Guaraná Paullinia cupana como aditivo zootécnico e nutricional na dieta de tambaqui Colossoma macropomum

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2-Fenoxietanol e óleo essencial de Eucalyptus globulus como anestésico e seus efeitos sobre os indicadores de estresse em Rhamdia quelen.

Rotineiramente na aquicultura os peixes são manipulados, provocando respostas fisiológicas de estresse que podem causar imunodepressão, retardo do crescimento, dor e até morte. Com a necessidade de reduzir essas adversidades nos manejos, os anestésicos são utilizados. O objetivo desde trabalho foi avaliar a concentração ideal (IC) e seus efeitos sobre as respostas de estresse do Rhamdia quelen submetido a dois protocolos de anestesia, com 2-Fenoxietanol (2-Phe) e óleo essencial de Eucalyptus globulus (EEO) descritos em artigos distintos. No Artigo 1, a análise do perfil químico do EEO mostrou que o 1,8-cineol é o componente majoritário do óleo. Em seguida, foram realizados dois experimentos. I) Avaliação da IC: Foram testadas quatro concentrações (600, 650, 700 e 750 L L-1). Com o aumento das concentrações de OEE, os tempos de indução à anestesia dos jundiás foram reduzidos, todavia, essas concentrações não exerceram influência nos tempos de recuperação. O EEO foi considerado um anestésico eficaz para o R. quelen (128,65 ± 40,42 g) com IC de 700 L L-1 (tempo de indução 2,74 ± 0,67 min e recuperação 2,26 ± 1,09 min). Durante este experimento, não foram observadas mortalidades. II) Avaliação do estresse: Os peixes foram divididos em três grupos: controle (valores basais, sem anestésico); eugenol (50 mg L-1) e EEO (700 L L-1). Neste ensaio, o EEO inibiu a resposta primária ao estresse (o cortisol não aumentou). Entretanto, os níveis plasmáticos de glicose e lactato aumentaram. Enquanto isso, o eugenol manteve todos os indicadores de estresse iguais aos do grupo controle. Portanto, embora o EEO tenha características anestésicas adequadas, ele deve ser usado com cautela, pois não evitou alterações nos níveis plasmáticos de glicose e lactato em R. quelen. Artigo 2: Foram realizados dois experimentos. I) Avaliação da IC: Sete concentrações de 2-Phe foram testadas: 300, 400, 500, 550, 600, 650 e 700 L L-1. Aumentando as concentrações de 2-Phe, os tempos de indução diminuíram, enquanto os tempos de recuperação aumentaram. A IC de 2-Phe para anestesiar R. quelen (126,47 ± 41,14 g) foi de 700 L L-1 (indução 2,98 ± 0,34 min e tempo de recuperação 2,75 ± 0,35 min). II) Avaliação do estresse: Os peixes foram divididos em três grupos: Controle (valores basais, sem anestésico); 2-Phe (700 L L-1); e Eugenol (50 mg L-1). Os níveis plasmáticos de cortisol, glicose e lactato foram aferidos nos peixes como indicadores de estresse em dois momentos diferentes: tempo zero (T0 = anestesiado) e o tempo um (T1 = uma hora após anestesia). Os animais dos grupos 2-Phe e Eugenol apresentaram aumento significativo nos valores de glicose quando comparados ao grupo controle. O lactato plasmático em T0 dos grupos Eugenol e 2-Phe não aumentou quando comparado ao grupo controle; entretanto, em T1, um aumento significativo foi observado em ambos os anestésicos. Não foram encontradas diferenças significativas nos níveis plasmáticos de cortisol entre os tratamentos e tempos. Portanto, 700 L L-1 de 2-Phe pode ser considerado um anestésico adequado para R. quelen.

Routinely in aquaculture, fish are manipulated, causing physiological stress responses that can cause immunosuppression, growth retardation, pain and even death. With the need to reduce these adversities in management, anesthetics are used. The objective of this work was to evaluate the ideal concentration (IC) and its effects on the stress responses of Rhamdia quelen submitted to two protocols of anesthesia, with 2-Phenoxyethanol (2-Phe) and essential oil of Eucalyptus globulus (EEO) described in distinct articles. In Article 1, the analysis of the chemical profile of the EEO showed that 1,8-cineole is the major component of the oil. Then, two experiments were carried out. I) IC Assessment: Four concentrations (600, 650, 700 and 750 L L-1) were tested. With the increase in OEE concentrations, the anesthetic induction times of silver catfish were reduced, however, these concentrations did not influence recovery times. EEO was considered an effective anesthetic for R. quelen (128.65 ± 40.42 g) with a IC of 700 L L-1 (induction time 2.74 ± 0.67 min and recovery 2.26 ± 1.09 min). During this experiment, no mortalities were observed. II) Stress assessment: The fish were divided into three groups: control (baseline values, no anesthetic); eugenol (50 mg L-1) and EEO (700 L L-1). In this assay, EEO inhibited the primary stress response (cortisol did not increase). However, plasma glucose and lactate levels increased. Meanwhile, eugenol kept all stress indicators the same as the control group. Therefore, although EEO has adequate anesthetic characteristics, it should be used with caution, as it did not prevent changes in plasma glucose and lactate levels in R. quelen. Article 2: Two experiments were carried out. I) IC Assessment: Seven concentrations of 2-Phe were tested: 300, 400, 500, 550, 600, 650 and 700 L L-1. Increasing 2-Phe concentrations, induction times decreased, while recovery times increased. The 2-Phe IC for anesthetizing R. quelen (126.47 ± 41.14 g) was 700 L L-1 (induction 2.98 ± 0.34 min and recovery time 2.75 ± 0.35 min). II) Stress assessment: The fish were divided into three groups: Control (baseline values, no anesthetic); 2-Phe (700 L L-1); and Eugenol (50 mg L-1). Plasma cortisol, glucose and lactate levels were measured in fish as stress indicators at two different times: time zero (T0 = anesthetized) and time one (T1 = one hour after anesthesia). The animals in the 2-Phe and Eugenol groups showed a significant increase in glucose values when compared to the control group. Plasma lactate at T0 in the Eugenol and 2-Phe groups did not increase when compared to the control group; however, at T1, a significant increase was observed for both anesthetics. No significant differences were found in plasma cortisol levels between treatments and times. Therefore, 700 L L-1 of 2-Phe can be considered a suitable anesthetic for R. quelen.

MAPEAMENTO DE ARRAIAS FLUVIAIS DO GÊNERO POTAMOTRYGON NO RIO TIETÊ, ESTADO DE SÃO PAULO

As arraias fluviais são peixes adaptados às águas dos rios e lagos e são encontradas nas bacias hidrográficas da América do Sul. A expansão da família zoológica no médio e alto rio Paraná iniciou-se após o represamento do Salto de Sete Quedas, atingindo a foz dos rios Paranapanema e Tietê, com invasão de um amplo trecho do baixo rio Tietê. Foram mapeadas dezesseis arraias do gênero Potamotrygon, por meio do monitoramento do produto pesqueiro dos pescadores, entre os municípios de Pereira Barreto e Buritama, Estado de São Paulo. As arraias aproveitam-se das eclusas das Usinas Hidrelétricas, avançando rapidamente. Não são animais agressivos, contudo, se pisoteadas ou manipuladas, chicoteiam a cauda contra o agressor. A arraia possui de 1 a 4 ferrões recobertos por um epitélio produtor de peçonha e podem causar importantes envenenamentos em pescadores e banhistas. O avanço destes peixes peçonhentos em áreas onde não existiam requer programas de esclarecimentos e interação com a comunidade para evitar acidentes graves em banhistas e pescadores e extermínio sem razão dos animais.

The freshwater stingrays are fish adapted to waters of the rivers and lakes, only existing in the hydrographic basins of South America. The expansion of the zoological family in the middle and upper Paraná River started after the damming of the Salto de Sete Quedas, reaching the mouth of the Paranapanema and Tietê Rivers and colonizing upstream in the stretch of the lower Tietê River. Sixteen freshwater stingrays of the genus Potamotrygon were mapped, by monitoring the fishery product of fishermen, between the municipalities of Pereira Barreto and Buritama, State of São Paulo. The stingrays take advantage of the locks of the Hydroelectric Plants, advancing rapidly. They are not aggressive animals, however, if trampled or manipulated, they whip the tail that has 1 to 4 stingers covered by a venom-producing epithelium and can cause important injuries to fishermen and bathers. The advancement of these venomous fish in areas where they did not exist requires programs for clarification and interaction with the community, to avoid serious accidents with envenomations in bathers and fishermen and the unreasonable extermination of animals

SOROPREVALÊNCIA DE TRIPANOSSOMÍASE, RINOTRAQUEÍTE INFECCIOSA BOVINA E DIARREIA VIRAL BOVINA EM BOVINOS COM SUSPEITA DE TRIPANOSSOMA VIVAX

A tripanossomíase bovina apresenta alta morbidade e mortalidade, que associados à inespecificidade dos sinais clínicos possibilitam sua rápida disseminação e culminam em graves prejuízos produtivos e reprodutivos. Os sinais clínicos são comuns a outras enfermidades como rinotraqueíte infecciosa bovina (IBR) e diarreia viral bovina (BVD). Visto isso, o presente trabalho objetivou avaliar a soroprevalência de T. vivax em animais com suspeita clínica da doença e comparar à soroprevalência de IBR e BVD, além de avaliar a sazonalidade das três patologias e se ocorrem de forma concomitante em fêmeas bovinas. Foi realizado um estudo retrospectivo por levantamento de registros do laboratório de Medicina Veterinária preventiva do Hospital Veterinário de Uberaba. No período compreendido entre 2013 e 2020 foram encaminhadas para o Hospital Veterinário de Uberaba (HVU) da Universidade de Uberaba (UNIUBE) 1443 amostras de sangue de fêmeas bovinas com suspeita clínica de tripanossomíase (distúrbios reprodutivos, apatia, febre, anorexia, anemia e queda na produção) para exame sorológico por imunofluorescência indireta, das quais 121 foram solicitados testes de ELISA indireto, buscando estabelecer diagnóstico diferencial para IBR e 123 para BVD. Para melhor interpretação, os dados foram agrupados de acordo com a doença e estações do ano. Pode-se notar que 57,10% (824/1443) eram positivas para T. vivax, 87,60% (106/121) para IBR e 70,73% (87/123) para BVD. Nota-se que as fêmeas bovinas com suspeita clínica de tripanossomíase apresentaram soroprevalência para T. vivax inferior (p<0,05) em relação a IBR e BVD. De acordo com as análises obtidas no presente trabalho, pode-se concluir que a prevalência de anticorpos anti-T. vivax em fêmeas bovinas com suspeita clínica de tripanossomíase é acima de 50%, durante todo o ano, exceto no inverno. A prevalência de IBR e BVD em fêmeas bovinas com suspeita clínica de tripanossomíase é maior que a prevalência de anticorpos anti-T. vivax. A prevalência de T. vivax e IBR variou de acordo com a sazonalidade. T. vivax pode se apresentar concomitantemente com IBR e BVD em fêmeas bovinas, sendo importante estabelecer o diagnóstico diferencial.

Bovine trypanosomiasis has high morbidity and mortality, associated with non-specificity of clinical signs allowing its rapid dissemination and culminating in serious productive and reproductive losses. Clinical signs are common to other diseases such as infectious bovine rhinotracheitis (IBR) and bovine viral diarrhea (BVD). Therefore, this study aimed to evaluate the seroprevalence of T. vivax in animals with clinical suspicion of the disease and to compare the seroprevalence infectious bovine rhinotracheitis (IBR) and bovine viral diarrhea (BVD), in addition to evaluating the seasonality of the three pathologies and whether they occur concomitantly in female cattle. A retrospective study was performed by surveying the records of the preventive veterinary medicine laboratory at the Veterinary Hospital of Uberaba. In the period between 2013 and 2020, 1443 blood samples from female cattle with clinical suspicion of trypanosomiasis (reproductive disorders, apathy, fever, anorexia, anemia and production decrease) were sent to the Uberaba University Veterinary Hospital (HVU) (UNIUBE) for serological examination by indirect immunofluorescence, of which 121 indirect ELISA tests were requested, seeking to establish a differential diagnosis for IBR and 123 for BVD. For better interpretation, data were grouped according to disease and seasons of the year. It can be noted that 57.10% (824/1443) were positive for T. vivax, 87.78% (106/121) for IBR and 70.73% (87/123) for BVD. Notice that bovine females with clinical suspicion of trypanosomiasis presented lower seroprevalence for T. vivax (p<0.05) compared to IBR and BVD. According to the analyzes obtained in the present work it can be concluded that the prevalence of anti-T. vivax in bovine females with clinical suspicion of trypanosomiasis is above 50%, throughout the year, except in winter. The prevalence of IBR and BVD in bovine females with clinical suspicion of trypanosomiasis is higher than the prevalence of anti-T. vivax. The prevalence of T. vivax and IBR varied according to seasonality. T. vivax can present concomitantly with IBR and BVD in bovine females, and it is important to establish a differential diagnosis.

EFEITO DA OZONIOTERAPIA NA REPARAÇÃO DE FRATURAS EXPERIMENTAIS EM FÊMUR DE COELHOS

Objetivou-se avaliar o efeito da ozonioterapia na reparação de fraturas experimentais em fêmures de coelhos por meio de avaliação clínica, radiográfica e histológica. Foram utilizados 24 coelhos (Oryctolagus cuniculus) da raça Nova Zelândia, machos, que foram submetidos à osteotomia femoral e osteossíntese e divididos aleatoriamente em dois grupos: controle (n=12), que não recebeu tratamento complementar e ozônio (n=12) que recebeu ozonioterapia por vias subcutânea e retal no pós-operatório. O exame clínico dos animais foi realizado diariamente com inspeção da ferida cirúrgica e palpação femoral para verificar a existência de reação inflamatória, instabilidade do foco de fratura, atrofia muscular e sensibilidade dolorosa. Avaliações radiográficas foram realizadas no pós-operatório imediato e após 15, 30, 45, 60, 75 e 90 dias, utilizando uma escala adaptada para classificação dos escores de alinhamento, aparato, aposição e atividade biológica. Realizou-se avaliação histológica aos 45 e 90 dias de pós-operatório. A análise estatística para dados não paramétricos e não pareados foi realizada pelo teste de Mann Whitney, e para dados não paramétricos e pareados pelo teste Wilcoxon. Os dados paramétricos foram analisados pelos testes de Kolmogorov-Smirnov e Shapiro-WilkK e as médias comparadas pelo teste T de Student. Clinicamente os animais se recuperaram bem no pós-operatório, sem apresentarem complicações. Não houveram diferenças significativas entre as medianas dos escores de alinhamento, aparato, aposição, reação periosteal, formação de calo ósseo, ponte óssea, linha de osteotomia e remodelação nos grupos controle e ozônio em nenhum dos tempos avaliados. Entretanto, quando comprado dentro do mesmo grupo, houve aumento significativos dos escores de formação de calo ósseo e de ponte óssea aos 15 e 30 dias em ambos os grupos experimentais. Houveram aumentos significativos dos escores de linha de osteotomia aos 15, 30 e 45 dias em ambos os grupos e no escore de remodelação aos 90 dias no controle e aos 45 dias no ozônio. A mediana do escore de atividade biológica do grupo ozônio foi superior ao controle aos 30 dias. A área de neoformação óssea foi maior no grupo ozônio quando comparada ao controle aos 45 e 90 dias de pós-operatório. Observou-se redução na área de osso neoformado no grupo ozônio aos 90 dias quando comparada aos 45 dias de pós-operatório. A contagem de osteócitos foi maior no grupo ozônio quando comparada ao controle aos 90 dias de pós-operatório. Conclui-se que o ozônio favoreceu a reparação de fraturas por meio do aumento do número de osteócitos e da secreção de matriz óssea.

The aim of this study was to evaluate the effect of ozone therapy on feeding experimental fractures in rabbit femurs through clinical, radiographic and histological evaluation. Twenty-four New Zealand male rabbits (Oryctolagus cuniculus) were used, which were broken by femoral osteotomy and osteosynthesis and randomly divided into two groups: control (n=12), who did not receive complementary treatment and ozone (n=12) who received ozone therapy via subcutaneous and rectal routes in the postoperative period. The clinical examination of the animals was performed daily with inspection of the surgical wound and femoral palpation to check for the existence of an inflammatory reaction, instability of the fracture site, muscle atrophy and pain sensitivity. Radiographic evaluations were carried out in the immediate postoperative period and after 15, 30, 45, 60, 75 and 90 days, using an adapted scale for classification of alignment, apparatus, apposition and biological activity scores. Histological evaluation was performed at 45 and 90 days after surgery. Statistical analysis for non-parametric and unpaired data was performed using the Mann Whitney test, and for non-parametric and paired data using the Wilcoxon test. Parametric data were analyzed using the Kolmogorov-Smirnov and Shapiro-Wilk tests and the means were compared using the Student's T test. Clinically, the animals recovered well in the postoperative period, without any complications. There were no significant differences between the median scores for alignment, apparatus, apposition, periosteal reaction, bone callus formation, bone bridge, osteotomy line and remodeling in the control and ozone groups in any of the evaluated times. However, when purchased within the same group, there was a significant increase in bone callus formation and bone bridge scores at 15 and 30 days in both experimental groups. There were significant increases in the osteotomy line scores at 15, 30 and 45 days in both groups and in the remodeling score at 90 days in the control and at 45 days in ozone. The median biological activity score of the ozone group was higher than the control at 30 days. The area of bone neoformation was greater in the ozone group when compared to the control at 45 and 90 days after surgery. There was a reduction in the area of newly formed bone in the ozone group at 90 days when compared to 45 days after surgery. Osteocyte counts were higher in the ozone group when compared to the control group at 90 days after surgery. It is concluded that ozone favored fracture repair by increasing the number of osteocytes and the secretion of bone matrix.

APRESENTAÇÃO CLINICA E FATORES PROGNÓSTICOS PRESENTES NOS CÃES COM LINFOMA CUTÂNEO ATENDIDOS NO HOSPITAL VETERINÁRIO GOVERNADOR LAUDO NATEL ENTRE 2008-2020: ESTUDO RETROSPECTIVO DE 80 CASOS

O linfoma cutâneo é uma enfermidade que compreende cerca de 3 a 8% de todos os linfomas em cães e 1% dos neoplasmas cutâneos. É uma doença que pode apresentar lesões cutâneas em patch, placas ou nodulares, que por vezes se apresentam de forma localizada ou disseminada pelo corpo. As lesões podem se apresentar ulceradas e com prurido, devido a um tropismo de linfócitos neoplásicos pela epiderme, derme e anexos cutâneos. O curso da doença costuma ser muito agressivo, de difícil controle e prognóstico desfavorável. Objetivou-se definir o perfil do paciente que é acometido por essa doença e, dessa forma, tentar encontrar fatores prognósticos que possam ajudar a definir a melhorar a conduta clínica para esses pacientes. Foram analisadas as fichas clinicas de 80 cães com diagnóstico de linfoma cutâneo e coletado dados como raça, sexo, idade, peso corporal, apresentação clínica das lesões, alterações sistêmicas e laboratoriais, tratamento de eleição, resposta terapêutica e tempo de sobrevida. Foi possível observar que essa enfermidade acomete mais cães de médio a grande porte, sem predileção sexual, com apresentação clínica mais nodular e disseminada, com baixa resposta aos tratamentos instituídos. Todos os fatores em que foi comparada a taxa de sobrevida obtiveram um p>0,05, o que significa que estatisticamente não interferiram no prognóstico desses pacientes.

Cutaneous lymphoma is a disease that comprises about 3 to 8% of all lymphomas in dogs and 1% of cutaneous neoplasms. It is a disease that can cause skin lesions in patches, plaques or nodules, which sometimes present in a localized or disseminated form throughout the body, and may contain ulcerated and itchy lesions, this is due to a tropism of neoplastic lymphocytes in the epidermis, dermis and cutaneous attachments. The course of the disease is usually very aggressive, difficult to control and has an unfavorable prognosis, because of this it aimed to define the profile of the patient who acquired this disease and, thus, try to find prognostic factors that can help to improve the clinical conduct of these animals. The medical records of 80 dogs diagnosed with cutaneous lymphoma were analyzed and data such as race, sex, age, body weight, clinical presentation of lesions, systemic and laboratory changes, treatment of choice, therapeutic response and survival time were collected. It was possible to observe that this disease affects more dogs of medium to large size, without sexual predilection, with a more nodular and widespread clinical presentation, with low response to the instituted treatments, all the factors in which the survival rate was compared obtained a p> 0.05, which means that they did not statistically interfere with the prognosis of these patients.

IMUNIZAÇÃO ORAL PARA INCREMENTO DA RESPOSTA IMUNOLÓGICA NO CONTROLE DA INFECÇÃO POR Mycoplasma hyopneumoniae EM SUÍNOS

Mycoplasma (M.) hyopneumoniae é o principal patógeno da pneumonia enzoótica suína (PES). Seu controle é desafiador e requer estratégias alternativas à vacinação convencional. Este estudo teve como objetivo desenvolver uma vacina oral contra M. hyopneumoniae utilizando uma sílica mesoporosa nanoestruturada (SBA-15) como adjuvante, e comparar seu efeito com uma vacina comercial intramuscular (IM) (CV). Cinquenta leitões livres de M. hyopneumoniae, com 24 dias de idade, constituíram cinco grupos iguais para diferentes protocolos de imunização, consistindo de uma imunização CV e/ou oral (OI). Os leitões controle não receberam nenhuma forma de imunização. Todos os leitões foram desafiados com M. hyopneumoniae cepa 232 no D49 pela via traqueal. Semanalmente, foram avaliadas a resposta de anticorpos IgA no trato respiratório e a quantificação de DNA bacteriano excretado pela via nasal, e quinzenalmente avaliou-se a IgG sérica. Os leitões foram eutanasiados aos 28 (D77) e 56 (D105) dias pós-infecção. Lesões pulmonares foram avaliadas macroscopicamente; fragmentos de pulmão e fluido broncoalveolar (BALF) foram coletados para estimativa das cargas bacterianas por qPCR e exame histopatológico. Todos os protocolos de imunização induziram redução nas lesões pulmonares macroscópicas Mycoplasma-like. Respostas de IgA anti-M. hyopneumoniae, a expressão da citocina IL-4 e uma expressão mais baixa de IL-8 foram induzidas por vacinas CV e OI, enquanto IgG foi induzida apenas por CV. A imunização oral usando sílica como um carreador adjuvante pode ser viável no controle da infecção por M. hyopneumoniae.

Mycoplasma (M.) hyopneumoniae is the main pathogen of porcine enzootic pneumonia (PEP). Its controlling is challenging, and requires alternative strategies. This study aimed to develop an oral vaccine against M. hyopneumoniae using a nanostructured mesoporous silica (SBA-15) as an adjuvant, and compare its effect with an intramuscular (IM) commercial vaccine (CV). Fifty 24 day-old M. hyopneumoniae-free piglets composed five equal groups for different immunization protocols, consisting of a CV and/or oral immunization (OI). Control piglets did not receive any form of immunization. All piglets were challenged with M. hyopneumoniae strain 232 on D49 by tracheal route. IgA antibody response in the respiratory tract, bacterial shedding and serum IgG were evaluated. The piglets were euthanized on 28 (D77) and 56 (D105) days post-infection. Lung lesions were macroscopically evaluated; lung fragments and bronchoalveolar fluid (BALF) were collected for estimation of bacterial loads by qPCR and/or histopathology examination. All immunization protocols induced reduction on Mycoplasma-like macroscopic lung lesions. IgA Ab responses anti-M. hyopneumoniae, the expression of IL-4 cytokine and a lower expression of IL-8 were induced by CV and OI vaccines, while IgG was induced only by CV. Oral immunization using silica as a carrier-adjuvant can be viable in controlling M. hyopneumoniae infection

EFEITO DA UTILIZAÇÃO DA MOXATERAPIA E POLIHEXAMETILENO BIGUANIDA (PHMB) NA CICATRIZAÇÃO DE FERIDAS EM CÃES

O processo de cicatrização é um fenômeno biológico essencial para a sobrevivência dos animais. Assim, estudar a cicatrização e encontrar meios para melhorar este processo é altamente relevante. O polihexametileno biguanida (PHMB) assim como a moxaterapia, tem sido utilizado na cicatrização de tecidos, mas a evidência dos seus efeitos é escassa na literatura médica. Assim, este estudo, objetivou analisar as ações terapêuticas, com ênfase no tempo de cicatrização das feridas, após a utilização dos produtos supracitados. Foram utilizados 40 cães hígidos, sem distinção de gênero, raça, idade, com peso entre 10 e 30 kg. Os animais foram castrados e, no mesmo momento cirúrgico, foi criada uma lesão cutânea limpa, circular na região abdominal, com 1 cm de diâmetro. Eles foram divididos em 4 grupos experimentais de 10 animais cada. Grupo Moxaterapia, Grupo PHMB 2 vezes ao dia e Grupo PHMB 1 vez ao dia (tratados com PHMB com trocas a cada 12 e 24 horas, respectivamente), e Grupo Controle (tratado com solução salina estéril 0,9%). Avaliações macroscópicas do processo de cicatrização foram realizadas diariamente durante 10 dias. Ao final do período, foi realizada biópsia excisional da área de cicatrização da ferida, permitindo avaliação histopatológica, histomorfométrica e imunohistoquímica. As variáveis foram analisadas por meio de Cumulative Link Mixed Model, testes de razão de verossimilhança, teste de comparações múltiplas de Bonferroni, adotando-se nível de significância igual a 5%. Os animais tratados com moxaterapia apresentaram menor dor/desconforto, prurido e melhor processo de cicatrização no nível macroscópico em relação ao grupo controle; e, quanto ao PHMB, não houve diferença significativa. Comparando os animais tratados com moxaterapia e PHMB, em relação aos animais não tratados, não houve diferença significativa, entretanto, ao comparar os grupos tratados com PHMB com o grupo tratado com moxaterapia, observou-se diferença significativa em relação à presença e quantidade de secreção. Histopatologicamente, a moxaterapia não diferiu do grupo controle, enquanto o grupo PHMB duas vezes ao dia apresentou efeito significativo no processo de colagenização. Na análise imunohistoquimica, não obteve diferença estatistica significativa na angiogenese e reepitelização da ferida quando comparado com o grupo controle. Conclui-se que o tratamento de feridas limpas a partir de curativos com PHMB e moxaterapia são eficazes como agentes promotores da cicatrização, mesmo não diminuído o tempo, permitiram manter os leitos das feridas em um ambiente propicio para progredir em direção ao fechamento da mesma, permitindo a profilaxia antibacteriana sem o uso de terapias antibióticas, diminuído o risco de resistência.

The healing process is an essential biological phenomenon for the survival of animals. Thus, studying healing and finding ways to improve this process is highly relevant. Polyhexamethylene biguanide (PHMB), as well as moxatherapy, has been used in tissue healing, but evidence of its effects is scarce in the medical literature. Thus, this study aimed to analyze the therapeutic actions, with emphasis on the time of wound healing after using the aforementioned products. Forty healthy dogs, without distinction of gender, breed, age, and weight between 10 and 30 kg were used. The animals were castrated and, at the same surgical moment, a clean, circular cutaneous lesion was created in the abdominal region, measuring 1 cm in diameter. They were divided into 4 experimental groups of 10 animals each. Moxatherapy Group, PHMB Group twice a day and PHMB Group once a day (treated with PHMB with changes every 12 and 24 hours, respectively), and Control Group (treated with 0.9% sterile saline solution). Macroscopic evaluations of the healing process were performed daily for 10 days. At the end of the period, an excisional biopsy of the wound healing area was performed, allowing for histopathological, histomorphometric and immunohistochemical evaluation. The variables were analyzed using the Cumulative Link Mixed Model, likelihood ratio tests, Bonferroni multiple comparisons test, adopting a significance level equal to 5%. The animals treated with moxatherapy had less pain/discomfort, pruritus and better healing process at the macroscopic level compared to the control group; and, as for PHMB, there was no significant difference. Comparing the animals treated with moxatherapy and PHMB, in relation to the untreated animals, there was no significant difference, however, when comparing the groups treated with PHMB with the group treated with moxatherapy, there was a significant difference in relation to the presence and amount of secretion. Histopathologically, moxatherapy did not differ from the control group, while the twice-daily PHMB group had a significant effect on the collagenization process. In the immunohistochemical analysis, there was no statistically significant difference when compared to the control group. concludes that the treatment of wounds cleaned from dressings with PHMB and moxatherapy are effective as agents to promote healing, even if the time is not reduced, they allowed to keep the wound beds in a favorable environment to progress towards the closure of the same, allowing the antibacterial prophylaxis without the use of antibiotic therapies, decreased the risk of resistance.

AVALIAÇÃO DA PRODUÇÃO, QUALIDADE E CRIOTOLERÂNCIA DE EMBRIÕES CULTIVADAS EM SOFaaci TRADICIONAL E SEQUENCIAL EM TRÊS ATMOSFERAS DE OXIGÊNIO

O presente estudo avalia a produção, qualidade, criotolerância e estresse oxidativo de embriões bovinos desenvolvidos em dois meios de cultivo, SOFaaci tradicional e SOFaaci sequencial, em diferentes atmosferas de cultivo. Um total de 11640 cumulus oócitos foram maturados em meio de maturação (TCM 199) por 24h. Após os oócitos foram co-incubados com sêmen em meio Talp-FIV por aproximadamente 20h. Logo, os presumíveis zigotos foram cultivados em meio SOFaaci tradicional ou SOFaaci sequencial. Seis grupos experimentais foram formados, MT20= meio tradicional a 20% de O2; MT12= meio tradicional a 12% de O2; MT5= meio tradicional a 5% de O2; MS20= meio sequencial a 20% de O2; MS12 = meio sequencial em 12% de O2 e MS5= meio sequencial em 5% de O2. O cultivo dos embriões com o meio sequencial foi iniciado com SOFaaci A, às 96 e 120hpf era feito a substituição de 75% do volume das gotas de CIV com o meio SOFaaci B. Nos grupos em que foi feito o CIV com meio SOFaaci tradicional, a renovação era realizada da mesma maneira, porém com o próprio SOFaaci tradicional. Ao se completarem sete dias de CIV os embriões foram vitrificados em hastes de vitrificação. Os resultados foram analisados com ANOVA e posterior Teste de Tukey e Teste de X2 com nível de significância à 5%. Na produção embrionária, os grupos em que foi utilizado o meio SOFaaci tradicional foram superiores ao meio SOFaaci sequencial (P=0.028) e a redução na atmosfera de O2 também teve efeito benéfico na taxa de embriões produzidos MT20= 45,3%; MT12= 49,7%; MT5= 53,9%; MS20= 40,2%; MS12= 41,6%; MS5= 45,0%, o número de células totais foi maior nos grupos cultivados em meio tradicional e atmosfera controlada (P<0.05) (MT20=114; MT12= 128; MT5=131; MS20=98; MS12=110; MS5= 112;), tendo, também um maior estresse oxidativo em embriões produzidos em atmosfera controlada (P<0.01) (MT20=4,10; MT12=5,30; MT5=7,46; MS20=4,23; MS12=8,27; MS5=5,93). Os embriões vitrificados e reaquecidos que foram cultivados em SOFaaci tradicional não diferiram entre si na taxa de recuperação nas três atmosferas utilizadas MT20= 60,2%; MT12= 66,6%; MT5= 60,6%. Por outro lado, os embriões cultivados em SOFaaci sequencial apresentaram maior taxa de recuperação na atmosfera de 5% de O2 (P<0,05) MS20= 42,3%, MS12= 53,0%; MS5= 80,1%. Entretanto, a taxa de eclosão dos embriões vitrificados e reaquecidos cultivados em meio SOFaaci tradicional nas atmosferas de 20% e 12% de O2 apresentaram as maiores taxas de eclosão (P<0,05) MT20= 70,7%; MT12= 81,2% e semelhante aos embriões cultivados em SOFaaci sequencial na atmosfera de 12% de O2 MT12= 70,9%. O estresse oxidativo de embriões vitrificados, não diferiu entre os grupos. Concluímos que embriões cultivados em SOFaaci tradicional em atmosferas controladas, apresentam maior produção, número de células e concentrações de espécies reativas de oxigênio. A recuperação após o reaquecimento foi melhor no SOFaaci sequencial na atmosfera de 5% de O2, mas as maiores taxas de eclosão foram obtidas em SOFaaci tradicional e sequencial na atmosfera de 12% de O2.

This study evaluates bovine embryos production, quality, cryotolerance and oxidative stress when developed in two culture medias, traditional SOFaaci and sequential SOFaaci in different culture atmospheres. A total of 11.640 cumulus oocytes were matured in maturation medium (TCM 199) for 24h. Afterwards, the oocytes were co-incubated with semen in Talp-FIV medium for approximately 20h. Therefore, presumptive zygotes were cultured in traditional SOFaa or sequential SOFaaci medium. Six experimental groups were formed, TM20= traditional medium at 20% O2; TM12= traditional medium at 12% O2; TM5= traditional medium at 5% O2; SM20= Sequential medium at 20% O2; SM12 = sequential medium in 12% O2 and SM5= sequential medium in 5% O2. The cultivation of embryos with the sequential medium was started with SOFaaci A, at 96 and 120hpf, 75% of the volume of the CIV drops was replaced with SOFaaci B medium. In groups where the CIV was carried out with traditional SOFaa, the renovation was carried out in the same way, but with the traditional SOFaa itself. At the end of seven days of CIV, the embryos were vitrified in vitrification rods. The results were analyzed with ANOVA and subsequent Tukey Test, and X2 Test with a 5% significance level. In embryo production, the groups in which the traditional medium was used were superior to the sequential medium (P=0.028) and the reduction in the O2 atmosphere also had a beneficial effect on the rate of embryos produced (TM20=45%; TM12=49%; TM5=53%; SM20= 40%; SM12=41%; SM5: 45%), the number of total cells was higher in the groups cultivated in traditional medium and controlled atmosphere (P=0.5) (TM20=114; TM12= 128; TM5=131; SM20= 98; SM12= 110; SM5= 112;), also having a higher oxidative stress in sequential medium and atmosphere embryos controlled (P=0.001) (TM20=4,10; TM12=5.30; TM5=7.46; SM20=4.23; SM12=8.27; SM5=5.93). The vitrified and reheated embryos that were cultivated in traditional SOFaaci did not differ from each other in the recovery rate in the three atmospheres used TM20 = 60.2%; TM12 = 66.6%; TM5 = 60.6%. On the other hand, embryos cultured in sequential SOFaaci higher rate of recovery in atmosphere 5% O2 (P < 0.05) SM20 = 42.3%, SM12 = 53.0%; SM5 = 80.1%. However, the hatch rate of vitrified and rewarmed embryos cultured in traditional SOFaaci medium in 20% and 12% O2 atmospheres outside the highest hatch rates (P <0.05) TM20 = 70.7%; TM12 = 81.2% and similar to embryos cultured in sequential SOFaaci in the atmosphere of 12% O2 SM12 = 70.9%. Oxidative stress of vitrified embryos did not differ between groups. We concluded that embryos cultivated in traditional SOFaaci in controlled atmospheres present greater production, number of cells and groups of reactive oxygen species. Recovery after reheat was better in sequential SOFaaci in 5% O2 atmosphere, but higher hatch rates were upgraded in traditional and sequential SOFaaci in 12% O2 atmosphere.

Viabilidade, resistência antimicrobiana e ação antagônica de Lactobacillus spp. isolados de leites fermentados frente a cepas de Listeria monocitogenes

Objetivou-se analisar a viabilidade, resistência antimicrobiana e a ação antagônica de Lactobacillus spp. isolados de leites fermentados frente a cepas de Listeria monocitogenes. Foram analisadas nove marcas de leites fermentados comerciais, adquiridas em duplicata, e inicialmente foram submetidas a avaliação da rotulagem, onde se utilizou padrões estabelecidos pela legislação brasileira. Em seguida, realizou-se a medição do pH e a avaliação da viabilidade das amostras, por contagem de Lactobacillus spp. Posteriormente foram realizados o isolamento de Lactobacillus spp. e a avaliação do perfil de resistência a antimicrobianos e a detecção da atividade antagonista dos isolados. Analisou ainda a capacidade dos isolados formarem biofilmes in vitro e sua ação frente a biofilmes consolidados de L. monocytogenes. Por fim, realizou-se a co-inoculação experimental com L. monocytogenes durante dez dias. Todos os leites fermentados avaliados se apresentaram conformes, de acordo com a legislação de rotulagem. Constatou-se que os valores de pH das amostras não apresentaram diferença acentuada, verificando-se valores entre 3,60 a 4,53 e que os produtos apresentaram viabilidade, do ponto de vista da presença de Lactobacillus spp.. Nove cepas de Lactobacillus spp. foram isoladas e todas apresentaram resistência a pelo menos um dos antimicrobianos testados. 66,66% (06/09) dos isolados se apresentaram resistentes à vancomicina, à ciproflaxicina e à gentamicina. Foram resistentes à oxacilina, 88,88% (08/09) das cepas. Já para ceftazidima e penicilina, constatou-se uma resistência de 100% (09/09). Tetraciclina e clindamicina apresentaram maior sensibilidade às cepas, onde o primeiro apresentou 33,33% (03/09) dos isolados resistentes e o segundo um percentual de apenas 11,11% (01/09) de resistência. As nove cepas foram submetidas a análise da atividade antagonista, onde não se observou inibição do crescimento de L. monocytogenes. As mesmas cepas também foram submetidas a avaliação da capacidade de formar biofilmes microbianos e cinco delas foram classificadas como fortes formadoras de biofilme e essas foram testadas frente a biofilmes consolidados de L. monocytogenes, no entanto nenhuma obteve resultado satisfatório. Na inoculação experimental, foi observado o crescimento da cepa de L. monocytogenes, em todas as amostras, ao longo dos dez dias analisados, bem como se percebeu que não houve redução nas populações de BAL que foram inoculadas com o patógeno. Nesse contexto, o consumo de leites fermentados pode trazer benefícios para a saúde da população, principalmente quando apresentam bactérias consideradas probióticas. A pesquisa de bactérias do gênero Lactobacillus nos produtos forneceu dados favoráveis, pois evidenciou que todas as amostras esses microrganismos ativos e viáveis. Foi possível constatar que não houve falhas na rotulagem, de acordo com às normas de produtos de origem animal nos leites fermentados analisados, no entanto destaca-se a presença de embalagens que estimulam o consumo do produto pelo público infantil, bem como a não identificação da alegação de produto probiótico na maioria das amostras. Também foi possível observar que, apesar da presença de Lactobacillus spp, não houve inibição do patógeno L. monocytogenes em todas as análises realizadas, não se evidenciando efeito bacteriocinogênico nos microrganismos que compõem os leites fermentados comerciais analisados. Além disso, é importante destacar que é fundamental a realização de análises voltadas à resistência de bactérias do grupo L. casei a antimicrobianos, sendo preciso realizar uma seleção de cepas comerciais que, comprovadamente, não apresentem resistência adquirida a antimicrobianos para a composição de produtos como os leites fermentados, tendo em vista que essa pesquisa constatou resistência de cepas de Lactobacillus spp. aos antimicrobianos testados.

The aim of this study was to analyze the viability, antimicrobial resistance and antagonistic action of Lactobacillus spp. isolated from fermented milk against Listeria monocytogenes strains. Nine brands of commercial fermented milk, purchased in duplicate, were analyzed and initially subjected to labeling evaluation, using standards established by Brazilian legislation. Then, the pH was measured and the viability of the samples was evaluated by counting Lactobacillus spp. Later, the isolation of Lactobacillus spp. and the evaluation of the antimicrobial resistance profile and the detection of the antagonistic activity of the isolates. It also analyzed the capacity of isolates to form biofilms in vitro and their action against consolidated biofilms of L. monocytogenes. Finally, experimental co-inoculation with L. monocytogenes was carried out for ten days. All the fermented milks evaluated were in compliance with the labeling legislation. It was found that the pH values of the samples did not show a marked difference, with values between 3.60 to 4.53 and that the products showed viability, from the point of view of the presence of Lactobacillus spp. Nine strains of Lactobacillus spp. were isolated and all showed resistance to at least one of the antimicrobials tested. 66.66% (06/09) of the isolates were resistant to vancomycin, ciproflaxicin and gentamicin. 88.88% (08/09) of the strains were resistant to oxacillin. As for ceftazidime and penicillin, a resistance of 100% was found (09/09). Tetracycline and clindamycin showed greater sensitivity to strains, where the first showed 33.33% (03/09) of resistant isolates and the second a percentage of only 11.11% (01/09) of resistance. The nine strains were subjected to analysis of antagonist activity, where no inhibition of L. monocytogenes growth was observed. The same strains were also submitted to evaluation of their ability to form microbial biofilms and five of them were classified as strong biofilm formers and these were tested against consolidated biofilms of L. monocytogenes, however none of them had a satisfactory result. In the experimental inoculation, the growth of the L. monocytogenes strain was observed, in all samples, over the ten days analyzed, and it was noticed that there was no reduction in the populations of BAL that were inoculated with the pathogen. In this context, the consumption of fermented milk can bring benefits to the health of the population, especially when they contain bacteria considered to be probiotic. The research of bacteria of the Lactobacillus genus in the products provided favorable data, as it showed that all samples had these active and viable microorganisms. It was found that there were no labeling failures, in accordance with the standards for animal products in the analyzed fermented milk, however, the presence of packaging that encourages the consumption of the product by children, as well as the non-identification of the product, stands out. probiotic product claim in most samples. It was also possible to observe that, despite the presence of Lactobacillus spp, there was no inhibition of the pathogen L. monocytogenes in all the analyzes performed, with no evidence of a bacteriocinogenic effect on the microorganisms that make up the commercial fermented milk analyzed. In addition, it is important to highlight that it is essential to carry out analyzes aimed at the resistance of bacteria of the L. casei group to antimicrobials, it being necessary to carry out a selection of commercial strains that, demonstrably, do not show acquired resistance to antimicrobials for the composition of products such as fermented milks, considering that this research found resistance of strains of Lactobacillus spp. to tested antimicrobials.

ATIVIDADE ANTI-HELMÍNTICA IN VITRO DE NANOEMULSÕES DE CARVONA SOBRE Haemonchus contortus

A resistência anti-helmíntica tem dificultado o controle de nematoides gastrintestinais em pequenos ruminantes. Dessa forma, novas alternativas de controle estão sendo estudadas, como o nanoencapsulamento de compostos bioativos, na tentativa de maximizar a eficácia parasitária desses compostos. Este trabalho teve como objetivo avaliar a atividade ovicida, larvicida e adulticida de nanoemulsões de carvona produzida por diferentes métodos de homogeneização sobre Haemonchus contortus. Três nanoemulsões de R-carvona foram preparadas usando dois equipamentos de homogeneização (ultra homogeneizador e sonicador) e com e sem revestimento de alginato de sódio: nanoemulsões de R-carvona sem revestimento homogeneizada em sonicador (NSR-son) e homogeneizadas em ultra homogeneizador (NSR- ultra) e R-carvona com revestimento de alginato de sódio (NCR-ultra). Foi realizada a análise de estabilidade, eficiência de encapsulamento e caracterizações físico-químicas das nanoemulsões. Os efeitos das nanoemulsões foi avaliado sobre H. contortus multirresistente no teste de eclosão de ovos (TEO), teste de desenvolvimento larvar (TDL) e teste de motilidade em adultos (TMA). As alterações na cutícula induzidas em H. contortus adultos foram avaliadas por meio da microscopia eletrônica de varredura (MEV) e microscopia confocal de varredura a laser. Os resultados foram submetidos à análise de variância (ANOVA) e comparados pelo teste Tukey (P<0,05). A concentração efetiva para inibir 50% da eclosão dos ovos e do desenvolvimento larvar (CE50) foi calculada no programa SPSS 17.0. NSR-ultra e NCR-ultra, foram mais estáveis frente à sedimentação e cremeação, respectivamente. Os tamanhos de partículas foram de 281,1 nm (NSR-son), 152,7 nm (NSR-ultra) e 557,8 nm (NCR-ultra) e os potenciais zeta de -15 mV (NSR-son), -10,8 mV (NSR-ultra) e -24,2 mV (NCR-ultra). A eficiência de encapsulamento foi de 99,84±0,01%. A microscopia eletrônica de varredura nas nanoemulsões detectou aumento no tamanho, distribuição não uniforme das partículas e presença de estruturas esféricas agregadas a rede polimérica. No TEO, as CE50 de NSR-son, NSR-ultra e NCR-ultra foram de 0,19 mg/mL, 0,02 mg/mL e 0,17 mg/mL, respectivamente. No TDL foram de 0,29 mg/mL, 0,31 mg/mL e 0,95 mg/mL para NSR-son, NSR-ultra e NCR- ultra, respectivamente. A inibição da motilidade de adultos foi de 100%, após 12h de exposição a NSR-ultra e NCR-ultra, enquanto que para NSR-son foi de 79,16%. A microscopia confocal e de varredura detectaram alterações na cápsula bucal e danos cuticulares. Conclui-se que as nanoemulsões de R-carvona com e sem revestimento de alginato de sódio produzidas por diferentes métodos de homogeneização causaram alterações morfológicas e inibiram a eclosão dos ovos, o desenvolvimento larvar e a motilidade de H. contortus adulto, sendo promissoras para controle de infecções por nematoides gastrintestinais em pequenos ruminantes após avaliações futuras no que se refere à segurança toxicológica desses produtos assim como a comprovação da eficácia anti-helmíntica in vivo.

Anthelmintic resistance has made it difficult to control gastrointestinal nematodes in small ruminants. Thus, new control alternatives are being studied, such as the nanoencapsulation of bioactive compounds, in an attempt to maximize the parasitic efficacy of these compounds. This work aimed to evaluate the ovicidal, larvicidal and adulticidal activity of carvone nanoemulsions produced by different homogenization methods on Haemonchus contortus. Three R-carvone nanoemulsions were prepared using two homogenization equipment (ultra homogenizer and sonicator) and with and without sodium alginate coating: uncoated R-carvone nanoemulsions homogenized in sonicator (UNAlg-son) and homogenized in ultra homogenizer (UNAlg-ultra) and sodium alginate coated R-carvone (CNAlg-ultra). Stability analysis, encapsulation efficiency and physicochemical characterizations of the nanoemulsions were performed. The of the nanoemulsions were evaluated on multidrug resistant H. contortus in the egg hatch test (EHT), larval development test (LDT) and adult worm motility test (AWMT). Changes in cuticle induced in adult H. contortus were evaluated by means of scanning electron microscopy (SEM) and confocal laser scanning microscopy. The results were submitted to analysis of variance (ANOVA) and compared using the Tukey test (P<0.05). The effective concentration to inhibit 50% of egg hatching and larval development (EC50) was calculated using the SPSS 17.0 program. UNAlg-ultra and CNAlg-ultra were more stable against sedimentation and creamation, respectively. The particle sizes were 281.1 nm (UNAlg-son), 152.7 nm (UNAlg-ultra) and 557.8 nm (CNAlg-ultra) and the zeta potentials were -15 mV (UNAlg-son), - 10.8 mV (NSR-ultra) and -24.2 mV (CNAlg-ultra). The encapsulation efficiency was 99.84±0.01%. Scanning electron microscopy of the nanoemulsions detected an increase in size, non-uniform distribution of particles and presence of spherical structures aggregated to the polymeric network. In EHT, the EC50 of UNAlg-son, UNAlg-ultra and CNAlg-ultra were 0.19 mg/mL, 0.02 mg/mL and 0.17 mg/mL, respectively. In LDT they were 0.29 mg/mL, 0.31 mg/mL and 0.95 mg/mL for UNAlg- son, UNAlg-ultra and CNAlg-ultra, respectively. The adult motility inhibition was 100% after 12h of exposure to UNAlg-ultra and CNAlg-ultra, while for UNAlg-son it was 79.16%. Confocal and scanning microscopy detected changes in the buccal capsule and cuticular damage. It is concluded that R-carvone nanoemulsions with and without sodium alginate coating produced by different homogenization methods caused morphological changes and inhibited egg hatching, larval development and adult motility of H. contortus, being promising for control of infections by gastrointestinal nematodes in small ruminants after further evaluations regarding the toxicological safety of these products as well as proof of anthelmintic efficacy in vivo.

SUPLEMENTAÇÃO ALIMENTAR COM MICROALGA Chlorella pyrenoidosa EM CABRAS MESTIÇAS E SEUS EFEITOS SOBRE O COMPORTAMENTO INGESTIVO, SEXUAL, SOCIAL E BEM-ESTAR

Apesar da importância das microalgas como alimento funcional na alimentação humana e animal, ainda são raras as informações de um protocolo definido para o uso de microalgas na dieta de caprinos. Objetivou-se com esse estudo avaliar em cabras os efeitos da suplementação por sete dias de doses crescentes de microalga Chlorella pyrenoidosa sobre a resposta fisiológica, comportamento alimentar, social e resposta a sincronização do estro. Foram utilizadas 28 cabras que tiveram o estro sincronização por três injeções de 100g de D- Cloprostenol em intervalos de setes dias. Os animais foram divididos em quatro grupos de sete aos quais receberam durante sete dias um drench oral com 0g, 5g, 10g e 20g de microalga em solução aquosa respectiva a cada grupo. O suplemento foi fornecido quarenta e oito horas após a segunda dose de prostaglandina e terminou vinte e quatro horas após a terceira dosagem. Neste intervalo foram avaliados parâmetros fisiológicos, consumo e aceitação da dieta, comportamento alimentar e social. Após a terceira dose de prostaglandina foi verificada a resposta ao estro e o comportamento sexual utilizando-se um rufião. Os resultados evidenciaram um incremento das sobras alimentares (P < 0,001) nos grupos com microalga sem manifestar alterações do consumo ou no comportamento alimentar e social. Entre os parâmetros fisiológicos, os grupos de microalgas apresentaram uma elevação (P < 0,001) da taxa respiratória nos horários da tarde, período de maior temperatura ambiental. A resposta ao estro e o comportamento sexual foi similar entre os grupos. A utilização da Chlorella como suplemento alimentar representa uma alternativa possível para caprinos.

Despite the importance of microalgae as a functional food in human and animal nutrition, there is still no information on a defined protocol for the use of microalgae in the diet of goats. The aim of this study was to investigate in goats the effects of supplementing increasing doses of the microalgae Chlorella pyrenoidosa for 7 days on the physiological response, feeding and social behavior, as well as the response to estrus synchronization. Twenty-eight goats that had estrus synchronization by three injections of 100g of D-Cloprostenol at intervals of seven days were used and divided into four groups of 7 animals to which an oral drench with respectively 0g, 5g, 10g and 20g was given for seven days of microalgae in aqueous solution. The supplement was given from the second day after the second dose of prostaglandin and ended the day after the third dose. In this interval, physiological parameters, dietary intake and acceptance, feeding and social behavior were evaluated, and after the third dose of prostaglandin, the response to estrus and sexual behavior were verified using a castrated male. The results showed an increase in food orts (P < 0.001) in the groups with microalgae without showing changes for intake, feeding and social behavior. Among the physiological parameters, the microalgae groups showed an increase (P < 0.001) in the respiratory rate in the afternoon hours of higher environmental temperature. The estrus response and sexual behavior were similar between groups. We conclude that the use of Chlorella as a food supplement represents a possible alternative for goats.

NANOEMULSÕES DE ALGINATO E ÓLEO ESSENCIAL DE Eucalyptus staigeriana: PRODUÇÃO, CARACTERIZAÇÃO, TOXICIDADE E ATIVIDADE ANTI-HELMÍNTICA SOBRE NEMATOIDES GASTRINTESTINAIS DE PEQUENOS RUMINANTES

O parasitismo por nematoides gastrintestinais (NGI) é uma grave ameaça a ovinocaprinocultura e com o aparecimento e disseminação da resistência anti-helmíntica (RA), novas alternativas de controle são necessárias. O óleo essencial de Eucalyptus staigeriana (OEEs) apresenta atividade anti-helmíntica, e o desenvolvimento de formulações visando o seu encapsulamento usando matriz de alginato de sódio (ALG) pode ser vantajoso para aumentar sua estabilidade e eficácia. Objetivando-se desenvolver emulsões de ALG e OEEs para o controle de NGI de pequenos ruminantes, a metodologia foi realizada em três fases. Na fase 1, cujo objetivo foi caracterizar uma população de Haemonchus contortus, nomeada Caucaia, quanto à RA, realizou-se a comparação entre testes fenotípicos de eclosão de ovos (TEO), desenvolvimento larvar (TDL) e redução de ovos nas fezes (TRCOF) e genotípico por qPCR para benzimidazois (BZs) e levamisol (LEV). Houve concordância entre TEO, TRCOF e qPCR para BZs, e entre TDL e qPCR para LEV. A população Caucaia foi considerada resistente a BZs, lactonas macrocíclicas, LEV e suspeita para monepantel. Na fase 2, objetivou-se desenvolver emulsões de ALG e OEEs, caracterizá-las e avaliar seus efeitos in vitro sobre eclosão de ovos e desenvolvimento larvar de H. contortus. Quatro emulsões foram preparadas com proporções variadas de Tween 80, OEEs e ALG 4%, caracterizadas físico-quimicamente e avaliadas no TEO e TDL. As emulsões foram estáveis, com tamanho de partícula predominantemente nanométrico e potencial zeta negativo. As emulsões foram mais efetivas que o OEEs no TEO, com concentração efetiva 50% (CE50) de 0,088 a 0,150 mg/mL para as emulsões e 0,308 mg/mL para OEEs. No TDL, emulsões e OEEs foram semelhantes, com CE50 variando de 3,91 a 4,60 mg/mL para emulsões e 4,17 mg/mL para OEEs. Portanto, emulsões de ALG e OEEs foram produzidas com sucesso, sendo a emulsão 2 (E2), com menor razão Tween 80/OEEs e ALG/OEEs, considerada a melhor e com potencial para o controle alternativo de H. contortus. Na fase 3, objetivou-se avaliar E2 in vitro contra H. contortus adultos, sua toxicidade aguda e atividade in vivo contra NGI. Foram realizados os testes de motilidade do adulto (TMA), avaliação por microscopia eletrônica de varredura (MEV) e confocal de varredura a laser (MCVL). A dose letal 50% (DL50) de E2 foi verificada e o TRCOF foi realizado contra NGI da população Caucaia. No TMA, OEEs e E2 inibiram a motilidade de H. contortus e nas concentrações de 0,4 e 0,6 mg/mL, E2 foi mais efetiva que o OEEs. As imagens de MEV e de MCVL demonstraram alterações estruturais, principalmente, enrugamento de cutícula. A DL50 estimada da emulsão foi superior a 2.000 mg/kg. No TRCOF, a eficácia do OEEs e de E2 foram similares, com 54,2% de redução no opg pós-tratamento. Portanto, E2 demonstrou efeito promissor contra H. contortus adultos in vitro, segurança toxicológica e atividade contra NGI in vivo. Dessa forma, foi possível produzir e caracterizar, de forma bem-sucedida, emulsões de ALG e OEEs, que demonstraram estabilidade e atividade anti-helmíntica contra NGI de pequenos ruminantes, com potencial para aplicação em futuros esquemas de tratamento alternativo.

Parasitism by gastrointestinal nematodes (GIN) is a serious threat to sheep and goat farming and due to emergence and spread of anthelmintic resistance (AR), new control alternatives are required. The essential oil of Eucalyptus staigeriana (EsEO) has anthelmintic activity, so the development of formulations aimed at its encapsulation using sodium alginate matrix (ALG) can be advantageous to increase its stability and effectiveness. Aiming to develop emulsions of ALG and EsEO to control GIN in small ruminants, the methodology was developed in three phases. In phase 1, whose objective was to characterize a population of Haemonchus contortus, named Caucaia, regarding AR, a comparison was made between phenotypic tests of egg hatch (EHT), larval development (LDT) and fecal egg reduction (FECRT) and genotypic by qPCR for benzimidazoles (BZs) and levamisole (LEV). There was agreement between EHT, FECRT and qPCR for BZs, and between LDT and qPCR for LEV. The Caucaia population was considered resistant to BZs, macrocyclic lactones, LEV and suspected for monepantel. In phase 2, the aim was to develop emulsions of ALG and EsEO, characterize them and evaluate their in vitro effects on egg hatching and larval development of H. contortus. Four emulsions were prepared by varying proportions between Tween 80, EsEO and 4% ALG, physicochemically characterized and evaluated on EHT and LDT. The emulsions were stable, with predominantly nanometric particle size and negative zeta potential. The emulsions were more effective than EsEO in EHT, with effective concentration 50% (EC50) ranging from 0.088 to 0.150 mg/mL for the emulsions and 0.308 mg/mL for EsEO. In LDT, emulsions and EsEO were similar, with EC50 ranging from 3.91 to 4.60 mg/mL for emulsions and 4.17 mg/mL for EsEO. Therefore, ALG and EsEO emulsions were successfully produced, and emulsion 2 (E2), with low levels of the ratio between Tween 80/EsEO and ALG/EsEO was considered the best and with potential for alternative control of H. contortus. In phase 3, the aim was to evaluate E2 in vitro against adult H. contortus, its acute toxicity and in vivo activity against GIN. Adult worm motility test (AWMT) was performed, evaluation by scanning electron microscopy (SEM) and confocal laser scanning microscopy (CLSM). The lethal dose 50% (LD50) of E2 was assessed and FECRT was performed against the Caucaia population GIN. In AWMT, EsEO and E2 inhibited the motility of H. contortus and at concentrations 0.4 and 0.6 mg/mL, E2 was more effective than EsEO. SEM and CLSM images showed structural changes, mainly cuticle wrinkling. The LD50 of the emulsion was estimated to be greater 2,000 mg/kg. In FECRT, the efficacy of EsEO and E2 were similar, with a 54.2% reduction in epg post-treatment. Therefore, E2 showed promising effect against adult H. contortus in vitro, toxicological safety and activity against GIN in vivo. In this way, it was possible to successfully produce and characterize emulsions of ALG and EsEO, which demonstrated stability and anthelmintic activity gainst GIN of small ruminants, with potential for application in future alternative treatment schemes.

Avaliação da infecção do vírus influenza em astrócitos como um fator de risco para os transtornos do neurodesenvolvimento

O vírus Influenza pertence à família Orthomyxoviridae. Há quatro tipos de vírus da Influenza: A, B, C e D. O tipo A é o responsável pelos grandes eventos pandêmicos e epidemias sazonais, sendo considerado mais virulento e geneticamente variável, possuindo a capacidade de atingir um grande espectro de reservatórios animais, entre mamíferos e aves. A infecção do vírus Influenza ocorre a partir do contato do vírus com a mucosa do trato respiratório superior, onde ocorre a ligação, entrada do vírus e consequentemente a infecção do hospedeiro. Evidências mostram que essa infecção pode mostrar alterações no cérebro como morfologia neuronal hipocampal prejudicada e habilidades cognitivas, problemas no córtex. Além disso, foi observado que infecções por Influenzadurante a gestação podem gerar sequelas neurocomportamentais e psicológicas, inflamação placentária, problemas no desenvolvimento cerebral no feto, com respostas de citocinas associadas a infecção e a neuroinflamação. Os astrócitos têm papel muito importante no sistema nervoso central dando suporte para o neurônio, regulando homeostase e por isso, entender sua morfologia, funcionalidade e perfil molecular antes e depois da infecção foi importante para entendermos o papel do vírus Influenza nessas células. Neste trabalho conseguimos observar que os astrócitos sofrem alterações na sua estrutura, fazendo com que as células fiquem arredondadas, sem estrutura estrelada e ramificada após a infecção pelo vírus Influenza, tendo a possibilidade de gerar problemas na sua funcionalidade e consequentemente problemas do neurodesenvolvimento.

The Influenza virus belongs to the Orthomyxoviridae family. There are four types of Influenza viruses: A, B, C and D. Type A is responsible for the great pandemic events and seasonal epidemics, being considered more virulent and genetically variable, possessing the capacity to reach a large spectrum of animal reservoirs, among mammals and birds. Influenza virus infection occurs from the contact of the virus with the mucous membrane of the upper respiratory tract, where bonding occurs, virus entry and consequently infection of the host. Evidence shows that this infection can show alterations in the brain such as impaired hippocampal neuronal morphology and cognitive abilities, problems in the cortex. Furthermore, it has been observed that Influenza infections during pregnancy can generate neurobehavioral and psychological sequelae, placental inflammation, problems in brain development in the fetus, with cytokine responses associated with infection and neuroinflammation. The astrocytes have a very important role in the central nervous system giving support to the neuron, regulating homeostasis and therefore, understanding their morphology, functionality and molecular profile before and after infection was important to understand the role of the Influenza virus in these cells. In this work we were able to observe that the astrocytes suffer alterations in their structure, making the cells rounded, without a stellate and branched structure after infection by the Influenza virus, with the possibility of generating problems in their functionality and consequently problems of neurodevelopment.

CARACTERIZAÇÃO DO USO DE LINHAGENS CELULARES DE IXODÍDEOS COMO MODELO DE ESTUDO IN VITRO DA INTERAÇÃO ENTRE CARRAPATO e LEISHMANIA SPP

A leishmaniose é um conjunto de doenças causadas por protozoários do gênero Leishmania que afetam homens e animais. A leishmaniose canina é uma doença de grande importância na saúde pública, pois os cães são o principal reservatório do parasito. A maioria dos cães infectados vem de áreas pobres, onde há ectoparasitos, como o carrapato Rhipicephalus sanguineus. Sua presença levantou a hipótese de que este poderia ser um vetor do parasito. O objetivo deste trabalho foi propor um modelo in vitro de estudo da interação entre Leishmania spp. e carrapatos Ixodídeos, usando a linhagemcelular do carrapato Ixodes scapularis (IDE8). Para esta análise, células IDE8 foram incubadas com promastigotas de L. amazonensis ou L. infantum durante: 2, 24 e 48 h a 34 ° C. Resultados mostraram que as formas promastigotas se ligam, interagem com a membrana das células de carrapato, são endocitadas e permanecem dentro de um vacúolo justaposto, como mostrado por microscopia eletrônica de transmissão e varredura. O índice de associação entre IDE8 e L. amazonensis não se alterou, mas entre IDE8 e L.infantum aumentou em cerca de 7 vezes em 48h. Os ensaios de viabilidade através da atividade de LDH mostraram que as células permanecem viáveis durante incubação com os parasitas. Além disso, L. infantum apresentou uma sobrevivência 13 vezes maior do que L. amazonenses após a interação com IDE8 em 48h. As células IDE8 apresentaram aumento de 2 vezes na produção de ROS e de 8 vezes da produção de oxiesterol após a interação com L. infantum. Os lipídeos triacilglicerol, 1,2 e 1,3 diacilgliceróis, monoacilglicerol e colesterol esterificado, todos derivados dos ácidos graxos, também apresentaram aumento após a interação. Assim, nossos dados indicam a capacidade de Leishmania spp. Interagir com células de carrapato in vitro, sobreviver a essa interação e modular reações metabólicas na célula hospedeira.

Leishmaniasis is a group of diseases caused by protozoa of the genus Leishmania that affect humans and animals. Canine leishmaniasis is a disease of great public health importance, since dogs are the main reservoir of the parasite. Most infected dogs come from poor areas where there are ectoparasites, such as the Rhipicephalus sanguineus tick. Its presence raised the hypothesis that this could be a vector of the parasite. The aim of this work was to propose an in vitro model to study the interaction between Leishmania spp. and Ixodid ticks, using the cell line from the Ixodes scapularis tick (IDE8). For this analysis, IDE8 tick cells were incubated with L. amazonensis or L. infantum promastigotes during: 2, 24 and 48 h at 34 ° C. The results showed that promastigotes bind, interact with the tick cell membrane, are endocytosed, and remain within a juxtaposed vacuole, as shown by transmission and scanning electron microscopy. The association index between IDE8 and L. amazonensis did not change, but between IDE8 and L. infantum it increased approximately 7 times up to 48 h. Viability assay through LDH activity demonstrated that IDE8 tick cell remain viable during infection with parasites. Furthermore, L. infantum showed a survival 13 times higher than L. amazonensis after interaction with IDE8. IDE8 tick cells infected with L. infantum also showed a 2-fold increase in ROS production and an 8-fold increase in oxysterol production. The lipids triacylglycerol, 1,2 and 1,3 diacylglycerols, monoacylglycerol and esterified cholesterol, derived from fatty acids, also showed an increase after the interaction. Therefore, our data indicate that Leishmania spp. are able to interact with tick cells in vitro, survive, and modulate metabolic reactions in tick cells.

AVALIAÇÃO DA CONTAMINAÇÃO POR ELEMENTOS POTENCIALMENTE TÓXICOS EM SIRIS, CAMARÕES E LULAS DA BAÍA DE GUANABARA E O POTENCIAL RISCO À SAÚDE DO CONSUMIDOR

A Baía de Guanabara é alvo de diferentes poluentes, dentre eles os elementos potencialmente tóxicos (EPT), eliminados na região através do despejo de esgoto industrial e doméstico. Entre tais EPTs, podemos citar o alumínio, arsênio, cádmio, chumbo, cobre, cromo, níquel, mercúrio e prata. Por conseguinte, a fauna aquática se torna alvo desses contaminantes, os quais acabam por alcançar os seres humanos através do consumo do pescado. Dentre os animais dessa região, siris, camarões e lulas destacam-se como potenciais bioindicadores da contaminação por EPTs. Desse modo, esta tese teve como objetivo inicial realizar uma revisão sistemática de literatura para compreender a dinâmica dos elementos citados no ambiente aquático, sua relação com os fatores abióticos, os efeitos à saúde animal e humana e avaliar o risco à saúde humana. Cento e sessenta artigos encontrados em três plataformas de busca foram utilizados para compor essa revisão. Os fatores abióticos como pH ácido e baixa salinidade influenciaram a biodisponibilidade, absorção e toxicidade dos elementos. A literatura também ressaltou o crescente destaque dos caranguejos e siris como biondicadores quando comparado a outros crustáceos e demais organismos aquáticos. Os estudos também apontaram resultados com contaminação acima dos limites internacionais estabelecidos, ressaltando a existência de potenciais danos à saúde dos consumidores. O segundo objetivo da presente tese foi explorar a contaminação mercurial através da avaliação da concentração do metal nas amostras de siri, camarão e lula da Baía de Guanabara. Neste estudo os principais fatores abióticos relacionados à dinâmica do elemento foram a temperatura, profundidade, transparência e salinidade. Os siris se confirmaram como principais biondicadores, achado este relacionado a seu habitat e metabolismo. Em contrapartida, a associação entre fatores abióticos e biométricos em lula e camarão foram diferentes, ressaltando particularidades de cada animal e a necessidade de mais estudos que esclareçam melhor esses comportamentos. O terceiro objetivo do trabalho foi realizar análise de risco quanto a concentração de mercúrio nos animais e a saúde do consumidor, através do cálculo do quociente de risco. O quociente demonstrou ausência de risco à saúde da população e segurança no consumo do pescado avaliado. O trabalho por fim, alerta para tendência em subestimar o risco proporcionado pelo consumo de pescado da região, quando apenas avaliamos a concentração de elementos no alimento, sem considerar outras variáveis relacionadas ao consumo. O quarto objetivo foi complementar a revisão sistemática, onde foram quantificados os nove EPTs, estudados na revisão, nas espécies de lula, camarão e siris, além da avaliação de risco. Neste estudo também ressaltamos a participação dos fatores abióticos, como oxigênio dissolvido, profundidade e transparência, contribuindo na maior ou menor toxicidade, biodisponibilidade e consequentemente absorção pela biota. Apenas os valores de arsênio se apresentaram acima do limite nacional, contudo, levando em consideração o baixo percentual existente em organismos aquáticos da espécie tóxica inorgânica, esse resultado não levou a existência de risco à saúde humana isoladamente. Ao considerarmos o risco de consumo para cada um dos três animais, associado a todos os elementos estudados, foi possível identificar a existência de risco à saúde da população consumidora de lulas e siris. O quinto objetivo foi realizar a quantificação do Titânio nas espécies da lula, camarão e siri e realizar uma avaliação de exposição a este contaminante emergente. A concentração de titânio encontrada foi em geral, superior a identificada em outros estudos. Além disso, identificamos que os valores encontrados na avaliação da exposição são indicativos de possíveis riscos à saúde do consumidor. Como sexto objetivo, foi realizada a escrita de um capítulo de livro, com o intuito de abordar os três principais elementos tóxicos abordados pela literatura, Hg, Cd e Pb, e a influência dos parâmetros físico-químicos da água na toxicidade, biodisponibilidade e especiação. Neste capítulo foi identificado que a salinidade e pH são importantes parâmetros que irão influenciar na absorção dos elementos pela biota. Além disso, a presença de matéria orgânica, assim como ligantes inorgânicos é fundamental para determinar a espécie química predominante e, consequentemente, uma maior predominância de espécies de maior ou menor toxicidade.

Guanabara Bay targets different pollutants, including potentially toxic elements (PTE), which are eliminated in the region through the discharge of industrial and domestic sewage. Among such PTEs, we can mention aluminum, arsenic, cadmium, lead, copper, chromium, nickel, mercury, and silver. Therefore, the aquatic fauna becomes a target of these contaminants, reaching human beings through seafood consumption. Among the animals in this region, swimming crabs, shrimp, and squid stand out as potential bioindicators of contamination by PTEs. Thus, this thesis had its initial objective to carry out a systematic literature review to understand the dynamics of the elements mentioned in the aquatic environment, their relationship with abiotic factors, the effects on animal and human health, and to assess the risk to human health. One hundred and sixty articles found in three search platforms were used to composse this review. Abiotic factors such as acidic pH and low salinity influenced the elements' bioavailability, absorption, and toxicity. The literature also highlighted the growing importance of swimming crabs and crabs as bioindicators compared to Other crustaceans and other aquatic organisms. The studies also pointed out results with contamination above established international limits, highlighting the existence of potential harm to consumers' health. The second objective of the current thesis was to explore mercury contamination by evaluating the metal concentration in swimming crab, shrimp, and squid samples from Guanabara Bay. In this study, the main abiotic factors related to element dynamics were temperature, depth, transparency, and salinity. The swimming crabs were confirmed as the main bioindicators, a finding related to their habitat and metabolism. On the other hand, the association between abiotic and biometric factors in squid and shrimp was different, highlighting each animal's particularities and the need for more studies to clarify these behaviors better. The third objective of the work was to perform a risk analysis regarding the concentration of mercury in animals and the consumer health by calculating the risk quotient. The quotient showed no risk to the population's health and safety in the consumption of the seafood evaluated. Finally, the work alerts to the tendency to underestimate the risk caused by seafood consumption in the region when we only assess the concentration of elements in the food without considering other variables related to consumption. The fourth objective was to complement the systematic review, where the nine PTEs studied in the review were quantified in squid, shrimp, and swimming crab species, in addition to the risk assessment. In this study, we also emphasize the participation of abiotic factors, such as dissolved oxygen, depth, and transparency, contributing to greater or lesser toxicity, bioavailability, and, consequently, absorption by the biota. Only arsenic values were above the national limit, however, taking into account the low percentagem existing in aquatic organisms of the inorganic toxic species, this result did not lead to the existence of a risk to human health in isolation. When considering the consumption risk for each of the three animals, associated with all the elements studied, it was possible to identify the existence of a risk to the health of the population consuming squid and crabs. The fifth objective was to carry out the quantification of Titanium in squid, shrimp and crab species and carry out an assessment of exposure to this emerging contaminant. The titanium concentration found was generally higher than that identified in other studies. In addition, we identified that the values found in the exposure assessment are indicative of possible risks to consumer health. As a sixth objective, a book chapter was written to address the three main toxic elements covered in the literature, Hg, Cd, and Pb, and the influence of physicochemical parameters of water on toxicity, bioavailability, and speciation. This chapter identified that salinity and pH are important parameters that will influence the absorption of elements by the biota. urthermore, the presence of organic matter and inorganic binders is essential to determine the predominant chemical species and, consequently, a greater predominance of species with greater or lesser toxicity.

DESENVOLVIMENTO DE SORVETE FUNCIONAL SIMBIÓTICO COM POLPA DE CAGAITA (Eugenia dysenterica)

A inovação tecnológica bioinspirada na fabricação de sorvetes tem impulsionado o mercado de derivados lácteos. Desta forma, aumentar a densidade nutricional e funcionais dos sorvetes, com o uso de soro lácteo, leitelho, inulina, probiótico e fruto do Cerrado constituem alternativa viável para o setor. Objetivou-se a produção e caracterização físico-química, microbiológica e sensorial de diferentes sorvetes variando as concentrações da relação leite/creme, soro lácteo e leitelho definidas pelo Delineamento Simplex Centroide, sendo posteriormente adicionado cepa probiótica de Lactobacillus acidophilus, inulina e polpa de cagaita (Eugenia dysenterica). Foram produzidas, inicialmente, nove amostras de sorvetes funcionais com teores de soro e de leitelho, variando de 5% a 15%, e relação leite/creme de 70% a 90%, conforme estipulado por Delineamento Simplex Centroide. Todas as formulações apresentaram resultados dentro dos padrões estabelecidos pela legislação vigente. Os sorvetes apresentaram maior teor dos ácidos graxos palmítico, oleico e esteárico. Destacaram-se as formulações com maior concentração dos coprodutos por apresentarem melhor composição nutricional, considerando-se os altos teores de proteína, frações proteicas, lipídeos e lactose. A formulação com maior concentração de soro e leitelho, bem como as formulaçõescontrole, totalizando seis amostras, foram incrementadas com 0,5% de Lactobacillus acidophilus, sendo três amostras com adição de 20% de polpa de cagaita e três amostras sem adição de polpa. Posteriormente, as formulações foram incrementadas com 5% de inulina. Realizou-se as análises físico-químicas, microbiológicas, levantamento de perfil de ácidos graxos, análise descritiva quantitativa, reologia, análise de perfil de textura e microscopia confocal. Todas as formulações apresentaram resultados dentro dos padrões estabelecidos pela legislação vigente. Os sorvetes funcionais probióticos e simbióticos foram categorizados em sorvetes padrão e premium em relação ao teor de gordura. As formulações com polpa de cagaita em sua composição, apresentaram maiores valores de acidez, umidade e menor velocidade de derretimento e maior dureza instrumental. Os sorvetes exibiram equivalência em relação à semi-quantificação dos pixels das imagens, obtidas pela análise de microscopia confocal, com a quantificação de lipídeos e proteínas. Sorvetes com adição de polpa apresentaram maior intensidade da cor amarela e aroma cítrico. Todos os sorvetes são categorizados como alimentos probióticos e apresentaram contagem de 8 Log10 UFC/g, sendo ótimos veículos para fornecer cultura probiótica e todos os seus benefícios ao ser consumido.

Bio-inspired technological innovation in ice cream manufacturing has driven the market for dairy products. In this way, increasing the nutritional density and approving ice cream, with the use of whey, buttermilk, inulin, probiotic and fruit from the Cerrado are viable alternative for the sector. The objective was the production and physicochemical, microbiological and sensory characterization of different ice creams, varying those due to the milk/cream ratio, whey and buttermilk defined by the Simplex Centroide Design, and subsequently added a probiotic strain of Lactobacillus acidophilus, inulin and cagaita pulp (Eugenia dysenterica). Nine ice creams were produced with whey and buttermilk contents, ranging from 5% to 15%, and milk/cream ratio from 70% to 90%, as stipulated by the Simplex Centroide Design. All formulations result within the standards defined by current legislation. Ice creams showed higher content of palmitic, oleic and stearic fatty acids. They stood out as formulations with the highest concentration of co-products for presenting the best nutritional composition, considering the high levels of protein, protein fractions, lipids and lactose. The high concentration of whey and buttermilk concentration, as well as the control formulations, totaling Lactobacillus acidophilus six, were increased with 0.5% of, being three with the addition of 20% of cagaita pulp and three without the addition of pulp. Subsequently, all formulations were increased with 5% of inulin. Physical-composition, microbiological, fatty acid profile, quantitative descriptive analysis, rheology, texture profile analysis and confocal microscopy were performed. All formulations result within the standards defined by current legislation. Available probiotic and symbiotic ice creams were categorized into standard and premium ice creams by fat content. Formulations with cagaita pulp presented higher acidity, moisture and lower melting speed and higher instrumental hardness. The ice creams exhibited equivalence in relation to the semiquantification of image pixels, accompanied by confocal microscopy analysis, with the quantification of lipids and proteins. Ice cream with the addition of pulp, presented higher intensity of yellow color and citrus aroma. All ice creams are categorized as probiotic foods and source count 8 Log10 CFU / g, being great vehicles to provide probiotic culture and all its benefits when consumed.

LARVICULTURA DE KINGUIO (Carassius auratus) EM SISTEMA DE BIOFLOCOS

O objetivo deste estudo foi avaliar a utilização do cultivo em sistema de bioflocos (BFT) na larvicultura inicial de kinguios (Carassius auratus). Para isto, foram realizados três experimentos. No primeiro, foram avaliados dois sistemas de cultivo (bioflocos e água clara) e três concentrações diárias de presas vivas (100, 200 e 300 náuplios Artemia larva-1). No segundo experimento, foram testadas duas concentrações de sólidos suspensos totais (150 e 300 mg L-1) e três densidades de larvas de kinguios (10, 20, e 30 larvas L-1). Ambos os ensaios foram conduzidos em delineamento inteiramente casualizado (DIC) em esquema fatorial 2x3 com seis repetições por tratamento e o desempenho zootécnico das larvas foi avaliado durante 15 dias. No terceiro experimento, foram testados os efeitos do sistema de produção (bioflocos e água clara) e de diferentes manejos alimentares na larvicultura de kinguio (ração, Artemia e combinação de Artemia e ração) sobre o desempenho zootécnico e histomorfometria intestinal das larvas. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado (DIC) em fatorial 2x3 com quatro repetições por tratamento e duração de 15 dias. No experimento 1, o sistema BFT melhorou o crescimento e a sobrevivência de larvas de kinguio em comparação com o sistema de água clara. O maior nível de oferta de presas vivas (300 náuplios larva-1) promoveu o melhor crescimento das larvas de kinguio, independente do sistema de cultivo. No experimento 2, verificou-se que concentrações de sólidos suspensos totais de até 300 mg L-1 não afetam o desempenho zootécnico dos animais e podem ser utilizados durante a larvicultura dos kinguios. O aumento da densidade de estocagem reduziu o crescimento dos animais, mas resultou em maior biomassa produzida. No experimento 3, o cultivo em sistema BFT melhorou a sobrevivência e a saúde intestinal de larvas de kinguios. Concentrações elevadas de amônia na água levaram a uma diminuição no crescimento de larvas de kinguios cultivadas em sistema BFT. Foi observada mortalidade total nos tratamentos que receberam somente ração. A combinação do alimento vivo com o alimento inerte proporcionou melhor desempenho zootécnico na larvicultura de kinguios no sistema água clara. No sistema BFT, a suplementação com ração aparentemente não é necessária. Os resultados mostraram que o sistema BFT é uma tecnologia promissora que tem potencial para ser implementada na larvicultura de kinguios com resultados positivos sobre o desempenho zootécnico e saúde intestinal. Mais estudos são necessários para entender melhor os efeitos dos parâmetros de qualidade da água sobre a larvicultura de kinguios em sistema BFT.

The aim of this study was to evaluate the use of biofloc system cultivation (BFT) in the initial larviculture of goldfish (Carassius auratus). For this, three experiments were carried out. In the first, two culture systems (bioflocs and clear water) and three daily concentrations of live prey (100, 200, and 300 Artemia nauplii larva-1) were evaluated. In the second experiment, two concentrations of total suspended solids (150 and 300 mg L -1) and three densities of goldfish larvae (10, 20, and 30 L-1) were tested. Both trials were carried out in a completely randomized design (DIC) in a 2x3 factorial design with six replicates per treatment and larvae performance was evaluated for 15 days. In the third experiment, the effects of the production system (bioflocs and clear water) and different feeding managements in goldfish larviculture (dry food, Artemia nauplii, combined Artemia nauplii and dry food) on the growth performance and intestinal histomorphometry of the larvae were tested. The experimental design was completely randomized (DIC) in a factorial 2x3 with four replicates per treatment and a duration of 15 days. In experiment 1, the BFT culture improved the growth and survival of goldfish larvae compared to the clear water system. The highest level of live prey supply (300 nauplii larva-1) promoted the best growth of goldfish larvae, regardless of the culture system. In experiment 2, it was found that concentrations of total suspended solids of up to 300 mg L-1 do not affect the performance of animals and can be used during larviculture of goldfish. Increasing stocking density reduced animal growth, but resulted in greater biomass produced. In experiment 3, cultivation in a BFT system improved the survival and intestinal health of goldfish larvae. High concentrations of ammonia in the water led to a decrease in the growth of goldfish larvae cultivated in a BFT system. Total mortality was observed in treatments that received only dry food. The combination of live prey with dry food provided better performance in the larviculture of goldfish in the clear water system. In the BFT system, supplementation with feed is apparently not necessary. The results showed that the BFT system is a promising technology that has the potential to be implemented in the larviculture of goldfish with positive results on performance and intestinal health. More studies are needed to better understand the effects of water quality parameters on goldfish larviculture in BFT system.

Pathological Investigation of Infectious Diseases In Free-Ranging Black-Tufted Marmosets (Callitrix penicillata) and Implications For Public Health And Conservation in Brazil

Resumo em português: Várias infecções emergentes que se tornaram epidêmicas em humanos tiveram origem em não humanos primatas (PNHs). Esses eventos de transmissão de doenças podem ser causados por alterações feitas pelo homem para habitats animais e são essenciais para o ponto de vista de Saúde Única. Agentes etiológicos de doenças infecciosas fatais doenças podem ser diagnosticadas testes laboratoriais de tecidos, uma vez que tal necropsia é fundamental para melhorar reconhecimento de doenças infecciosas emergentes e reemergentes. A maioria dos estudos de doenças infecciosas doenças em PNHs são baseadas em levantamentos sorológicos ou moleculares, há dados limitados sobre doenças infecciosas e doenças como causa de óbitos em PNHs no Brasil. Doença infecciosa fatais natural como causa de óbito foram investigados no Laboratório de Patologia Veterinária da Universidade de Brasília como integrante do Programa Nacional de Vigilância das Epizootias de Febre Amarela na PNH do Brasil Ministério da Saúde. Esta investigação levou à identificação de outras doenças infecciosas fatais em NHPs; aqui nós descrevemos, a partir de 1.042 casos recuperados, achados histopatológicos, imunohistoquímicos, diagnóstico molecular e investigação epidemiológica da infecção fatal por Leptospira interrogans em um sagui-de-tufo-preto (Callithrix penicilatta) urbanizado, de vida livre, no Brasil. Leptospirose fatal em PNHs é rara, este é o primeiro relato de leptospirose fatal em um PNH de vida livre descrevendo achados essenciais para facilitar o diagnóstico post- mortem de leptospirose e compreensão da doença no PNH. A aplicação da perspectiva Saúde Única leva em consideração o possível papel dos NHPs na epidemiologia e dinâmica de transmissão de humanos e animais leptospirose e potencial de transmissaão de patógenos na interface humano-PNH em áreas antropizadas. Os PNH são importantes sentinelas de algumas doenças zoonóticas no Brasil, e esses animais também podem indicam riscos de leptospirose no meio ambiente. Outro aspecto da perspectiva de Uma Saúde é zoonoses reversas, onde doenças humanas podem se espalhar para populações vulneráveis de vida selvagem. Isto é uma preocupação para as populações de saguis. Aqui, descrevemos o clínico-patológico achados clínico-patológicos, imunohistoquímicos, moleculares e ultraestruturais de infecção fatal pelo vírus herpes simplex tipo 1 (HSV-1) em 13 saguis-detufo-preto de vida livre áreas urbanizadas, no Brasil. Meningoencefalite necrotizante, glossite ulcerativa, e hepatite necrotizante com inclusões virais intranucleares foram caracteristicas da doença. Antígenos de HSV-1 foram localizados por imunohistoquímica e partículas virais por transmissão de elétrons microscopia dentro das células neurais, epitélio da língua e hepatócitos. O teste de PCR confirmou o HSV-1 em todos os casos. Embora quase todos os relatos anteriores de infecção por HSV-1 em saguis sejam de animais de cativeiro, nossos resultados destacam o risco de transmissão de doenças infecciosas interespécies noainterface humanoanimal em ambientes antropizados e enfatiza a importância de uma abordagem de Saúde Única para vigilância de doenças infecciosas nesses locais.

Resumo na língua estrangeira: Several emerging infections that became epidemic in humans have originated in non-human primates (NHPs). These disease transmission events can be driven by man-made alterations to animal habitats and are essential for a One Health viewpoint. Etiologic agents of fatal infectious diseases can be diagnosed laboratory testing of tissues, as such necropsy is key for improving recognition of emerging and re-emerging infectious diseases. Most of the studies of infectious diseases in NHPs are based on serological or molecular assays, there are limited data on infectious diseases as the cause of deaths in NHPs in Brazil. Natural fatal infectious diseases as a cause of death were investigated in the Veterinary Pathology Laboratory at the University of Brasilia as part of the National Surveillance Program of Yellow Fever Epizootics in NHP of the Brazilian Ministry of Health. This investigation lead to the identification of other fatal infectious diseases in NHPs; herein we describe, from 1,042 cases retrieved, histopathological, immunohistochemical, molecular diagnosis, and epidemiological investigation of fatal Leptospira interrogans infection in an urbanized, freeranging, black-tufted marmoset (Callithrix penicilatta) in Brazil. Fatal leptospirosis in NHPs is rare, this is the first report of fatal leptospirosis in a free-ranging NHP describing findings essential to facilitate the postmortem diagnosis of leptospirosis and understanding the disease in NHP. Applying the One Health perspective brings into consideration the possible role of NHPs in the epidemiology and transmission dynamics of human and animal leptospirosis, and potential of pathogen spillover at the human-NHP interface in anthropized areas. NHP are important sentinels for some zoonotic diseases in Brazil, and these animals could also indicate leptospirosis risks in the environment. Another aspect on the One Health perspective is reverse zoonoses, where human diseases can be spread to vulnerable wildlife populations. This is a concern for marmoset populations. Herein we describe the clinicopathological clinicopathological, immunohistochemical, molecular, and ultrastructural findings of fatal human herpes simplex virus type 1 (HSV-1) infection in 13 urbanized, free-ranging, blacktufted marmosets (Callithrix penicilatta) in Brazil. Necrotizing meningoencephalitis, ulcerative glossitis, and necrotizing hepatitis with intranuclear viral inclusions were hallmarks of the disease. We localized HSV-1 antigens by immunohistochemistry and viral particles by transmission electron microscopy within neural cells, tongue epithelium, and hepatocytes. PCR testing confirmed HSV1 in all cases. While nearly all prior reports of HSV-1 infection in marmosets are from captive animals, our findings highlight the risk of interspecies infectious disease transmission at the human-animal interface in anthropized environments and emphasize the importance of a One Health approach to infectious disease surveillance in these settings.

EFEITOS DA DORZOLAMIDA À 2% NA RE-EPITELIZAÇÃO CORNEAL E NOS NÍVEIS DA METALOPROTEASE-9 NA LÁGRIMA DE GATOS COM ÚLCERA DE CÓRNEA INDUZIDA EXPERIMENTALMENTE

O presente estudo objetivou determinar se a instilação três vezes ao dia de dorzolamida a 2% altera o tempo de cicatrização da ferida na córnea e a expressão precoce de MMP-9 em lágrimas de gatos com ceratite ulcerativa superficial induzida experimentalmente. Foram utilizados 16 gatos domésticos, com peso e idade 3,08kg (variando: 2,02 a 5,04kg) e 3,2 anos (variando: 1 a 5 anos), respectivamente. Os animais foram distribuídos de forma aleatória em dois grupos com n=8/cada, no qual o grupo tratamento (GT) recebeu 40µL de dorzolamida a 2% (três vezes ao dia) enquanto o controle (GC) recebeu 40µL solução salina, no mesmo período de tempo. Ambos os grupos receberam uma gota de tobramicina 0,3% (quatro vezes ao dia) até resultado negativo da fluoresceína na córnea. Lágrimas foram coletadas 24 e 48h após a ceratectomia e a MMP-9 total foi quantificada por ELISA. A taxa de reepitelização da córnea nao diferiu entre os grupos (p=0,26) e variou de 0,21 a 0,77 mm²/h. O tempo médio de cicatrização da ferida em córnea não diferiu entre os grupos (p=0,36) e foi de 65,50±3,62h no GC e 71,00±4,58h no GT. A única diferença significativa com relação às dimensões das áreas ulceradas foi observada nas primeiras 24h de avaliação, sendo a área do GC 3,34mm² maior que a observada no GT (p=0,04). 24h após a ceratectomia, o nível de MMP-0 no GC foi de 6,09±2,62 ng/mL maior quando comparado ao nível de MMP-9 no GT no mesmo momento (p=0,03). Podemos concluir que a instilação de uma solução oftálmica de dorzolamida 2% preservada com cloreto de benzalconio (CB) não prejudicou o tempo de cicatrização da ferida em córnea e a expressão precoce de MMP-9 nas lágrimas de gatos com ceratite ulcerativa superficial induzida experimentalmente. No entanto, nossos resultados justificam uma investigação mais aprofundada de uma solução oftálmica de dorzolamida 2% livre de conservante de CB em um experimento conduzido com uma metodologia semelhante.

The current study aimed to determine if three-times daily instillation of 2% dorzolamide alters the corneal wound healing time and the early expression of MMP9 in the tears of cats with experimentally induced superficial ulcerative keratitis. Sixteen adult domestic shorthair cats, with an average weight and age of 3.08 kg (range: 2.02 to 5.04 kg) and 3.20 years (range: 1 to 5 years), respectively, were enrolled in this study. The animals were randomly allocated to two diferente groups (eight cats per group). Cats in the treatment group (TG) received 40µL of a 2% dorzolamide (three times daily) while cats in the control group (CG) received 40µL of saline, at the same time point. Both group received one drop of 0.3% tobramycin (four times daily) until the corneas became fluorescein negative. Tears were collected 24 and 48h after keratectomy, and the total MMP-9 was quantified by ELISA. The corneal re-epithelialization rate did not differ between groups (p = 0.26) and ranged from 0.21 to 0.77 mm2 /h. The average time to achieve corneal wound healing did not differ between groups (p = 0.36) and was 65.50±3.62h in the CG and 71.00±4.58h in the TG. The only significant difference with regard the dimensions of the ulcerated areas was observed in the first 24h of evaluation, being the area of the CG 3.34 mm2 larger than the one observed in the TG (p = 0.04). In both groups corneas healed without scarring, pigmentation, or vascularization. At 24h post keratectomy, the level of MMP-9 in the CG was 6.09±2.62 ng/mL higher when compared to level of MMP-9 in the TG at the same time point (p = 0.03). This study showed that the instillation of a BAK-preserved 2% dorzolamide ophthalmic solution did not impair the corneal wound healing time and the early expression of MMP-9 in the tears of cats with experimentally induced superficial ulcerative keratitis. However, our results warrant further investigation of a BAK-preservative free 2% dorzolamide ophthalmic solution in an experiment conducted with a similar methodology.