes the diseased layers of the cornea, keeping the Descemet membrane and endothelium healthy, reducing the risk of rejection, aimed at tissue recovery. In the present report, a canine, from the Shih Tzu breed, a female, that has not been castrated, 2 years and 6 months old, was treated, she had a history of ocular discomfort and mucous secretion in both eyes. In the ophthalmic examination, keratoconjunctivitis sicca was found in the left eye and ectopic cilia was found in both eyes. With the aid of a fluorescein test, the presence of a deep stromal ulcer affecting the right eye was confirmed. The patient underwent ectopic cilia removal using the wedge resection technique and an allogeneic corneal transplantation using DALK, with only the diseased epithelium and stroma being replaced, reducing the risk of rejection and failures related to surgery. 90 days after the procedure, there was no reaction to the graft, there was complete epithelial repair and maintenance of

Caracterizada pela ruptura do epitélio corneano, as úlceras de córnea ameaçam a integridade ocular, tendo desenvolvimento multifatorial, como a diminuição da proteção e o excesso de abrasão aplicado na superfície da córnea. A ceratoplastia restaura a anatomia corneana, removendo tecidos inflamados ou infectados, com objetivo de promover acuidade visual. A técnica de ceratoplastia lamelar anterior profunda (DALK -deep anterior lamelar keratoplasty) remove seletivamente as camadas doentes da córnea, mantendoa membrana de Descemet e endotélio saudáveis, reduzindo o risco de rejeição, visando recuperação tecidual. No presente relato, um canino, raça Shih Tzu, fêmea não castrada, 2 anos e 6 meses de idade, foi atendido com histórico de desconforto ocular e secreção mucosa em ambos os olhos. No exame oftálmico constatou-se ceratoconjuntivite seca no olho esquerdo e cílios ectópicos em ambos os olhos. Com auxílio do teste de fluoresceína, confirmou-se a presença de úlcera estromal profunda acometendo o olho direito. O paciente foi submetido a remoção dos cílios ectópicos pela técnica de secção em cunha e ao transplante de córnea alógena utilizando a DALK, sendo substituído apenas o epitélio e estroma doentes, reduzindo o risco de rejeição e falhas relacionadas a cirurgia. Após 90 dias do procedimento, constatou-se ausência de reação ao enxerto, completa reparação epitelial e manutenção da função visual com discreta opacidade corneana.

Deep anterior lamellar keratoplasty (DALK) as a treatment of a deep stromal ulcer in a dog: case report / Ceratoplastia lamelar anterior profunda(DALK) como tratamento de úlcera estromal profunda em cão: relato de caso

Characterized by the rupture of the corneal epithelium, corneal ulcers threaten ocular integrity, with multifactorial development, such as decreased protection and excessive abrasion applied to the corneal surface. Keratoplasty restores the corneal anatomy, removing the inflamed or infected tissues, in order to promote visual acuity. The technique of deep anterior lamellar keratoplasty (DALK) selectively removes the diseased layers of the cornea, keeping the Descemet membrane and endothelium healthy, reducing the risk of rejection, aimed at tissue recovery. In the present report, a canine, from the Shih Tzu breed, a female, that has not been castrated, 2 years and 6 months old, was treated, she had a history of ocular discomfort and mucous secretion in both eyes. In the ophthalmic examination, keratoconjunctivitis sicca was found in the left eye and ectopic cilia was found in both eyes. With the aid of a fluorescein test, the presence of a deep stromal ulcer affecting the right eye was confirmed. The patient underwent ectopic cilia removal using the wedge resection technique and an allogeneic corneal transplantation using DALK, with only the diseased epithelium and stroma being replaced, reducing the risk of rejection and failures related to surgery. 90 days after the procedure, there was no reaction to the graft, there was complete epithelial repair and maintenance of(AU)

Caracterizada pela ruptura do epitélio corneano, as úlceras de córnea ameaçam a integridade ocular, tendo desenvolvimento multifatorial, como a diminuição da proteção e o excesso de abrasão aplicado na superfície da córnea. A ceratoplastia restaura a anatomia corneana, removendo tecidos inflamados ou infectados, com objetivo de promover acuidade visual. A técnica de ceratoplastia lamelar anterior profunda (DALK -deep anterior lamelar keratoplasty) remove seletivamente as camadas doentes da córnea, mantendoa membrana de Descemet e endotélio saudáveis, reduzindo o risco de rejeição, visando recuperação tecidual. No presente relato, um canino, raça Shih Tzu, fêmea não castrada, 2 anos e 6 meses de idade, foi atendido com histórico de desconforto ocular e secreção mucosa em ambos os olhos. No exame oftálmico constatou-se ceratoconjuntivite seca no olho esquerdo e cílios ectópicos em ambos os olhos. Com auxílio do teste de fluoresceína, confirmou-se a presença de úlcera estromal profunda acometendo o olho direito. O paciente foi submetido a remoção dos cílios ectópicos pela técnica de secção em cunha e ao transplante de córnea alógena utilizando a DALK, sendo substituído apenas o epitélio e estroma doentes, reduzindo o risco de rejeição e falhas relacionadas a cirurgia. Após 90 dias do procedimento, constatou-se ausência de reação ao enxerto, completa reparação epitelial e manutenção da função visual com discreta opacidade corneana.(AU)

Evaluation of equine corneal endothelium after exposure to 0. 05% brilliant blue - an in vitro study / Avaliação do endotélio corneano de equinos após contato com o corante azul brilhante 0, 05% - estudo in vitro

The aim of this study was to evaluate the immediate effects of 0.05% brilliant blue on corneal endothelium of horses. Thirty-eight corneas of 19 horses, male or female, of different ages were studied. Corneas were randomly divided into two groups. Group 1: Corneal endothelium was covered with 0.3mL of brilliant blue 0.05% for 60 seconds followed by rinsing with a balanced salt solution. Group 2: Corneal endothelium was covered with BSS for 60 seconds. The corneas were excised with an 8mm trephine and prepared to analyze posterior endothelial surface using a light microscope (24 corneas) and a scanning electron microscope (14 corneas). The equine posterior corneal endothelium surface observed by optical microscopy and scanning electron microscopy revealed a continuous layer of polygonal cells of uniform size and shape in both the control and treatment groups. Due to non-normal residuals at ANOVA mean comparison, a generalized linear model was utilized at 5% level of significance. The chi-square test stated that treatment and control group were not different statistically. The 0.05% brilliant blue did not cause damage to equine corneal endothelium.(AU)

Objetivou-se avaliar os efeitos imediatos de uma solução de 0,05% de azul brilhante sobre o endotélio da córnea de equinos. Trinta e oito córneas de 19 cavalos, machos ou fêmeas, de diferentes idades foram estudadas. As córneas foram divididas aleatoriamente em dois grupos. Grupo 1: O endotélio corneano foi perfundido com 0,3mL de azul brilhante 0,05% durante 60 segundos seguido por irrigação com uma solução salina balanceada. Grupo 2: O endotélio corneano foi perfundido com BSS durante 60 segundos. As córneas foram posteriormente excisadas com trépano de 8mm e preparadas para análise endotelial utilizando um microscópio óptico (24 córneas) e um microscópio eletrônico de varredura (14 córneas). A análise da superfície posterior do endotélio da córnea equina observada por microscopia óptica e microscopia eletrônica de varredura revelou uma camada contínua de células poligonais de tamanho e forma uniformes tanto no grupo controle quanto no grupo tratamento. Devido aos resíduos não normais na comparação da média de ANOVA, utilizou-se um modelo linear generalizado com nível de significância de 5%. Evidenciou-se com o teste qui-quadrado que não houve diferença estatística entre o grupo controle e o grupo tratamento. O azul brilhante de 0,05% não causou dano ao endotélio corneano de equinos.(AU)

Evaluation of equine corneal endothelium after exposure to 0. 05% brilliant blue - an in vitro study / Avaliação do endotélio corneano de equinos após contato com o corante azul brilhante 0, 05% - estudo in vitro

The aim of this study was to evaluate the immediate effects of 0.05% brilliant blue on corneal endothelium of horses. Thirty-eight corneas of 19 horses, male or female, of different ages were studied. Corneas were randomly divided into two groups. Group 1: Corneal endothelium was covered with 0.3mL of brilliant blue 0.05% for 60 seconds followed by rinsing with a balanced salt solution. Group 2: Corneal endothelium was covered with BSS for 60 seconds. The corneas were excised with an 8mm trephine and prepared to analyze posterior endothelial surface using a light microscope (24 corneas) and a scanning electron microscope (14 corneas). The equine posterior corneal endothelium surface observed by optical microscopy and scanning electron microscopy revealed a continuous layer of polygonal cells of uniform size and shape in both the control and treatment groups. Due to non-normal residuals at ANOVA mean comparison, a generalized linear model was utilized at 5% level of significance. The chi-square test stated that treatment and control group were not different statistically. The 0.05% brilliant blue did not cause damage to equine corneal endothelium.(AU)

Objetivou-se avaliar os efeitos imediatos de uma solução de 0,05% de azul brilhante sobre o endotélio da córnea de equinos. Trinta e oito córneas de 19 cavalos, machos ou fêmeas, de diferentes idades foram estudadas. As córneas foram divididas aleatoriamente em dois grupos. Grupo 1: O endotélio corneano foi perfundido com 0,3mL de azul brilhante 0,05% durante 60 segundos seguido por irrigação com uma solução salina balanceada. Grupo 2: O endotélio corneano foi perfundido com BSS durante 60 segundos. As córneas foram posteriormente excisadas com trépano de 8mm e preparadas para análise endotelial utilizando um microscópio óptico (24 córneas) e um microscópio eletrônico de varredura (14 córneas). A análise da superfície posterior do endotélio da córnea equina observada por microscopia óptica e microscopia eletrônica de varredura revelou uma camada contínua de células poligonais de tamanho e forma uniformes tanto no grupo controle quanto no grupo tratamento. Devido aos resíduos não normais na comparação da média de ANOVA, utilizou-se um modelo linear generalizado com nível de significância de 5%. Evidenciou-se com o teste qui-quadrado que não houve diferença estatística entre o grupo controle e o grupo tratamento. O azul brilhante de 0,05% não causou dano ao endotélio corneano de equinos.(AU)

Identificação de Neospora caninum por PCR em cordão umbilical de bezerros recém nascido no Brasil / PCR-based identification of Neospora caninum in the umbilical cord of a newborn calf in Brazil

This study was conducted at a beef cattle breeding farm in the far southern region of Brazil. The birth of a calf with unilateral corneal opacity was immediately reported to the Laboratory of Parasitology, in the Universidade Federal de Pelotas, Rio Grande do Sul, Brazil; blood was collected from the cow and calf before colostrum intake. The umbilical cords from this calf and from six other healthy animals were collected. Serological examination, utilizing an indirect fluorescent antibody test, was done using a cut-off point of 1:100. Polymerase chain reaction (PCR) was also performed using the umbilical cord samples. Serological tests showed that the calf was positive for Neospora caninum at birth, with a titer of 1:1600; a titer of 1:3200 was reported in the dam. PCR, using umbilical cord tissue from the affected animal, was positive for the presence of this parasite, and the molecular identity of the amplified product was confirmed by sequencing. Therefore, the detection of N. caninum DNA in the umbilical cord represents a novel alternative test for the diagnosis of this parasitic infection in newborn calves that are clinically suspected to have neosporosis.

O estudo foi realizado em uma fazenda de criação de gado de corte na região do extremo sul do Brasil. O nascimento de um bezerro com opacidade unilateral da córnea foi imediatamente relatado ao Laboratório de Parasitologia da Universidade Federal de Pelotas (RS) e coletou-se sangue da vaca e do bezerro antes da ingestão do colostro. Foram coletados sangue e cordão umbilical do bezerro com opacidade na córnea bem como de outros seis bezerros aparentemente saudáveis antes da ingestão de colostro. Foram realizados exames sorológicos utilizando o teste indireto de anticorpos fluorescentes (IFAT) com ponto de corte de 1: 100 e reação em cadeia da polimerase (PCR). O resultado dos exames sorológicos mostraram que o bezerro foi positivo para N. caninum ao nascer com titulação de 1:1600 e o de sua mãe foi de 1:3200 na IFAT. A PCR do cordão umbilical foi positiva para o agente no animal com opacidade córnea unilateral e a identidade molecular do produto amplificado foi confirmada por sequenciamento. A detecção de DNA de N. caninum no cordão umbilical é uma nova alternativa para o diagnóstico deste agente em bezerros recém-nascidos com suspeita clínica de neosporose.

Identificação de Neospora caninum por PCR em cordão umbilical de bezerros recém nascido no Brasil / PCR-based identification of Neospora caninum in the umbilical cord of a newborn calf in Brazil

This study was conducted at a beef cattle breeding farm in the far southern region of Brazil. The birth of a calf with unilateral corneal opacity was immediately reported to the Laboratory of Parasitology, in the Universidade Federal de Pelotas, Rio Grande do Sul, Brazil; blood was collected from the cow and calf before colostrum intake. The umbilical cords from this calf and from six other healthy animals were collected. Serological examination, utilizing an indirect fluorescent antibody test, was done using a cut-off point of 1:100. Polymerase chain reaction (PCR) was also performed using the umbilical cord samples. Serological tests showed that the calf was positive for Neospora caninum at birth, with a titer of 1:1600; a titer of 1:3200 was reported in the dam. PCR, using umbilical cord tissue from the affected animal, was positive for the presence of this parasite, and the molecular identity of the amplified product was confirmed by sequencing. Therefore, the detection of N. caninum DNA in the umbilical cord represents a novel alternative test for the diagnosis of this parasitic infection in newborn calves that are clinically suspected to have neosporosis.(AU)

O estudo foi realizado em uma fazenda de criação de gado de corte na região do extremo sul do Brasil. O nascimento de um bezerro com opacidade unilateral da córnea foi imediatamente relatado ao Laboratório de Parasitologia da Universidade Federal de Pelotas (RS) e coletou-se sangue da vaca e do bezerro antes da ingestão do colostro. Foram coletados sangue e cordão umbilical do bezerro com opacidade na córnea bem como de outros seis bezerros aparentemente saudáveis antes da ingestão de colostro. Foram realizados exames sorológicos utilizando o teste indireto de anticorpos fluorescentes (IFAT) com ponto de corte de 1: 100 e reação em cadeia da polimerase (PCR). O resultado dos exames sorológicos mostraram que o bezerro foi positivo para N. caninum ao nascer com titulação de 1:1600 e o de sua mãe foi de 1:3200 na IFAT. A PCR do cordão umbilical foi positiva para o agente no animal com opacidade córnea unilateral e a identidade molecular do produto amplificado foi confirmada por sequenciamento. A detecção de DNA de N. caninum no cordão umbilical é uma nova alternativa para o diagnóstico deste agente em bezerros recém-nascidos com suspeita clínica de neosporose.(AU)

Uso de membrana de fibrina rica em plaquetas e leucócitos (L-PRF) em úlceras de córnea profundas induzidas em coelhos

A Fibrina rica em plaquetas e leucócitos (L-PRF) é um subproduto sanguíneo que se caracteriza por possuir fatores de crescimento, atuar na cicatrização tecidual, e ser de fácil obtenção. Objetivou-se verificar a composição da L-PRF e sua atuação na cicatrização da córnea de coelhos, e a histomorfometria da membrana de L-PRF e da córnea. Foram utilizados 30 coelhos, adultos, sadios, todos submetidos à indução de úlcera profunda de córnea, distribuídos aleatoriamente em dois grupos experimentais, Grupo controle (n=14) e Grupo membrana de PRF (n=15), neste foi instituído tratamento com membrana de L- PRF suturada à córnea. Os animais foram avaliados em diferentes dias do pós-cirúrgico (M1, M4, M7 e M30), e avaliados clinicamente quanto a hiperemia conjuntival, opacidade, vascularização, blefaroespasmo, teste de fluoresceína, e tempo de absorção da membrana. Os resultados clínicos apresentaram-se favoráveis, com presença de vascularização e opacidade leve no grupo L-PRF; na histomorfometria no M30, verificou-se alteração significativa com menor espessura significativa do epitélio e estroma no grupo membrana, comparado ao controle, na borda da úlcera e centro; entretanto, considerando os vasos da córnea, os resultados foram similares nos dois grupos experimentais. A membrana de L-PRF do coelho é constituída basicamente por fibrina e apresenta significativa presença da camada leucocitária em sua extremidade inferior. A utilização da membrana de L-PRF promove a cicatrização e é viável, promove cicatrização da córnea e vascularização leve em úlceras de córnea profunda em coelhos. Adicionalmente, pode ser suturada no leito da úlcera, como uma alternativa para tratamento de afecções na superfície ocular, e caracteriza-se por ser de rápida obtenção, devido ser possível ser preparada no ato cirúrgico e baixo custo.

Platelet and leukocyte-rich fibrin (L-PRF) is a blood by-product that is characterized by having growth factors, acting on tissue healing, and being easily obtained. The objective was to verify the composition of L-PRF and its performance in the healing of cornea, as well as in the transparency, vascularization and histomorphometry of the L-PRF membrane and the cornea. Thirty healthy adult rabbits were subjected to induction of deep corneal ulcer, randomly distributed in two experimental groups, Control Group (n = 14) and PRF Membrane Group (n = 15), in which treatment with L membrane was instituted. - PRF fixed to the cornea. The animals were evaluated on different days after surgery (M1, M4, M7 and M30), and the clinical evaluation criteria were: conjunctival hyperemia, opacity, vascularization, blepharospasm, fluorescein test, intraocular pressure and absorption time of the membrane. The clinical results were favorable, with the presence of vascularization and slight opacity: histomorphometry showed statistical difference when comparing the measurements of stroma thickness between the groups GM and CG of the border (p <0.0001) and the injury of the two groups (p = 0.0006), regarding the evaluation of the corneal vessels, there was no statistical difference in the comparison of the two groups and a low variation. It is concluded that the use of the PRF membrane is feasible and promotes corneal transparency and mild vascularization in deep corneal ulcers in rabbits. In addition, it can be sutured in the wound bed, making it an alternative for treating disorders on the ocular surface, being quick to obtain and low cost.

Morphology of endothelial cells from different regions of the equine cornea / Morfologia das células do endotélio de diferentes regiões da córnea de equinos

The objective of this study was to evaluate the morphology of different regions of the equine cornea using optical microscopy. Both healthy eyes of eight horses, male or female, of different ages were evaluated. Corneas were stained with alizarin red vital dye and subsequently examined and photographed using optical microscopy. Corneal endothelial morphology of central, superior, inferior, temporal and nasal areas was assessed. One hundred endothelial cells from each corneal area were analyzed. The shape of the corneal endothelial cells of each corneal region was analyzed. Statistical data analysis was conducted using the Student's t test. Values of P<0.01 were considered significant. Regarding morphological analysis, no statistically significant differences were reported between the equine corneal regions analyzed. The present research suggested that there are no morphological differences between regions of the equine cornea. The values obtained in any region of the equine cornea can be extrapolated to other regions of the cornea and are representative of the cell morphology present in all regions of the cornea.(AU)

O objetivo deste estudo foi o de avaliar a morfologia das diferentes regiões da córnea equina usando microscopia óptica. Foram avaliados ambos os olhos saudáveis de oito equinos, machos ou fêmeas, de diferentes idades. As córneas foram coradas com corante vital vermelho de alizarina, examinadas com microscópio óptico e fotografadas. A morfologia endotélio corneano de áreas centrais, superior, inferior, temporal e nasal foi avaliada. Foram analisadas células endoteliais da córnea de cada área. A forma das células endoteliais da córnea de cada região da córnea foi analisada. Análise estatística dos dados foi realizada por meio do teste t. Valores de P<0.01 foram considerados significativos. Em relação à análise morfológica estatisticamente significativa, não foram encontradas diferenças entre as regiões da córnea equina analisadas. O presente trabalho sugere que não houve diferença entre a morfologia das regiões da córnea de equino. Os valores obtidos em qualquer região da córnea equina podem ser extrapolados para outras regiões da córnea e são representativos da morfologia celular em todas as regiões da córnea.(AU)

Análises clínica e cito-histomorfológica da superfície ocular de cães da raça Shih Tzu com ceratoconjuntivite seca

A ceratoconjuntivite seca (CCS) é uma enfermidade de grande impacto na medicina veterinária de pequenos animais. Ocasiona alterações na dinâmica do filme lacrimal, podendo ser classificada em quantitativa, nos casos em que a porção aquosa está diminuída, ou qualitativa, quando há alterações da camada de lipídio e/ou mucina. A CCS quantitativa é uma enfermidade muito comum em cães, principalmente a de origem imunomediada, sendo os cães da raça Shih Tzu alguns dos mais acometidos. O objetivo deste estudo foi realizar estudo clínico e cito-histomorfológico de olhos de cães da raça Shih Tzu portadores de CCS em diferentes estádios da enfermidade. Foram realizadas análises clínica e cito-histomorfológica de 35 olhos provenientes de 23 cães da raça Shih Tzu, machos e fêmeas, entre dois e oito anos, sendo cada olho considerado uma unidade experimental e distribuído em um dos quatro grupos do estudo de acordo com o teste lacrimal de Schirmer (TLS-1). Assim, dez olhos com TLS-1 a 15 mm/min e não portadores de CCS compuseram o grupo controle (GC). Para compor os grupos de olhos portadores de CCS, 25 olhos foram assim distribuídos: grupo CCS inicial (CCS1), oito olhos com TLS-1 entre 14-11 mm/min; grupo CCS moderada (CCS2), sete olhos com TLS-1 entre 10-6 mm/min; e no grupo CCS severa (CCS3), dez olhos com TLS-1 5mm/min. Foi observada piora das variáveis clínicas estudadas nos olhos dos casos mais graves de CCS, incluindo hiperemia, neovascularização e pigmentação corneana. Ainda, à avaliação citomorfológica houve redução da quantidade de células intermediárias nos grupos de olhos com CCS. O exame histomorfológico demonstrou aumento do infiltrado inflamatório conjuntival linfoplasmocitário e redução da quantidade de células caliciformes conjuntivais (CCc) nos casos moderados a severos da enfermidade. Conclui-se que cães da raça Shih Tzu não sem CCS quantitativa apresentam disfunções lacrimais qualitativas da lágrima. Além disso, a severidade das alterações clínicas aumenta de acordo com o avanço da enfermidade. O exame citopatológico é limitado para a avaliação do infiltrado inflamatório e das células conjuntivais caliciformes quando comparado ao histopatológico, assim como as células epiteliais intermediárias podem ser consideradas um promissor marcador citológico da saúde ocular em cães da raça Shih Tzu. Cães da raça Shih Tzu portadores de CCS quantitativa apresentam processo inflamatório acentuado e deficiência da camada de mucina, gerando instabilidade do filme lacrimal. Acrescente-se que cães da raça Shih Tzu devem ser submetidos a avaliações oftálmicas de rotina para identificar disturbios qualitativos, quantitativos e de distribuição do filme lacrimal precocemente, e assim adequadamente tratados, visando minimizar os efeitos deletérios na córnea e conjuntiva.

Keratoconjunctivitis sicca (KCS) is a disease of great impact in the veterinary medicine of small animals. It causes changes in the dynamics of the tear film, and can be classified as quantitative, in cases where the aqueous portion is decreased, or qualitative, when there are changes in the lipid and/or mucin layer. Among the etiologies, immunomediated is the most common in dogs, with Shih Tzu dogs being one of the most affected. The aim of this study was to perform clinical and cytohistomorphological evaluation of eyes of Shih Tzu dogs with KCS at different stages of the disease. Clinical and cytohistomorphological analyses of 35 eyes from 23 Shih Tzu dogs, males, and females, between two and eight years old, each eye being considered an experimental unit, and distributed in one of the four study groups according to the Schirmer Tear Test (STT-1). Thus, ten eyes with STT-1 at 15 mm/min and non-KCS comprised the control group (GC). To make up the groups of eyes with KCS, 25 eyes were distributed as well: initial KCS group (KCS1), eight eyes with STT-1 between 14-11 mm/min; moderate KCS group (KCS2), seven eyes with STT-1 between 10-6 mm/min; and in the severe KCS group (CCS3), ten eyes with STT-1 5mm/min. Worsening of the clinical variables studied was observed in the eyes of the most severe cases of KCS, including hyperemia, neovascularization, and corneal pigmentation. Furthermore, the cytomorphological evaluation reduced the number of intermediate cells in the groups of eyes with KCS. Histomorphological examination showed an increase in the lymphoplasmocitic conjunctival inflammatory infiltrate and a reduction in the amount of conjunctival goblet cells (CGc) in moderate to severe cases of the disease. It was concluded that Shih Tzu dogs without quantitative KCS have qualitative tear disfunction. The severity of clinical changes increases with the progression of the disease. The cytopathological examination is limited to assess inflammatory infiltrate and globet cell counting when compared to histopathological examination, as well as intermediate epithelial cells can be considered a promising cytological marker of the ocular health in Shih Tzu dogs. Shih Tzu dogs with quantitative KCS presents a marked inflammatory process and deficiency of the mucin layer, causing instability of the pre-corneal lacrimal film. Also, Shih Tzu dogs should be submitted to routine ophthalmic evaluations to identify early quantitative and distribution disorders of the tear film, and thus adequatily treated, in order to minimize the deleterious the cornea and conjunctiva.

Intraocular pressure and Schirmer tear test values in maned wolf (Chrysocyon brachyurus) / Pressão intraocular e teste lacrimal de Schirmer em lobos-guará (Chrysocyon brachyurus)

The purpose of this study was to establish baseline data on lacrimal quantity (STT-1) and intraocular pressure (IOP) in captive maned wolves. Ten healthy adult maned wolves were contained with a snare pole and muzzle and kept in decubitus of the left side. STT-1 measurement was performed on the lateral third of the lower conjunctival sac for one minute. The cornea was desensitized and intraocular pressure was measured with an tonopen. Average STT-1 in both eyes was 11±5mm.min-1, with no statistical difference between the left and right eye (p=0.960). Average IOP in both eyes was 20±6mmHg, with no statistical difference between the left and right eye (p=0.836). Average STT-1 was lower than, and IOP was the same as normal levels found in dogs. There was no statistical difference in the age of the animals, and STT-1 and IOP values. In the present paper, average maned wolf STT-1 levels were lower compared with those found in dogs, while the IOP was the same in maned wolves as in dogs. Due to the increased incidence in providing emergency care for maned wolf victims of road kill and fires, determination reference values of ocular parameters may improve the correct diagnosis and treatment of the disease.(AU)

O objetivo deste estudo foi estabelecer dados de referência sobre a produção lacrimal (STT-1) e pressão intraocular (PIO) em lobos-guará em cativeiro. Foram utilizados 10 lobos-guará, saudáveis e adultos. Os animais foram contidos com cambão e mordaça e mantidos em decúbito lateral esquerdo. O TLS foi realizado no terço médio da pálpebra inferior, durante um minuto. A córnea foi dessensibilizada e a PIO mensurada com tonopen. A média do TLS-1 dos olhos direitos e esquerdo foi 11±5mm/min, não havendo diferença significativa entre os olhos (p=0,960). A média da PIO dos olhos direitos e esquerdo foi 20±6mmHg, não observando diferença entre os olhos direitos e esquerdos (p=0,836). Média STT-1 foi menor do que, e PIO foi o mesmo que os níveis normais em cães. Não houve diferença estatística na idade dos animais e valores STT-1 e da PIO. No presente trabalho, os níveis médios de guará STT-1 foram mais baixos em comparação com as observadas nos cães, enquanto que a pressão intraocular foi a mesma nos lobos guará como em cães. Devido ao aumento da incidência na prestação de cuidados de emergência para vítimas de lobos-guará atropelamentos e incêndios, determinar os valores de referência dos parâmetros oculares podem melhorar o diagnóstico correto e tratamento de doenças.(AU)

Intraocular pressure and Schirmer tear test values in maned wolf (Chrysocyon brachyurus) / Pressão intraocular e teste lacrimal de Schirmer em lobos-guará (Chrysocyon brachyurus)

The purpose of this study was to establish baseline data on lacrimal quantity (STT-1) and intraocular pressure (IOP) in captive maned wolves. Ten healthy adult maned wolves were contained with a snare pole and muzzle and kept in decubitus of the left side. STT-1 measurement was performed on the lateral third of the lower conjunctival sac for one minute. The cornea was desensitized and intraocular pressure was measured with an tonopen. Average STT-1 in both eyes was 11±5mm.min-1, with no statistical difference between the left and right eye (p=0.960). Average IOP in both eyes was 20±6mmHg, with no statistical difference between the left and right eye (p=0.836). Average STT-1 was lower than, and IOP was the same as normal levels found in dogs. There was no statistical difference in the age of the animals, and STT-1 and IOP values. In the present paper, average maned wolf STT-1 levels were lower compared with those found in dogs, while the IOP was the same in maned wolves as in dogs. Due to the increased incidence in providing emergency care for maned wolf victims of road kill and fires, determination reference values of ocular parameters may improve the correct diagnosis and treatment of the disease.(AU)

O objetivo deste estudo foi estabelecer dados de referência sobre a produção lacrimal (STT-1) e pressão intraocular (PIO) em lobos-guará em cativeiro. Foram utilizados 10 lobos-guará, saudáveis e adultos. Os animais foram contidos com cambão e mordaça e mantidos em decúbito lateral esquerdo. O TLS foi realizado no terço médio da pálpebra inferior, durante um minuto. A córnea foi dessensibilizada e a PIO mensurada com tonopen. A média do TLS-1 dos olhos direitos e esquerdo foi 11±5mm/min, não havendo diferença significativa entre os olhos (p=0,960). A média da PIO dos olhos direitos e esquerdo foi 20±6mmHg, não observando diferença entre os olhos direitos e esquerdos (p=0,836). Média STT-1 foi menor do que, e PIO foi o mesmo que os níveis normais em cães. Não houve diferença estatística na idade dos animais e valores STT-1 e da PIO. No presente trabalho, os níveis médios de guará STT-1 foram mais baixos em comparação com as observadas nos cães, enquanto que a pressão intraocular foi a mesma nos lobos guará como em cães. Devido ao aumento da incidência na prestação de cuidados de emergência para vítimas de lobos-guará atropelamentos e incêndios, determinar os valores de referência dos parâmetros oculares podem melhorar o diagnóstico correto e tratamento de doenças.(AU)

UTILIZAÇÃO DA MATRIZ EXTRACELULAR CORNEAL DE TILÁPIA NA CERATOPLASTIA LAMELAR EXPERIMENTAL EM SUÍNOS E APLICADA A AFECÇÕES CORNEAIS EM CÃES E GATO

A córnea é a estrutura mais anterior do olho, e quando encontra-se hígida, é lisa, esférica e transparente. As afecções corneais podem ser causadas por vários fatores e se não tratadas corretamente, podem levar a perda da visão. Devido a escassez de estudos no Brasil sobre a utilização da matriz extracelular corneal (MEC), objetivou-se utilizar a matriz extracelular corneal de tilápia (MECT) em córneas de suínos submetidos a ceratoplastia e em cães e gato com enfermidades corneais. Para a realização dos estudos in vitro, as córneas de tilápia foram descelularizadas utilizando o hidróxido de sódio (0,5 M) e conservadas em solução de Dulbeccos modified minimum essencial medium (DMEN) associada ao glicerol. As mesmas foram avaliadas através da extração e quantificação do DNA, onde ocorreu uma diferença estatística do DNA antes da descelularização (10,43 ± 3,84 ng/mg) e após a descelularização (4,6 ± 2,15 ng/mg). No teste microbiológico não foram observadas a presença de contaminantes e no cultivo celular observou-se que as células Madin Darby Bovine Kidney (MDBK), 3T3-L1 e fibroblasto bovinos se desenvolveram na MECT. Já nos estudos in vivo, observou-se a opacidade corneal em todos os animais do grupo ceratectomia (CT) e em 92,8% (13/14) dos animais do grupo ceratoplastia (CP). A vascularização corneal esteve presente em 92,8% (13/14) dos animais do grupo CP até os 30 dias de pós-operatório (PO), e esteve ausente aos 60 dias de PO no grupo CP e grupo CT. Na avaliação histológica foram observados a presença de vasos nos subgrupos CP15 e CP30, e não foram observados vasos no subgrupo CP60. A reeepitelização corneal esteve presente em todos os animais dos subgrupos CP e CT e pôde-se observar através da coloração pelo tricrômio de gomory que a MECT se integrou à córnea receptora. Após a realização dos estudos experimentais, as MECTs foram utilizadas em dois cães com úlceras profundas e um gato com sequestro corneano. Após a ceratectomia, a MECT foi suturada na córnea receptora utilizando poliglactina nº 8-0 no canino 1 e felino e mononylon nº 10-0 no canino 2. O tratamento prescrito no PO consistiu no uso de antibiótico e cicloplégico tópico e anti-inflamatório sistêmico. Com 30 dias de PO, utilizou-se o corticóide tópico. Na avaliação do PO com sete dias, a reepitelização esteve presente em todos os animais e com 60 dias de PO as córneas apresentaram-se translúcidas nos três pacientes. No canino 1 observouse a presença de pigmentação em faixa e na área da ceratoplastia, enquanto que no canino 2 e felino, visualizou-se a presença de uma nébula na área do enxerto. Desta forma, a MECT permitiu o crescimento celular, sem efeito citotóxico, sendo integrada na córnea suína, e a mesma foi eficaz no tratamento do sequestro corneal em felino e úlceras complicadas em caninos.

The cornea is the most anterior structure of the eye and when healthy, it is smooth, spherical and transparent. Corneal disorders can be caused by several factors and if is not treated correctly, can lead to loss of vision. Due to the lack of studies in Brazil on the use of corneal extracellular matrix (ECM), the objective of this study was to evaluate corneal extracellular matrix of tilapia (TECM) in corneas of pigs experimentally submitted to keratoplasty and subsequent use for the treatment of dogs and cat with corneal diseases. Corneas of tilapia were decellularized with sodium hydroxide (0.5 M) and preserved in DMEM with glycerol solution for further in vitro analysis. Corneas were evaluated by the extraction and quantification of DNA and the statistical analysis of DNA had different results before (10.43 ± 3.84 ng/mg) and after decellularization (4.6 ± 2.15 ng/mg). TECM cultures showed no microbiological contaminants and cell cultures supported the growth of bovine MDBK, 3T3-L and fibroblast cells. In vivo assessments demonstrated corneal opacities in all animals that underwent keratectomy (KT) and in 92.8% (13/14) of the keratoplasty (KP) group. Corneal vascularization was present in 92,8% (13/14) animals of the KP group at day 30 postoperatively (PO) and was absent at day 60 PO in the KP and KT groups. At histologic evaluation vessels were present in the subgroups CP15 and CP30 and no vessels were observed in the subgroup CP60. Corneal reepithelization occurred in all animals of KP and KT groups. Gomori trichrome stains revealed that the TECM grafts were integrated into the cornea. Next, TECM were used in two dogs with deep ulcers and a cat with corneal sequestrum. After keratectomy TECM graft was sutured in the recipient cornea of case 1 with 8-0 polyglactin and in case 2 and case 3 with mononylon 10- 0. PO included topical antibiotic, topical cycloplegic and systemic anti-inflammatory. 30 days after surgery topical corticosteroid was introduced. At day 7 PO reepithelization was present in all animals and at day 60 all animals presented corneal transparency. Band pigmentation was present where keratoplasty was performed in case 1. Corneal nebula was present at graft surfaces in cases 2 and 3. Thus, TECM allowed cell growth, without cytotoxic effect, integrated into swine cornea, and was effective in the treatment of corneal sequestrum in a cat and complicated ulcers in dogs.

Análise de duas metodologias de precipitação sobre o rendimento, características estruturais e atividade de polissacarídeos sulfatados de Gracilaria cornea (Rhodophyta) / Analysis of two precipitation methods on the yield, structural features and activity of sulfated polysaccharides from Gracilaria cornea (Rhodophyta)

A demanda global de produtos naturais de algas marinhas tem aumentado mundialmente. Entretanto, a obtenção de polissacarídeos sulfatados (PSs) com álcool isoamílico (AIA) não é relatada. Investigou-se a eficiência de dois métodos (M) de precipitação de PSs da alga marinha vermelha Gracilaria cornea. Os PSs isolados enzimaticamente foram concentrados com cloreto cetilpiridimínio (M I) ou AIA (M II). Os extratos foram examinados, segundo seu rendimento, características estruturais e efeitos in vitro sobre o tempo de tromboplastina parcial ativada (TTPA) usando plasma humano normal e heparina padrão (193 UI mg-1). A diferença nos rendimentos foi 12,99% e semelhante determinação quantitativa de sulfato foi obtida entre os métodos ( 26%). A eletroforese em gel de agarose revelou diferenças em termos de densidade de cargas entre os extratos. Enquanto ambos os extratos revelaram agarocoloides, o método M II também se mostrou alternativo para lipídios, proteínas e ácidos nucleicos de acordo com a análise de infravermelho. Os extratos praticamente não modificaram o TTPA (1,95 e 2 UI mg-1 para M I e M II, respectivamente). Os resultados revelaram AIA como um solvente alternativo para obtenção de PSs da alga marinha vermelha G. cornea, dependendo do critério de utilização na indústria.(AU)

The global demand for natural products from seaweeds has increased worldwide; however, no description of the use of isoamly alcohol (IAA) for obtaining of sulfated polysaccharides (SPs) has been reported. We investigated the efficiency of two precipitation methods (M) in obtaining SPs from the red seaweed Gracilaria cornea. SPs enzymatically isolated were concentrated with cetylpyridinium chloride (M I) or IAA (M II) and extracts were examined with regard to their yield, structural features and in vitro effects on the activated partial thromboplastin time (APTT) using normal human plasma and standard heparin (193 IU mg-1). Yield difference reached 12.99%. Quantitative determination of sulfate was similar between the two methods ( 26%), but extracts revealed different pattern on charge density by agarose gel electrophoresis. Whereas both extracts revealed as agarocolloids, alternative M II was also efficient for lipids, proteins and nucleic acids according to the infrared analysis. Extracts had virtually no effect on APPT (1.95 and 2 IU mg-1 for M I and M II, respectively). The results revealed IAA as an alternative solvent for obtaining SPs from the red seaweed G. cornea, depending on the industry usage criterion.(AU)

Avaliações de estímulo nasolacrimal, métodos quantitativos de lágrima e repetibilidade teste-reteste em cães braquicefálicos e não braquicefálicos

Alterac oes na superf cie ocular ou deficiencia da por c ao aquosa da l agrima s ao condi c oes comumente diagnosticadas na oftalmologia veterinaria, principalmente em c aes. Com isso, objetivou-se caracterizar os achados diagnosticos, aplicar repetitividade teste-reteste e corre- lacionar os testes lacrimais em caes de diferentes perfis cef alicos. A popula c ao do estudo compreendeu 50 caes clinicamente saud aveis (25 braquicef alicos e 25 n ao braquicef alicos). Sucessivos testes diagnosticos foram executados em cada c ao com intervalo de 10 minutos e repetidos apos 24 horas sob condi c oes similares. Os testes avaliados foram: sensa c ao t atil da cornea (STC), teste de meniscometria (SMT), teste lacrimal do vermelho de fenol (TLVF), tira endodontica de papel absorvente (TEPA), teste lacrimal de Schirmer I sem (TLS-I) e com estimulac ao nasolacrimal (TLS-I +RN) e teste lacrimal de Schirmer II (TLS-II). A media ± desvio padrao dos resultados obtidos foram menores em braquicef alicos x n ao braquicef alicos (exceto para SMT; 7,4±2,0 × 7,3±2,4 mm/5s, que nao houve diferen c a significativa), com diferenc a estatisticamente significativa para STC (1,8±0,5 cm × 3,4±0,8 cm), TLVF (37,2±4,0 mm/15s × 41,1±5,5 mm/15s), TLS-I (20,1±3,4 mm/min × 23,3±5,7 mm/min) e TLS-I+RN (23,2 ± 3,6 mm/min × 27,1 ± 5,4 mm/min) e sem diferenc a estatisticamente significativa para TEPA (16,6±2,7 mm/15s × 17,5±2,9 mm/15s). A estimulac ao lacrimal incrementou em m edia 18% a produc ao lacrimal por meio do TLS-I. Correla c oes dos testes foram geralmente fracas a moderadas (r<0,70) exceto pela forte correlac ao positiva entre TLS-I e TLS-I +RN (r = 0,83, P < 0,001). A confiabilidade dos testes foi boa, no entanto a repetitividade foi relativamente fraca a moderada, como demonstrada pelo baixo coeficiente de correlac ao intraclasse (CCI 0,75) e amplo limite de concordancia de 95%, exceto para STC (CCI = 0,91). Em caes braquicef alicos, observou-se que a sensibilidade da cornea e secre c ao da por c ao aquosa da l agrima apresentaram valores menores. Assim, um entendimento mais solido da superf cie ocular requer a combinac ao de diversos testes diagnosticos. Al em disto, o reflexo nasolacrimal pode ser uma ferramenta util tanto para diagnostico quanto para terapia em c aes.

Ocular surface disorders or aqueous tear deficiency are conditions commonly diagnosed in veterinary practice, especially in dogs. Thus, the aim of this study was to characterize diagnostic findings, test-retest repeatability, and correlations among lacrimal tests in dogs of diverse cephalic conformations. The study population comprised 50 clinically healthy dogs (25 brachycephalic and 25 non-brachycephalic). A series of diagnostics were performed in each dog, allowing for a 10min-interval between tests and repeating each test 24h later under similar conditions: corneal tactile sensation (CTS), strip meniscometry test (SMT), phenol red thread test (PRTT), endodontic absorbent paper point tear test (EAPPTT), Schirmer tear test-1 without (STT-1) or with nasolacrimal stimulation (NL-STT-1), and Schirmer tear test-2 (STT-2). Mean±SD test values were lower in brachycephalic vs. non-brachycephalic dogs (except for SMT; 7.4±2.0 vs. 7.3±2.4 mm/5s without significant difference), with statistically significant differences noted for CTS (1.8±0.5 cm vs. 3.4±0.8 cm), PRTT (37.2±4.0 mm/15s vs. 41.1±5.5 mm/15s), STT-1 (20.1±3.4 mm/min vs. 23.3 ±5.7 mm/min) and NL-STT1 (23.2±3.6 mm/min vs. 27.1±5.4 mm/min), and non-significant differences for EAPPTT (16.6±2.7 mm/15s vs. 17.5±2.9 mm/15s). Nasolacrimal stimulation increased STT-1 values by 18% on average. Correlations among tests were generally weak to moderate (r < 0.70) except for a strong positive correlation between STT- 1 and NL-STT1 (r= 0.83, P < 0.001). Tests reliability was good although test-retest repeatability was generally poor to moderate, as depicted by low intraclass correlation coefficients (ICC 0.75) and wide 95% limits of agreement, except for CTS (ICC = 0.91). In brachycephalic dogs was observed that corneal sensitivity and aqueous tear secretion are lower. A comprehensive assessment of the ocular surface requires the combination of several diagnostic tests. The nasolacrimal reflex may provide a useful diagnostic and therapeutic tool in dogs.

Valores de referência para testes de diagnóstico oftálmico e microbiota bacteriana ocular em Gavião-asa-de-telha (Parabuteo unicinctus, Temminck, 1824)

O presente trabalho avaliou os parâmetros clínicos oftálmicos, a microbiota conjuntival e a ecobiometria ocular em animais da espécie Parabuteo unicinctus nascidos em cativeiro, com objetivo de auxiliar no diagnóstico e tratamento de afecções oftálmicas que podem acometer animais cativos ou de vida livre. A produção lacrimal avaliada pelo teste lacrimal de Schirmer demonstrou valores médios de 12,95 ± 4,83 mm/min, a avaliação da sensibilidade da córnea com o uso estesiometria de Cochet-bonnet demonstrou média de 2,56 ± 0,92 cm, a pressão intraocular com a tonometria de rebote revelou valores médios de 19,56 ± 4,45 mmHg e na avaliação da microbiota conjuntival o Staphylococcus sp foi a bactéria de maior frequência (81,81% das amostras). Nenhum dos parâmetros demonstrou diferenças estatísticas quando comparados os valores de machos e fêmeas, olho direito e esquerdo. As dimensões do bulbo ocular mensuradas pela ecobiometria em modo B demonstrou médias de 2,83 ± 0,30 mm para a Câmara anterior, 5,90 ± 0,24 mm o diâmetro da Lente, 11,96 ± 0,29 mm o diâmetro da Câmara vítrea e 20,70 ± 0,50 mm o eixo axial longitudinal total (soma de todas as medidas). Os diâmetros da Câmara anterior e eixo axial total apresentaram diferenças estatísticas quando comparado os valores entre machos e fêmeas (p=0,04 e p=0,00, respectivamente), os demais parâmetros ecobiométricos não demostraram diferenças estatísticas entre machos e fêmeas, olho direito e esquerdo.

The present study evaluated ophthalmic clinical parameters, conjunctival microbiota and ocular ecobiometry in animals of the species Parabuteo unicinctus born in captivity, with the objective of assisting in the diagnosis and treatment of ophthalmic diseases that can affect captive or free-living animals. The tear production evaluated by the Schirmer's tear test showed mean values of 12.95 ± 4.83 mm / min, the evaluation of the sensitivity of the cornea using Cochet-bonnet esthesiometry showed an average of 2.56 ± 0.92 cm, intraocular pressure with rebound tonometry revealed mean values of 19.56 ± 4.45 mmHg and in the assessment of the conjunctival microbiota Staphylococcus sp was the most frequent bacterium (81.81% of the samples). None of the parameters showed statistical differences when comparing the values of males and females, right and left eyes. The dimensions of the eyeball measured by ecobiometry in mode B showed averages of 2.83 ± 0.30 mm for the anterior chamber, 5.90 ± 0.24 mm the diameter of the Lens, 11.96 ± 0.29 mm the diameter the Vitreal chamber and 20.70 ± 0.50 mm the total longitudinal axial axis (sum of all measures). The diameters of the anterior chamber and the total axial axis showed statistical differences when comparing the values between males and females (p = 0.04 and p = 0.00, respectively), the other ecobiometric parameters did not show statistical differences between males and females, right eye and left.

PARÂMETROS OFTÁLMICOS E MORFOLOGIA OCULAR EM PREGUIÇA-COMUM (BRADYPUS VARIEGATUS)

O Brasil é classificado como um dos países mais ricos em biodiversidade do mundo. Bradypus variegatus é uma espécie popularmente conhecida como preguiça-comum, tendo ampla distribuição geográfica brasileira. Este trabalho objetivou descrever sistematicamente a morfologia macro e microscópica dos órgãos visuais e avaliação dos órgãos por exames complementares em Bradypus variegatus. Sob aprovação pela CEUA da UFRA e Sisbio. Os espécimes avaliados foram provenientes do Jardim Botânico Bosque Rodrigues Alves para realização de morfometria e morfologia externa dos bulbos com auxílio de paquímetro, testes oftálmicos (teste de Schirmer, tonometria). Animais que vieram a óbito durante período de pesquisa foram doados ao Laboratório de Pesquisa Morfológica Animal (LaPMA) da UFRA, fixados e dissecados em seguida. Realizada identificação do órgão na sua parte externa e anexos perioculares, seguido de fotodocumentação, e coleta de fragmentos para análise de histologia básica no Laboratório de Histologia e Embriologia Animal (LHEA) da UFRA. Foi avaliado apenas um espécime de B. variegatus in vivo, onde se aferiu o Schirmer obteve-se o valor de 04 mm/min no bulbo ocular direito e 05 mm/min no esquerdo e quanto a verificação de PIO, os valores adquiridos foram 13 mmHg no bulbo ocular direito e 08 mmHg no esquerdo. Quanto a morfologia podemos identificar estruturas importantes que compõem o bulbo ocular. A órbita é circundada pelos ossos frontal, lacrimal; zigomático, maxilar, mandíbula e temporal. Evidenciação de tecido cartilaginoso e glandular de 3º pálpebra, assim como uma grande camada de tecido de glândulas lacrimais. Córnea com extensa amada de estroma e bem definida a camada de membrana de Descemet. Área de trabeculado corneoescleral com grande bertura para drenagem de liquido produzido por humor aquoso, seguido de extensa camada retiniana, onde vemos maior camada de fotorreceptores, sem discriminação de células fotorreceptoras de cones e bastonetes. Foi identificado particularidades e semelhanças entre outras espécies domesticas e silvestres já descritas.

Brazil is classified as one of the richest countries in biodiversity in the world. Bradypus variegatus is a species popularly known as common sloth, having wide Brazilian geographical distribution. This study aimed to systematically describe the macro and microscopic morphology of visual organs and evaluation of organs by complementary examinations in Bradypus variegatus. This work was approved by the CEUA of UFRA and Sisbio. The specimens evaluated came from the Bosque Rodrigues Alves Botanical Garden to perform morphometry and external morphology of the bulbs with the aid of caliper, ophthalmic tests (Schirmer test, tonometry). Animals that died during the research period were donated to the Animal Morphological Research Laboratory (LaPMA) of UFRA, fixed and dissected afterwards. Identification of the organ on its external part and periocular attachments was performed, followed by photodocumentation, and collection of fragments for analysis of basic histology in the Laboratory of Animal Histology and Embryology (LHEA) of UFRA. Only one specimen of B. variegatus in vivo was evaluated, where the Schirmer was measured, the value of 04 mm/min was obtained in the right ocular bulb and 05 mm/min in the left and, regarding the IOP verification, the values acquired were 13 mmHg in the right ocular bulb and 08 mmHg in the left. As for morphology we can identify important structures that make up the ocular bulb. The orbit is surrounded by the frontal, tearbones; zygomatic, maxillary, mandible and temporal. Evidence of cartilaginous and glandular tissue of the 3rd eyelid, as well as a large layer of tissue of lacrimal glands. Cornea with extensive stroma layer and well-defined Descemet membrane layer. Area of corneo-scleral trabeculate with large opening for drainage of liquid produced by aqueous humor, followed by extensive retinal layer, where we see larger layer of photoreceptors, without discrimination of photoreceptor cells of cones and rods. Particularities and similarities were identified between other domestic and wild species already described.

Comparação entre dois protocolos de tratamento de ceratoconjuntivite seca experimentalmente induzida em coelhos / Comparison of two treatment protocols of experimentally induced keratoconjunctivitis sicca in rabbits

O objetivo deste estudo foi avaliar e comparar a eficácia de dois protocolos de tratamento de ceratoconjuntivite seca (CCS) experimentalmente induzida em coelhos: uma formulação oftálmica tópica composta por álcool polivinílico 1,4%, adicionado com acetilcisteína 10% e pilocarpina 1% (AAP), e outro protocolo com o uso do óleo de semente de linhaça (OL) tópico em forma de colírio, durante 12 semanas. Foram utilizados 15 coelhos machos, adultos, da raça Nova Zelândia, alocados aleatoriamente em três grupos: grupo C (controle), grupo AAP (formulação oftálmica) e grupo L (OL tópica). Os animais foram avaliados semanalmente pelo teste lacrimal de Schirmer, teste de fluoresceína e teste de Rosa Bengala; uma vez por mês, pelo exame de citologia esfoliativa ocular; ao final do experimento, pela análise histopatológica da córnea e conjuntiva. Os resultados demonstraram que houve um aumento maior na produção lacrimal quando utilizada a formulação oftálmica, e uma resolução mais rápida das úlceras de córnea, bem como diminuição no número de células desvitalizadas quando utilizado o óleo de semente de linhaça, além de aumento no número de células caliciformes em ambos os grupos de tratamento. A associação desses dois protocolos pode ser no futuro uma alternativa no tratamento da CCS.(AU)

The objective of this study was to evaluate and compare the effectiveness of two treatment protocol of experimentally induced keratoconjunctivitis sicca (KCS) in rabbits, a topical ophthalmic formulation composed by 1.4% povinilic alcohol added with 10% acetylcysteine and 1% pilocarpine (AAP) and another protocol with the topical use of the linseed seed oil (LO) in eye drop form f or 12 weeks. Fifteen male New Zealand white rabbits were aleatory allocated in 3 groups: Group C (Control), Group AAP (ophthalmic formulation) and Group L (LO topical). The animals were evaluated weekly using the Schirmer's tear test, fluorescein test and Rose Bengal test monthly for ocular cytology, and at the end of the experiment for histopathological analysis of cornea and conjunctive. The results demonstrated that there was a larger increase in the tear production when the ophthalmic formulation was us ed and a faster rapid resolution of corneal ulcers and decrease in the number of devitalized cells when linseed seed oil was used, besides an increase in the number of caliciform cells in both treatment groups. The association of those two protocols can be a future alternative in the treatment of KCS.(AU)

Ensaio toxicológico do extrato aquoso de Waltheria douradinha (douradinha do campo) em modelo ex vivo / Toxicological asay with aqueous extract of Waltheria douradinha (douradinha do campo) in ex vivo model

A produção de fitoterápicos exige que em seu desenvolvimento haja testes em relação a sua toxicidade. Assim métodos que promovam a redução de animais em pesquisa devem ser aplicados também a estes compostos. A OECD (Guideline for the Testing of Chemicals) recomenda o teste do olho de frango como uma alternativa de triagem, antes de levar os produtos à ensaios in vivo. Os objetivos deste estudo foram determinar a toxicidade do extrato aquoso de Walteria ouradinha através de ensaio ex vivo em globo ocular de frangos, e demonstrar dados que justifiquem a utilização deste como teste de triagem anterior ao ensaio in vivo. Foram utilizados olhos de frangos ex vivo, distribuídos em grupos conforme o produto instilado em sua superfície: grupo extrato aquoso de W. douradinha (WD), salina 0,9% (CN) e ácido acético 10% (CP). A toxicidade foi avaliada para retenção de fluoresceína, opacidade e inchaço de córnea, e critérios histopatológicos, conforme recomendação da OECD. O grupo WD demonstrou resultados macroscópicos com baixo índice de irritabilidade, quando comparados com os olhos CP (P<0,05). Ainda, os olhos WD demonstraram menores alterações histopatológicas que os olhos CP, estando, em todas ocasiões, com índice não irritante. Nas condições deste estudo concluímos que o extrato aquoso de W. douradinha possui baixo grau de toxicidade perante as análises macroscópicas e histopatológicas. Mais que isso, indicamos o teste do olho da galinha como ensaio de triagem para determinação da toxicidade de fitoterápicos, podendo ser usado antes de levar os extratos à teste em animais, reduzindo assim o uso destes.

Requirements for the toxicological assessment of phytotherapies are increasing, as these become more widespread. Methods that reduce the animals used in these toxicology studies should also be applied for these compounds. The enucleated chicken eye test is recommended by OECD as an early screening method, used prior to the in vivo assays. The objectives of this study were to assess the toxicity of the aqueous extract of Walteria douradinha through the enucleated chicken eye test, as recommended by the OECD, and demonstrate evidence supporting it as a valid screening assay. The eyes of commercially slaughtered chicken were used in this study, these were divided into groups according to the product instilled: aqueous extract of W. douradinha (WD); 0.9% saline (CN); and 10% acetic acid (CP). Toxicity was evaluated by predetermined criteria for fluorescein retention, corneal opacity, and swelling, in five time points. Histopathological criteria for corneal lesions were also assessed. Throughout the study the WD group showed low rates of irritability compared with CP eyes (P <0.05) in the macroscopic criteria. Moreover, WD eyes showed lower histopathological changes than CP eyes, and were characterized as non irritant. In this study we conclude that the aqueous extract of W. douradinha has a low degree of toxicity, as shown by both macroscopic and histopathological parameters. Furthermore, we recommend the enucleated chicken eye test as a screening assay to determine the toxicity of herbal extracts, and should be used before in vivo testing, thus reducing the number of animals used.

Ensaio toxicológico do extrato aquoso de Waltheria douradinha (douradinha do campo) em modelo ex vivo / Toxicological asay with aqueous extract of Waltheria douradinha (douradinha do campo) in ex vivo model

A produção de fitoterápicos exige que em seu desenvolvimento haja testes em relação a sua toxicidade. Assim métodos que promovam a redução de animais em pesquisa devem ser aplicados também a estes compostos. A OECD (Guideline for the Testing of Chemicals) recomenda o teste do olho de frango como uma alternativa de triagem, antes de levar os produtos à ensaios in vivo. Os objetivos deste estudo foram determinar a toxicidade do extrato aquoso de Walteria ouradinha através de ensaio ex vivo em globo ocular de frangos, e demonstrar dados que justifiquem a utilização deste como teste de triagem anterior ao ensaio in vivo. Foram utilizados olhos de frangos ex vivo, distribuídos em grupos conforme o produto instilado em sua superfície: grupo extrato aquoso de W. douradinha (WD), salina 0,9% (CN) e ácido acético 10% (CP). A toxicidade foi avaliada para retenção de fluoresceína, opacidade e inchaço de córnea, e critérios histopatológicos, conforme recomendação da OECD. O grupo WD demonstrou resultados macroscópicos com baixo índice de irritabilidade, quando comparados com os olhos CP (P<0,05). Ainda, os olhos WD demonstraram menores alterações histopatológicas que os olhos CP, estando, em todas ocasiões, com índice não irritante. Nas condições deste estudo concluímos que o extrato aquoso de W. douradinha possui baixo grau de toxicidade perante as análises macroscópicas e histopatológicas. Mais que isso, indicamos o teste do olho da galinha como ensaio de triagem para determinação da toxicidade de fitoterápicos, podendo ser usado antes de levar os extratos à teste em animais, reduzindo assim o uso destes. (AU)

Requirements for the toxicological assessment of phytotherapies are increasing, as these become more widespread. Methods that reduce the animals used in these toxicology studies should also be applied for these compounds. The enucleated chicken eye test is recommended by OECD as an early screening method, used prior to the in vivo assays. The objectives of this study were to assess the toxicity of the aqueous extract of Walteria douradinha through the enucleated chicken eye test, as recommended by the OECD, and demonstrate evidence supporting it as a valid screening assay. The eyes of commercially slaughtered chicken were used in this study, these were divided into groups according to the product instilled: aqueous extract of W. douradinha (WD); 0.9% saline (CN); and 10% acetic acid (CP). Toxicity was evaluated by predetermined criteria for fluorescein retention, corneal opacity, and swelling, in five time points. Histopathological criteria for corneal lesions were also assessed. Throughout the study the WD group showed low rates of irritability compared with CP eyes (P <0.05) in the macroscopic criteria. Moreover, WD eyes showed lower histopathological changes than CP eyes, and were characterized as non irritant. In this study we conclude that the aqueous extract of W. douradinha has a low degree of toxicity, as shown by both macroscopic and histopathological parameters. Furthermore, we recommend the enucleated chicken eye test as a screening assay to determine the toxicity of herbal extracts, and should be used before in vivo testing, thus reducing the number of animals used. (AU)